向微流體裝置中壓電分配診斷液體的製作方法

2023-05-31 14:59:56 1

專利名稱：：向微流體裝置中壓電分配診斷液體的製作方法
技術領域：
：本發明涉及用於測量生物樣品中分析物數量的試劑和儀器，其通過所述分析物與試劑反應以產生可^r測的響應來實現。
背景技術：
：在含有試劑的基材上分配液體已經開發出許多儀器來測量生物樣品中分析物的數量，所述生物樣品例如為尿液、血液、唾液或者粘液或組織提取物。通常，樣品液體被施加到含有與所述分析物反應的試劑的表面上。所述試劑產生可檢測的響應，測量該響應並將其與所述分析物的量相關聯。所述表面性質上通常為親水性的或者疏水性的，例如濾紙對比於聚苯乙烯。一些裝置採用了多個表面的組合，例如尿液分析條試驗，其在疏水性的聚苯乙烯手柄頂端使用了親水性的濾紙墊。在典型的試驗中，將含有未反應試劑的條浸蘸，即完全浸入液體樣品中，然後測量所述樣品中分析物與試劑之間的反應，所述測量通常是通過光學方法實現。所述未反應的試劑本身可以是水溶性或非水溶性的。它們在多孔基材內沉積或固定並乾燥。所述基材連接或者放置在承載表面上。另外，可以在測定過程中使用含有或不含試劑的液體。所述液體試劑可以在與分析物的反應之前、之後或過程中施加到已含有乾燥試劑的基材表面上，通常是在樣品施加之後添加。顯然，為了成本和方便等的原因起見，樣品和試劑的體積應當儘可能的小。較不明顯的是，當施加少量液體試劑或生物樣品到含有試劑的表面上時，通常難以得到均勻而準確的響應。在存在小而少量的分析物時，分析物與試劑的反應小於所述反應區域。所述基材可用來放大所述反應的響應。膜，例如薄膜，可以用親和性試劑固定以便閱讀區中反應物的捕獲和濃縮。在合意的方向(例如橫向而非縱向)引導液體流動由於增加了液體樣品或試劑與反應區之間流體交換的數量而能夠提高效率。每次交換使得分析物發生進一步的反應，從而放大了所述信號。所述基材表面的改性使得試劑能夠在反應區被分離。此外，所述表面本身的性質也可用於提高分析物的反應5性，例如通過增加試劑的溶解性或者促進在所述表面上與試劑的反應來實現。大多數生物樣品和液體試劑具有顯著的水含量，因此相容於親水性基材而不容於疏水性表面。當所述樣品和試劑液體分配時會快速散布在親水性基材上而被疏水性基材所排斥。在所述表面上分配液體與試劑之間的接觸通過直接分配到反應區域或部分反應區域上而實現。然而，當基材相對疏水時，所分配的液體會在所述基材表面上形成液珠以試圖最小化其與所述表面的接觸，從而其不會均勻散布在所述試劑上。與分配液體有關的另一難題是乾燥試劑在性質上可能是水溶性的或非水溶性的。非水溶性的乾燥試劑可能不容易被所述液體樣品達到，而水溶性的試劑可能溶解並隨液體在所述基材上一起移動。理想的是所述試劑應當均勻接觸樣品，因為所述試劑與樣品的可測量的響應，例如顯色，應當均勻以便獲得所述樣品中分析物數量的準確讀數。與獲得在表面上一皮分配的液體與試劑之間的良好接觸有關的另一問題涉及所述樣品的物理性質。其物理性質如表面張力、粘度、總固體含量、顆粒大小和附著力是有所變化的。因此，其不容易以一致的體積均勻地沉積在被試劑覆蓋的基材上。同樣，隨著液體樣品量的減少，將一致量的具有變化性質的樣品施加到試劑上變得越來越困難。相反，噴墨列印等等就依賴於為這種用途開發出的且具有一致物理性質的液體。液滴的沉積是常見的操作。實例包括噴墨印表機，壓電或氣泡致動的，所述噴墨印表機由包含幾飛升(femtoliter)到幾十納升的直徑大約2到300pm(通常為50jxm)的多個小液滴的受控沉積來形成印跡。