一種藍莓果化學組分研究的方法
2023-09-17 01:55:10
專利名稱：一種藍莓果化學組分研究的方法
技術領域：
本發明涉及一種藍莓果化學組分研究的方法，尤其是涉及一種氣相色譜質譜聯用(GC-MS)柱前衍生化法研究藍莓果化學組分的研究方法。
背景技術：
藍莓是世界糧農組織推薦的五大健康水果之一，具有很強的抗氧化能力；能夠預防高血壓、高血脂及肥胖，特別是對眼睛的健康有特別的好處。藍莓中含有豐富的多酚類、黃酮類以及多糖類物質，特別是其中的花青素具有促進視力的功效，是提供藍莓保健功效的重要因子。對藍莓果的化學組分的研究是合理利用藍莓資源的基礎。近年來，藍莓果實中的化學組分的結構鑑定引起了越來越多研究者的廣泛興趣。到目前為止，研究者多數使用液相色譜質譜聯用儀(HPLC-MS)為研究手段，少量研究者用核磁共振儀(NMR)研究其化學組分結構。氣相色譜質譜聯用儀(GC-MS)是另一種廣譜的化學組分研究手段，具有線性範圍寬、靈敏度高、使用成本低、應用廣泛的特點，而迄今尚未有相關手段研究藍莓化學組分的報導。為了更全面細緻地研究藍莓果化學組分，需嘗試開發一種GC-MS研究其化學組分的快捷、簡便、經濟、實用的新方法。本研究以採用高效、快捷、簡便、經濟的手段研究藍莓果化學組分為研究目標，採用GC-MS柱前衍生化法研究藍莓果化學組分，為全面細緻地研究藍莓果化學組分提供工藝參數，為合理利用生物量豐富的藍莓資源提供指導。
發明內容
本發明旨在以我國資源十分豐富的藍莓果為原料，開發一種GC-MS柱前衍生化法研究藍莓果化學組分的簡便、經濟、實用的新方法。一種GC-MS柱前衍生化法研究藍莓果化學組分的方法，其流程示意圖見圖1，其特徵在於I)製備藍莓果化學組分提取液將藍莓鮮果用榨汁機研磨，得到藍莓果泥，準確稱量藍莓果泥5g左右，用不同體系不同配比的有機溶液作為提取液浸沒果泥，室溫浸提2小時，1500rpm離心10分鐘,取上清液，該上清液為藍莓果化學組分提取液，其中所述不同體系不同配比的有機溶液的體積為100-200mL，所述的不同體系不同配比的有機溶液有四種，第一種為含甲酸的甲醇溶液，所述的甲醇溶液中含甲酸的體積百分比為O. 1-1% ;第二種為甲醇溶液，所述的甲醇溶液的體積濃度(V/V)為30% -60% ;第三種為丙酮溶液，所述的丙酮溶液的體積濃度(V/V)為40% -70% ;第四種為乙醇溶液，所述的乙醇溶液的體積濃度(V/V)為30% -60% ;2)提取液衍生化將ImL提取液置於離心中，用氮吹儀吹乾，再加入O.1-1mL BSTFA衍生化試劑，放入烘箱中，60-100°C保溫lh，取出後冷卻至室溫，得到衍生化溶液；
3) GCMS儀測試衍生化溶液設置GCMS儀器條件，測試衍生化溶液，得到衍生化溶液總離子流圖、各峰所對應的化合物質譜圖等數據信息，所述的GCMS儀器條件為Rtx-5石英毛細管柱，進樣口溫度280°C，分流比10 1，程序升溫，接口溫度250°C，進樣量I微升，所述的程序升溫程序為柱初溫100°C，升溫速率6°C /min,升至250°C，繼續升溫，速率15°C /min,升至280°C，保持時間 20min ；4)獲得藍莓果化合物組分信息利用得到衍生化溶液數據信息，利用圖譜庫檢索和人工圖譜解析確定化合物結構。
圖1. GC-MS柱前衍生化法研究藍莓果化學組分方法流程示意2. O.1 %甲酸的甲醇溶液提取物經衍生化後的GC-MS總離子流3. 30 %甲醇溶液提取物經衍生化後的GC-MS總離子流4.丙酮水乙酸溶液提取物經衍生化後的GC-MS總離子流5. 50%乙醇溶液提取物經衍生化後的GC-MS總離子流圖
