一類抗病毒化合物在製造用於治療或預防在呼吸道中病毒感染的製劑中的應用的製作方法

2023-06-09 08:18:06 1

專利名稱：一類抗病毒化合物在製造用於治療或預防在呼吸道中病毒感染的製劑中的應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及二硫代氨基甲酸酯化合物和消毒劑的應用以及消毒表面、介質或細胞培養物的方法。
有許多病毒在人和哺乳動物的呼吸道內引起疾病。雖然這些呼吸-致病的病毒可能結構不同且屬於不同的病毒科，但是它們都有共同點即它們能通過例如襲擊呼吸道中的特定細胞穿過呼吸道進入體內，這些特定細胞例如呼吸道中的上皮細胞層、肺泡細胞、肺細胞等等。對於所有這些，流感的經典症狀是相同的，特徵是局部發炎和在呼吸道中的疾病症狀(例如流鼻涕、嘶啞、咳嗽、小水皰、咽喉痛)。
病毒感染，特別是在呼吸道中，通過氧化性應激反應在被感染的細胞中產生病理變化，特別是在上皮細胞中。活性的氧中間體(ROIs)，例如由白細胞、上皮肺部細胞或黃嘌呤氧化酶產生的，被認為是這些病毒誘導的細胞損傷的媒介物。氧化-特異性轉錄因子NFκKB(核因子κB)的激活可以在這一氧化性應激反應的過程中發生。已經在大部分變化的細胞類型中發現了NFκB並且它與用於炎性和免疫應答的基因的激活有關。
抗氧化劑能通過誘捕ROIs來阻斷NFκB的激活，否則，它會引起這種激活。因此，已經提出了應用抗氧化劑，特別是來治療潛伏病毒的感染。但是已經發現，只利用單獨的抗氧化劑不能有效地治療這類潛伏感染，而-即使能有效地治療-只有通過利用不同的抗氧化劑的混合物(即具有不同作用的抗氧化劑)和其它的抑制病毒的製劑(US5,686,436)的組合。利用抗氧化劑還不可能達到抑制病毒複製，或甚至抑制病毒感染，且特別是不可能抑制流感或細小核糖核酸病毒感染(Knobil等，Am.J.Physiol.274(1)(1998)(134-142))。
另一方面，提出用來對抗病毒感染的不同的抗氧化劑在它們的抗氧化活性方面有很大差異。例如，L-抗壞血酸和維生素E保護穀胱甘肽；維生素K、A和E是過氧亞硝酸鹽和體內其它強氧化劑的拮抗劑。抗炎的類固醇、非-糖皮質激素拉扎洛依(Lazaroide)，二硫代氨基甲酸酯和N-乙醯基-L-半胱氨酸作為NFκB活化的抑制劑已有描述。
病毒取決於它們的遺傳信息載體可被分為DNA或RNA病毒，其中核酸以單鏈或雙鏈存在並被蛋白質膜包封。
這些RNA病毒的單鏈RNA以正鏈(mRNA)或負鏈出現。這一病毒遺傳物質也可以出現在許多片段中，例如在流感病毒的情形下。
屬於細小核糖核酸病毒的人鼻病毒(HRV)是世界上普通感冒的主要原因。HRV的頻繁出現、嚴重的二次感染的風險和鑑於醫療花費、看病和僱員的因病休假的經濟效應使得HRVs成為重要的、嚴肅對待的病原體。儘管它們頻繁發生，至今除了症狀治療，還沒有對於這一病毒疾病的可靠治療。另一方面，感染的結果，例如鼻病毒，不是很嚴重或甚至到威脅生命的地步，以致服用具有高副作用風險的藥物作為代價。因此，被用來抵抗這種病毒的製劑必須顯示低副作用或沒有副作用。動物細小核糖核酸病毒組包括馬鼻炎A病毒(ERAV)，與足和口疾病病毒(MKS)一樣，它屬於口蹄疫病毒屬。
其它造成呼吸道疾病的重要病毒科包括正粘病毒科和副粘病毒科，以人流感病毒作為最重要的代表。
新流行的流感病毒株的出現，通常被認為歸因於包含新的凝血素或神經氨酸酶基因的新亞型。這些新的病毒在免疫學上與先前流行的流感病毒不同。流感A和B病毒需要8個RNA片段來使其有傳染性，然而流感C病毒僅需要7個。流感A、B和C病毒在體內能產生同型的重排列，但不是在異型之間。理論上，從兩個流感A病毒的8個片段能產生256種重排列；但是這種隨機的分離並不發生，因為在蛋白質水平上某些蛋白質需要它們的病毒株特異性配偶體。這一點對於禽流感病毒A/小雞/德國/34(H7N1)FPV Rostock HA已經明確地表明，其被片段4編碼，它只能特異性地與它的被片段7編碼的病毒株特異M2蛋白質形成功能性病毒。(Grambas，S，Hay，A J.，Maturation ofInfluenza A virus hemagglutinin-estimates of the pHencountered during transport and its regulation by the M2protein；Virology 1992；199011-18)(Grambas，S，Bennett，HS，Hay，AJ.Influence of amantadine resistance mutations on thepH regulatory function of the M2 protein of Influenza A viruses.Virology 1992；191541-549)。流感接種是抵抗每年的在人群中流感病毒傳染的首要策略之一。然而，流感仍舊是世界上發病率和死亡率的主要原因並且是具有虛弱的免疫系統的病人以及老年人生病和死亡的首要原因。雖然金剛烷胺和金剛乙胺的抗病毒活性縮短臨床流感症狀的持續時間，但是重要的副作用以及有抵抗力的突變株的出現已有描述(Fields等，Virology，第三版(1995)，Lippincott-RovenPubl.，Philadelphia，第1卷，第434-436頁)。目前，在市場上有新的抗病毒劑組，它們抑制流感病毒神經氨酸酶。扎那米韋(Zanamivir)和奧塞米韋(Oseltamivir)是流感A和B病毒神經氨酸酶抑制劑的實例。然而，這些藥物只能縮短症狀的持續時間。
抑制人體內逆轉錄病毒和潛伏病毒(例如HIV)繁殖的方法在US 5686 436中有描述。其中，施用了包含在其它成分中的抗氧化劑和NFκB誘導抑制劑的藥物。相反，為了達到抗呼吸性病毒感染的有效作用，當病毒仍舊在急性感染階段時它必須被有效攻擊。只能被用在潛伏病毒水平的治療並不適用於阻止或治療在呼吸道內的急性病毒感染。
因此，需要高效性的物質，其在呼吸道中能有效地抗病毒感染，特別是對於人，其無副作用或只有小的副作用、便宜並且能大量生產。
