一種抗菌改性殼聚糖噴霧劑及其製備方法

2023-10-07 09:57:39

一種抗菌改性殼聚糖噴霧劑及其製備方法
【專利摘要】本發明涉及一種抗菌改性殼聚糖噴霧劑及其製備方法。該製備方法包括製備改性殼聚糖、製備梔子油、製備梔子苷、製備螺旋藻多糖與螺旋藻多肽與配製殼聚糖噴霧劑等步驟。本發明的噴霧劑應用於治療男女性外陰瘙癢與真菌感染，病菌感染，毛囊炎，陰道炎，還應用於褥瘡與皮膚長期炎症的治療等，應用十分廣泛，它對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌、白色念珠菌、綠膿桿菌或其它真菌的抗菌能力達到99％以上。
【專利說明】一種抗菌改性殼聚糖噴霧劑及其製備方法 【【技術領域】】
[0001] 本發明屬於醫用藥品【技術領域】。更具體地，本發明涉及一種抗菌改性殼聚糖噴霧 齊?，還涉及所述抗菌改性殼聚糖噴霧劑的製備方法， 【【背景技術】】
[0002] 殼聚糖是一種來源於甲殼類動物（蟹蝦）的外殼及節肢類動物（蟑螂等）骨骼的 天然鹼性高分子多糖，具有良好的生物相容性、生物可降解性以及抗菌、防腐、促進內皮細 胞、毛細血管、心肌細胞及神經軸突的再生，止血和促進傷口癒合等優良性能。研究表明，低 分子量殼聚糖具有人體易吸收，能夠活化淋巴細胞、增強機體免疫力、抗菌抑菌、抑制腫瘤 細胞生長等生理活性，此外，研究發現，殼聚糖脫乙醯度越高，其清除羥自由基、超氧自由基 和有機自由基的效果越好。這些性質使它作為天然的抗菌劑、抗菌材料、防腐劑有著很好的 應用前景。
[0003] 隨著噴霧容器日趨完善，新型拋射劑不斷湧現，為適應現代社會快節奏的生活方 式和臨床應用的需要，各種噴霧劑的製備工藝趨於成熟，在局部、全身治療以及環境消毒等 方面應用更加廣泛，充分顯示其獨特的優勢，近年來發展較快，已成為目前醫療器械領域中 的一個重要分支。
[0004] 噴霧劑在局部治療方面獨顯優勢，因藥液能夠均勻分布於局部病患部位，並能迅 速吸收而發揮作用。目前，在治療燒傷、燙傷效果顯著，治癒率均在90%以上。在小兒溼疹、 花斑癬、閉合性骨傷、腳氣及各種皮炎、婦科疾病、皮膚損傷以及體表潰瘍、關節周圍炎、防 治疤痕增生等方面的臨床需求呈上升趨勢。
[0005]目前，人們利用殼聚糖製備出噴霧劑，例如CN102846655A公開了一種抗菌噴霧劑 及其製備方法，該噴霧劑由水、殼聚糖、甘油、聚六亞甲基胍、維生素Ε製成，其中0. 01 %殼 聚糖難以發揮抗菌效果，抗菌主體聚六亞甲基胍是一種合成的高分子聚合物，主要用於水 產品因細菌引起的各種疾病的預防和治療。CN102860567A公開了一種殼聚糖保鮮噴霧劑， 它由、殼聚糖、食用膠、冰醋酸、檸檬酸與水製成，但它沒有清楚說明殼聚糖的分子量及脫乙 醯度，也沒有評價它的抗菌、防腐保鮮效果。CN102524316B公開了一種殼聚糖基橡膠樹割面 防凍抗菌噴霧劑及其製備方法，該噴霧劑含有殼聚糖、茶樹精油、聚乙烯醇、植物生長調節 劑等，它同樣沒有清楚說明殼聚糖的分子量及脫乙醯度，也沒有評價它的抗菌效果。
[0006] 另外，目前尚未見到有關利用殼聚糖作為主要原料製備泡沫劑的專利。目前應用 的殼聚糖是主要是高分子殼聚糖，也未見到通過對殼聚糖改性，控制其分子量和脫乙醯度 來提高泡沫劑抗菌作用的相關報導。
[0007] 本發明的目的在於克服現有技術中存在的缺點，解決目前缺乏純殼聚糖類環保、 高效抗菌噴霧劑等問題，提出一種抗菌改性殼聚糖噴霧劑的製備方法，獲得的噴霧劑具有 噴霧效果好，藥液能夠均勻分布於病患部位，並能迅速吸收而發揮作用，抗菌廣譜，同時能 夠促進病灶細胞修復與癒合生長，可應用於病患的局部、全身治療。 【
【發明內容】
】
[0008][要解決的技術問題]
[0009] 本發明的目的是提供一種抗菌改性殼聚糖噴霧劑。
[0010] 本發明的另一個目的是提供所述抗菌改性殼聚糖噴霧劑的製備方法。
[0011][技術方案]
[0012] 本發明是通過下述技術方案實現的。
[0013] 本發明涉及一種抗菌改性殼聚糖噴霧劑的製備方法。
[0014] 該抗菌改性殼聚糖噴霧劑製備方法的步驟如下：
[0015]A、製備改性殼聚糖
[0016] 將脫乙醯度80%、分子量20X104?30X104Da的殼聚糖溶解於以重量計1. 0? 3. 0%醋酸水溶液中，再加入為殼聚糖重量1?3倍的二叔戊基過氧化物，得到的溶液在超 聲波清洗機中進行超聲處理，得到低分子量殼聚糖複合物溶液，再經過聚丙烯腈超濾膜分 子截留與分級，得到分子量為500Da以下的殼聚糖；把這種殼聚糖加到以重量計35?45% 氫氧化鉀水溶液中，在溫度105?115°C的條件下處理10?20min，接著用1. 0?3. 0N鹽 酸水溶液進行中和、過濾、蒸餾水洗滌、乾燥，得到脫乙醯度99?100%、分子量為500Da以 下的改性殼聚糖；
[0017]B、製備桅子油
[0018] 往80?120重量份桅子粉中加入700?900重量份石油經，然後在超聲波清洗機 中進行超聲提取，過濾得到濾液與濾渣，所述的濾渣接著用500?700重量份石油醚以同樣 方式重複超聲提取2?3次，濾液合併，採用水浴加熱方式在溫度60?90°C的條件下除去 合併濾液中的石油烴，得到桅子油；
[0019] C、製備桅子苷
[0020] 往80?120重量份桅子粉中加入800?1200重量份以體積計70?80%乙醇水 溶液，然後在超聲波清洗機中進行超聲提取，過濾得到濾液與濾渣，所述的濾渣接著以同樣 方式重複超聲提取2?3次，濾液合併，然後在流速為20?30微升/秒的條件下通過非極 性大孔吸附樹脂柱和在流速為30?37微升/秒的條件下通過聚醯胺柱，接著使用濃度以 體積計15?25%乙醇水溶液洗脫劑從吸附柱洗脫，得到的洗脫液在旋轉蒸發器中在減壓 蒸餾的條件下處理得到桅子苷；
[0021]D、製備螺旋藻多糖與螺旋藻多肽
[0022] 將新鮮螺旋藻在低溫細胞破碎機中在4°C?6°C低溫條件下處理12?18分鐘，得 到的處理液再經過低溫超速離心機在溫度4°C?6°C條件下進行離心處理，接著使用低溫 過濾設備在溫度2°C?5°C的條件下過濾，然後在溫度2°C?8°C的條件下使用截留分子量 為10kD的滲透膜進行膜滲透處理，得到螺旋藻多糖與螺旋藻多肽；
