假蒟提取物及其在製備殺蟲抑菌劑中的應用的製作方法

2023-06-03 05:47:21

專利名稱：假蒟提取物及其在製備殺蟲抑菌劑中的應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種假蒴提取物及其在製備殺蟲抑菌劑中的應用。
背景技術：
在人類與害蟲的長期鬥爭過程中，殺蟲劑的發展經歷了一個從高毒到低毒、低效 到高效、殺滅到控制的過程，且殺蟲劑的種類日趨豐富，按其來源可大致分為化學合成、動 物源、植物源、微生物源等四大類。目前主要用化學殺蟲劑進行防治。但由於化學農藥的大 量使用，加上用藥不規範，致使害蟲對有機磷、氨基甲酸酯、擬除蟲菊酯、菸鹼類等多種藥劑 產生了抗藥性。植物是天然產物的巨大寶庫，其產生的次生代謝物質如生物鹼、黃酮、木質素、萜 類、萘醌類等超過40萬種，這些次生代謝物中有多種物質對害蟲具有毒殺、忌避、拒食、抑 制生長發育等作用，再加上這些物質在環境中易降解消失，環境和諧性良好，易與其他防治 措施相協調，前景誘人，引起人們極大的興趣，成為研發重點和熱門領域之一。假蒴(Piper sarmentosum Roxb.)，又名哈蒴、假薯、假萎，鑽骨風，為胡椒科胡椒 屬植物，生於山谷密林中或村旁溼潤處。假蒴為多年生葡匐草本，揉之有香氣。莖節膨大， 常生不定根。葉互生，近膜質，吸腺點，下部的葉闊卵形或近圓形，長7-14cm，寬6-13cm， 先端短尖，基部心形或近截形，葉脈7條；上部的葉小，卵形至卵狀披針形；葉柄長l-5cm。 花單性，雌雄異株，無花被；穗狀花序；雄花序長1. 5-2cm,直徑2-3mm，苞片扁圓形，直徑 0. 5-0. 6mm,雄蕊2枚；雌花序長6_8mm，果期延長達2. 5cm ；苞片稍大，柱頭3_5。漿果近球 形，具角稜，直徑2. 5-3cm，下部嵌生於序軸中。花期夏季。假蒴可用於胃寒痛，氣脹腹痛，風 溼腰痛，產後氣虛腳腫，瘡痛，痔瘡，跌打腫痛。但迄今為止並未發現有以假蒴為原料，製造 植物性殺蟲殺菌劑的報導。

發明內容
本發明的目的在於提供一種假蒴提取物及其在殺蟲抑菌劑中的應用。本發明所提供的假蒴提取物的製備方法，是將假蒴組織用乙醇在20-35°C下冷浸 提取，然後過濾將濾液濃縮至膏狀物，然後過以大小為200-300目的矽膠顆粒為填料的層 析柱，用石油醚洗脫，將洗脫液濃縮烘乾得到假蒴提取物。所述方法中，還包括將所述假蒴組織在用乙醇冷浸提取前先陰乾，然後粉碎過40 目篩後作為假蒴提取材料；所述假蒴組織為假蒴的根和/或假蒴的莖。所述方法中，所述乙醇冷浸提取的時間為7-10天，優選為10天，提取的次數為2-3 次，優選為3次。所述方法中，所述乙醇與所述假蒴提取材料的質量比為(6-10) 1。上述方法製備的假蒴提取物也屬於本發明所要求保護的範圍。本發明還提供一種殺蟲殺菌微乳劑，它由下述重量百分比的組分組成權利要求5所述的假蒴提取物3 25 %，