本發明的目標是通過應用具有結構式R1R2NCS2H的二硫代氨基甲酸酯化合物和這些化合物的氧化形式、特別是它們的二聚物和它們的可藥用鹽來製備用於治療或預防攻擊呼吸道並在那裡引起疾病的RNA病毒感染的製劑達到的，其中R1和R2各自獨立地代表直鏈或支鏈C1-C4烷基或與氮原子形成具有4到6個C原子的脂族環，其中R1、R2或脂族環任選地被一個或多個選自OH、NO2、NH2、COOH、SH、F、Cl、Br、I、甲基或乙基的取代基取代。在本發明中，「呼吸道」指所有從機體開口並且直到肺泡的器官和區域(鼻、口、眼(包括淚腺)和耳朵)。在這裡，可藥用鹽，特別是指Na、K、Ca、Mg、NH4和Zn。現在第一次出乎意料地發現，本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物能被用來很有效地抵抗RNA病毒引起的感染，所述病毒攻擊呼吸道並在那裡引起疾病；在本申請中這些病毒被稱作「呼吸性RNA病毒」。與Knobil等的觀察相反，(Am.J.Physiol.(1998)，第134-142頁)，在本發明的範圍內，本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物抗呼吸性RNA病毒感染的抗病毒作用，例如HRV和流感感染，能被明顯的體現。這一點是特別令人吃驚的，因為其它抗氧化劑不顯現抗呼吸性RNA病毒的抗病毒作用，並且氧化還原電位的變化不僅僅是本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物抗病毒作用的原因。例如，根據本發明這一點能清楚地顯示，即抗氧化劑維生素C、維生素E，2-巰基乙醇和N-乙醯基-L-半胱氨酸對於抵抗呼吸性RNA病毒根本不起作用。而且，本發明的抗呼吸性RNA病毒感染和這些病毒增殖的二硫代氨基甲酸酯化合物的有效性不能僅歸因於抑制NFκB激活，而是已經顯示本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物，在本發明申請的範圍中，它被理解為還包含氧化型，特別是二聚物，針對性抑制呼吸性RNA病毒的繁殖。
DE 1963223 A涉及用於治療腦內病毒感染的製劑，其中所述製劑據稱包含單胺去甲腎上腺素、多巴胺和5-羥色氨生物合成的抑制劑。在此文獻中提出的實施例顯示了α-甲基絡氨酸甲酯對被單純皰疹感染的小鼠的作用。因此，在此文獻中描述的抑制特定的單胺生物合成的機制僅被應用來治療腦內的DNA病毒感染。本發明的呼吸性RNA病毒的治療按照另一規則起作用並且不可應用於腦內病毒感染，如否定實施例FSME(實施例13)和EMC(實施例14)所示。因此，DE 1963223A涉及不同的應用領域，它不能和本發明的應用相比較，並且因此是非顯而易見的。
在Calvert，J.G.，Interferon Research，1990(10)，第13-23頁中描述了二乙基二硫代氨基甲酸酯對於門戈病毒的作用。在那裡發現DDTC鈍化門戈病毒病毒粒子。然而門戈病毒是嚴重的腦心肌炎的動因，並不影響呼吸道或在那裡引起疾病。
WO 95/03792 A1涉及硫醇化合物在製造用於治療病毒誘導的疾病的藥物組合物中的應用，病毒蛋白中的二硫橋被硫醇化合物破壞。此文獻提及了許多病毒，其中包括RNA病毒、細小核糖核酸病毒科。此文獻也很廣泛地給出了許多硫醇化合物的實例，還一般性包括二硫代氨基甲酸酯。從許多不同的潛在組合只說明了下述的實施例如硫醇化合物N-乙醯半胱氨酸(NAC)、半胱氨酸、半胱氨酸鹽酸鹽和N，S-二乙醯半胱氨酸乙酯(DACEE)。只有肝炎B和牛痘病毒被顯示為病毒疾病。
因此，不僅對於大多數化合物和病毒疾病沒有實施例顯示，而且已經證明在那篇文獻中公開的治療不能操作到描述的程度，如其所述某些細小核糖核酸病毒(那些不攻擊呼吸道，但是攻擊神經細胞的)不被PDTC抑制，或者它們的繁殖不減少。因此，不是所有由病毒誘導的疾病和硫醇化合物的結合都是被降低，並且應用根據本發明選擇的二硫代氨基甲酸酯的化合物(它們在WO 95/03792 A1中沒有公開)來治療或預防由呼吸性RNA病毒引起的感染是非顯而易見的。
GB 861 043 A涉及組合物，其中它們還被用於抵抗病毒的保護。那些組合物例如包括二硫代氨基甲酸酯，但是在那裡未公開特異性的病毒。
Knobil等，Am.J.Physiol.(1998)，第134-142頁，涉及氧化劑和它們在病毒誘導的基因表達上的影響的研究。雖然在那裡明確地發現既不是NAC也不是PDTC抑制流感病毒感染或複製。
在DE 2555730 A中描述了包含二甲基二硫代氨基甲酸酯化合物的抗微生物劑。這一化合物是8-羥基喹啉金屬鹽-N，N-二甲基二硫代氨基甲酸酯複合物。但是那篇文獻僅公開了殺真菌和抗細菌作用。
WO 99/66918 A1涉及應用二硫代氨基甲酸酯的二硫化物衍生物來減少病人的氧化氮或抑制NFκB。在那篇文獻中，雖然報導了很大量的疾病，但是沒有詳細描述病毒疾病。
Flory E等，J.Biol.Chem.，2000年3月24日，275(12)，第8307-8314頁，涉及各種流感A病毒蛋白質在NFκB-依賴性表達激活中的作用的研究。
Tai D.I.等，Hepatology，2000年3月，31(3)，第785-787頁，涉及PDTC抑制NFκB激活的研究，其中假設HCV感染會通過NFκB的激活產生抗細胞凋亡。
Schwarz等，1998(J.Virol；Vol.72(7))；第5654-5660頁)研究了NFκB對與人鼻病毒有關的腦心肌炎病毒(EMCV)的繁殖的作用。用EMCV感染的無NFκB(knockout p50-/-或p65-/-)的細胞，病毒繁殖雖然減少了，但是引起了增強的凋亡性細胞死亡。那與在這提出的數據極端相反這些實施例能清楚地表明本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物不僅抑制相關鼻病毒的複製，而且阻止病毒誘導的細胞死亡。因此，根據本發明，NFκB的抑制不是本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物有效性的關鍵因素。
