一種半活體培養測定櫻桃需冷量的方法與流程
2023-06-07 08:19:11
本發明屬於植物育種領域，具體涉及一種半活體培養測定櫻桃需冷量的方法。
背景技術：
：需冷量是指落葉果樹自然休眠所需的有效低溫時數，多數落葉果樹需要積累一定的需冷量後才能打破休眠，進行升溫。需冷量對落葉果樹適地適栽、設施栽培和預測氣候變化具有重要的意義。櫻桃果實外表色澤鮮豔、晶瑩美麗，富含糖、蛋白質、維生素及鈣、鐵、磷、鉀等多種元素，是一種高檔水果，經濟價值高，適合我國種值。通過設施栽培能夠提早果實的成熟期，從而顯著地提高經濟效益，但櫻桃和其它果樹一樣，需要積累一定的需冷量後才能打破自然休眠，從而正常開花結果。因此，只有知道櫻桃各品種的需冷量，才能正確地選擇設施地栽培品種和覆膜加溫時間。現有的測量果樹需冷量方法多是落葉後每隔一段時間直接從田間採集枝條，然後帶回實驗室進行光照培養，觀察花芽或葉芽的萌芽率，然後根據當地氣象局監測的氣溫或自動監測儀測定的溫度進行測算，這種方法耗費時間長，且枝條易受外界溫度不可控因素的影響，同時需要利用其它設備記錄外界溫度。劉仁道(劉仁道,劉建軍.甜櫻桃不同品種需冷量研究.北方園藝,2009(2)：84-85)等將枝條採集後直接放入4℃冰箱中保存，然後進行室溫培養，但此方法的缺點是枝條長時間存放會出現乾枯或發黴現象，且在冰箱中存放始終處於黑暗環境，對花芽分化有一定影響，不能精確地測定其需冷量。技術實現要素：本發明針對當前果樹需冷量測定存在的問題，提出一種利用半活體培養測量法，除了控制溫度以外，儘可能模擬外界環境條件，以便更為準確地測定櫻桃的需冷量，為生產實踐提供更為可靠的數據。該方法可用於其他落葉果樹(桃、梨等)的需冷量測定，也可為其他植物的需冷量測定提供參考。即，本發明的第一目的在於提供一種半活體培養測定櫻桃需冷量的方法，包括以下步驟：1)採集櫻桃枝條；2)低溫培養櫻桃枝條；3)室溫培養櫻桃枝條，統計花芽和葉芽萌芽率，測定櫻桃需冷量。優選地，本發明所述的半活體培養測定櫻桃需冷量的方法中，所述步驟1)中採集的櫻桃枝條為12月中下旬櫻桃樹休眠後、採集帶有飽滿花芽的櫻桃樹上一年生枝條。優選地，本發明所述的半活體培養測定櫻桃需冷量的方法中，所述步驟1)中採集櫻桃枝條的方法為剪平枝條基部，控制枝條長度30～50cm，且每根枝條上至少留有5個花芽。優選地，本發明所述的半活體培養測定櫻桃需冷量的方法中，所述步驟2)中低溫培養的方法為將採集的枝條插入裝有培養液的容器中，放入4～7℃低溫培養箱中培養。更優選地，本發明所述的半活體培養測定櫻桃需冷量的方法中，所述步驟2)中低溫培養的光照條件為白天/黑夜＝10h/14h，光照強度1200lx。優選地，本發明所述的半活體培養測定櫻桃需冷量的方法中，所述步驟3)中室溫培養櫻桃枝條的方法為每隔4天將低溫培養箱中的枝條取出，剪去枝條基部，使枝條下部露出新鮮色，插入裝有培養液的容器中，然後將裝有枝條的容器放入白天溫度25℃、晚上溫度15℃的培養箱中進行培養15天。更優選地，本發明所述的半活體培養測定櫻桃需冷量的方法中，所述室溫培養的光照條件為白天/黑夜＝14h/10h，光照強度2500lx。優選地，本發明所述的半活體培養測定櫻桃需冷量的方法中，所述需冷量測定的標準為以葉芽和花芽萌芽率達到50％為葉芽和花芽滿足其自身需冷量，再用需冷量模型計算出櫻桃需冷量。