含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物及其製備方法

2023-06-02 08:39:21 2

專利名稱：含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物及其製備方法
技術領域：
本發明的示範性實施方案涉及含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物及其製備 方法。
背景技術：
為了實施藥物的靜脈給藥，已經研究了使用生物可降解聚合物的亞微米顆粒藥物 遞送體系(submicronic particulate drug delivery systems) 近來，己經 艮道了使用 生物可降解聚合物的納米粒子體系和聚合膠束(polymeric micelle)體系是有用的技術體 系，其可以改變藥物的體內分布以降低不良副作用，並可以提供改善的功效。此外，因為這 樣的體系使靶向藥物遞送成為可能，它們可以實現對靶器官、靶組織或靶細胞的藥物控制 釋放。事實上，已知這樣的體系具有優異的與體液的相容性，並改善難溶藥物的溶解能力和 藥物的生物利用度。近來，已報導了通過將藥物化學鍵合到包含親水鏈段與疏水鏈段的嵌段共聚物上 來製備嵌段共聚物膠束的方法。該嵌段共聚物是由親水鏈段(A)和疏水鏈段(B)聚合而得 到的A-B型二嵌段共聚物。在上述嵌段共聚物中，使用聚氧化乙烯作為親水鏈段(A)，並使 用聚胺基酸或疏水基團鍵合的聚胺基酸作為疏水鏈段(B)。諸如阿黴素或吲哚美辛的藥物 可以被物理包封(encapsulated)在由所述嵌段共聚物形成的聚合膠束的核內，所以該嵌 段共聚物膠束可用作藥物遞送體系。然而，由該嵌段共聚物形成的聚合膠束在體內應用的 情況下引起許多問題，這是因為其不能在體內水解，而只能被酶降解，具有不良的生物相容 性，並且引起免疫反應等等。因此，已做了很多嘗試以開發具有改善的生物可降解性和生物相容性的核_殼型 藥物遞送體系。例如，本領域技術人員已知包含聚亞烷基二醇作為親水聚合物和聚乳酸作為疏水 聚合物的二嵌段或多嵌段共聚物。更具體地，將丙烯酸衍生物與這樣的二嵌段或多嵌段共 聚物的端基鍵合以形成共聚物。使所得共聚物交聯以穩定該聚合膠束。然而，製備這樣的 二嵌段或多嵌段共聚物的方法難以將交聯劑引入聚合物的A-B或A-B-A型二嵌段或三嵌段 共聚物的疏水鏈段，以通過交聯形成穩定結構。此外，因為在上述方法中使用的交聯劑迄今 為止尚未應用於人體，該交聯劑可能無法確保在人體內的安全性。進一步地，該交聯聚合物 不能在體內降解，因此不能應用於體內用途。作為另一個例子，已知所謂的溶劑蒸發工藝作為製備聚合物膠束組合物的方法。 溶劑蒸發工藝可以作為大規模工藝應用，通過該工藝可以將難溶於水的紫杉烷衍生物包封 在兩親嵌段共聚物膠束內。然而，溶劑蒸發工藝的應用在溶劑選擇方面受到限制，因為該溶 劑應該是紫杉烷和聚合物均可溶於其中的有機溶劑，並且應該具有足夠低的沸點以至於其 可以通過蒸發而揮發。此外，該有機溶劑應該是藥學上可接受的溶劑，其殘留對人體不具有 不良作用。進一步地，溶劑蒸發工藝基本包括使試劑長時間暴露於高溫下的步驟，因此其可 能引起諸如藥學活性成分的降解或藥理效果的降低的問題。

發明內容
