免疫原性組合物的製作方法
2023-12-05 09:05:31
專利名稱：免疫原性組合物的製作方法
技術領域：
本發明是包含無乳鏈球菌(Streptococcus agalactiae)莢膜糖和運載體蛋白偶聯物的免疫原性組合物的領域。所述組合物用於免疫。
背景技術：
在針對有莢膜細菌的疫苗中使用細菌的莢膜糖已有多年歷史。然而，由於糖是T非依賴性抗原，它們的免疫原性較弱。與運載體偶聯可將T非依賴性抗原轉化成T依賴性抗原，從而增強記憶反應並能發展出保護性免疫。因此，最有效的糖疫苗是基於糖偶聯物，原型偶聯物(conjugate)疫苗針對b型流感嗜血菌(Haemophilus influenzae) ( 『Hib』 )[例如見參考文獻84的第14章]。其偶聯物疫苗已有描述的另一種細菌是無乳鏈球菌(Streptococcusagalactiae),也稱作「B組鏈球菌」,或簡單稱作「GBS」。Dennis Kasper及其同事進行了許多這樣的工作，在例如參考文獻1-9中進行了描述。已顯示偶聯物疫苗就各GBS血清型la、lb、I1、III和V而言在人體中安全且具有免疫原性[10]。然而，這些仍然需要進一步和改善的GBS偶聯物疫苗。
發明內容
第一方面，本發明使用一種或多種來自GBS血清型la、lb、III或V的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成的偶聯物。特別地，本發明提供了包含一種或多種這些偶聯物的免疫原性組合物。所述組合物可以用作防止這些GBS血清型感染的疫苗。第二方面，本發明提供了對患者進行抗GBS感染免疫的方法，所述方法包含給予患者偶聯物的步驟，所述偶聯物是GBS莢膜糖與白喉類毒素或其衍生物偶聯而成的偶聯物，其中所述患者用白喉類毒素或其衍生物預先免疫。通常，所述偶聯物是本發明第一方面的免疫原性組合物中的所述GBS偶聯物之一。免疫原性組合物在一個實施方式中，本發明提供了含有偶聯物的免疫原性組合物，所述偶聯物是GBS血清型Ia的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成。在第二個實施方式中，本發明提供了含有偶聯物的免疫原性組合物，所述偶聯物是GBS血清型Ib的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成。在第三個實施方式中，本發明提供了含有偶聯物的免疫原性組合物，所述偶聯物是GBS血清型III的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成。在第四個實施方式中，本發明提供了含有偶聯物的免疫原性組合物，所述偶聯物是GBS血清型V的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成。所述免疫原性組合物可以包含多於一種偶聯物。下面描述包含兩種、三種或四種偶聯物的本發明實施方式。這些組合物中，發明人發現了包含偶聯物的組合物可以賦予除了 GBS血清型Ib以外對GBS血清型Ia的保護，所述偶聯物是GBS血清型Ib的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成。這個觀察與參考文獻11中的描述相反，參考文獻11提示了 Ib型偶聯物不能誘導能殺滅Ia型細菌的抗體。因此，下述包含GBS血清型Ib莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成的偶聯物的實施方式可以有優勢，因為其提供了對血清型Ia增強的保護(當所述組合物也包含GBS血清型Ia的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成的偶聯物時)，並且當所述組合物不包含GBS血清型Ia的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成的偶聯物時，甚至也可以提供保護。如上所述，所述免疫原性組合物可以包含兩種偶聯物。在一個實施方式中，所述第一偶聯物是GBS血清型Ia的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成，而所述第二偶聯物是GBS血清型Ib的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成。在第二個實施方式中，所述第一偶聯物是GBS血清型Ia的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成，而所述第二偶聯物是GBS血清型III的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成。在第三個實施方式中，所述第一偶聯物是GBS血清型Ia的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成，而所述第二偶聯物是GBS血清型V的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成。在第四個實施方式中，所述第一偶聯物是GBS血清型Ib的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成，而所述第二偶聯物是GBS血清型III的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成。在第五個實施方式中，所述第一偶聯物是GBS血清型Ib的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成，而所述第二偶聯物是GBS血清型V的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成。