Hplc法測定維生素c泡騰片中維生素c含量的方法

2023-09-15 00:55:35

專利名稱：Hplc法測定維生素c泡騰片中維生素c含量的方法
技術領域：
本發明屬於分析化學領域，涉及定量測定製劑中維生素C含量的方法，具體地說是一種高效液相色譜法(HPLC法)測定維生素C泡騰片中維生素C含量的方法。
背景技術：
國內對用HPLC法測定藥品、果汁、食品等中的維生素C的含量的研究較多，但對泡騰片中維生素C含量測定的液相方法研究較少。測定維生素C泡騰片中維生素C的含量的常用方法為中和滴定法，中華人民共和國藥典2005版有詳細的描述。但是對於添加了一些特定的輔料的維生素C泡騰片，由於這些特定輔料如維生素 B2、香精，酒石酸、糖、碳酸氫鈉等的存在，在採用滴定法測定過程中會因顏色和維生素B2的幹擾，不能準確地確定滴定終點，從而造成測定誤差；另外，試劑中碘離子易被氧化，也會造成滴定終點有誤差，因此，對於添加了上述特定輔料的維生素C泡騰片，不適合採用中和滴定法來測定維生素C的含量。還有，中和滴定法中所使用的碘滴定液容易揮發，易對人體造成損害。

發明內容
本發明要解決的技術問題，針對添加有維生素B2、香精、糖等輔料的維生素C泡騰片，因無法使用中國藥典所規定的測定方法進行維生素C的含量測定的情況，提供一種 HPLC法測定維生素C泡騰片中維生素C含量的方法，本方法具有簡便、準確、重複性好、專屬性強等特點，適用於對維生素C泡騰片中的維生素C含量進行測定。為解決上述技術問題，本發明所採用的技術方案是
一種HPLC法測定維生素C泡騰片中維生素C含量的方法，其色譜條件為
(1)色譜柱島津VP-ODS (250 mm X4. 6 mm,5um)；
(2)流動相為混合比例為298的甲醇和O. 03mol/L磷酸鹽緩衝液；
(3)紫外檢測器的檢測波長為254nm。作為本發明的一種限定，所述的磷酸鹽緩衝液為磷酸二氫鉀和磷酸二氫鈉溶液中的一種。作為上述限定的進一步限定，所述的磷酸鹽緩衝液為磷酸二氫鉀溶液。作為上述限定的再次限定，所述的磷酸二氫鉀溶液的pH值為2. 4。作為上述限定的最後限定，所述的磷酸二氫鉀溶液使用磷酸調節pH值。作為本發明的另一種限定，該HPLC法測定維生素C泡騰片中維生素C含量的方法，其色譜條件為所用流動相的流速為O. 8mL/min,進樣體積為20 μ L，柱溫為30°C。通過上述方法的建立過程，本方法測定維生素C泡騰片中維生素C的含量能夠達到真實和準確地分析的要求。由於採用了上述的技術方案，本發明與現有技術相比，所取得的技術進步在於採用HPLC法檢測維生素C泡騰片中維生素C含量的方法，操作簡單，提高了檢測的靈敏度和準確度，並可以適用於有顏色幹擾的樣品；另外本發明避免使用傳統檢測方法中存在的使用碘試劑的情況，提高了操作的安全性。本發明適於對維生素C泡騰片中維生素C的含量進行測定。


