一種藥物的質量控制方法
2023-09-18 12:31:25
專利名稱：一種藥物的質量控制方法
技術領域：
本發明涉及到一種藥物的質量控制方法，特別地，涉及一種藥物高效毛細管電泳 指紋圖譜法的質量控制方法。
背景技術：
第ZL200410048292. 2號專利申請中公開了一種中藥組合物，該中藥組合物由如 下重量份的原料藥製成人參3-10份、水蛭3-11份、土鱉蟲5-10份、乳香(制)1-5份、赤 芍3-9份、降香1-5份、檀香1-5份、全蠍3-9份、蟬蛻3_12份、蜈蚣1_3份、冰片1_7份、炒 酸棗仁3-10份。有益氣養陰，搜風解痙的功效，可以有效改善心肌缺血程度，通絡止痛。為 控制該藥物的質量穩定性，需要建立該藥物的質量控制方法。高效毛細管電泳(HPCE)是近年來迅速發展起來的一種重要分析技術，在中藥鑑 別、中藥分析與質量控制等方面顯示出越來越廣闊的應用前景。在指紋圖譜方面，HPCE-UV 在藥材鑑別等各方面展示了極其重要的應用前景。HPCE技術的研究和應用，給藥物分析領 域和藥品檢驗工作帶來了生機與活力，無疑將對該專業技術的發展及提高起著重要的推動
和促進作用。尤其以對基因工程藥物、中成藥複方製劑的分析和中藥材種屬的鑑定，令人矚目。目前的HPLC等分析手段在動物藥分析測定上應用具有局限性，HPCE卻在分離分 析蛋白多肽方面展現出很好的應用前景，在含有多種動物藥中藥製劑的分析測定上，HPCE 作為藥物的質量控制方法比傳統的薄層法和高效液相色譜法更為快速準確。
發明內容
本發明目的是提供一種藥物的質量控制方法，所述方法採用高效毛細管電泳指紋 圖譜法，測定條件如下電解緩衝液為20mmol/l硼酸鹽溶液，pH為8. 5，電壓為20kv，溫度25°C，紫外檢測 波長為254nm，壓力進樣，時間10秒；供試品溶液的製備方法為稱取所述藥物藥粉0. 2g，置5mL容量瓶中，加入鹼性提取液4mL，超聲提取20min 後定容，充分振搖後取適量溶液於1.5mL離心管中，以12000r/min離心lOmin，取上清液 0. 22 μ m膜濾過備用。最後，將測得的指紋圖譜實驗數據導入中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統軟體， 設定參照圖譜，將色譜峰自動匹配，然後生成對照圖譜，進行相似度評價，相似度均應大於 0. 9。所述藥物由如下重量份的原料藥製成人參3-10份、水蛭3-11份、土鱉蟲5-10 份、乳香(制)1-5份、赤芍3-9份、降香1-5份、檀香1-5份、全蠍3-9份、蟬蛻3_12份、蜈 蚣1-3份、冰片1-7份、酸棗仁(炒)3-10份。優選地，所述藥物由如下重量份的原料藥製成人參6 檀香2 或者 人參10 檀香2 或者 人參6 檀香2
水蛭10土鱉蟲7乳香(制)2赤芍5降香2
全蠍7蟬蛻7蜈蚣1冰片5酸棗仁(炒)5。
水蛭8土鱉蟲7乳香(制)2赤芍5降香2
全蠍9蟬蛻7蜈蚣1冰片5酸棗仁(炒)5。
水蛭11土鱉蟲7乳香(制)2赤芍5降香2
全蠍3蟬蛻7蜈蚣1冰片5酸棗仁(炒)5。
本發明的藥物質量控制方法，適用於該中藥組合物的任何口服或非口服的固體制