[0023]E、配製殼聚糖噴霧劑
[0024] 將2. 5?3. 2重量份在步驟A得到的改性殼聚糖溶解於6?15重量份濃度以重 量計0. 8?1. 2%醋酸水溶液中，然後往所得到的溶液中加入0. 8?1. 2重量份吐溫60、 0. 8?1. 2重量份月桂醯胺丙基甜菜鹼，混合均勻，再加入0. 3?0. 8重量份在步驟C得到 的桅子苷、〇. 1?〇. 4重量份在步驟B得到的桅子油、0. 1?0. 4重量份在步驟D得到的螺 旋藻多肽、0. 1?0. 4重量份在步驟D得到的螺旋藻多糖，混合均勻，最後加入0. 1?0. 4重 量份烯丙基三丁基溴化膦，用蒸餾水將其總重量達到100重量份，得到所述的抗菌改性殼 聚糖噴霧劑。
[0025] 根據本發明的一種優選實施方式，在步驟A中，脫乙醯度80 %殼聚糖在醋酸水溶 液中在攪拌速度250?350rpm的條件下溶解5?15min。
[0026] 根據本發明的另一種優選實施方式，在步驟A中，得到的溶液在超聲頻率22kHz與 超聲功率為200W的條件下超聲處理35?45min。
[0027] 根據本發明的另一種優選實施方式，在步驟B中，所述的濾渣在第1次超聲提取 時，桅子粉與石油烴的重量比是90?110 :750?850 ;在第2次或第3次超聲提取時，桅子 粉與石油烴的重量比是90?110 :550?650。
[0028] 根據本發明的另一種優選實施方式，在步驟C中，所述的大孔吸附樹脂是由苯乙 烯與二乙烯苯共聚合製備得到的非極性D10ULX-60或LX-20型樹脂；所述的聚醯胺是由己 內醯胺或己二酸與己二胺合成製備得到的高分子聚醯胺。
[0029] 根據本發明的另一種優選實施方式，在步驟C中，所述大孔吸附樹脂柱的洗脫劑 或所述聚醯胺柱的洗脫劑是濃度以體積計18?22%乙醇水溶液。
[0030] 根據本發明的另一種優選實施方式，在步驟D中，所述的滲透膜是由聚醚碸、三醋 酸纖維素或再生纖維素製備的滲透膜。
[0031] 根據本發明的另一種優選實施方式，在步驟D中，所述的低溫超速離心機的轉速 是20000?30000轉/分鐘。
[0032] 根據本發明的另一種優選實施方式，改性殼聚糖、吐溫60、月桂醯胺丙基甜菜鹼、 桅子苷、桅子油、螺旋藻多肽、螺旋藻多糖與烯丙基三丁基溴化膦的重量比是2. 8?3. 0 : 0. 85 ?1. 12 :0. 85 ?1. 12 :0. 45 ?0. 65 :0. 15 ?0. 24 :0. 15 ?0. 26 :0. 15 ?0. 25 :0. 15 ? 0· 24。
[0033] 本發明還涉及採用所述製備方法得到的抗菌改性殼聚糖噴霧劑。所述的抗菌改性 殼聚糖噴霧劑對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌、白色念珠菌、綠膿桿菌或其它真菌的 抗囷能力達到99%以上。
[0034] 下面將更詳細地描述本發明
[0035] 本發明涉及一種抗菌改性殼聚糖噴霧劑的製備方法。
[0036] 本發明以純天然生物質殼聚糖為主要基質，通過調整其分子量，改變其脫乙醯度， 再與其它增效劑配合使用，同時輔以能夠促進組織細胞修復的營養與生長調節輔料等的組 合，製備了新型的殼聚糖抗菌噴霧劑，在治療婦科疾病、皮膚損傷以及體表潰瘍、男女性外 陰騷癢、小兒溼疹、花斑癬、腳氣及各種皮炎等的治療方面獨顯優勢。
[0037] 本發明改性殼聚糖抗菌噴霧劑製備方法的步驟如下：
[0038]A、製備改性殼聚糖
[0039] 將脫乙醯度80%、分子量20X104?30X104Da的殼聚糖溶解於以重量計1. 0? 3. 0%醋酸水溶液中，再加入為殼聚糖重量1?3倍的二叔戊基過氧化物，得到的溶液在超 聲波清洗機中進行超聲處理，得到低分子量殼聚糖複合物溶液，再經過聚丙烯腈超濾膜分 子截留與分級，得到分子量為500Da以下的殼聚糖；把這種殼聚糖加到以重量計35?45% 氫氧化鉀水溶液中，在溫度105?115°C的條件下處理10?20min，接著用1. 0?3. 0N鹽 酸水溶液進行中和、過濾、蒸餾水洗滌、乾燥，得到脫乙醯度99?100%、分子量為500Da以 下的改性殼聚糖。
[0040] 殼聚糖（β-(1 -4)-2-氨基-2-脫氧-D-葡萄糖）的化學結構為帶陽離子的高 分子鹼性多糖聚合物，是自然界唯一帶正電荷、陽離子食用纖維；它具有物理性能穩定、良 好的溶解性、親水吸溼性、生物降解性、生物相容性和成膜性、粘結性、透氣性等理化性能。
[0041] 在步驟A中，脫乙醯度80 %殼聚糖在醋酸水溶液中在攪拌速度250?350rpm的條 件下溶解5?15min。
[0042] 本發明使用的殼聚糖是目前市場上銷售的產品，例如由濟南海得貝海洋生物工程 有限公司以商品名食品醫藥級殼聚糖銷售的產品。
[0043] 在這個步驟加入二叔戊基過氧化物（Di-tert-amylperoxide)的作用是通過過氧 化物的作用使殼聚糖分子鏈產生斷裂，形成低分子殼聚糖，使用有機過氧化物而不是採用 過氧化氫的目的是使斷鏈過程溫和可控，而不會產生無法控制的斷鏈反應。
[0044] 本發明使用的二叔戊基過氧化物是目前市場上銷售的產品，例如由泰州市海翔化 工有限公司以商品名叔戊基過氧化物銷售的產品。
[0045] 在本發明中，超聲波清洗處理的目的在於讓高分子量殼聚糖醋酸水溶液在超聲波 頻率20?25kHz與功率180?220W的條件下進行超聲波處理30?50分鐘，得到低分子 量殼聚糖複合物溶液。優選地，高分子量殼聚糖醋酸水溶液在超聲頻率22kHz與超聲功率 為200W的條件下超聲處理35?45min。
[0046] 本發明使用的超聲波清洗機是目前市場上銷售的產品，例如由.常州市佑達超聲 波設備有限公司以商品名YD1008超聲波清洗機銷售的產品。
[0047] 本發明通過分子超濾技術，將殼聚糖分級，截取分子量小於500Da的具有最佳分 子水平範圍的殼聚糖，然後通過再次脫乙醯化，得到高脫乙醯度、低分子量、分子量分布窄 的改性殼聚糖，大大提高抗菌廣譜性能。
[0048] 聚丙烯腈超濾膜通常是一種具有良好的生物學惰性、化學穩定性、熱穩定性的疏 水性超濾膜。