在第六個實施方式中，所述第一偶聯物是GBS血清型III的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成，而所述第二偶聯物是GBS血清型V的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成。相似地，所述免疫原性組合物可以包含三種偶聯物。在一個實施方式中，所述第一偶聯物是GBS血清型Ia的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成，而所述第二偶聯物是GBS血清型Ib的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成，以及所述第三偶聯物是GBS血清型III的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成。本發明人發現了這種組合物(如下面所示例)特別適用作疫苗以防止GBS感染。因此這個實施方式是本發明優選的實施方式。在第二個實施方式中，所述第一偶聯物是GBS血清型Ia的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成，而所述第二偶聯物是GBS血清型Ib的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而 成，以及所述第三偶聯物是GBS血清型V的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成。在第三個實施方式中，所述第一偶聯物是GBS血清型Ia的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成，而所述第二偶聯物是GBS血清型III的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成，以及所述第三偶聯物是GBS血清型V的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成。在第四個實施方式中，所述第一偶聯物是GBS血清型Ib的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成，而所述第二偶聯物是GBS血清型III的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成，以及所述第三偶聯物是GBS血清型V的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成。採用相同方式，所述免疫原性組合物可以包含四種偶聯物。在一個實施方式中，所述第一偶聯物是GBS血清型Ia的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成，而所述第二偶聯物是GBS血清型Ib的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成，所述第三偶聯物是GBS血清型III的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成，以及所述第四偶聯物是GBS血清型V的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成。通常，上述免疫原性組合物不會包含特定提到的那些以外的任何偶聯物，特別是含有來自特定提到的那些以外的GBS血清型莢膜糖的偶聯物。然而，在一些實施方式中，所述組合物可以包含其他的偶聯物，包括含有其他GBS血清型莢膜糖的偶聯物。例如，所述組合物可以包含是GBS血清型II的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成的偶聯物。類似地，所述組合物可以包含是GBS血清型VI的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成的偶聯物。在另一種可能性中，所述組合物可以包含是GBS血清型VIII莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成的偶聯物。
上述免疫原性組合物可以包含每個單位劑量的任意合適量的莢膜糖。合適量的莢膜糖可以是每個單位劑量0.1-50 μ g。通常，各GBS莢膜糖存在的量是1-30 μ g，例如2-25 μ g，和特別是5-20 μ g。合適量的莢膜糖可以包含每個單位劑量5、10和20 μ g。本發明人發現了這些量是合適的，特別是當所述免疫原性組合物包含來自GBS血清型la、Ib和/或III的莢膜糖時。因此，在上述實施方式中，各莢膜糖的合適量/單位劑量可選自下表的編號選項，其中按照血清型指示了相關的實施方式，從中獲得所述組合物的莢膜糖:
表A-包含一種偶聯物的免疫原性組合物
權利要求
1.一種免疫原性組合物，所述組合物包含:a)GBS血清型Ia的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成的偶聯物；b)GBS血清型Ib的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成的偶聯物；和c)GBS血清型III的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成的偶聯物。
2.如權利要求1所 述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述GBS莢膜糖的總量 70 μ go
3.如權利要求1或2所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述各GBS莢膜糖以每單位劑量UOyg的量存在。
4.如權利要求3所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述各GBS莢膜糖以每單位劑量5 μ g、10 μ g或20 μ g的量存在。
