超聲組織處理兩步法及其組織超聲處理裝置的製作方法
2023-06-26 23:30:46 1
專利名稱：超聲組織處理兩步法及其組織超聲處理裝置的製作方法
技術領域：
本發明是涉及一種組織處理方法及其處理裝置，尤其是能在臨床病理診斷過程中對待檢組織進行超聲處理的方法及其一種組織超聲處理裝置。
為此，本發明提供了一種密閉組織超聲處理裝置，這種組織超聲處理裝置包括超聲處理儀和密閉組織處理裝置，其特徵在於前述密閉組織處理裝置包括冷凝回流器、組織籃、敞口試劑缸三部分；實施時將病理取材的組織標本放入組織籃內，再將組織籃放入盛有處理溶液的試劑缸內，然後再將冷凝回流器垂直插入試劑缸口中，通過膠塞與試劑缸密閉連接，至此，冷凝回流器與試劑缸及組織籃共同組成一個密閉組織處理裝置，將該裝置放在超聲處理儀的超聲換能器上。由此在密閉狀態下對組織進行丙酮、浸蠟超聲處理，使組織的超聲處理過程避免了試劑被蒸乾，試劑揮發汙染環境的缺陷，並使處理過程更簡單，耗時更短，切片質量更優良穩定，同時也能滿足快速病理診斷的速度要求和常規病理製片的各種要求，從而達到組織處理時間短、切片質量高、診斷速度快、適用範圍廣、無空氣汙染的目的。
本發明還提供一種超聲組織處理方法，其技術特徵為將丙酮冰醋酸處理溶液裝入試劑缸中，在90℃以下對組織進行超聲處理10分鐘以下，然後再將石蠟溶液裝入試劑缸中，在90℃以下對組織進行超聲浸蠟處理10分鐘以下。我們將這種方法稱之為「超聲組織處理兩步法」。
根據本發明的一個特徵，採用90％～100％濃度丙酮100ml+冰醋酸5ml的丙酮冰醋酸溶液對組織進行超聲處理。
為表明本發明，現就相關的技術設備及操作方法陳述如下一、基本設備1、超聲組織處理儀國內廠家提供，該儀器的工作平臺是電熱可調恆溫水浴槽及其中的超聲換能器，為組織處理提供恆溫加熱和超聲波振蕩的環境，達到加速組織處理的過程。
2、本發明的組織超聲處理裝置包括試劑缸、冷凝回流器和組織籃三部分。該裝置為超聲組織處理過程提供了一個密閉的環境，避免試劑蒸發而導致試劑銳減和汙染環境，並使裝置內保持穩定壓力和溫度，有了該裝置，可以選擇較高的處理溫度。適當的加熱是組織處理必要的條件，溫度過低，處理速度太慢，溫度過高，組織收縮嚴重影響切片質量。
3、組織處理專用試劑丙酮冰醋酸溶液，90％～100％濃度丙酮100ml+冰醋酸5ml釀成。丙酮對組織具有良好的固定、脫水和透明作用，冰醋酸可以適當提高丙酮的沸點，減少處理過程組織的收縮和硬化，改善組織切片的順應性，提高HE染色的亮麗和對比度。石蠟選用溶點58～60℃優質石蠟。該種石蠟具有密度較高，質地細膩和柔韌性好等優良品質，所以切片不易碎裂和皺褶，漂片時展開充分。二、具體操作方法1、標本取材臨床送檢的各種組織標本，用75％的酒精保存按常規取材。組織塊厚度＜2mm，以1～1.5mm為佳；破碎成細小組織用擦鏡紙包好，骨質脫鈣後取材。經取材的組織按順序放入組織籃小格內。
2、組織超聲處理超聲處理儀按使用說明書操作，首先給水浴槽內注水並打開電源開機預熱到75℃或80℃。將組織連同組織籃移入盛丙酮溶液的試劑缸內，注入丙酮到浸沒組織籃1cm左右，連接好冷凝回流器。丙酮處理將試劑缸移放在超聲換能器上，開啟超聲工作開關，在90℃以下對組織進行超聲處理10分鐘以下，超聲處理最佳為8分鐘/75℃或5～6分鐘/80℃。浸蠟石蠟預溶預熱，將組織連同組織籃和冷凝回流器從盛丙酮溶液的試劑缸內取出，移入接到盛石蠟溶液的試劑缸內，再把試劑缸放置在超聲換能器上，開啟超聲工作開關，在90℃以下對組織進行超聲浸蠟處理10分鐘以下，進行超聲浸蠟處理最佳為7分鐘/75℃或5分鐘/80℃。