本發明的二硫代氨基甲酸酯的根據本發明的抗病毒作用不依賴於特定物質的組合。本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物完全能被單獨地應用，不依賴於另外的添加劑，特別是抗氧化劑，按照US 5,686,436這一點對於NFκB-激活抑制劑的抗逆轉錄病毒作用是絕對必需的，因為，出乎意料地，抗病毒作用不僅與抵抗氧化性應激反應有關，而且感染/複製能被本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物抑制。
能夠表明本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物誘導基因，其作為抗氧化劑作用於經誘導的轉錄因子起作用(Meyer et al.，EMBO J.12，2005-2015，1993)。異二聚物轉錄因子AP1能被NAC和本發明的二硫代氨基甲酸酯誘導，導致DNA結合和轉移活化。本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物誘導的AP1的活化依賴於蛋白質合成並涉及c-jun和c-fos基因的轉錄。然而，單獨AP1的活化不是本發明的抑制病毒的重大原因。
已知吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)作為氧化強化劑和抗氧化劑、轉錄因子NFκB激活抑制劑、鋅離子載體和金屬螯合劑。在Sherman等，Biochem.Biophys.Res.Comm.，191(3)1301-1308，1993中描述了PDTC作為NFκB激活抑制劑以及NO-合成酶抑制劑。WO01/00193 A2涉及包含在微微摩爾和毫微摩爾範圍的二乙基二硫代氨基甲酸酯組合物，其顯示強烈的抗凋亡作用。
根據本發明，能夠表明本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物既在體外也在體內顯示強烈的抗RNA病毒作用，所述RNA病毒攻擊呼吸道並在那裡引起疾病(「呼吸性RNA病毒」)。
根據本發明，感染在非常早的階段已受到對抗，甚至在廣泛的細胞損傷前或甚至在細胞死亡發生之前。
在本發明中，呼吸性RNA病毒指任何通過呼吸道(也就是呼吸的通道和肺)攻擊機體並進入機體在呼吸道引發疾病的人和哺乳動物病毒。顯然，在這一感染中發生的生物過程是相似的，使得本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物的作用以類似的方式有效地發生，不管這組病毒的生物異質性。但是，相反地，已經顯示單獨的本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物的作用不足以成功地抵抗由其它病毒引起的病毒感染，那些病毒通過其它的感染途徑進入體內並經過不同的生物循環(例如那些能整合入宿主基因組作為潛伏病毒的)，或在其它器官(例如腦)引發疾病。
在這方面已經顯示，在其間用二硫代氨基甲酸酯治療AIDS病人不能使被人類免疫缺陷病毒(The HIV87 Study Group，AIDS Res.Hum.Retroviruses 1993，1月；9(1)，83-89)感染的無症狀和極小症狀的病人治癒或改善(二硫代氨基甲酸酯(Imuthiol)的多中心隨機安慰劑對照研究)。基於此結果，對於潛伏病毒沒有再做進一步的研究(見US 5 686 436)。
根據本發明，二硫代氨基甲酸酯化合物，基本上在病毒感染的早期階段或者如果它們是在感染前使用的，顯現它們的獨特的活性。因此，如果預防性使用本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物能預防病毒感染的爆發，例如，在有呼吸性病毒感染危險，甚至有上升的危險的地方和時間，例如在有流行病或寒潮的區域。本發明的二硫代氨基甲酸酯優選被用來阻止病毒感染。
尤其優選的是根據本發明的病毒抑制，但是主要是在呼吸性病毒感染的早期階段抑制病毒。因此，本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物的目的是被用來抑制病毒的複製，也就是在被感染的個體的持久損傷發生之前的時候。在那方面，不僅在被感染的個體上阻止進行性的病毒感染的結果是可能的，而且也阻止了其它傳染性病毒向其它個體傳播；最小化了進一步感染的危險，它對於健康策略有很大的總的作用和意義，特別是關於人流感病毒。
下面的病毒，尤其被認為是本發明範圍內的呼吸性RNA病毒鼻病毒、柯薩奇病毒、艾柯病毒、冠狀病毒、腸道病毒、人正粘病毒(例如流感病毒(A、B和C))、副粘病毒(例如副流感病毒和肺病毒)、呼吸合胞體病毒(RSV)和其它只要(至少)在呼吸道中引起疾病的RNA病毒。病毒或病毒株不在呼吸道中引起疾病但是在另一器官(例如腦)中引起疾病的，例如腦膜炎病毒、腦心肌炎病毒、脊髓灰質炎病毒、心臟病毒等等，不在本申請的範圍內。對於本發明的呼吸性RNA病毒，上或下呼吸道表皮細胞的感染是同樣的。另外，其它器官能被攻擊。它們在呼吸道引起的局部發炎被認為是流感經典症狀的主要原因，例如流鼻涕、喉嚨痛、嘶啞、咳嗽、小水皰和經常發燒。具有虛弱免疫力的個體的二次感染的頻繁發生也是由於被這些呼吸性病毒的感染。
在本發明的範圍內，按照基於King等(「Picornaviridae」in「Virus Taxonomy，Seventh Report of the InternationalCommittee for the Taxonomy of Viruses」，(2000)，Van Regenmortel等編；Academic Press 657-673)的細小核糖核酸病毒科的目前分類，只要攻擊呼吸道並在那裡引起疾病的細小核糖核酸病毒都被認為是「真」細小核糖核酸病毒，也就是腸道病毒屬、鼻病毒、口蹄疫病毒、Parechovirus、Erbovirus、Kobuvirus和Teschovirus。這些細小核糖核酸病毒屬病毒的特徵是相似的遺傳結構、蛋白質組成、培養性質和抵抗熱或殺病毒劑的能力。