劑，優選為膠囊劑、片劑、顆粒劑、散劑、口服液或丸劑。本發明的藥物質量控制方法，適用於使用任何方法製備成的上述劑型固體製劑。優選為由如下方法製成的膠囊劑a)按照重量份比例稱取各原料藥；b)藥材粉碎工藝將全蠍、水蛭、蜈蚣、土鱉蟲和蟬蛻五種蟲藥經淨選、水洗處理後和淨選炮製後的 制乳香按處方配料，由粉碎機進行粉碎，藥粉細度達到80目以上；粗粉後的藥粉經各種超 微粉碎技術進行超微粉碎，使藥粉平均粒徑小於100 μ m ；待粉碎的藥材經清洗烘乾滅菌 後，配料；c)提取濃縮和乾燥工藝降香和檀香先加水提取揮髮油後再用水提取，赤芍和酸棗仁加水煎煮，水提液過 濾後，待濃縮成浸膏；人參用乙醇提取後，再用水提取，醇提液回收乙醇後，濃縮成醇提浸 膏，水提液過濾與所有的水提液混勻後濃縮成水提浸膏；d)製劑工藝在沸騰制粒乾燥機中加入超微粉碎粉，再將步驟C)所得提取浸膏噴入制粒；將制 成的顆粒經整粒，加入冰片細粉，噴入由降香和檀香提取的揮髮油，混勻後由膠囊充填機充 填，製成膠囊。8、根據權利要求6所述的應用，其特徵在於，所述膠囊劑是由以下步驟製成的a)按照重量份比例稱取各原料藥；b)藥材粉碎工藝將全蠍、水蛭、蜈蚣、土鱉蟲和蟬蛻五種蟲藥經淨選、水洗處理後和淨選炮製後的 制乳香按處方配料，由粉碎機進行粉碎，藥粉細度達到80目以上；粗粉後的藥粉經各種超 微粉碎技術進行超微粉碎，使藥粉平均粒徑小於100 μ m ；待粉碎的藥材經清洗烘乾滅菌 後，配料；c)提取濃縮和乾燥工藝降香和檀香先加水提取揮髮油後再用水提取，赤芍和酸棗仁加水煎煮，水提液過 濾後，待濃縮成浸膏；人參用乙醇提取後，再用水提取，醇提液回收乙醇後，濃縮成醇提浸 膏，水提液過濾與所有的水提液混勻後濃縮成水提浸膏，將浸膏直接噴霧乾燥成噴霧粉；d)製劑工藝將超微粉碎粉與步驟C)所得噴霧乾燥粉一起加到沸騰制粒乾燥機中，再噴溶媒製成顆粒；將製成的顆粒經整粒，加入冰片細粉，噴入由降香和檀香提取的揮髮油，混勻後 由膠囊充填機充填，製成膠囊。
圖1 本發明藥物鹼性提取液的高效毛細管電泳圖譜，提取出的成分較多，而且峰 型較好；圖2 :10批本發明藥物樣品的指紋圖譜，同時生成對照指紋圖譜，共有8個共有峰。
具體實施例方式本發明藥物質量控制方法，即高效毛細管電泳指紋圖譜法的具體實施方式
如下藥物的原料藥重量份比例如下人參6克、水蛭10克、土鱉蟲7克、乳香(制)2克、赤芍5克、降香2克、檀香2克、全蠍7克、蟬蛻7克、蜈蚣1克、冰片5克、酸棗仁(炒)5克。質量控制方法1、儀器與材料毛細管電泳儀；石英毛細管(75 μ mX 50cm，河北永年光導纖維廠)離心機(飛 鴿TGL-16C，上海安亭科學儀器廠)；超聲波清洗器(HS10260D，天津恆奧)；電子天平 (BS2202，德國 Sartorius)。電解緩衝液為20mmol/L硼酸鹽溶液(pH 8. 5)，化學試劑均為分析純，水為去離子 水。10批次本發明藥物。2實驗方法與結果2.1毛細管電泳條件石英毛細管(75 μ mX 50cm，河北永年光導纖維廠)；電解緩衝液為20mmol/l硼酸 鹽溶液(pH 8. 5)，電壓為20kv，溫度25°C，紫外檢測波長為254nm，壓力進樣，時間IOs0開機後先用0. lmol/L NaOH衝洗毛細管2min，再用去離子水衝洗5min，然後用 緩衝液衝洗至基線平穩後開始進樣，每2次運行之間先以25psi依次用甲醇(1. 