防治子宮內膜有絲分裂的方法

2023-06-20 17:54:56

專利名稱：：防治子宮內膜有絲分裂的方法子宮內膜(endometrium)由組織、血管、和受雌激素刺激經有絲分裂導致增生的腺體組成。處於正常月經期的婦女，每月激素的波動可引起子宮內膜的生長和脫落。如果婦女受孕，子宮內膜起營養和發育胚胎的作用。許多子宮內膜癌的病例與稱之為「子宮內膜增生」的疾患前兆有關係。子宮內膜增生可按其是否存在細胞學上的異常。是否存在發育不良及所構建模式的複雜程度來分類。細胞學異常對其發展癌變的可能性是最有預測性的指標。存在細胞學異常的初級或囊樣增生中約有8％的機遇發生癌變。而有細胞學異常的複合增生或腺瘤型增生發生癌變的機遇為29％。不存在細胞學異常時初級增生的癌變率為1％，複合增生的癌變率為3％。隨著雌激素水平不斷地增高，子宮內膜也一直保持其生長狀態(有絲分裂的活性)，在某種情況下引起子宮內膜組織的過多或子宮內膜增生。子宮內膜的過度生長經常是良性狀態，但可能也是子宮內膜癌的前兆。由於這種危險的存在，醫生極力主張婦女應避免長期任用雌激素治療，因為長期使用雌激素過程中，如果子宮內膜不再脫落，可導致子宮內膜的生長過度，並且醫生主張應迅速尋求醫治雌激素過剩的治療方案。(在激素代用品治療中，使用黃體酮可引起長成的子宮內膜破裂、滲出或脫落)。醫生根據幾種因素決定治療方法。首先，他們檢查來自組織活檢或宮頸擴張與刮宮術的細胞。如果細胞是正常的只是過於飽滿，這種情況下發展成癌變的可能性比表現出不規則增大的細胞核和其它細胞異常特徵的情況下。在某些情況下宮頸擴張與刮宮術可表明癌變已經擴散。有絲分裂活性也是重要的。子宮內膜癌是最常見的婦科病症，而且是繼乳腺癌、結腸直腸癌和肺癌之後處第四位的婦科常見惡性腫瘤。每年診出子宮內膜癌的新病例大約有30,000～40,000例之間。而這種常見病症大多數病人出現在早期。子宮內膜癌主要發病於絕經後的婦女，診斷出的患者平均年齡為58歲，而且40歲以前的病例佔5％以下。子宮內膜癌的發病率在有乳腺瘤、子宮內膜瘤和卵巢瘤的婦女或屬於高社會經濟收入狀態的婦女中表現較高。出現子宮內膜癌最值得注意的危險因素是肥胖和由於使用黃體酮導致過多雌激素的存在。子宮內膜癌臨床分級的不準確性防礙了對其最佳治療和治療結果的分析。在未診斷出癌變轉移或發生全身癌變之前，醫學上目前採取的適合病人的最基本方法是整個子宮切除術/雙側輸卵管卵巢切除術。如果需要，可計劃輔助治療，這要取決於外科病理的結果僅僅是子宮內疾病還是子宮外疾病。如果病人的骨盆結是陽性的，那麼可用外部射線對骨盆結節放療；如果主動脈結節是陽性的，那麼用外部射線對異常主動脈區域放療。子宮外其它位置有癌變的患者可能需要整個腹部做放療。根據病變擴散的部位，某些病人除了放療外還需要系統治療。處於II期疾病的病人患子宮外或復發癌變的危險性較高。如果子宮頸的大小正常或大體上正常，可完全用外科條件進行筋膜外的經腹子宮全切術/雙側輸卵管卵巢切除術(TAH/BSO)，並在術後進行放療。對於大子宮頸，可選用兩種方法。第一種方法是整個骨盆放療，隨後進行腔內移植，接著進行TAH/BSO並對異常主動脈的淋巴節採樣。第二種選擇的方法是基部子宮切除術。如果需要，可用雙側輸卵管卵巢切除術和骨盆及異常動脈淋巴切除術並用放療配合。處於外科III期的疾病，主要外科方法是試驗應用經腹子宮全切除術/雙側輸卵管卵巢切除術來切除腫瘤。子宮外的病灶根據其位置和範圍可必要地擴大放療區域，全身化療或激素治療。