一種美國紅楓的組織培養方法
2023-10-06 22:05:59
一種美國紅楓的組織培養方法
【專利摘要】本發明涉及植物的組織培養方法，具體說是一種美國紅楓的組織培養方法，其包括選用美國紅楓帶腋芽的有效莖段作為外植體，先對有效莖段進行消毒預處理；然後在超淨工作檯上把外植體接種到腋芽發育啟動培養基中進行培養，獲得無菌苗；將上述無菌苗接種到芽增殖和伸長培養基中進行培養；選擇增殖芽的生長點按照培育進度依次轉移到愈傷組織誘導培養基、愈傷組織增殖培養基、根誘導培養基中進行培養，獲得無毒植株；將無毒植株移栽種植。本發明採用獨特的外植體和培養基配方，大幅度提高了美國紅楓組織培養的成功率和植株質量，為美國紅楓的產業化發展提供有力保證，且培養快速、經濟。
【專利說明】一種美國紅楓的組織培養方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及植物的組織培養方法，尤其涉及觀賞林木的組織培養方法，具體地說是一種美國紅楓的組織培養方法。
【背景技術】
[0002]美國紅楓(Acerrubrum)又名紅花槭、北美紅楓，槭樹科槭樹屬。樹高12 —18米，其樹姿優美，枝葉繁茂，葉型纖秀，葉色秀麗，秋天變色最早，主色鮮紅，副色橘黃，色豔如花，主要用於林園觀賞和庭院綠化，也是珍貴的家庭盆栽樹種。目前，美國紅楓一般採用種子繁殖、嫁接繁殖和扦插繁殖三種繁殖方式，但是這三種方式繁殖速度較慢，組織培養快繁是一種有效的繁殖方式，它不僅提高了紅楓的繁殖速率，同時對苗木的質量也提供了有力保證，為園林綠化提供充足的種苗。
[0003]White早在1943年就發現植物生長點附近的病毒濃度很低，有的甚至無病毒，如果利用組織培養方法，取一定大小的莖尖生長點進行培養，再生的植株有可能不攜帶任何病毒，從而可以獲得脫病毒苗，再用脫毒苗進行繁殖，則種植的作物就不會或極少發生病毒感染，可以大幅度提高作物的觀賞價值和使用價值。
【發明內容】
[0004]針對上述技術問題，本發明提供一種美國紅楓的組織培養方法，實現美國紅楓的人工快速經濟繁育，提高美國紅楓的觀賞價值，推進美國紅楓的進一步產業化。
[0005]本發明解決上述技術問題所採用的技術方案為:一種美國紅楓的組織培養方法，包括以下步驟:
[0006]a:選用美國紅楓帶腋芽的有效莖段作為外植體，先對有效莖段進行消毒預處理；
[0007]b:然後在超淨工作檯上把外植體接種到腋芽發育啟動培養基中進行培養，獲得無菌苗；
[0008]c:將上述無菌苗接種到芽增殖和伸長培養基中進行培養；
[0009]d:選擇增殖芽的生長點按照培育進度依次轉移到愈傷組織誘導培養基、愈傷組織增殖培養基、根誘導培養基中進行培養，獲得無毒植株；
[0010]e:將無毒植株移栽種植。
[0011]作為優選，在移栽種植前，將無毒植株進行煉苗鍛鍊。
[0012]作為優選，外植體接種到腋芽發育啟動培養基中進行暗處理2d，然後轉入1600-2000Lux光強下培養，光照12_14h/d，溫度22_26°C，培養20天，獲得無菌苗。
[0013]作為優選，步驟(C)中培養條件為:溫度24_26°C，溼度60%_70%，光照為12_14h/d，光強為1600-2000Lux的螢光燈下培養。
[0014]作為優選，所述煉苗鍛鍊採用閉瓶煉苗6d後進行開瓶煉苗3d的方式進行。
[0015]作為優選，所述美國紅楓腋芽發育啟動培養基組合為MS+6 - BA (0.6mg/L)+IAA(0.4mg/L)。[0016]作為優選，所述芽增殖及伸長培養基組合為l/2MS+6-BA(l.0mg/L)+IAA(0.2mg/L) +GA3(1.0mg/L)
[0017]作為優選，所述愈傷組織誘導培養基組合為WAP、6-BA (0.6mg/L)、IAA (0.3mg/L)，愈傷組織增殖培養基組合為WAP、6-BA(0.6mg/L)、IAA(1.0mg/L)，根誘導培養基配方為1/2MS.6-BA (0.5mg/L)、NAA (2.0mg/L)、活性炭(1.0mg/L)。
[0018]從以上技術方案可知，本發明採用獨特的外植體和培養基配方，大幅度提高了美國紅楓組織培養的成功率和植株質量，為美國紅楓的產業化發展提供有力保證，且培養快速、經濟。
【具體實施方式】
[0019]下面詳細介紹本發明的培養方法，首先選用美國紅楓帶腋芽的有效莖段作為外植體進行培養，先對有效莖段進行消毒預處理在超淨工作檯上把外植體接種到最佳的腋芽發育啟動培養基中，暗處理2d，然後轉入1600-2000LUX光強下培養，光照12_14h/d，溫度22-26°C，培養20天，獲得無菌苗，然後把無菌苗接種到芽增殖和伸長培養基中，條件:溫度24-26°C，溼度60%-70%，光照為12_14h/d，光強為1600_2000Lux的螢光燈下培養，最後選擇增殖芽的生長點按照培育進度依次轉移到愈傷組織誘導培養基、愈傷組織增殖培養基、根誘導培養基中進行培養，培養完成後獲得無毒植株，然後再將無毒苗移栽種植，為了提高移栽成活率，採用閉瓶煉苗6d後開瓶煉苗3d的方式進行移栽前煉苗鍛鍊。
