多孔性纖維素介質的製造方法與流程

2023-09-14 20:49:31 2

本發明涉及多孔性纖維素介質的製造方法。
背景技術：
：以纖維素為代表的多糖及其衍生物已利用於各種用途。對它們的微多孔體而言，其自身可作為吸附劑，另外，可以通過向其表面進行某些化學修飾，而賦予吸附、分離的功能。以下舉出這些的一個例子。由於酶利用的普及、生物醫藥的開發等，以蛋白質為代表的生物高分子的分離純化成為了重要的技術課題之一。用於解決該問題的重要的方法為色譜。在色譜中，可使用將與目的物質或者作為除去對象的雜質進行相互作用的某些原子團(常常將它們稱為選擇物(selector))結合至稱為基質的固體而成的分離劑。沒有蛋白質的非特異性吸附這一點，是作為用於分離生物高分子的材料極其重要的特性，因此，多糖類作為基質得到重用。另外，由於多糖類在分子內具有較多的羥基，因此，可以將其作為立足點而經過醚鍵、酯鍵容易地與選擇物結合，這也是得到重用的較大原因。另外，為了分離純化生物高分子，通常使用以下方法：將對目標的分子具有某些親和性的選擇物結合至基質，在吸附目的分子後，用某些方法使被吸附的目的分子游離並進行回收。為了獲得大量的目的分子，可以結合大量的選擇物，並且使該選擇物與分子量大的生物高分子有效地相互作用，要求基質為使得目的分子可以自由地出入的多孔質結構。換言之，將該基質填充於柱並進行空間(size)排阻色譜時，必須表現出大於需要純化的分子與配體合起來的尺寸的排阻界限。這樣的基質多數情況以粒子的形式填充於稱為柱的管中進行使用。但是，近年來備受矚目的新的形態，是稱為整塊(monolith)的一體的多孔體。它通過容納於稱為毛細管的細管、或柱等容器中而用於相同的用途。但是，比較薄的面積大的整塊也可以作為過濾膜使用。作為這樣的基質的使用容易度的主要原因，除了相對於分離對象的選擇性以外，可列舉其物理強度。即，彈性模量低的基質由於在色譜、過濾中在液體、氣體進行流動時，受到壓縮變形、斷裂，結果導致色譜柱內的液體的流動變得不均一，進而阻塞，從而導致柱的分離效率顯著降低。從這方面考慮，物理強度的高低為重要的特性，在這點上，纖維素即使在多糖類中也為優異的材料。此外，纖維素存在以下優點：作為多糖的一般的特徵在其表面具有醇性羥基，因此可以通過化學反應結合多種原子團，及可以大量地、比較廉價地得到高純度的原料等。從以上的原因考慮，開發了以生物高分子的分離純化為主要目的的多孔性纖維素粒子。作為用於製造該多孔性纖維素粒子的方法，多為將纖維素以某些方法溶解之後進行再生的方法，但也可見若干將有機酸酯作為起始原料的方法。與將纖維素本身直接溶解，存在需要特殊溶劑、溶液的粘度非常高等困難相對，這些方法利用了以下優點：有機酸酯能夠溶解於眾多溶劑，纖維素的有機酸酯可以利用與各種有機酸的各種結合率、或聚合度，在穩定的品質下供應於工業上，還可以容易地分解酯鍵來對纖維素進行再生等。作為這樣的纖維素粒子的製造方法，例如在專利文獻1中，記載了將纖維素有機酸酯溶解於滷代烴那樣的有機溶劑中而成的溶液分散於水性介質中，使其形成酯溶液的微小液滴，向其中添加銨鹽等水解促進劑進行該酯的水解，從而形成纖維素微小粒子。另外，在專利文獻2中，記載了通過以下製造多孔球狀粒子的方法：將纖維素脂肪酸酯與纖維素脂肪酸酯的膠凝劑溶解於有機溶劑而製成溶液，向水性介質中攪拌添加該溶液並使其形成液滴，進一步添加促凝劑將液滴中的纖維素脂肪酸酯製成凝膠粒子，從生成的粒子除去膠凝劑、促凝劑及溶劑。在非專利文獻1中，記載了通過將乙酸纖維素溶解於水溶解性的有機溶劑(丙酮和DMSO的混合溶劑)，並使其在水中分散，從而包含乙酸纖維素的溶液與水接觸而凝固，形成多孔性的粒子。在非專利文獻2中，記載了將纖維素二乙酸酯溶解於DMSO，之後添加無水硫酸鈉並攪拌，將混合物投入酸凝集浴槽(鹽酸)而獲得纖維素粒子(珠)。另外，記載了為了提高珠的多孔性，將提取之後的珠浸漬於大量溫水中來除去硫酸鈉的方法。現有技術文獻專利文獻專利文獻1：日本特開昭62-277401號專利文獻2：日本特開昭63-95237號非專利文獻非專利文獻1：Chen,L.F.；Tsao,G.T.Biotechnol.Bioeng.1976,18,1507非專利文獻2：Bai,Y.-X.；Li,Y.-F.Carbohydr.Polym.2006,64,402非專利文獻3：A.J.Reuvers等,J.Polym.Sci.,1986,24,793技術實現要素：發明要解決的問題在專利文獻1和2的技術中，在任意方法中均使用了包含滷代烴的溶劑，為了在製作粒子時利用汽化進行該溶劑的除去，需要較大能量和用於回收已汽化的溶劑的裝置。另外，在使用了專利文獻2中記載的那樣的促凝劑的情況下，由於在形成的液滴之中，在與促凝劑接觸的部分形成了緻密的纖維素脂肪酸酯的膜，從而變成了走形的粒子形狀的情況。另外，在專利文獻2記載的那樣的利用伴隨物質的移動的工藝的情況下，存在反應產生偏移的可能性。另外，在非專利文獻1中，記載了用甲醛和鹽酸使已形成的珠發生交聯反應，使珠進行交聯，在非專利文獻2中，記述了為了對粒子設置細孔而使用了細孔形成劑，兩者均包括在形成粒子時對其表面進行處理的工序，為了獲得多孔性纖維素粒子，需要除去表面處理中使用的物質。本發明的目的在於提供製作多孔性纖維素介質的技術，其中，在可以應用於分離劑的多孔性纖維素介質的製造中，通過對於包含作為原料的乙酸纖維素、水和有機溶劑的均一組合物，不伴隨向體系外的物質的移動而進行凝膠化，獲得多孔性乙酸纖維素，通過使其水解而製作多孔性纖維素介質。解決問題的方法本發明是鑑於上述情況而完成的。論文中(非專利文獻3)報告了包含水、有機溶劑和乙酸纖維素的均一組合物在某溫度以下時，發生相轉變(液態-凝膠狀)而凝膠化。