技術問題因此，為了解決與相關領域有關的上述問題，提供了具有改善的穩定性的含紫杉 烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物。還提供了通過簡化步驟在短時間內製備含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物 的方法。技術方案一方面，提供了含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物，其包含紫杉烷、含有親水 嵌段和疏水嵌段的兩親嵌段共聚物，和重量摩爾滲透壓濃度調節劑。另一方面，提供了製備含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物的方法，其包括 (a)將紫杉烷和兩親嵌段共聚物溶解在有機溶劑中；以及(b)向其中加入含有重量摩爾滲 透壓濃度調節劑的水溶液以形成聚合膠束。有益效果根據本文公開的一實施方案，含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物具有優異的 穩定性，所以其能夠防止藥物的快速釋放。此外，根據本文公開的另一實施方案，該組合物 的製備方法不需要除去有機溶劑的單獨步驟，由此使期望的藥理效果達到最佳，並減少制 備步驟數和製備時間。附圖簡述現在參考在以下給出的含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物及其製備方法的 某些示範性實施方案給出詳細描述，這些示範性實施方案僅僅通過例證方式給出因而並非 限制性的，並由


，其中圖1是製備例1中得到的二嵌段共聚物[mPEG-PLA]的1H NMR譜；並且圖2是製備例2中得到的二嵌段共聚物[mPEG-PLGA]的1H NMR譜。發明實施方式以下對各種實施方案做出詳細說明，在附圖中例證並在下文中描述其實施例。盡 管結合示範性實施方案對本發明進行描述，但應當理解本說明書並非意圖為限制性的。根據本文公開的一實施方案，含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物可以包含紫 杉烷、含有親水嵌段和疏水嵌段的兩親嵌段共聚物，以及重量摩爾滲透壓濃度調節劑。該含 紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物具有優異的生物可降解性和生物相容性，並且提供具 有相對改善的穩定性的聚合膠束結構。在根據本文公開的一實施方案的組合物中，以該膠束組合物的總乾重為基礎，紫 杉烷的含量可以是0. l_30wt%，並且含有親水嵌段和疏水嵌段的兩親嵌段共聚物的含量可 以是20-98wt%。此外，重量摩爾滲透壓濃度調節劑的含量可以是基於該組合物總乾重的 0. l-50wt%。紫杉烷可以是無水或水合狀態、或者無定形或結晶狀態。此外，紫杉烷可以是從天 然植物中提取的，或者可以是通過半合成或植物細胞培養得到的。在一實施方案中，紫杉烷 在該組合物中的含量可以是基於該組合物總乾重的0. l-30wt%，特別是0. 5-15wt%，更特 別是 l-7wt%。
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在一實施方案中，紫杉烷包括紫杉醇、多西紫杉醇、7-表紫杉醇、t-乙醯基紫杉醇 (t-acetyl paclitaxel) UO-脫乙醯基紫杉醇、10-脫乙醯基_7_表紫杉醇、7_木糖基紫杉 醇(7-xylosylpaclitaxel)、10_ 脫乙醯基 ~7~ 戊二醯紫杉醇(lO-desacetyl-7-glutarylp aclitaxel)、7_N，N- 二甲基甘氨醯紫杉醇(7_N，N-dimethylglycylpaclitaxel)、7_L_ 丙氨 醯紫杉醇(7-L-alanylpaclitaxel)或其混合物。具體地，可以使用紫杉醇或多西紫杉醇。在一實施方案中，該兩親嵌段共聚物可以包含以A-B、A-B-A或B_A_B結構的形式 相互連接的親水嵌段(A)和疏水嵌段(B)。