一種大葉白蠟再生植株的快速繁殖方法
2023-06-24 02:26:26 2
一種大葉白蠟再生植株的快速繁殖方法
【專利摘要】本發明涉及一種大葉白蠟植株再生的快速繁殖方法,包括葉片的消毒、愈傷組織的誘導、愈傷組織的分化、生根培養、煉苗移栽。採用本發明的大葉白蠟組培誘導率高,再生率高,且生長快速,遺傳穩定性好,可以短期內獲得大量的大葉白蠟幼苗。
【專利說明】 一種大葉白蠟再生植株的快速繁殖方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及大葉白蠟組織培養的快繁方法,屬於植物【技術領域】。
【背景技術】
[0002]大葉白臘/7Tarizw1Samericana L var juglandifolia 又名花曲柳,木犀科涔屬,落葉喬木,喜光,耐寒。對土壤要求不嚴。產黃河流域各省和東北三省。生山坡、河岸、路旁,海拔1500m以下。俄羅斯、朝鮮也有分布。木材硬而緻密,為制家具的好材料。樹生長較快,可用行道樹;種子油供制肥皂用。樹皮含有苦芩甙、丁香甙、槲皮素,鞣質等可做藥用,清肝明目,收斂止痢。主治風毒赤眼,慢性痢疾。目前市場上對大葉白蠟的需求量很大,大葉白蠟主要採用常規種植方法,使用組培技術對其進行快繁,可以顯著縮短周期,保持遺傳穩定性,滿足市場的需要。
【發明內容】
[0003]本發明所要解決的技術問題是提供一種大葉白蠟的快速繁殖方法,由該方法所製備得到的大葉白蠟組培誘導率高,再生率高,且生長快速,遺傳穩定性好,可以短期內獲得大量的大葉白蠟幼苗。
[0004]本發明所要解決的技術問題是通過以下方案來實現的:
取大葉白蠟幼嫩葉片,在含抑菌劑的洗潔精中浸泡15min,流水衝洗20min,超淨工作檯上1%高錳酸鉀處理lOmin,無菌水衝洗5遍,消毒處理過的大葉白蠟葉片接入培養基為PDA+2,4-D4.0mg/L+6-BA0.2mg/l+VC5.0mg/1誘導培養基中進行愈傷組織誘導,附加蔗糖20g/L,瓊脂6.0g/L, PH5.83,光照15001x,溫度21 ± I °C,誘導出來的愈傷組織放入分化培養基改良PDA+6-BA0.3-0.5mg/L+TDZ0.1-0.5mg/L,附加蔗糖40g/L,瓊脂6.0g/L, PH5.83,光照30001x,溫度23土 1°C,分化培養出來的大葉白蠟芽苗放入生根培養基 1/2⑶+ΝΑΑ0.01-0.02mg/L,附加蔗糖 20g/L,瓊脂 6.0g/L, PH5.83,光照 60001x,溫度
23± 1°C,將生長良好、植株健壯根系發達的試管苗,打開瓶蓋,洗去根部培養基,栽植於泥炭土:鋸末=2:1的基質中,基質使用高壓滅菌鍋121°C高壓滅菌20min,澆足水後覆蓋聚乙烯膜小拱棚,放入溫室,溼度保持在90%。
[0005]採用本發明製備的大葉白蠟成活率高,周期短,產量大,能耗少,利於大規模種植。
[0006]下面將結合【具體實施方式】對本發明作進一步闡述,但本發明要求保護的範圍並不局限於下列實施方式。
【具體實施方式】
[0007]實施例1
取大葉白蠟幼嫩葉片,在含抑菌劑的洗潔精中浸泡15min,流水衝洗20min,超淨工作檯上1%高錳酸鉀處理lOmin,無菌水衝洗5遍,消毒處理過的大葉白蠟葉片接入培養基為PDA+2,4-D4.0mg/L+6-BA0.2mg/l+VC5.0mg/l誘導培養基中進行愈傷組織誘導,附加蔗糖20g/L,瓊脂6.0g/L, PH5.83,光照15001x,溫度21 土 1°C,誘導出來的愈傷組織放入分化培養基改良 PDA+6-BA0.3mg/L+TDZ0.lmg/L,附加蔗糖 40g/L,瓊脂 6.0g/L, PH5.83,光照30001x,溫度23土1°C,分化培養出來的大葉白蠟芽苗放入生根培養基1/2⑶+NAA0.0lmg/L,附加蔗糖20g/L,瓊脂6.0g/L, PH5.83,光照60001x,溫度23± I°C,將生長良好、植株健壯根系發達的試管苗,打開瓶蓋,洗去根部培養基,栽植於泥炭土:鋸末=2:1的基質中,基質使用高壓滅菌鍋121°C高壓滅菌20min,澆足水後覆蓋聚乙烯膜小拱棚,放入溫室,溼度保持在90%,成活率89%。
[0008]實施例2