3、浸蠟完畢後，組織即可進行常規石蠟包埋和切片及染色製作。
為了更好地說明本發明的優點及特點，將本發明與現有技術比較如下1、傳統石蠟切片法的具體步驟為病理標本取材→10％濃度的甲醛固定2小時→80％濃度的酒精脫水1小時→85％酒精脫水1小時→95％酒精脫水1小時×2次→100％酒精脫水1小時×2次→二甲苯透明30分鐘×2次→浸蠟1小時×3次→組織石蠟包埋→切片→脫蠟→染色→封片。組織包埋前的處理需13小時以上。
本發明的具體步驟為病理標本取材→丙酮超聲處理5～8分鐘→超聲浸蠟5～7分鐘→組織石蠟包埋→切片→脫蠟→染色→封片。組織包埋前的處理僅需10～15分鐘。
2、冰凍切片法的具體步驟為病理標本取材→速凍(約需5分鐘)→切片→固定→染色→封片；共需時間15～20分鐘完成全過程。速度雖較快，但切片質量常與傳統切片不一致，同時，組織塊不便保存，無法對細小組織進行切片。
本發明對組織處理整個過程能在20～25分鐘內完成，切片質量與傳統切片一致，同時能對細微組織進行切片，組織塊便於保存。
3、原有超聲組織處理石蠟切片法的具體步驟為病理標本常規取材→超聲處理AF液(95％酒精90ml+40％甲醛10ml)超聲固定5分鐘→95％酒精超聲脫水3～7分鐘→100％酒精超聲脫水5～8分鐘→純丙酮超聲處理3～7分鐘→二甲苯超聲透明3～5分鐘→超聲浸蠟10～15分鐘。浸蠟完畢，按常規石蠟包埋和切片。超聲處理的工作溫度60～65℃，組織處理過程均是開放式處理。各種試劑在加熱和超聲振蕩作用下，大量蒸發，造成工作環境的極大汙染，尤其是甲醛、二甲苯和丙酮的汙染最為嚴重，可以說汙染問題是超聲組織處理石蠟切片技術難以推廣應用的最大障礙。另外，操作過程需要6步和30～47分鐘，加上步驟更換的時間，組織處理過程實際耗時會在40～60分鐘，很難適應手術時快速病理診斷的要求。
本發明能很好地解決上述缺點，其具有組織處理快速—組織包埋前的處理僅需10～15分鐘，步驟簡單—丙酮超聲處理、超聲浸蠟處理兩個步驟，採用密閉組織處理裝置—無汙染，並能完成常規製片工作的優點。
綜上所述，本發明所提供的組織超聲處理裝置及「超聲組織處理兩步法」，徹底解決了原有病理製片技術的種種缺陷，且具備了製片快速、切片優良、能大批量製片，製片過程無汙染、技術成本低等諸多優點。
本發明的優點具體體現為1、時間本發明的組織超聲處理僅需丙酮和浸蠟兩個步驟即可完成，如選用75℃的工作溫度，共耗時15分鐘，如選用80℃的工作溫度，僅耗時10分鐘，步驟簡單，速度快，對單個組織的製片，能在20分鐘內完成全過程，能滿足手術時快速度病理診斷的要求。
2、切片質量選用75℃和15分鐘方案處理組織，切片質量不低於常規石蠟切片，並能適用於任何類型組織的製片。選用80℃和10分鐘的方案，對某些組織，如子宮內膜和胃腸黏膜等的處理，收縮度稍大於常規石蠟切片法，但不影響診斷。
3、適用範圍廣「超聲組織處理兩步法」，能一次性處理大批量和不同類型的組織標本且切片良好，能滿足日常工作的要求，切片速度快，能適應手術時快速病理診斷的要求，用經「超聲組織處理兩步法」處理過的切片進行免疫組化染色和特殊染色，效果良好。
4、清潔環保「超聲組織處理兩步法」，是在密閉條件下處理組織，無空氣汙染。同時該法避免使用甲醛和二甲苯等強致癌物質，如按全國病理單位4000個，每個病理單位每周消耗一公斤甲醛(10％)和二甲苯計算，每年有近200噸甲醛和200噸二甲苯的廢棄物汙染水源，如全國病理單位能採用本法製片，其環保效益是可想而知的。
本發明的具體實施方式
由以下實施例及其附圖詳細給出
圖2本發明中超聲處理儀的俯視圖。
圖3本發明中冷凝回流器的剖面圖。