此外，該兩親嵌段共聚物可以在其水溶液狀態下 形成核_殼型聚合膠束，其中所述疏水嵌段形成核而所述親水嵌段形成殼。在一實施方案中，該兩親嵌段共聚物的親水嵌段(A)可以是聚乙二醇(PEG)或單 甲氧基聚乙二醇(mPEG)。具體地，其可以是mPEG。該親水嵌段(A)的重均分子量可以為 500-20, 000道爾頓，特別是1，000-5, 000道爾頓，更特別是1，000-2, 500道爾頓。該兩親嵌段共聚物的疏水嵌段(B)可以是非水溶性的生物可降解聚合物。在一實 施方案中，疏水嵌段(B)可以是聚乳酸(PLA)或聚乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA)。在另一實 施方案中，該疏水嵌段(B)的重均分子量可以為500-20，000道爾頓，特別是1，000-5, 000 道爾頓，更特別地是1，000-2，500道爾頓。可以用脂肪酸基團保護該疏水嵌段(B)的端羥 基，所述脂肪酸基團的具體實例包括乙酸酯基、丙酸酯基、丁酸酯基、硬脂酸酯基、棕櫚酸酯 基等等。包含親水嵌段(A)和疏水嵌段(B)的兩親嵌段共聚物在該組合物中的含量可以是 基於該組合物的總乾重的20-98wt%，特別是65-98wt%，更特別是80_98wt%。在另一實施方案中，親水嵌段(A)和疏水嵌段(B)可以以這樣的比例存在於兩親 嵌段共聚物中使得該共聚物包含基於共聚物重量的40-70wt%，特別是50-60wt%的親水 嵌段(A)。當親水嵌段(A)的比例低於40%時，該聚合物具有不希望的低水溶性，導致難以 形成膠束。另一方面，當親水嵌段(A)的比例高於70%時，該聚合物變得過於親水以至於不 能形成穩定的聚合膠束，因此該組合物可能無法用作溶解紫杉烷的組合物。重量摩爾滲透壓濃度調節劑的作用是改善含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合 物的穩定性。具體地，重量摩爾滲透壓濃度調節劑顯著地改善該組合物在其水溶液狀態下 的穩定性。重量摩爾滲透壓濃度調節劑的一種可能的作用機理如下。藥物在聚合膠束結構中的包封程度與由聚合物的疏水嵌段在水溶液中形成的核 的部分成比例。此外，聚合膠束的穩定性取決於該聚合膠束在水溶液中形成的動態平衡狀 態，即取決於聚合膠束狀態和溶解在水中的單聚體(unimer)狀態之間的平衡常數。儘管可以將大量的難溶藥物包封在聚合膠束結構內，但在包封藥物時，該聚合物 膠束的親水嵌段可能被大量的水分子包圍，因此水分子與親水嵌段之間的相互作用可能弱 化膠束的疏水嵌段之間的疏水作用，由此破壞膠束在動態平衡狀態下的穩定。添加重量摩 爾滲透壓濃度調節劑引起重量摩爾滲透壓濃度調節劑與水之間的靜電吸引力，導致水分子 從該聚合膠束的親水嵌段脫離。因此，疏水嵌段之間的疏水作用(否則疏水嵌段會參與松 散的相互作用)相對增強，以致於可以形成穩定的膠束結構。此外，根據本文公開的一實施 方案，在組合物的製備期間不除去重量摩爾滲透壓濃度調節劑，而將其保留在最終組合物 中。通過由重量摩爾滲透壓濃度調節劑實現的穩定效果，該含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠 束組合物具有優異的穩定性。該重量摩爾滲透壓濃度調節劑是藥學上可接受的，並且可以選自任何重量摩爾滲透壓濃度調節劑，只要其與血液接觸時不引起溶血。在一實施方案中，該重量摩爾滲透壓濃 度調節劑可以是電解質，特別是無機鹽。優選地，該重量摩爾滲透壓濃度調節劑可以是選 自氯化鈉、氯化鈣、硫酸鈉和氯化鎂的至少一種。更具體地，該重量摩爾滲透壓濃度調節劑 可以是氯化鈉或氯化鈣。