一種單針藻的養殖方法與流程
2023-09-14 03:55:25 1
本發明涉及微藻生物領域，具體地，涉及一種單針藻的養殖方法。
背景技術：
：單針藻(Monoraphidium)是一種單細胞綠藻，具有不規則的紡錘體形狀，細胞長12-26μm，寬4-8μm，易於在淡水中繁殖，在積累生物量的同時，消耗一定量的二氧化碳，有利於環境的淨化保護。此外，單針藻中的生物質富含油脂，油脂含量可達細胞乾重的30％左右，可以作為生物能源的潛在來源。同時單針藻中還含有豐富的類β-胡蘿蔔素、維生素以及碳水化合物，具有很高的附加值。因此，單針藻的大規模養殖具有很重要的意義。但是，單針藻的大規模培養和生產技術的研究卻還很少。其中，專利申請CN103555584A和CN103540533A提供了兩種單針藻藻種，並公開了所提供藻種的養殖方法，單針藻油脂含量最高可以達到30.4％。採用指定的培養基進行開放式養殖，通過加入稀鹽酸調節pH值以及加入絮凝劑絮凝採收。但加入絮凝劑後藻液的分離清液難於重複利用，養殖成本較高。同時，廢水排放大，有一定的環境汙染。專利申請CN104073437A公開了一種單針藻的養殖方法，採用開放式養殖，可以利用含量0.03-35％二氧化碳的混合氣體，需要利用絮凝劑和通過調節pH值到酸性使得單針藻沉澱，進而實現單針藻的離心分離。但該方法同樣由於加入絮凝劑導致採收後分離液難於重複利用、養殖成本較高、並會造成一定的環境汙染。技術實現要素：本發明的目的是為了克服現有技術中的上述缺陷，提供一種單針藻的養殖方法，該方法能夠實現單針藻的連續養殖，養殖過程操作穩定，質量控制容易，單針藻油脂含量高，且在養殖過程中所有培養液都可以回收利用，養殖成本低且不會產生廢液排放和環境汙染的問題。為了實現上述目的，本發明提供了一種單針藻的養殖方法，該方法包括：(1)將單針藻進行生物量增長階段的培養；(2)當培養至藻液的OD680值為0.01-10時，將藻液進行分離，得到分離清液I和單針藻藻泥，分離清液I返回至步驟(1)中回用；(3)將步驟(2)得到的單針藻藻泥進行油脂積累階段的培養，所述培養的方式為氮飢餓脅迫培養；(4)脅迫培養5-10天後進行分離，得到分離清液II和油脂積累的單針藻，分離清液II返回至步驟(3)中回用；(5)將油脂積累的單針藻乾燥得到單針藻產品。本發明的方法，為一種單針藻生物量增長培養和油脂積累培養的連續生產的方法，能夠實現單針藻的連續養殖，養殖過程操作穩定，質量控制容易，本發明方法養殖的單針藻的油脂含量高，且在養殖過程中所有培養液都可以回收利用，養殖成本低且不會產生廢液排放和環境汙染的問題。本發明的其它特徵和優點將在隨後的具體實施方式部分予以詳細說明。具體實施方式以下對本發明的具體實施方式進行詳細說明。應當理解的是，此處所描述的具體實施方式僅用於說明和解釋本發明，並不用於限制本發明。本發明提供了一種單針藻的養殖方法，所述方法包括：(1)將單針藻進行生物量增長階段的培養；(2)當培養至藻液的OD680值為0.01-10時，將藻液進行分離，得到分 離清液I和單針藻藻泥，分離清液I返回至步驟(1)中回用；(3)將步驟(2)得到的單針藻藻泥進行油脂積累階段的培養，所述培養的方式為氮飢餓脅迫培養；(4)脅迫培養5-10天後進行分離，得到分離清液II和油脂積累的單針藻，分離清液II返回至步驟(3)中回用；(5)將油脂積累的單針藻乾燥得到單針藻產品。本發明方法中，優選情況下，步驟(1)在生物量增長養殖器中進行，生物量增長養殖器為開放式光生物反應器或封閉式光生物反應器。對於開放式光生物反應器和封閉式光生物反應器沒有特別的限定，可以分別為本領域常用的各種開放式光生物反應器和封閉式光生物反應器。例如開放式光生物反應器可以為跑道式光生物反應器或箱體式光生物反應器；開放式光生物反應器的材質可以為金屬、水泥、無機玻璃、有機玻璃或塑料，塑料可以包括聚乙烯、聚丙烯、聚氯乙烯、聚碳酸酯等。