一種富硒蟲草花的生產方法與流程

2023-06-16 15:49:31 1

本發明屬於蟲草花生產領域，具體涉及一種富硒蟲草花的生產方法。

背景技術：

蛹蟲草是子囊菌亞門，核菌綱，肉座菌目，麥角菌科，通常稱為北蟲草，活性成分包括蟲草菌素、腺苷、蟲草多糖和蟲草酸等。所述蟲草菌素（cordycepin）又稱蟲草素，是一種核苷類抗生素，具有多種生理活性，如抑菌、抗腫瘤、抑制病毒作用，以及增強免疫功能和防治心腦血管疾病等作用。目前，蛹蟲草因為價格低廉，營養成分與野生冬蟲夏草媲美，深受人們喜歡。

申請號201511030322.1的中國專利公開了一種富硒蟲草花的生產方法，具體公開了生產方法按如下步驟進行：(1)斜面培養：將出發菌株蛹蟲草接種於斜面培養基，20～30℃恆溫培養7～10d，獲得斜面菌體；所述斜面培養基的配方為：蛋白腖8～12g/l、葡萄糖30～50g/l、瓊脂13～20g/l、氯黴素0.08～0.12g/l，溶劑為水，ph為5.5～6.5；(2)種子液培養：將步驟(1)獲得的斜面菌體接種至種子培養基中，在20～30℃，150～200r/min的搖床條件下振蕩培養7～10d，獲得種子液；所述種子培養基的配方為：葡萄糖10～15g/l、k2hpo4·3h2o0.4～0.6g/l、kh2po40.4～0.6g/l、l-甘氨酸0.8～1.2g/l、mgso4·7h2o0.4～0.6g/l、氯黴素0.08～0.12g/l，溶劑為水，ph為5.5～6.5；(3)固體發酵：將烘乾至恆重的啤酒糟粉末與亞硒酸鈉、水混合均勻，118～130℃滅菌20～30min，得到固體發酵培養基，冷卻待用；將步驟(2)培養好的種子液接種至所得固體發酵培養基中，在20～30℃進行恆溫發酵培養30～40d，得到成品富硒蟲草花；所述種子液的接種體積量為5～15ml/100g固體發酵培養基；所述亞硒酸鈉的添加量以烘乾至恆重的啤酒糟粉末的質量計為15～25mg/kg；所述烘乾至恆重的啤酒糟粉末與水的料液質量比為1：2～3。本方法所得蟲草花含硒量高，以廢棄物啤酒糟為基質，成本低。但是培養方法比較常規，蟲草花產量有待提高，且蟲草素的含量低。

技術實現要素：

針對現有技術的不足，本發明的目的在於提供一種富硒蟲草花的生產方法，該蟲草花產量高，蟲草素含量高，且含硒豐富，非常適合給腦力勞動者使用。

為解決現有技術問題，本發明採取的技術方案為：

一種富硒蟲草花的生產方法，包括以下步驟：步驟1，將蟲草花菌種接種於斜面培養基中，以2-4℃/s的恆速升溫至15-22℃靜置培養3-5天得斜面菌種；步驟2，將純化後的斜面菌種置於等離子照射2-5s後，接入種子培養基中，22-28℃下恆溫下搖床培養5-7天後，獲得種子液；步驟3，將種子培養液接入固體發酵培養基中間歇式培養，所述間歇式培養條件白天溫度25-28℃，通氣量1.1-1.8v/v，光強度120-150lx，夜間溫度30-32℃，通氣量1.4-1.6v/v，光強度50-80lx，所述固體發酵培養基包括以下原料：豆渣、花生殼、水、螯合錫、螯合鐵、檸檬酸、醋酸鈉、棉花籽、納米銀顆粒、氯黴素、皂角、維生素c、馬鈴薯、胡蘿蔔。

作為改進的是，步驟1中斜面培養基的配方：蛋白腖9-11g/l、葡萄糖41-48g/l、瓊脂12-20g/l、氯黴素0.08-0.12g/l、碳纖維1-8g/l，溶劑為水，ph為5.5-6.5。

