乙醇注入-動態高壓微射流製備茶多酚納米脂質體的方法

2023-12-05 20:33:51 2

乙醇注入-動態高壓微射流製備茶多酚納米脂質體的方法
【專利摘要】一種乙醇注入法結合動態高壓微射流製備茶多酚納米脂質體的方法，以茶多酚、卵磷脂、吐溫-80和磷酸鹽緩衝溶液為原材，採用乙醇注入-動態高壓微射流法製備得到茶多酚納米脂質體。本發明製備的茶多酚納米脂質體平均粒徑為67.4±3.0nm，zeta電位為-6.07±0.59mV，分布係數為0.220±0.010，包封率達到了79.7±5.4%，並表現出良好的緩釋性，24h後僅有30.3±2.9%的茶多酚釋放出來。在pH=7.4的小腸模擬環境中，茶多酚脂質體表現出良好的穩定性。
【專利說明】乙醇注入-動態高壓微射流製備茶多酚納米脂質體的方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種水溶性藥物納米脂質體的製備方法，具體涉及一種乙醇注入-動態高壓微射流製備茶多酚納米脂質體的方法，可進一步應用於食品、藥品、化妝品等領域。
【背景技術】
[0002]茶多酚具有抗氧化、抗癌等功能，是保健食品、藥品等的潛在使用對象，但它對光、氧氣敏感，使得其應用受到了限制。脂質體(liposome)是由磷脂雙分子層形成的內部包含水相的封閉囊泡。研究表明，脂質體具有緩釋性、細胞親和性、組織相容性和靶向性等優點，已成功應用於生物醫藥、化工農業等領域。脂質體用於包裹營養素、酶、食品添加劑、食品抗菌劑等物質已顯示出誘人前景。利用脂質體技術將茶多酚包封起來，可以克服茶多酚上述缺點。乙醇注入-動態高壓微射流法製備的脂質體可以克服粗脂質體粒徑大，不穩定等缺點，同時乙醇注入法也突破了薄膜法洗膜困難和小批量生產的障礙。