特別地，該重量摩爾滲透壓濃度調節劑可以是氯化鈉。在另一實 施方案中，該重量摩爾滲透壓濃度調節劑在該組合物中的含量可以是基於組合物總乾重的 0. l_50wt%，特別是 0. 5-20wt%，更特別是 I-IOwt %。另一方面，提供了包含該含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物的凍幹組合物。該凍幹組合物可以進一步包含凍幹助劑。在一實施方案中，該凍幹助劑可以是選 自乳糖、甘露醇、山梨醇和蔗糖的至少一種。加入凍幹助劑用於使凍幹組合物維持餅狀。 此外，凍幹助劑用於在凍幹組合物復原期間，協助兩親嵌段共聚物膠束組合物在短時間內 均勻地形成。在另一實施方案中，凍幹助劑的用量可以是基於該凍幹組合物的總乾重的 l-90wt%，更特別是 10-60wt%。在一實施方案中，當凍幹組合物在水溶液中復原時，其可以包含基於該組合物總 乾重的0. l_15wt%的紫杉烷。此外，在復原時，兩親嵌段共聚物可以以10-150mg/mL的濃度 存在，重量摩爾滲透壓濃度調節劑可以以5-30mg/mL(特別是10-20mg/mL)的濃度存在，而 凍幹助劑可以以1-lOOmg/mL的濃度存在。在另一實施方案中，凍幹組合物在水溶液中的可 控膠束粒度可以在l-400nm，更特別在5-200nm的範圍內，這取決於該共聚物的分子量。在一實施方案中，可以將含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物配製成水溶液、 散劑或片劑的形式。在另一實施方案中，該組合物可以是注射劑。例如，可以用注射用蒸餾 水、0. 9%生理鹽水、5%葡萄糖水溶液等復原該組合物。當復原該組合物時，至少95%的紫 杉烷穩定12小時或12小時以上而不沉澱。另一方面，提供了製備含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物的方法。根據本文公開的一實施方案，製備該含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物的方 法可以包括(a)將紫杉烷和兩親嵌段共聚物溶解於有機溶劑中；並且(b)向其中加入含有重量摩爾滲透壓濃度調節劑的水溶液以形成聚合膠束。在另一實施方案中，該方法可以在步驟(b)之後進一步包括(c)向聚合膠束中加入凍幹助劑；並且(d)實施凍幹。當通過使用有機溶劑經溶劑蒸發工藝用膠束組合物包封紫杉烷時，在組合物在注 射用水中復原並保持在室溫下之後，在含紫杉烷的膠束組合物中可能發生快速藥物沉澱。 這是因為在溶劑蒸發工藝中使用的有機溶劑殘留在組合物中。因此，根據本文公開方法的一實施方案，通過使用重量摩爾滲透壓濃度調節劑和 最低量的有機溶劑可以防止藥物沉澱。為了將仍殘留在最終組合物中的有機溶劑的量降至 最低，需要將組合物在60°C或60°C以上的高溫下減壓乾燥至少12小時。但是，這樣的減壓 高溫乾燥條件可能引起藥物的降解。因此，根據本文公開的一實施方案，製備含紫杉烷的兩 親嵌段共聚物膠束組合物的方法使用最低量的有機溶劑，使得最終組合物可以直接進行凍 幹，而不需要除去有機溶劑的單獨步驟。根據本文公開的一實施方案，包含重量摩爾滲透壓濃度調節劑並使用最低量的有