5min)，水 (2min)衝洗毛細管，再以 20psi 依次用 0. lmol/L Na0H(2min)，水(2min),0. lmol/L 的 HCl 溶液(2min)，水(2min)，緩衝液(3min)衝洗毛細管；實驗結束用0. lmol/L NaOH衝洗毛細 管2min，再用水衝洗5min。2. 2樣品供試液的製備稱取本發明藥物藥粉0. 2g置5mL容量瓶中，加入鹼性提取液4mL，超聲提取20min 後定容，充分振搖後取適量溶液於1.5mL離心管中，以12000r/min離心lOmin，取上清液 0. 22 μ m膜濾過備用。本發明藥物鹼性提取液的高效毛細管電泳圖譜見圖1，提取出的成分較多，而且峰 型較好，遂採用鹼性提取液作為提取溶媒。2. 3精密度取一批次本發明藥物樣品供試液，連續重複進樣5次，記錄電泳圖。以圖1中的5 號峰為參照物峰，計算共有峰的相對遷移時間均< 0. 26%，相對峰面積RSD均< 2. 56%，進 樣精密度合格。
2. 4穩定性取一批次本發明藥物樣品供試液，分別在制各樣品的0，2，4，6，8，10，12，14h進樣 測定，共有峰的相對遷移時間均< 0. 36%，相對峰面積RSD均< 2. 60%，樣品在12h內基本穩定。2. 5重現性取一批次本發明藥物樣品，分別製備5份供試品，進樣檢測，共有峰相對遷移時間 RSD均< 2. 60 %，相對峰面積RSD均< 3. 00 %，重現性較好。2. 6樣品分析在10批藥物圖譜中，得到10批藥物樣品的指紋圖譜，同時生成對照指紋圖譜，共 有8個共有峰，圖譜見圖2。其中4. 756,6. 007,6. 665,8. 487,9. 585、和16. 718min的峰為 強吸收峰。將實驗數據導入中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統2004A版軟體，設定參照圖 譜，將色譜峰自動匹配，然後生成對照圖譜，進行相似度評價，由10批藥物生成指紋圖譜的 共有模式(即對照圖譜)，各樣品與該共有模式比較，其相似度結果見表1。表1相似度計算結果
權利要求
一種藥物的質量控制方法，該藥物由如下重量份的原料藥製成人參3 10份、水蛭3 11份、土鱉蟲5 10份、乳香(制)1 5份、赤芍3 9份、降香1 5份、檀香1 5份、全蠍3 9份、蟬蛻3 12份、蜈蚣1 3份、冰片1 7份、酸棗仁(炒)3 10份，其特徵在於所述方法採用高效毛細管電泳指紋圖譜法，測定條件如下電解緩衝液為20mmol/l硼酸鹽溶液，pH為8.5，電壓為20kv，溫度25℃，紫外檢測波長為254nm，壓力進樣，時間10秒；供試品溶液的製備方法為稱取所述藥物藥粉0.2g，置5mL容量瓶中，加入鹼性提取液4mL，超聲提取20min後定容，充分振搖後取適量溶液於1.5mL離心管中，以12000r/min離心10min，取上清液0.22μm膜濾過備用。最後，將測得的指紋圖譜實驗數據導入中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統軟體，設定參照圖譜，將色譜峰自動匹配，然後生成對照圖譜，進行相似度評價，相似度均應大於0.9。
