新的核酸轉移試劑,含有它們的組合物及其應用的製作方法
2023-06-01 14:52:26
>化合物化合物／DNA電荷比輔助脂類RLU／肺皮克／肺給藥方法化合物(5)6／1DOPE(1∶1)254．91611．3ⅰ．ⅴ．化合物(5)8／1DOPE(1∶1)535．23558．1ⅰ．ⅴ．化合物(5)0．5／1膽固醇(3∶1)209．61330．5ⅰ．m．化合物(5)0．5／1DOPE(1∶1)155．8974．6ⅰ．m．化合物(6)6／1-175．11098．7ⅰ．ⅴ．化合物(6)5／1DOPE(1∶1)407．72700．8ⅰ．ⅴ．化合物(6)0．5／1DOPE(1∶1)1768．713005．4ⅰ．m．權利要求1.呈D、L或DL形式的通式(Ⅰ)化合物CA-Rep-R(Ⅰ)其中①CA代表具有下述通式(Ⅱ)的環脒基團及其內消旋體式中·m和n彼此獨立地是0-3的整數，m+n大於或等於1，·R1代表下述通式(Ⅲ)的基團其中p和q彼此獨立地是0-10的整數，Y代表羰基、氨基、甲基氨基或亞甲基，Y在不同的基團〔(CH2)p-Y〕中可以有不同的意義，(*)代表氫原子，或者是與基團Rep鍵合的地方，其中R1可以與通式(Ⅱ)任何原子相連，包括Z，並且在式(Ⅱ)中只有一個基團R1，·X代表NR2基團或CHR2基團，R2是氫原子，或者如前面所定義的與R1基團連接的鍵，·基團代表*第一種情況通式(Ⅳ)基團其中W＇代表CHR或NR，R″和R彼此獨立地代表氫原子、甲基或如前面所定義的與R1基團連接的鍵，或*第二種情況通式(Ⅴ)基團其中W＇代表CHR或NR，R＇和R彼此獨立地代表氫原子、甲基或如前面所定義的與R1基團連接的鍵，②Rep不存在或是通式(Ⅵ)的間隔基根據情況其氮原子與X、V、W或Z原子相連，或與基團R1的取代基Y相連，以及·t是0-8的整數，·r是0-10的整數，r在不同-NR4-(CH)r-基團中可以有不同的意義，·R3在不同-NR4-(CH)rR3-基團中可以有不同的意義，它代表氫原子、甲基或下述通式(Ⅶ)基團其中u是0-10的整數，s是2-8的整數，在不同基團-(CH2)sNR5-中可以有不同的意義，R5是氫原子，如前面所定義的CA基團，這些CA基團彼此獨立並可以不同，或是通式(Ⅶ)基團，這些通式(Ⅶ)基團彼此獨立並可以具有不同的意義，·R4與R3定義相同，或代表如前面定義的CA基團，這些CA基團彼此獨立並且可以不同，③R與通式(Ⅵ)Rep基團的羰基官能團相連，或如果Rep基團不存在，R直接與CA基團相連，並代表*式NR6R7基團，其中R6和R7彼此獨立地代表氫原子或含有1-22個碳原子、選擇性地含有氟的飽和或未飽和的直鏈或支鏈脂族基團，並且R6和R7兩個取代基中至少一個基不是氫，另一個含有10-22個碳原子，*或者類固醇衍生物*或者下述通式(Ⅷ)基團其中x是1-8中的整數，y是1-10中的整數，Q代表C(O)NR6R7基團，式中R6和R7如前面所定義，或者Q代表C(O)R8基團，其中R8代表下述式(Ⅸ)基團式中z是2-8中的整數，R9是含有8-22個碳原子、選擇性地含有氟的飽和或未飽和的脂族基團，或類固醇衍生物，兩個取代基R6彼此獨立地如前面所定義，或R8代表-O-R9基團，其中R9如前面所定義。2.根據權利要求1所述的化合物，其特徵在於基團R1與Z，或者與V相連，另一方面通過Y與Rep基團相連。3.根據權利要求1所述的化合物，其特徵在於式(Ⅱ)環脒基團CA包含5、6、7或8個環原子。4.根據權利要求1所述的化合物，其特徵在於R3代表氫原子或甲基，R4如權利要求1所定義，或在式(Ⅵ)中的R3與R4代表氫原子，或者R4是氫原子，而R3是其中R5代表CA基團的式(Ⅶ)基團。5.根據權利要求1所述的化合物，其特徵在於在式(Ⅴ)中，p和q彼此獨立地選自2、3或4。6.根據權利要求1所述的化合物，其特徵在於R6和R7是相同或不同的，每個代表含10-22個碳原子、任選地含氟的、飽和或未飽和直鏈或支鏈脂族鏈。7.根據權利要求1所述的化合物，其特徵在於R6和R7是相同或不同的，每個代表含有12、14、16、17、18或19個碳原子、任選地含氟的飽和或未飽和直鏈或支鏈脂族鏈。