5.如權利要求4所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述每單位劑量GBS血清型la、Ib和III莢膜糖的量與表C中第二列所述劑量選項之一對應。
6.如權利要求5所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述每單位劑量GBS血清型la、Ib 和 III 莢膜糖的量選自 20yg、20yg和 20 μ g; 10 μ g、10 μ g 和 10 μ g;與 5 μ g、5 μ g 和5μ g0
7.如權利要求6所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述每單位劑量GBS血清型la、Ib和III莢膜糖的量是5 μ g、5 μ g和5 μ g。
8.如權利要求1或2所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述各GBS莢膜糖以每單位劑量0.Hyg的量存在。
9.如權利要求8所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述各GBS莢膜糖以每單位劑量0.5、2.5或5yg的量存在。
10.如權利要求9所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述每單位劑量GBS血清型la、Ib和III莢膜糖的量與表C』中所述劑量選項之一對應。
11.如權利要求1- 10中任一項所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述GBS血清型la、Ib和III莢膜糖的質量比率與表F中第二列所述比例選項之一對應。
12.如權利要求11所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述GBS血清型Ia、Ib和III莢膜糖的質量比率是1:1:1。
13.如權利要求1- 12中任一項所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述組合物以一個單位劑量給予，然後在第一單位劑量3個月後給予第二單位劑量。
14.如權利要求1- 12中任一項所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述免疫原性組合物還包含:d)GBS血清型V的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成的偶聯物。
15.如權利要求14所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述組合物以一個單位劑量給予，然後在第一單位劑量I個月後給予第二單位劑量。
16.如權利要求1- 12和14中任一項所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述組合物以單個劑量給予。
17.如前述權利要求中任一項所述的免疫原性組合物,其特徵在於,所述免疫原性組合物不含鋁鹽佐劑。
18.如前述權利要求中任一項所述的免疫原性組合物,其特徵在於,所述免疫原性組合物不含任意佐劑。
19.如前述權利要求中任一項所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述a)、b)和/或C)中的運載體蛋白是白喉類毒素、破傷風類毒素或CRM197。
20.如權利要求19所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述a)、b)和c)中的運載體蛋白是CRM197。
21.如前述權利要求中任一項所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述偶聯物通過對10-30%糖唾液酸殘基氧化偶聯前生成的醛基進行還原氨化獲得。
22.如前述權利要求中任一項所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述GBS莢膜糖在位點7、8和/或9的唾液酸殘基基本沒有O乙醯化。
23.如前述權利要求中任一項所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述GBS血清型Ia的莢膜糖MW範圍是150-300kDa;所述GBS血清型Ib的莢膜糖MW範圍是150_300kDa;和/或所述GBS血清型III的莢膜糖MW範圍是50-200kDa。
24.如前述權利要求中任一項所述的免疫原性組合物，其特徵在於，GBS血清型Ia莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成的偶聯物具有約1:1-1:2的糖:蛋白比率(w/w);GBS血清型Ib莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成的偶聯物具有約1:1-1:2的糖:蛋白比率(w/w);和/或GBS血清型III莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成的偶聯物具有約3:1-1:1的糖:蛋白比率(w/w)。
25.如前述權利要求中任一項所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述組合物用於肌肉內給予。
26.如前述權利要求中任一項所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述組合物還包括:(a)含有選自SEQ ID NOl _ 3胺基酸序列的多肽，和/或(b)多肽，所述多肽含有⑴與一種或多種SEQ ID NOl - 3和/或(ii) SEQ ID NOl - 3的片段具有序列相同性的胺基酸序列。