7機溶劑的含紫杉烷兩親嵌段共聚物膠束組合物可以提供凍幹組合物，當將該凍幹組合物復 原成注射劑時，在12小時或12小時以上不發生紫杉烷的沉澱。在一實施方案中，步驟(a)的有機溶劑可以包含選自丙酮、乙醇、甲醇、乙酸乙酯、 乙腈、二氯甲烷、氯仿、乙酸和二氧雜環己烷的至少一種。該有機溶劑的用量可以為基於所 得膠束組合物重量的0. 5-30wt%，特別是0. 5-15wt%，更特別是I-IOwt%。當有機溶劑的 用量低於0.5wt%時，可能難以溶解藥物。另一方面，當有機溶劑的用量高於30wt%時，在 凍幹組合物復原時可能發生藥物沉澱。在步驟(b)中，可以將含有重量摩爾滲透壓濃度調節劑的水溶液的重量摩爾滲透 壓濃度調節為 30-15，000m0sm/kg,特別為 100-5，000m0sm/kg,更特別為 200-2，500m0sm/ kg。當該水溶液的重量摩爾滲透壓濃度低於30m0sm/kg時，在組合物的製備期間可能發生 藥物沉澱。另一方面，當該水溶液的重量摩爾滲透壓濃度高於15，000m0sm/kg時，該聚合物 中可能發生相分離。在一示範性實施方案中，該重量摩爾滲透壓濃度調節劑可以是選自氯 化鈉、氯化鈣、硫酸鈉和氯化鎂的至少一種。此外，該重量摩爾滲透壓濃度調節劑的用量可 以是基於膠束組合物總乾重的0. l-50wt%。步驟(b)可以在25°C或25°C以下的溫度下實 施。在一實施方案中，製備含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物的方法可以進一步 包括在實施凍幹的步驟(d)之前，使用滅菌過濾器對步驟(C)中得到的聚合膠束水溶液進 行滅菌。根據本文公開的一實施方案，含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物可以以水溶 液形式或散劑形式口服給藥或腸胃外給藥。腸胃外給藥包括通過血管內、肌內、皮下、腹膜 內、鼻、直腸、眼、肺或其它途徑給藥。口服給藥包括以片劑或膠囊劑，或水溶液本身的形式 給藥。此外，根據本文公開的一實施方案，凍幹組合物幾乎不引起多西紫杉醇在復原後 的組合物中的濃度隨時間的變化。然而，當不添加重量摩爾滲透壓濃度調節劑時，多西紫杉 醇的濃度在一小時後下降。下列實施例並非意圖為限制性的。製備例1 單甲氧基聚乙二醇-聚丙交酯(mPEG-PLA)嵌段共聚物(A_B型)的合 成首先，將5. Og的單甲氧基聚乙二醇(數均分子量2，000道爾頓)引入IOOmL的 二頸圓底燒瓶中，並且在減壓(ImmHg)和130°C下加熱3-4小時以從中除去水。接下來， 用氮氣吹掃該燒瓶，並使用注射器向其中加入基於D-丙交酯和L-丙交酯重量的0. Iwt% (10. 13mg,25mmol)的辛酸亞錫(Sn (Oct) 2)作為反應催化劑。將反應混合物攪拌30分鐘， 然後使其在130°C下減壓(ImmHg) 1小時以除去溶解該催化劑的溶劑(甲苯)。然後，向其 中加入10. 13g的純化丙交酯，並且在130°C下將所得混合物加熱18小時。在加熱後，將所 得聚合物溶解在二氯甲烷中，並將其加入乙醚中以引起聚合物的沉澱。將所得的聚合物在 真空爐中乾燥48小時。該共聚物單甲氧基聚乙二醇-聚丙交酯(mPEG-PLA)的數均分子量為2，000-1, 765 道爾頓。通過1H-NMR實施的該共聚物的分析揭示該共聚物是A-B型二嵌段共聚物(見圖 1)。
制各例2 單甲氧,某聚乙二醇-聚乳酸-乙醇酸共聚物(mPEG-PLGA)嵌段共聚物 (A-B型)的合成以與製備例1中相同的方式，通過在作為催化劑的辛酸亞錫的存在下，使單甲氧 基聚乙二醇(數均分子量5，000道爾頓)、丙交酯和乙交酯在120°C下反應12小時而得到 嵌段共聚物。該嵌段共聚物單甲氧基聚乙二醇-聚乳酸-乙醇酸共聚物(mPEG-PLGA)的數均分 子量為5，000-4，000道爾頓，並且是A-B型共聚物。通過1H-NMR實施的該共聚物的分析揭 示該共聚物是A-B型二嵌段共聚物(見圖2)。實施仿ι 丨 ι -.