金銀花微生物菌種製作及栽培方法
2023-05-28 06:44:31 1
專利名稱：金銀花微生物菌種製作及栽培方法
技術領域：
本發明涉及微生物菌種製作及栽培技術領域，特別涉及一種金銀花微生物菌種製作及栽培方法。
背景技術：
金銀花又名銀花、二花、忍冬、雙苞花等。屬多年生常綠、半常綠木質藤本藥用植物。其未放開的乾燥花蕾入藥稱為金銀花。金銀花微生物腐生於老齡金銀花墩根系土壤與枯木質藤本相連處，系天然野生真菌類植物，是天然的廣譜抗菌素植物，長期以來它被人們當作是治療咽喉腫痛、溼病發熱、關節疼痛、祛暑等症狀的良藥。該微生物除醫療作用外，還具有養顏保健功效，是微生物真菌類中的佳品。但由於金銀花微生物屬天然野生，其成因條件非常苛刻，而且大多都生長在小氣候環境比較隱蔽溼潤之處，主要生長在坡度陡峭、溝壑縱深之處的老齡金銀花墩上，不易被人們發現採集，故較為珍稀，很難滿足人們社會生活的需求，而且目前尚無人對其進行人工馴化和繁殖培育。
發明內容
本發明的目的在於提供一種從採集天然野生微生物種開始，經人工進行科學分離馴化提純，直至進行菌種分離與繁殖栽培的金銀花微生物菌種製作及栽培方法。
本發明的目的是通過如下技術方案實現的首先從金銀花墩上生長的微生物菌的基質上或子實體上獲得菌種，然後移入試管培養基上培養，當菌絲長滿整個培養基斜面後，將其分成30份分別放入試管培養基上擴大培養，當菌絲再次長滿整個培養基斜面後，再將每一試管菌種分成20份分別放入裝有培養料的塑膠袋內進行栽培。栽培時，菌種與培養料的重量比為10～15∶100，栽培環境溫度在24℃左右，溼度80～90％，菌絲達到生理成熟時將包在培養料外的塑膠袋揭開繼續培養，當子實體的子實層面由白色漸變為淡黃褐色時即可進行採收。金銀花微生物菌種可以採用子實體分離、菌木分離和孢子分離三種方法獲得。子實體分離是將精心選取天然野生性形態完整、肥厚結實、水分少、無病蟲害的子實體切取一小塊組織，把它接種到適宜的培養基上，適溫(27℃)培養，從中得到純度較高的菌絲體；菌木分離的方法是選取天然野生老齡金銀花微生物子實體生長良好、沒有其他木腐菌混生、被子實體柄基凹陷包圍的木質藤本，剪取含菌絲密集的菌木一塊，把它接種到適宜的培養基上適溫(27℃)培養，從中得到純度較高的菌絲體；孢子分離是將從子實體層中彈射出來的孢子放在適宜的培養基上適溫(25℃)培養，使其萌發、生長成菌絲體，從而得到純度較高的金銀花微生物菌種。培養基按如下比例配製而成，各成分的重量比例為馬鈴薯200g、葡萄糖10g、硫酸鎂0.5g、磷酸二氫鉀1g、瓊脂20g、水1000ml。培養料主要由金銀花木質藤木屑或闊葉樹木屑、棉子殼，再適當的配以其他材料如麩皮、石膏粉、蔗糖、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、黃豆粉製成。
配方一木屑78％、麩皮20％、石膏粉1％、蔗糖1％；配方二棉子殼98％、磷酸二氫鉀0.1％、硫酸鎂0.05％、黃豆粉1％、石膏粉1％；配方三木屑35％、棉子殼35％、麩皮28％、黃豆粉1％、石膏粉1％。
本發明從採集其天然野生微生物種開始，經人工進行科學分離馴化提純，建立了一套完整有效的菌種分離與繁殖栽培體系，實現人工培育產業化，向社會提供更多優質的金銀花微生物，以造福人類。
具體實施例方式
首先按以下比例製備好培養基，即將去皮後的馬鈴薯200g切成薄片，加水約1000ml，加熱煮沸，並保持微沸10-15分鐘至薯片酥而不爛為止，然後用紗布過濾，再在濾液中加入瓊脂20g再煮至瓊脂全部溶解為止，然後再加入葡萄糖10g、硫酸鎂0.5g、磷酸二氫鉀1g，並用熱水補足至總體積1000ml為止，攪拌均勻，分管試裝，裝量為試管高度的1/5，塞上棉塞放入滅菌鍋中，在0.1mpa條件下滅菌半小時，待棉塞表面水分蒸發乾後趁熱取出培養基試管，並將其斜置，待其冷卻、凝結並放置2-3天後即可使用。然後從金銀花墩上生長的微生物菌的基質上或子實體上用無菌操作方法獲得菌種，然後移入試管培養基上培養，當菌絲長滿整個培養基斜面後，將其分成30份分別放入試管培養基上擴大培養。試管最好放置在無強光照射、空氣流通、含氧量在21％左右、空氣相對溼度為60～80％、溫度為22～24℃的環境中。當菌絲長滿整個培養斜面(約30天)後，再將每一試管菌種分成20份分別放入裝有培養料的塑膠袋內進行栽培。栽培季節最好選擇在穀雨、霜降時節。栽培時，菌種與培養料的重量比為10～15∶100，栽培環境溫度最好在24℃左右，溼度80～90％，空氣要流通，氧氣要充足。培養40天左右，菌絲已達生理成熟，可將包在培養料外的塑膠袋揭開，使其能暴露在空氣中，並放置在14～18℃的環境中繼續培養，約兩周左右，子實體便可形成。當子實體的子實層面由白色漸變為淡黃褐色時即可進行採收。培養料主要由金銀花木質藤屑或闊葉樹木屑、棉子殼，再適當配以其他材料如麩皮、石膏粉、蔗糖、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、黃豆粉製成，其配方如下配方1木屑78％、麩皮20％、石膏粉1％、蔗糖1％；配方2棉子殼98％、磷酸二氫鉀0.1％、硫酸鎂0.05％、黃豆粉1％、石膏粉1％；配方3木屑35％、棉子殼35％、麩皮28％、黃豆粉1％、石膏粉1％。