溶劑 10 20%乳化劑 10 20%穩定劑2 5%，抗凍劑 3 5%， 餘量為水；其中，所述溶劑選自乙二醇、環己酮、二甲基甲醯胺、二甲苯、甲醇、乙醇、二甲亞 碸、正丁醇和苯中的一種或兩種以上任意組合；所述乳化劑選自十二烷基苯磺酸鹽、蓖麻油 環氧乙烷醚、苯酚衍生物聚氧乙烯基醚、壬基酚聚氧乙烯醚和烷基酚聚氧乙烯醚中的一種 或兩種以上任意組合；所述穩定劑選自丁基縮水甘油醚，苯基縮水甘油醚，甲苯基縮水甘油 醚，聚乙烯基乙二醇二縮水甘油醚等的一種或兩種以上任意組合；所述抗凍劑選自環己酮、 乙二醇、丙二醇、丙三醇或聚乙二醇400中的一種或兩種以上任意組合；所述水選自去離子 水、蒸餾水或自來水。所述殺蟲殺菌微乳劑優選由下述重量百分含量的組分組成權利要求5所述的假蒴提取物5-12. 5%,溶劑15-20%，乳化劑18-20%，穩定劑2.5-3%，抗凍劑2_5%，餘量為水。其中，所述溶劑為乙醇、正丁醇、二甲亞碸、甲醇和苯中的一種或兩種以上任意混 合，所述乳化劑為十二烷基苯磺酸鹽、烷基酚聚氧乙烯醚、壬基酚聚氧乙烯醚和苯酚衍生物 聚氧乙烯醚中的一種或兩種以上任意混合，所述穩定劑為丁基縮水甘油醚和/或甲苯基縮 水甘油醚，所述抗凍劑為丙三醇和/或丙二醇。所述殺蟲殺菌微乳劑特別優選由下述1)或2)所述重量百分含量的組分組成1)權利要求5所述的假蒴提取物5%，溶劑15%，乳化劑18%，穩定劑3%，抗凍劑5%，餘量為水；其中，溶劑為乙醇、正丁醇和苯的混合溶液，乙醇、正丁醇和苯的質量比為 3:1: 1，乳化劑為十二烷基苯磺酸鹽和苯酚衍生物聚氧乙烯醚的混合物，十二烷基苯磺 酸鹽和苯酚衍生物聚氧乙烯醚的質量比為1 2，穩定劑為丁基縮水甘油醚，抗凍劑為丙三2)權利要求5所述的假蒴提取物 10%,溶劑 20%, 乳化劑 20%,
穩定劑2.5%，抗凍劑2%，餘量為水；其中，溶劑為甲醇和二甲亞碸的混合溶液，甲醇和二甲亞碸的質量比為9 1，乳 化劑為烷基酚聚氧乙烯醚和壬基酚聚氧乙烯醚的混合物，烷基酚聚氧乙烯醚和壬基酚聚氧 乙烯醚的質量比為2 3，穩定劑為甲苯基縮水甘油醚，抗凍劑為丙二醇。上述殺蟲殺菌微乳劑的製造方法，為先將假蒴提取物溶於權利要求7所述的溶劑 中，加入權利要求7所述的乳化劑、抗凍劑和分散劑，攪拌均勻，在攪拌情況下加入水，攪拌 30-60分鐘，冷卻至室溫，得到殺蟲殺菌微乳劑。本發明的方法以假蒴根、莖為原料，冷浸提取得到假蒴提取物，並將其與溶劑、農 藥助劑等合理配製，獲得殺蟲活性顯著、低毒低殘留，害蟲不易對其產生抗藥性的新型植物 源殺蟲殺菌微乳劑。實驗證明，本發明通過盆栽試驗和田間小區試驗驗證假蒴提取物對斜紋夜蛾的的 殺蟲活性，發現該植物提取物對斜紋夜蛾、橡副珠蠟蚧、蚜蟲、香蕉炭疽病菌、辣椒炭疽病 菌、芒果炭疽病菌和橡膠炭疽病菌具有很好的防治效果。以假蒴提取物製備的微乳劑，通過 室內和田間試驗證明假蒴微乳劑對多種昆蟲和病菌具有良好的抵制活性，對斜紋夜蛾、橡 副珠蠟蚧和蚜蟲等具有較好的殺蟲作用。以假蒴提取物製備的植物源殺蟲抑菌劑，其高效、 低毒的特點符合當代農藥的需求；具有不汙染環境、安全、低毒、不傷害天敵與非靶標生物 等特點，在有害生物綜合防治(IPM)潛力很大，具有十分廣闊的前景；且該殺蟲劑製造工藝 簡單，原料易得，成本低廉，符合目前農藥的發展趨勢，適宜於推廣應用。