^umm^mm^ mPEG-PLA ^^mmmw^mm^首先，在60°C下將760mg的製備例1中得到的兩親嵌段共聚物mPEG-PLA(數均分 子量2，000-1, 765道爾頓)完全溶解在0. 2mL的乙醇中以提供包含該共聚物的澄清的乙 醇溶液。將該乙醇溶液冷卻至25°C，並向其中加入20mg的多西紫杉醇，並攪拌所得溶液直 至多西紫杉醇完全溶解。接下來，在分別的容器中準備各自含有0. 9wt %和1. Swt %的氯化鈉並具有 300m0sm/kg和600m0sm/kg的重量摩爾滲透壓濃度的水溶液。通過使用市售滲透計 (Gonotech GmbH, 0SM0MAT030)測量該重量摩爾滲透壓濃度。將4mL的每一水溶液加入該 包含共聚物的乙醇溶液中，並將所得混合物在40°C下攪拌10分鐘以形成聚合膠束水溶液。然後，將IOOmg的D-甘露醇溶解在每一溶液中，通過孔徑為200nm的過濾器過濾 所得的溶液以除去未溶解的多西紫杉醇，然後凍幹。使凍幹的組合物經歷以下的液相色譜以測定多西紫杉醇的含量。此外，通過動態 光散射(DLS)法測量粒度。結果顯示在下表1中。表1
液相餼譜1)色譜柱長度為250mm且內徑為4. 6mm的不鏽鋼柱，用粒徑為5μπι且孔徑為 300人的包覆有五氟苯基(pentafluorophenyΙ-coated)的顆粒填充。2)流動相乙腈甲醇水=26 32 420
3)流速1· 5mL/min4)載樣量20 μ L5)檢測器:UV吸收分光光度計(測量波長232nm)^mm 2. ^m^mmmmm HIPEG-PLA mm^mmmm^mm^r首先，在60°C下將IOOmg的製備例1中得到的兩親嵌段共聚物mPEG_PLA(數均分 子量2，000-1, 765道爾頓)完全溶解在0. ImL的乙醇中以提供包含該共聚物的澄清的乙 醇溶液。將該乙醇溶液冷卻至25°C，並向其中加入20mg的紫杉醇，並攪拌所得溶液直至紫 杉醇完全溶解。接下來，在分別的容器中準備各自含有0. 9wt %和1. Swt %的氯化鈣並具有 230m0sm/kg和460m0sm/kg的重量摩爾滲透壓濃度的水溶液。將4mL的每一水溶液加入該 包含共聚物的乙醇溶液中，並將所得混合物在40°C下攪拌10分鐘以形成聚合膠束水溶液。然後，將39mg的D-甘露醇溶解在每一溶液中，然後通過孔徑為200nm的過濾器過 濾所得的溶液以除去未溶解的紫杉醇，然後凍幹。使凍幹的組合物經歷如實施例1所述的液相色譜以測定紫杉醇的含量。此外，通 過DLS法測量粒度。結果顯示在下表2中。[表 2]
￥施例3 含有氯北#1和多西紫杉醇的mPEG-PLGA嵌段共勿膠束會目合物的制各首先，在50°C下將760mg的製備例2中得到的兩親嵌段共聚物mPEG-PLGA(數均分 子量5，000-4, 000道爾頓)完全溶解在0. 2mL的丙酮中以提供包含該共聚物的澄清的丙 酮溶液。將該丙酮溶液冷卻至25°C，並向其中加入40mg的多西紫杉醇，並攪拌所得溶液直
至多西紫杉醇完全溶解。接下來，將8mL的含有0. 9wt%的氯化鈉並具有300m0sm/kg的重量摩爾滲透壓濃 度的水溶液加入該包含共聚物並進一步包含藥物的丙酮溶液中，並將所得混合物在25°C下 攪拌20分鐘以形成均勻溶液。一旦形成了均勻溶液，就將200mg的D-甘露醇溶解在該溶 液中以提供澄清的聚合膠束水溶液。最後，通過孔徑為200nm的過濾器過濾該聚合膠束水 溶液以除去未溶解的多西紫杉醇，然後凍幹。使凍幹的組合物經歷如實施例1所描述的液相色譜以測定多西紫杉醇的含量。此 外，通過DLS法測量粒度。多西紫杉醇含量101. 3wt%。粒度35nm。