[0049] 用聚丙烯腈超濾膜進行分級是一種將分子量大於500Da的殼聚糖分子截留，而讓 分子量小於500Da的殼聚糖分子通過的操作。殼聚糖的分子量是採用常規凝膠滲透色譜方 法測定得到的。
[0050] 本發明使用的聚丙烯腈超濾膜的性能如下：厚度50-90μm、單位重量2. 1-3. 4mg/ cm2、孔隙率75-81 %、強度大於15pst。
[0051] 本發明使用的聚丙烯腈超濾膜是目前市場上銷售的產品，例如由招遠金匯膜科技 有限公司以商品名UFbIA250-PAN膜銷售的產品。
[0052] 在分級後，讓收集的分子量為500Da以下的殼聚糖分子部分在熱空氣乾燥設備中 在溫度60°C的條件下乾燥至含水量低於6%。
[0053] 接著，對所得到的分子量為500Da以下的殼聚糖分子用鹼進行改性，即進一步脫 乙醯化處理。
[0054] 在這個改性步驟中，洗滌的目的在於去除中和產生的鹽及其它雜質。乾燥的目的 在於去除水分，這個乾燥步驟所使用的設備與前面描述的相同，乾燥溫度條件也與前面描 述的相同。
[0055] B、製備桅子油
[0056]往80?120重量份桅子粉中加入700?900重量份石油烴，然後在超聲波清洗機 中進行超聲提取，過濾得到濾液與濾渣，所述的濾渣接著用500?700重量份石油醚以同樣 方式重複超聲提取2?3次，濾液合併，採用水浴加熱方式在溫度60?90°C的條件下除去 合併濾液中的石油烴，得到桅子油；
[0057] 桅子粉是目前市場上銷售的產品，例如由廣州南北行中藥飲片有限公司以商品名 桅子銷售的產品。桅子粉的粒度一般是60?100目。
[0058] 石油烴也是目前市場上銷售的產品，例如由廣州化學試劑公司以商品名石油醚銷 售的產品。
[0059] 在這個步驟中，用石油烴從桅子粉中提取油溶性成分桅子油。
[0060] 在這個步驟中，所述的濾渣在第1次超聲提取時，桅子粉與石油烴的重量比是 90?110 :750?850 ;在第2次或第3次超聲提取時，桅子粉與石油烴的重量比是90? 110 :550 ?650。
[0061] 這個步驟使用的超聲波清洗機及其超聲處理條件如前面所述，在此不再贅述。
[0062] C、製備桅子苷
[0063] 往80?120重量份桅子粉中加入800?1200重量份以體積計70?80%乙醇水 溶液，然後在超聲波清洗機中進行超聲提取，過濾得到濾液與濾渣，所述的濾渣接著以同樣 方式重複超聲提取2?3次，濾液合併，然後在流速為20?30微升/秒的條件下通過非極 性大孔吸附樹脂柱和在流速為30?37微升/秒的條件下通過聚醯胺柱，接著使用濃度以 體積計15?25%乙醇水溶液洗脫劑從吸附柱洗脫，得到的洗脫液在旋轉蒸發器中在減壓 蒸餾的條件下處理得到桅子苷；
[0064] 這個步驟使用的桅子粉的粒度一般是60?100目。
[0065] 在這個步驟中，用乙醇水溶液從桅子粉中提取醇溶性成分桅子苷。
[0066] 在這個步驟中，使用的超聲波清洗機及其超聲處理條件如前面所述，在此不再贅 述。
[0067] 在這個步驟中，所得到的濾液用非極性大孔吸附樹脂處理的目的在於分離桅子苷 與桅子黃色素及其它雜質。本發明使用的大孔吸附樹脂是由苯乙烯與二乙烯苯共聚合製備 得到的非極性D101、LX-60或LX-20型樹脂，例如由西安藍曉科技新材料股份有限公司以商 品名大孔樹脂銷售的D101、LX-60、LX-20大孔吸附樹脂。
[0068] 在本發明中，所述濾液通過所述樹脂床的流速小於20微升/秒，則會影響流出時 間；如果所述的流速大於30微升/秒，則會使吸附與分離不完全。因此，所述的流速為20? 30微升/秒是恰當的，優選地是22?28微升/秒，更優選地是24?26微升/秒。
[0069] 所述樹脂床的流出液接著通過聚醯胺柱，其目的在於進一步分離色素及雜質成 分，純化樣品。
[0070] 所述的聚醯胺是由己內醯胺或己二酸與己二胺合成製備得到的高分子聚醯胺。本 發明使用的高分子聚醯胺是由浙江台州市路橋四甲生化塑料廠以商品名聚醯胺樹脂銷售 的聚醯胺。
[0071] 在本發明中，所述樹脂床流出液通過所述聚醯胺柱的流速小於30微升/秒，則會 影響流出時間；如果所述的流速大於37微升/秒，則會影響分離效果。因此，所述的流速為 30?37微升/秒是恰當的，優選地是32?36微升/秒，更優選地是34?36微升/秒。
[0072] 優選地，所述大孔吸附樹脂柱的洗脫劑或所述聚醯胺柱的洗脫劑是濃度以體積計 18?22%乙醇水溶液。
[0073] 得到的洗脫液在廣州星爍儀器有限公司以商品名RE-301型旋轉蒸發器銷售的旋 轉蒸發器中在壓力〇. 002-0. 098MPa的條件下進行減壓蒸餾。
[0074] D、製備螺旋藻多糖與螺旋藻多肽
[0075] 將新鮮螺旋藻在低溫細胞破碎機中在4°C?6°C低溫條件下處理12?18分鐘，得 到的處理液再經過低溫超速離心機在溫度4°C?6°C條件下進行離心處理，接著使用低溫 過濾設備在溫度2°C?5°C的條件下過濾，然後在溫度2°C?8°C的條件下使用截留分子量 為10kD的滲透膜進行膜滲透處理，得到螺旋藻多糖與螺旋藻多肽；
[0076] 螺旋藻（SpirulinaplatensisGeitl.)是一類低等生物，原核生物，由單細胞或多 細胞組成的絲狀體，體長200-500μm，寬5-10μm，圓柱形，呈疏鬆或緊密的有規則的螺旋 旋形彎曲。它具有減輕癌症放療、化療的毒副反應，提高免疫功能，降低血脂等功效。
[0077] 本發明使用的低溫細胞破碎機是目前市場上銷售的產品，例如由廣州聚能生物科 技有限公司公司以商品名JN-02C低溫連續流細胞破碎機銷售的產品。
[0078] 在這個步驟中，所述的低溫超速離心機的轉速是20000?30000轉/分鐘。本發 明使用的低溫超速離心機是目前市場上銷售的產品，例如由美國貝克曼庫爾特有限公司公 司以商品名XPN-80超速離心機銷售的產品。
[0079] 所述的低溫過濾設備是目前市場上銷售的產品，例如由東莞龍田過濾設備有限公 司以商品名LT600保溫夾套過濾器銷售的產品。
[0080] 本發明使用的滲透膜是目前市場上銷售的產品，例如由美國海德能公司以商品名 QUALSEPDairyRO系列濃縮分離膜銷售的產品。