本發明人等發現，如果利用該性質，可以對於上述組合物不依賴物質的移動，例如溶劑的蒸發、非溶劑(膠凝劑)的添加等，獲得塊狀、粒子狀等相應於目標的形狀的凝膠，隨後通過水解而獲得保持多孔質結構並具有優異的特性的纖維素介質。即，本發明的要旨如下所述。[1]多孔性纖維素介質的製造方法，其包括：使包含乙酸纖維素、有機溶劑和水的流動性的均一組合物降低溫度而使其凝膠化的工序，和對獲得的凝膠中包含的乙酸纖維素進行水解的工序。[2]球狀多孔性纖維素粒子的製造方法，其包括：將包含乙酸纖維素、有機溶劑和水的流動性的均一組合物，分散至與該均一組合物不混合的分散介質中獲得分散液的第一工序，和降低獲得的分散液的溫度而使所述組合物凝膠化，從而形成由所述組合物構成的凝膠化粒子的第二工序，和對獲得的凝膠化粒子中包含的乙酸纖維素進行水解的第三工序。[3]根據[2]所述的球狀多孔性纖維素粒子的製造方法，其包括在所述第二工序和第三工序之間，將用於分離獲得的凝膠化粒子的分離溶劑，添加至形成有凝膠化粒子的分散液中，在分離溶劑中分離凝膠化粒子的工序。[4]根據[3]所述的球狀多孔性纖維素粒子的製造方法，其中，所述分離溶劑為水、甲醇、乙醇、2-丙醇、乙醯胺、甲醯胺、或它們的混合物。[5]根據[2]～[4]中任一項所述的球狀多孔性纖維素粒子的製造方法，其包括向所述分散介質中添加分散穩定劑。[6]根據[2]～[5]中任一項所述的製造方法，其中，所述分散介質為碳原子數20以上的烴、矽油或氟化烴。[7]多孔性纖維素整塊(monolith)的製造方法，其包括：將包含乙酸纖維素、有機溶劑和水的流動性的均一組合物加入至成型容器，降低溫度而使其在該成型容器內凝膠化的工序，和對獲得的凝膠中包含的乙酸纖維素進行水解的工序。[8]根據[1]～[7]中任一項所述的製造方法，其中，所述均一組合物中的有機溶劑為沸點為120℃以上，與水混合、且與飽和烴不混合的物質。[9]根據[1]～[8]中任一項所述的製造方法，其中，所述均一組合物中包含的有機溶劑為非質子性極性溶劑。[10]根據[1]～[9]中任一項所述的製造方法，其中，所述均一組合物在0℃～100℃的溫度範圍具有作為透明的流動性液體的溫度範圍，和在低於該溫度範圍的溫度失去流動性的相轉變溫度。[11]根據[1]～[10]中任一項所述的製造方法，其中，所述乙酸纖維素為選自纖維素二乙酸酯及纖維素單乙酸酯中的1種以上。[12]吸附體的製造方法，其包括：將親和配體固定至用[1]所述的製造方法獲得的多孔性纖維素介質、用[2]～[6]任一項中所述的製造方法獲得的多孔性纖維素粒子、或用[7]所述的製造方法用獲得的多孔性纖維素整塊的工序。[13]根據[12]所述的吸附體的製造方法，其中，所述親和配體為選自蛋白A、蛋白G、蛋白L及它們的功能性變異體中的一種以上。[14]目標物質的純化法，其包括：將用根據[12]或[13]所述的製造方法獲得的吸附體與包含目標物質的混合物進行接觸，使目標物質結合至固定於吸附體的親和配體的第一工序，和對結合至吸附體的親和配體的目標物質進行分離的第二工序。發明的效果根據本發明，在製造多孔性纖維素粒子那樣的多孔性纖維素介質時，不需要使用用於溶解乙酸纖維素的滷代烴那樣的有機氯類溶劑，不僅如此，在對包含乙酸纖維素的組合物進行凝膠化時，由於利用了不伴隨物質移動的、由溫度的變化導致的凝膠化，因此可以使獲得的乙酸纖維素介質的細孔的大小均勻。附圖說明[圖1]用本發明的製造方法獲得的多孔性纖維素粒子(實施例1)的光學顯微鏡照片。[圖2]用本發明的製造方法獲得的多孔性纖維素粒子(實施例1)的掃描型電子顯微鏡照片。[圖3]顯示用實施例1中獲得的多孔性纖維素粒子，進行標準聚氧乙烯的分離得到的標準曲線的圖。[圖4]為用本發明的製造方法獲得的多孔性纖維素粒子(實施例3)的掃描型電子顯微鏡照片。[圖5]用本發明的製造方法獲得的多孔性纖維素粒子(實施例6)的掃描型電子顯微鏡照片。[圖6]用本發明的製造方法獲得的多孔性纖維素粒子(實施例7)的掃描型電子顯微鏡照片。[圖7]用本發明的製造方法獲得的多孔性纖維素粒子(實施例8)的掃描型電子顯微鏡照片。[圖8]用本發明的製造方法獲得的多孔性纖維素粒子(實施例9)的掃描型電子顯微鏡照片。[圖9]用本發明的製造方法獲得的多孔性纖維素粒子(實施例10)的掃描型電子顯微鏡照片。[圖10]用本發明的製造方法獲得的多孔性纖維素粒子(實施例11)的掃描型電子顯微鏡照片。具體實施方式本發明的多孔性纖維素介質的製造方法為，利用包含乙酸纖維素、有機溶劑和水的均一組合物會根據溫度變化而發生液體-凝膠的相轉變，由於溫度變化使所述均一組合物形成凝膠，然後對凝膠中包含的乙酸纖維素進行水解而轉換為纖維素。在本發明中，由溫度變化導致的液體-凝膠的相轉變是指，在某溫度具有流動性的液態的組合物，在溫度改變時失去流動性的現象。例如，雖然眾多的均一溶液組合物中可確認到溫度下降時粘度升高的現象，但在由液體形成的凝膠化中，流動性完全消失，多數情況下會白濁。在本發明中，不添加用於引起凝膠化的試劑等，通過溫度變化而發生凝膠化。就本發明使用的乙酸纖維素而言，只要是包含水、有機溶劑和該乙酸纖維素的組合物通過溫度引起相轉變即可，可以是任意的。作為乙酸纖維素的代表性的物性，可列舉聚合度和取代度。對於聚合度，為了提高獲得的多孔性纖維素粒子的機械強度，防止使用時向溶劑等的溶出，優選重量平均為50以上。另一方面，對於上限，只要是能夠取得的，也可以使用任意的。取代度對乙酸纖維素的溶解性提供較強的影響。取代度是表示，在纖維素的1個葡萄糖殘基具有的3個羥基之中有幾個被取代的數值，在乙酸酯的情況下，有時也利用乙酸含量、乙醯基含量進行表現，但這些可以互相換算。