2.如權利要求1所述的質量控制方法，其特徵在於，所述藥物由如下重量份的原料藥 製成人參6水蛭10 土鱉蟲7乳香(制)2赤芍5降香2檀香2全蠍7蟬蛻7蜈蚣1冰片5酸棗仁(炒)5。
3.如權利要求1所述的質量控制方法，其特徵在於，所述藥物由如下重量份的原料藥 製成人參10水蛭8 土鱉蟲7乳香(制)2赤芍5降香2檀香2全蠍9蟬蛻7蜈蚣1冰片5酸棗仁(炒)5。
4.如權利要求1所述的質量控制方法，其特徵在於，所述藥物由如下重量份的原料藥 製成人參6水蛭11 土鱉蟲7乳香(制)2赤芍5降香2檀香2全蠍3蟬蛻7蜈蚣1冰片5酸棗仁(炒)5。
5.如權利要求1-5中任一項所述的質量控制方法，其特徵在於，所述藥物的製劑劑型 為膠囊劑、片劑、顆粒劑、散劑、口服液或丸劑。
6.根據權利要求6所述的質量控制方法，其特徵在於，所述膠囊劑是由以下步驟製成的a)按照重量份比例稱取各原料藥；b)藥材粉碎工藝將全蠍、水蛭、蜈蚣、土鱉蟲和蟬蛻五種蟲藥經淨選、水洗處理後和淨選炮製後的制乳 香按處方配料，由粉碎機進行粉碎，藥粉細度達到80目以上；粗粉後的藥粉經各種超微粉 碎技術進行超微粉碎，使藥粉平均粒徑小於100 μ m ；待粉碎的藥材經清洗烘乾滅菌後，配 料；c)提取濃縮和乾燥工藝降香和檀香先加水提取揮髮油後再用水提取，赤芍和酸棗仁加水煎煮，水提液過濾後， 待濃縮成浸膏；人參用乙醇提取後，再用水提取，醇提液回收乙醇後，濃縮成醇提浸膏，水提 液過濾與所有的水提液混勻後濃縮成水提浸膏；d)製劑工藝在沸騰制粒乾燥機中加入超微粉碎粉，再將步驟c)所得提取浸膏噴入制粒；將製成的 顆粒經整粒，加入冰片細粉，噴入由降香和檀香提取的揮髮油，混勻後由膠囊充填機充填， 製成膠囊。
7.根據權利要求6所述的質量控制方法，其特徵在於，所述膠囊劑是由以下步驟製成的a)按照重量份比例稱取各原料藥；b)藥材粉碎工藝將全蠍、水蛭、蜈蚣、土鱉蟲和蟬蛻五種蟲藥經淨選、水洗處理後和淨選炮製後的制乳 香按處方配料，由粉碎機進行粉碎，藥粉細度達到80目以上；粗粉後的藥粉經各種超微粉 碎技術進行超微粉碎，使藥粉平均粒徑小於100 μ m ；待粉碎的藥材經清洗烘乾滅菌後，配 料；c)提取濃縮和乾燥工藝降香和檀香先加水提取揮髮油後再用水提取，赤芍和酸棗仁加水煎煮，水提液過濾後， 待濃縮成浸膏；人參用乙醇提取後，再用水提取，醇提液回收乙醇後，濃縮成醇提浸膏，水提 液過濾與所有的水提液混勻後濃縮成水提浸膏，將浸膏直接噴霧乾燥成噴霧粉；d)製劑工藝將超微粉碎粉與步驟c)所得噴霧乾燥粉一起加到沸騰制粒乾燥機中，再噴溶媒製成 顆粒；將製成的顆粒經整粒，加入冰片細粉，噴入由降香和檀香提取的揮髮油，混勻後由膠 囊充填機充填，製成膠囊。
全文摘要
本發明提供了一種藥物的質量控制方法，本發明藥物由人參、水蛭、蜈蚣、全蠍、土鱉蟲、蟬蛻、赤芍、冰片等組成，具有益氣活血、化瘀通絡的功效。本發明方法採用高效毛細管電泳法，作為質量控制方法，具有快速準確的優點。
文檔編號A61K35/62GK101991669SQ200910075218
公開日2011年3月30日 申請日期2009年8月27日 優先權日2009年8月27日
發明者劉興國, 孟作環, 宋劍, 賈繼明 申請人:河北以嶺醫藥研究院有限公司