[0081] 在這個步驟中，膜滲透處理是在2°C?8°C低溫條件下進行。
[0082] 膜滲透處理所得到的產物採用常規的紅外光譜、質譜分析方法分析確定其螺旋藻 多糖和螺旋藻多肽。
[0083]E、配製殼聚糖噴霧劑
[0084] 將2. 5?3. 2重量份在步驟A得到的改性殼聚糖溶解於6?15重量份濃度以重 量計0. 8?1. 2%醋酸水溶液中，然後往所得到的溶液中加入0. 8?1. 2重量份吐溫60、 0. 8?1. 2重量份月桂醯胺丙基甜菜鹼，混合均勻，再加入0. 3?0. 8重量份在步驟C得到 的桅子苷、〇. 1?〇. 4重量份在步驟B得到的桅子油、0. 1?0. 4重量份在步驟D得到的螺 旋藻多肽、0. 1?0. 4重量份在步驟D得到的螺旋藻多糖，混合均勻，最後加入0. 1?0. 4重 量份烯丙基三丁基溴化膦，用蒸餾水將其總重量達到100重量份。
[0085] 優選地，改性殼聚糖、吐溫60、月桂醯胺丙基甜菜鹼、桅子苷、桅子油、螺旋藻多肽、 螺旋藻多糖與烯丙基三丁基溴化膦的重量比是2. 8?3. 0 :0· 85?1. 12 :0· 85?1. 12 : 0. 45 ?0. 65 :0. 15 ?0. 24 :0. 15 ?0. 26 :0. 15 ?0. 25 :0. 15 ?0. 24。
[0086] 本發明使用的吐溫60的作用在於能夠穩定桅子油及桅子苷，使其不會在噴霧劑 中出現分層、分離現象；它是目前市場上銷售的產品，例如由江蘇省海安石油化工廠以商品 名T-60銷售的吐溫60。
[0087] 本發明使用的月桂醯胺丙基甜菜鹼的作用在於能夠均勻分散螺旋藻多肽和螺旋 藻多糖，使其不會出現沉澱，同時，月桂醯胺丙基甜菜鹼也能夠起到進一步提升殼聚糖抗 菌效能的作用；它是目前市場上銷售的產品，例如由上海中翔精細化工有限公司以商品名CAB35銷售的產品。
[0088] 本發明還涉及採用所述製備方法得到的抗菌改性殼聚糖噴霧劑。本發明的抗菌改 性殼聚糖泡沫劑經過國家標準抑菌檢測法（GB/T16886)檢測分析，對金黃色葡萄球菌、大 腸桿菌、鏈球菌、白色念珠菌、綠膿桿菌或其它真菌的抗菌能力達到99%以上。
[0089] 本發明的抗菌改性殼聚糖噴霧劑主體採用殼聚糖、桅子苷、桅子油、螺旋藻多肽、 螺旋藻多糖等天然產物，提高了噴霧劑的生物安全性與生產過程的環保。
[0090] 本發明的噴霧劑通過高脫乙醯度的小分子殼聚糖與桅子提取物、螺旋藻多糖提取 物的協同影響，充分發揮了殼聚糖多糖的抗菌作用，極大提高了噴霧劑整體抗有害微生物 作用，對細菌、病毒、真菌均具有明顯殺滅效果。同時，桅子與螺旋藻的提取物具有生物活 性，能夠達到促進受損皮膚、組織的癒合與生長，促進細胞代謝，增強肌膚的抗病能力。
[0091] 本發明通過加入少量桅子油，吐溫60與月桂醯胺丙基甜菜鹼兩種非離子表面活 性劑，提高了產品的滲透擴散性能，使噴霧劑中的有效成分更容易與表皮產生作用，均勻擴 散，發揮治療效果。
[0092] 本發明的噴霧劑應用於治療男女性外陰瘙癢與真菌感染，病菌感染，毛囊炎，陰道 炎，還應用於褥瘡與皮膚長期炎症的治療等，應用十分廣泛。
[0093][有益效果]
[0094] 本發明的有益效果是：
[0095] 本發明採用二叔戊基過氧化物與超聲技術相結合的方式以降解殼聚糖，本發明 方法採用有機過氧化物，作用溫和，減少殼聚糖氧化變色，再通過分子超濾技術，將殼聚糖 分級，截取分子量低於500Da的小分子殼聚糖，然後通過脫乙醯化，獲得低分子量高脫乙醯 度、分子量分布窄的改性殼聚糖，其抗自由基與清除自由基能力大大提高，對提高了消炎能 力，病原微生物的作用能力也大大提高。
[0096] 本發明的抗菌改性殼聚糖噴霧劑主體採用殼聚糖、桅子苷、桅子油、螺旋藻多肽、 螺旋藻多糖等天然產物，提高了噴霧劑的生物安全性與生產過程的環保。
[0097] 本發明的噴霧劑通過高脫乙醯度的小分子殼聚糖與桅子提取物、螺旋藻多糖提取 物的協同影響，充分發揮了殼聚糖多糖的抗菌作用，極大提高了噴霧劑整體抗有害微生物 作用，對細菌、病毒、真菌均具有明顯殺滅效果。同時，桅子與螺旋藻的提取物具有生物活 性，能夠達到促進受損皮膚、組織的癒合與生長，促進細胞代謝，增強肌膚的抗病能力。
[0098] 本發明通過加入少量桅子油，吐溫60與月桂醯胺丙基甜菜鹼兩種非離子表面活 性劑，提高了產品的滲透擴散性能，使噴霧劑中的有效成分更容易與表皮產生作用，均勻擴 散，發揮治療效果。
[0099] 本發明的噴霧劑應用於治療男女性外陰瘙癢與真菌感染，病菌感染，毛囊炎，陰道 炎，還應用於褥瘡與皮膚長期炎症的治療等，應用十分廣泛。
[0100] 本發明的噴霧劑對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌、白色念珠菌、綠膿桿菌或 其它真菌的抗菌能力達到99%以上。 【【具體實施方式】】
[0101] 通過下述實施例將能夠更好地理解本發明。
[0102] 實施例1 :製備抗菌改性殼聚糖噴霧劑
[0103] 該實施例的實施步驟如下：
[0104] A、製備改性殼聚糖
[0105] 由濟南海得貝海洋生物工程有限公司以商品名食品醫藥級殼聚糖銷售的、脫乙醯 度80 %、分子量20X104Da的殼聚糖，在以重量計1. 6 %醋酸水溶液中在攪拌速度250rpm的 條件下溶解5min，再加入為殼聚糖重量1. 0倍的二叔戊基過氧化物，得到的溶液在由常州 市佑達超聲波設備有限公司以商品名YD1008超聲波清洗機銷售的超聲波清洗機中，在超 聲頻率22kHz與超聲功率為200W的條件下超聲處理35min，得到低分子量殼聚糖複合物溶 液，再經過由招遠金匯膜科技有限公司以商品名UFbIA250-PAN膜銷售的聚丙烯腈超濾膜 分子截留與分級，得到分子量為500Da以下的殼聚糖；把這種殼聚糖加到以重量計35%氫 氧化鉀水溶液中，在溫度105°C的條件下處理lOmin，接著用1.6N鹽酸水溶液進行中和、過 濾、蒸餾水洗滌、在溫度60°C的條件下乾燥，得到脫乙醯度99%、分子量為500Da以下的改 性殼聚糖；
[0106] B、製備桅子油
