一種紅豆杉中10-去乙醯基紫杉醇的薄層色譜檢測方法
2023-10-20 02:55:32 3
一種紅豆杉中10-去乙醯基紫杉醇的薄層色譜檢測方法
【專利摘要】一種紅豆杉中10-去乙醯基紫杉醇的薄層色譜檢測方法，涉及一種檢測方法，具體涉及一種紅豆杉中10-去乙醯基紫杉醇的薄層色譜檢測方法，所述方法包括如下步驟：⑴10-去乙醯基紫杉醇對照品溶液製備；⑵樣品溶液製備；⑶薄層色譜檢測。本發明有益效果是檢測10-去乙醯基紫杉醇方法簡單、實用和經濟。
【專利說明】—種紅豆杉中10-去乙醯基紫杉醇的薄層色譜檢測方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種檢測方法，具體涉及一種紅豆杉中10-去乙醯基紫杉醇的薄層色譜檢測方法。
【背景技術】
[0002]紫杉醇是紅豆杉屬植物中的一種複雜的次生代謝產物，也是目前所了解的惟一一種可以促進微管聚合和穩定已聚合微管的藥物。同位素示蹤表明，紫杉醇只結合到聚合的微管上，不與未聚合的微管蛋白二聚體反應。細胞接觸紫杉醇後會在細胞內積累大量的微管，這些微管的積累幹擾了細胞的各種功能，特別是使細胞分裂停止於有絲分裂期，阻斷了細胞的正常分裂。通過I1-1II臨床研究，紫杉醇主要適用於卵巢癌和乳腺癌，對肺癌、大腸癌、黑色素瘤、頭頸部癌、淋巴瘤、腦瘤也都有一定療效。
[0003]10-去乙醯基紫杉醇可以通過化學合成為紫杉醇，所以檢測10-去乙醯基紫杉醇
是重要的。
[0004]常規的10-去乙醯基紫杉醇檢測方法為HPLC檢測，填料為反相填料。流動相為乙腈-水，檢測器是紫外檢測器。
【發明內容】
[0005]常規的HPLC檢測10-去乙醯基紫杉醇方法要求高:
[0006]⑴需要一臺HPLC，一臺HPLC價格通常10萬以上，HPLC價格高，普及率低；
[0007](2) HPLC需要有專業的人員操作、維護和維修；
[0008](3) HPLC檢測需要大量溶劑，大量溶劑的使用對環境也造成了極大的汙染；
[0009](4) HPLC檢測每次只能檢測一個樣品，檢測時間也長。
[0010]本發明提供了一種易於操作、能定性半定量和經濟的薄層色譜檢測方法，該方法解決HPLC檢測的部分弊端。
[0011]一種紅豆杉中10-去乙醯基紫杉醇的薄層色譜檢測方法，所述方法包括如下步驟:
[0012]⑴稱取10-去乙醯基紫杉醇0.1?lmg，用Iml有機溶劑溶解，得到10-去乙醯基紫杉醇對照品溶液；
[0013]⑵將紅豆杉原料粉碎，用醇溶液浸提三次，合併三次浸提溶液，濃縮浸提溶液至原體積的1/3?1/2，用等體積有機溶劑I萃取三次，合併三次萃取相，蒸乾萃取相，稱取蒸乾粉末0.1?lmg，用Iml有機溶劑II溶解，得到樣品溶液；
[0014]⑶吸取步驟⑴和⑵製備的溶液各5?10 μ 1，點在同一矽膠G薄層板上，展開劑是滷代烴和醇，滷代烴和醇的體積比是100:10?I,展開,取出，晾乾,用5?10%濃硫酸乙醇溶液顯色，用105°C烘乾薄層板至斑點顯色。
[0015]所述方法步驟⑴中的有機溶劑優選為甲醇、無水乙醇或N，N-甲基甲醯胺，N，N-甲基甲醯胺溶解10-去乙醯基紫杉醇溶解度高，甲醇和無水乙醇沸點低。[0016]所述方法步驟⑴紅豆杉原料優選為樹皮、枝葉和樹根。
[0017]所述方法步驟⑵醇溶液優選為甲醇、無水乙醇、甲醇水溶液或乙醇水溶液。
[0018]所述方法步驟⑵有機溶劑I優選為二氯甲烷、三氯甲烷或乙酸乙酯。
