一種金針菇出菇育種方法

2023-07-02 22:34:56 5

專利名稱：：一種金針菇出菇育種方法
技術領域：
：本發明屬於食用菌育種領域，具體的說涉及一種用試管出菇育種方法選育金針菇菌種的過程。
背景技術：
：金針菇是我國工廠化生產發展最快的食用菌種類。幾十年來，為了跟上產業發展的要求，國內同行一直致力於金針菇新品種的選育。品種選育必然需要進行栽培出菇試驗，以確定其子實體性狀的優劣，進而選擇優質的菌種。其中最常規的栽培出菇方法就是工廠化瓶栽和傳統袋料栽培。然而，這兩種方法的缺點在於，對於能源的消耗量非常大，而且人力方面的需求也很大，另外也比較容易造成不同菌株孢子間的相互附著，造成菌種遺傳表現的不穩定。這些缺點會導致資源方面的浪費，及研究經費的約束，大大降低了育種效率。所以，我們亟需尋找金針菇菌種選育中栽培出菇的新方法。
發明內容本發明所要解決的技術問題在於提供一種金針菇試管出菇育種方法，應用於金針菇優秀新菌種的選育中。本發明的金針菇試管出菇育種方法，包括以下步驟(1)製備培養基及培養料；(2)培養料裝填將培養料填入試管，壓緊，用透氣性薄膜包上試管口，皮筋箍緊；(3)金針菇菌種的製備將要選育的金針菇菌種，由母種轉接為原種，原種再轉接為栽培種；(4)菌種接入在超淨工作檯上將金針菇栽培種接入試管中培養料上，用透氣性薄膜包上試管口，皮筋箍緊，貼上標籤；(5)搔菌菌絲長滿試管時，將培養基表面的栽培種及老化菌絲挖去；(6)出菇、採收；篩選優質品種。所述的試管為30X250mm的試管，玻璃試管為佳(購自上海滬華玻璃儀器有限公司)。所述的透氣性薄膜是16X16cm的封口膜(購自上海鼎國生物技術有限公司)。在這一過程中還可以做生長速度的測量菌絲生長環境下，菌種接入疒10天後，在試管上菌絲生長處劃一條線，再經過710天，劃第二條線，測量兩條線間的距離，除以天數即可得到日平均菌絲生長速度；按實驗需要可以繼續劃線測量速度，得到不同時間段的生長速度。金針菇子實體特徵是1.相對其它食用菌子實體，例如香菇，金針菇子實體菌柄細長，菌柄直徑約為廣3毫米，長度為1(Γ20釐米；2.金針菇子實體菌蓋較小，菌蓋直徑約為1(Γ20毫米；3.金針菇子實體顏色分為白色和黃色，表現為不同部位、不同層次的顏色差另|J。4.金針菇在子實體成熟後產生孢子，孢子彈射容易造成菌株間相互汙染，從而破壞遺傳穩定；如果用試管進行栽培，則可以避免這一汙染，有助於遺傳穩定。所以，金針菇子實體的尺寸與30X250mm玻璃試管較為合適，利用試管出菇是非常適合於考察金針菇子實體性狀的栽培方法。試管出菇栽培在金針菇菌種選育中有以下重要作用1.節約能源消耗，節省人力；2.栽培周期短，提高育種效率；3.穩定遺傳性狀；4.實驗操作可控性強。目前還未見將試管栽培出菇的方法應用到金針菇的選育研究。具體方法步驟為(1)培養基與培養料製備按育種需要製備培養基與培養料；培養基為PDA培養基。配方去皮馬鈴薯200g煮汁，葡萄糖20g，瓊脂20g，蒸餾水IOOOmL,pH7。置於15X150mm小試管中，管口用矽膠塞塞住。PDA培養基採用高壓滅菌，滅菌溫度為121°C，保持30分鐘。栽培種培養料配方木屑30%，玉米芯20%，棉籽殼20%，麩皮15%，米糠15%，含水量61%62%。初始pH6.5。木屑一般使用闊葉樹木屑，其它原料必須保持新鮮、乾燥，無蟲蛀和黴變現象，顆粒度符合設備和工藝要求。原料保存過程中應通風換氣，保持儲藏環境乾燥。原料混合時，按配方要求準確定量，使物料充分攪拌均勻，加水至含水量達到61%62%。根據季節變化調整攪拌時間，防止混合料酸敗。培養料在裝填後立即進行滅菌處理，一般採用高壓滅菌。滅菌時間為料的中心溫度必須達到121°C，並保持120分鐘，必須徹底殺滅培養料中的所有微生物。滅菌後冷卻至管內溫度25°C以下，方可接種。(2)培養料裝填將製備好的培養料填入試管，用透氣性薄膜包上試管口，皮筋箍緊；使用30X250mm玻璃試管，要求裝料緊實度均勻，料面距離試管底部約纊10釐米長，用透氣性薄膜包上試管口，皮筋箍緊。