已經提出了沉積小液滴的其它方法，儘管其與典型的噴墨印表機有所不同，但通常採用壓電原理來形成液滴。其實例見於美國專利US5063396,5518179,6394363和6656432中。通過注射器型移液管沉積庫史大的液滴(3-100^iL)已知可在診斷系統中再現。這對應於約2至6mm的單個液滴直徑。這種移液管系統的商用實例為CLINITEKALTAS⑧尿檢分析儀。液滴大小可以為大於或小於噴嘴的大小，這取決於噴嘴的形狀、泵的類型以及所施加的壓力。當液體樣品以液滴的形式被分配到包含試劑的墊上時，特別地觀察到了上面所討論的問題。人們發現，當樣品以液滴的形式添加而不是像通常做法那樣通過將試劑墊浸入(浸漬)到樣品液體中來完全覆蓋所述試劑墊時，所述墊的表面與試劑間的相互作用會形成不準確的響應。當基材的疏水性過強時，3至100)LlL數量級的大液滴不會轉移到試劑中而是在表面上形成氣泡。如果表面是親水性的，則其又會以過多的流體覆沒(overwhelm)所述試劑。幾飛升至幾十納升的4交小液滴當一皮沉積在疏水性過強的基材上時也會產生問題，這是因為其不具有完全覆蓋所述表面積的體積，而會以不均勻的圖案隨機聚集。小液滴還允許了使水溶性試劑遷移的開放空間。這些微小液滴還傾向於發生液體蒸發且形成氣溶膠，這被認為是具有生物危害性的，如果所述氣溶膠包括尿液或血液樣品的話。因此，如果液體以液滴的形式沉積在測試墊上而不是將墊浸漬在樣品中，則需要改進。在所分配的液體與試劑之間完全接觸後，可採用多種方法中的一種來讀取結果。通常採用光學方法，其依賴於光語信號以產生響應。為了成為有用結果，結果必須是可再現的。光學測量受到被觀察的試劑區域的影響且所允許的被分配液體與試劑發生反應的時間的影響。視野內不均勻區域的形成和反應時間量的變化會增大誤差。例如，對不均勻地橫越基材散布的樣品或試劑進行的測量在每次讀取時會給出不同的結果。在作為U.S.2006/0263902A1公布的共同未決美國專利申請11/135928中，發明人報導了其以微小液滴形式沉積生物流體和試劑到載有試劑的基材上的方法，所迷申請與本申請共同被轉讓。他們證明載有試劑的基材取決於所述試劑的水溶性和所述基材的表面能(即，取決於所述載有試劑的基材是親水性的或是疏水性的)而表現不同。相比於在載有試劑的表面上沉積大約50pL至lpL的小液滴時，沉積大液滴，例如1.7-20.4nL,表現出具有較不準確的結果。發明人還發現小液滴被所述疏水性基材所吸收，而大液滴則不容易被吸收。當在載有試劑的表面上散布時，水溶性試劑表現出被溶解並與液體一起移動。發明人發現，這種移動所造成的不均勻的試劑響應會通過沉積小液滴所緩和。沉積小液滴可以通過具有許多小開口的噴嘴或者通過單個噴嘴來實現，所述噴嘴可以相對載有試劑的基材移動，或反之亦然，以覆蓋預定的區域。液體樣品與試劑在所述基材上的反應可以讀作為樣品覆蓋區域的平均值，或者優選地通過一次一點地掃描反應區域再取結果的平均值。向微流體裝置中沉積液體向用於生物樣品分析的微流體裝置中添加生物樣品及相關液體可以通過各種技術實現。將非常少量的血液、尿液等樣品引入這種裝置，在其中它們與能夠指示在所述樣品中分析物存在和數量的試劑發生接觸。已經發現，即使在通過適當的微流體裝置設計已克服了剛才所討論的問題之後，測量生物樣品中分析物的量可能也不會具有人們所需要的再現性。該問題部分原因涉及這些設計中固有的可變性。