優選地，本發明所述的半活體培養測定櫻桃需冷量的方法中，所述培養液為25g/l的蔗糖溶液；所述培養液在整個培養期間，每5天更換一次。本發明與現有技術相比，本發明至少具有以下優點：通過低溫培養與室溫培養交替應用，儘可能模擬外界條件，有效地控制了溫度，避免枝條受外界溫度不可控因素的影響或利用其它設備記錄外界溫度，為需冷量的計算提供方便。具體實施方式下面將結合本發明中的實施例，對本發明中的技術方案進行清楚、完整地描述。顯然，所描述的實施例僅僅是本發明一部分實施例，而不是全部的實施例。基於本發明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬於本發明保護的範圍。實施例11)枝條採集：於12月中旬短柄櫻桃樹和黑珍珠櫻桃樹落葉後，採集帶有飽滿花芽的一年生枝條，剪平枝條基部，控制枝條長度50cm，確保每根枝條上至少留有5個花芽。2)低溫培養：將採集的枝條插入裝有25g/l蔗糖培養液的容器中，放入4℃培養箱中進行培養，光照條件白天/黑夜＝10h/14h，光照強度1200lx。營養液每隔5天更換一次。3)室溫培養：每隔4天將4℃培養箱中的枝條取出，剪去枝條基部，使枝條下部露出新鮮色，插入裝有25g/l蔗糖培養液的容器中，然後將裝有枝條的容器放入白天溫度25℃、晚上溫度15℃、白天/黑夜＝14h/10h、光照強度為2500lx的培養箱中進行培養。15天後，統計花芽和葉芽萌芽率，以葉芽和花芽萌芽率達到50％為葉芽和花芽滿足其自身需冷量，再用需冷量模型計算出櫻桃需冷量。表14℃培養後短柄和黑珍珠櫻桃葉芽和花芽的萌芽率(％)培養時間144h240h336h432h528h624h720h816h短柄葉芽16.030.045.079.0100黑珍珠葉芽10.015.020.024.035.055.066.7100短柄花芽26.038.069.0100黑珍珠花芽10.022.036.044.072.7100從表1可以看到，短柄葉芽的需冷量為432h，花芽需冷量為336h；黑珍珠葉芽需冷量為624h，花芽需冷量為528h。實施例21)枝條採集：於12月中旬短柄和黑珍珠櫻桃樹落葉後，採集帶有飽滿花芽的一年生枝條，剪平枝條基部，控制枝條長度50cm，確保每根枝條上至少留有5個花芽。2)低溫培養：將採集的枝條插入裝有25g/l蔗糖培養液的容器中，放入7℃培養箱中進行培養，光照條件白天/黑夜＝10h/14h，光照強度1200lx。營養液每隔5天更換一次。3)室溫培養：每隔4天將7℃培養箱中的枝條取出，剪去枝條基部，使枝條下部露出新鮮色，插入裝有25g/l蔗糖培養液的容器中，然後將裝有枝條的容器放入白天溫度25℃、晚上溫度15℃、白天/黑夜＝14h/10h、光照強度為2500lx的培養箱中進行培養。15天後，統計花芽和葉芽萌芽率，以葉芽和花芽萌芽率達到50％為葉芽和花芽滿足其自身需冷量，再用需冷量模型計算出櫻桃需冷量。表27℃培養後短柄和黑珍珠櫻桃葉芽和花芽的萌芽率(％)從表2可以看到，短柄葉芽的需冷量為432h，花芽需冷量為336h；黑珍珠葉芽需冷量為624h，花芽需冷量為528h。以上所述僅是本發明的優選實施方式，應當指出，對於本
技術領域：
的普通技術人員來說，在不脫離本發明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發明的保護範圍。當前第1頁12