[0107] 往80重量份桅子粉中加入700重量份石油烴，然後在由常州市佑達超聲波設備有 限公司以商品名YD1008超聲波清洗機銷售的超聲波清洗機中在超聲頻率22kHz與超聲功 率為200W的條件下超聲處理35min，過濾得到濾液與濾渣，所述的濾渣接著用500重量份石 油醚以同樣方式重複超聲提取2次，濾液合併，採用水浴加熱方式在溫度60°C的條件下除 去合併濾液中的石油烴，得到桅子油；
[0108] C、製備桅子苷
[0109] 往80重量份桅子粉中加入800重量份以體積計70%乙醇水溶液，然後在由常州市 佑達超聲波設備有限公司以商品名YD1008超聲波清洗機銷售的超聲波清洗機中，在超聲 頻率22kHz與超聲功率為200W的條件下超聲處理35min，過濾得到濾液與濾渣，所述的濾渣 接著以同樣方式重複超聲提取3次，濾液合併，然後在流速為26微升/秒的條件下通過由 西安藍曉科技新材料股份有限公司以商品名大孔樹脂銷售的D101型大孔吸附樹脂柱，接 著在流速30微升/秒的條件下通過由浙江台州市路橋四甲生化塑料廠以商品名聚醯胺樹 脂銷售的聚醯胺柱，然後使用濃度以體積計15%乙醇水溶液洗脫劑從吸附柱洗脫，得到的 洗脫液在廣州星爍儀器有限公司以商品名RE-301型旋轉蒸發器銷售的旋轉蒸發器中在壓 力0. 002-0. 098MPa的條件下進行減壓蒸餾得到桅子苷；
[0110] D、製備螺旋藻多糖與螺旋藻多肽
[0111] 將新鮮螺旋藻在由廣州聚能生物科技有限公司公司以商品名JN-02C低溫連續流 細胞破碎機銷售的低溫細胞破碎機中在溫度4°C低溫條件下處理12分鐘，得到的處理液 再經過由美國貝克曼庫爾特有限公司公司以商品名XPN-80超速離心機銷售的低溫超速 離心機在溫度4°C條件下進行離心處理，接著使用由東莞龍田過濾設備有限公司以商品名 LT600保溫夾套過濾器銷售的低溫過濾設備在溫度2°C的條件下過濾，然後在溫度2°C的條 件下使用由美國海德能公司以商品名QUALSEPDairyRO系列濃縮分離膜銷售的截留分子量 為10kD的滲透膜進行膜滲透處理，得到螺旋藻多糖與螺旋藻多肽；
[0112] E、配製殼聚糖噴霧劑
[0113] 將2. 5重量份在步驟A得到的改性殼聚糖溶解於6重量份濃度以重量計0. 8% 醋酸水溶液中，然後往所得到的溶液中加入0. 8重量份由江蘇省海安石油化工廠以商品名T-60銷售的吐溫60、0. 8重量份由上海中翔精細化工有限公司以商品名CAB35銷售的月桂 醯胺丙基甜菜鹼，混合均勻，再加入〇. 3重量份在步驟C得到的桅子苷、0. 1重量份在步驟B 得到的桅子油、〇. 4重量份在步驟D得到的螺旋藻多肽、0. 2重量份在步驟D得到的螺旋藻 多糖，混合均勻，最後加入〇. 1重量份烯丙基三丁基溴化膦，用蒸餾水將其總重量達到100 重量份。
[0114] 根據本說明書描述的國家標準抑菌檢測法檢測分析確定，本實施例製備的抗菌 改性殼聚糖泡沫劑對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌、綠膿桿菌的抗菌能力均達到 99. 0%。
[0115] 實施例2 :製備抗菌改性殼聚糖噴霧劑
[0116] 該實施例的實施步驟如下：
[0117]A、製備改性殼聚糖
[0118] 由濟南海得貝海洋生物工程有限公司以商品名食品醫藥級殼聚糖銷售的、脫乙醯 度80 %、分子量24X104Da的殼聚糖，在以重量計3. 0 %醋酸水溶液中在攪拌速度320rpm的 條件下溶解5min，再加入為殼聚糖重量1. 6倍的二叔戊基過氧化物，得到的溶液在由常州 市佑達超聲波設備有限公司以商品名YD1008超聲波清洗機銷售的超聲波清洗機中，在超 聲頻率22kHz與超聲功率為200W的條件下超聲處理38min，得到低分子量殼聚糖複合物溶 液，再經過由招遠金匯膜科技有限公司以商品名UFbIA250-PAN膜銷售的聚丙烯腈超濾膜 分子截留與分級，得到分子量為500Da以下的殼聚糖；把這種殼聚糖加到以重量計40%氫 氧化鉀水溶液中，在溫度105°C的條件下處理12min，接著用3. 0N鹽酸水溶液進行中和、過 濾、蒸餾水洗滌、在溫度60°C的條件下乾燥，得到脫乙醯度100%、分子量為500Da以下的改 性殼聚糖；
[0119] B、製備桅子油
[0120] 往110重量份桅子粉中加入800重量份石油烴，然後在由常州市佑達超聲波設備 有限公司以商品名YD1008超聲波清洗機銷售的超聲波清洗機中在超聲頻率22kHz與超聲 功率為200W的條件下超聲處理45min，過濾得到濾液與濾渣，所述的濾渣接著用500重量份 石油醚以同樣方式重複超聲提取3次，濾液合併，採用水浴加熱方式在溫度70°C的條件下 除去合併濾液中的石油烴，得到桅子油；
[0121] C、製備桅子苷
[0122] 往100重量份桅子粉中加入1060重量份以體積計75%乙醇水溶液，然後在由常州 市佑達超聲波設備有限公司以商品名YD1008超聲波清洗機銷售的超聲波清洗機中，在超 聲頻率22kHz與超聲功率為200W的條件下超聲處理45min，過濾得到濾液與濾渣，所述的濾 渣接著以同樣方式重複超聲提取2次，濾液合併，然後在流速為20微升/秒的條件下通過 由西安藍曉科技新材料股份有限公司以商品名大孔樹脂銷售的LX-60型樹脂大孔吸附樹 脂柱，接著在流速32微升/秒的條件下通過由浙江台州市路橋四甲生化塑料廠以商品名聚 醯胺樹脂銷售的聚醯胺柱，然後使用濃度以體積計22%乙醇水溶液洗脫劑從吸附柱洗脫， 得到的洗脫液在廣州星爍儀器有限公司以商品名RE-301型旋轉蒸發器銷售的旋轉蒸發器 中在壓力0. 002-0. 098MPa的條件下進行減壓蒸餾得到桅子苷；
[0123] D、製備螺旋藻多糖與螺旋藻多肽
[0124] 將新鮮螺旋藻在由廣州聚能生物科技有限公司公司以商品名JN-02C低溫連續流 細胞破碎機銷售的低溫細胞破碎機中在5°C低溫條件下處理15分鐘，得到的處理液再經過 由美國貝克曼庫爾特有限公司公司以商品名XPN-80超速離心機銷售的低溫超速離心機在 溫度4°C條件下進行離心處理，接著使用由東莞龍田過濾設備有限公司以商品名LT600保 溫夾套過濾器銷售的低溫過濾設備在溫度3°C的條件下過濾，然後在溫度5°C的條件下使 用由美國海德能公司以商品名QUALSEP DairyRO系列濃縮分離膜銷售的截留分子量為10kD 的滲透膜進行膜滲透處理，得到螺旋藻多糖與螺旋藻多肽；