[0020]在實施過程中，美國紅楓腋芽發育啟動培養最佳培養基組合為MS+6 - BA (0.6mg/L)+IAA(0.4mg/L)，芽增殖及伸長培養基組合為 1/2MS+6-BA (1.0mg/L)+IAA (0.2mg/L) +GA3 (1.0mg/L)，所述愈傷組織誘導最佳培養基組合為WAP+6-BA (0.6mg/L) +IAA (0.3mg/L)，愈傷組織增殖培養最佳培養基組合為WAP+6-BA (0.6mg/L) +IAA (1.0mg/L)，根誘導最佳培養基配方為 l/2MS+6-BA(0.5mg/L) +NAA (2.0mg/L) + 活性炭(1.0mg/L)。
`[0021]實施例
[0022]取美國紅楓帶腋芽的有效莖尖1.0-1.5cm作為組織培養外植體，在超淨工作檯上將外植體放入到70%酒精中消毒20-30S ;然後轉入2%的次氯酸鈉溶液中消毒5-10min，再用無菌水衝洗5次左右，處理完後把外植體接種到MS+6 - BA (0.6mg/L)+IAA(0.4mg/L)培養基中培養15d左右，獲得無菌苗，再將無菌苗接種到l/2MS+6-BA(l.0mg/L)+IAA(0.2mg/L)+GA3(1.0mg/L)培養基中20天後，獲得大量增殖的芽，最後在超淨工作檯上挑取這些芽的生長點依次接種到WAP+6-BA (0.6mg/L) +IAA (0.3mg/L)培養基培養10天左右、WAP+6-BA(0.6mg/L)+IAA(l.0mg/L)培養基培養 30 天左右和 1/2MS+6-BA(0.5mg/L)+NAA(2.0mg/L) +活性炭(1.0mg/L)培養基中培養四周左右中培養，從而獲得組織培養無毒植株；組培苗如果直接移栽，成活率不高，為了提高成活率，先要對組培苗進行移栽前煉苗鍛鍊，一般採用閉瓶煉苗6d+開瓶煉苗3d後，再移栽到大棚中去。
[0023]上述實施方式僅供說明本發明之用，而並非是對本發明的限制，有關【技術領域】的普通技術人員，在不脫離本發明精神和範圍的情況下，還可以作出各種變化和變型，因此所有等同的技術方案也應屬於本發明的範疇。
【權利要求】
1.一種美國紅楓的組織培養方法，包括以下步驟: a:選用美國紅楓帶腋芽的有效莖段作為外植體，先對有效莖段進行消毒預處理； b:然後在超淨工作檯上把外植體接種到腋芽發育啟動培養基中進行培養，獲得無菌苗； c:將上述無菌苗接種到芽增殖和伸長培養基中進行培養； d:選擇增殖芽的生長點按照培育進度依次轉移到愈傷組織誘導培養基、愈傷組織增殖培養基、根誘導培養基中進行培養，獲得無毒植株；e:將無毒植株移栽種植。
2.根據權利要求1所述的方法，其特徵在於:在移栽種植前，將無毒植株進行煉苗鍛鍊。
3.根據權利要求1所述的方法，其特徵在於:外植體接種到腋芽發育啟動培養基中進行暗處理2d，然後轉入1600-2000Lux光強下培養，光照12_14h/d，溫度22-26 °C，培養20天，獲得無菌苗。
4.根據權利要求1所述的方法，其特徵在於:步驟(c)中培養條件為:溫度24-26°C，溼度60%-70%，光照為12-14h/d，光強為1600-2000Lux的螢光燈下培養。
5.根據權利要求2所述的方法，其特徵在於:所述煉苗鍛鍊採用閉瓶煉苗6d後進行開瓶煉苗3d的方式進行。
6.根據權利要求1所述的方法，其特徵在於:所述美國紅楓腋芽發育啟動培養基組合為 MS+6 — BA(0.6mg/L)+IAA(0.4mg/L)。
7.根據權利要求1所述的方法，其特徵在於:所述芽增殖及伸長培養基組合為1/2MS+6-BA(1.0mg/L)+IAA(0.2mg/L)+GA3(1.0mg/L)。
8.根據權利要求1所述的方法，其特徵在於:所述愈傷組織誘導培養基組合為WAP、6-BA(0.6mg/L)、IAA (0.3mg/L)，愈傷組織增殖培養基組合為 WAP、6_BA(0.6mg/L)、IAA (1.0mg/L)，根誘導培養基配方為 1/2MS、6_BA (0.5mg/L)、NAA (2.0mg/L)、活性炭(1.0mg/L)。
【文檔編號】A01H4/00GK103828719SQ201410090748
【公開日】2014年6月4日 申請日期:2014年3月13日 優先權日:2014年3月13日
【發明者】李在根 申請人:湖南天福林業科技有限公司