對III期病人，可根據陰道或子宮旁的範圍需徹底的轉移性檢查後進行放療。對IV期病變的大多數患者最好用系統療法，它包括激素療法或化學療法。可以應用骨盆放療或子宮切除以達到治標和控制病情的目的。子宮內膜癌復發者骨盆處可用放療。不幸的是，大多數這類病人出現病變的遠距離轉移。放療後在骨盆中遠離癌變中心的復發是很少見的。然而，假如這種情況發生了，經選擇的患者可以作為骨盆去除術的志願者。而對於大多數復發病人用激素或化學療法治療。使用孕激素治療復發性子宮內膜癌已有十年的歷史。儘管在近來的試驗中孕激素顯示出較低(15-20％)的有效率，但是，它的總有效率大約為25％。患有子宮內膜癌的病人中，黃體酮和雌激素陽性的受試者對內分泌治療有較好的應答性。多數陽性受試者對孕激素應答，而只有15％陰性受試者對孕激素應答。甲孕酮(Provera)和甲地孕酮(Megace)是最常用的藥物。三苯氧胺(Nolvadex)也用來治療復發性子宮內膜癌病人，並且以前對孕激素有效的病人對此藥的治療效果較好。幾個細胞毒藥物對子宮內膜癌有活性，但均為短效，但對前期和復發性子宮內膜癌被認為是治標的。兩個單獨應用活性最好的藥物是阿黴素和順鉑。許多細胞毒藥物已合併使用，但是與單獨用藥的效果相比，多種藥物化療的結果未見明顯地好轉。本發明提供了防治子宮內膜有絲分裂方法，該法包括給需要治療的患者服用有效劑量的式I化合物及其藥學上適用的鹽和其溶劑化物，其中R1和R3獨立地是H、或其中Ar是任選取代的苯基；R2系選自四氫吡咯子基、六亞甲基亞氨基、和哌啶子基。本發明所涉及發現選自2-苯基-3-芳醯基苯並噻吩類(苯並噻吩類)一組式I化合物可用於防治子宮內膜有絲分裂。本發明提供治療和預防的實施方法是，給需要治療的受試者服用防治子宮內膜有絲分裂有效劑量的式I化合物或其藥學上適用的鹽或其溶劑化物。術語「防治」具有通常認可意義它包括阻止、預防、抑制、減慢、停止或逆轉病情的發展。因此，在合適的情況下本發明方法既包括醫學治療，和/或包括預防服用。雷洛昔芬是本發明優選的化合物而且為式I化合物的鹽酸鹽，其中R1和R3為氫，R2為1-哌啶基。通常將至少一個式I化合物與常用的賦型劑、稀釋劑或載體混合，將它們壓製成片劑或配製成酏劑或製成方便口服給藥或經肌內或靜脈途徑給藥的溶液劑。本發明化合物可經皮下給藥，也可製成控釋劑型等。本發明方法中使用的化合物可以根據已有的方法來製備，如美國專利US4,133,814，US4,418,068，和US4,380,635等中的詳細方法，將所有這些方法收編在本申請中作為參考。一般來講，本發明方法用含有6-羥基和2-(4-羥基苯基)的苯並〔b〕噻吩作為起始原料。起始化合物被保護，醯化，並脫保護，生成式I化合物。上述美國專利提供了合成所述化合物的實例。術語「任選取代的苯基」包括苯基和由C1-C6烷基、C1-C4烷氧基、羥基、硝基、氯、氟或三(氯或氟)甲基一次或兩次取代的苯基。本發明方法所應用的化合物與範圍廣的有機和無機的酸與鹼生成藥學上適用的酸和鹼加成鹽，並且包括通常用於藥物化學中生理上適用的鹽。所述鹽也屬本