作為改進的是，步驟2中種子培養基的配方：葡萄糖10-15g/l、k2hpo4·3h2o0.4-0.6g/l、kh2po40.4-0.6g/l、l-甘氨酸0.8-1.2g/l、mgso4·7h2o0.4-0.6g/l、氯黴素0.08-0.12g/l，溶劑為水，ph為5.5-6.5。

作為改進的是，步驟3中固體發酵培養基的配方：豆渣35-50g/l、花生殼12-18g/l、螯合錫1-3g/l、螯合鐵0.4-1.8g/l、檸檬酸5-8g/l、醋酸鈉4-10g/l、棉花籽12-18g/l、納米銀顆粒0.01-0.08g/l、氯黴素0.05-0.07g/l、皂角12-18g/l、維生素c0.01-0.04g/l、馬鈴薯12-18g/l、胡蘿蔔4-12g/l，溶劑為水，ph為6.2-6.7。

作為進一步改進的是，步驟3中固體發酵培養基的製備方法，包括以下步驟：第一步，將馬鈴薯和胡蘿蔔蒸熟後，與豆渣和花生殼混合投入球磨機中磨碎得第一混合物；第二步，將第一混合物、螯合錫、螯合鐵、檸檬酸、醋酸鈉、納米銀顆粒、氯黴素、維生素c、水混合物攪拌，再加入棉花籽攪拌均勻即可。

作為進一步改進的是，第二步中的攪拌速度為250-280rpm。

與現有技術相比，本發明方法過程簡單，等離子照射和間歇式培養協同作用，大大節省了資源，提高了培養成果，其中所得蟲草花產量至少提高了12%，且含硒量提高了0.5-0.8mg/g，蟲草素的含量提高了25-29%。

具體實施方式

實施例1

一種富硒蟲草花的生產方法，包括以下步驟：步驟1，將蟲草花菌種接種於斜面培養基中，以2℃/s的恆速升溫至15℃靜置培養3天得斜面菌種；步驟2，將純化後的斜面菌種置於等離子照射2s後，接入種子培養基中，22℃下恆溫下搖床培養5天後，獲得種子液；步驟3，將種子培養液接入固體發酵培養基中間歇式培養，所述間歇式培養條件白天溫度25℃，通氣量1.1v/v，光強度120lx，夜間溫度30℃，通氣量1.4v/v，光強度50lx。

步驟1中斜面培養基的配方：蛋白腖9g/l、葡萄糖41g/l、瓊脂12g/l、氯黴素0.08g/l、碳纖維1g/l，溶劑為水，ph為5.5。

步驟2中種子培養基的配方：葡萄糖10g/l、k2hpo4·3h2o0.4g/l、kh2po40.4g/l、l-甘氨酸0.8g/l、mgso4·7h2o0.4g/l、氯黴素0.08g/l，溶劑為水，ph為5.5。

步驟3中固體發酵培養基的配方：豆渣35g/l、花生殼12g/l、螯合錫1g/l、螯合鐵0.4g/l、檸檬酸5g/l、醋酸鈉4g/l、棉花籽12g/l、納米銀顆粒0.01g/l、氯黴素0.05g/l、皂角12g/l、維生素c0.01g/l、馬鈴薯12g/l、胡蘿蔔4g/l，溶劑為水，ph為6.2。

上述步驟3中固體發酵培養基的製備方法，包括以下步驟：步驟1，將馬鈴薯和胡蘿蔔蒸熟後，與豆渣和花生殼混合投入球磨機中磨碎得第一混合物；步驟2，將第一混合物、螯合錫、螯合鐵、檸檬酸、醋酸鈉、納米銀顆粒、氯黴素、維生素c、水混合物以250rpm的速度攪拌，再加入棉花籽攪拌均勻即可。