圖4本發明中試劑缸的剖面示意圖。
圖5本發明中組織籃的剖面示意圖。
圖6本發明中組織籃暨圖5的俯視圖。
1超聲處理儀 2冷凝回流器3組織籃 4試劑缸11外殼 12控制平臺13水浴槽 14超聲換能器15電熱管 20上氣室21外殼體 22膠塞23進氣口 24出氣口25水箱 26直列冷卻管27水箱上封板 28水箱下封板29下氣室 31組織籃的疊加層格32中軸棒 33外板34內隔板 35網孔式底板41試劑缸外體 42瓶口加固沿43喇叭狀瓶口 241安全閥具體實施方式
以下結合附圖及較佳實施例，對依據本發明提出的組織超聲處理裝置其具體實施方式
、結構、特徵及其功效，詳細說明如下請參閱
圖1所示，本發明的組織超聲處理裝置，其包括有超聲處理儀1和密閉組織處理裝置。該密閉組織處理裝置包括冷凝回流器2、組織籃3、敞口試劑缸4三部分上述組織籃3放入盛有處理溶液的上述敞口試劑缸4內，上述冷凝回流器2垂直插入於敞口試劑缸口4中，通過膠塞22與上述敞口試劑缸4密閉連接；上述密閉組織處理裝置放置在上述超聲處理儀1的超聲換能器14上。
請參見圖2所示，超聲處理儀1，其有立方體的外殼11，外殼11頂部靠前為控制平臺12。該控制平臺12包括有電源開關、超聲開啟鍵、溫控鍵、控時鍵，外殼11頂部中央部分有一個圓形水浴槽13，圓形水浴槽13中安裝有電熱管15。工作時將水注入圓形水浴槽13，作為熱能和超聲能的傳遞介質，水浴槽13中於電熱管15兩邊對應裝有兩個超聲換能器14，超聲換能器14提供一定功率和頻率的超聲源，電熱管15在工作時對水浴槽13中的水加熱。
請參見圖3所示的冷凝回流器2，該冷凝回流器2為圓柱形外殼體21，外殼體21下部通過水箱下封板28與圓錐形下氣室29相連接；進氣口23與下氣室29連接，並從膠塞22的中心穿過，膠塞22與試劑缸4密閉連接(參見圖1)；外殼體21上部通過水箱上封板27與圓錐形上氣室20連接；出氣口24與上氣室20連接；安全閥241置於出氣口24處；安全閥241為玻璃球做成，能使冷凝回流器2內保持一定的正壓力，從而起到安全閥的作用；外殼體21內部為水箱25，用水作為冷卻劑；水箱25內置放有多根直列冷卻管26，試劑蒸氣通過直列冷卻管26流通並獲得冷凝和回流。
請參見圖4所示的敞口試劑缸4，其為透明玻璃缸體41，具有喇叭狀瓶口43，並有加固沿42，此加固沿採用無瓶頸形式，以方便組織籃3進出；實際操作時，將試劑缸4置放在水浴槽13中。
請參見圖5、6所示的組織籃3，其為多層疊加格結構31，並由一中軸棒32固定；每層疊加格結構31由外板33、內格板34、網孔式底板35構成；實際操作時，將組織籃3置放於盛有處理液的試劑缸4中。
本發明實施例說明臨床送檢各種組織標本，用75％的酒精保存按常規取材。組織塊厚度＜2mm，以1～1.5mm為佳；破碎成細小組織用擦鏡紙包好，骨質脫鈣後取材。經取材的組織按順序放入組織籃小格31內；將超聲處理儀1上的水浴槽13內注入水並打開電源開機預熱到75℃或80℃，將組織連同組織籃移入試劑缸4內，注入丙酮到浸沒組織籃1cm左右，然後將冷凝回流器2的進氣口23垂直插入試劑缸4口，通過膠塞22與試劑缸4密閉連接，至此，冷凝回流器與試劑缸及組織籃共同組成一個密閉的組織處理裝置，將該裝放置在超聲處理儀的水浴槽13中，藉助水浴槽13中的超聲換能器14及電熱管15所提供的熱能和超聲能對組織籃3內的組織標本進行丙酮超聲處理，超聲處理8分鐘/75℃或5～6分鐘/80℃完畢。然後，將組織連同組織籃3和冷凝回流器2從試劑缸4中取出，移入接到盛有經過預溶預熱石蠟的試劑缸4中，再把試劑缸4放置在超聲處理儀1上(步驟同上)進行超聲浸蠟處理7分鐘/75℃或5分鐘/80℃完畢。浸蠟完畢後，組織即可進行常規石蠟包埋和切片及染色製作。