已經發現本發明特別適於抵抗使人和動物致病的真呼吸細小核糖核酸病毒，特別是那些腸道病毒屬(腸道病毒70、71、柯薩奇病毒)和鼻病毒屬(例如人鼻病毒)和口蹄疫病毒屬(例如足和口疾病病毒)，然而對於其它病毒不能證明本發明的優點，包括引起潛伏感染的細小核糖核酸病毒，例如HAV。這可能也是由於「真」呼吸細小核糖核酸病毒組很相似的事實，並且在感染中發生的病理生理學過程是很相似的以至於本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物類似地起作用。
在本申請中，「病毒感染」指呼吸性病毒在細胞上的任何攻擊，其包括，例如下述步驟中的一個開始於病毒粒子與細胞對接，並且在較後的階段中將病毒的遺傳信息引入細胞，生產新病毒粒子部分並表達感染的病毒粒子。
此外，也可能使用這些化合物的氧化型，特別是它們的二聚物，因為在有機體內它們很快被代謝成還原型，這是本身已知的。在本申請中，「氧化型」指那些其中S基團被氧化的化合物。二硫化四乙基秋蘭姆(disulfiram)是一種此氧化的二聚物形式的優選實例，它也被稱作「安塔布司(Antabuse)」或「戒酒硫(Abstinyl)」並且是二硫化四乙基秋蘭姆(tetraethylthiuram disulfide)(C10H20N2S4)。二硫化四乙基秋蘭姆本身是已知的，並且特別被用來治療酒精中毒。二硫化四乙基秋蘭姆在氧化還原作用中作為介質並鈍化醛脫氫酶。當攝入乙醇時，乙醛在體內累積並對總體的身體健康產生明顯的副作用。同時攝入二硫化四乙基秋蘭姆和酒精導致焦慮狀態、噁心、失明、胸痛、頭疼等等，這些症狀的持續時間從3-4天至一星期。出於此原因，二硫化四乙基秋蘭姆被治療地施用給酒精中毒者，然而因為這些嚴重的副作用，任何隨後的酒精消耗都應該被避免。
二硫化四乙基秋蘭姆其它已知的作用是抑制酶，例如果糖、1，6-二磷酸脫氫酶、黃嘌呤氧化酶、己糖激酶、醛脫氫酶和多巴胺β-羥化酶。
二硫化四乙基秋蘭姆也被用來治療蝨病和疥瘡，並用來治療鎳皮炎。
對於二硫化四乙基秋蘭姆的代謝已有詳細的研究，例如見Dollery，C.，1999，Therapeutic Drugs，第二版，第1卷，ChurchillLivingstone，Edinburgh。解釋了二硫化四乙基秋蘭姆在體內的主要代謝產物是二乙基二硫代氨基甲酸酯，並且此過程進行的非常快。
本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物的氧化型是非常容易脂溶的，並且能被提供例如作為口服製劑，化合物在胃內吸收。特別地，化合物也能被用作噴粉劑。此外，本發明化合物的氧化型能提供羥基來增加它們的水溶性以使它們能被用作氣霧劑。如果本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物是以氧化形式提供並且尤其是二聚體產品，可達到這種製劑的貯存作用，也就是本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物在一定的時期內逐漸被釋放到機體並被機體吸收。氧化的二硫代氨基甲酸酯化合物也能被植入機體來治療以獲得這一貯庫作用，這一點是本身已知的。
本發明一種優選的化合物的特徵是R1和R2各自獨立地代表C1-C3烷基或與氮原子一起形成具有4到6個C原子的脂族環，其已被證明對於治療或預防呼吸性RNA病毒感染是尤其有利的。
二硫代氨基甲酸酯化合物優選吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)和N，N-二乙基二硫代氨基甲酸酯(DDTC)。這些化合物顯示有突出的抗呼吸性RNA病毒感染的強大活性。
特別優選的病毒感染是細小核糖核酸病毒、正粘病毒或副粘病毒感染。本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物抵抗這些病毒感染是尤其有效的。
在這裡，正粘病毒優選為人流感病毒，尤其選自流感A、流感B、流感C或者副粘病毒為副流感病毒或肺炎病毒。正粘病毒優選是哺乳動物的流感A病毒，而細小核糖核酸病毒是鼻病毒，特別是人或馬鼻病毒，腸道病毒，特別是腸道病毒70、71或柯薩奇病毒，或是口蹄疫病毒，特別是足和口疾病病毒或馬鼻炎病毒A。上面已解釋了，這樣的病毒或病毒株不包括不在呼吸道引起疾病而只在腦或神經細胞內引起疾病的，例如屬於細小核糖核酸病毒的心臟病毒或脊髓灰質炎病毒。用本發明的化合物治療或阻止這些病毒感染是特別有效的。
細小核糖核酸病毒科包括一系列小RNA病毒組，其中有鼻病毒(例如人鼻病毒)、腸道病毒(例如腸道病毒70、71、柯薩奇病毒，已知它們是例如手、足和口疾病的病原體)、口蹄疫病毒(例如在嘴裡引起疾病的足和口疾病病毒和馬鼻炎病毒A)。例如，特別有興趣的是對於足和口疾病，應用本發明的化合物來渡過接種和當疫苗開始生效這一段時期(大約10-12天)，因為在此期間被接種的動物不被保護，並且在此無疫苗保護的情況下動物在感染生病後會分泌大量病毒。因此，本發明的化合物應該在接種同時或在其後約兩星期給動物施用。
正粘病毒和副粘病毒是流感病毒和其它類似病毒的早期集體名稱的細分。在人體上，副粘病毒引起麻疹、腮腺炎及呼吸和神經疾病。副粘病毒中包括副流感病毒、腮腺炎病毒、紐卡斯爾病病毒、呼吸合胞體病毒(RSV)、麻疹病毒和牛瘟病毒。在人體上引起流感的流感A、B和C病毒屬於正粘病毒。