t施徹丨4 含有氯北I丐和紫杉醇的mPEG-PLGA嵌段共勿膠束會目合物的制各首先，在50°C下將IOOmg的製備例2中得到的兩親嵌段共聚物mPEG_PLGA(數均分 子量5，000-4, 000道爾頓)完全溶解在0. 2mL的丙酮中以提供包含該共聚物的澄清的丙 酮溶液。將該丙酮溶液冷卻至25°C，並向其中加入40mg的紫杉醇，並攪拌所得溶液直至紫 杉醇完全溶解。接下來，將8mL的含有0. 9wt%的氯化鈣並具有230m0sm/kg的重量摩爾滲透壓濃 度的水溶液加入該包含共聚物並進一步包含藥物的丙酮溶液中，並將所得混合物在25°C下 攪拌20分鐘以形成均勻溶液。一旦形成了均勻溶液，就將53mg的D-甘露醇溶解在該溶液 中以提供澄清的聚合膠束水溶液。最後，通過孔徑為200nm的過濾器過濾該聚合膠束水溶 液以除去未溶解的紫杉醇，然後凍幹。使凍幹的組合物經歷高效液相色譜(HPLC)以測定多西紫杉醇的含量。此外，通過 DLS法測量粒度。多西紫杉醇含量101. Iwt %。粒度35nm。比較例1 不含無機鹽的mPEG-PLA嵌段共聚物膠束組合物的製備首先，在60°C下將760mg的製備例1中得到的兩親嵌段共聚物mPEG-PLA(數均分 子量2，000-1, 765道爾頓)完全溶解在0. 2mL的乙醇中以提供包含該共聚物的澄清的乙 醇溶液。將該乙醇溶液冷卻至25°C，並向其中加入20mg的多西紫杉醇，並攪拌所得溶液直 至多西紫杉醇完全溶解。接下來，將4mL的注射用蒸餾水(重量摩爾滲透壓濃度0m0sm/kg)加入包含該共 聚物的乙醇溶液中，並將所得混合物在40°C下攪拌10分鐘以形成均勻溶液。一旦形成了均 勻溶液，就將IOOmg的D-甘露醇溶解在該溶液中以提供澄清的聚合膠束水溶液。最後，通 過孔徑為200nm的過濾器過濾該聚合膠束水溶液以除去未溶解的多西紫杉醇，然後凍幹。使凍幹的組合物經歷HPLC以測定多西紫杉醇的含量。此外，通過DLS法測量粒度。多西紫杉醇含量100. 3wt%。粒度l8nm。實驗例1 穩定性試驗在水溶液在37°C下的穩定性方面，將實施例1的包含氯化鈉的聚合膠束組合物與 比較例1的不含無機鹽的聚合膠束組合物相比較。
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用注射用蒸餾水將實施例1和比較例1的凍幹組合物各自稀釋至多西紫杉醇濃度 為lmg/mL。將每一稀釋溶液保持在37°C下，隨時間測量每一膠束結構中所包含的多西紫杉 醇的濃度。結果顯示在下表3中。表3
從表3中的結果可以看出，實施例1的組合物即使在12小時後也不引起多西紫杉 醇的沉澱，而比較例1的組合物在12小時後顯示59%的多西紫杉醇沉澱量。從以上結果可 以看出，加入氯化鈉可以將膠束組合物的多西紫杉醇保持率提高約至少2倍。此外，還可以 看出較高的無機鹽與兩親嵌段共聚物的量的比例提供具有較高穩定性的膠束組合物。參考示範性實施例給出詳細的描述。儘管如此，本領域技術人員應理解，可以在不 背離該含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物及其製備方法的原則和精神的情況下對這 些實施方案做出變化，該含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物及其製備方法的範圍由所 附權利要求及其等效物所限定。
1權利要求
含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物，其包含紫杉烷、含有親水嵌段(A)和疏水嵌段(B)的兩親嵌段共聚物，以及重量摩爾滲透壓濃度調節劑。