實施例1精心選取天然野生性形成完整、肥厚結實、水分少、無病蟲害的子實體，用解剖刀切取子實體邊緣稍內部長勢旺盛、新生力強的菌塊，挑取黃豆粒大小菌髓中的少許菌絲，然後再用鑷子將其移入試管培養基上，將試管斜面向下，用黑色或灰色硬紙製成與試管粗細相適應的套袋將其套上，再放於22～26℃左右條件下培養，5～7天後組織上可長出菌絲，去掉有雜菌感染的菌絲後繼續培養，直至菌絲基本長滿培養基斜面，即可挑取米粒大小(約斜面的1/30)接種塊移植到另一新的培養基上，置於22～26℃條件下培養，兩周左右即可長滿整個試管斜面，然後再將其分成20份分別放入裝有培養料的塑膠袋內進行栽培。
實施例2選取天然野生老齡金銀花微生物子實體生長良好、沒有其他木腐菌混生、被子實體柄基凹陷包圍的木質藤本，用剪枝刀剪取含菌絲密集的菌木一塊，並剔除外層較髒部分，然後移入已滅菌的接種箱，用酒精燈灼燒5-10秒鐘，燒掉菌木表面雜菌，再將菌木做成木針狀，用鑷子將中間部分移入有培養基的試管中，再塞好棉塞，放於22～26℃條件下培養3～4天，此時菌木上即長出菌絲，繼續培養7-8天後，取米粒大小健康菌絲移入另一新的培養基上，再放於22～26℃的環境下培養兩周左右就可以長滿整個試管斜面，然後將其分成20份分別放入裝有培養料的塑膠袋內進行栽培。
實施例3採集野生金銀花微生物菌體個大、肉質肥厚、外光澤內密實、無病蟲害、已經成熟且開始散發孢子的子實體，置於接種箱內，放在搪瓷器皿上，再用經滅菌的紗布將其蓋上，然後移於培養室在18～22℃條件下培養，1～2天後孢子會散落在下面的搪瓷器皿上，然後將孢子連同器皿一起移到接種箱內，用接種針沾取孢子，接在試管培養基上並輕輕划動使孢子均勻分布於培養基上，在22～26℃條件下培養，直至孢子萌髮長成菌絲。剔除不健康菌絲。然後放於24℃條件下繼續培養，直至長滿試管後，再擴大培養。
權利要求
1.一種金銀花微生物菌種製作及栽培方法，其特徵在於首先從金銀花墩上生長的微生物菌的基質上或子實體上獲得菌種，然後移入試管培養基上培養，當菌絲長滿整個培養基斜面後，將其分成30份分別放入試管培養基上擴大培養，當菌絲再次長滿整個培養基斜面後，再將每一試管菌種分成20份分別放入裝有培養料的塑膠袋內進行栽培，其菌種可以採用子實體分離、菌木分離和孢子分離三種方法獲得。
2.一種金銀花微生物菌種製作及栽培方法，其特徵在於栽培時菌種與培養料的重量比為10～15∶100，栽培環境溫度在24℃左右，溼度80～90％，菌絲達到生理成熟時，將包在培養料外的塑膠袋揭開，繼續培養，當子實體的子實層面由白色漸變為淡黃褐色時進行採收。
3.根據權利要求1所述的一種金銀花微生物菌種製作及栽培方法，其特徵在於培養基按如下比例配製而成，各成分的重量比例為馬鈴薯200g、葡萄糖10g、硫酸鎂0.5g、磷酸二氫鉀1g、瓊脂20g、水1000ml。
4.根據權利要求1和2所述的一種金銀花微生物菌種製作及栽培方法，其特徵在於培養料主要由金銀花木質藤木屑或闊葉樹木屑、棉子殼，再適當的配以其他材料如麩皮、石膏粉、蔗糖、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、黃豆粉製成，其配方如下配方一木屑78％、麩皮20％、石膏粉1％、蔗糖1％；配方二棉子殼98％、磷酸二氫鉀0.1％、硫酸鎂0.05％、黃豆粉1％、石膏粉1％；配方三木屑35％、棉子殼35％、麩皮28％、黃豆粉1％、石膏粉1％。
全文摘要
本發明通過子實體分離、菌木分離和孢子分離三種方法從金銀花墩上生長的微生物菌的基質上或子實體上獲得菌種，然後移入試管培養基上培養，以得到更多的菌種，然後放入裝有培養料的塑膠袋中進行栽培。當子實體的子實層面由白色漸變為淡黃褐色時進行採收。本發明建立了一套完整有效的菌種分離與繁殖栽培體系，實現人工培育產業化，可向社會提供更多優質的金銀花微生物造福人類。
文檔編號C12N1/22GK1521255SQ03102568
公開日2004年8月18日 申請日期2003年2月12日 優先權日2003年2月12日
發明者廉世聞 申請人:廉世聞