A型流感病毒是大部分流感流行病和所有大流行病的原因。流感A病毒在馬、豬和鳥身上發生，例如經典禽類瘟疫的病原體；然而，只有人流感病毒和哺乳動物的流感病毒，例如馬，能被認為是真正意義上的呼吸性病毒，因為禽流感病毒(Avian Influenza Virus(AI))的生物學和人類流感病毒的生物學完全不同。因此，AI病毒不能被認為是呼吸性病毒。在鴨子體內，病毒基本上在腸道內複製；然而在人體內則並非如此。因此，AI病毒也能從鳥糞中被分離出來(Hinshaw等，1980，Canad.J.Microbiol.26，622-9)。除此之外，AI病毒的核苷酸變異率比從哺乳動物中分離出的病毒的核苷酸變異率低。與鳥不同的有機體內，病毒蛋白質的進化典型地顯示突變的快速累積，而此在AI病毒中不發生(Gorman等，1991，J.Virol.653704-14；Ludwig等，1995，Virology 212555-61)。不同的流感病毒的受體特異性不同。大部分的AI病毒優選地與α2-3-半乳糖-唾液酸受體結合。相反，人流感病毒基本上與α2-6-半乳糖-唾液酸受體結合(Rogers和Paulson，1983，Virology 127，361-73；Baum和Paulson，1990，Acta Histochem.，Suppl.4035-8)。
由於本發明覆蓋的病毒在人類和哺乳動物中引起許多廣泛傳播的疾病，本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物的抗病毒作用對於那些病毒是尤其重要的。由於本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物抵抗那些病毒是顯著有效的，本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物尤其適於生產一系列用來治療或預防那些病毒感染的製劑。本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物能容易地且低成本地大量生產，並且甚至在高濃度時它們對於被治療的細胞幾乎沒有毒性。
在一個優選的具體實施方式
中，本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物以濃度為0.01-5000mM的製劑的形式，優選1-300mM，並且特別優選10-100mM。在這些濃度，本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物抵抗呼吸性RNA病毒是特別有效的並且幾乎不顯示副作用或無副作用。使用的濃度按照要治療的病毒感染選擇，取決於病毒感染的強度或按照要治療的有機體選擇，無論動物或人類，取決於年齡。
特別適合的是，本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物在製劑中濃度為10mM-1M。在這一情況下，本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物以高濃度形式存在，並且製劑可以在治療前取決於需要的濃度被稀釋。
製劑優選進一步包含可藥用載體。在藥學領域內任何本領域技術人員已知可藥用載體都能被使用，例如磷酸緩衝鹽溶液(PBS)或有不同緩衝液的氯化鈉溶液，或包含脂質體的配製劑，其中載體的選擇也取決於治療的類型、病毒感染或被治療的有機體。
製劑優選口服、鼻內、靜脈內、胃腸外、直腸、作為眼或耳滴劑、含漱劑或氣霧劑施用。給藥的模式特別取決於被治療的病毒感染。例如，在呼吸道內的感染用鼻內給藥的製劑治療，如包含二硫代氨基甲酸酯化合物的氣霧劑形式，因為被治療的病毒感染正好在病毒攻擊的位置。取決於給藥形式，在特定的濃度提供二硫代氨基甲酸酯，或製劑為適合那一形式的給藥而包括另外的物質。當然可能以乾燥的形式提供製劑，在此情況下在治療前用合適的溶劑來稀釋。
一種特別優選的應用是製劑包含另外的抗病毒物質。以這種方式可以從許多方面被攻擊呼吸道內的病毒感染能，或所有不同病毒能被同時削弱或徹底根除。這種另外的抗病毒物質包括抑制複製的物質、免疫刺激物質、中和性抗體等等並且任選通常能支持免疫系統的物質。
優選地，製劑包含至少兩種本發明的不同的二硫代氨基甲酸酯的組合，特別是PDTC和DDTC的混合物。本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物在細胞內發揮促氧化和抗氧化作用。它們的抗氧化作用包括根除過氧化氫、除去超氧自由基、過氧亞硝酸鹽、羥基自由基和脂質過氧化產物。通過這些排除，二硫代氨基甲酸酯被氧化成二硫化秋蘭姆。二硫化秋蘭姆造成二硫代氨基甲酸酯的促氧化作用，並且在許多情況下，秋蘭姆的形成取決於金屬的存在。已有報導，也許二硫代氨基甲酸酯的抗-細胞凋亡活性與由硫醇氧化導致的Kaspasen的鈍化有關。
尤其優選的本發明的製劑進一步包含選自如下的物質抗生素、疫苗、免疫-抑制劑、穩定劑、免疫-刺激物質、血液製品或它們的混合物。如果使用另外的抗生素，細菌感染和呼吸性病毒能一起被抵抗。如果製劑包含另外的疫苗，在這裡理解為既指滅活的也指活性的疫苗，在本發明的治療或預防病毒感染的同時阻止容易感染虛弱的有機體的某些其它的、另外的病毒感染。此外，也可加入穩定劑來增加儲存穩定性或儲存期。血液製品，例如血漿、血細胞、凝集因子等等，取決於治療的病人。
有利的是將製劑應用於抑制病毒繁殖。以此方式確保已經存在的感染不會擴散，而是相反很快被治療。
根據本發明的另一方面，本發明也涉及包含至少一種上述本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物的消毒劑。在本發明中，「消毒劑」指任何在人或動物有機體外部抵抗病毒的物質，如在表面、在製劑中、特別是在介質中或用於細胞培養物。特別地，如果被處理的物質對於其它更加有侵蝕性的抗病毒物質是敏感的，可使用這種消毒劑。例如，包含本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物的消毒劑適於作為介質的添加劑或用來處理對其它更具侵蝕性的消毒劑或抗病毒物質反應敏感的細胞或細胞培養物。本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物已經顯示它們在治療或預防呼吸細胞和細胞培養物的呼吸性RNA病毒感染方面是特別有效的。