(3)金針菇菌種的製備將要選育的金針菇菌種，由母種轉接為原種，原種再轉接為栽培種；菌種均轉接於滅過菌的斜面上，選用15X150mm試管，試管口用矽膠塞塞住。培養基為PDA培養基。(4)菌種接入在超淨工作檯上將金針菇栽培種接入試管中培養料上，用透氣性薄膜包上試管口，皮筋箍緊，貼上標籤；接種時按無菌操作程序進行。將經過滅菌的30X250mm試管放進接種室，超淨工作檯上，紫外滅菌20min，然後將菌種帶入接種室。先將的試管口移向酒精燈火焰上，去掉皮筋和透氣性薄膜，轉動試管口，使試管口的周圍都得到火焰滅菌。再靠近酒精燈火焰，去掉15X150mm試管口的矽膠塞，用鑷子或接種勺取菌種快，接到30X250mm試管培養料上。接種量要求蓋滿培養料表面至瓶口，這樣能使菌絲生長均勻，並能有效防止雜菌汙染。試管口蓋上透氣性薄膜，箍上皮筋，貼上標籤，送進培養室培養。培養室溫度控制在20°C22°C，溼度維持在60%70%。(5)生長速度的測量菌絲生長環境下，菌種接入疒10天後，在試管上菌絲生長處劃一條線，再經過710天，劃第二條線，測量兩條線間的距離，除以天數即可得到日平均菌絲生長速度；按實驗需要可以繼續劃線測量速度，得到不同時間段的生長速度。(6)搔菌待菌絲長滿試管中的培養料後，去掉試管口透氣性薄膜，使用合適的搔菌工具，去掉表面接種塊及老化菌絲並使出菇表面平整，向瓶中注入廣2毫升水。催蕾控制溫度為13°C15°C，溼度為90%95%，直到形成魚籽般的菇蕾。(7)出菇栽培將試管至於金針菇出菇的適宜環境下出菇，採收及記錄，以便篩選優質品種。所述的適宜環境為溫度控制為4°C8°C，溼度為90%以上，CO2濃度為30003500ppmo子實體成熟時採收，並拍照。記錄子實體顏色、菌柄長度、直徑、菌蓋直徑及出菇期、栽培周期等數據。按照性狀篩選優良菌株。運用本發明的方法選育出的金針菇菌種具有選育速度快、周期短、能耗少、效率高、遺傳穩定、可控性強等特點。實施例一菌株F3為中國農業微生物菌種保藏中心上海食用菌分中心保藏。(保藏號為4150)選用F3菌株，分別進行工廠化栽培出菇和試管栽培出菇。從培養基和培養料的製備到菌種製備，以及菌絲培養和出菇栽培，條件步驟相同。不同點在於工廠化栽培出菇選用的是IlOOmL耐高溫塑料瓶，裝料至瓶口2cm左右，約800g，中間打孔至瓶底，接種時使用的是自動接種機接種；搔菌後去掉瓶蓋，子實體在瓶口上方生長；試管栽培出菇選用的是30X250mm玻璃試管，料面距離試管底部約纊10釐米長，用透氣性薄膜包上試管口；接種使用手工接種；搔菌後去掉透氣性薄膜，子實體還在試管中生長。然後在菌絲生長速度、子實體外觀、栽培周期、抗逆性等方面進行觀察記錄，評價其菌種特性。金針菇試管栽培出菇與傳統工廠化金針菇栽培出菇方法的比較tableseeoriginaldocumentpage5tableseeoriginaldocumentpage6權利要求一種金針菇出菇育種方法，包括以下步驟(1)製備培養基及培養料；(2)培養料裝填將培養料填入試管，壓緊，用透氣性薄膜包上試管口，皮筋箍緊；(3)金針菇菌種的製備將要選育的金針菇菌種，由母種轉接為原種，原種再轉接為栽培種；(4)菌種接入在超淨工作檯上將金針菇栽培種接入試管中培養料上，用透氣性薄膜包上試管口，皮筋箍緊，貼上標籤；(5)搔菌菌絲長滿試管時，將培養基表面的栽培種及老化菌絲挖去；(6)出菇、採收；篩選優質品種。全文摘要本發明公開了一種金針菇出菇育種方法，使用該方法選育金針菇菌株具有選育速度快、周期短、能耗少、效率高、遺傳穩定、可控性強等特點。文檔編號A01G1/04GK101822172SQ201010183628公開日2010年9月8日申請日期2010年5月25日優先權日2010年5月25日發明者尚曉冬,徐珍,譚琦申請人:上海市農業科學院;上海科立特農科(集團)有限公司;上海國森生物科技有限公司