與申請號201511030322.1的中國專利中實施例1的蟲草花相比，產量提高了12%，且含硒量提高了0.5mg/g，蟲草素的含量提高了25%。

實施例2

一種富硒蟲草花的生產方法，包括以下步驟：步驟1，將蟲草花菌種接種於斜面培養基中，以3℃/s的恆速升溫至18℃靜置培養4天得斜面菌種；步驟2，將純化後的斜面菌種置於等離子照射4s後，接入種子培養基中，26℃下恆溫下搖床培養6天後，獲得種子液；步驟3，將種子培養液接入固體發酵培養基中間歇式培養，所述間歇式培養條件白天溫度26℃，通氣量1.5v/v，光強度140lx，夜間溫度31℃，通氣量1.5v/v，光強度75lx，所述固體發酵培養基包括以下原料：豆渣、花生殼、水、螯合錫、螯合鐵、檸檬酸、醋酸鈉、棉花籽、納米銀顆粒、氯黴素、皂角、維生素c、馬鈴薯、胡蘿蔔。

步驟1中斜面培養基的配方：蛋白腖10g/l、葡萄糖42g/l、瓊脂18g/l、氯黴素0.09g/l、碳纖維5g/l，溶劑為水，ph為6.0。

步驟2中種子培養基的配方：葡萄糖12g/l、k2hpo4·3h2o0.5g/l、kh2po40.5g/l、l-甘氨酸1.0g/l、mgso4·7h2o0.5g/l、氯黴素0.10g/l，溶劑為水，ph為6.2。

步驟3中固體發酵培養基的配方：豆渣42g/l、花生殼16g/l、螯合錫2g/l、螯合鐵1.2g/l、檸檬酸6g/l、醋酸鈉8g/l、棉花籽16g/l、納米銀顆粒0.05g/l、氯黴素0.06g/l、皂角15g/l、維生素c0.03g/l、馬鈴薯15g/l、胡蘿蔔8g/l，溶劑為水，ph為6.5。

上述步驟3中固體發酵培養基的製備方法，包括以下步驟：步驟1，將馬鈴薯和胡蘿蔔蒸熟後，與豆渣和花生殼混合投入球磨機中磨碎得第一混合物；步驟2，將第一混合物、螯合錫、螯合鐵、檸檬酸、醋酸鈉、納米銀顆粒、氯黴素、維生素c、水混合物以260rpm的速度攪拌，再加入棉花籽攪拌均勻即可。

與申請號201511030322.1的中國專利中實施例2的蟲草花相比，產量提高了15%，且含硒量提高了0.8mg/g，蟲草素的含量提高了32%。

實施例3

一種富硒蟲草花的生產方法，包括以下步驟：步驟1，將蟲草花菌種接種於斜面培養基中，以2-4℃/s的恆速升溫至15-22℃靜置培養3-5天得斜面菌種；步驟2，將純化後的斜面菌種置於等離子照射2-5s後，接入種子培養基中，22-28℃下恆溫下搖床培養5-7天後，獲得種子液；步驟3，將種子培養液接入固體發酵培養基中間歇式培養，所述間歇式培養條件白天溫度25-28℃，通氣量1.1-1.8v/v，光強度120-150lx，夜間溫度30-32℃，通氣量1.4-1.6v/v，光強度50-80lx，所述固體發酵培養基包括以下原料：豆渣、花生殼、水、螯合錫、螯合鐵、檸檬酸、醋酸鈉、棉花籽、納米銀顆粒、氯黴素、皂角、維生素c、馬鈴薯、胡蘿蔔。

步驟1中斜面培養基的配方：蛋白腖11g/l、葡萄糖48g/l、瓊脂20g/l、氯黴素0.12g/l、碳纖維8g/l，溶劑為水，ph為6.5。

步驟2中種子培養基的配方：葡萄糖15g/l、k2hpo4·3h2o0.6g/l、kh2po40.6g/l、l-甘氨酸1.2g/l、mgso4·7h2o0.6g/l、氯黴素0.12g/l，溶劑為水，ph為6.5。

步驟3中固體發酵培養基的配方：豆渣50g/l、花生殼18g/l、螯合錫3g/l、螯合鐵1.8g/l、檸檬酸8g/l、醋酸鈉10g/l、棉花籽18g/l、納米銀顆粒0.08g/l、氯黴素0.07g/l、皂角18g/l、維生素c0.04g/l、馬鈴薯18g/l、胡蘿蔔12g/l，溶劑為水，ph為6.7。