【發明內容】

[0003]本發明的目的是針對現有技術的不足提供一種乙醇注入-動態高壓微射流製備茶多酚納米脂質體的方法，以提高茶多酚脂質體的穩定性，為茶多酚脂質體的開發提供理論依據和技術參考。
[0004]本發明所述一種乙醇注入-動態高壓微射流製備茶多酚納米脂質體的方法工藝步驟如下:
(1)茶多酚納米脂質體的組份茶多酚、卵磷脂、膽固醇和吐溫-80與pH=6.0濃度為0.05M/L的磷酸鹽緩衝溶液的 質量體積比為:在100mLpH=6.0濃度為0.05M/L的磷酸鹽緩衝溶液中:茶多酚0.25-0.75g、卵磷脂2.02-6.06g、膽固醇0.30-0.90g、吐溫-80
0.51-1.53g ；
(2)按上述質量體積比稱取茶多酚、卵磷脂、膽固醇和吐溫-80，在40°C_50°C下溶於與磷酸鹽緩衝溶液相同體積的無水乙醇中；
(3)將步驟(2)所得溶液加入到步驟(1)確定的質量體積比的pH=6.0濃度為0.05M/L的磷酸鹽緩衝溶液中，攪拌形成乳液；
(4)將步驟(3)所得乳液在蒸發儀上蒸發除去乙醇得茶多酚粗脂質體；
(5)用動態高壓微射流處理步驟(4)得到的粗脂質體，壓力為llOMPa，處理一次得到茶多酚納米脂質體。
[0005]本發明的有益效果是:
(1)包封率:乙醇注入-動態高壓微射流法製備的茶多酚納米脂質體具有比較高的包封率，包封率為79.7 ±5.4%。
[0006](2)粒徑電位:乙醇注入-動態高壓微射流法製備的茶多酚納米脂質體的平均粒徑為 67.4±3.0nm，分布係數為 0.22±0.010，電位為-6.07 ±0.59mV。
[0007](3)微觀形貌圖:乙醇注入-動態高壓微射流法製備的茶多酚納米脂質體，其原子力圖(圖1)，可以看出脂質體成球形，且粒徑大小為lOOnm以下，且分布比較均勻。
[0008](4)乙醇注入-動態高壓微射流法製備的茶多酚納米脂質體表現出良好的緩釋性能，透析24h後，茶多酚的釋放率僅為30.3 ±2.9%。
[0009](5)鹼性環境中穩定性實驗:將茶多酚溶液和茶多酚納米脂質體置於模擬胃腸道的鹼性環境下，評估其穩定性，在430nm的波長下測定其氧化物的含量。具體步驟如下:將茶多酚溶液和茶多酚納米脂質體分別用磷酸鹽緩衝溶液(pH=7.4,0.05M/L)稀釋，使它們的最終濃度為200μ g/mL，然後置於37°C保溫。在預先設定的時間下觀察顏色並其在430nm波長下測定其吸光度。在Oh時，茶多酚溶液和茶多酚納米脂質體的吸光度都很小，分別為
0.083和0.062。到24h時後，茶多酚溶液的和茶多酚脂質體的吸光度分別達到了 1.304和
0.827。並且在相同的時間下，茶多酚納米脂質體的吸光度遠低於茶多酚溶液。如在4h時，茶多酚脂質體的吸光度為0.357，而茶多酚溶液的吸光度為0.613。並且隨著時間的推移，兩者之間的差值越來越大(圖3)，這表明茶多酚納米脂質體能顯著提高茶多酚的穩定性。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0010]圖1:茶多酚納米脂質體的粒徑分布與原子力的微觀圖； 圖2:茶多酚溶液和茶多酚納米脂質體的體外釋放；
圖3:茶多酚溶液和茶多酚納米脂質體在pH=7.4的環境中穩定性觀察。
【具體實施方式】
[0011]實施例1
稱取121.2g卵磷脂、18.lg膽固醇、30.6g吐溫-80和15.0g茶多酚，45°C下完全溶解於3L無水乙醇中，將乙醇溶液緩慢注入到3L磷酸鹽緩衝溶液(pH=6.0、0.05M/L)中，形成乳液，然後將其轉移到圓底燒瓶中，在45°C水浴條件下真空旋轉除去無水乙醇，形成均勻的懸濁液即為粗脂質體。將粗脂質體加入到動態高壓微射流中，於llOMPa條件下微流化處理1次，即製備得到納米脂質體。製得的納米脂質體為較透明乳白色溶液。製得的茶多酚納米脂質體的包封率為78.6%，平均粒徑為68.5nm，分布係數為0.223，Zeta電位為-6.86mV,在體外釋放試驗中，24h後茶多酚的釋放率僅為29.8%。
[0012]實施例2
稱取82.5g卵磷脂、10.6g膽固醇、20.6g吐溫-80和10.2g茶多酚，50°C下完全溶解於3L無水乙醇中，將乙醇溶液緩慢注入到3L磷酸鹽緩衝溶液(pH=6.0、0.05M/L)中，形成乳液，然後將其轉移到圓底燒瓶中，在45°C水浴條件下真空旋轉除去無水乙醇，形成的均勻懸濁液即為粗脂質體。將粗脂質體加入到動態高壓微射流中，於llOMPa條件下微流化處理1次，即製備得到納米脂質體。製得的納米脂質體為較透明乳白色溶液。製得的茶多酚納米脂質體的包封率為75.2%，平均粒徑為71.2nm，分布係數為0.219，Zeta電位為-6.08mV，在體外釋放試驗中，24h後茶多酚的釋放率僅為26.8%。
[0013]實施例3
稱取182.lg卵磷脂、28.4g膽固醇、46.8g吐溫-80和22.5g茶多酚，50°C下完全溶解於3L無水乙醇中，將乙醇溶液緩慢注入到3L磷酸鹽緩衝溶液(pH=6.0、0.05M/L)中，形成乳液，然後將其轉移到圓底燒瓶中，在45°C水浴條件下真空旋轉除去無水乙醇，形成均勻的懸濁液即為粗脂質體。將粗脂質體加入到動態高壓微射流中，於llOMPa條件下微流化處理1次，即製備得到納米脂質體。製得的納米脂質體為較透明乳白色溶液。製得的茶多酚納米脂質體的包封率為82.5%，平均粒徑為65.4nm，分布係數為0.232，Zeta電位為-5.92mV，在體外釋放試驗中，24h後茶多酚的釋放率僅為33.8%。
[0014]實施例4
稱取138.4g卵磷脂、20.9g膽固醇、35.3g吐溫-80和17.0g茶多酚，45°C下完全溶解於3L無水乙醇中，將乙醇溶液緩慢注入到3L磷酸鹽緩衝溶液(pH=6.0、0.05M/L)中，形成乳液，然後將其轉移到圓底燒瓶中，在45°C水浴條件下真空旋轉除去無水乙醇，形成的均勻懸濁液即為 粗脂質體。將粗脂質體加入到動態高壓微射流中，於llOMPa條件下微流化處理1次，即製備得到納米脂質體。製得的納米脂質體為較透明乳白色溶液。製得的茶多酚納米脂質體的包封率為82.6%，平均粒徑為64.5nm，分布係數為0.208，Zeta電位為-5.42mV，在體外釋放試驗中，24h後茶多酚的釋放率僅為30.8%。
【權利要求】
1.一種乙醇注入法結合動態高壓微射流製備茶多酚納米脂質體的方法，其特徵是:(1)茶多酚納米脂質體的組份茶多酚、卵磷脂、膽固醇和吐溫-80與pH=6.0濃度為0.05M/L的磷酸鹽緩衝溶液的質量體積比為:在100mLpH=6.0濃度為0.05M/L的磷酸鹽緩衝溶液中:茶多酚0.25-0.75g、卵磷脂2.02-6.06g、膽固醇0.30-0.90g、吐溫-80.0.51-1.53g ；(2)按上述質量體積比稱取茶多酚、卵磷脂、膽固醇和吐溫-80，在40°C_50°C下溶於與磷酸鹽緩衝溶液相同體積的無水乙醇中；(3)將步驟(2)所得溶液加入到步驟(1)確定的質量體積比的pH=6.0濃度為0.05M/L的磷酸鹽緩衝溶液中，攪拌形成乳液；(4)將步驟(3)所得乳液在蒸發儀上蒸發除去乙醇得茶多酚粗脂質體；(5)用動態高壓微射流 處理步驟(4)得到的粗脂質體，壓力為llOMPa，處理一次得到茶多酚納米脂質體。
【文檔編號】A61K31/353GK103637989SQ201310546039
【公開日】2014年3月19日 申請日期:2013年11月7日 優先權日:2013年11月7日
【發明者】劉偉, 鄒立強, 周磊, 劉成梅, 梁瑞紅, 牛靜, 劉珍, 曹燕林, 彭盛峰 申請人:南昌大學