具體實施例方式以下，關於本發明的一種藍莓果化學組分研究的方法，基於實施方式進行說明。一種藍莓果化學組分研究的方法，其步驟為I)製備藍莓果化學組分提取液將藍莓鮮果用榨汁機研磨，得到藍莓果泥；準確稱量藍莓果泥5g左右，用不同體系不同配比的有機溶液作為提取液浸沒果泥，室溫浸提2小時，1500rpm離心10分鐘,取上清液，該上清液為藍莓果化學組分提取液，其中所述不同體系不同配比的有機溶液的體積為100-200mL，所述的不同體系不同配比的有機溶液有四種，第一種為含甲酸的甲醇溶液，所述的甲醇溶液中含甲酸的體積百分比為O. 1-1% ;第二種為甲醇溶液，所述的甲醇溶液的體積濃度(V/V)為30% -60% ;第三種為丙酮溶液，所述的丙酮溶液的體積濃度(V/V)為40% -70% ;第四種為乙醇溶液，所述的乙醇溶液的體積濃度(V/V)為30% -60% ;2)提取液衍生化將ImL提取液置於離心中，用氮吹儀吹乾，再加入O.1-1mL BSTFA衍生化試劑，放入烘箱中，60-100°C保溫lh，取出後冷卻至室溫，得到衍生化溶液；3) GCMS儀測試衍生化溶液設置GCMS儀器條件，測試衍生化溶液，得到衍生化溶液總離子流圖、各峰所對應的化合物質譜圖等數據信息，所述的GCMS儀器條件為Rtx-5石英毛細管柱，進樣口溫度280°C，分流比10 1，程序升溫，接口溫度250°C，進樣量I微升，所述的程序升溫程序為柱初溫100°C，升溫速率6°C /min,升至250°C，繼續升溫，速率15°C /min,升至280°C，保持時間 20min ；4)獲得藍莓果化合物組分信息利用得到衍生化溶液數據信息，利用圖譜庫檢索和人工圖譜解析確定化合物結構。這種藍莓果化學組分研究方法，能夠得到豐富的藍莓果組分結構信息，主要包括醇類、酸類、酯類、小分子糖類、酮類、酸類等化合物。實施例1.將愛國者藍莓鮮果用榨汁機研磨,準確稱量果泥5g，用含甲酸O. 1%的甲醇溶液IOOmL浸沒果泥，室溫浸提2小時，1500rpm離心10分鐘，取上清液；準確量取上清液lmL，置於離心管中，用氮吹儀吹乾，加入O. 5mL BSTFA，將離心管放入烘箱中，80°C保溫lh，得到衍生化溶液；使用GCMS儀測試衍生化溶液，得到衍生化溶液總離子流圖，見圖2，通過圖譜庫檢索和人工圖譜解析共鑑定出40個化合物結構，其中包括酸類化合物12個、醇類化合物6個、酚類化合物4個、酯類化合物7個、小分子糖類化合物8個、酮類化合物I個、烷烴類化合物2個。實施例2.將愛國者藍莓鮮果用榨汁機研磨,準確稱量果泥5g,用30%甲醇溶液150mL浸沒果泥，室溫浸提2小時，1500rpm離心10分鐘，取上清液；準確量取上清液lmL，置於離心管中，用氮吹儀吹乾，加入O. 5mLBSTFA，將離心管放入烘箱中，100°C保溫lh，得到衍生化溶液；使用GCMS儀測試衍生化溶液，得到衍生化溶液總離子流圖，見圖3，通過圖譜庫檢索和人工圖譜解析共鑑定出34個化合物結構，其中包括酸類化合物12個、醇類化合物6個、酚類化合物I個、酯類化合物6個、酚類化合物I個、小分子糖類化合物4個、酮類化合物2個、其他類化合物2個。實施例3.將愛國者藍莓鮮果用榨汁機研磨，準確稱量果泥5g，用50 %丙酮溶液IOOmL浸沒果泥，室溫浸提2小時，1500rpm離心10分鐘，取上清液；準確量取上清液lmL，置於離心管中，用氮吹儀吹乾，加入lmLBSTFA，將離心管放入烘箱中，100°C保溫lh，得到衍生化溶液；使用GCMS儀測試衍生化溶液，得到衍生化溶液總離子流圖，見圖4，通過圖譜庫檢索和人工圖譜解析共鑑定出25個化合物結構，其中包括酸類化合物8個、酚類化合物I個、酯類化合物3個、小分子糖類化合物7個、酮類化合物3個、其他類化合物3個。