首先，表面塗層中的可變性會造成液體蔓延過毛細阻隔物或位於試劑區域周圍。這造成了液體移動的計時和反應體積的變化。其次，經驗較少的使用者會施加不恰當量的樣品或試劑。第三，當以低成本方法大量生產時，這些微流體裝置的內部尺寸會依每個晶片而不同。本發明人發現，這些問題可以被克服，使得結果的準確性和再現性顯著提高。發明創造內容本發明一方面涉及用於測定在生物流體中包含的分析物量的改進方法。所述方法包括以直徑在0.05至lmm範圍的液滴的形式將生物流體樣品和/或相關液體分配到微流體裝置的入口中。所述生物樣品和/或相關液體的分配以預定的次數(times)進行，以控制所述微流體裝置的操作。相關液體被未分配液體的時間間隔相隔開成液滴組地沉積，從而使樣品以選定的次數移入微流體裝置中預定的位點以優化測定試驗。圖1表示了實施例1的微流體裝置。具體實施例方式8定義本文所使用的以下術語定義如下"光譜圖像"是指包含試劑的區域對沉積在該包含試劑的區域上的生物樣品的光學響應的詳細視圖，例如利用顏色、反光度、透光度或吸光度或其它方面的變化，如拉曼光譜、螢光、化學發光、磷光或電化學阻抗圖諳，所述詳細視圖使得能夠對整個包含試劑的區域的亞單位進行檢查。所述圖像可以是多維的，其中添加了光學響應的位點(即x-y)。"親水性"表面是在該表面與被置於其上的水滴之間具有小於90。的接觸角的那些表面。"疏水性，，表面是在該表面與被置於其上的水滴之間具有90。或更大接觸角的那些表面。液體與多孔基材的相互作用本發明提供了對在多孔基材("墊")內發生的反應的改良控制，所迷多孔基材包含乾燥的試劑並位於微流體裝置內。所述反應由樣品液體與包含試劑的墊之間的相互作用引起。當含有未知量的分析物的液體樣品接觸包含試劑的墊時，所述液體必須溶解所迷試劑以使與分析物的反應能夠發生，其產生可檢測的結果，例如獨特的光學信號如顏色，這可通過光譜學手段測得。反應發生的速度和結果可檢測的程度受到多種因素的影響。這些因素包括試劑的可達性、其在液體中的溶解度、以及液體所放置的區域中試劑和液體的相對量。如果想獲得一致而準確的結果，向多孔墊均勻施加液體十分重要。同樣，墊的性質，例如其疏水性/親水性、其孔隙度和毛細度、以及其厚度也是決定測試結果的因素。墊的性質不僅影響著被吸收液體的體積，還影響著乾燥到所述墊上的試劑的溶解和表面相互作用。它們也影響著液體流動的方向以及在特定位點處固定試劑的能力。例如，墊通常與膜例如薄膜一起使用，所述膜使得液體側向而非垂直向流動。因此流體交換的次數可以在限定的反應區域實現。當反應區域包含固定的生物親和性分子例如抗體和核酸時，流體交換的次數可提高捕獲效率。在實踐中，本領域技術人員發現設計實用的測定系統時，墊本身、試劑和樣品液體的物理性質都必須考慮到。與直接沉積樣品(以及相關液體)到包含試劑的墊上相比，在微流體裝置中所述樣品將被添加到入口，然後通過間隔的孔和毛細通道轉移到含有包含試劑的墊的腔室中。通常樣品與其它液體相混合或被稀釋，所述其它液體例如液體試劑。所述樣品可以在液體試劑之前、同時或者之後加入微流體裝置中。可以使用單個或多個入口。儘管樣品、液體試劑和混合物可以不同地流動，但均勻分配液體仍然是4艮重要的。在本發明中，以精確的圖案特定次數(times)小增量地向目標區域定時施加樣品液體和/或其它相關液體提供了對液體與包含試劑的墊之間相互作用的改良控制，從而提供了提高的準確度和結果的均勻性。沉積液體樣品在許多測定中，將試劑放置於多孔基材或"墊"中，並將所述條形的基材浸入被測試的生物流體中。