通常，將取代度在2.8～2.9附近的作為三乙酸酯，2.5附近的作為二乙酸酯進行流通。在本發明中，只要是可以提供發生相轉變的組合物的乙酸纖維素，可以是任何取代度。取代度是指，纖維素中1個葡萄糖殘基具有的3個羥基之中，取代成其他取代基的數量的平均值。對於乙酸纖維素而言，通常流通的有：作為纖維材料等廣泛應用的所謂纖維素二乙酸酯(其中，典型的產品為乙醯基取代度為2.5，以乙酸的含量形式表示為(乙醯化度)55％附近)，和作為照片、液晶顯示用的膜材料使用的三乙酸酯(乙醯基取代度為2.8～2.9，以乙酸的含量形式表示為(乙醯化度)60％附近)。對取代度為1附近的(雖然應稱之為單乙酸酯，但由於通常不流通，因此，未作為通稱建立)乙酸纖維素而言，有時也能溶解於水，極性溶劑類的選則較廣。像這樣，對於獲得通常不流通的等級，可以通過例如：向比其取代度高的乙酸纖維素的溶液中添加計算量的鹼進行溶劑分解，或將其的含水乙酸溶液利用硫酸等酸催化劑進行水解，並在適當的時機停止反應(中和硫酸)等而獲得。例如，可以以二乙酸酯(纖維素二乙酸酯)作為起始物質，使其與每葡萄糖單元1.5當量的鹼發生作用而獲得。作為鹼，易於使用由於為中性分子因此易於與眾多有機溶劑混合，且反應迅速的肼、羥胺，但重要的是，只要是與原料溶液混合的鹼，也可以利用氫氧化物，例如季銨氫氧化物等。對於乙醯化的程度中的三乙酸酯、二乙酸酯、單乙酸酯的邊界沒有明確的區別，但在本發明中，為了方便，將2.7以上作為三乙酸酯，1.5以上且低於2.7作為二乙酸酯，0.5以上且低於1.5作為單乙酸酯。本發明的製造方法中使用的組合物，為包含所述乙酸纖維素、有機溶劑和水的均一組合物。均一組合物是指，水與有機溶劑與乙酸纖維素為均一混合的狀態的組合物。在本發明中，由溫度變化導致的液體-凝膠的相轉變是指，在某溫度具有流動性的液態的組合物，在溫度改變時失去流動性的現象。在本發明中，可以通過適宜調整該組合物的組成、含有的乙酸纖維素的聚合度、取代度，來調整液體-凝膠的相轉變發生的溫度。優選所述均一組合物在0℃和100℃的溫度範圍具有作為透明的流動性液體的溫度範圍，和在低於該溫度範圍的溫度失去流動性的相轉變溫度。對所述組合物中的乙酸纖維素、有機溶劑、水的含量而言，只要該組合物在給定的溫度範圍發生相轉變即可，可以是任意的。對該組合物中的乙酸纖維素的含量而言，優選為了使獲得的多孔性纖維素具有適於實用的細孔直徑和適度的硬度，優選為1～20重量％，進一步優選為5～15重量％。對於所述組合物中含有的水與有機溶劑的比率，只要是可發生凝膠化的即可，可以採用任意比例。可列舉例如，以重量比計為10:90～90:10的方式。對本發明的製造方法中使用的所述組合物中的有機溶劑的種類和水的重量組成比而言，如上所述，只要是可發生相轉變的即可，也可以是任意的。雖然可以使用所述非專利文獻3中報告的相對於CDA的丙酮-水混合體系，相同的二噁烷-水混合體系，但對這些有機溶劑而言，由於在液體石蠟中溶解相當多的量、蒸氣壓高，因此，由於在分散處理的過程中伴隨溫度以外的物質移動的原因，容易發生未預期的凝膠化等，難以操作。因此，期望即使相對於液體石蠟等非極性液體，溶解性也低，且難以發生由蒸發導致的濃度變化，作為具有這樣屬性的溶劑，優選為相對於己烷那樣的飽和烴不均一地混合，且沸點為120℃以上的有機溶劑。作為相對於乙酸纖維素全體的溶解力高、並且具備所述性質的溶劑，被稱為非質子性極性溶劑的溶劑有很多符合，可例示選自：DMSO、環丁碸、二甲基碸、N-甲基吡咯烷酮、N,N-二甲基乙醯胺、N,N』-二甲基咪唑烷酮、六甲基磷醯三胺、四甲基脲等中的一種以上。作為實際的組合物，可列舉以下的例子。[使用纖維素單乙酸酯的情況的一例]對包含纖維素單乙酸酯5重量％、水55重量％、DMSO45重量％的組合物而言，在高於55℃附近的溫度顯示透明粘稠的液態，在該溫度以下成為白濁的凝膠狀，該轉換為可逆的。[使用纖維素二乙酸酯的情況的例子]對包含纖維素二乙酸酯5重量％、水20重量％、DMSO80重量％的組合物而言，在70℃以上為液態，在50℃以下成為凝膠狀，該變化為可逆的。對包含纖維素二乙酸酯6.8重量％、NMP(N-甲基吡咯烷酮)71.6重量％、水21.6重量％的組合物而言，在20℃以下為凝膠狀，在40℃以上成為透明液態，該變化為可逆的。對包含纖維素二乙酸酯7.7重量％、N,N-二甲基乙醯胺73.7重量％、水18.6重量％的組合物而言，在20℃以下為凝膠狀，在50℃以上成為透明液態，該變化為可逆的。對所述相轉變的溫度而言，通常為有機溶劑的比率變大則降低，水的比率變大則升高。從多孔性纖維素介質的製造中的操作容易程度方面，優選相轉變溫度為0℃到100℃，進一步優選為30～70℃。對獲得的由包含乙酸纖維素的均一組合物形成的凝膠而言，通過對該凝膠中包含的乙酸纖維素進行水解而轉換成親水性高的纖維素。為此，對乙酸纖維素的乙醯基進行除去。對於乙醯基的除去，可以使用將其與金屬氫氧化物(氫氧化鈉、氫氧化鉀)、季銨氫氧化物、氫氧化鋇、氫氧化鈣等進行反應的方法。另外，也可以在用於進行該乙醯基的除去的反應中使用胺類。作為胺類的例子，可列舉氨、肼、羥胺、胍、烷基胺類等。對於反應條件而言，由於所述化合物具有的相對於溶劑的溶解性、反應速度不同，因此，不能一概地決定，可以使用公知的方法，只要可將乙醯基除去至適合利用目的的程度即可。反應結束後，利用不會對獲得的多孔性纖維素造成不良影響的溶劑進行洗滌，根據需要添加防腐劑。根據本發明的製造方法製造的多孔性纖維素介質，既可以以球狀粒子形式也可以以整塊形式利用。在製作球狀粒子或整塊的情況下，雖然與在降低所述特定的組合物的溫度而使其凝膠化後，對獲得的凝膠中包含的乙酸纖維素進行水解的工藝沒有實質差異，但用於控制形狀的工藝不同。