治療高血脂症的組合物的製作方法
2023-07-02 02:37:51 2
專利名稱：治療高血脂症的組合物的製作方法
技術領域：
本發明涉及治療高血脂症的新的組合物，特別是含有煙酸和阿託伐他汀鈣及藥用輔料的組合物。
背景技術：
隨著醫藥科學的不斷發展，人們認識到膽固醇、脂肪等含量過高是發生心血管疾病的基本病因，高血脂是發生冠心病及高血壓的主要危險因素。因此，人們開始把血脂調節藥的開發作為防治心血管疾病的重點。自20世紀80年代末起，降血脂藥物大量推出，其中他汀類藥物受到人們好評，其臨床療效之佳是其它各類調節血脂藥物所不能相比的。十多年來，幾個國際大規模冠心病防治試驗的完成，證實他汀類藥物可以降低冠心病的發病率和死亡率，而且能使已經形成的動脈粥樣硬化斑塊發展減緩，甚至減退，從而打破了冠心病不可逆轉的傳統觀念，由「他汀」引發的一場血脂革命正在全球興起。目前，醫藥界對調脂藥在防治心血管疾病方面的作用充滿信心，調脂療法將成為21世紀預防心血管疾病的主要方法。
阿託伐他汀(Atorvastatin)是第三代他汀類調脂藥，是一種全合成的羥甲戊二醯輔酶A(HMG-CoA)還原酶抑制劑，1995年首次在美國以鈣鹽形式上市。其化學名稱為[R-(R′，R′)]-2-(4-氟苯基)-βδ-二羥基-5-(1-甲基乙基)-3-苯基-4-[(苯胺)羰基]-1-氫-吡咯-1-庚酸鈣三水合物。
結構式
分子式(C33H34FN2O5)2Ca·3H2O通常所說的阿託伐他汀就是指上述的鈣鹽三水合物，或稱為阿託伐他汀鈣。中國導醫網(www.daoyi.com/drug/html/200009/6000000189670.html)對其藥效綜述如下1、抑制HMG-CoA還原酶。HMG-CoA還原酶是膽固醇合成酶系中的限速酶，通過對其的抑制作用，從而使膽固醇合成減少。阿託伐他汀與普伐他汀(pravastatin)相同，口服吸收後即有生物活性，而洛伐他汀(lovastatin)和辛伐他汀(simvastatin)為前藥，需在體內代謝後才具有生物活性。因此阿託伐他汀發揮作用比洛伐他汀和辛伐他汀更快。本藥對HMG-CoA還原酶的抑制作用較其他同類藥物強。阿託伐他汀對HMG-CoA還原酶抑制作用的50％抑制濃度(IC50)為73nmol.L-1，而普伐他汀為2650nmol.L-1。阿託伐他汀80mg/d，普伐他汀40mg/d，辛伐他汀40mg/d使血漿甲基二羥戊酸(MVA)濃度分別減少59％，32％和49％。此外，單劑量阿託伐他汀對HMG-CoA還原酶抑制作用的持續時間較其他同類藥物長。
2、增加低密度脂蛋白(LDL)受體。阿託伐他汀通過對HMG-CoA還原酶的抑制作用使血漿中和組織細胞內膽固醇濃度均降低，可刺激肝臟內LDL受體密度增加，從而使血漿低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)清除增強。肝臟LDL受體可與極低密度脂蛋白(VLDL)結合，使VLDL降解增加，從而使甘油三酯(TG)濃度下降。
3、抑制極低密度脂蛋白膽固醇(VLDL-C)合成。膽固醇是合成VLDL必需的，本藥通過使血漿膽固醇濃度降低，使VLDL合成和分泌減少。VLDL是攜帶和轉運TG必需的，VLDL-C又是LDL-C的前體，故本藥可使TG、VLDL-C、LDL-C均降低。
4抗動脈粥樣硬化作用。阿託伐他汀通過降低血脂、減少脂質浸潤和泡沫細胞形成，對延遲動脈粥樣硬化病變有利。本藥尚可防止動脈粥樣硬化斑塊破裂。此外，體外實驗表明阿託伐他汀可抑制血管平滑肌增殖和遷移。動物實驗表明，本藥2.5mg/kg可使兔動脈粥樣硬化斑塊面積減少67％(P＜0.05)，而同樣劑量的洛伐他汀、普伐他汀、辛伐他汀無此作用；本藥尚有抑制血小板激活、降低血粘度、抑制凝血等作用。臨床研究表明22例高脂血症病人應用本藥80mg/d後使血漿粘度降低10％，凝血因子VII的活性降低8％，血栓烷A2(TXA2)誘發的血小板聚集率降低11％。這些作用均對防止動脈粥樣硬化有利。
阿託伐他汀一般耐受性良好，大部分不良反應輕微，與洛伐他汀相比，病人耐受性更好。
煙酸及其衍生物在脂肪組織中可通過降低環磷酸腺苷(cAMP)水平而抑制激素敏感性脂肪酶，直接抑制脂肪的分解代謝，使TG不易分解為游離脂肪酸(FFA)，導致血液中FFA濃度降低，肝臟合成TG的原料缺乏，以致於VLDL合成減少，繼發性地引起LDL產生減少。此外，本藥直接抑制肝臟合成VLDL也可能是降低LDL的原因。煙酸及其衍生物能通過減少VLDL產生而降低LDL、TG水平，進而減少TC水平，即降低具有致動脈粥狀硬化(AS)作用的血漿脂蛋白水平，升高具有抗AS作用的HDL水平。