如果消毒劑包含濃度在10μM-5M的本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物，此消毒劑是特別有效的，特別是30μM-1M。一方面，這些濃度是抗呼吸性RNA病毒感染有效的，另一方面，這種消毒劑是顯著地溫和的，例如，它能被用作細胞培養物的抗病毒物質。在這裡，濃度取決於病毒感染的性質或高級階段，以及用於處理的物質，例如細胞的性質和敏感性。顯然，也可能提供統一濃度的消毒劑，在這種情況下在使用前用合適的溶劑稀釋本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物至想要的濃度。
消毒劑優選包含另外的消毒劑，特別是抗病毒物質。這些物質對於微生物領域的技術人員是已知的，特別是如果在同時抵抗其它病毒(例如DNA病毒)將它們加入。當然，另外抗微生物物質，特別是抗生素，也能被加入。
本發明的另一方面涉及消毒表面、介質或細胞培養物的方法，其中本發明的消毒劑，例如如上所述的，被分別施用於表面或細胞培養物或被加入介質中。例如為了消毒表面，用消毒劑來清潔表面是足夠的。在介質和細胞培養物情況下，消毒劑能經過較長的時間發揮它的作用，並且如上所述消毒劑的濃度可以取決於不同的目的而變化。
本發明的另一方面，發明涉及用發明的二硫代氨基甲酸酯化合物治療或預防呼吸性RNA病毒感染。在這裡，以適當的形式和適當的濃度，向病人或動物施用如上所述的包含本發明的二硫代氨基甲酸酯化合物的製劑。
現在將通過附加的實施例和附圖來詳細地解釋本發明，但是它們不構成限制。


圖1顯示在細胞培養物中PDTC對HRV複製的抑制作用；圖2顯示PDTC對由鼻病毒誘導的細胞病理效應的抑制；圖3顯示PDTC和DDTC增加了細胞存活力；
圖4顯示PDTC的治療作用與時間的相關性；圖5顯示eIF4GI的分裂；圖6顯示用於測定鼻病毒衣殼蛋白質表達的蛋白質印跡分析；圖7顯示其它抗氧化劑在HRV病毒感染中的作用；圖8和9顯示PDTC在流感病毒複製中的作用；圖10顯示PDTC在被流感病毒感染的vero細胞上的作用與濃度的相關性。
圖11A和11B顯示PDTC對被流感病毒感染的小鼠的作用。
圖12顯示PDTC抗ERAV的有效性。
圖13A和13B顯示PDTC抗MKS的有效性；和圖14顯示PDTC缺乏抗EMCV作用。
實施例實施例1PDTC導致的傳染的鼻病毒粒子生產的減少在用不同的HRV血清型感染細胞後加入PDTC來測試被HRV感染期間它的有效性。
用HRV血清型1A、2、14和16以20TCID50(組織-培養-感染-劑量50)/細胞感染HeLa細胞。同時將PDTC以125μM的濃度加入介質中。在感染4小時後移去多餘的病毒，同時將PDTC加入新鮮的介質中。在感染(p.I.)24小時(圖1，頂部)和48小時(圖1，底部)後，收集上清液並通過TCID50試驗測定病毒後代的量。在24小時後用PDTC處理細胞病毒滴定度(vt)減少了103(圖1，頂部)。在感染48小時後，從用PDTC處理的細胞收集的上清液也顯示病毒滴定度顯著減少(圖1，底部)。這些試驗表明PDTC具有抗不同的HRV血清型的強大的抗病毒作用。
實施例2PDTC抑制HRV-誘導的細胞病理效應並且增加被感染的細胞的生存能力。
細胞中形態學的變化，被稱作「細胞病理效應」(CPE)，在鼻病毒感染的晚期階段發生。這些HRV誘導的CPE的特徵為細胞變圓、收縮、核變形及染色質縮合。當HeLa細胞被HRV2、HRV14、HRV1A和HRV16以100TCID50/細胞感染時，在後-感染8小時後可見明顯的細胞病理效應。在感染期間添加PDTC阻斷了這些細胞病理效應的出現。圖2顯示在125μM PDTC(見較低的右圖)的存在下在感染8小時後被感染的細胞的形態學和未感染(n.i.)的細胞的形態學不能區分開(見兩個較高的圖)。
因此，PDTC處理在非常早的階段攻擊病毒感染，這樣阻止了更廣泛的細胞損傷。
實施例3PDTC和DDTC增加被感染細胞的生存能力。
進行細胞增殖分析來檢驗在病毒感染期間PDTC或DDTC對細胞生存能力的影響。
按照製造商的指示做了細胞滴定度96水性非放射性細胞增殖分析(Promega；Madison，Wisconsin，U.S.A.)。在感染前一天將細胞放置在96孔板中。用不同的HRV血清型以20TCID50/細胞感染這些細胞。通過添加四唑物質來測定細胞的生存能力，在37℃保溫2小時，並在492nm測定吸收。
與未感染的HeLa細胞相比，在用HRV2感染24小時後，HeLa細胞顯示完全喪失了它們的代謝活性(模擬的感染介質＝MIM)。在圖3中能夠看到(頂部DDTC，底部PDTC)通過添加甚至極微濃度的PDTC或DDTC能顯著地增加細胞的生存能力。對於未感染的細胞單獨用PDTC或DDTC僅有很小的作用。儘管使用的抑制病毒感染的濃度顯示無毒性(「-」指「無」)。
實施例4PDTC效能與時間的相關性(給藥)為了測定被PDTC攻擊的病毒生命周期階段，在病毒感染後以20TCID50/細胞在不同的時間添加PDTC並進行增殖分析。顯示在感染後(「-」指「無」)最初的六小時內添加PDTC(125μM)提供了抵抗病毒誘導的增殖喪失的最好的保護(圖4A)。這一效能對於單一的血清型也不是特異性的，如使用的HRV血清型1A、2、14和16。只有在大於感染8小時後細胞的PDTC處理(125μM)降低了保護效能。
如果在被感染的和用PDTC處理的細胞的上清液中測定病毒滴定度(vt)也獲得類似的結果(見圖4B)。在感染後4小時添加PDTC則HRV2產生的滴定度降低103。甚至如果在感染僅6小時後開始PDTC處理，產生的病毒滴定度也顯著降低。這些結果顯示添加具有抗病毒作用的PDTC，甚至是在感染的最後階段添加，細胞的存活能力也增長，而有感染力的病毒的量顯著下降。
這顯示抗病毒作用不僅在病毒生命周期的早期階段發生，例如在受體結合或進入受體期間。