儘管這種測定很實用，但其不能如人們所期望的那樣具有必要的準確度或再現性。之前證明沉積大的樣品液滴(即l-7pL至20.4pL)不如將測試條浸入液體效果好。然而，小液滴(即50pL至lpL)在生物測試陣列中具有優良的結果。之前已描述過兩類分配噴嘴。第一種採用了單個噴嘴來分配一系列單個液滴到包含試劑的基材上。所述噴嘴或基材將移動以在合意的區域提供均勻的覆蓋。第二類噴嘴採用了鑽有一連串孔的板，這樣一次可以分配多個系列的液滴。在兩種類型中，最小的液滴尺寸被認為有大約50pL,這與大約45-50pm的孔直徑有關。所述噴嘴可以通過來自各種來源的壓力所操控。採用壓電促動器是分配所述小液滴的一種優選方法。微流體裝置作為U.S.2004/0265172A1公布的美國專利申請10608671中討論了生物樣品與包含在微流體裝置的試劑相接觸的進入和移動過程。這種裝置通常具有大約0.1至20(HiL的總體積，然而，根據其用途也可以具有更大或更小的體積。一般來說，微流體裝置可以通過藉助預定量的第二液體移動第一液體來操控，所述移動要麼到達毛細阻隔物要麼引入所需量的第二液體。本發明的方法提供了在微流體裝置中更準確的液體移動。已公布申請U.S.2006/0263902A1中描述了將生物樣品的小液滴直接沉積到包含試劑的多孔基材上的優點。該方法不適合微流體裝置，所述微流體裝置利用毛細作用力來移動液體樣品與微流體裝置內的試劑相4妻觸。有關微流體裝置的經驗表明，測試結果受到與試劑反應的生物樣品量的影響。這要預料到，因為對結果的解釋，例如從顯色來確定分析物的量，是基於用來校準測量儀器的生物樣品中的分析物的量。儘管生物樣品的量可以利用具有已知體積的孔或毛細管來定義，但已經發現這些小型裝置組中的變量已足以造成結果中不合意的可變性。體積差異是一個因素，但尤為重要的因素涉及被稱為"毛細阻隔物(capillarystop)"的性質。這些毛細阻隔物放置在裝置內，其中利用了毛細通道尺寸的變化來阻止液體在毛細作用力下繼續流動。實踐中，生物樣品和液體例如緩沖液、洗滌液體(washliquid)、附加試劑等可以以造成毛細阻隔物被克服的量來添加，從而使液體在所述裝置中向前移動。例如，如果生物樣品被引入微流體裝置並通過毛細作用力移動到包含試劑的腔室的入口，其在毛細阻隔物處^1亭頓，然後必須克^J亥阻隔物以侵z使所述樣品移動進入腔室。這可以通過引入液體例如洗滌液體到入口中來實現，其造成毛細阻隔物被克服並且生物樣品移動進入包含試劑的腔室。人們發現毛細作用力強度和毛細阻隔物的變化對微流體裝置的性質有不利的影響。儘管存在該可變性，所述裝置仍提供了有用的信息，但仍需尋求改進。已經發現，以小液滴的形式施加生物樣品和其它液體到孩丈流體裝置的入口在控制液體移動通過這種裝置方面具有顯著的優點。微流體裝置中的毛細通道含有非常小的液體體積，例如5nL/mm。因此，僅使用小增量的液體就能克服所述毛細阻隔物。需要精確的分配液滴來引發毛細阻隔物，使得所述分配的開始和停止可控制在納秒範圍內。這種準確的分配在由試劑反應所決定的時間內實現，該時間通過光語學手段測定。人們發現分配事件的模式對保持均勻流動很重要。特別地，已經發現以已知的量分配液體並間隔以不進4亍液體分配的時間，使得可以以先前不能獲得的方式來控制液體移動的順序。這在以下實施例中得到證明，在所述實施例中生物樣品(全血)被加入微流體裝置，接著是裂解(lysis)和洗滌溶液。