發明內容。用於生成所述鹽的典型無機酸有鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硝酸、硫酸、磷酸和連二磷酸等。可用的有機酸如脂肪單羧酸及二羧酸、苯基取代的鏈烷酸、羥基鏈烷酸和羥基鏈烷二酸、芳香酸、脂肪或芳香磺酸生成的鹽。因此，藥學上適用的鹽包括醋酸鹽，苯乙酸鹽，三氟醋酸鹽，丙烯酸鹽，抗壞血酸鹽，苯甲酸鹽，氯代苯甲酸鹽，二硝基苯甲酸鹽，羥基苯甲酸鹽，甲氧基苯甲酸鹽，甲基苯甲酸鹽，鄰-乙醯氧基苯甲酸鹽，萘-2-苯甲酸鹽，溴化物，異丁酸鹽，苯基丁酸鹽，β-羥基丁酸鹽，丁炔-1，4-二酸鹽，己炔-1，4-二酸鹽，癸酸鹽，辛酸鹽，氯化物，肉桂酸鹽，檸檬酸鹽，甲酸鹽，富馬酸鹽，乙醇酸鹽，庚酸鹽，馬尿酸鹽，乳酸鹽，蘋果酸鹽，馬來酸鹽，羥基馬來酸鹽，丙二酸鹽，扁桃酸鹽，甲磺酸鹽，煙酸鹽，異煙酸鹽，硝酸鹽，草酸鹽，鄰苯二甲酸鹽，teraphthalate，磷酸鹽，一氫磷酸鹽，二氫磷酸鹽，偏磷酸鹽，焦磷酸鹽，丙炔酸鹽，丙酸鹽，苯丙酸鹽，水揚酸鹽，癸二酸鹽，琥珀酸鹽，辛二酸鹽，硫酸鹽，硫酸氫鹽，焦硫酸鹽，亞硫酸鹽，亞硫酸氫鹽，磺酸鹽，苯磺酸鹽，對溴苯磺酸鹽，氯苯磺酸鹽，乙磺酸鹽，2-羥基乙磺酸鹽，甲磺酸鹽，萘-1-磺酸鹽，萘-2-磺酸鹽，對甲苯磺酸鹽，二甲苯磺酸鹽，酒石酸鹽等，優選的鹽為鹽酸鹽。藥學上適用的酸加成鹽通常可由式I化合物與等當量或稍過量酸反應製得。一般地將反應物置於互溶劑如乙醚或苯中反應。生成的鹽通常在約1小時到10天時間內從溶液中析出，通過過濾或其它方便的手段可將形成的鹽從溶劑中分離出來。用於形成鹽常用的鹼包括氫氧化銨、鹼金屬和鹼土金屬氫氧化物、碳酸鹽，及脂肪族伯胺，仲胺，叔胺和脂肪族二胺。鹼尤其用於製備加成鹽包括氫氧化銨、碳酸鉀、甲胺、二乙氨、1，2-乙二胺、環己胺。藥學上適用的鹽與它的原化合物相比一般增加其溶解性，因此，通常更適合配製液體製劑或乳劑。藥物製劑可通過本
技術領域：
已知的工藝製備。例如，將化合物與常用的賦形劑、稀釋劑或載體一起製成片劑、膠囊劑、混懸液劑、粉劑等。適用於所述製劑的賦形劑、稀釋劑和載體的實例如下填充劑和膨脹劑如澱粉、糖、甘露糖醇和矽衍生物；粘合劑如羧甲基纖維素和其它纖維素衍生物、藻酸鹽、明膠和聚乙烯吡咯烷酮；吸溼劑如甘油；崩解劑如碳酸鈣和碳酸氫鈉；防止溶出劑如石蠟；增加吸收劑如季銨類化合物；表面活性劑如十六烷醇、單硬脂酸甘油酯；吸附性載體如高嶺土和膨潤土；潤滑劑如滑石粉、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣和固態聚乙醇。可以將本發明化合物配製成便於口服給藥的酏劑或溶液劑，或配製成適合非腸道給藥的溶液劑型，如經肌內，皮下或靜脈途徑給藥。另外，也可將本發明化合物製成緩釋劑型等。還可將本發明化合物製成使有效成分只在或優先在腸道的某一特定部位於特定時間釋放的劑型。包衣包封和保護材料可由某些聚合物或石蠟製備。按照本發明，用來防治子宮內膜有絲分裂的式I化合物所需的具體劑量取決於病情的嚴重程度、給藥途徑及由主治醫生決定的有關因素。一般來講每日接受的有效劑量約為0.1～約1000mg/日，較典型的約為50～約200mg/日。每日給需要的受試者服藥一次到三次，或也可根據需要適當增加給藥次數，以便在一段時間內有效地治療和預防子宮內膜有絲分裂。通常優選地給予式I化合物酸加成鹽的形式，為此習慣上藥物分子中常帶有鹼基，如哌啶子基環。因此可使用下列口服給藥劑型。製劑在下述製劑中「活性成分」意指式I化合物。製劑I明膠膠囊劑按下列處方製備硬明膠膠囊劑成分量(mg/膠囊)活性成分0.1～1000澱粉(NF)0～650流動性澱粉0～650流動性為350釐司的矽氧烷0～15將以上成分混合，通過美國45號篩後裝填到硬明膠膠束裡。