具體實施例方式下述實施例中，如無特殊說明，均為常規方法。下述實施例中，所述百分含量如無特殊說明，均為質量百分含量。本發明的發明人通過對海南島多種熱帶植物殺蟲活性的篩選時，首次發現假蒴對 斜紋夜蛾幼蟲具有很好的殺蟲活性，對多種熱帶病菌也有很好的抑制作用，之後又發現該 種植物提取物對蘿蔔蚜、香蕉蚜、小菜蛾、菜青蟲等多種害蟲具有明顯的毒殺作用，並通過 盆栽試驗和田間小區試驗驗證假蒴提取物對斜紋夜蛾的的殺蟲活性，發現該植物提取物對 斜紋夜蛾具有很好的防治效果，在供試濃度為2%時，藥後5天的防治效果高於對照藥劑 1. 8%阿維菌素1000倍稀釋液。鑑於此，本發明以假蒴的根和莖為原料，通過有機溶劑提取 後，將所得提取物與農藥助劑進行合理混合，配製出一種植物性殺蟲殺菌微乳劑。以下述實 施例為例，說明本發明的假蒴提取物的製備及以其製備殺蟲劑的效果。以下對本發明作進一步的詳細描述。實施例1、假蒴提取物的製備將生長至開花時期的假蒴植株(苗木購自毫州市保華藥業有限公司)清洗乾淨， 並將其葉棄除掉，放於室內自然陰乾後，將其根和莖粉碎過40目篩，以乙醇為溶劑，按假蒴 與乙醇的重量比為1 8的比例混合，冷浸(室溫下，20-35°C，浸泡)提取3次，每次10天； 用布氏漏鬥過濾，合併濾液，用旋轉蒸發儀減壓濃縮濾液至膏狀物，加入等重量100-200目 柱層析矽膠拌成粉狀物，採用幹法上柱(層析柱的填料為200-300目的柱層析矽膠)，以石油醚為溶劑進行洗脫，將收集的洗脫液經濃縮後再在45°C電熱恆溫鼓風乾燥箱中烘乾，即 得假蒴提取物。實施例2、假蒴提取物的製備將生長至開花時期的假蒴植株(苗木購自毫州市保華藥業有限公司)置於室內 自然陰乾粉碎過40目篩，用10倍於假蒴粉碎物重量的甲醇，在回流條件下提取，提取溫度 60°C，提取時間M小時，用旋轉蒸發儀減壓濃縮濾液至膏狀物，再在45°C電熱恆溫鼓風乾 燥箱中烘乾至恆重，即得假蒴提取物。實施例3、5%假蒴微乳劑的製備5%假蒴微乳劑由下述重量百分含量的物質組成實施例1製備的假蒴提取物5%，溶劑15%，乳化劑18%，穩定劑3%，抗凍劑5%，餘量為水； 其中，溶劑為乙醇、正丁醇和苯的混合溶液，乙醇、正丁醇和苯的質量比為 3:1: 1，乳化劑為十二烷基苯磺酸鹽和苯酚衍生物聚氧乙烯醚的混合物，十二烷基苯磺 酸鹽和苯酚衍生物聚氧乙烯醚的質量比為1 2，穩定劑為丁基縮水甘油醚，抗凍劑為丙三稱取實施例1製備的假蒴提取物5公斤，溶於15公斤乙醇、正丁醇和苯的混合溶 液(乙醇、正丁醇和苯的質量比為3 1 1)中，然後依次加入6公斤十二烷基苯磺酸鈣 (DBS-Ca)和12公斤苯酚衍生物聚氧乙烯醚(1601，此為乳化劑的名稱)，5公斤丙三醇和3 公斤丁基縮水甘油醚，室溫下攪拌均勻，然後高速攪拌下加入自來水補足至100公斤，再攪 拌45分鐘，冷卻，即得5%假蒴殺蟲殺菌微乳劑。