目前，該領域的研究趨勢是將兩種不同作用機制的調血脂藥製成複方製劑，從而使降脂作用更加全面，同時還可發揮協同作用，增強療效，減少毒副作用。
美國專利US5260305A公開了HMG-CoA還原酶抑制劑普伐他汀和煙酸及其衍生物的組合物，具體公開了規格為普伐他汀5mg、10mg、20mg、40mg和煙酸750mg的組合物的製備，但沒有公開其有益效果及最佳配比的藥理實驗數據。
中國專利申請CN1425374A公開了煙酸和洛伐他汀組合物，公開的比例是煙酸和洛伐他汀的重量比為25～50∶1，優選的比例是25∶1或37.5∶1，但沒有涉及煙酸和阿託伐他汀複方的最佳配比及相應藥理實驗數據。
發明目的本發明的目的是通過一系列科學的篩選實驗，提供一種新的治療高脂血症的藥物組合物，其優點是作用全面和效應增強、毒副作用低和使用方便。本藥物含有特定比例的煙酸和阿託伐他汀鈣鹽三水合物(以下簡稱阿託伐他汀鈣)，由於兩藥作用機制不同，組成組合物後降脂作用將更加全面，並且兩藥合用有協同作用，其降脂作用明顯優於相同劑量的單方；此外，通過合理選擇組合物中阿託伐他汀鈣的用量，使組合物在有效降低血脂水平的同時又無明顯的毒副作用，同時本組合物一日只需用藥一次，用藥方便，這將大大提高患者的順應性。
發明內容
本發明的組合物由煙酸和阿託伐他汀鈣以及藥用輔料組成，其中煙酸和阿託伐他汀鈣的重量比為30～240∶1，優選的比例的是30～90∶1，進一步優選的比例的是90∶1。該組合物的藥物製劑的劑型，包括片劑、膠囊、顆粒劑、丸劑、滴丸等固體製劑，可以按照本領域公知的一般製劑方法製備，煙酸含量相當於在將組合物給藥時約600～2250mg的日劑量，阿託伐他汀鈣含量相當於5～80mg的日劑量，其中優選阿託伐他汀鈣含量相當於10～30mg的日劑量。
本發明的組合物在製成固體製劑，如片劑或膠囊時，為達到持久的治療效果，優選地將有效量的煙酸製成緩釋部分，再與有效量的阿託伐他汀鈣共同製成緩釋製劑，如緩釋片、緩釋膠囊等。相應地，可藥用的輔料包括稀釋劑，如澱粉、乳糖、甘露醇、預膠化澱粉、糊精、微晶纖維素；崩解劑，如羧甲基澱粉鈉、羥丙基澱粉、低取代羥丙基纖維素、羧甲基纖維素鈉；緩釋劑，如乙基纖維素、羥丙基甲基纖維素-4M、羥丙基甲基纖維素-15M；優特奇RS-100、RL100、RS30D、RL30D、NE30D，以及蘇麗絲(Surelease，乙基纖維素的水分散體)粘合劑，如聚乙烯吡咯烷酮，交聯聚乙烯吡咯烷酮，潤滑劑，如硬脂酸鎂、滑石粉、微粉矽膠等。
本發明的組合物通過藥理方面的研究工作，表明當採用本發明的組合物，尤其是採用優選的配比時，與單獨應用有效量的煙酸或阿託伐他汀鈣相比，本發明的組合物給出令人吃驚的更好效果，同時毒性沒有增加，因而安全劑量範圍大，療效持續時間長，綜合效果好，使用方便。本發明的組合物可以每日1～2次給藥，優選為每日1次。
具體實施例方式
現通過如下實例進一步說明本發明的內容，但本發明的應用範圍不限於下列實例。
實例1a、煙酸 600g空白丸芯 250g7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇) 200g製備工藝將煙酸過120目篩，處方量稱取，倒入下料鬥中。開造粒包衣機，入風壓力0.5bar，入風溫度30℃，噴槍壓力(CYL)3bar，霧化壓力(CAP1)0.8bar，倒入空白丸芯，造粒，下料速度4rpm，蠕泵12％，轉盤轉速145rpm，噴7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇)。造粒結束，50℃烘乾，出料。
b、阿託伐他汀鈣 5g空白丸芯 30g7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇) 30g製備工藝將阿託伐他汀鈣過120目篩，處方量稱取，倒入下料鬥中。開造粒包衣機，入風壓力0.5bar，入風溫度30℃，CYL3bar，CAP10.8bar，倒入空白丸芯，造粒，下料速度4rpm，蠕泵6％，轉盤轉速160rpm，噴7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇)。造粒結束，45℃烘乾，出料。
c、將a和b製得的小丸採用硬膠囊藥物填充機按照每兩粒膠囊中含煙酸與阿託伐他汀鈣的重量分別為200mg和5mg進行填充，即可。
實例2a、煙酸 600g乳糖 30g羧甲基澱粉鈉 30g微晶纖維素18g6％PVP的無水乙醇溶液 100g硬脂酸鎂 2g製備工藝煙酸過100目篩，乳糖、羧甲基澱粉鈉、微晶纖維素過80目篩，稱取處方量的煙酸和乳糖、羧甲基澱粉鈉、微晶纖維素混合均勻，加入6％PVP無水乙醇溶液適量制粒，60℃乾燥，16目篩整幹顆粒，幹顆粒中加入處方量的硬脂酸鎂。