實施例1使用了以下縮寫PBS-磷酸鹽緩衝液BSA-牛血清白蛋白FITC-異硫氰酸螢光素在硝酸纖維素基材(5.0|iim孔)上進行HbA!c免疫測定，所述基材上放置有兩個4mm寬的捕獲帶。第一條帶包含有HbA!c凝集物(分析物HbA,c的模擬物；lmg/mL在PBS中，pH7.4)。第二條帶包含單克隆的抗FITC抗體(3mg/mL,在0.05硼酸鹽中，pH8.5)。製備用於結合HbAu;分析物的綴合物，其包含連接到用FITC和HbA]c抗體標記的BSA上的藍色乳膠顆粒。製備兩種濃度以用於高(8-15%HbAlc)和低(3-8%HbAlc)濃度測定中。將所述BSA標記的物質連接到藍色乳膠顆粒(300nm,67p叫.的COOH/g)上，每毫克乳膠加載30嗎BSA-FITC-抗HbAlc。含有01%BSA的PBS洗滌溶液用於所述高濃度範圍，而抗-FITC抗體乳膠綴合物的1:IO稀釋液用於所述低濃度範圍。所述抗-FITC抗體以每lmg藍色乳膠顆粒lOpg抗體製備。將所述綴合物用酪蛋白阻斷緩沖液稀釋並乾燥在玻璃纖維紙中。對高濃度範圍所述綴合物以l:4的比例稀釋，對低濃度範圍用1:400的比例稀釋。當HbA,c存在於生物樣品(在本例中為血液)中時，其將結合到所述綴合物上。然後結合的綴合物將不與所述凝集帶結合，而是會通過第二條帶，在第二條帶處其會與抗-FITC抗體結合。過量的綴合物將會被所述第一條帶結合，因為其會結合到所述綴合物中的HbAw抗體上。通過測量存在於兩條捕獲帶上的FITC的相對量，可以確定樣品中HbAc的量。如圖1中所示。該裝置具有四個腔室，通過毛細通道連接，並且具有大約20pL的總體積。所述第一腔室是所述裝置的入口。其向周圍環境開放。腔室2包含位於玻璃纖維紙上並由微小柱支撐的綴合物。硝酸纖維素捕獲條在腔室3中，其進入口(entrance)含有微小柱陣列以分布液體。腔室4包含用於從腔室3去除過量液體的多孔墊。使用時，將樣品(全血)加入腔室1中，其用來確定所述樣品的體積。所述樣品流過毛細管並在腔室2的進入口處停住。加入裂解液(Cellytic-M,SigmaAldrich，St.Louis,MO)以強制樣品進入腔室2,在這裡其接觸所述綴合物。在所述綴合物顆粒與所述樣品反應之後，向12腔室1加入洗滌液體以強制所述樣品和綴合物通過腔室3進入口處的阻隔物，使得稀釋的樣品通過在所述條上的捕獲帶。通過在所述捕獲帶中的FITC顯色並用作為光學檢測器的CCD相機讀取，然後通過適當的軟體與校正數據相比較。將附加液體進料至腔室1以移動殘留的樣品進入腔室4,這裡含有吸收墊。用該微流體裝置進行測試，其中使用了三種方法來向腔室1中添加液體。具有大約0.3至2mm開口且根據其填充長度可分配大約0.3-100jiiL液滴的常規毛細移液管用來將樣品和其它液體放置在入口中。具有大約50pm開口的微分配頭以連續而無停頓的方式分配所述樣品和液體。相同的微分配頭還用於間斷地和定時地精確移動液體以克服毛細阻隔物，所述間斷的時間間隔內無液體被分配。已經發現，不時地(attimes)小液滴最適合於給出清晰優良結果的反應，如下表所示。分配方法%過填充%填充不足%不均勻顏色響應計時大移液管32%23%18%10-20秒微分配(連續)16%9%17%~3-6秒定時組的樣i:分配0.1%0.3%1.2%~〉0.0秒在上表中，"°/。過填充或％填充不足"是指一系列測試，其中測試了圖1的微流體裝置並且其中發現添加了比反應所需較多或少的液體。"