實施例4、10%假蒴微乳劑的製備10%假蒴微乳劑由下述重量百分含量的物質組成實施例1製備的假蒴提取物10%，溶劑20%，乳化劑20%，穩定劑2.5%，抗凍劑2%，餘量為水。其中，溶劑為甲醇和二甲亞碸的混合溶液，甲醇和二甲亞碸的質量比為9 1，乳 化劑為烷基酚聚氧乙烯醚和壬基酚聚氧乙烯醚的混合物，烷基酚聚氧乙烯醚和壬基酚聚氧 乙烯醚的質量比為2 3，穩定劑為甲苯基縮水甘油醚，抗凍劑為丙二醇。稱取實施例1製備的假蒴提取物10公斤，溶於20公斤甲醇和二甲亞碸的混合溶 液(甲醇和二甲亞碸的質量比為9 1)中，然後依次加入8公斤烷基酚聚氧乙烯醚(0P-10) 和12公斤壬基酚聚氧乙烯醚(NP-15)，2公斤丙二醇，2. 5公斤甲苯基縮水甘油醚，室溫下攪 拌均勻，然後高速攪拌下加入自來水補足100公斤，再攪拌45分鐘，冷卻，即得10%假蒴微乳劑。實施例5、假蒴微乳劑殺蟲抑菌活性1供試材料1)供試害蟲斜紋夜蛾(Spodoptera litura Fabricius)採自未施藥的木瓜地，在室內飼養多 代，試驗時挑取大小一致、健康活潑的3齡中期幼蟲供試。橡副珠蠟蚧(Parasaissetia nigra)採自未施藥的橡膠地，在室內飼養多代，試驗 挑選大小一致的3齡試蟲供試。蘿蔔蚜(Lipaphiserysimi pseudobrassicae)採自中國熱帶農業科學院環境與植 物保護研究所試驗基地，採回的成蟲進行試驗。2)供試菌種香蕉炭疽病菌(Colletotrichum musae)(購買自中國農業微生物菌種保藏管理中 心，保藏編號ACCC No. 31247)；辣椒炭疽病菌(Colletotrichum capsici)(中國農業微生物菌種保藏管理中心， 保藏編號 ACCC No. 31218)；芒果炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides)(購買自中國農業微生物菌種 保藏管理中心，保藏編號ACCC No. 31219)；橡膠炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioules)(購買於中國農業微生物菌株 保藏管理中心，保藏編號ACCC No. 30012)。2試驗方法1)假蒴提取物及其製備的殺蟲殺菌劑的殺蟲活性檢測採用浸漬法測定(慕立義.植物化學保護研究方法.中國農業出版社.1987 56) 測定實施例1製備的假蒴提取物(假蒴提取物1)、實施例2製備的假蒴提取物(假蒴提取 物2)、實施例3製備的5%假蒴微乳劑和實施例4製備的10%假蒴微乳劑對斜紋夜蛾的毒 殺活性；其中，實施例1製備的假蒴提取物1和實施例2製備的假蒴提取物2分別用丙酮神 定容至50mg/ml母液，以上四種藥劑分別用含有0. (質量百分含量)吐溫80的蒸餾水 溶液稀釋成含有效成分(即假蒴提取物)濃度為lmg/mL或0. 