優選地，開放式光生物反應器為透明聚丙烯箱體或水泥跑道池。封閉式光生物反應器可以為鼓泡式光生物反應器、氣升式光生物反應器、攪拌式光生物反應器等；封閉式光生物反應器的材質可以為無機玻璃、有機玻璃或透明塑料，透明塑料可以包括聚乙烯、聚丙烯、聚氯乙烯、聚碳酸酯等。優選地，封閉式光生物反應器為自清潔的鼓泡式聚氯乙烯光生物反應器。本發明方法中，對於單針藻藻種和培養液沒有特別的限定，可以分別為本領域常用的各種單針藻藻種和培養液，此為本領域技術人員所公知，在此不再贅述。本發明方法中，本領域技術人員應該理解的是，在實際的單針藻培養過程中，培養溫度、光照強度和培養液的pH值往往無法控制在一個精確的點值，而是在一個範圍內進行波動。優選情況下，步驟(1)中，培養的條件包括：溫度為15-35℃，光照強度為1000-15000Lux，pH值為5-14，進一步 優選為8-12。其中，培養的條件還包括：在培養過程中通入的碳源為含有二氧化碳的氣體，氣體中二氧化碳的含量為0.03-30重量％，優選為1-25重量％，進一步優選為5-15重量％。在進行光照時，光源可以為自然光，也可以為人造光源(如LED光源)，優選為自然光。含有二氧化碳的氣體可以為高純二氧化碳或工業過程排放的含有二氧化碳的氣體，工業過程排放的含有二氧化碳的氣體可以包括電廠和煉廠排放的含有二氧化碳的氣體。優選地，含有二氧化碳的氣體為高純二氧化碳或者煉廠制氫尾氣。本領域技術人員應該理解的是，含有二氧化碳的氣體在進入到單針藻養殖器前需進行淨化除去固體顆粒物並進行冷卻。本發明方法中，本領域技術人員應該理解的是，生物量增長養殖器的數目應與油脂積累養殖器中單針藻的生長周期、採收周期、採收數量、單針藻積累油脂的生長周期相匹配，其中，單針藻生物量增長養殖器可以是1個，也可以是多個並聯操作。本發明方法中，優選情況下，步驟(2)中，培養至藻液的OD680值為0.05-5，進一步優選為0.1-5，更優選為0.1-3。本發明方法中，優選情況下，步驟(2)中，將全部藻液轉移至分離與儲運裝置中進行分離。本發明方法中，步驟(2)中，對於將藻液轉移至分離與儲運裝置中的方式沒有特別的限定，可以為本領域常用的各種轉移的方式。其中，轉移的方式優選為重力轉移、溢流轉移、虹吸轉移或者壓力輸送轉移，進一步優選為壓力輸送轉移，如用蠕動泵進行壓力輸送轉移。本發明方法中，優選情況下，步驟(2)中，分離的方式為離心分離、過濾分離或者重力沉降分離，進一步優選為過濾分離。過濾分離的方式可以為常壓過濾分離、加壓過濾分離和真空抽濾分離，優選為真空抽濾分離。本發明方法中，優選情況下，分離與儲運裝置為圓柱形分離空塔，所述 圓柱形分離空塔的高徑比為1-10:1，進一步優選為1.5-5:1，且所述圓柱形分離空塔的底部安裝有過濾介質。對於過濾介質沒有特別的限定，可以為本領域常用的各種過濾介質，優選情況下，過濾介質為玻砂、濾布或濾紙，進一步優選為玻砂；過濾介質的孔徑為1-60μm，進一步優選為10-30μm。本發明方法中，優選情況下，圓柱形分離空塔設置有攪拌器，進一步優選地，攪拌器為錨式攪拌器、框式攪拌器或螺帶式攪拌器，更進一步優選為框式攪拌器。本發明方法中，本領域技術人員應該理解的是，分離與儲運裝置的數目視生物量增長養殖器和油脂積累養殖器中的培養液的體積而定，可以是1個，也可以是多個並聯操作。本發明方法中，優選情況下，將分離清液I返回至步驟(1)中回用的方式包括：將分離清液I與補充的(新鮮的)培養液在介質罐中混合後返回至生物量增長養殖器。本發明方法中，優選情況下，步驟(3)在油脂積累養殖器中進行，油脂積累養殖器為開放式光生物反應器或封閉式光生物反應器，優選為開放式光生物反應器。對於開放式光生物反應器和封閉式光生物反應器沒有特別的限定，可以分別為本領域常用的各種開放式光生物反應器和封閉式光生物反應器。