為了製造整塊，在具有任意形狀的容器中使所述均一組合物發生相轉變，但為了製造微粒，通常使溶液狀的均一組合物以分散於與其不混合的分散介質中的狀態進行溫度變化，從而使其發生相轉變。以下，對這些具體的方法進行簡單說明。作為本發明的球狀多孔性纖維素粒子的製造方法，可例舉以下方式，其包括：將包含乙酸纖維素、有機溶劑和水的流動性的均一組合物，分散至與該均一組合物不混合的分散介質中而獲得分散液的第一工序，和通過降低獲得的分散液的溫度而使所述組合物凝膠化，從而形成由所述組合物構成的凝膠化粒子的第二工序，和對獲得的凝膠化粒子中包含的乙酸纖維素進行水解的第三工序。另外，可以在所述第二工序和第三工序之間，包括將用於分離獲得的凝膠化粒子的分離溶劑，添加至形成有凝膠化粒子的分散液中，在分離溶劑中分離凝膠化粒子的工序。在本發明的球狀多孔性纖維素粒子的製造方法中，使用了用於對所述組合物進行分散的分散介質。作為本發明可以使用的分散介質，只要是不會通過與所述組合物中的水、有機溶劑進行混合而引起所述組合物的不期望的凝膠化、相轉變溫度的極端變化，對目標的球狀多孔性纖維素粒子的孔徑造成不良影響即可，可以為任意的。為了防止在分散所述組合物時所述組合物發生凝聚，優選分散介質在組合物的分散時具有某種程度的粘度。作為分散介質的粘度，可列舉於25℃為0.2～20Pa·s。對分散介質而言，優選不會與所述組合物中包含的水、有機溶劑混合的非極性的分散介質，可列舉例如：液體石蠟、凡士林那樣的碳原子數20以上的烴、矽油、氟化烴。由於凡士林在為特定的軟化溫度以下時會迅速地失去流動性，因此，在分散的凝膠化液的粒子容易進行再凝聚而形成團塊的情況下，可以首先在軟化溫度以上製備分散液，將其先降低至軟化溫度以下，使凝膠化液滴彼此不能移動、接觸，對提高粒子的收率的目的有效。凡士林的軟化溫度根據其種類而不同，可以適當地選擇。對本發明中的包含乙酸纖維素的組合物而言，被分散於分散介質中後，在從使其溫度降低到使其凝膠化之間，需要保持分散狀態。為此，優選向分散介質添加適當的分散穩定劑。對分散穩定劑而言，只要具有提高所述組合物的分散狀態的穩定性、延緩由組合物形成的粒子進行凝聚的速度的效果即可，可以是任意的。作為這樣的分散穩定劑，可列舉：甘油、山梨糖醇酐、聚甘油、蔗糖等多元醇與高級羧酸的酯、包含少量極性基團的改性矽油等，也可以使用除此以外的市售的分散穩定劑。作為將包含乙酸纖維素的所述組合物分散至所述分散介質中的方法，已經進行了形形色色的提案，從提供寬範圍的粒徑分布的方案到提供單分散的粒徑的方案等各種各樣。例如，就使用通常稱為微反應器的容器，將液態的分散介質以適當的速度的流動中，從較細的噴嘴向其中注入凝膠化的均一組合物的方法而言，適於製造粒徑均一的情況。另外，可以使用如下各種方法：將本發明的流動性的均一組合物從孔徑一定的膜向分散介質中擠出的方法，將本發明的流動性的均一組合物放入開有一定大小的孔的內筒，在分散介質中使其進行旋轉，利用離心力擠出已凝膠化的均一組合物的方法，將根據需要包含分散穩定劑的分散介質與流動性的均一組合物送液至填充有一定大小的珠的柱中的方法，通過振動噴嘴將流動性的均一組合物注入分散介質中的方法，使用(超)聲波的方法等。在實施例中雖然提供了各種粒徑的混合物，例示了最簡單的利用攪拌的方法。該方法為通過將上述均一組合物向上述分散介質添加後，於相轉變溫度以上的溫度進行攪拌混合，從而生成由上述組合物構成的大致球狀的粒子，隨後通過冷卻至相轉變溫度以下，使變為分散液滴的均一組合物凝膠化。攪拌混合的條件可以根據目標的平均粒徑適當進行選擇。需要說明的是，對於向上述分散介質添加包含乙酸纖維素的上述組合物時的上述分散介質的溫度，可列舉使得上述組合物保持液態的溫度的方式。具體而言，可列舉將分散介質的溫度設定為高於上述組合物發生相轉變的溫度範圍的溫度的方式。通過將分散介質設定為這樣的溫度，上述組合物的攪拌混合變得容易。另一方面，由於即使流動性的均一組合物從相轉變溫度以上變為以下，到凝膠化為止也需要一些時間，因此進行添加時的凝膠化液和/或分散介質的溫度不需要必須為相轉變溫度以上。但是，優選在上述均一組合物保持流動性的狀態下，將上述均一組合物添加至分散介質來進行分散。在不滿足該條件的情況下，生成的粒子為不規則的破碎形狀，變得不適合於色譜的目的。但是，也能夠在以凝膠狀態發生破碎、分散後，使溫度上升高於相轉變溫度來暫時融解凝膠，再次降低溫度而使其凝膠化。最終將上述分散介質冷卻至低於上述組合物發生相轉變的溫度範圍的溫度時，上述組合物凝膠化。對這之後的程序沒有特別限定，但在本發明的實施例中，可列舉為了從分散介質取出凝膠化的乙酸纖維素而使用分離溶劑的方式。可列舉例如，為了從凝膠化的由上述組合物構成的粒子之中，僅將乙酸纖維素作為凝膠狀粒子從分散介質中分離，因而向分散有上述組合物的分散介質添加分離溶劑的方式。作為分離溶劑，使用與分散介質不混合的、在凝膠化的上述組合物之中，乙酸纖維素不溶但與其中的水及該組合物中的有機溶劑混合的溶劑。由此，可以防止凝膠化的上述組合物之中的乙酸纖維素再次溶解。作為這樣的分離溶劑，可列舉水、甲醇、乙醇、2-丙醇、乙醯胺、甲醯胺、或它們的混合物。雖然可以將分散於分散介質中的狀態的乙酸纖維素凝膠直接進行濾過，但通常由於分散介質粘度較高，因此，過濾中需要壓力，變形或者破壞凝膠粒子的危險性升高。也能夠通過向分散介質中添加可與其混合的低粘度的液體，而降低過濾時的壓力。需要說明的是，優選在分離溶劑中添加用於將乙酸纖維素分解而轉換為纖維素(脫乙醯化)的試劑，例如，氫氧化鉀、氫氧化鈉那樣的金屬氫氧化物、胺類那樣的鹼，在分離工序時進行使其變化為纖維素的脫乙醯基反應。