漿果類花葯再生植株的誘導基的製作方法
2023-10-29 00:07:52 1
專利名稱：漿果類花葯再生植株的誘導基的製作方法
技術領域：
本發明涉及植物組織培養基的改進，尤其涉及漿果類花葯再生植株的誘導 培養基的配方改進，屬於生物工程技術領域。
背景技術：
目前，漿果類多是採用花葯培養獲得脫毒苗和單倍體植株，但漿果類花葯
愈傷組織再生植株的誘導率較低，最高僅達到20%左右。嚴重影響了漿果類生 產脫毒種苗的應用和生物技術育種工作的進程。
傳統的花葯培養均是採用MS和F培養基，MS與F培養基無機鹽濃度較 高，成本較高；且激素的濃度也不合理，誘導分化率較低。
發明內容
本發明就是針對上述問題，提供一種誘導分化率高的漿果類花葯再生植株 誘導基。
為實現上述目的，本發明採用如下技術方案，本發明的誘導基包括無機鹽 和激素，所述的無機鹽的大量元素包括NH4N03 300-450mg/L， NH4H2P04 80-150mg/L， KN03 500-650mg/L, CaCl22H20 80-100mg/L， MgS047H20 200-300mg/L， Ca(N03)2.4H20 200-300mg/L， EDTA-FE 10-30mg/L;
所述的無機鹽的微量元素包括KI 0.3-1.2mg/L， MnS04*H20 10-30mg/L， H3B03 5-20mg/L， ZnS04.7H20 5-10mg/L， NaMo04.2H20 0.1-0.5mg/L， CuS04'5H20 0.5-1.0mg/L， CoCl2'6H20 0.5-1.0mg/L;
所述激素包括6-苄基氨基嘌呤BA 0.2-0.8mg/L，赤黴酸GA3 0.5-1.5mg/L， 二，四-滴酊脂2-4D 0.2-0.8mg/L，青黴素G 20-80mg/L，吲哚丁酸IBA 0.2-1.0mg/L。本發明的有益效果
由於本發明的無機鹽含量是1575.1-1771.5mg/L，最適濃度1742mg/L與MS 培養基所含無機鹽濃度比為1: 2.6，與F培養基所含無機鹽濃度比為1: 1.6。 研究結果表明合理降低培養基無機鹽含量有利於分化培養，高濃度無機
鹽抑制愈傷組織植株的再生，尤其是磷鎂含量與比例作用顯著，含量越高比值
超大其抑制作用越大；因此，利用本發明進行槳果類花葯培養，再生植株誘導 率達90%以上，可比MS培養基與F培養基節約投入成本1.6—2. 6倍；花粉 單核期培養誘導產生二倍體植株與單倍體植株，試驗調查顯示適宜濃度的GA3 與2. 4—D可有效促進植株分化，誘導作用明顯；微量元素硼鈷銅含量的增加 可促進花粉管伸長，形成單格體植株，且植株難壯，成活率高。
愈傷組織分化產生的二倍體植株可進一步擴繁成無毒種苗用於生產，提高 漿果類的產量與品質；其產生的單倍體植株通過秋水仙素加倍成為漿果類育種 的純合材料，縮短了育種周期。
具體實施例方式
實施例1:
誘導基包括無機鹽和激素，所述的無機鹽的大量元素包括NH4N03 360mg/L， NH4H2P04 115mg/L， KN03 560mg/L， CaCl22H20 90mg/L, MgS04.7H20 240mg/L， Ca(N03)2.4H20 240mg/L， EDTA-FE 22mg/L;
所述的無機鹽的微量元素包括KI 0.4mg/L, MnS(VH20 20mg/L， H3B03 14mg/L， ZnS04.7H20 8mg/L， NaMo04.2H20 0.3mg/L， CuS04.5H20 0.3mg/L， CoCl2.6H20 0.3mg/L;