％不均勻顏色"是指腔室3中的顯色，其指示了所捕獲的綴合物的量並允許計算樣品中HbA!c的量。"響應計時，，是指在所述微流體裝置中液體開始從腔室2流到腔室3所經歷的最小時間。這些測試通常在l到IO分鐘內實施，包括溫育和顯色。溫育和顯色時間的誤差會導致響應的誤差，因為有比預期更多或更少的試劑發生了反應。實施例2前述實施例中使用的微分配頭能夠以85滴/微秒的速率分配大約100pL的液滴。除了被未分配液體的間隔所隔開的分配時間段，還可以控制各時間段中分配的體積，即各時間段內的液滴數。這種能力使得可以更準確地控制樣品和稀釋液移動通過所述微流體裝置。在上述HbAlc測定中，提供恰當的時間用於樣品與綴合物的溫育以及樣品/綴合物在洗滌所述測試條之前完成反應是十分重要的。這需要監控樣品進程和控制添加稀釋液的時間。樣品和樣品/綴合物以特定速度移動對於優化測定來說十分重要。這在連續監控樣品和樣品/綴合物的位置並據此來控制牙希#奪液的添加時成為可能。在該實施例中，控制所述微分配以提供每毫秒85滴的組，之間間隔0.1秒。當與移液管和連續的微分配相比時，獲得了以下結果tableseeoriginaldocumentpage14在上表中，"計時準確度"是指實施所述分配方法所需的小時間段。"添加的最小體積"是指每種分配方法可以控制的程度。"體積容差"涉及體積的變量，由它可預期所述微流體裝置的最佳操作。在本實施例中，腔室之間的毛細管具有大約50nL的體積，其是在所述毛細管末端處的毛細阻隔物被引發之前能夠加入的最小體積。當分配的最小體積大於50nL時，對於大移液管來說體積容差為零。即使當使用毛細管作為移液管時，0.3pL(300nL)的體積也會具有零體積容差。使用具有密集的液滴組的微分配，最小的組為一滴。在該實施例中，液滴以85滴/毫秒的速度分配並且每滴的體積為100pL。所述體積則大約為O.l^L/毫秒(8.5nL/毫秒)。這一般來說是良好的操作範圍。其提供了高體積容差並且所述微流體裝置99.996%可靠地準時發射(fire)。由於所述裝置通過光語圖像監控，就可以通過額外的液滴組來校正所述微流體毛細管體積中的失誤發射或變化。通常的操作範圍為30到150滴/毫秒，而所述液滴體積在大約30pL至1000nL。當採用連續的微分配時，所述分配器可以電子制動，但通常會分配不止一個液滴。在該實施例中，"添加的最小體積"為50滴O.lOOnL或者5nL。這意味著體積容差對於該裝置來說不高或者為80%的時間(五分之四)。由於微流體裝置可以與僅容納5nL的毛細管一起工作，故這種容差相比於以加強組微分配的觀測來說可接受度較小。權利要求1、在微流體裝置中測定生物流體中分析物的量的方法，所述微流體裝置具有至少一個樣品入口，至少一個排氣口，以及至少一個包含試劑的腔室，所述方法包括(a)將所述生物流體的樣品分配到所述微流體裝置的所述至少一個樣品入口中，所述樣品由毛細作用力移動通過與所述至少一個樣品入口連通的毛細通道到達毛細阻隔物；(b)將一部分不同於所述(a)的樣品的液體分配到所述(a)的至少一個入口，所述液體部分足以強制所述樣品通過所述毛細阻隔物，所述液體部分以直徑在0.05至1mm範圍的液滴組的形式被分配，所述液滴組由未分配液滴的時間間隔所隔開，所述液體部分在引入所述樣品之後在預定的時間添加。2、權利要求1的方法，其中(b)所述的不同液體以足以使所有(a)所述的樣品位移到在所述微流體裝置中超過所述毛細阻隔物的位置的量^皮引入。