現代醫學，由於有了先進的窺鏡活檢和影像導引下的穿刺活檢技術，因此，臨床上任何部位和組織病變的手術前或治療前的病理活檢診斷已達到了無所不能的地步。然而傳統的病理診斷需要2-3個工作日，嚴重遲滯了臨床診療的進程，增加了病人的精神負擔和經濟負擔。因此，再保證準確診斷的前提下，儘可能縮短病理的診斷過程，是現代社會生活和臨床醫學的迫切需要。本發明能對內窺鏡或穿刺活檢細小組織快速制出優良的切片，能滿足現代醫學對病理的快速診斷的要求。病理診斷將象做血常規一樣，標本隨到隨切片，1小時內發出病理報告。病理科將不再使用甲醛和二甲苯，工作人員從此告別了這些致癌物質的危害，病理工作將成為安全的職業，同時也不再因甲醛和二甲苯的廢棄而造成社會環境汙染。另外本發明所使用的丙酮醋酸溶液對組織具有優良的固定、脫水和透明的性能，冰醋酸能有效降低組織收縮和增強染色的對比度，使切片更優良、染色更亮麗。用本法製作的切片，對抗原破壞較輕，不影響免疫組化和特殊染色結果。
權利要求
1.一種組織超聲處理裝置包括超聲處理儀和密閉組織處理裝置，其特徵在於前述密閉組織處理裝置包括冷凝回流器、組織籃、敞口試劑缸三部分；實施時將病理取材的組織標本放入組織籃內，再將組織籃放入盛有處理溶液的試劑缸內，然後再將冷凝回流器垂直插入試劑缸口中，通過膠塞與試劑缸密閉連接，至此，冷凝回流器與試劑缸及組織籃共同組成一個密閉組織處理裝置，將該裝置放在超聲處理儀的超聲換能器上。
2.根據權利要求1所述的組織超聲處理裝置，其特徵在於所述的冷凝回流器為水冷或風冷式。
3.根據權利要求2所述的組織超聲處理裝置，其特徵在於所述的冷凝回流器為直列管水冷或風冷式。
4.根據權利要求2所述的組織超聲處理裝置，其特徵在於所述的冷凝回流器為單管或多管盤旋螺管狀水冷或風冷式。
5.根據權利要求1、2、3或4所述的組織超聲處理裝置，其特徵在於所述的組織籃為多層疊加結構，每層內分成若干個小格，由中軸棒固定。
6.根據權利要求5所述的組織超聲處理裝置，其特徵在於所述的組織籃為圓形或方形的蜂窩狀多層疊加結構。
7.根據權利要求5所述的組織超聲處理裝置，其特徵在於所述的敞口試劑缸為敞口無瓶頸透明玻璃缸。
8.根據權利要求1或6所述的組織超聲處理裝置，其特徵在於所述的敞口試劑缸為敞口無瓶頸透明玻璃缸。
9.一種超聲組織處理方法，其特徵在於將丙酮冰醋酸處理溶液裝入試劑缸中，在90℃以下對組織進行超聲處理10分鐘以下，然後再將石蠟溶液裝入試劑缸中，在90℃以下對組織進行超聲浸蠟處理10分鐘以下。
10.根據權利要求9所述的一種超聲組織處理方法其特徵在於所述的丙酮冰醋酸溶液的配方為90％～100％濃度丙酮100ml+冰醋酸5ml。
全文摘要
本發明用於解決組織超聲處理過程試劑被蒸發和汙染空氣的問題，建立組織石蠟切片新方法及其裝置。其發明為病理標本經常規取材，用超聲組織處理儀和發明人自己製作的組織超聲處理裝置，對待檢組織進行超聲處理丙酮冰醋酸溶液處理10分鐘以下，浸蠟處理10分鐘以下，超聲處理溫度選用90℃以下。處理完畢，按常規包埋、切片和染色。組織處理兩步驟共10～15分鐘完成，組織超聲處理過程無汙染，切片質量好，能一次同時處理大量的不同組織類型和大小的組織標本，即便是微小的組織，亦能獲得優良的切片。
文檔編號G01N1/06GK1410751SQ02153488
公開日2003年4月16日 申請日期2002年12月3日 優先權日2002年12月3日
發明者吳偉健, 朱海豐 申請人:吳偉健, 朱海豐