2.如權利要求1所述的組合物，其中所述含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物包含 基於所述組合物總乾重的0. l_30wt%的紫杉烷、20-98襯％的含有親水嵌段和疏水嵌段的 兩親嵌段共聚物，以及0. l_50wt%的重量摩爾滲透壓濃度調節劑。
3.如權利要求1所述的組合物，其中所述含有親水嵌段(A)和疏水嵌段(B)的兩親嵌 段共聚物是A-B、A-B-A或B-A-B型嵌段共聚物。
4.如權利要求1所述的組合物，其中所述紫杉烷是紫杉醇、多西紫杉醇、7-表紫杉 醇、t-乙醯基紫杉醇、10-脫乙醯基紫杉醇、10-脫乙醯基-7-表紫杉醇、7-木糖基紫杉醇、 10"脫乙醯基-7-戊二醯紫杉醇、7-N，N- 二甲基甘氨醯紫杉醇、7-L-丙氨醯紫杉醇，或者其 混合物。
5.如權利要求1所述的組合物，其中所述親水嵌段(A)具有500-20，000道爾頓的重均 分子量，並且所述疏水嵌段(B)具有500-20，000道爾頓的重均分子量。
6.如權利要求1所述的組合物，其中所述親水嵌段(A)是聚乙二醇或單甲氧基聚乙二 醇，並且所述疏水嵌段(B)是聚乳酸(PLA)或聚乳酸和乙醇酸的共聚物(PLGA)。
7.如權利要求1所述的組合物，其中所述重量摩爾滲透壓濃度調節劑是無機鹽。
8.如權利要求7所述的組合物，其中所述無機鹽是選自氯化鈉、氯化鈣、硫酸鈉和氯化 鎂的一種或多種。
9.如權利要求1所述的組合物，其中所述兩親嵌段共聚物膠束組合物是進一步包含凍 幹助劑的凍幹組合物。
10.如權利要求9所述的組合物，其中所述凍幹組合物的特徵在於當用注射用蒸餾 水、0. 9%生理鹽水和5%葡萄糖水溶液復原所述組合物時，至少95%的紫杉烷穩定12小時 而不沉澱。
11.如權利要求9所述的組合物，其中所述凍幹助劑的用量是基於所述凍幹組合物的 總乾重的l_90wt%。
12.如權利要求9所述的組合物，其中所述凍幹助劑是選自乳糖、甘露醇、山梨醇和蔗 糖的一種或多種。
13.製備含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物的方法，其包括將紫杉烷和兩親嵌段共聚物溶解在有機溶劑中以提供聚合物溶液；並且向所述聚合物溶液中加入包含重量摩爾滲透壓濃度調節劑的水溶液以形成聚合膠束。
14.如權利要求13所述的方法，其在向所述聚合物溶液中加入包含重量摩爾滲透壓濃 度調節劑的水溶液以形成聚合膠束之後，進一步包括向所述聚合膠束中加入凍幹助劑；並且實施凍幹。
15.如權利要求13所述的方法，其中所述有機溶劑是選自丙酮、乙醇、甲醇、乙酸乙酯、 乙腈、二氯甲烷、氯仿、乙酸和二氧雜環己烷的一種或多種。
16.如權利要求13所述的方法，其中所述有機溶劑的用量是基於所述膠束組合物重量 的 0. 5-30wt%。
17.如權利要求13所述的方法，其中所述水溶液具有30-15，OOOmOsm/kg的重量摩爾滲透壓濃度。
18.如權利要求13所述的方法，其中所述重量摩爾滲透壓濃度調節劑是選自氯化鈉、 氯化鈣、硫酸鈉和氯化鎂的一種或多種。
全文摘要
記載了含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物，其包含紫杉烷、含有親水嵌段和疏水嵌段的兩親嵌段共聚物，以及重量摩爾滲透壓濃度調節劑。還記載了製備所述組合物的方法。所述組合物具有優異的穩定性，所以其可以防止藥物的快速釋放，並且可以改善期望的藥理效果。此外，所述方法使得所述組合物的高效製備成為可能。
文檔編號A61K31/785GK101910274SQ200880123622
公開日2010年12月8日 申請日期2008年10月13日 優先權日2007年12月31日
發明者徐敏孝, 李思元 申請人:株式會社三養社