用中藥指紋圖譜技術檢測丁香藥材的方法
2023-10-17 23:38:29
專利名稱：用中藥指紋圖譜技術檢測丁香藥材的方法
技術領域：
本發明屬於一種中藥材的檢測方法，具體是用中藥指紋圖譜技術檢測丁香藥材的方法。
背景技術：
丁香藥材來源於桃金孃科植物丁香Eugeniacaryophylla-ta Thunb.的乾燥花蕾，收載於中國藥典。丁香花蕾中含16-18％的丁香油，油中含70-85％的丁香酚、7-17％的乙醯丁香酚、葎草烯等化學成分，中國藥典中僅採用揮髮油測定的方法對其進行定量分析，因此，不能完整的反應丁香藥材的全貌。指紋圖譜分析技術可以有效地量化檢測出中藥材的宏觀質量信息，它與現行的單一指標成分或活性成分鑑定相比，其所含的信息是綜合的多層次的和具體量化的，因此更為科學和合理，更為符合中藥的藥理，中藥質量的最終檢測標準也更為安全和有效。用中藥指紋圖譜技術檢測中藥材的質量已成為目前能夠為國內外廣泛接受的一種中藥質量評價模式。
發明內容
本發明的目的就是提出一種用中藥指紋圖譜技術檢測丁香藥材的方法。
本方法包括下述步驟第一步，建立丁香藥材對照指紋圖譜①標準品溶液的製備取丁香酚標準品適量，加甲醇製成每1mg/ml的溶液，即得；②對照品溶液的製備取經鑑定為丁香藥材的粉末5.0g，置具塞錐形瓶中，加入70％甲醇25ml，振搖使其充分浸潤，室溫下浸泡24小時後，過濾，精密吸取1ml上述溶液置10ml頂空進樣瓶中，加蓋密封，即得；色譜條件色譜柱Agilent HP-5，30m×320μm×0.25μm，進樣口溫度230℃
FID檢測器溫度260℃升溫程序初始100℃，保持1min，4.5℃/min升至180℃，保持1min，10℃/min升至220℃，保持10min；載氣為N2，流速1.5ml/min，恆流方式，不分流；進樣器G1888A頂空自動進樣器，頂空瓶溫度90℃，進樣閥溫度105℃，傳輸線溫度120℃，頂空瓶平衡時間15min，頂空瓶充壓時間0.2min，定量環填充時間0.2min，定量環平衡時間0.5min，進樣時間1min；③3、主要儀器與試藥色譜儀 Agilent6890試藥甲醇 天津產 優級純水純淨水二次蒸餾氮氣高純氮氣，純度99.999％④檢測對照品溶液及標準品溶液分別經頂空進樣器進樣，氣相色譜儀測定，即得對照品和標準品氣相色譜圖。
所述丁香藥材對照指紋圖譜中，共有5個特徵峰，其中1號峰為丁香酚，與標準品指紋圖譜一致。丁香藥材對照指紋圖譜的建立，使產品的質量控制有了非常明確、直觀、易於操作的標準，使用時只需將檢測結果與之進行比較即可得出結論。
第二步，建立丁香藥材指紋圖譜共有模式圖譜對所收集並經鑑定為丁香藥材的10批樣品按對照品溶液的製備方法製備供試品溶液，按上述標準品溶液製備方法製備標準品溶液，並逐一按上述相同方法檢測，分別得到各批丁香藥材相應的指紋圖譜和標準品指紋圖譜；經計算機輔助相似性評價系統進行計算，即可得出丁香藥材共有模式圖譜；建立共有模式圖譜的作用一是可以將所得的丁香藥材指紋圖譜輸入計算機計算供試品與共有模式圖譜之間的相關係數，從理論上考察供試品與共有模式圖譜之間的相似度，從而使質量的判別標準更客觀科學；二是可方便不同產地、不同品種、不同生態環境下各品種之間進行比較，以考察產品的均一性和穩定性，確保為消費者提供優質的產品。
第三步，供試品檢測1、供試品溶液的製備以上述相同方法製備丁香藥材供試品溶液；2、以上述相同方法製備標準品溶液；3、以上述相同方法測定待測的標準品和供試品；4、結果分析判定色譜圖中應檢出與對照指紋圖譜相同的5個特徵峰，其中1號峰為丁香酚，應與標準品指紋圖譜一致；供試品指紋圖譜與相應的共有模式圖譜經計算機輔助相似性評價系統進行計算，相關係數應大於0.9000；本發明的原理是基於丁香藥材中主要含有大量的揮發性成分，因此，採用對揮發性成分比較靈敏的氣相色譜法對揮髮油物質群進行檢測，從整體上、宏觀上對產品質量進行控制；在研究過程中還分別對提取方法、檢測方法、色譜條件與系統適應性進行考察，同時滿足精密性、穩定性、重現性等要求，將所採集的並經專家鑑定的樣品作為對照品，其所得出的指紋圖譜作為丁香藥材對照指紋圖譜；根據所採集10批樣品的指紋圖譜經藥典委員會推薦的由湖南中南大學中藥現代化研究中心開發的計算機輔助相似性評價系統進行計算，建立了丁香藥材指紋圖譜共有模式圖譜，並確定供試品指紋圖譜與相應的共有模式圖譜之間的相關係數為0.9000；因此，利用本方法能方便的對丁香藥材進行檢測。
圖1是丁香藥材對照指紋圖譜；圖2是丁香藥材指紋圖譜共有模式圖譜；圖3是丁香酚標準品指紋圖譜；
圖4是編號為20050120 20050228 20050523丁香藥材。