上述步驟3中固體發酵培養基的製備方法，包括以下步驟：步驟1，將馬鈴薯和胡蘿蔔蒸熟後，與豆渣和花生殼混合投入球磨機中磨碎得第一混合物；步驟2，將第一混合物、螯合錫、螯合鐵、檸檬酸、醋酸鈉、納米銀顆粒、氯黴素、維生素c、水混合物以280rpm的速度攪拌，再加入棉花籽攪拌均勻即可。

與申請號201511030322.1的中國專利中實施例3的蟲草花相比，產量提高了14%，且含硒量提高了0.6mg/g，蟲草素的含量提高了26%。

實施例4

一種富硒蟲草花的生產方法，包括以下步驟：步驟1，將蟲草花菌種接種於斜面培養基中，以2℃/s的恆速升溫至15℃靜置培養3天得斜面菌種；步驟2，將純化後的斜面菌種置於等離子照射2s後，接入種子培養基中，22℃下恆溫下搖床培養5天後，獲得種子液；步驟3，將種子培養液接入固體發酵培養基中間歇式培養，所述間歇式培養條件白天溫度25℃，通氣量1.1v/v，光強度120lx，夜間溫度30℃，通氣量1.4v/v，光強度50lx。

步驟1中斜面培養基的配方：蛋白腖11g/l、葡萄糖48g/l、瓊脂20g/l、氯黴素0.12g/l、碳纖維8g/l，溶劑為水，ph為6.5。

步驟2中種子培養基的配方：葡萄糖15g/l、k2hpo4·3h2o0.6g/l、kh2po40.6g/l、l-甘氨酸1.2g/l、mgso4·7h2o0.6g/l、氯黴素0.12g/l，溶劑為水，ph為6.5。

步驟3中固體發酵培養基的配方：豆渣50g/l、花生殼18g/l、螯合錫3g/l、螯合鐵1.8g/l、檸檬酸8g/l、醋酸鈉10g/l、棉花籽18g/l、納米銀顆粒0.08g/l、氯黴素0.07g/l、皂角18g/l、維生素c0.04g/l、馬鈴薯18g/l、胡蘿蔔12g/l，溶劑為水，ph為6.7。

上述步驟3中固體發酵培養基的製備方法，包括以下步驟：步驟1，將馬鈴薯和胡蘿蔔蒸熟後，與豆渣和花生殼混合投入球磨機中磨碎得第一混合物；步驟2，將第一混合物、螯合錫、螯合鐵、檸檬酸、醋酸鈉、納米銀顆粒、氯黴素、維生素c、水混合物以260rpm的速度攪拌，再加入棉花籽攪拌均勻即可。

與申請號201511030322.1的中國專利中實施例1的蟲草花相比，產量提高了14%，且含硒量提高了0.7mg/g，蟲草素的含量提高了27%。

實施例5

一種富硒蟲草花的生產方法，包括以下步驟：步驟1，將蟲草花菌種接種於斜面培養基中，以3℃/s的恆速升溫至18℃靜置培養4天得斜面菌種；步驟2，將純化後的斜面菌種接入種子培養基中，26℃下恆溫下搖床培養6天後，獲得種子液；步驟3，將種子培養液接入固體發酵培養基中間歇式培養，所述間歇式培養條件白天溫度26℃，通氣量1.5v/v，光強度140lx，夜間溫度31℃，通氣量1.5v/v，光強度75lx，所述固體發酵培養基包括以下原料：豆渣、花生殼、水、螯合錫、螯合鐵、檸檬酸、醋酸鈉、棉花籽、納米銀顆粒、氯黴素、皂角、維生素c、馬鈴薯、胡蘿蔔。