實施例5PDTC存在下HRV感染過程的研究測定不同的蛋白水解活性來研究PDTC存在和不存在時鼻病毒感染的過程。由病毒2A蛋白酶導致的細胞轉移啟動因子4GI(eIF4GI)和4GII的酶的分裂是在被鼻病毒和腸道病毒感染過程中發生的一個特徵性的蛋白水解活動。依賴於HRV血清型，eIF4G蛋白質在感染的早期分裂。在鼻病毒感染期間的另一分裂活動，僅近來有描述，是中間的絲蛋白細胞角蛋白8的分裂。這一分裂也取決於2A蛋白酶，但是在感染的較晚階段發生。為了研究PDTC處理在病毒感染期間的作用，進行蛋白質印跡分析來分析這些2A蛋白酶底物。
為做蛋白質印跡分析在指定的時間移除介質。通過添加100μl蛋白質緩衝液(8％十二烷基硫酸鈉，20％β-巰基-乙醇，20％甘油，0.04％溴酚藍)來溶解細胞。在每一泳道用SDS-PAGE分離20μl蛋白質提取物，並印在PVDF膜上。用在TBS中的0.1％吐溫20和5％脫脂奶粉來進行抗體的溫育。eIF4GI的多克隆兔抗體被用作免疫檢測。與鹼性磷酸酶耦聯的抗-兔免疫球蛋白被用作第二抗體。用鹼性磷酸酶反應染色。利用預染色SDS-7B標記物(Sigma)測定分子量。
在用HRV2感染HeLa細胞4小時後能檢測到eIF4GI分裂(100TCID50/細胞)。(cp指分裂產物，「分裂產物(cleavageproduct)」)。在感染8小時後分裂完成(圖5)。在那時在PDTC存在下在被感染的細胞中未能檢測到eIF4GI分裂。在晚些時候，約感染24小時後，能檢測到微量eIF4GI分裂，甚至在用PDTC處理的細胞中。
這顯示蛋白酶功能被阻斷或病毒蛋白質的量極大地減少了。
實施例6病毒包膜蛋白質檢測為了測定PDTC在病毒蛋白質表達上的作用，通過對從HRV2-感染的HeLa細胞(100TCID50/細胞)的蛋白質提取物的蛋白質印跡分析來檢測HRV2的衣殼蛋白質(見圖6)。利用抗HRV2的多克隆兔血清，如實施例5所述進行蛋白質印跡分析。在感染六小時後在未處理的細胞中檢測到了大量的鼻病毒蛋白質VP1、VP2和VP3。在感染後的第一個8小時內，PDTC處理阻止了那些衣殼蛋白質的表達。在較後的時間只檢測到了VP1、VP2和VP3的微量表達，約感染後24小時。
這顯示了PDTC延遲了病毒蛋白質的生產，解釋了PDTC的抗鼻病毒作用和它對細胞的保護作用。
實施例7抗病毒作用與氧化還原電位相關性測定在HRV2感染HeLa細胞期間，測試了其它抗氧化劑對它們的抑制作用(圖7)。用HRV2(100TCID50/細胞)在6孔板中感染HeLa細胞(「n.i.」指「未感染」)。在感染1小時後移除介質，並加入新鮮的介質或具有不同濃度PDTC或NAC的介質。24小時後，用PBS洗滌細胞菌苔並用結晶紫染色。在圖7A中很明顯看到HRV2感染毀壞了細胞菌苔。PDTC，而不是NAC，能阻止此作用。如實施例3所述(圖7B，C，D)測定了維生素C、Trolox和β-巰基乙醇(2-ME)的效能。出乎意料地顯示了這些抗氧化劑中沒有一種在病毒增殖期間具有任何阻止作用。在無病毒條件下測試這些物質的毒性作用作為對照。大量的維生素C(100μg/ml)嚴重地抑制了細胞生長。
這表明PDTC的抗病毒作用不是由於它的抗氧化作用，而是明顯與其它性質相關。
實施例8PDTC對流感病毒複製的作用用流感病毒A/PR8/34或Vienna/47/96感染5×105Vero細胞，m.o.i.(感染多重性)為0.01並在室溫溫育1小時。然後，移去接種體並加入包含5μg/ml胰蛋白酶和600μM PDTC的感染介質。在48和72小時後移去上清液並用標準板分析測定在上清液中的病毒滴定度。如圖8中所示，與對照樣本(c)相比，A/PR8/34的病毒滴定度減少了大於2個log等級。
為測試PDTC的有效性，在有和沒有PDTC的情況下進行TCID50(50％組織-培養-感染劑量)分析。用Kaerber方法加和在每一濃度的TCID50用特定病毒的兩倍稀釋液感染96孔微滴定板。感染一小時後，移去上清液並添加包含特定濃度的介質。在4天後測定被感染細胞的數目。圖9顯示在PDTC濃度為300μM時，A/PR8/34和Vienna/47/96的TCID50分別減少了76.4％和82.2％。在濃度為1200μM時，對於這兩種病毒都獲得了高於99.9％的抑制率。
實施例9PDTC有效濃度的測定利用CPE(細胞病理效應)減少分析來測定PDTC的有效濃度。將Vero細胞在96孔微滴定板中溫育並用5TCID50/孔和50TCID50/孔的流感A/PR8/34及用5 TCID50/孔的流感A/Vienna/47/96感染。在感染一小時後移去上清液，並加入具有5μg/ml胰蛋白酶和兩倍稀釋級數的PDTC(此PDTC初始濃度在1200μM)。在接下來的4天中對比對照樣本用肉眼檢測每一濃度的板的細胞病理效應。將每一濃度出現的對照樣本的細胞病理效應相加。100％陽性指在所有孔中完全溶解。在圖10中能夠看到，在PDTC濃度在50-100μM之間時能獲得陽性孔50％的減少。對於所有病毒，在PDTC濃度為600μM時能獲得細胞病理效應的完全抑制。
實施例10在體內PDTC作用的測定以致死劑量(50μl 107pfu)給十隻C57/BL6小鼠鼻內接種。一小時後，用25μl 600mMPDTC或用25μlPBS對它們鼻內給藥。在最初的48小時，每12小時檢查小鼠並給藥，然後是每24小時。測定小鼠的重量並以初始體重的百分比(％w)報告(圖11A)。圖11B顯示用PDTC治療的所有小鼠(方形)都活過了病毒感染並且在感染7天後體重增加。所有用PBS治療的小鼠(菱形)在感染12天內都死亡了(％s＝存活百分率)。
這表明在體外和體內單獨給PDTC就顯示抗流感病毒感染的強大活性。
實施例11PDTC抗馬鼻炎A病毒(ERAV)的抗病毒活性如下研究了通過添加PDTC使得ERAV病毒繁殖減少以10TCID50/細胞感染Vero細胞。與此同時，以不同的濃度加入PDTC(1mM-50μm)。在感染4小時後移去接種體，並加入含PDTC的新鮮的介質。在感染24小時後移去上清液，並用標準板分析測定病毒滴定度。
圖12表明與未處理的細胞(-)相比，上清液中的病毒滴定度(vt)減少了。
實施例12在細胞培養物中PDTC對足和口疾病病毒(MKS)增殖的作用用CPE(細胞病理效應)減少分析測定PDTC抵抗由MKS病毒引起的破壞的有效濃度。