例如開放式光生物反應器可以為跑道式光生物反應器或箱體式光生物反應器；開放式光生物反應器的材質可以為金屬、水泥、無機玻璃、有機玻璃或塑料，塑料可以包括聚乙烯、聚丙烯、聚氯乙烯、聚碳酸酯等。優選地，開放式光生物反應器為透明聚丙烯箱體或水泥跑道池。封閉式光生物反應器可以為鼓泡式光生物反應器、氣升式光生物反應器、攪拌式光生物反應器等；封閉式光生物反應器的材質可以為無機玻璃、有機玻璃或透明塑料，透明塑料可以包括聚乙烯、聚丙烯、聚氯乙烯、聚碳酸酯等。本發明方法中，優選情況下，步驟(3)中，單針藻藻泥與分離清液II 在分離與儲運裝置中混合後轉移至油脂積累養殖器中進行油脂積累階段的培養。進一步優選地，轉移至油脂積累養殖器中的方式為虹吸轉移、真空轉移或者壓力輸送轉移，更進一步優選為壓力輸送轉移，如用蠕動泵進行壓力輸送轉移。本發明方法中，優選情況下，步驟(3)中，在將單針藻藻泥與分離清液II在分離與儲運裝置中混合之前，用去離子水洗滌單針藻藻泥，並將洗滌液返回至步驟(1)中回用。對於洗滌的具體方式沒有的限定，只要能夠對分離與儲運裝置中的單針藻藻泥進行洗滌即可，優選地，洗滌的次數為1-5次，進一步優選為3-4次；每次洗滌所用的去離子水的體積為洗滌的單針藻藻泥體積的1-5倍，優選為3-4倍。本發明方法中，優選情況下，將洗滌液返回至步驟(1)中回用的方式包括：將洗滌液與補充的(新鮮的)培養液在介質罐中混合後返回至生物量增長養殖器。本發明方法中，對於脅迫單針藻積累油脂的方式沒有特別的限定，可以為本領域常用的各種方式。步驟(3)中，氮飢餓脅迫培養可以通過減少油脂積累階段的培養液中氮含量來實現，優選地，油脂積累階段的培養液中氮含量為生物量增長階段的培養液中氮含量的0-99％，進一步優選為0-30％，更進一步優選為0。所述培養液中的氮優選為硝酸鈉。優選情況下，除硝酸鈉以外，油脂積累階段培養使用的培養液與生物量增長階段培養使用的培養液相同。本發明方法中，優選情況下，培養的條件包括：pH值為5-12，溫度為24-30℃，光照強度為1000-15000Lux。本發明方法中，本領域技術人員應該理解的是，油脂積累養殖器的數目應與生物量增長養殖器中單針藻的養殖體積和生長周期相匹配，可以是1個，也可以是多個並聯操作。本發明方法中，優選情況下，步驟(4)中，分離的方式為離心分離、過濾分離或重力沉降分離，進一步優選為過濾分離。本發明方法中，優選情況下，將分離清液II返回至步驟(3)中回用的方式包括：將分離清液II通過泵輸送到分離與儲運裝置，同分離出的單針藻藻泥混合均勻。進一步優選地，通過蠕動泵輸送分離清液II。本領域技術人員可以理解的是，為了方便分離清液II的回用，可以將分離清液II先儲存於清液罐中備用。本發明方法中，步驟(5)中，可以先將油脂積累的單針藻送至濃縮罐中再進行乾燥。對於乾燥的方式沒有特別的限定，可以為本領域常用的各種乾燥方式，優選情況下，乾燥的方式為自然乾燥、真空乾燥或噴霧乾燥，進一步優選為旋風噴霧乾燥。實施例以下將通過實施例對本發明進行詳細描述，但本發明不僅限於此。在實施例和對比例中，單針藻購自中科院武漢水生生物研究所。藻液的光密度值(OD值)測定：光密度值用分光光度計測定，以蒸餾水作對照，測定藻液在波長680nm處的吸光值，作為藻液濃度的指標。培養時BG11培養基的成份見表1-表2，在BG11培養基中NaNO3為氮源。表1BG11培養基組分含量，mg/LK2HPO4·3H2O40NaNO31500Na2CO320MgSO4·7H2O75CaCl2·2H2O36檸檬酸6檸檬酸鐵銨6EDTA-2Na1微量元素A51表2微量元素A5組分組成，mg/LH3BO32860MnCl2·4H2O1810ZnSO4·7H2O222CuSO4·5H2O79NaMoO4·5H2O390Co(NO3)2·6H2O50煉廠制氫尾氣為中國石化公司石家莊煉化分公司的煉廠制氫尾氣，二氧化碳的含量為15-20重量％，使用前進行淨化除去固體顆粒物並進行冷卻。