所述激素包括6-苄基氨基嘌呤BA 0.5mg/L,赤黴酸GA3 1.2mg/L, 二， 四-滴酊脂2-4D 0.55mg/L,青黴素G55mg/L，吲哚丁酸IBA0.6mg/L。
本發明與MS、 F培養基比較還有如下不同1)本發明中大量營養元素的 比例與試管苗中營養元素比例相近，P: Mg為l: 1， N03-N: NH4-N為2.1: 1，提高了磷、鎂含量和比值，確定了合適的氮素來源；
2) 微量元素含量比提高硼酸用量一倍，硫酸銅和氯化鈷30倍；
3) 本發明總離子濃度較低，與MS、 F培養基總離子濃度比為1: 2.6: 1.6;
4) 調整了激素配比，增加了赤黴素與2， 4-D兩種激素。
權利要求
1、漿果類花葯再生植株的誘導基，包括無機鹽和激素，其特徵在於所述的無機鹽的大量元素包括NH4NO3300-450mg/L，NH4H2PO480-150mg/L，KNO3 500-650mg/L，CaCl2·2H2O80-100mg/L，MgSO4·7H2O200-300mg/L，Ca(NO3)2·4H2O200-300mg/L，EDTA-FE10-30mg/L；所述的無機鹽的微量元素包括KI0.3-1.2mg/L，MnSO4·H2O10-30mg/L，H3BO35-20mg/L，ZnSO4·7H2O5-10mg/L，NaMoO4.2H2O0.1-0.5mg/L，CuSO4·5H2O0.5-1.0mg/L，CoCl2·6H2O0.5-1.0mg/L；所述激素包括6-苄基氨基嘌呤BA0.2-0.8mg/L，赤黴酸GA30.5-1.5mg/L，二，四-滴酊脂2-4D 0.2-0.8mg/L，青黴素G 20-80mg/L，吲哚丁酸IBA0.2-1.0mg/L。
2、根據權利要求1所述的漿果類花葯再生植株的誘導基，其特徵在於所述 的無機鹽的大量元素包括NH4N03 360mg/L, NH4H2P04 115mg/L， KN03 560mg/L， CaCl22H20 90mg/L， MgS047H20 240mg/L， Ca(N03)24H20 240mg/L， EDTA畫FE 22mg/L;所述的無機鹽的微量元素包括KI 0.4mg/L， MnS04'H20 20mg/L， H3B03 14mg/L， ZnS04'7H20 8mg/L， NaMo04.2H20 0.3mg/L, CuS04.5H20 0.3mg/L， CoCl2'6H20 0.3mg/L;所述激素包括6-苄基氨基嘌呤BA 0.5mg/L，赤黴酸GA3 1.2mg/L， 二， 四-滴酊脂2-4D 0.55mg/L，青黴素G55mg/L，吲哚丁酸IBA 0.6mg/L。
全文摘要
漿果類花葯再生植株的誘導基涉及植物組織培養基的改進，尤其涉及漿果類花葯再生植株的誘導培養基的配方改進，屬於生物工程技術領域。本發明就是提供一種誘導分化率高的漿果類花葯再生植株誘導基。本發明的誘導基包括無機鹽和激素，所述的無機鹽的大量元素包括NH4NO3，NH4H2PO4，KNO3，CaCl2·2H2O，MgSO4·7H2O，Ca(NO3)2·4H2O，EDTA-FE；所述的無機鹽的微量元素包括KI，MnSO4·H2O，H3BO3，ZnSO4·7H2O，NaMoO4·2H2O，CuSO4·5H2O，CoCl2·6H2O；所述激素包括BA，GA3，2-4D，G，IBAL。採用本發明的誘導基可使花葯再生植株的誘導分化率達到90％以上，利於擴繁脫毒種苗，且可縮短育種周期。
文檔編號A01H4/00GK101433185SQ20071015821
公開日2009年5月20日 申請日期2007年11月13日 優先權日2007年11月13日
發明者磊 劉 申請人:磊 劉