27.如前述權利要求中任一項所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述組合物是可注射的液體溶液或懸浮液。
28.如權利要求1- 26中任一項所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述組合物凍幹。
29.如權利要求28所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述組合物包含甘露醇以穩定所述偶聯物。
30.如前述權利要求中任一項所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述組合物包含磷酸二氫鉀緩衝液。
31.如前述權利要求中任一項所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述組合物包含氯化鈉。
32.如前述權利要求中任一項所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述組合物是疫苗。
33.如前述權利要求中任一項所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述組合物對人給予。
34.如前述權利要求中任一項所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述組合物給予選自育齡婦女、妊娠婦女和年老患者的人。
35.如權利要求34所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述組合物給予妊娠婦女。
36.如權利要求33-35中任一項所述的免疫原性組合物，其特徵在於，給予前，所述人中針對GBS血清型Ia莢膜糖、GBS血清型Ib莢膜糖和/或GBS血清型III莢膜糖的抗體水平檢測不到。
37.如前述權利要求中任一項所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述組合物用作藥物。
38.如權利要求37所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述組合物用於防止和/或治療無乳鏈球菌(S.agalactiae)造成的疾病。
39.如權利要求38所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述疾病是新生兒敗血症、菌血症、新生兒肺炎、新生兒腦膜炎、子宮內膜炎、骨髓炎或膿毒性關節炎。
40.如前述權利要求中任一項所述的免疫原性組合物，其特徵在於，所述組合物給予用白喉類毒素或其衍生物預先免疫的患者，並且所述免疫原性組合物中至少一種偶聯物是GBS莢膜糖與白喉類毒素或其衍生物偶聯而成的偶聯物。
41.一種對患者進行抗GBS感染免疫的方法，所述方法包含給予患者偶聯物的步驟，所述偶聯物是GBS莢膜糖與喉類毒素或其衍生物偶聯而成的偶聯物，其中所述患者用白喉類毒素或其衍生物預先免疫。
42.如權利要求41所述的方法，其特徵在於，所述偶聯物包含於免疫原性組合物中，所述免疫原性組合物包含:a)GBS血清型Ia的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成的偶聯物；b)GBS血清型Ib的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成的偶聯物；和c)GBS血清型III的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成的偶聯物；並且所述來自GBS的莢膜糖是來自GBS血清型la、Ib或III的莢膜糖。
43.如權利要求42所述的方法，其特徵在於，所述GBS的莢膜糖是GBS血清型III的莢月旲糖。
44.如權利要求42或43所述的方法，其特徵在於，所述免疫原性組合物有如權利要求1-39中任一項所述的特性。
45.一種對患者進行抗GBS感染免疫的方法，所述方法包含給予患者偶聯物的步驟，所述偶聯物是GBS莢膜糖與破傷風類毒素或其衍生物偶聯而成的偶聯物，其中所述患者用破傷風類毒素或其衍生物預先免疫。
46.如權利要求45所述的方法，其特徵在於，所述偶聯物包含於免疫原性組合物中，所述免疫原性組合物包含:a)GBS血清型Ia的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成的偶聯物；b)GBS血清型Ib的莢膜糖與運載體 蛋白偶聯而成的偶聯物；和c)GBS血清型III的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成的偶聯物；並且所述來自GBS的莢膜糖是來自GBS血清型la、Ib或III的莢膜糖。
47.如權利要求46所述的方法，其特徵在於，所述GBS的莢膜糖是GBS血清型III的莢月旲糖。
48.如權利要求46或47所述的方法，其特徵在於，所述免疫原性組合物有如權利要求1-39中任一項所述的特性。
全文摘要
本發明提供了一種免疫原性組合物，其包含a)GBS血清型Ia的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成的偶聯物；b)GBS血清型Ib的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成的偶聯物；和c)GBS血清型III的莢膜糖與運載體蛋白偶聯而成的偶聯物。本發明也提供了對患者進行抗GBS感染免疫的方法，所述方法包含給予患者偶聯物的步驟，所述偶聯物是GBS莢膜糖與白喉類毒素或其衍生物偶聯而成的偶聯物，其中所述患者用白喉類毒素或其衍生物預先免疫。
文檔編號A61P31/04GK103209708SQ201180054731
公開日2013年7月17日 申請日期2011年9月16日 優先權日2010年9月16日
發明者F·伯爾蒂, M·肯託尼, P·科斯坦蒂諾, O·芬科, G·格蘭迪, D·邁文, J·特爾福德 申請人:諾華有限公司