具體實施例方式實施例1 丁香藥材的檢測1、藥材來源 廣東2、樣品編號 200501203、供試品溶液的製備以上述相同方法製備丁香藥材供試品溶液；4、以上述相同方法製備標準品溶液；5、以上述相同方法測定待測的標準品和供試品溶液；6、結果判定色譜圖中檢出了與丁香藥材對照指紋圖譜相同的5個特徵峰，其中1號峰為丁香酚，與標準品指紋圖譜一致；供試品指紋圖譜與丁香藥材指紋圖譜共有模式圖譜經計算機輔助相似性評價系統進行計算，相關係數為0.9813，大於0.9000；因此，可以判定本供試品符合本公司修訂的關於丁香藥材的質量標準。
實施例2 丁香藥材的檢測1、藥材來源 安徽2、樣品編號 200502283、供試品溶液的製備以上述相同方法製備丁香藥材供試品溶液；4、以上述相同方法製備標準品溶液；5、以上述相同方法測定待測的標準品和供試品溶液；6、結果判定色譜圖中檢出了與丁香藥材對照指紋圖譜相同的5個特徵峰，其中1號峰為丁香酚，與標準品指紋圖譜一致；供試品指紋圖譜與丁香藥材指紋圖譜共有模式圖譜經計算機輔助相似性評價系統進行計算，相關係數為0.9854，大於0.9000；因此，可以判定本供試品符合本公司修訂的關於丁香藥材的質量標準。
實施例3 丁香藥材的檢測1、藥材來源 馬達加斯加2、樣品編號 200505233、供試品溶液的製備以上述相同方法製備丁香藥材供試品溶液；4、以上述相同方法製備標準品溶液；5、以上述相同方法測定待測的標準品和供試品溶液；6、結果判定色譜圖中檢出了與丁香藥材對照指紋圖譜相同的5個特徵峰，其中1號峰為丁香酚，與標準品指紋圖譜一致；供試品指紋圖譜與丁香藥材指紋圖譜共有模式圖譜經計算機輔助相似性評價系統進行計算，相關係數為0.9617，大於0.9000；因此，可以判定本供試品符合本公司修訂的關於丁香藥材的質量標準。
權利要求
1.用中藥指紋圖譜技術檢測丁香藥材的方法，包括下述步驟第一步，建立丁香藥材對照指紋圖譜①標準品溶液的製備取丁香酚標準品適量，加甲醇製成每1mg/ml的溶液，即得；②對照品溶液的製備取經鑑定為丁香藥材的粉末5.0g，置具塞錐形瓶中，加入70％甲醇25ml，振搖使其充分浸潤，室溫下浸泡24小時後，過濾，精密吸取1ml上述溶液置10ml頂空進樣瓶中，加蓋密封，即得；③色譜條件色譜柱Agilent HP-5，30m×320μm×0.25μm，進樣口溫度230℃FID檢測器溫度260℃升溫程序初始100℃，保持1min，4.5℃/min升至180℃，保持1min，10℃/min升至220℃，保持10min；載氣為N2，流速1.5ml/min，恆流方式，不分流；進樣器G1888A頂空自動進樣器，頂空瓶溫度90℃，進樣閥溫度105℃，傳輸線溫度120℃，頂空瓶平衡時間15min，頂空瓶充壓時間0.2min，定量環填充時間0.2min，定量環平衡時間0.5min，進樣時間1min；④檢測對照品溶液及標準品溶液分別經頂空進樣器進樣，氣相色譜儀測定，即得對照品和標準品氣相色譜圖；第二步，建立丁香藥材指紋圖譜共有模式圖譜對所收集並經鑑定為丁香藥材的10批樣品按對照品溶液的製備方法製備供試品溶液，按上述標準品溶液製備方法製備標準品溶液，並逐一按上述相同方法檢測，分別得到各批丁香藥材相應的指紋圖譜和標準品指紋圖譜；經計算機輔助相似性評價系統進行計算，即可得出丁香藥材共有模式圖譜；第三步，供試品檢測1、供試品溶液的製備以上述相同方法分別製備丁香藥材供試品溶液；2、以上述相同方法分別製備標準品溶液；3、以上述相同方法測定待測的標準品和供試品；4、結果分析判定色譜圖中應檢出與對照指紋圖譜相同的5個特徵峰，其中1號峰為丁香酚，應與標準品指紋圖譜一致；供試品指紋圖譜與相應的共有模式圖譜經計算機輔助相似性評價系統進行計算，相關係數應大於0.9000。
2.根據權利要求1所述的用中藥指紋圖譜技術檢測丁香藥材的方法，其特徵在於所述計算機輔助相似性評價系統系由藥典委員會推薦的由湖南中南大學中藥現代化研究中心開發。
全文摘要
本發明公開了一種用中藥指紋圖譜技術檢測丁香藥材的方法，本方法包括以下幾個步驟，第一步，建立丁香藥材對照指紋圖譜；第二步，建立丁香藥材指紋圖譜共有模式圖譜；第三步，供試品檢測；將所測得的供試品圖譜與對照指紋圖譜進行比較，並輸入計算機輔助相似性評價系統進行相似度計算，得出相關係數，便可作出檢測結論；本方法具有以下特點①可以從整體上、宏觀上表徵丁香藥材的質量；②明確、直觀，具有較好的專屬性和特徵性，重現性好；可操作性強；③可用於鑑別丁香藥材的真偽。
文檔編號B01J20/281GK1991359SQ20051012057
公開日2007年7月4日 申請日期2005年12月28日 優先權日2005年12月28日
發明者劉勝華, 李波, 李先芝, 屠鵬飛, 鮑忠 申請人:勁牌有限公司