取大葉白蠟幼嫩葉片,在含抑菌劑的洗潔精中浸泡15min,流水衝洗20min,超淨工作檯上1%高錳酸鉀處理lOmin,無菌水衝洗5遍,消毒處理過的大葉白蠟葉片接入培養基為PDA+2,4-D4.0mg/L+6-BA0.2mg/l+VC5.0mg/1誘導培養基中進行愈傷組織誘導,附加蔗糖20g/L,瓊脂6.0g/L, PH5.83,光照15001x,溫度21 ± I °C,誘導出來的愈傷組織放入分化培養基改良 PDA+6-BA0.4mg/L+TDZ0.3mg/L,附加蔗糖 40g/L,瓊脂 6.0g/L, PH5.83,光照30001x,溫度23土 1°C,分化培養出來的大葉白蠟芽苗放入生根培養基1/2⑶+ΝΑΑ0.02mg/L,附加蔗糖20g/L,瓊脂6.0g/L, PH5.83,光照60001x,溫度23土 1°C,將生長良好、植株健壯根系發達的試管苗,打開瓶蓋,洗去根部培養基,栽植於泥炭土:鋸末=2:1的基質中,基質使用高壓滅菌鍋121°C高壓滅菌20min,澆足水後覆蓋聚乙烯膜小拱棚,放入溫室,溼度保持在90%,成活率90%。
[0009]實施例3
取大葉白蠟幼嫩葉片,在含抑菌劑的洗潔精中浸泡15min,流水衝洗20min,超淨工作檯上1%高錳酸鉀處理lOmin,無菌水衝洗5遍,消毒處理過的大葉白蠟葉片接入培養基為PDA+2,4-D4.0mg/L+6-BA0.2mg/l+VC5.0mg/l誘導培養基中進行愈傷組織誘導,附加蔗糖20g/L,瓊脂6.0g/L, PH5.83,光照15001x,溫度21 土 1°C,誘導出來的愈傷組織放入分化培養基改良 PDA+6-BA0.5mg/L+TDZ0.5mg/L,附加蔗糖 40g/L,瓊脂 6.0g/L, PH5.83,光照30001x,溫度23土1°C,分化培養出來的大葉白蠟芽苗放入生根培養基1/2⑶+ΝΑΑ0.02mg/L,附加蔗糖20g/L,瓊脂6.0g/L, PH5.83,光照60001x,溫度23± I°C,將生長良好、植株健壯根系發達的試管苗,打開瓶蓋,洗去根部培養基,栽植於泥炭土:鋸末=2:1的基質中,基質使用高壓滅菌鍋121°C高壓滅菌20min,澆足水後覆蓋聚乙烯膜小拱棚,放入溫室,溼度保持在90%,成活率88%。
【權利要求】
1.一種大葉白蠟再生植株的快速繁殖方法,包括葉片的消毒、愈傷組織的誘導、愈傷組織的分化、生根培養、煉苗移栽,其主要步驟如下: (1)取大葉白蠟的幼嫩葉片,對其進行消毒處理; (2)將步驟(I)消毒處理過的大葉白蠟葉片接入培養基為PDA+2,4-D4.0mg/L+6-BA0.2mg/l+VC5.0mg/1誘導培養基中進行愈傷組織誘導,附加蔗糖20g/L,瓊脂6.0g/L, PH5.83,光照 15001x,溫度 21±1°C ; (3)取步驟(2)誘導出來的愈傷組織放入分化培養基改良PDA+6-BA0.3-0.5mg/L+TDZ0.1-0.5mg/L,附加蔗糖 40g/L,瓊脂 6.0g/L, PH5.83,光照 30001x,溫度 23±1°C ; (4)取步驟(3)分化培養出來的大葉白蠟芽苗放入生根培養基1/2⑶+ΝΑΑ0.01-0.02mg/L,附加蔗糖 20g/L,瓊脂 6.0g/L, PH5.83,光照 60001x,溫度 23±1°C ; (5)取步驟(4)生根後的大葉白蠟試管苗進行煉苗移栽。
2.按照權利要求1所述的一種大葉白蠟再生植株的快速繁殖方法,其特徵在於:步驟(1)中所述大葉白蠟無菌葉片的獲得為,取大葉白蠟幼嫩葉片,在含抑菌劑的洗潔精中浸泡15min,流水衝洗20min,超淨工作檯上1%高猛酸鉀處理1min,無菌水衝洗5遍。
3.按照權利要求1所述的一種大葉白蠟再生植株的快速繁殖方法,其特徵在於:步驟(2)誘導培養基加入了VC,可以防止愈傷組織的褐化。
4.按照權利要求1所述的一種大葉白蠟再生植株的快速繁殖方法,其特徵在於:步驟(5)中大葉白蠟的煉苗方法為將生長良好、植株健壯根系發達的試管苗,打開瓶蓋,洗去根部培養基,栽植於泥炭土:鋸末=2:1的基質中,基質使用高壓滅菌鍋121 °C高壓滅菌20min,澆足水後覆蓋聚乙烯膜小拱棚,放入溫室,溼度保持在90%。
【文檔編號】A01H4/00GK104255469SQ201410463155
【公開日】2015年1月7日 申請日期:2014年9月12日 優先權日:2014年9月12日
【發明者】楊存 申請人:南京通澤農業科技有限公司