實施例4.將愛國者藍莓鮮果用榨汁機研磨，準確稱量果泥5g，用50 %乙醇溶液180mL浸沒果泥，室溫浸提2小時，1500rpm離心10分鐘，取上清液；準確量取上清液lmL，置於離心管中，用氮吹儀吹乾，加入lmLBSTFA，將離心管放入烘箱中，80°C保溫lh，得到衍生化溶液；使用GCMS儀測試衍生化溶液，得到衍生化溶液總離子流圖，見圖5，通過圖譜庫檢索和人工圖譜解析共鑑定出26個化合物結構，其中包括酸類化合物8個、醇類化合物酚類化合物2個、酚類化合物2個、酯類化合物5個、小分子糖類化合物6個、酮類化合物I個、其他類化合物2個。以上所述，僅是本發明的較佳實施例而已，並非對本發明作任何形式上的限制，雖然本發明已以較佳實施例揭露如上，然而並非用以限定本發明，任何熟悉本專業的技術人員，在不脫離本發明技術方案的範圍內，當可利用上述揭示的技術內容做出些許更動或修飾為等同變化的等效實施例，但凡是未脫離本發明技術方案內容，依據本發明的技術實質對以上的實施例所作的任何簡單修改、等同變化與修飾，均仍屬於本發明技術方案的範圍內。
權利要求
1.一種GC-MS柱前衍生化法研究藍莓果化學組分的方法，其特徵在於1)製備藍莓果化學組分提取液將藍莓鮮果用榨汁機研磨，得到藍莓果泥，準確稱量藍莓果泥5g左右，用不同體系不同配比的有機溶液作為提取液浸沒果泥，室溫浸提2小時，1500rpm離心10分鐘，取上清液，該上清液為藍莓果化學組分提取液，其中所述不同體系不同配比的有機溶液的體積為 100-200mL，所述的不同體系不同配比的有機溶液有四種，第一種為含甲酸的甲醇溶液，所述的甲醇溶液中含甲酸的體積百分比為O. 1-1% ;第二種為甲醇溶液，所述的甲醇溶液的體積濃度(V/V)為30% -60% ;第三種為丙酮溶液，所述的丙酮溶液的體積濃度(V/V)為 40% -70% ;第四種為乙醇溶液，所述的乙醇溶液的體積濃度(V/V)為30% -60% ;2)提取液衍生化將ImL提取液置於離心中，用氮吹儀吹乾，再加入O.1-1mL BSTFA衍生化試劑，放入烘箱中，60-100°C保溫lh，取出後冷卻至室溫，得到衍生化溶液；3)GCMS儀測試衍生化溶液設置GCMS儀器條件，測試衍生化溶液，得到衍生化溶液總離子流圖、各峰所對應的化合物質譜圖等數據信息，所述的GCMS儀器條件為Rtx-5石英毛細管柱，進樣口溫度280°C， 分流比10 1，程序升溫，接口溫度250°C，進樣量I微升，所述的程序升溫程序為柱初溫 100°C，升溫速率6°C /min，升至250°C，繼續升溫，速率15°C /min，升至280°C，保持時間 20min ；4)獲得藍莓果化合物組分信息利用得到衍生化溶液數據信息，利用圖譜庫檢索和人工圖譜解析確定化合物結構。
全文摘要
本發明提供一種藍莓果化學組分研究的方法，屬藍莓果化學成分研究技術，包括下述步驟1)製備藍莓果化學組分提取液，2)提取液衍生化，3)氣質聯用儀測試衍生化溶液，4)獲得藍莓果化合物組分信息。本發明採用氣質聯用儀柱前衍生化法研究藍莓果化學組分，為全面細緻地研究藍莓果化學組分提供了工藝參數，為合理利用生物量豐富的藍莓資源提供指導。
文檔編號G01N30/02GK102998398SQ20121055937
公開日2013年3月27日 申請日期2012年12月21日 優先權日2012年12月21日
發明者呂兆林, 幹蘇靈, 潘月, 雷美玲, 郭弘璇, 林西, 張柏林, 侯智霞 申請人:北京林業大學