下面是關於雷洛昔芬膠囊劑的一些具體實例製劑2雷洛昔芬膠囊劑成分量(mg/膠囊)雷洛昔芬1澱粉(NF)112流動性澱粉225.3流動性為350釐司矽氧烷1.7製劑3雷洛昔芬膠囊劑成分量(mg/膠囊)雷洛昔芬5澱粉(NF)108流動性澱粉225.3流動性為350釐司矽氧烷1.7製劑4雷洛昔芬膠囊劑成分量(mg/膠囊)雷洛昔芬10澱粉(NF)103流動性澱粉225.3流動性為350釐司矽氧烷1.7製劑5雷洛昔芬膠囊劑成分量(mg/膠囊)雷洛昔芬50澱粉(NF)150流動性澱粉379流動性為350釐司矽氧烷3.0上述具體配方可以根據提出的理由進行改變。按下列成分製備片劑製劑6片劑成分量(mg/片)活性成分0.1～1000微晶纖維素0～650煙霧狀二氧化矽0～650硬脂酸0～15將上述成分混合後壓製成片。另外，活性成分分別為0.1～1000mg的片劑可如下製備製劑7片劑成分量(mg/片)活性成分0.1～1000澱粉45微晶纖維素35聚乙烯吡咯烷酮4(為10％水溶液)羧甲基纖維素鈉4.5硬脂酸鎂0.5滑石粉1活性成分、澱粉和纖維素過美國45號篩，然後充分混勻。混合後的藥粉與聚乙烯吡咯烷酮水溶液混合，過美國14號篩。制粒，並在50～60℃乾燥，然後過美國18篩。再將已過美國60號篩的羧甲基纖維素鈉、澱粉、硬脂酸鎂和滑石粉加入顆粒中，混合後在壓片機上壓片，得到片劑。5ml劑量中活性成分分別為0.1～1000mg懸浮液製備如下製劑8懸浮液成分量(mg/5ml)活性成分0.1～1000mg羧甲基纖維素鈉50mg糖漿1.25mg苯甲酸溶液0.1ml矯味劑適量色素適量純化水至5ml活性成分過45號篩後與羧甲基纖維素鈉、糖漿混合調成均勻糊狀物。然後將苯甲酸溶液、矯味劑和色素用水稀釋，在攪拌下加入糊狀物中。加足夠量純水到所需的體積。試驗試驗1共徵集251名健康、絕經後的婦女受試。每位受試者在開始本研究的試驗之前最後一次月經時間是在在開始試驗前6個月以上但小於6年的時間內。開始試驗之前每位受試者絕經的情況可通過血清中雌二醇＜120pmol/L和促卵泡成熟激素＞30IU/L的指標來確定。受試者試驗前至少3個月未使用過雌激素且從未使用過氟化物、降鈣素或二膦酸鹽治療、受試者的健康狀況良好，年齡在46到60歲之間。本試驗是多元、隨機、受控制的雙盲試驗。合格的受試者可允許隨機地分到四個試驗組的某一組中，四個組分別為安慰劑組、每日一次接受式I化合物200mg組、每日一次接受式I化合物600mg和每日一次接受雌激素0.625mg組。每組中所有受試者還每天一次口服碳酸鈣(520mg/日鈣元素)增補物。在8周治療期中所有藥物和增補物都在每天上午服。一旦上述試驗結束(Visit5)，每個受試者每天需吸甲孕酮(Provera)5mg，連服12天。通過使用一種Pipelle導管，處理前和處理8周後的子宮內膜。按常規方法進行活檢並且將取下的組織標本放進10％福馬林緩衝溶液中浸泡。標本用組織濾紙過濾器分離，重新得到的標本進行大體檢查後按其外觀(顏色、特徵和粘度)和體積分類。使用標準形態學方法將標本加工成石蠟塊，將活檢組織逐次地切到兩個微米小的載玻片上去形成6～20個切面的一系列的條帶。由於臨床上子宮內膜顯著異常的受試者不在本研究範圍內，或後來假如發展異常也將終止本試驗研究，因此，通過活檢可對所述的診斷結果直接做出評價。這種工作可由兩名病理學家中之一完成且化驗結果可很快報告給臨床醫生。活檢的主要目的是測定雌激素對形態學影響的程度。通過觀察一系列本試驗研究之外得到的表示子宮內膜形態學充分圖譜的pipelle活檢，可以訓練兩名病理學家識別活檢。