一種從長春七中提取鎮痛有效成分蛇床子素的方法
2023-06-12 03:51:11
專利名稱：一種從長春七中提取鎮痛有效成分蛇床子素的方法
技術領域：
本發明涉及一種藥物的提取方法，具體一種從長春七中提取鎮痛有效 成分蛇床子素的方法。
技術背景文獻報導蛇床子素具有鎮痛和抗炎作用(胡杰，陳剛.蛇床子素抗炎鎮痛作用的實驗研究[J].湖南中醫雜誌.2007， 23 (1): 82-83.)，且鎮痛 作用與長春七提取物具有鎮痛作用的研究結果(石娟，王雲霞，邊敏，等. 長春七提取物鎮痛作用的實驗研究[J].中國現代應用藥學雜誌.2006， 23(2): 100-102.)相吻合；長春七又名巖風，為傘形科巖風屬植物長春七 [丄沾a"o^ ^c/2tor附era/s ( Fisch) DC.]的乾燥根及根莖，具有發散風寒，祛 風溼，鎮痛，健脾胃，止咳，解毒之功效。主治感冒風寒，周身疼痛，咳 嗽，頭痛，牙痛，關節腫痛，跌打損傷，風溼筋骨疼痛、麻木，金牛七中 毒等症。在陝西、甘肅、四川等地有分布(中國科學院西北植物研究所編 著.秦嶺植物志.第一巻.種子植物(第三冊)[M].北京科學出版社， 1981.410-411.江蘇新醫學院編.中藥大辭典(上冊)[M].上海上海科學技 術出版社，1985.456.)。關於長春七的鎮痛有效成分研究尚未見文獻報導，《中國藥典》(2005年版)、及地方標準也未有收載，同時，市場上長春七 藥材的質量控制又缺乏量化指標。 發明內容本發明的目的在於提供一種從長春七中提取鎮痛有效成分蛇床子素的方法。為達到上述目的，本發明採用的技術方案是1) 乙醚提取首先取長春七藥材粗粉，用6倍量的乙醚回流提取， 過濾；藥渣再用6倍量的乙醚回流提取一次，過濾，合併兩次提取液，棄 去藥渣，得到長春七的乙醚提取液，回收乙醚溶劑後，得到的殘留物就是 乙醚提取物；2) 第一次柱色譜法分離取長春七乙醚提取物拌樣後加至矽膠色譜 柱上，用氯仿-甲醇(20: 0 20: 4)溶劑系統進行梯度洗脫，收集其中氯 仿-甲醇(20: O)的洗脫液，回收溶劑，得到提取物；3) 第二次柱色譜法分離將第一次柱色譜法分離得到的氯仿-甲醇(20:0) 提取物拌樣後加至另一矽膠色譜柱上，以石油醚-醋酸乙酯(20: 0 20: 20)溶劑系統進行梯度洗脫，收集石油醚-醋酸乙酯(20:1)的洗脫液，放 置，有灰黃色粉末狀沉澱析出，過濾，得沉澱；4) 精製將第二次柱色譜法分離得到的沉澱用石油醚-醋酸乙酯(20:1) 反覆重結晶，得蛇床子素的白色針狀結晶。本發明以鎮痛作用為藥效學指標對長春七的不同提取部位進行活性 篩選，確定了長春七鎮痛的有效部位，並對有效部位進行了化學成分研究， 分離並鑑定出了蛇床子素，己有的研究結果證明蛇床子素具有鎮痛作用， 可作為長春七的鎮痛有效成分，長春七的乙醚部位為長春七具有鎮痛作用 的有效部位，可望成為鎮痛藥的替代品，發揮鎮痛作用。
具體實施方式
實例例1:本發明是從陝西太白產長春七藥材粗粉的乙醚提取物中提 取分離鎮痛有效成^"蛇床子素的方法。優選的方法為首先取長春七藥材粗粉，用6倍量的乙醚回流提取，過濾，藥渣再用6倍量的乙醚回流提 取一次，過濾，合併兩次提取液，棄去藥渣，得到乙醚提取液，回收乙醚 溶劑後，得到的殘留物就是乙醚提取物；乙醚提取物用矽膠色譜柱分離兩 次第一次用氯仿-甲醇溶劑系統進行梯度洗脫，收集其中氯仿-甲醇(20: 0)洗脫液，洗脫液回收溶劑後的提取物用於第二次柱色譜分離；第二次以 石油醚-醋酸乙酯溶劑系統進行梯度洗脫，收集石油醚-醋酸乙酯(20:1) 洗脫液，回收部分溶劑，放置後有灰黃色粉末狀沉澱出現，過濾，得沉澱; 所得沉澱用石油醚-醋酸乙酯(20:1)反覆重結晶，得白色針狀結晶，稱為 化合物I 。化合物I的純度檢査採用TLC法，展開劑系統分別選用石油醚 -醋酸乙酯(2:1)、正己烷-醋酸乙酯(4:1)和正己烷-二氯甲烷(1: 3)， 供試品的色譜中，在可見光下無斑點，在紫外燈(254nm)下顯單一藍紫 色螢光斑點；噴以10%的硫酸乙醇溶液，揮幹溶劑後加熱至斑點顯色清晰， 可見光下呈單一玫瑰紅色斑點，在紫外燈(254nm)下顯單一藍色螢光斑 點。證明化合物I為純化合物。化合物I為白色針狀結晶(石油醚-醋酸乙酯(20: 1) 〕， mp80-82。C。 異羥肟酸鐵反應顯紫紅色。