[0125] E、配製殼聚糖噴霧劑
[0126] 將3. 2重量份在步驟A得到的改性殼聚糖溶解於14重量份濃度以重量計1. 0% 醋酸水溶液中，然後往所得到的溶液中加入〇. 9重量份由江蘇省海安石油化工廠以商品名 T-60銷售的吐溫60、0. 9重量份由上海中翔精細化工有限公司以商品名CAB35銷售的月桂 醯胺丙基甜菜鹼，混合均勻，再加入〇. 5重量份在步驟C得到的桅子苷、0. 3重量份在步驟B 得到的桅子油、〇. 2重量份在步驟D得到的螺旋藻多肽、0. 4重量份在步驟D得到的螺旋藻 多糖，混合均勻，最後加入〇. 1重量份烯丙基三丁基溴化膦，用蒸餾水將其總重量達到100 重量份。
[0127] 根據本說明書描述的國家標準抑菌檢測法檢測分析確定，本實施例製備的抗菌 改性殼聚糖泡沫劑對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌、綠膿桿菌的抗菌能力均達到 99. 6%。
[0128] 實施例3:製備抗菌改性殼聚糖噴霧劑
[0129] 該實施例的實施步驟如下：
[0130] A、製備改性殼聚糖
[0131] 由濟南海得貝海洋生物工程有限公司以商品名食品醫藥級殼聚糖銷售的、脫乙醯 度80 %、分子量24X104Da的殼聚糖，在以重量計3. 0 %醋酸水溶液中在攪拌速度350rpm的 條件下溶解l〇min，再加入為殼聚糖重量2. 0倍的二叔戊基過氧化物，得到的溶液在由常州 市佑達超聲波設備有限公司以商品名YD1008超聲波清洗機銷售的超聲波清洗機中，在超 聲頻率22kHz與超聲功率為200W的條件下超聲處理40min，得到低分子量殼聚糖複合物溶 液，再經過由招遠金匯膜科技有限公司以商品名UFbIA250-PAN膜銷售的聚丙烯腈超濾膜 分子截留與分級，得到分子量為500Da以下的殼聚糖；把這種殼聚糖加到以重量計38%氫 氧化鉀水溶液中，在溫度ll〇°C的條件下處理18min，接著用1. 0N鹽酸水溶液進行中和、過 濾、蒸餾水洗滌、在溫度60°C的條件下乾燥，得到脫乙醯度99%、分子量為500Da以下的改 性殼聚糖；
[0132] B、製備桅子油
[0133] 往100重量份桅子粉中加入840重量份石油烴，然後在由常州市佑達超聲波設備 有限公司以商品名YD1008超聲波清洗機銷售的超聲波清洗機中在超聲頻率22kHz與超聲 功率為200W的條件下超聲處理42min，過濾得到濾液與濾渣，所述的濾渣接著用700重量份 石油醚以同樣方式重複超聲提取3次，濾液合併，採用水浴加熱方式在溫度60°C的條件下 除去合併濾液中的石油烴，得到桅子油；
[0134] C、製備桅子苷
[0135] 往95重量份桅子粉中加入880重量份以體積計75 %乙醇水溶液，然後在由常州市 佑達超聲波設備有限公司以商品名YD1008超聲波清洗機銷售的超聲波清洗機中，在超聲 頻率22kHz與超聲功率為200W的條件下超聲處理45min，過濾得到濾液與濾渣，所述的濾渣 接著以同樣方式重複超聲提取2次，濾液合併，然後在流速為24微升/秒的條件下通過由 西安藍曉科技新材料股份有限公司以商品名大孔樹脂銷售的LX-20型樹脂大孔吸附樹脂 柱，接著在流速34微升/秒的條件下通過由浙江台州市路橋四甲生化塑料廠以商品名聚醯 胺樹脂銷售的聚醯胺柱，然後使用濃度以體積計18%乙醇水溶液洗脫劑從吸附柱洗脫，得 到的洗脫液在廣州星爍儀器有限公司以商品名RE-301型旋轉蒸發器銷售的旋轉蒸發器中 在壓力0. 002-0. 098MPa的條件下進行減壓蒸餾得到桅子苷；
[0136] D、製備螺旋藻多糖與螺旋藻多肽
[0137] 將新鮮螺旋藻在由廣州聚能生物科技有限公司公司以商品名JN-02C低溫連續流 細胞破碎機銷售的低溫細胞破碎機中在4°C低溫條件下處理18分鐘，得到的處理液再經過 由美國貝克曼庫爾特有限公司公司以商品名XPN-80超速離心機銷售的低溫超速離心機在 溫度6°C條件下進行離心處理，接著使用由東莞龍田過濾設備有限公司以商品名LT600保 溫夾套過濾器銷售的低溫過濾設備在溫度2°C的條件下過濾，然後在溫度3°C的條件下使 用由美國海德能公司以商品名QUALSEP DairyRO系列濃縮分離膜銷售的截留分子量為10kD 的滲透膜進行膜滲透處理，得到螺旋藻多糖與螺旋藻多肽；
[0138] E、配製殼聚糖噴霧劑
[0139] 將3. 2重量份在步驟A得到的改性殼聚糖溶解於14重量份濃度以重量計1. 0% 醋酸水溶液中，然後往所得到的溶液中加入〇. 8重量份由江蘇省海安石油化工廠以商品名 T-60銷售的吐溫60、0. 9重量份由上海中翔精細化工有限公司以商品名CAB35銷售的月桂 醯胺丙基甜菜鹼，混合均勻，再加入〇. 5重量份在步驟C得到的桅子苷、0. 2重量份在步驟B 得到的桅子油、〇. 4重量份在步驟D得到的螺旋藻多肽、0. 1重量份在步驟D得到的螺旋藻 多糖，混合均勻，最後加入〇. 4重量份烯丙基三丁基溴化膦，用蒸餾水將其總重量達到100 重量份。
[0140] 根據本說明書描述的國家標準抑菌檢測法檢測分析確定，本實施例製備的抗菌 改性殼聚糖泡沫劑對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌、綠膿桿菌的抗菌能力均達到 99. 8%。
[0141] 實施例4:製備抗菌改性殼聚糖噴霧劑
[0142] 該實施例的實施步驟如下：
[0143] A、製備改性殼聚糖
[0144] 由濟南海得貝海洋生物工程有限公司以商品名食品醫藥級殼聚糖銷售的、脫乙醯 度80 %、分子量26X104Da的殼聚糖，在以重量計2. 5 %醋酸水溶液中在攪拌速度250rpm的 條件下溶解8min，再加入為殼聚糖重量2. 0倍的二叔戊基過氧化物，得到的溶液在由常州 市佑達超聲波設備有限公司以商品名YD1008超聲波清洗機銷售的超聲波清洗機中，在超 聲頻率22kHz與超聲功率為200W的條件下超聲處理40min，得到低分子量殼聚糖複合物溶 液，再經過由招遠金匯膜科技有限公司以商品名UFbIA250-PAN膜銷售的聚丙烯腈超濾膜 分子截留與分級，得到分子量為500Da以下的殼聚糖；把這種殼聚糖加到以重量計42%氫 氧化鉀水溶液中，在溫度115°C的條件下處理lOmin，接著用1. 0N鹽酸水溶液進行中和、過 濾、蒸餾水洗滌、在溫度60°C的條件下乾燥，得到脫乙醯度99%、分子量為500Da以下的改 性殼聚糖；