b、阿託伐他汀鈣10g羥丙基纖維素15g預膠化澱粉 10g6％PVP的無水乙醇溶液30g山榆酸甘油酯1g製備工藝阿託伐他汀鈣過100目篩，羥丙基纖維素、預膠化澱粉過80目篩，稱取處方量的阿託伐他汀鈣和羥丙基纖維素、預膠化澱粉混合均勻，加入6％PVP的無水乙醇溶液適量制粒，60℃乾燥，16目篩整幹顆粒，幹顆粒中加入處方量的山榆酸甘油酯。
c、將上述a，b兩種組分採用雙層壓片機衝壓片即得雙層片，每片含煙酸與阿託伐他汀鈣的重量分別為200mg和10mg。
實例3a、煙酸 600g乳糖 30g羧甲基澱粉鈉 30g微晶纖維素18g6％PVP的無水乙醇溶液 100g硬脂酸鎂 2g製備工藝煙酸過100目篩，乳糖、羧甲基澱粉鈉、微晶纖維素過80目篩，稱取處方量的煙酸和乳糖、羧甲基澱粉鈉、微晶纖維素混合均勻，加入6％PVP無水乙醇溶液適量制粒，60℃乾燥，16目篩整幹顆粒，幹顆粒中加入處方量的硬脂酸鎂。
b、阿託伐他汀鈣 20g羥丙基纖維素 30g預膠化澱粉20g6％PVP的無水乙醇溶液 50g山榆酸甘油酯 2g製備工藝阿託伐他汀鈣過100目篩，羥丙基纖維素、預膠化澱粉過80目篩，稱取處方量的阿託伐他汀鈣和羥丙基纖維素、預膠化澱粉混合均勻，加入6％PVP的無水乙醇溶液適量制粒，60℃乾燥，16目篩整幹顆粒，幹顆粒中加入處方量的山榆酸甘油酯。
c、將上述a，b兩種組分採用雙層壓片機衝壓片即得雙層片，每片含煙酸與阿託伐他汀鈣的重量分別為200mg和20mg。
實例4a、煙酸 900g羥丙基甲基纖維素-4M40g微晶纖維素 30g8％PVP的無水乙醇溶液 150g硬酯酸鎂 2g製備工藝煙酸過100目篩，羥丙基纖維素-4M、微晶纖維素過80目篩，稱取處方量的煙酸和羥丙基纖維素-4M、微晶纖維素混合均勻，加入8％PVP無水乙醇溶液適量制粒，60℃乾燥，16目篩整幹顆粒，幹顆粒中加入處方量的硬脂酸鎂。
b、阿託伐他汀鈣 20g羧甲基纖維素鈉 30g乳糖 20g6％PVP的95％乙醇溶液 50g硬酯酸鎂 2g製備工藝阿託伐他汀鈣過100目篩，羧甲基纖維素鈉、乳糖過80目篩，稱取處方量的阿託伐他汀鈣和羧甲基纖維素鈉、乳糖混合均勻，加入6％PVP的95％乙醇溶液適量制粒，60℃乾燥，16目篩整幹顆粒，幹顆粒中加入處方量的硬脂酸鎂。
c、將上述a，b兩種組分採用雙層壓片機衝壓即得雙層片，每片含煙酸與阿託伐他汀鈣的重量分別為300mg和20mg。
實例5a、煙酸 900g空白丸芯 250g7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇)200g製備工藝將煙酸過120目篩，處方量稱取，倒入下料鬥中。開造粒包衣機，入風壓力0.5bar，入風溫度30℃，CYL3bar，CAP10.8bar，倒入空白丸芯，造粒，下料速度4rpm，蠕泵12％，轉盤轉速145rpm，噴7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇)。造粒結束，50℃烘乾，出料。
b、a中製得的含煙酸小丸Surelease 90g滑石粉1g純水 50g製備工藝將a中製得的含煙酸小丸倒入轉盤，開造粒包衣機，入風壓力1.0bar，入風溫度30℃，CYL3bar，CAP11.5bar，蠕泵5％，轉盤轉速180rpm，噴入Surelease的純水溶液。包衣結束，50℃烘乾，出料。
c、按照實例5中b的要求製得阿託伐他汀鈣小丸，與本例b中製得的煙酸小丸採用硬膠囊藥物填充機按照每兩粒膠囊中含煙酸與阿託伐他汀鈣的重量分別為300mg和10mg進行填充，即可。
實例6a、煙酸 900g空白丸芯 300g7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇)200g製備工藝將煙酸過120目篩，處方量稱取，倒入下料鬥中。開造粒包衣機，入風壓力0.5bar，入風溫度30℃，CYL3bar，CAP10.8bar，倒入空白丸芯，造粒，下料速度4rpm，蠕泵12％，轉盤轉速145rpm，噴入7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇)。造粒結束，50℃烘乾，出料。
b、a中製得的含煙酸小丸乙基纖維素40g
硬脂酸 70g聚乙二醇-6000 6g滑石粉 12g95％乙醇 1000g製備工藝將a中製得的含煙酸小丸倒入下料鬥中。開造粒包衣機，入風溫度30℃，入風壓力0.5bar，入風溫度30℃，CYL3bar，CAP11.0bar，蠕泵6％，轉盤轉速175rpm，噴入乙基纖維素、硬脂酸和聚乙二醇-6000的95％乙醇溶液。包衣結束，50℃烘乾，出料。