在不向分離溶劑添加鹼、不進行脫乙醯基反應的情況下，也可以在提取分離的包含乙酸纖維素的凝膠狀的粒子之後，使其與鹼發生反應。對進行了脫乙醯基反應的多孔性纖維素粒子而言，通過用水等的適當的方法進行洗滌，通常以水溼的狀態進行保存。在使其乾燥的情況下，適量添加糖類、甘油等。在利用水溼進行長期保存的情況下，為了防止腐敗，添加醇、疊氮鈉等防腐劑。另外，也可以在添加了甘油、糖類、尿素等的狀態下進行乾燥。在使用時，通過常規方法填充至柱進行使用。可以通過公知的適當的分級，從根據本發明的製造方法獲得的多孔性纖維素粒子之中，篩選粒徑(最大直徑)為30～300μm的具有大致球狀～球狀的形狀的粒子，將其用作色譜用的填充劑。作為色譜，可列舉空間排阻色譜。可以利用於空間排阻色譜，也就是說，表示也可以通過結合適當的配體，利用於基於除了空間排阻以外的各種模式的色譜分離。其中，包括離子交換、疏水性、親和(Affinity)等模式。一般而言，對於分離純化諸如利用生物技術製造的高分子，例如，激素、酶、抗體藥物等，優選具有使得這些物質可充分進入的大小的細孔的基質。即，可以期待：使用填充了該粒子的柱，在以水作為流動相進行凝膠過濾層析時，在以聚乙二醇的分子量進行換算為大致103～107的範圍的某些分子量區域發生分級。在實施例1的GPC中，分子量104～106的標準物質(聚乙二醇)在不同的時間洗脫，這表示可以通過本法製造的基質的細孔直徑適於進行這些物質的分離純化。對細孔的大小而言，可以通過改變待凝膠化的包含水、有機溶劑和乙酸纖維素的組合物中的乙酸纖維素的濃度，或凝膠化的條件(例如，調整均一組合物的冷卻速度等)而進行精細調整。以下，對於製作親和色譜模式中使用的吸附體的方法進行說明。可以使用蛋白質作為親和配體。對本發明可以使用的蛋白質而言，可列舉分子量為3～300kDa，優選為30～150kDa，且對於那些作為分離對象的例如為抗體那樣的相對於蛋白質有親和性的物質。其中，作為親和配體，蛋白A、蛋白G、蛋白L及它們的功能性變異體在抗體的蛋白質的分離中使用時的選擇性較高，故優選。在以分離抗體作為主要目的的情況下，作為配體，優選能夠與免疫球蛋白的一部分進行特異性結合的那些。所述功能性變異體，指天然胺基酸序列中具有至少1個變性，仍保持了伴隨天然排列的至少1個功能的蛋白質。天然排列包括原本自然產生的胺基酸序列。作為胺基酸的變化，可列舉將1個以上的胺基酸置換為另外的胺基酸，1個以上的胺基酸的刪除和/或1個以上的胺基酸的追加或這些的任意組合。也可以舉出相對於天然排列進行的追加、刪除及取代的組合那樣的方式。功能性變異體也可以包含蛋白質的片段或結構域。對功能性變異體的胺基酸序列而言，可以與天然胺基酸序列至少有70％相同、至少75％相同、至少80％相同、至少85％相同、至少90％相同、至少95％相同、至少98％相同，且仍保持伴隨天然排列的至少1個功能。對相對於所述多孔性纖維素粒子的蛋白質的負載量而言，相對於多孔性纖維素粒子100重量份，優選為1.0～25重量份。另外，可列舉相對於多孔性纖維素粒子的體積每1ml，為1～50mg的方式。在利用本發明的製造方法製作成的多孔性纖維素介質的製造方法中，可以進一步包括固定所述親和配體的工序，從而製作結合有親和配體的吸附體。該吸附體也可以用作親和層析用的分離劑。作為其製造工序，可列舉如下的方式。首先，可以包含以下工序：對於利用所述的製造方法製造成的多孔性纖維素介質之中球狀粒子的那些，用交聯劑使其發生交聯反應。對於交聯方法沒有特別的限制，可以使用例如：環氧氯丙烷、環氧溴丙烷、二氯丙醇等滷代丙二醇(ハロヒドリン)、雙環氧乙烷、聚環氧乙烷那樣的交聯劑。其次，可以包含對交聯的纖維素粒子進行活化的工序。為了使其活化，可以通過導入公知的反應性官能團進行活化。可以通過利用例如：溴化氰(CNBr)、N,N』-二琥珀醯亞胺碳酸酯(DSC)、環氧化物及活化羧酸(NHS酯)等進行活化，從而變為比多孔性纖維素粒子本來具有的官能團更容易與作為配體的固定化化合物發生反應的官能團。然後，可列舉隨後，經過使其與作為配體的固定化的化合物發生反應，將配體與多孔性纖維素粒子固定化的工序的製造吸附體的方法。與上述不同，作為吸附體的製造方法，可列舉通過向存在多孔性纖維素粒子與作為配體的固定化的化合物的體系中，添加碳二亞胺那樣的縮合試劑，或戊二醛那樣的在分子中具有多個官能團的試劑進行縮合、交聯，從而將多孔性纖維素粒子與配體固定，並獲得吸附體的方法。作為使多孔性纖維素粒子與親和配體進行結合的另外的方式，可列舉向纖維素、纖維素粒子導入甲醯基，使該甲醯基與蛋白質的氨基發生反應的方式。對於導入甲醯基的反應，可列舉例如：通過過碘酸氧化法對具有頻哪羥基的多糖類進行氧化，在糖鏈上生成甲醯基的方法。另外，可列舉經由通過將環氧基的開環得到的甘油基與過碘酸鹽發生作用的方法等得到的各種間隔基團(spacer)來導入甲醯基的方法。例如：作為間隔基團可以使用葡糖胺等那樣的氨基糖。作為使多孔性纖維素粒子的甲醯基與蛋白A那樣的蛋白質進行結合的方法，可以使用公知的方法，可列舉例如：將葡糖胺等那樣的氨基糖作為間隔基團導入而成的多孔性纖維素粒子，與含有蛋白A的溶液發生反應的方式。作為這樣的方法，可列舉例如，日本特開2008-279366號公報中記載的方法。整塊為將多孔性原料製成一體的團塊而成。在使用上述粒子狀填充劑的色譜中，展開液雖然也通過粒子的微小孔，但更多地通過粒子間間隙。與此相對，在整塊中，通過的是一體的多孔體的微小孔。因此，一般而言，雖然與粒子狀填充劑的情況相比，多數情況使得固體成分含量降低，而相對展開液的流動的阻力減少，但除了用作過濾材料的情況以外，本質的分離機理與用作填充劑的情況完全沒有改變。