[0145] B、製備桅子油
[0146] 往120重量份桅子粉中加入860重量份石油經，然後在由常州市佑達超聲波設備 有限公司以商品名YD1008超聲波清洗機銷售的超聲波清洗機中在超聲頻率22kHz與超聲 功率為200W的條件下超聲處理42min，過濾得到濾液與濾渣，所述的濾渣接著用700重量份 石油醚以同樣方式重複超聲提取3次，濾液合併，採用水浴加熱方式在溫度60°C的條件下 除去合併濾液中的石油烴，得到桅子油；
[0147] C、製備桅子苷
[0148] 往90重量份桅子粉中加入920重量份以體積計80%乙醇水溶液，然後在由常州市 佑達超聲波設備有限公司以商品名YD1008超聲波清洗機銷售的超聲波清洗機中，在超聲 頻率22kHz與超聲功率為200W的條件下超聲處理42min，過濾得到濾液與濾渣，所述的濾 渣接著以同樣方式重複超聲提取3次，濾液合併，然後在流速為30微升/秒的條件下通過 由西安藍曉科技新材料股份有限公司以商品名大孔樹脂銷售的D101型樹脂大孔吸附樹脂 柱，接著在流速36微升/秒的條件下通過由浙江台州市路橋四甲生化塑料廠以商品名聚醯 胺樹脂銷售的聚醯胺柱，然後使用濃度以體積計18%乙醇水溶液洗脫劑從吸附柱洗脫，得 到的洗脫液在廣州星爍儀器有限公司以商品名RE-301型旋轉蒸發器銷售的旋轉蒸發器中 在壓力0. 002-0. 098MPa的條件下進行減壓蒸餾得到桅子苷；
[0149] D、製備螺旋藻多糖與螺旋藻多肽
[0150] 將新鮮螺旋藻在由廣州聚能生物科技有限公司公司以商品名JN-02C低溫連續流 細胞破碎機銷售的低溫細胞破碎機中在6°C低溫條件下處理18分鐘，得到的處理液再經過 由美國貝克曼庫爾特有限公司公司以商品名XPN-80超速離心機銷售的低溫超速離心機在 溫度5°C條件下進行離心處理，接著使用由東莞龍田過濾設備有限公司以商品名LT600保 溫夾套過濾器銷售的低溫過濾設備在溫度3°C的條件下過濾，然後在溫度2°C的條件下使 用由美國海德能公司以商品名QUALSEPDairyRO系列濃縮分離膜銷售的截留分子量為10kD 的滲透膜進行膜滲透處理，得到螺旋藻多糖與螺旋藻多肽；
[0151]E、配製殼聚糖噴霧劑
[0152] 將2. 8重量份在步驟A得到的改性殼聚糖溶解於10重量份濃度以重量計1. 1% 醋酸水溶液中，然後往所得到的溶液中加入1. 2重量份由江蘇省海安石油化工廠以商品名 T-60銷售的吐溫60、1. 0重量份由上海中翔精細化工有限公司以商品名CAB35銷售的月桂 醯胺丙基甜菜鹼，混合均勻，再加入〇. 8重量份在步驟C得到的桅子苷、0. 4重量份在步驟B 得到的桅子油、〇. 2重量份在步驟D得到的螺旋藻多肽、0. 3重量份在步驟D得到的螺旋藻 多糖，混合均勻，最後加入〇. 2重量份烯丙基三丁基溴化膦，用蒸餾水將其總重量達到100 重量份。
[0153] 根據本說明書描述的國家標準抑菌檢測法檢測分析確定，本實施例製備的抗菌 改性殼聚糖泡沫劑對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌、綠膿桿菌的抗菌能力均達到 99. 1%。
[0154] 實施例5 :製備抗菌改性殼聚糖噴霧劑
[0155] 該實施例的實施步驟如下：
[0156] A、製備改性殼聚糖
[0157] 由濟南海得貝海洋生物工程有限公司以商品名食品醫藥級殼聚糖銷售的、脫乙醯 度80 %、分子量24X104Da的殼聚糖，在以重量計1. 6 %醋酸水溶液中在攪拌速度270rpm的 條件下溶解l〇min，再加入為殼聚糖重量2. 5倍的二叔戊基過氧化物，得到的溶液在由常州 市佑達超聲波設備有限公司以商品名YD1008超聲波清洗機銷售的超聲波清洗機中，在超 聲頻率22kHz與超聲功率為200W的條件下超聲處理42min，得到低分子量殼聚糖複合物溶 液，再經過由招遠金匯膜科技有限公司以商品名UFbIA250-PAN膜銷售的聚丙烯腈超濾膜 分子截留與分級，得到分子量為500Da以下的殼聚糖；把這種殼聚糖加到以重量計45%氫 氧化鉀水溶液中，在溫度105°C的條件下處理12min，接著用3.ON鹽酸水溶液進行中和、過 濾、蒸餾水洗滌、在溫度60°C的條件下乾燥，得到脫乙醯度100%、分子量為500Da以下的改 性殼聚糖；
[0158] B、製備桅子油
[0159] 往105重量份桅子粉中加入820重量份石油烴，然後在由常州市佑達超聲波設備 有限公司以商品名YD1008超聲波清洗機銷售的超聲波清洗機中在超聲頻率22kHz與超聲 功率為200W的條件下超聲處理45min，過濾得到濾液與濾渣，所述的濾渣接著用500重量份 石油醚以同樣方式重複超聲提取2次，濾液合併，採用水浴加熱方式在溫度70°C的條件下 除去合併濾液中的石油烴，得到桅子油；
[0160] C、製備桅子苷
[0161] 往100重量份桅子粉中加入1000重量份以體積計75%乙醇水溶液，然後在由常州 市佑達超聲波設備有限公司以商品名YD1008超聲波清洗機銷售的超聲波清洗機中，在超 聲頻率22kHz與超聲功率為200W的條件下超聲處理45min，過濾得到濾液與濾渣，所述的濾 渣接著以同樣方式重複超聲提取3次，濾液合併，然後在流速為25微升/秒的條件下通過 由西安藍曉科技新材料股份有限公司以商品名大孔樹脂銷售的LX-60型樹脂大孔吸附樹 脂柱，接著在流速37微升/秒的條件下通過由浙江台州市路橋四甲生化塑料廠以商品名聚 醯胺樹脂銷售的聚醯胺柱，然後使用濃度以體積計20%乙醇水溶液洗脫劑從吸附柱洗脫， 得到的洗脫液在廣州星爍儀器有限公司以商品名RE-301型旋轉蒸發器銷售的旋轉蒸發器 中在壓力0. 002-0. 098MPa的條件下進行減壓蒸餾得到桅子苷；
[0162] D、製備螺旋藻多糖與螺旋藻多肽