8.根據權利要求1所述的化合物，其特徵在於當R是類固醇衍生物時，所述衍生物選自膽固醇、膽甾烷醇、3-α-5-環-5-α-膽甾烷-6-β-醇、膽酸、甲酸膽甾醇酯、甲酸膽甾烷基酯、甲酸3α，5-環-5α-膽甾烷-6β-基酯、膽甾烯基胺、6-(1，5-二甲基己基)-3a，5a-二甲基-十六氫環戊〔a〕環丙烯並〔2，3〕環戊二烯並〔1，2-f〕萘-10-基胺或膽甾烷胺。9.根據權利要求1所述的化合物，其為下式化合物化合物(1)化合物(2)化合物(3)化合物(4)化合物(5)化合物(6)10.根據權利要求1-9中任一項所述化合物的製備方法，其特徵在於合成帶一個或多個環脒官能的部分，然後在有間隔基的脂類上接枝這些部分。11.根據權利要求1-8中任一項所述化合物的製備方法，其特徵在於首先合成脂多胺類似物，其次環化成環脒基團。12.組合物，其特徵在於它含有至少一種通式(Ⅰ)化合物。13.根據權利要求12所述的組合物，其特徵在於它含有一種通式(Ⅰ)化合物和一種核酸。14.根據權利要求12或13所述的組合物，其特徵在於它還含有一種或多種添加劑。15.根據權利要求14所述的組合物，其特徵在於添加劑是一種或多種具有兩個脂肪鏈的脂類。16.根據權利要求15所述的組合物，其特徵在於中性脂類是在生理條件下為兩性離子或無離子電荷的天然或合成脂類，它們例如選自二油醯基磷脂醯乙醇胺(DOPE)、油醯基棕櫚醯基磷脂醯乙醇胺(POPE)、二硬脂醯基-、二棕櫚醯基-、二肉豆蔻醯基-磷脂醯乙醇胺以及它們的1-3次N-甲基化衍生物、磷脂醯基甘油、二醯基甘油、糖基二醯基甘油、腦苷脂(具體如半乳糖腦苷脂)、鞘脂(具體如鞘磷脂)，或脫唾液酸神經節苷脂(具體如脫唾液酸GM1和GM2)。17.根據權利要求14所述的組合物，其特徵在於添加劑是一種直接幹預或非直接地幹預核酸濃集的化合物。18.根據權利要求17所述的組合物，其特徵在於所述的添加劑完全或部分地從魚精蛋白、組蛋白、核仁蛋白和／或它們的衍生物得到，或所述的添加劑還可以全部或部分地由肽基元(KTPKKAKKP)和／或(ATPAKKAA)構成，基元數可以是2-10，這些基元可以連續地或不連續地重複。19.根據權利要求12-18中任一項所述的組合物，其特徵在於該組合物還含有一種或多種非離子表面活性劑，其量足以使核脂複合物微粒的尺寸穩定。20.根據權利要求12-19中任一項所述的組合物，其特徵在於該組合物含有用於可注射製劑的在藥學上可接受的賦形劑。21.根據權利要求12-19中任一項所述的組合物，其特徵在於該組合物含有用於皮膚和／或黏膜施用的藥學上可接受的賦形劑。22.根據權利要求13所述的組合物，其特徵在於所述的核酸是脫氧核糖核酸或核糖核酸。23.根據權利要求22所述的組合物，其特徵在於所述的核酸含有一個表達盒，該盒由在靶細胞中有活性的一個或多個啟動子和轉錄終止子控制下的一個或多個有治療意義的基因構成。24.根據權利要求1-9中任一項所述化合物在製備用於治療疾病的藥物的應用。25.根據權利要求1-9中任一項所述化合物在生產採用肌內方法在細胞內轉移核酸治療疾病的藥物的應用。26.在細胞中轉移核酸的方法，該方法包括下述步驟(1)讓核酸與如前面定義的通式(Ⅰ)化合物進行接觸，以便生成核脂複合物，(2)讓細胞與(1)中生成的核脂複合物接觸。27.根據權利要求26所述的在細胞中轉移核酸的方法，其特徵在於所述的核酸和／或所述的化合物預先與一種或多種添加劑混合。28.用編碼蛋白質或可以轉錄成能緩解疾病的核酸的核酸治療疾病的方法，所述核酸與通式(Ⅰ)化合物結合。全文摘要本發明涉及用於向細胞中轉移核酸的新的有效化合物。這些新化合物更具體地屬於脂類多胺類並含有至少一個環脒官能團。它們可用於在體外、離體或體內在不同類型細胞中轉染目標核酸。文檔編號A61K48/00GK1294582SQ9980427公開日2001年5月9日申請日期1999年3月30日優先權日1998年4月2日發明者G·柏克,M·弗萊德裡克,H·霍夫蘭德,D·斯徹爾曼申請人:阿文蒂斯藥物公司