本發明的多孔性纖維素整塊的製造方法包括：將包含乙酸纖維素、有機溶劑和水的流動性的均一組合物加入至成型容器，降低溫度而使其在該成型容器內凝膠化的工序，和對獲得的凝膠中包含的乙酸纖維素進行水解的工序。該方法使用的乙酸纖維素、有機溶劑，可以使用與用於球狀粒子的製作中相同的物質。在液相色譜中，展開液在分離劑之中的任一部分均以相同的速度進行移動，形成所謂活塞式流動(pistonflow)是極其重要的。在填充劑中，各個粒子的特性的偏差通過混合而變得平均，因此允許粒子間的性質存在一些差異，但是承擔液體的流動的大部分的粒子間空隙的均一性變得重要。因此，將填充劑填充到稱為柱的容器時的技術變得重要。與此相對，在整塊中，極其重要的是生成的多孔質結構在相對於展開液的流動成直角的方向上為均一的，及整塊與容器之間不能存在液體容易流動的間隙。對於製備在此敘述的在直角方向上均一的多孔體，不能通過與膠凝劑(沉澱劑)的接觸、和作為公知技術的溶劑的蒸發來進行。對本發明的利用乙酸纖維素的溫度變化來導致凝膠化的方法而言，由於如果原料組合物的溫度的均一化快於凝膠化速度，則可提供均一的凝膠，因此優選用於製備整塊。在製作整塊時，將所述包含水、有機溶劑及乙酸纖維素的均一組合物投入任意形狀的成型容器，隨後通過使其溫度降低而形成由該組合物形成的凝膠，將其直接、或者通過適當的方法進行乾燥後，對獲得的凝膠中包含的乙酸纖維素進行水解。對用於水解的鹼、水解的方法而言，可以使用與製作球狀多孔性纖維素粒子中使用的相同的鹼、方法。評價製備成的整塊，需要如已經敘述的那樣，以沒有間隙、沒有局部壓緊的方式容納於適當的容器中。用於此的方法可以是公知的、非公知的任意方法。通常，利用凝膠化而生成整塊時，很多情況產生一些收縮，與容器之間存在間隙。這樣的情況下，可以將容器壁面修飾為與纖維素類物質的親和性強的化學結構(例如在表面結合纖維素)使得不存在間隙，或者通過使得凝膠的環境變化導致的收縮、溶脹，或容器的尺寸為可調整等而無間隙地容納。實施例以下舉出實施例，對本發明進一步加以詳細的說明，但不言而喻，本發明的範圍不僅限於相關實施例。1.纖維素單乙酸酯溶液的製備將於100℃真空乾燥了1小時的纖維素二乙酸酯(乙醯化度54.75％，6％丙酮溶液粘度0.117Pa·s(25℃))14.70g溶解於78mL的DMSO(東京化成(株)制GR級)。在另一容器中量取單水合肼(Hydrazinemonohydrate)>98％(東京化成(株)制)4.20g、DMSO12.01g，混合之後，將總量滴加至上述纖維素二乙酸酯溶液，進行混合使得不留沉澱。將該液體於70℃保持17小時，獲得了纖維素單乙酸酯溶液。向獲得的液體20.2g中添加水12.1g，充分攪拌混合之後，浸於溫水浴中，在逐步升溫、降溫時，在高於40～45℃的溫度為粘稠但具有流動性的透明液體，但在此以下的溫度變得白濁並失去了流動性。2.多孔性纖維素粒子的製備將液體石蠟(關東化學(株)制，比重0.87，(ChemicalsIndustrialproductsCollectAssociate)鹿1級)154g、乳化劑TSG10(NihonEmulsion制)0.41g加入至塑料(PE)容器中，在烘箱中保持於70℃。一方面，將1製備的纖維素單乙酸酯溶液與水各自6.6g於60℃進行充分混合，冷卻至室溫時形成了白濁的果凍狀固體。將其投入所述加溫了的液體石蠟，繼續加溫30分鐘之後，使用直徑4cm的攪拌槳，以950～1000rpm進行攪拌了5分鐘。將獲得的分散液移至1L燒杯，進行了水冷卻。於20℃保持3小時之後，向其中添加氫氧化鉀0.75g、水20g、乙醇150mL的混合液，緩慢攪拌1小時。保持原樣靜置一夜，則確認到在以乙醇為主的下層的底部，有白色的微粒沉降。圖1中顯示了本沉澱的顯微鏡照片，可知基本為接近正球的形狀。另外，在將該粒子反覆水洗之後，用叔丁醇置換水，並冷凍乾燥後進行的電子顯微鏡照片中，可見多孔質的表面(圖2)。另外，將經洗滌的粒子於100℃進行真空乾燥，利用KBr壓片法測定了紅外吸收光譜，完全觀察不到源於乙醯基的1720cm-1附近的羰基伸縮振動。3.空間排阻色譜收集三批同樣進行所獲得的粒子，以水分散的狀態直接利用不鏽鋼製篩進行分級，收集150μm～106μm的部分，沉降體積為約10mL。將其約8mL填充至內徑10mm、高度100mm的柱，利用下述要領，以超純水作為流動相，注入表1所示的標準聚氧乙烯的樣品，利用差示折光檢測器進行了檢測。將按照常規方法描繪的標準曲線示於圖3。使用柱HR10/100(GEHealthcare)Tricorn10/100(GEHealthcare)流量0.05ml/min(分析時間180min～240min)◇PEO洗脫液超純水(排氣)標準物質(種類、濃度、灌注量)[表1]TSKgel標準聚氧乙烯(從東曹(株)購入)分子量concn(mg/ml)PEO940,0005.0SE-150610,0005.0SE-70240,0005.0SE-30120,0005.0SE-892,0005.0SE-537,0005.0SE-213,0005.0Bluedextran20002,000,0003.0進樣量10μL多孔性纖維素粒子的製備將VTR纖維素二乙酸酯(乙醯化度54.75％，6％丙酮溶液粘度0.117Pa·s(25℃))16.27g溶解於DMSO182.49g。取本溶液39.19g於燒杯中，一邊加溫至80℃一邊添加DMSO11.01g與水11.01g的混合液，進行攪拌混合。提供了透明的粘性液體，但自然冷卻至室溫時發生了凝膠化。一方面，向750mL的液體石蠟(關東化學，鹿1級)添加了乳化劑TSG10(NihonEmulsion制)2.04g，保溫於90℃。