封閉式光生物反應器為聚氯乙烯薄膜袋，直徑為220mm、高為1500mm、容積為35L，無內導流筒。開放式跑道池光生物反應器為水泥跑道池，受光面積為50m2。單針藻的養殖速率(g/m2/d)＝單針藻乾重/單針藻生物量增長階段的受光面積/單針藻生物量增長階段的養殖時間。分離與儲運裝置為一個100L的底部帶有玻砂過濾介質的有機玻璃圓柱形分離空塔，高徑比為2:1，框式攪拌，帶有從頂部插入到底部的輸送管，並與油脂積累養殖器連接，輸送管的直徑為10mm，玻砂的規格為G3，孔徑 為15-30μm。實施例1本實施例用於說明利用封閉式光生物反應器養殖單針藻的方法。本實施例中，單針藻生物量增長階段的培養和油脂積累階段的培養均在封閉式光生物反應器中進行。其中，生物量增長階段培養的封閉式光生物反應器為1個，油脂積累階段培養的封閉式光生物反應器為1個，分離與儲運裝置為1個。培養液由硝酸鈉、碳酸氫鈉和BG11培養基複合組成，每升培養液中硝酸鈉的含量為0.02mol，碳酸氫鈉的含量為0.1mol。(1)單針藻的一級培養將單針藻藻種接種到裝有1000mL培養液的2000mL三角瓶中，接種單針藻藻種後培養液的OD680值為0.015。在20-30℃、1800-2200Lux、pH值10-12下培養藻液至OD680值為3.3，備用。培養過程中pH值由高純二氧化碳調節。(2)在1個封閉式光生物反應器中進行單針藻生物量增長階段的培養：封閉式光生物反應器消毒後加入28L培養液和一級培養的單針藻藻種，培養液的初始OD680值為0.1。煉廠制氫尾氣從封閉式光生物反應器底部通過氣石分散以鼓泡形式進入，並產生攪動、混合，進氣流量為200L/h。在20-24℃、光照強度1800-5000Lux、pH值8-10下培養，pH值通過煉廠制氫尾氣的進氣流量控制。(3)單針藻分離與轉移：培養15天後培養液的OD680值達到3.1，通過蠕動泵壓力輸送轉移的方式將單針藻藻液從步驟(2)的封閉式光生物反應器中全部轉移至分離與儲運裝置。經過玻砂過濾，得到分離清液I和單針藻藻泥，分離清液I進入培養液介質罐中，然後用去離子水洗滌分離得到的 單針藻藻泥3次，每次用水5L，洗滌液進入培養液介質罐中，並補充BG11培養基和硝酸鈉至前述培養液的相應含量，此時混合液的OD值為1.1。然後將混合液經過蠕動泵再進入步驟(2)的封閉式光生物反應器中，繼續單針藻生物量增長階段的培養。28L液體由清液罐經泵送入分離與儲運裝置，與過濾得到的單針藻藻泥混合，混合均勻後，混合液由蠕動泵經輸送管壓力輸送轉移進入單針藻油脂積累養殖器。(4)在1個油脂積累養殖器，即封閉式光生物反應器中進行單針藻油脂的積累：混合液壓力輸送轉移至封閉式光生物反應器後，以不含硝酸鈉的培養液進行培養以積累油脂。培養時溫度為28-32℃，光照強度為1000-5000Lux，pH值為8-12。煉廠制氫尾氣從封閉式光生物反應器底部通過氣石分散以鼓泡形式進入，並產生攪動、混合，煉廠制氫尾氣的進氣量為200L/h，pH值通過煉廠制氫尾氣的進氣流量控制。培養5天後停止進氣，靜置分離，得到分離清液II和油脂積累的單針藻，分離清液II進入清液罐，油脂積累的單針藻進入濃縮罐並經過真空乾燥後得到單針藻藻粉。按單針藻生物量增長階段培養液的總體積計，單針藻養殖速率為12g/m2/d，得到的單針藻中油脂含量為36.6％。實施例2本實施例用於說明利用開放式光生物反應器養殖單針藻的方法。本實施例中，單針藻生物量增長階段的培養和油脂積累階段的培養均在開放式跑道池光生物反應器中進行。其中，生物量增長階段培養的開放式跑道池光生物反應器為1個，油脂積累階段培養的開放式跑道池光生物反應器為1個，分離與儲運裝置為1個。