紫外燈(254nm)下顯藍色螢光。UV《，"m (溶劑:甲醇)258， 322。 IR《y :3020 (=CH)， 2880 (-CH) ,1722 (C=0) ，1605 (-C=C) ，1565 (C=C) ，1435,1281和1120 (C畫O-C)， 850 (S=cH和S純)。^-NMR (300MHz，CHCl3) S : 6.23( 1H, d ， J = 9.5Hz, 3國H), 7.61( 1H, d ， J = 9.5 Hz， 4國H) ， 7.29( 1H, d， J = 8.5 Hz, 5-H ), 6.81 (IH， d， J = 8.5Hz,6-H)，3.53(2H,d， J = 7.5Hz，l' -H) , 5.22 ( lH,t， 2' -H)， 1.66(3H,s， 4'畫H)，1.83(3H,s， 5'畫H) ， 3.91 (3H， s， -OCH3)。 13C-NMR (75MHz，CHCl3) S : 161.3 (C-2 ) ， 117.9 (C國3 ), 143.7 (C畫4 ) ， 126.2 (C隱5 )，112.9 (C-6) ， 160.2 (C畫7 ) , 112.9 (C-8 ) ， 21.9 ( C-l' ) , 121.2(C-2' ) , 132.5 (C-3' ),17.8(C-4' ),25.7(C國5' ) ,107.4 (C-4a) , 152.8 (C國8a)。與蛇床子 素對照品TLC行為一致，且混合後熔點不下降。與文獻I (於德泉，楊峻 山.分析化學手冊[M].2版.第7分冊，北京化學工業出版社，2002: 450.) 一致，經鑑定為蛇床子素(osthol)。本發明所稱的蛇床子素，又稱歐芹酚甲醚(osthole)，是從陝西太白產 的傘形科巖風屬植物長春七[i:沾a"o泡6wc/ztom7era/s ( Fisch) DC.]藥材粗 粉的乙醚提取物中分離得到，屬香豆素類化合物。化學名7-甲氧基-8-異戊稀基香豆素2H國1國BenzGpyran國2漏GiiG, 7—md;hoxy-8—(3誦methy1—2-butenyl)結構式分子式及分子量C15H1603; 244.28 物理性狀熔點80°C-82°C ，白色針狀結晶。 蛇床子素為長春七的鎮痛有效成分，長春七的乙醚部位為長春七具有 鎮痛作用的有效部位。
權利要求
1、一種從長春七中提取鎮痛有效成分蛇床子素的方法，其特徵在於1)乙醚提取首先取長春七藥材粗粉，用6倍量的乙醚回流提取，過濾；藥渣再用6倍量的乙醚回流提取一次，過濾，合併兩次提取液，棄去藥渣，得到長春七的乙醚提取液，回收乙醚溶劑後，得到的殘留物就是乙醚提取物；2)第一次柱色譜法分離取長春七乙醚提取物拌樣後加至矽膠色譜柱上，用氯仿-甲醇(20∶0～20∶4)溶劑系統進行梯度洗脫，收集其中氯仿-甲醇(20∶0)的洗脫液，回收溶劑，得到提取物；3)第二次柱色譜法分離將第一次柱色譜法分離得到的氯仿-甲醇(20∶0)提取物拌樣後加至另一矽膠色譜柱上，以石油醚-醋酸乙酯(20∶0～20∶20)溶劑系統進行梯度洗脫，收集石油醚-醋酸乙酯(20∶1)的洗脫液，放置，有灰黃色粉末狀沉澱析出，過濾，得沉澱；4)精製將第二次柱色譜法分離得到的沉澱用石油醚-醋酸乙酯(20∶1)反覆重結晶，得蛇床子素的白色針狀結晶。
全文摘要
一種從長春七中提取鎮痛有效成分蛇床子素的方法，首先取長春七藥材粗粉，用乙醚回流提取，過濾；藥渣再用乙醚回流提取一次，過濾，合併兩次提取液，棄去藥渣，回收乙醚溶劑後，得到的殘留物就是乙醚提取物；取長春七乙醚提取物拌樣後加至矽膠色譜柱上，依次用氯仿-甲醇溶劑和石油醚-醋酸乙酯系統進行梯度洗脫，回收溶劑，得到提取物；將提取物放置，有灰黃色粉末狀沉澱析出，過濾，得沉澱；將沉澱物用石油醚-醋酸乙酯反覆重結晶，得蛇床子素的白色針狀結晶。本發明以鎮痛作用為藥效學指標對長春七的不同提取部位進行活性篩選，確定了長春七鎮痛的有效部位，分離並鑑定出了蛇床子素，可作為長春七的鎮痛有效成分。
文檔編號C07D311/00GK101255148SQ20081001778
公開日2008年9月3日 申請日期2008年3月25日 優先權日2008年3月25日
發明者容夢榮, 朱彗凝, 娟 石 申請人:西安交通大學