向其中投入所述凝膠時，凝膠溶解，集中於下層。將放入了該液的容器浸於80℃的水浴，同時向內容液插入的分散器，以400rpm旋轉、攪拌5分鐘。攪拌結束後，將容器浸於水浴，進行冷卻。3小時後，在容器底沉澱了粒狀物和一部分塊狀的凝聚物。這裡，添加將KOH3.09g溶解於水50mL而成的溶液，以約10rpm進行緩慢攪拌。放置一夜後，添加400mL的水緩慢攪拌，之後對下層進行分液。利用少量的乾冰對其進行中和，之後用水洗滌。利用顯微鏡觀察，為直徑約50μm的球狀物。在該物質的紅外光譜中，未確認到表示乙酸酯的羰基的1720cm-1附近的吸收。多孔性纖維素粒子的製備將纖維素二乙酸酯(乙醯化度54.75％，6％丙酮溶液粘度0.117Pa·s(25℃))2.60g溶解於NMP(N-甲基吡咯烷酮)25.01g和水5.00g。將本溶液加溫至55℃，同時添加NMP3.71g與水3.70g的混合液，攪拌混合。提供了透明的粘性液體，但利用冰浴冷卻時發生了凝膠化。一方面，向400mL的液體石蠟(關東化學，鹿1級)添加了乳化劑TSG10(NihonEmulsion制)0.64g，保溫於55℃。向其中投入所述凝膠時，凝膠溶解，集中於下層。將放入有該溶液的容器浸於55℃的水浴，同時向內容液插入的分散器，以350rpm旋轉、攪拌10分鐘。攪拌結束後，將容器浸於水浴，進行冷卻。2小時後，在容器底沉澱了粒狀物和一部分塊狀的凝聚物。這裡，添加水200mL，以約10rpm緩慢攪拌，對下層進行分液。接著添加水200mL，重複該操作，從下層提取了凝膠。向其中添加KOH2.51g，緩慢攪拌，放置兩夜後，廢棄上清液。利用玻璃過濾器濾過殘渣，利用水反覆洗滌。將獲得的粒子的顯微鏡照片示於圖4，可知基本為接近正球的形狀。多孔性纖維素二乙酸酯整塊的製備將與實施例1中使用的相同的包含纖維素二乙酸酯6.8重量％、NMP(N-甲基吡咯烷酮)71.6重量％、水21.6重量％的組合物充滿內徑19mm的玻璃小瓶，於60℃形成透明的溶液，之後自然冷卻至15℃。一夜後，組合物變成了白濁不透明的多孔性纖維素二乙酸酯的凝膠。將其反覆用水洗滌而獲得的白色圓柱狀纖維素二乙酸酯，直徑為約18mm。多孔性纖維素整塊的製備將獲得的多孔性纖維素二乙酸酯整塊的小片0.38g浸於由氫氧化鉀0.2g、水1mL、乙醇10mL形成的液中1晝夜之後，利用水反覆洗滌。就獲得的物質而言，大小雖然縮至氫氧化鉀處理前的約85％，但為白色且形狀完全沒有變化。切取該整塊的小片，在濾紙上滾動，除去表面的附著水後進行稱量時，為104.9mg。將該物質放至聚苯乙烯的稱量皿，利用90℃的烘箱乾燥了1小時後時，呈收縮的半透明的堅固小片，其重量為9.9mg，即使進一步延長乾燥，重量也不再減少。該整塊的固體成分率為9.4％。將該經乾燥的整塊片破碎，根據通用的方法將極少的量與溴化鉀共同成型為壓片，測定了紅外吸收光譜，但完全觀察不到源於乙醯基的1720cm-1附近的羰基伸縮振動，明確顯示已轉換為纖維素。多孔性乙酸纖維素整塊及纖維素整塊的製備將與實施例1中使用的相同的包含纖維素二乙酸酯7.7重量％、N,N-二甲基乙醯胺73.7重量％、水18.6重量％的組合物，通過與實施例4相同的操作，獲得了多孔性乙酸纖維素凝膠。該物質水洗之後的直徑為約17mm。利用與實施例4相同的條件對該整塊的小片進行氫氧化鉀處理，水洗後時，大小雖然縮至74％，但形成了形狀沒有變化的白色固體，其固體成分率為12.7％。在紅外線吸收光譜中，未檢測到乙醯基。1.多孔性纖維素粒子的製備將液體石蠟(關東化學(株)制，比重0.87，鹿1級)385g、乳化劑TSG10(NihonEmulsion制)2.05g加入至500mL可拆卸式燒瓶，利用水浴保持於60℃。一方面，將實施例1-1製備的纖維素單乙酸酯溶液16.5g、DMSO3.5g、水24.5g於60℃進行充分混合。將其投入所述加溫了的液體石蠟，繼續加溫10分鐘之後，使用直徑6cm的攪拌槳，以250rpm攪拌了5分鐘。將獲得的分散液移至平坦的金屬制容器，進行了冰冷卻。於10℃保持30分鐘使其凝膠化後，移至1L三角燒瓶，添加氫氧化鉀1.9g、水20g、乙醇150mL的混合液及庚烷150mL，緩慢攪拌1小時。保持原樣靜置一夜之後，添加水，對包含凝膠化的微粒的下層進行分離，添加乙酸進行中和之後，利用乙醇和水對獲得的微粒進行洗滌。收集四批同樣進行所獲得的粒子，以水分散的狀態直接利用不鏽鋼製篩進行分級，收集50～106μm的部分，則沉降體積形成約10mL。2.交聯多孔性纖維素粒子的製備向100mL三頸燒瓶中添加實施例6-1中獲得的多孔性纖維素粒子7.9mL、將硫酸鈉8.7g溶解於水23.6g而成的溶液，於50℃進行攪拌。添加45重量％的氫氧化鈉水溶液0.48g和硼氫化鈉75mg，進行攪拌。將45重量％氫氧化鈉水溶液4.86g和環氧氯丙烷4.98g，以分別進行7等分的量隔30分鐘進行添加，花費了大約3小時。添加結束後，於50℃反應16小時。冷卻至40℃以下後，添加乙酸0.52g進行中和。過濾反應混合物並回收粒子，利用純水進行過濾並洗滌，獲得了目標的交聯多孔性纖維素粒子。3.蛋白A向交聯多孔性纖維素粒子的固定化和柱的製作利用玻璃過濾器濾過實施例6-2中獲得的交聯多孔性纖維素粒子，利用乙腈進行洗滌，獲得了載體3.3mL。將載體移液至燒瓶，添加包含乙腈2.5mL與碳酸二(N-琥珀醯亞胺)55mg的乙腈溶液10mL，於4℃、180rpm進行振蕩。然後，添加包含N,N-二甲基氨基吡啶41mg的乙腈溶液1mL，振蕩22小時進行反應。利用玻璃過濾器進行濾過，按照乙腈30mL、包含5％乙酸的二噁烷30mL、甲醇30mL、2-丙醇30mL的順序進行洗滌，獲得了活化載體。