3、權利要求3的方法，其中權利要求2所述的被位移的樣品接觸在所述至少一個包含試劑的腔室中分配的試劑並且替代在所述至少一個腔室中存在的空氣。4、權利要求3的方法，其中所述樣品和所述試劑反應並產生與所述樣品中的所述分析物的量相關的可檢測結果。5、權利要求2的方法，其中所述被位移的樣品接觸調節劑或載體試劑以使所述樣品備用於後續的與試劑接觸。6、權利要求l的方法，其中(b)所迷的不同液體的液滴組通過微分配噴嘴以大約3萬滴到15萬滴每秒的速率被分配。7、權利要求1的方法，其中所述微流體裝置具有大約0.1到200pL的總體積。8、權利要求1的方法，其中液滴的最小組具有大約lOOpL的體積。9、權利要求8的方法，其中所述分配的計時準確度為大約0.01毫秒。10、在微流體裝置中測定生物流體中分析物的量的方法中，所述微流體裝置具有至少一個樣品入口，至少一個排氣口，以及至少一個包含試劑的腔室，所述測定包括將所述生物流體的樣品分配到所述至少一個入口中，並通過分配不同於所述樣品的液體到所述至少一個入口中來使所述樣品位移，改進包括以直徑在0.05至lmm範圍的液滴組的形式分配所述不同的液體，所述液滴組由未分配液滴的時間間隔所隔開。11、權利要求10的方法，其中所述生物流體的樣品通過毛細作用力移動到與所述至少一個樣品入口連通的毛細通道中的毛細阻隔物處，並且所述不同的液體以足以強制所述樣品通過所迷毛細阻隔物的量分配。12、權利要求11的方法，其中所述生物流體的樣品被強制通過所述毛細阻隔物而進入所述至少一個包含試劑的腔室。13、權利要求11的方法，其中所述樣品和所述試劑反應並產生與所述樣品中的所述分析物的量相關的可檢測結果。14、權利要求11的方法，其中所述樣品接觸調節劑或載體試劑以使所述樣品備用於後續的與試劑接觸。15、權利要求10的方法，其中所述不同液體的液滴組通過微分配噴嘴以大約3萬滴到15萬滴每秒的速率分配。16、權利要求10的方法，其中所述微流體裝置具有大約0.1到200pL的總體積。17、權利要求10的方法，其中最小的液滴組具有大約100pL的體積。18、權利要求10的方法，其中所述分配的計時準確度為大約0.01毫秒。19、權利要求11的方法，其中被分配的不同液體的體積為大約5nL。20、操作微流體裝置的方法，所述微流體裝置具有至少一個樣品入口，至少一個排氣口，以及至少一個腔室，所述方法包括(a)以直徑在0.05至lmm範圍的液滴組的形式分配預定量的第一液體到所述至少一個入口中；(b)將足以強制所述第一液體離開所述至少一個入口的預定量的第二液體分配到所述至少一個入口中，所述第二液體以直徑在0.05至lmm範圍的液滴組的形式^皮分配，所述液滴組由未分配液滴的時間間隔所隔開，所述第二液體在引入所述第一液體之後的預定的時間添加。21、權利要求20的方法，其中所述微流體裝置包括在所述至少一個入口和所述至少一個腔室之間連通的毛細通道，且所述第一液體通過毛細作用力從所述入口移動到在通往所述至少一個腔室的進入口處的毛細阻隔物處。全文摘要一種測定，其中生物流體樣品被分配到微流體裝置的入口中，該測定通過以小滴和間隔時間的方式來分配所述生物樣品和/或相關液體以便控制所述微流體裝置的操作，提高了所述測定的準確度和再現性。文檔編號G01N33/50GK101688875SQ200880014433公開日2010年3月31日申請日期2008年3月14日優先權日2007年5月2日發明者J·A·普羅菲特,M·J·普日亞申請人:西門子醫療保健診斷公司