c、阿託伐他汀鈣 5g空白丸芯 30g7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇) 30g製備工藝將阿託伐他汀鈣過120目篩，處方量稱取，倒入下料鬥中，開造粒包衣機，入風壓力0.5bar，入風溫度30℃，CYL3bar，CAP10.8bar，倒入空白丸芯，造粒。下料速度4rpm，蠕泵12％，轉盤轉速120rpm，噴入7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇)。造粒結束，45℃烘乾，出料。
d、將b與c製得的小丸採用硬膠囊藥物填充機按照每兩粒膠囊中含煙酸與阿託伐他汀鈣的重量分別為300mg和5mg進行填充，即可。
實例7a、煙酸 1200g甘露醇10g乳糖 40g微晶纖維素20g6％PVP的95％乙醇溶液 120g硬酯酸鎂 2g製備工藝煙酸過100目篩，甘露醇、乳糖、微晶纖維素過80目篩，稱取處方量的煙酸和甘露醇、乳糖、微晶纖維素混合均勻，加入6％PVP的95％乙醇溶液適量制粒，60℃乾燥，16目篩整幹顆粒，幹顆粒中加入處方量的硬脂酸鎂。
b、阿託伐他汀鈣 5g
預膠化澱粉50g甘露醇50g乳糖 40g6％PVP的95％乙醇溶液 100g微粉矽膠 5g製備工藝阿託伐他汀鈣過100目篩，預膠化澱粉、甘露醇、乳糖過80目篩，稱取處方量的阿託伐他汀鈣和預膠化澱粉、甘露醇、乳糖混合均勻，加入6％PVP的95％乙醇溶液適量制粒，60℃乾燥，16目篩整幹顆粒，幹顆粒中加入處方量的硬脂酸鎂。
c、將上述a，b兩種組分採用雙層壓片機衝壓即得雙層片，每片含煙酸與阿託伐他汀鈣的重量分別為400mg和5mg。
實例8a、煙酸 1200g乳糖 30g羥丙基甲基纖維素-15M 20g8％PVP的95％乙醇溶液 150g山榆酸甘油酯 2g製備工藝煙酸過100目篩，乳糖、羥丙基甲基纖維素-15M過80目篩，稱取處方量的煙酸和乳糖、羥丙基甲基纖維素-15M混合均勻，加入8％PVP的95％乙醇溶液適量制粒，60℃乾燥，16目篩整幹顆粒，幹顆粒中加入處方量的山榆酸甘油酯。
b、阿託伐他汀鈣 10g羥丙基纖維素 25g糊精 20g6％PVP的95％乙醇溶液 50g滑石粉2g製備工藝阿託伐他汀鈣過100目篩，羥丙基纖維素、糊精過80目篩，稱取處方量的阿託伐他汀鈣和羥丙基纖維素、糊精混合均勻，加入6％PVP的95％乙醇溶液適量制粒，60℃乾燥，16目篩整幹顆粒，幹顆粒中加入處方量的滑石粉。
c、將上述a，b兩種組分採用雙層壓片機衝壓即得雙層片，每片含煙酸與阿託伐他汀鈣的重量分別為400mg和10mg。
實例9煙酸和阿託伐他汀鈣複方治療大鼠高血脂症的複方篩選摘要本試驗的目的在於通過篩選確定毒性低、作用強、使用方便的煙酸和阿託伐他汀鈣複方製劑的組成。採用高脂飼料誘發大鼠高脂血症模型，給模型大鼠連續灌服煙酸(300～1200mg/kg)和(或)阿託伐他汀鈣(2.5～30mg/kg)14天。結果發現，煙酸和阿託伐他汀鈣伍用對高脂飼料所致的大鼠高脂血症有明顯的治療作用，降脂效果與兩種藥物的劑量相關，煙酸600mg/kg和阿託伐他汀鈣10mg/kg、煙酸600mg/kg和阿託伐他汀鈣20mg/kg及煙酸900mg/kg和阿託伐他汀鈣10mg/kg聯合用藥組效果顯著，可顯著降低大鼠血清總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇水平，顯著升高高密度脂蛋白膽固醇水平，並對上述指標均表現出協同作用。其中煙酸900mg/kg和阿託伐他汀鈣10mg/kg聯合用藥組效果最顯著，優選煙酸900mg/kg和阿託伐他汀鈣10mg/kg組成的複方。在本實驗劑量範圍內，聯合用藥組對與肝臟和肌肉毒性相關的血清酶活性無明顯影響。
1試驗目的通過篩選確定煙酸和阿託伐他汀鈣複方製劑的組成，以達到複方製劑毒副作用低、作用全面和增強、使用方便之目的。
2受試藥物藥品名稱煙酸批 號0208003純 度大於99.7％生產單位魯南製藥股份有限公司配製方法臨用前用1％羧甲基纖維素鈉(CMC)混勻，配成試驗所需濃度。
2.2他汀類藥物藥品名稱阿託伐他汀鈣(Atorvastatin)批 號031102純 度大於99.0％生產單位山東新時代藥業有限公司自製配製方法臨用前用1％CMC混勻，配成試驗所需濃度。
3動物3.1品系和來源Wistar大鼠，軍事醫學科學院醫學實驗動物中心繁殖，實驗動物質量許可證號為醫動字D01-3039。
3.2體重和性別年齡9周～10周，體重180-220g，雄性。
3.3飼養條件動物實驗室空氣定時排風、光照良好，常溫。每籠飼養5隻動物，飼以本院實驗動物中心專門為大鼠配製的膨化飼料，自由飲水。動物實驗條件合格證號為醫動字D01-2051。試驗開始前，觀察動物進食、活動及糞便等1周，選擇健康動物進入試驗。