應用與雌激素誘導的增生相關的標準形態學判斷標準，設計分級分類法以便定量雌激素的作用包括可能遇到的更細微的變化。然後由每位病理學家用這種記分分類法對其中10名病例記分，為了確保對理解和使用判斷標準的一致性，將這些病例一起檢察。來自本研究原始活檢的前20名病例由每位病理學家用盲法記分後，檢查該記分，以便核實記分分類法特有的用途。病理學家可由以下幾個方面評價活檢樣本1)樣本充足性，2)腺體形態學，3)基質形態學，4)其它方面變化。其它觀察結果作為正文注釋進行記錄。根據腺體和基質的形態學特徵進行分級計算總分，並且按4級生雌激素作用分級，這裡0級表示典型的絕經後的子宮內膜，2級代表顯著的雌激素作用。將兩名病理學家總記分平均後制定出0～3個等級。最初直接診斷後分級，而且通常選10到20個病例順序地分級。可以預料，因為典型的絕經後的子宮內膜組織是不活潑的，而且由表淺(5mm或更少)組織內膜組成pipelle活檢方法是有限的、盲目活檢方法，所以，在最初活檢中缺乏性組織的比率較高。由於子宮內膜腺體活檢要求具有腺體和基質形態學的分級特徵，所以每位受試者得出任何結論之前，最終的活檢一定含有腺體。樣本的充足性定義如下如果子宮內膜源組織不存在或有爭議的，則該樣本認為是不充足並且不在評價範圍內。如果所獲得的子宮內膜表皮細胞是多分段的，則該樣本不能分級但活檢樣本被認為充足，並按4分級法定為0級，表示無雌激素作用。如果得到帶有腺體的破裂子宮內膜，那麼該活檢是充足的並且可按腺體和基質特徵記分。如果獲得完整的子宮內膜組織，那麼該活檢充足，並且可按腺體和基質的變化分級。另外，組織的體積被認為是具有雌激素作用的指標。腺體的形態學對充足活檢樣本是一主要的分級因素。基質形態學對充足的活檢樣本是第二位分級因素。表1和表2列出了含腺體和/或基質並用來分級的每一樣本的特徵。用4個特徵將腺體分級形狀，相對於胞漿截面積的細胞核，細胞核假分層和有絲分裂的活性。表1，腺體特徵生雌激素作用的分級雌激素作用/分級值腺體特徵無生雌激素作用有限生雌激素作用強的生雌激素作用(0)(1)(2)形狀小直管狀開口直形開口環狀彎曲形核與胞漿非常高適當低比率(＞75％)(50～75％)(＜50％)核假分層無有限的散布有絲分裂無少分裂很多注至少20個腺體切面用於有絲分裂作用的分級(四種系列狹小樣本切片)在較多狹小樣本中，斷定不存在有絲分裂之前，觀察最少20個腺體外形的系列切片。表2列出了基質和「其它」特徵。用於基質分類的4個特徵為密度、有絲分裂、上皮細胞中組織變形改變及組織的體積。表2.基質特徵生雌激素作用的分級雌激素作用/分級值基質特徵無生雌激素作用有限有雌激素作用強的生雌激素作用(0)(1)(2)密度密集的纖維疏鬆的細胞水腫有絲分裂無很少少/多組織變形a無很少分裂彌散組織體積b碎片或極少中等，多數大量未受觸動的未受觸動的未受觸動的a組織變形包括管狀、嗜曙紅細胞和鱗狀類型。b只是在腺體顯示出某些雌激素作用(1或2級)時才應用。代表缺少雌激素作用的形態學特徵的分級為零，代表有限的或顯著的生雌激素作用的分級分別為1或2。用這種方法，活檢能夠獲得0～16的記分。除腺體和基質的形態學之外，所描述的其它重要的形態學特徵包括促孕作用、炎症過程、損壞性出血、息肉狀的生長或其它病理發現，但不包括增生作用的記分，因為其它變化基本上是非增生的。從腺體和基質形態特徵的分級得到的記分總和產生4級生雌激素作用的等級，每一樣本的記分等級如下0級＝0～3，典型的具有少量的或無生雌激素作用的絕經後子宮內膜。