5mg/mL備用，每濃度重複4 次，每重複15頭試蟲，以含有0. 吐溫80的蒸餾水作為空白對照。用塗抹法(畢仁軍.植物源農藥假蒴微乳劑及混配製劑的研製.2009 20)測定實 施例1製備的假蒴提取物1、實施例2製備的假蒴提取物2、實施例3製備的5%假蒴微乳劑 和實施例4製備的10%假蒴微乳劑對橡副珠蠟蚧三齡幼蟲的毒殺活性；其中，實施例1制 備的假蒴提取物1和實施例2製備的假蒴提取物2分別用丙酮神定容至50mg/ml母液，以 上四種藥劑分別用含有0. (質量百分濃度)吐溫80的蒸餾水溶液稀釋成含有效成分 (即假蒴提取物)濃度為lmg/mL或0. 5mg/mL備用，每濃度重複4次，每重複15頭試蟲，以 含有0. 吐溫80的蒸餾水作為空白對照。用噴霧法(慕立義.植物化學保護研究方法.中國農業出版社.1987 :56-58)測 定實施例1製備的假蒴提取物1、實施例2製備的假蒴提取物2、實施例3製備的5%假蒴 微乳劑和實施例4製備的10%假蒴微乳劑對蘿蔔蚜的毒殺活性；其中，實施例1製備的假 蒴提取物1和實施例2製備的假蒴提取物2分別用丙酮神定容至50mg/ml母液，以上四種藥劑分別用含有0.1%吐溫80的蒸餾水溶液稀釋成含有效成分(即假蒴提取物)濃度為 lmg/mL和0. 5mg/mL備用，每濃度重複4次，每重複15頭試蟲，以含有0. 1 %吐溫80的蒸餾 水作為空白對照。死亡率(％ )=死亡蟲數/總蟲數X 100校正死亡率(％ )=(處理死亡率-對照死亡率)/ (100-對照死亡率)X 100假蒴提取物及其製備的殺蟲殺菌劑的殺蟲活性結果如表1所示，結果表明，5%假 蒴微乳劑和10%假蒴微乳劑對斜紋夜蛾3齡幼蟲、橡副珠蠟蚧3齡幼蟲和蘿蔔蚜具很強的 毒殺活性，其殺蟲活性強度要高於相同質量濃度的假蒴提取物。表1假蒴提取物及其製備的殺蟲殺菌劑對幾種害蟲的殺蟲活性
權利要求
1.一種假蒴提取物的製備方法，是將假蒴組織用乙醇在20-35°C下冷浸提取，然後過 濾將濾液濃縮至膏狀物，然後過以大小為200-300目的矽膠顆粒為填料的層析柱，用石油 醚洗脫，將洗脫液濃縮烘乾得到假蒴提取物。
2.根據權利要求1所述的方法，其特徵在於所述方法還包括將所述假蒴組織在用乙 醇冷浸提取前先陰乾，然後粉碎過40目篩後作為假蒴提取材料；所述假蒴組織為假蒴的根 和/或假蒴的莖。
3.根據權利要求2或3所述的方法，其特徵在於所述乙醇冷浸提取的時間為7-10天， 優選為10天，提取的次數為2-3次，優選為3次。
4.根據權利要求1-4中任意一項所述的方法，其特徵在於所述乙醇與所述假蒴提取 材料的質量比為(6-10) 1 ；所述假蒴組織為生長至開花時期的假蒴的根和/或莖。
5.權利要求1-4中任意一項所述的方法製備的假蒴提取物。