4大鼠高脂血症模型製備[1]大鼠高脂血症模型採用高脂飼料致高脂血症法。高脂飼料配方如下基礎飼料86.3％、膽固醇3％、豬油10％、甲基硫氧嘧啶0.2％、豬膽鹽0.5％，保證各成分混合均勻。連續2周。給藥期間隔天給予高脂飼料。
5煙酸和阿託伐他汀鈣對正常大鼠血脂水平的影響5.1劑量設置依據臨床上煙酸的劑量750～2000mg/次(按人體重60kg計算，上述劑量為12.6～35mg/kg)，3次/日，按體表面積為單位的劑量等效原則推算，上述人常用劑量換算成大鼠劑量約為150～400mg/kg/day。結合文獻報導[3]，將本試驗中煙酸的劑量設定為300、600、900、1200mg/kg。
臨床上阿託伐他汀鈣的劑量為10mg/次(按人體重60kg計算，上述劑量為0.17mg/kg)，1次/日，每日量最大不超過80mg[3]。按體表面積為單位的劑量等效原則推算，上述人常用劑量換算成大鼠劑量約為0.85mg/kg。結合文獻報導[5-8]，將本試驗中阿託伐他汀鈣的劑量設定為2.5、5、10、20、30mg/kg。
5.2組別設置依據上述劑量設置，按血清總膽固醇水平均衡原則，將正常動物隨機分為(1)正常對照組；(2)煙酸300mg/kg組；(3)煙酸600mg/kg組；(4)煙酸900mg/kg組；(5)煙酸1200mg/kg組；(6)阿託伐他汀鈣2.5mg/kg組；(7)阿託伐他汀鈣5mg/kg組；(8)阿託伐他汀鈣10mg/kg組；(9)阿託伐他汀鈣20mg/kg組；(10)阿託伐他汀鈣30mg/kg組；(11)煙酸600mg/kg和阿託伐他汀鈣5mg/kg組；(12)煙酸600mg/kg和阿託伐他汀鈣10mg/kg組；(13)煙酸600mg/kg和阿託伐他汀鈣20mg/kg組；(14)煙酸900mg/kg和阿託伐他汀鈣5mg/kg組；(15)煙酸900mg/kg和阿託伐他汀鈣10mg/kg組；(16)煙酸900mg/kg和阿託伐他汀鈣20mg/kg組；(17)煙酸1200mg/kg和阿託伐他汀鈣5mg/kg組；(18)煙酸1200mg/kg和阿託伐他汀鈣10mg/kg組。每組10隻。
5.3給藥臨床擬用的給藥途徑為口服，故本試驗採用灌胃法給藥，連續灌胃4天。灌胃均在動物進食後進行。每天1次。給藥體積為0.3ml/100g體重。
5.4檢測指標血清化學指標包括總膽固醇(TC)、丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、肌酸激酶(CK)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-L)。其中丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、肌酸激酶(CK)檢測試劑採用北京中生生物工程高技術公司產品，用SABA/18全自動生化分析儀測定；其餘試劑採用日本羅氏試劑公司產品，用日立7020自動生化分析儀測定。測定方法參照試劑說明書取血樣前禁食16小時。
6煙酸和阿託伐他汀鈣對高脂血症大鼠血脂水平的影響6.1劑量設置依據同5.1正常大鼠實驗。
6.2組別設置依據上述劑量設置，按血清總膽固醇水平均衡原則，將模型大鼠隨機分為(1)正常對照組；(2)模型對照組；(3)煙酸300mg/kg組；(4)煙酸600mg/kg組；(5)煙酸900mg/kg組；(6)煙酸1200mg/kg組；(7)阿託伐他汀鈣2.5mg/kg組；(8)阿託伐他汀鈣5mg/kg組；(9)阿託伐他汀鈣10mg/kg組；(10)阿託伐他汀鈣20mg/kg組；(11)阿託伐他汀鈣30mg/kg組；(12)煙酸600mg/kg和阿託伐他汀鈣5mg/kg組；(13)煙酸600mg/kg和阿託伐他汀鈣10mg/kg組；(14)煙酸600mg/kg和阿託伐他汀鈣20mg/kg組；(15)煙酸900mg/kg和阿託伐他汀鈣5mg/kg組；(16)煙酸900mg/kg和阿託伐他汀鈣10mg/kg組；(17)煙酸900mg/kg和阿託伐他汀鈣20mg/kg組；(18)煙酸1200mg/kg和阿託伐他汀鈣5mg/kg組；(19)煙酸1200mg/kg和阿託伐他汀鈣10mg/kg組。每組10隻。
6.3給藥臨床擬用的給藥途徑為口服，故本試驗採用灌胃法給藥，連續灌胃14天。灌胃均在動物進食後進行。每天1次。給藥體積為0.3ml/100g體重。
6.4檢測指標同5.4正常大鼠實驗。