1級＝4～6，明確但有限的雌激素作用。2級＝7～10，有中等生雌激素作用。3級＝＞10，顯著的生雌激素作用。如前所述，如果活檢標本中含子宮內膜表皮細胞的多重分段，那麼，這樣的標本定為0級。每一活檢有8個評分4種腺體形態學的評價，2種基質形態學評價(為進行統計學分析，將密度和有絲分裂的記分合併，將組織變形和組織體積的記分合併)，這6個評分的總和與分級按上述方法確定。為評價兩位評分人之間關於在未治療前和治療8周得到的記分總和的一致性，計算組內相關係數〔Fleiss，TL關於比率和比例的統計學方法(1981)紐約JohnWiley和Sons.218頁Fleiss，JL(1981)StatisticalMethodsforRatesandproportion，NewYorkJohnWileyandSons，P.218〕使用供研究者校正用的Cochran-Mantel-Haenazel統計學方法，分析給藥前和治療8周以及從給藥前到治療8周的每種分級的記分變化，對治療差異進行統計分析〔Landis，RJHeyman，ERandKoch，GG「關於三維列聯表的平均偏差一個選擇性試驗的綜述和評價」.國際統計評論(1978)，46237-254Landis，RJHeyman，ERandKoch，GG(1978)，」「AveragepartialAssociationinThree-waycontingencyTablesAReviewandDiscussionofAlternativeTests」.InternationalStatistscalReview46237-245〕。用X2檢驗評價治療前和治療8周的活檢組織中子宮內膜腺體存在的差異性。如果總的治療差異性統計學上是顯著的，那麼在有效的治療組與安慰劑組之間可進行配對治療比較。以雙側0.05的顯著水平判斷統計學上的顯著性。所有統計學分析使用SAS程序〔愛達荷核公司SAS研究所，統計分析程序/統計分析使用指南(1989)第六版本，第四版1和2卷，數字控制核心愛達荷公司SAS研究所出版-SASInstituteInc，(1989)，SAS/STATUser′sGuide，Version6，FourthEdition，Volumes1and2，Cary，NCSASInstituteInc〕。本試驗中的陽性結果是指腺體有絲分裂的記分減少，它表明相對於安慰劑組的細胞複製減少。表3說明本研究的重要結果。表3，關於腺體特徵最終結果的平均(±平均數標準誤)評分*，與安慰劑組有統計學顯著性差異，雙尾檢驗(P＜0.050)f，與安慰劑組在一定程度上有一定的差異，雙尾檢驗(P＝0.053)權利要求1.防治子宮內膜有絲分裂的方法，該法包括給需要的人服用有效劑量的式I化合物或其藥學上適用的鹽的溶劑化物，其中R1和R3獨立地是氫、或這裡Ar是任選取代的苯基；R2系選自四氫化吡咯、六亞甲基亞氨基及哌啶子基。2.權利要求1所述的方法，所述的化合物為其鹽酸鹽。3.權利要求1所述方法，其中給藥是預防性的。4.權利要求1所述的方法，其所述的化合物為下式化合物或其鹽酸鹽。全文摘要一種防治子宮內膜有絲分裂的方法，該方法包括給需要治療的患者施用所需有效劑量的式I化合物或其藥學上適用鹽的溶劑化物，其中，R文檔編號A61K31/38GK1158086SQ9519517公開日1997年8月27日申請日期1995年9月20日優先權日1994年9月22日發明者S·M·波斯申請人:伊萊利利公司