取活化載體1mL至玻璃過濾器中，利用偶聯緩衝液(0.1M磷酸鈉，pH7.0)進行洗滌。將活化載體移至燒瓶，添加蛋白A為53.6mg/mL的含蛋白A溶液168μL、偶聯緩衝液2mL，於5℃、130rpm振蕩22小時，進行固定。利用玻璃過濾器進行濾過，利用偶聯緩衝液洗滌。利用Bradford法測定了反應之後的濾液，結果可知，每1mL載體固定了蛋白A9.0mg。然後將載體轉移至燒瓶，添加1MTris鹽酸(pH8)2mL，於25℃、130rpm振蕩2小時，封閉未反應活性基團。利用玻璃過濾器進行濾過，將洗滌液1(0.1MTris鹽酸、0.5M氯化鈉，pH8.0)、洗滌液2(0.1M乙酸銨緩衝液、0.5M氯化鈉，pH4.0)交替3個循環進行洗滌。利用純水洗滌固定化載體1mL，裝入Tricorn5/50Column。另外，將Sepharose4FastFlow(GEHealthcare)也以相同的操作製作成柱(蛋白A固定量10mg/mL)。4.蛋白固定柱的抗體吸附容量將實施例6-3中製作的蛋白A固定柱設置於液相色譜裝置AKTAexplore(GEHealthcareBioscience)，使吸附緩衝液(20mM磷酸緩衝液、150mM氯化鈉，pH7.2)以1mL/min.或者0.4mL/min.的條件進行流動，使其平衡化之後，注入製備成1mg/mL的源自人血清的γ-球蛋白(和光純藥)。持續注入，直至達到洗脫液的280nm的吸光度的15％為止，之後利用吸附緩衝液進行洗滌，之後將吸附緩衝液置換為20mM檸檬酸(pH2.4)。動態吸附容量(DBC)根據洗脫液的280nm時除了非吸附成分以外的吸光度達到注入樣品的吸光度的10％為止所注入的樣品量進行計算。將各固定柱的DBC示於表2。[表2]多孔性纖維素粒子的製備將液體石蠟(關東化學(株)制，比重0.87，鹿1級)771g、乳化劑TSG10(NihonEmulsion制)4.11g加入至1L可拆卸式燒瓶，利用水浴保持於60℃。一方面，將實施例1-1製備的纖維素單乙酸酯溶液33g、DMSO7g、水49g於60℃進行充分混合。將其投入所述已加溫的液體石蠟，繼續加溫10分鐘之後，使用直徑6cm的攪拌槳，以200rpm攪拌了10分鐘。將獲得的分散液移至平坦的金屬制容器，進行了水冷卻。花費15分鐘冷卻至20℃，之後一邊向水浴一點點添加冰，一邊進一步花費15分鐘冷卻至10℃，使其凝膠化。於10℃保持30分鐘之後，移至2L三角燒瓶，添加氫氧化鉀3.1g、水200g、乙醇200mL的混合液及庚烷200mL，緩慢攪拌1小時，獲得了微粒。保持原樣靜置一夜之後，添加水，對包含凝膠化的微粒的下層進行分離，添加乙酸進行中和之後，利用乙醇和水洗滌獲得的微粒。微粒以水分散的狀態直接利用不鏽鋼製篩進行分級，收集50～106μm的部分，沉降體積約8mL。通過與實施例6相同的操作進行交聯，對蛋白A進行固定而製作成的柱的動態吸附容量為，於流速1.0mL/min.為7mg，於流速0.4mL/min.為18mg。多孔性纖維素粒子的製備將液體石蠟(關東化學(株)制，比重0.87，鹿1級)13g、乳化劑TSG10(NihonEmulsion制)75mg加入至20mL樣品管，利用水浴保持於60℃。一方面，將實施例1-1製備的纖維素單乙酸酯溶液1.65g、DMSO0.35g、水2.45g於60℃進行充分混合。將該纖維素單乙酸酯溶液1.5g投入所述加溫了的液體石蠟，繼續加溫5分鐘之後，用手搖動1分鐘進行了攪拌。將樣品管進行冰冷卻，於10℃保持30分鐘而進行了凝膠化，之後移至100mL三角燒瓶，添加氫氧化鉀0.1g、水1g、乙醇20mL的混合液及庚烷20mL，緩慢攪拌1小時，獲得了微粒。保持原樣靜置一夜之後，添加水，對下層的微粒進行分離，利用乙醇和水進行洗滌。多孔性纖維素粒子的製備將液體石蠟(關東化學(株)制，比重0.87，鹿1級)13g、乳化劑TSG10(NihonEmulsion制)75mg加入至20mL樣品管，利用水浴保持於60℃。一方面，將實施例1-1製備的纖維素單乙酸酯溶液1.65g、DMSO0.35g、水2.45g於60℃進行充分混合。將該纖維素單乙酸酯溶液1.5g投入所述加溫了的液體石蠟，繼續加溫5分鐘之後，用手搖動1分鐘進行了攪拌。將樣品管進行水冷卻，花費15分鐘冷卻至20℃，之後一邊向水浴一點點添加冰，一邊進一步花費15分鐘冷卻至10℃。於10℃保持30分鐘而進行了凝膠化之後，移至100mL三角燒瓶，添加氫氧化鉀0.1g、水1g、乙醇20mL的混合液及庚烷20mL，緩慢攪拌1小時，獲得了微粒。保持原樣靜置一夜之後，添加水對下層的微粒進行分離，利用乙醇和水進行洗滌。多孔性纖維素粒子的製備將實施例9的纖維素單乙酸酯溶液的DMSO變為NMP(N-甲基吡咯烷酮)，以與實施例9相同的操作製備了多孔性纖維素粒子。多孔性纖維素粒子的製備將實施例9的纖維素單乙酸酯溶液的DMSO變為N,N-二甲基乙醯胺，以與實施例9相同的操作製備了多孔性纖維素粒子。工業實用性本發明的製造方法利用包含乙酸纖維素的特定的組合物可根據溫度變化而發生凝膠化的性質，進行了多孔性纖維素介質的製造。在乙酸纖維素的凝膠化的過程中，細孔的大小為均一的。這方面與傳統的多孔性纖維素介質的製造方法中，在細孔的形成的過程中發生溶劑的蒸發，從而產生物質的移動的方式不同。另外，根據本發明的製造方法獲得的多孔性纖維素介質的細孔的大小，為數千左右的較大的大小。根據本發明的製造方法獲得的多孔性纖維素介質的硬度，與目前存在的市售品為同程度。根據本發明的製造方法獲得的多孔性纖維素介質，其形狀為球狀粒子、為整塊，均作為分離劑有用。當前第1頁1&nbsp2&nbsp3&nbsp