在96孔微滴定板中用0.1TCID50/細胞MKS病毒O-Manisa來接種IB-RS-2細胞，並在37℃溫育1小時。然後，移去接種體並加入含有特定濃度PDTC(10μM-1200μM)的感染介質。在24小時後，通過顯微鏡觀察細胞病理效應來測定被感染的孔數目。
圖13A顯示在24小時後被感染孔的數目(％pos.)依賴於PDTC的濃度。600μM PDTC給予細胞100％抵抗病毒細胞病理效應的保護。濃度在75μM-150μM時能達到被感染的孔減少50％。
為測試PDTC對MKS病毒複製的作用，在T25cm2細胞培養瓶中用0.001 TCID50/細胞的MKS病毒O-Manisa感染IB-RS-2細胞，並在37℃溫育1小時。然後，移去接種體並添加包含特定濃度PDTC(0μM-200μM)的感染介質。在感染24小時後移去上清液並用標準板分析測定病毒滴定度(TCID)。
如圖13B所示，與對照樣本相比(0)，O-Manisa MKS病毒的病毒滴定度被PDTC減少了大於2個log級數，在對照樣本中未添加PDTC。
實施例13在細胞培養物中PDTC對FSME增殖的作用FSME病毒不屬於細小核糖核酸病毒並且不引起呼吸道疾病。
在下述濃度的PDTC的存在下，用10pfu/細胞的FSME病毒(Neudoerfel)感染BHK-21細胞的茂密的單層細胞1000μM、500μM、250μM、125μM、62.5μM、31.25μM、15.6μM、7.8μM、3.9μM、1.95μM和0.975μM。
然後將細胞在37℃溫育4天，並且用顯微鏡檢查單層細胞。利用酶免疫分析測定病毒增殖。顯微鏡檢測未顯示PDTC毒性作用跡象。病毒增殖的定量顯示在任何受試的濃度，PDTC都不會減少病毒增殖。
相似的，我們研究了在混懸的細胞中PDTC是否會影響細胞增殖。濃度與上述測試的相同。這一實驗也顯示PDTC對病毒增殖有減少跡象。
實施例14PDTC對EMC-感染的小鼠的作用用10 TCID50的EMC病毒在腹膜內感染C57B16小鼠。然後，每天一次腹膜內給對照組50μl PBS。其它兩組用50μl的50mM PDTC每天治療。在感染的同時開始一組治療(PDTC)，而在感染24小時後開始另一組治療(PDTC 24hpi)。
圖14顯示感染開始後小鼠體重的變化。很明顯在被治療的和未治療的小鼠之間沒有差別。在每一組中被感染小鼠死亡的平均時間為5.5天。
這表明PDTC對EMC感染無作用。EMC確實屬於細小核糖核酸病毒，但是不在呼吸道引起疾病，而在神經細胞中引起疾病。
權利要求
1.具有結構式R1R2NCS2H的二硫代氨基甲酸酯化合物和這些化合物的氧化型，特別是它們的二聚物和它們的可藥用鹽在製備治療或預防攻擊呼吸道並在那裡引起疾病的RNA病毒感染的製劑中的應用，其中R1和R2各自獨立地代表直鏈或支鏈C1-C4烷基或者與氮原子形成具有4到6個C原子的脂族環，其中R1、R2或脂族環任選地被一個或多個選自OH、NO2、NH2、COOH、SH、F、Cl、Br、I、甲基或乙基的取代基取代。
2.根據權利要求1的應用，其特徵在於R1和R2各自獨立地代表C1-C3烷基或者與氮原子形成具有4到6個C原子的脂族環。
3.根據權利要求1或2的應用，其特徵在於二硫代氨基甲酸酯化合物選自吡咯烷二硫代氨基甲酸酯和N，N-二乙基二硫代氨基甲酸酯。
4.根據權利要求1-3中任一項的應用，其特徵在於，所述病毒感染是細小核糖核酸病毒、正粘病毒或副粘病毒的感染。
5.根據權利要求4的應用，其特徵在於正粘病毒是人流感病毒，特別選自流感A、流感B、流感C或者副粘病毒分別是副流感病毒或肺炎病毒。
6.根據權利要求4的應用，其特徵在於正粘病毒是哺乳動物的流感A病毒。
7.根據權利要求1-6中任一項的應用，其特徵在於細小核糖核酸病毒是鼻病毒，特別是人或馬鼻病毒，是腸道病毒，特別是腸道病毒70、71或柯薩奇病毒，或是口蹄疫病毒，特別是足和口疾病病毒或馬的鼻炎病毒A。
8.根據權利要求1-7中任一項的應用，其特徵在於二硫代氨基甲酸酯化合物以濃度為0.01-5000mM，優選1-300mM，並且尤其優選10-100mM提供於製劑中。
9.根據權利要求1-7中任一項的應用，其特徵在於二硫代氨基甲酸酯化合物以濃度為10mM-1M提供於製劑中。
10.根據權利要求1-9中任一項的應用，其特徵在於此製劑進一步包含可藥用載體。
11.根據權利要求1-10中任一項的應用，其特徵在於此製劑是口服、鼻內、靜脈內、直腸、腸胃外、或作為眼或耳滴劑、作為含漱劑或作為氣霧劑施用的製劑。
12.根據權利要求1-11中任一項的應用，其特徵在於此製劑包含另外的抗病毒物質。
13.根據權利要求1-12中任一項的應用，其特徵在於此製劑進一步包含至少兩種不同的二硫代氨基甲酸酯化合物的組合。
14.根據權利要求1-13中任一項的應用，其特徵在於此製劑還包含選自抗生素、疫苗、免疫抑制劑、穩定劑、免疫-刺激物質、血液製品或它們的混合物的另外的物質。
15.根據權利要求1-14中任一項的應用，其特徵在於此製劑被用來抑制病毒繁殖。
16.消毒劑，其包含至少一種根據權利要求1-15中所描述的二硫代氨基甲酸酯化合物。
17.根據權利要求16所述的消毒劑，其特徵在於，包含濃度為10μM-5M，特別是30μM-1M的二硫代氨基甲酸酯化合物。
18.根據權利要求16或17所述的消毒劑，其特徵在於，包含其它消毒的，特別是抗病毒的物質。
19.用於表面、介質或細胞培養物消毒的方法，其特徵在於，將根據權利要求17或18所述的消毒劑施用於表面或細胞培養物上或介質中。
全文摘要
本發明公開了具有結構式R
文檔編號A61P31/16GK1549709SQ02817135
公開日2004年11月24日 申請日期2002年7月15日 優先權日2001年7月16日
發明者伊莉莎白·蓋於德納克, 安德列亞斯·格拉薩烏爾, 恩斯特·庫赫勒, 託馬斯·馬斯特, 喬基姆·塞佩爾特, 塞佩爾特, 庫赫勒, 馬斯特, 亞斯 格拉薩烏爾, 伊莉莎白 蓋於德納克 申請人:伊莉莎白·蓋於德納克, 安德列亞斯·格拉薩烏爾, 恩斯特·庫赫勒, 託馬斯·馬斯特, 喬基姆·塞佩爾特, 伊莉莎白 蓋於德納克