7煙酸和阿託伐他汀鈣複方不同組分相互影響試驗7.1組別設置從療效較顯著的煙酸和阿託伐他汀鈣劑量組中，確定煙酸和阿託伐他汀鈣複方的劑量(1)正常對照組；(2)模型對照組；(3)煙酸600mg/kg；(4)煙酸900mg/kg；(5)阿託伐他汀鈣10mg/kg；(6)阿託伐他汀鈣20mg/kg；(7)煙酸600mg/kg和阿託伐他汀鈣10mg/kg組複方組；(8)煙酸600mg/kg和阿託伐他汀鈣20mg/kg組複方組；(9)煙酸900mg/kg和阿託伐他汀鈣10mg/kg組複方組。每組10隻。分組前測定血清總膽固醇水平，按均衡原則隨機分組。每組10隻。
7.2給藥和檢測指標同前述6.3和5.4。
8試驗結果
8.1煙酸和阿託伐他汀鈣對正常大鼠血脂水平的影響正常大鼠給藥4天後，煙酸、阿託伐他汀鈣和聯合用藥組的總膽固醇、血清甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇均有所降低，高密度脂蛋白膽固醇水平升高，見表1。
表1 煙酸和阿託伐他汀鈣及複方對正常大鼠血脂的影響血清總膽固醇血清甘油三酯 低密度脂蛋白膽固 高密度脂蛋白膽組別(mmol/L) (mmol/L)醇(mmol/L) 固醇(mmol/L)正常對照組 1.73±0.18 0.73±0.24 0.33±0.11 0.96±0.18煙酸300mg/kg 1.61±0.34 0.71±0.26 0.31±0.12 0.98±0.17煙酸600mg/kg 1.53±0.27 0.69±0.32 0.27±0.12 0.99±0.22煙酸900mg/kg 1.51±0.27*0.63±0.29 0.28±0.13 1.16±0.25煙酸1200mg/kg 1.48±0.26*0.57±0.35 0.25±0.15 1.19±0.12**阿託伐他汀鈣2.5mg/kg 1.67±0.32 0.69±0.34 0.31±0.14 0.98±0.12阿託伐他汀鈣5mg/kg 1.63±0.31 0.67±0.29 0.26±0.15 0.97±0.10阿託伐他汀鈣10mg/kg1.51±0.30 0.65±0.35 0.24±0.10*1.05±0.23阿託伐他汀鈣20mg/kg1.45±0.23*0.55±0.17 0.22±0.09*1.06±0.14阿託伐他汀鈣30mg/kg1.40±0.28*0.51±0.19*0.19±0.11*1.06±0.17煙酸600+阿託5mg/kg 1.55±0.25 0.61±0.36 0.23±0.10*1.07±0.22煙酸600+阿託10mg/kg1.46±0.26*0.49±0.10*0.19±0.11**1.16±0.15*煙酸600+阿託20mg/kg1.39±0.30**0.46±0.12**0.17±0.07***1.18±0.15**煙酸900+阿託5mg/kg 1.44±0.24*0.63±0.23 0.26±0.08 0.98±0.23煙酸900+阿託10mg/kg1.40±0.25*0.50±0.09*0.18±0.13**1.21±0.16**煙酸900+阿託20mg/kg1.44±0.26*0.50±0.16*0.19±0.08**1.08±0.23煙酸1200+阿託5mg/kg1.43±0.30*0.52±0.14*0.25±0.10 1.04±0.16煙酸1200+阿託10mg/kg 1.41±0.35*0.51±0.16*0.24±0.09*1.12±0.20注與正常對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.018.2煙酸和阿託伐他汀鈣對模型大鼠血脂水平的影響大鼠飼以高脂飼料14天後分組給藥。煙酸的劑量範圍為300～1200mg/kg，阿託伐他汀鈣的劑量範圍為2.5～30mg/kg，組成聯合用藥組。給藥14天後，與模型對照組比較，煙酸和阿託伐他汀鈣各劑量組血清總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇均有不同程度的下降，高密度脂蛋白膽固醇水平均有所升高，見表2。
與模型對照組相比，煙酸600mg/kg和阿託伐他汀鈣10mg/kg、煙酸600mg/kg和阿託伐他汀鈣20mg/kg及煙酸900mg/kg和阿託伐他汀鈣10mg/kg三個聯合用藥組大鼠的血清總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇水平均顯著降低，高密度脂蛋白膽固醇水平均顯著升高。與相同劑量的煙酸或阿託伐他汀鈣單方組比較，上述三個聯合用藥組血清總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇水平均顯著降低，高密度脂蛋白膽固醇水平均顯著升高，並對上述指標均表現出協同作用。其中以煙酸900mg/kg和阿託伐他汀鈣10mg/kg聯合用藥組效果最為顯著。