步驟1中斜面培養基的配方：蛋白腖10g/l、葡萄糖42g/l、瓊脂18g/l、氯黴素0.09g/l、碳纖維5g/l，溶劑為水，ph為6.0。

步驟2中種子培養基的配方：葡萄糖12g/l、k2hpo4·3h2o0.5g/l、kh2po40.5g/l、l-甘氨酸1.0g/l、mgso4·7h2o0.5g/l、氯黴素0.10g/l，溶劑為水，ph為6.2。

步驟3中固體發酵培養基的配方：豆渣42g/l、花生殼16g/l、螯合錫2g/l、螯合鐵1.2g/l、檸檬酸6g/l、醋酸鈉8g/l、棉花籽16g/l、納米銀顆粒0.05g/l、氯黴素0.06g/l、皂角15g/l、維生素c0.03g/l、馬鈴薯15g/l、胡蘿蔔8g/l，溶劑為水，ph為6.5。

上述步驟3中固體發酵培養基的製備方法，包括以下步驟：步驟1，將馬鈴薯和胡蘿蔔蒸熟後，與豆渣和花生殼混合投入球磨機中磨碎得第一混合物；步驟2，將第一混合物、螯合錫、螯合鐵、檸檬酸、醋酸鈉、納米銀顆粒、氯黴素、維生素c、水混合物以260rpm的速度攪拌，再加入棉花籽攪拌均勻即可。

與申請號201511030322.1的中國專利中實施例5的蟲草花相比，產量提高了8%，且含硒量提高了0.2mg/g，蟲草素的含量提高了15%。

實施例6

一種富硒蟲草花的生產方法，包括以下步驟：步驟1，將蟲草花菌種接種於斜面培養基中，以3℃/s的恆速升溫至18℃靜置培養4天得斜面菌種；步驟2，將純化後的斜面菌種置於等離子照射4s後，接入種子培養基中，26℃下恆溫下搖床培養6天後，獲得種子液；步驟3，將種子培養液接入固體發酵培養基中培養，所述固體發酵培養基包括以下原料：豆渣、花生殼、水、螯合錫、螯合鐵、檸檬酸、醋酸鈉、棉花籽、納米銀顆粒、氯黴素、皂角、維生素c、馬鈴薯、胡蘿蔔。

步驟1中斜面培養基的配方：蛋白腖10g/l、葡萄糖42g/l、瓊脂18g/l、氯黴素0.09g/l、碳纖維5g/l，溶劑為水，ph為6.0。

步驟2中種子培養基的配方：葡萄糖12g/l、k2hpo4·3h2o0.5g/l、kh2po40.5g/l、l-甘氨酸1.0g/l、mgso4·7h2o0.5g/l、氯黴素0.10g/l，溶劑為水，ph為6.2。

步驟3中固體發酵培養基的配方：豆渣42g/l、花生殼16g/l、螯合錫2g/l、螯合鐵1.2g/l、檸檬酸6g/l、醋酸鈉8g/l、棉花籽16g/l、納米銀顆粒0.05g/l、氯黴素0.06g/l、皂角15g/l、維生素c0.03g/l、馬鈴薯15g/l、胡蘿蔔8g/l，溶劑為水，ph為6.5。

上述步驟3中固體發酵培養基的製備方法，包括以下步驟：步驟1，將馬鈴薯和胡蘿蔔蒸熟後，與豆渣和花生殼混合投入球磨機中磨碎得第一混合物；步驟2，將第一混合物、螯合錫、螯合鐵、檸檬酸、醋酸鈉、納米銀顆粒、氯黴素、維生素c、水混合物以260rpm的速度攪拌，再加入棉花籽攪拌均勻即可。

與申請號201511030322.1的中國專利中實施例6的蟲草花相比，產量提高了10%，且含硒量提高了0.4mg/g，蟲草素的含量提高了21%。

從上述結果中可以看出，本發明方法培養的蟲草花產量高，蟲草素量大，且含有大量硒元素，非常適合替代傳統的冬蟲夏草，另外，比較實施例2和實施例5-6可知，等離子照射處理斜面菌種、間歇式培養種子液均能提高產量，兩者的協同作用，更是大大提高蟲草花的產量和質量，因此具有良好的市場前景。