培養液由硝酸鈉、碳酸氫鈉和BG11培養基複合組成，每升培養液中硝酸鈉的含量為0.02mol，碳酸氫鈉的含量為0.1mol。(1)單針藻的一級培養將單針藻藻種接種到裝有1000mL培養液的2000mL三角瓶中，接種單針藻藻種後培養液的OD680值為0.015。在20-30℃、1800-2200Lux、pH值10-12下培養藻液至OD680值為3.3，備用。培養過程中pH值由高純二氧化碳調節。(2)在1個開放式跑道池光生物反應器中進行單針藻生物量增長階段的培養：在開放式跑道池光生物反應器中加入10000L培養液和一級培養的單針藻藻種，培養液的初始OD680值為0.07。煉廠制氫尾氣從上面進入培養液中，通過分散器鼓泡形式進入跑道池，進氣流量為2000L/h。在22-25℃、光照強度1800-5000Lux、pH值10-12下培養，pH值通過煉廠制氫尾氣的進氣流量控制。(3)單針藻分離與轉移：培養15天後培養液的OD680值達到1.6，通過蠕動泵將單針藻藻液從步驟(2)的開放式跑道池光生物反應器中全部轉移至分離與儲運裝置。經過玻砂過濾，得到分離清液I和單針藻藻泥，分離清液I進入培養液介質罐中，然後用去離子水洗滌分離得到的單針藻藻泥4次，每次用水100L，洗滌液進入培養液介質罐中，並補充BG11培養基和硝酸鈉至前述培養液的相應含量，此時混合液的OD值為0.53。然後將混合液經過蠕動泵再進入步驟(2)的開放式跑道池光生物反應器中，繼續單針藻生物量增長階段的培養。80L液體由清液罐經泵送入分離與儲運裝置，與過濾得到的單針藻藻泥混合，混合均勻後，混合液經過輸送管進入油脂積累養殖器，同時補充清液罐中的清液至10000L。(4)在1個油脂積累養殖器，即開放式跑道池光生物反應器中進行單針藻油脂的積累：混合液虹吸轉移至開放式跑道池光生物反應器後，以不含硝酸鈉的培養液進行培養以積累油脂。培養時溫度為22-25℃，光照強度為1800-5000Lux，pH值為10-12。煉廠制氫尾氣通過分散器鼓泡形式進入開放 式跑道池光生物反應器，並產生攪動、混合，煉廠制氫尾氣的進氣量為600L/h，pH值通過煉廠制氫尾氣的進氣流量控制。培養6天後停止進氣，離心分離，得到分離清液II和油脂積累的單針藻，分離清液II進入清液罐，油脂積累的單針藻進入濃縮罐並經過旋風噴霧乾燥後得到單針藻藻粉。按單針藻生物量增長階段培養液的總體積計，單針藻的養殖速率為10.5g/m2/d，得到的單針藻中油脂的含量為31.7％。實施例3本實施例用於說明利用複合式光生物反應器養殖單針藻的方法。本實施例中，單針藻生物量增長階段的培養在封閉式光生物反應器中進行，油脂積累階段的培養在開放式跑道池光生物反應器中進行。其中，生物量增長階段培養的封閉式光生物反應器為10個，油脂積累階段培養的開放式跑道池光生物反應器為1個，分離與儲運裝置為1個。培養液由硝酸鈉、碳酸氫鈉和BG11培養基複合組成，每升培養液中硝酸鈉的含量為0.02mol，碳酸氫鈉的含量為0.1mol。(1)單針藻的一級培養將單針藻藻種接種到裝有1000mL培養液的2000mL三角瓶中，接種單針藻藻種後培養液的OD680值為0.015。在20-30℃、1800-2200Lux、pH值10-12下培養藻液至OD680值為3.3，備用。培養過程中pH值由高純二氧化碳調節。(2)在10個並聯的封閉式光生物反應器中進行單針藻生物量增長階段的培養：在每個封閉式光生物反應器中加入28L培養液和一級培養的單針藻藻種，培養液的初始OD680值為0.12。煉廠制氫尾氣從封閉式光生物反應器的底部通過氣石分散以鼓泡形式進入，並產生攪動、混合，進氣流量為200L/h。在20-25℃、光照強度1800-5000Lux、pH值9-11下培養，pH值通 過煉廠制氫尾氣的進氣流量控制。