表2煙酸和阿託伐他汀鈣及複方對模型大鼠血脂的影響
注與正常對照組比較，###P＜0.001；與模型對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.0018.3煙酸和阿託伐他汀鈣對模型大鼠血清酶活性的影響本實驗通過測定用藥14天後高血脂模型大鼠血清中丙氨酸氨基轉移酶和肌酸激酶的水平，來評價煙酸和阿託伐他汀鈣及複方對模型大鼠肝臟功能和骨骼肌組織的影響。結果表明，與模型對照組相比，煙酸各劑量(300～1200mg/kg)組模型大鼠血清丙氨酸氨基轉移酶和肌酸激酶水平均無顯著差異(P＞0.05)；阿託伐他汀鈣各劑量(2.5～30mg/kg)組模型大鼠血清中上述指標亦未見顯著差異(P＞0.05)，阿託伐他汀鈣和煙酸各聯合用藥組大鼠血清丙氨酸氨基轉移酶和血清肌酸激酶均無明顯變化(P＞0.05)，見表3。
表3煙酸和阿託伐他汀鈣及複方對模型大鼠血清丙氨酸氨基轉移酶和肌酸激酶的影響丙氨酸氨基轉移酶組別肌酸激(U/L)(nmol.s-1/L)正常對照組 639.0±111.0 351.3±144.7模型對照組 667.1±109.0 373.5±112.9煙酸300mg/kg640.9±117.1 361.2±106.9煙酸600mg/kg645.9±124.4 354.6±1104煙酸900mg/kg655.0±110.0 380.3±120.6煙酸1200mg/kg 642.2±114.7 377.5±103.9阿託伐他汀鈣2.5mg/kg635.6±115.8 364.6±105.4阿託伐他汀鈣5mg/kg 674.3±132.4 367.5±132.1阿託伐他汀鈣10mg/kg 650.9±101.3 389.2±119.6阿託伐他汀鈣20mg/kg 640.7±95.1 378.6±109.8阿託伐他汀鈣30mg/kg 66.9±117.2 384.0±120.5煙酸600+阿託5mg/kg 653.6±110.0 374.3±101.0煙酸600+阿託10mg/kg 669.5±123.5 353.5±124.1煙酸600+阿託20mg/kg 641.7±125.6 367.6±111.9煙酸900+阿託5mg/kg 604.3±132.1 361.7±115.7煙酸900+阿託10mg/kg 647.5±128.7 370.5±130.5煙酸900+阿託20mg/kg 646.3±124.5 372.0±117.8煙酸1200+阿託5mg/kg 651.4±136.7 369.6±103.7煙酸1200+阿託10mg/kg647.8±140.1 375.9±119.48.4煙酸和阿託伐他汀鈣複方中不同組分相互影響試驗高血脂模型大鼠連續給藥14天後，與相同劑量的單方相比，煙酸和阿託伐他汀鈣聯合用藥組均能明顯降低模型大鼠血清中總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇水平以及明顯升高高密度脂蛋白膽固醇水平，見表4。
綜合分析，與模型對照組相比，煙酸600mg/kg和阿託伐他汀鈣10mg/kg、煙酸600mg/kg和阿託伐他汀鈣20mg/kg及煙酸900mg/kg和阿託伐他汀鈣10mg/kg聯合用藥組效果顯著，可顯著降低大鼠血清總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇水平，顯著升高高密度脂蛋白膽固醇水平。與相同劑量的煙酸或阿託伐他汀鈣單方組比較，上述三個聯合用藥組血清總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇水平均顯著降低，高密度脂蛋白膽固醇水平均顯著升高，三個聯合用藥組對上述指標均表現出協同作用。其中煙酸900mg/kg和阿託伐他汀鈣10mg/kg聯合用藥組效果最顯著，因此優選煙酸900mg/kg和阿託伐他汀鈣10mg/kg組成的複方。