6.一種殺蟲殺菌微乳劑，它由下述重量百分比的組分組成權利要求5所述的假蒴提取物3 25%，溶劑10 20%，乳化劑10 20%，穩定劑2 5%，抗凍劑3 5%， 餘量為水；其中，所述溶劑選自乙二醇、環己酮、二甲基甲醯胺、二甲苯、甲醇、乙醇、二甲亞碸、正 丁醇和苯中的一種或兩種以上任意組合；所述乳化劑選自十二烷基苯磺酸鹽、蓖麻油環氧 乙烷醚、苯酚衍生物聚氧乙烯基醚、壬基酚聚氧乙烯醚和烷基酚聚氧乙烯醚中的一種或兩 種以上任意組合；所述穩定劑選自丁基縮水甘油醚，苯基縮水甘油醚，甲苯基縮水甘油醚， 聚乙烯基乙二醇二縮水甘油醚等的一種或兩種以上任意組合；所述抗凍劑選自環己酮、乙 二醇、丙二醇、丙三醇或聚乙二醇400中的一種或兩種以上任意組合；所述水選自去離子 水、蒸餾水或自來水。
7.根據權利要求6所述的殺蟲殺菌微乳劑，所述殺蟲殺菌微乳劑由下述重量百分含量 的組分組成權利要求5所述的假蒴提取物5-12. 5%,溶劑15-20%，乳化劑18-20%，穩定劑2.5-3%，抗凍劑2-5%，餘量為水；其中，所述溶劑為乙醇、正丁醇、二甲亞碸、甲醇和苯中的一種或兩種以上任意混合，所 述乳化劑為十二烷基苯磺酸鹽、烷基酚聚氧乙烯醚、壬基酚聚氧乙烯醚和苯酚衍生物聚氧 乙烯醚中的一種或兩種以上任意混合，所述穩定劑為丁基縮水甘油醚和/或甲苯基縮水甘 油醚，所述抗凍劑為丙三醇和/或丙二醇。
8.根據權利要求7所述的殺蟲殺菌微乳劑，所述殺蟲殺菌微乳劑由下述1)或2)所述 重量百分含量的組分組成
9.權利要求6所述的殺蟲殺菌微乳劑的製造方法，為先將假蒴提取物溶於權利要求6 所述的溶劑中，加入權利要求6所述的乳化劑、抗凍劑和分散劑，攪拌均勻，在攪拌情況下 加入水，攪拌30-60分鐘，冷卻至室溫，得到殺蟲殺菌微乳劑。
10.權利要求5所述的假蒴提取物或權利要求6-9中任意一項所述的殺蟲殺菌劑在防 治蟲害和/或病害中的應用；所述蟲害為斜紋夜蛾和/或橡副珠蠟蚧和/或蘿蔔蚜引起的 蟲害；所述病害為香蕉炭疽病菌和/或辣椒炭疽病菌和/或芒果炭疽病菌和/或橡膠炭疽 病菌引起的病害。餘量為水；
全文摘要
本發明公開了一種假蒟提取物及其在製備殺蟲抑菌劑中的應用。該假蒟提取物的製備方法，包括下述步驟1)將假蒟根、莖粉碎後得假蒟粗粉；2)用6-10倍於假蒟粉碎物重量的有機溶劑，冷浸提取的時間為7-10d，提取次數為2-3次，過濾將濾液濃縮至膏狀物，然後過填料為200-300目矽膠的層析柱，用石油醚洗脫，將洗脫液濃縮烘乾得到假蒟提取物。以該提取物為原料，通過與溶劑、乳化劑、抗凍劑、穩定劑和水進行合理的配比，可製成假蒟微乳劑。本發明對斜紋夜蛾、橡副珠蠟蚧、蘿蔔蚜、芭蕉炭疽病菌和橡膠炭疽病菌具有很好的防治效果。該製劑製造工藝簡單，成本低廉，符合目前農藥的發展趨勢，適宜於推廣應用。
文檔編號A01P7/04GK102038007SQ20091023581
公開日2011年5月4日 申請日期2009年10月9日 優先權日2009年10月9日
發明者馮崗, 劉紅芳, 張敬寶, 張方平, 畢仁軍, 符悅冠, 金啟安, 韓冬銀, 黃武仁 申請人:中國熱帶農業科學院環境與植物保護研究所