(3)單針藻分離與轉移：培養15天後各封閉式光生物反應器中的培養液的OD680值達到3-4，通過虹吸轉移的方式將單針藻藻液從步驟(2)的10個封閉式光生物反應器中全部轉移至分離與儲運裝置。經過玻砂過濾，得到分離清液I和單針藻藻泥，分離清液I進入培養液介質罐中，然後用去離子水洗滌分離得到的單針藻藻泥3次，每次用水50L，洗滌液進入培養液介質罐中，並補充BG11培養基和硝酸鈉至前述培養液的相應含量，此時混合液的OD值為0.75。然後將混合液經過蠕動泵再分別進入步驟(2)的10個封閉式光生物反應器中，繼續單針藻生物量增長階段的培養。80L液體由清液罐經泵送入分離與儲運裝置，與過濾得到的單針藻藻泥混合，混合均勻後，混合液由蠕動泵經輸送管壓力輸送轉移進入油脂積累養殖器，同時補充清液罐中的清液至300L。(4)在1個油脂積累養殖器，即開放式跑道池光生物反應器中進行單針藻油脂的積累：混合液壓力輸送轉移至開放式跑道池光生物反應器後，以不含硝酸鈉的培養液進行培養以積累油脂。培養時溫度為20-25℃，光照強度為1800-5000Lux，pH值為10-12。煉廠制氫尾氣通過分散器鼓泡形式進入開放式跑道池光生物反應器，並產生攪動、混合，煉廠制氫尾氣的進氣量為600L/h，pH值通過煉廠制氫尾氣的進氣流量控制。培養5天後停止進氣，玻砂過濾分離，得到分離清液II和油脂積累的單針藻，分離清液II進入清液罐，油脂積累的單針藻進入濃縮罐並經過旋風噴霧乾燥後得到單針藻藻粉。按單針藻生物量增長階段培養液的總體積計，單針藻的養殖速率為11g/m2/d，得到的單針藻中油脂的含量為30.8％。對比例1本對比例用於說明利用單一的開放式光生物反應器養殖單針藻的方法。培養液由硝酸鈉、碳酸氫鈉和BG11培養基複合組成，每升培養液中硝酸鈉的含量為0.02mol，碳酸氫鈉的含量為0.1mol。(1)單針藻的一級培養將單針藻藻種接種到裝有1000mL培養液的2000mL三角瓶中，接種單針藻藻種後培養液的OD680值為0.015。在20-30℃、1800-2200Lux、pH值10-12下培養藻液至OD680值為3.3，備用。培養過程中pH值由高純二氧化碳調節。(2)在開放式跑道池光生物反應器中加入10000L培養液和一級培養的單針藻藻種，培養液初始OD值為0.07。煉廠制氫尾氣從上面進入培養液中，通過分散器鼓泡形式進入跑道池，進氣流量2000L/h。在22-25℃、光照強度1800-5000Lux、pH值8-12下培養，pH值通過煉廠制氫尾氣的進氣流量控制。培養18天後培養液的OD680值達到1.2，通過蠕動泵輸送離心採收，得到離心液和單針藻藻泥，單針藻藻泥經過旋風噴霧乾燥後得到單針藻藻粉。離心液進入培養液介質罐，並補充BG11培養基和硝酸鈉至前述培養液的相應含量，此時混合液的OD值為0.1。然後將混合液經過蠕動泵送回至開放式跑道池光生物反應器中，繼續單針藻養殖。按培養液的體積計，單針藻的養殖速率為0.9g/m2/d，得到的單針藻中油脂的含量為22％。本發明的單針藻的養殖方法，能夠實現單針藻的連續養殖，養殖過程操作穩定，質量控制容易，單針藻油脂含量高，且在養殖過程中所有培養液都可以回收利用，養殖成本低且不會產生廢液排放和環境汙染的問題。以上詳細描述了本發明的優選實施方式，但是，本發明並不限於上述實施方式中的具體細節，在本發明的技術構思範圍內，可以對本發明的技術方案進行多種簡單變型，這些簡單變型均屬於本發明的保護範圍。另外需要說明的是，在上述具體實施方式中所描述的各個具體技術特徵，在不矛盾的情況下，可以通過任何合適的方式進行組合，為了避免不必要的重複，本發明對各種可能的組合方式不再另行說明。此外，本發明的各種不同的實施方式之間也可以進行任意組合，只要其不違背本發明的思想，其同樣應當視為本發明所公開的內容。當前第1頁1 2 3