表4煙酸和阿託伐他汀鈣複方中不同組分治療大鼠高脂血症的效果血清總膽固醇 血清甘油三酯 低密度脂蛋白膽固醇 高密度脂蛋白膽固組別(mmol/L) (mmol/L) (mmol/L) 醇(mmol/L)正常對照組 2.08±0.91 0.77±0.130.31±0.19 1.25±0.55模型對照組 12.10±2.29###2.16±0.55###8.90±1.31###3.16±1.22***煙酸600mg/kg10.35±1.621.78±0.687.25±1.88*4.22±1.15煙酸900mg/kg8.67±1.83**1.69±0.516.93±1.28**4.56±0.57*阿託伐他汀鈣10mg/kg 10.23±1.67*1.53±0.67*731±1.85*4.45±1.36*阿託伐他汀鈣20mg/kg 9.66±2.27*1.46±0.51*6.89±1.61**4.50±1.04*煙酸600+阿託10mg/kg 7.40±1.65***，！！，@@0.98±0.27***，！！，@4.95±1.21***，！！，@@5.98±1.02***，!！，@煙酸600+阿託20mg/kg 6.39±1.86***，！！！，0.83±0.21***，！！！，4.29±1.68***，！！，6.01±1.37***，！！，
煙酸900+阿託10mg/kg 4.86±1.08***，^^^，@@@0.75±0.28***，^^^，@@3.92±1.25***，^^^，@@@6.43±1.02***，^^^，@@注與正常對照組比較，###P＜0.01，#P＜0.05與模型對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001與煙酸600mg/kg組比較，！！！P＜0.001，！！P＜0.01與阿託伐他汀鈣10mg/kg組比較，@P＜0.05，@@P＜0.01。@@@P＜0.001與煙酸900mg/kg組比較，^^^P＜0.001與阿託伐他汀鈣20mg/kg組比較，P＜0.001，P＜0.059結論煙酸和阿託伐他汀鈣伍用對高脂飼料所致的大鼠高脂血症有明顯的治療作用，降脂效果與兩種藥物的劑量相關，煙酸600mg/kg和阿託伐他汀鈣10mg/kg、煙酸600mg/kg和阿託伐他汀鈣20mg/kg及煙酸900mg/kg和阿託伐他汀鈣10mg/kg聯合用藥組效果顯著，可顯著降低大鼠血清總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇水平，顯著升高高密度脂蛋白膽固醇水平，並對上述指標均表現出協同作用。其中煙酸900mg/kg和阿託伐他汀鈣鈣10mg/kg聯合用藥組效果最顯著，優選煙酸900mg/kg和阿託伐他汀鈣10mg/kg組成的複方。在本實驗劑量範圍內，聯合用藥組對血清酶活性無明顯影響，初步表明對肝和橫紋肌無明顯的毒性作用。此外，目前煙酸單方的臨床用法為3次/日，本實驗證明，煙酸1次/日仍有顯著的降血脂作用，且毒性小，這為煙酸和阿託伐他汀鈣組成複方後一日僅用藥1次提供了可靠的實驗依據，這必將大大方便患者服用，提高患者的順應性。
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權利要求
1.一種治療高血脂症組合物，其特徵在於所述的組合物包括(1)第一活性成分，它是煙酸(NicotinicAcid)；(2)第二活性成分，它選自阿託伐他汀(Atorvastain)、或其可以藥用的鹽、酯或溶劑化物(3)一種或多種其它可藥用的活性成分或者非活性成分。
2.按照權利要求1所述的組合物，其特徵在於所述的阿託伐他汀可以藥用的鹽為合適的阿託伐他汀生理可接受的鹽，包括衍生自無機的和有機的鹼所形成鹽，如鈉鹽、鈣鹽、鉀鹽、鋅鹽、鐵鹽等。
3.按照權利要求1所述的組合物，其特徵在於所述的阿託伐他汀可以藥用的酯為合適的阿託伐他汀生理可接受的酯，包括衍生自脂肪醇、芳香醇、雜環醇所形成的酯，如甲醇、己醇、烯丙醇、苯醇等。
4.按照權利要求1～2所述的組合物，其特徵是第二個活性成分為阿託伐他汀鈣。
5.按照權利要求4所述的組合物，其特徵是煙酸和阿託伐他汀鈣的重量比為(30～240)∶1。
6.按照權利要求4所述的組合物，其特徵是優選煙酸和阿託伐他汀鈣的重量比是(30～90)∶1。
7.按照權利要求4所述的組合物，其特徵是進一步優選煙酸和阿託伐他汀鈣的重量比是90∶1。
8.按照權利要求7所述的組合物，其特徵是進一步優選煙酸的量是900mg，相應地，阿託伐他汀鈣的重量比是10mg。
9.1～8所述的組合物製成的醫療用製劑。
10.按照權利要求1～9所述的組合物，其劑型包括片劑、膠囊、顆粒劑、丸劑、滴丸。
全文摘要
本發明提供一種新的治療高脂血症的藥物組合物，其特徵是含有有效量的煙酸(Nicotinic Acid)和阿託伐他汀(Atorvastatin)鈣，重量比為(30～240)∶1，優選重量比為(30～90)∶1，進一步優選重量比為90∶1。其降脂作用明顯優於相同劑量的單方，表明兩藥合用有協同作用，同時又無明顯的毒性作用。
文檔編號A61P3/06GK1568993SQ20041002406
公開日2005年1月26日 申請日期2004年4月30日 優先權日2004年4月30日
發明者趙志全 申請人:魯南製藥股份有限公司