圖I為本發明實施例溶劑幹擾性試驗的HPLC圖2為本發明實施例空白輔料幹擾性試驗的HPLC圖3為本發明實施例樣品批號為100312的HPLC4為本發明實施例樣品批號為100420的HPLC5為本發明實施例樣品批號為100520的HPLC6為本發明實施例對照品濃度為10 μ L和20 μ L線性範圍測定的HPLC7為本發明實施例對照品濃度為25 μ L和30 μ L線性範圍測定的HPLC8為本發明實施例對照品濃度為35 μ L和40 μ L線性範圍測定的HPLC9為本發明實施例對照品精密度試驗連續進樣第1-3次測定的HPLC圖10為本發明實施例對照品精密度試驗連續進樣第4-6次測定的HPLC圖11為本發明實施例對照品穩定性試驗標準品Oh測定的HPLC12為本發明實施例對照品穩定性試驗標準品2h測定的HPLC13為本發明實施例對照品穩定性試驗標準品4h測定的HPLC14為本發明實施例對照品穩定性試驗標準品6h測定的HPLC15為本發明實施例樣品穩定性試驗樣品Oh測定的HPLC圖16為本發明實施例樣品穩定性試驗樣品2h測定的HPLC圖17為本發明實施例樣品穩定性試驗樣品4h測定的HPLC圖18為本發明實施例樣品穩定性試驗樣品6h測定的HPLC圖。本發明下面將結合說明書附圖與具體實施例作進一步詳細說明，但是本發明的保
護範圍並不限於下述的實施例。
具體實施例方式以下實施例只用於說明本發明，並不限定本發明。實施例一種測定維生素C泡騰片中維生素C含量的方法
本測量方法是利用HPLC法測定維生素C泡騰片中維生素C含量。該方法的色譜條件
為
(1)色譜柱島津VP-ODS (250 mm X4. 6 mm,5um)；
(2)流動相為混合比例為298的甲醇和O. 03mol/L磷酸鹽緩衝液，混合比例為體積
比；
其中0. 03mol/L的磷酸鹽緩衝液溶液為磷酸二氫鉀(也可以用磷酸二氫鈉溶液替代)， 用磷酸調節PH值至2.4;
(3)紫外檢測器的檢測波長為254nm。一、本發明方法的建立過程
I、儀器與試劑儀器島津LC-2010A高效液相色譜儀(LC-2010型號檢測器、LC-2010型號泵，LC-2010 柱溫箱，LC-2010自動進樣器)，LCsolution色譜工作站；
試劑甲醇(色譜純)，磷酸二氫鉀(優級純)，乙二胺四乙酸二鈉即EDTA-2Na (優級純)， 磷酸(優級純)，水(二次去離子水)，維生素C泡騰片(樣品，河北科星藥業有限公司生產)，維生素C對照品(美國ChemService公司生產，批號為418-10B，含量為99. 5%)。2、含量測定方法的建立
2.I、波長的選擇
根據維生素C紫外光吸收具有的特性，測定了它的O. 02%EDTA-2Na水溶液在紫外光下的吸收圖譜，維生素C的檢測波長選用254nm。2. 2、溶液的配製
溶劑的配製取4. 08g磷酸二氫鉀，置於IOOOml的棕色容量瓶中，用二次去離子水溶解並稀釋至刻度，搖勻，配製得O. 03mol/L磷酸二氫鉀溶液A ；
取O. 2g EDTA-2Na,置於IOOOml的棕色容量瓶中用二次去離子水溶解並稀釋至刻度， 搖勻，配製得O. 02%EDTA-2Na溶液B。對照品溶液的配製取維生素C對照品50mg精密稱定置IOOml的棕色容量瓶中用溶液B溶解並稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml置IOOml棕色容量瓶中，用溶液A稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液M。樣品溶液的配製取樣品10片，精密稱定，研細，取細粉O. 56g (約相當於維生素C 50mg)精密稱定，置IOOml的棕色容量瓶中再用溶液B溶解並稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續濾液5ml置IOOml量瓶中，用溶液A稀釋至刻度，搖勻，即得樣品溶液D。2. 3、溶劑、空白輔料的幹擾性試驗
為排除色譜圖中有溶劑和空白輔料幹擾維生素C峰的出現，對單獨的溶劑和空白輔料進行專屬性試驗，以增加檢測的準確性。溶劑的影響精密量取5ml溶液B置IOOml棕色容量瓶中，加入溶液A溶解並稀釋至刻度，搖勻，作為樣品I。空白輔料的影響按製劑配方規定的比例，除維生素C外，其它組分和輔料稱取 10. 0g，混勻，研細，取細粉O. 56g精密稱定，置於IOOml的棕色容量瓶中，加入溶液B，溶解並稀釋至刻度，搖勻，濾過；精密量取濾液5ml置IOOml棕色容量瓶中，加入溶液A稀釋至刻度，搖勻，作為樣品2。照上述色譜條件進樣，分別取樣品I和樣品2各20μ L，進樣，記錄色譜圖，如圖I 和圖2所示。結果顯示由圖I可以看出檢測結果接近於基線沒有幹擾峰出現，表明溶劑對維生素C的測定沒有影響。由圖2可以看出沒有幹擾峰出現，表明空白輔料對維生素C測定沒有影響。2. 4、樣品的測定
取三批樣品，依照上述2. 2方法製備樣品溶液，每批樣品做2個平行，各取20 μ L進樣， 記錄色譜圖，批號為100312的產品測定結果如圖3所示，批號為100420的產品測定結果如圖4所示，批號為100520的產品測定結果如圖5所示，按外標法計算維生素C的含量，結果如表I所示,根據試驗測定結果,確定維生素C含量為標示量的90. 0%-110. 0%。
權利要求
1.HPLC法測定維生素C泡騰片中維生素C含量的方法，其特徵在於該方法的色譜條件為(1)色譜柱島津VP-ODS (250 mm X4. 6 mm,5um)；(2)流動相為混合比例為298的甲醇和O. 03mol/L磷酸鹽緩衝液；(3)紫外檢測器的檢測波長為254nm。
2.根據權利要求I所述的HPLC法測定維生素C泡騰片中維生素C含量的方法，其特徵在於所述的磷酸鹽緩衝液為磷酸二氫鉀或磷酸二氫鈉溶液中的一種。
3.根據權利要求2所述的HPLC法測定維生素C泡騰片中維生素C含量的方法，其特徵在於所述的磷酸鹽緩衝液為磷酸二氫鉀溶液。
4.根據權利要求3所述的HPLC法測定維生素C泡騰片中維生素C含量的方法，其特徵在於所述的磷酸二氫鉀溶液的PH值為2. 4。
5.根據權利要求4所述的HPLC法測定維生素C泡騰片中維生素C含量的方法，其特徵在於所述的磷酸二氫鉀溶液使用磷酸調節PH值。
6.根據權利要求1-5中任一項所述的HPLC法測定維生素C泡騰片中維生素C含量的方法，其特徵在於所用流動相的流速為O. 8mL/min，進樣體積為20 μ L，柱溫為30°C。
全文摘要
本發明公開了HPLC法測定維生素C泡騰片中維生素C含量的方法，其色譜條件為(1)色譜柱島津VP-ODS(250mm×4.6mm，5μm)；(2)流動相為混合比例為2:98的甲醇和0.03mol/L磷酸鹽緩衝液；(3)紫外檢測器的檢測波長為254nm；所用流動相的流速為0.8mL/min，進樣體積為20μL，柱溫為30℃。本發明採用HPLC法檢測維生素C泡騰片中維生素C含量的方法，操作簡單，提高了檢測的靈敏度和準確度，並可以適用於有顏色幹擾的樣品；另外本發明避免使用傳統檢測方法中使用碘試劑，提高了操作的安全性。本發明適於對維生素C泡騰片中維生素C的含量進行測定。
文檔編號G01N30/36GK102608231SQ20121007019
公開日2012年7月25日 申請日期2012年3月16日 優先權日2011年11月30日
發明者付旭東, 呂虎林, 田會彥, 魏桂香 申請人:河北科星藥業有限公司