[0019]所述方法步驟⑵有機溶劑II優選為甲醇、無水乙醇或N，N-二甲基甲醯胺，N，N-二甲基甲醯胺溶解10-去乙醯基紫杉醇溶解度高，甲醇和無水乙醇沸點低。
[0020]所述方法步驟⑶滷代烴優選為二氯甲烷或三氯甲烷。
[0021]所述方法步驟⑶醇優選為甲醇或無水乙醇。
[0022]本發明有益效果是:
[0023]⑴10-去乙醯基紫杉醇檢測方法簡單、實用和經濟。
[0024]⑵一次檢測可以同時檢測多個樣品。
[0025]⑶檢測結果可以定性和半定量。
【具體實施方式】
[0026]下述非限制性實施例可以使本領域的普通技術人員更全面地理解本發明，但不以任何方式限制本發明。
[0027]實施例1
[0028]一種紅豆杉中10-去乙醯基紫杉醇的薄層色譜檢測方法，所述方法包括如下步驟:
[0029]⑴稱取10-去乙醯基紫杉醇標準品0.5mg,用Iml甲醇超聲溶解，得到10-去乙醯基紫杉醇對照品溶液，濃度0.5mg/ml，作為定性和半定量的標準；
[0030]⑵將紅豆杉樹皮、枝葉和樹根粉碎，粉碎後用無水乙醇浸提三次，合併三次浸提溶液，減壓蒸餾法濃縮浸提溶液，真空度0.8MPa，水浴溫度55°C，濃縮至原體積的1/3，用等體積二氯甲烷萃取濃縮液三次，合併三次萃取相，減壓蒸餾法蒸乾萃取相，真空度0.4MPa，水浴溫度35°C，稱取蒸乾粉末0.5mg，用Iml甲醇超聲溶解，得到樣品溶液；
[0031]⑶用玻璃點樣毛細管吸取步驟⑴和⑵製備的溶液各10 μ 1，點在同一矽膠G薄層板、距板底Icm處同一水平線上，展開劑是三氯甲烷和無水乙醇，三氯甲烷和無水乙醇的體積比是100:5，平衡5?lOmin，展開，展開至距板頂Icm處取出，取出，用熱風吹乾，用10%濃硫酸乙醇溶液顯色，用105°C烘乾薄層板至斑點顯色。
【權利要求】
1.一種紅豆杉中10-去乙醯基紫杉醇的薄層色譜檢測方法，所述方法包括如下步驟: ⑴稱取10-去乙醯基紫杉醇0.1?lmg，用Iml有機溶劑溶解，得到10-去乙醯基紫杉醇對照品溶液； ⑵將紅豆杉原料粉碎，用醇溶液浸提三次，合併三次浸提溶液，濃縮浸提溶液至原體積的1/3?1/2，用等體積有機溶劑I萃取三次，合併三次萃取相，蒸乾萃取相，稱取蒸乾粉末0.1?lmg，用Iml有機溶劑II溶解，得到樣品溶液； ⑶吸取步驟⑴和⑵製備的溶液各5?10 μ 1，點在同一矽膠G薄層板上，展開劑是滷代烴和醇，滷代烴和醇的體積比是100:10?I,展開,取出，晾乾,用5?10%濃硫酸乙醇溶液顯色，用105°C烘乾薄層板至斑點顯色。
2.根據權利要求1所述的方法，其特徵在於:所述方法步驟⑴有機溶劑是甲醇、無水乙醇或N，N-二甲基甲醯胺。
3.根據權利要求1所述的方法，其特徵在於:所述方法步驟⑴紅豆杉原料是樹皮、枝葉和樹根。
4.根據權利要求1所述的方法，其特徵在於:所述方法步驟⑵醇溶液是甲醇、無水乙醇、甲醇水溶液或乙醇水溶液。
5.根據權利要求1所述的方法，其特徵在於:所述方法步驟⑵有機溶劑I是二氯甲烷、三氯甲烷或乙酸乙酯。
6.根據權利要求1所述的方法，其特徵在於:所述方法步驟⑵有機溶劑II是甲醇、無水乙醇或N，N-二甲基甲醯胺。
7.根據權利要求1所述的方法，其特徵在於:所述方法步驟⑶滷代烴是二氯甲烷或三氯甲烷。
8.根據權利要求1所述的方法，其特徵在於:所述方法步驟⑶醇是甲醇或無水乙醇。
【文檔編號】G01N30/90GK103808851SQ201210460618
【公開日】2014年5月21日 申請日期:2012年11月15日 優先權日:2012年11月15日
【發明者】劉勝遠 申請人:劉勝遠