[0163] 將新鮮螺旋藻在由廣州聚能生物科技有限公司公司以商品名JN-02C低溫連續流 細胞破碎機銷售的低溫細胞破碎機中在6°C低溫條件下處理18分鐘，得到的處理液再經過 由美國貝克曼庫爾特有限公司公司以商品名XPN-80超速離心機銷售的低溫超速離心機在 溫度5°C條件下進行離心處理，接著使用由東莞龍田過濾設備有限公司以商品名LT600保 溫夾套過濾器銷售的低溫過濾設備在溫度3°C的條件下過濾，然後在溫度2°C的條件下使 用由美國海德能公司以商品名QUALSEP DairyRO系列濃縮分離膜銷售的截留分子量為10kD 的滲透膜進行膜滲透處理，得到螺旋藻多糖與螺旋藻多肽；
[0164] E、配製殼聚糖噴霧劑
[0165] 將2. 6重量份在步驟A得到的改性殼聚糖溶解於10重量份濃度以重量計1. 1% 醋酸水溶液中，然後往所得到的溶液中加入1. 〇重量份由江蘇省海安石油化工廠以商品名 T-60銷售的吐溫60、1. 0重量份由上海中翔精細化工有限公司以商品名CAB35銷售的月桂 醯胺丙基甜菜鹼，混合均勻，再加入〇. 3重量份在步驟C得到的桅子苷、0. 4重量份在步驟B 得到的桅子油、0. 1重量份在步驟D得到的螺旋藻多肽、0. 2重量份在步驟D得到的螺旋藻 多糖，混合均勻，最後加入〇. 3重量份烯丙基三丁基溴化膦，用蒸餾水將其總重量達到100 重量份。
[0166] 根據本說明書描述的國家標準抑菌檢測法檢測分析確定，本實施例製備的抗菌 改性殼聚糖泡沫劑對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌、綠膿桿菌的抗菌能力均達到 99. 4%。
[0167] 實施例6 :製備抗菌改性殼聚糖噴霧劑
[0168] 該實施例的實施步驟如下：
[0169]A、製備改性殼聚糖
[0170] 由濟南海得貝海洋生物工程有限公司以商品名食品醫藥級殼聚糖銷售的、脫乙醯 度80 %、分子量24X104Da的殼聚糖，在以重量計1. 6 %醋酸水溶液中在攪拌速度270rpm的 條件下溶解l〇min，再加入為殼聚糖重量2. 5倍的二叔戊基過氧化物，得到的溶液在由常州 市佑達超聲波設備有限公司以商品名YD1008超聲波清洗機銷售的超聲波清洗機中，在超 聲頻率22kHz與超聲功率為200W的條件下超聲處理42min，得到低分子量殼聚糖複合物溶 液，再經過由招遠金匯膜科技有限公司以商品名UFbIA250-PAN膜銷售的聚丙烯腈超濾膜 分子截留與分級，得到分子量為500Da以下的殼聚糖；把這種殼聚糖加到以重量計35%氫 氧化鉀水溶液中，在溫度105°C的條件下處理12min，接著用3.ON鹽酸水溶液進行中和、過 濾、蒸餾水洗滌、在溫度60°C的條件下乾燥，得到脫乙醯度99%、分子量為500Da以下的改 性殼聚糖；
[0171] B、製備桅子油
[0172] 往90重量份桅子粉中加入900重量份石油烴，然後在由常州市佑達超聲波設備有 限公司以商品名YD1008超聲波清洗機銷售的超聲波清洗機中在超聲頻率22kHz與超聲功 率為200W的條件下超聲處理35min，過濾得到濾液與濾渣，所述的濾渣接著用500重量份石 油醚以同樣方式重複超聲提取2次，濾液合併，採用水浴加熱方式在溫度90°C的條件下除 去合併濾液中的石油烴，得到桅子油；
[0173] C、製備桅子苷
[0174] 往120重量份桅子粉中加入1200重量份以體積計74%乙醇水溶液，然後在由常州 市佑達超聲波設備有限公司以商品名YD1008超聲波清洗機銷售的超聲波清洗機中，在超 聲頻率22kHz與超聲功率為200W的條件下超聲處理38min，過濾得到濾液與濾渣，所述的濾 渣接著以同樣方式重複超聲提取2次，濾液合併，然後在流速為23微升/秒的條件下通過 由西安藍曉科技新材料股份有限公司以商品名大孔樹脂銷售的LX-20型樹脂大孔吸附樹 脂柱，接著在流速35微升/秒的條件下通過由浙江台州市路橋四甲生化塑料廠以商品名聚 醯胺樹脂銷售的聚醯胺柱，然後使用濃度以體積計25%乙醇水溶液洗脫劑從吸附柱洗脫， 得到的洗脫液在廣州星爍儀器有限公司以商品名RE-301型旋轉蒸發器銷售的旋轉蒸發器 中在壓力0. 002-0. 098MPa的條件下進行減壓蒸餾得到桅子苷；
[0175] D、製備螺旋藻多糖與螺旋藻多肽
[0176] 將新鮮螺旋藻在由廣州聚能生物科技有限公司公司以商品名JN-02C低溫連續流 細胞破碎機銷售的低溫細胞破碎機中在4°C低溫條件下處理14分鐘，得到的處理液再經過 由美國貝克曼庫爾特有限公司公司以商品名XPN-80超速離心機銷售的低溫超速離心機在
【權利要求】
1. 一種抗菌改性殼聚糖噴霧劑的製備方法，其特徵在於該製備方法的步驟如下： A、 製備改性殼聚糖 將脫乙醯度80%、分子量20X104?30X104Da的殼聚糖溶解於以重量計1. 0?3. 0% 醋酸水溶液中，再加入為殼聚糖重量1?3倍的二叔戊基過氧化物，得到的溶液在超聲波清 洗機中進行超聲處理，得到低分子量殼聚糖複合物溶液，再經過聚丙烯腈超濾膜分子截留 與分級，得到分子量為500Da以下的殼聚糖；把這種殼聚糖加到以重量計35?45%氫氧化 鉀水溶液中，在溫度105?115°C的條件下處理10?20min，接著用1. 0?3. 0N鹽酸水溶 液進行中和、過濾、蒸餾水洗滌、乾燥，得到脫乙醯度99?100%、分子量為500Da以下的改 性殼聚糖； B、 製備桅子油 往80?120重量份桅子粉中加入700?900重量份石油經，然後在超聲波清洗機中進 行超聲提取，過濾得到濾液與濾渣，所述的濾渣接著用500?700重量份石油醚以同樣方式 重複超聲提取2?3次，濾液合併，採用水浴加熱方式在溫度60?90°C的條件下除去合併 濾液中的石油烴，得到桅子油； C、 製備桅子苷 往80?120重量份桅子粉中加入800?1200重量份以體積計70?80%乙醇水溶 液，然後在超聲波清洗機中進行超聲提取，過濾得到濾液與濾渣，所述的濾渣接著以同樣方 式重複超聲提取2?3次，濾液合併，然後在流速為20?30微升/秒的條件下通過非極性 大孔吸附樹脂柱和在流速30?37微升/秒的條件下通過聚醯胺柱，接著使用濃度以體積 計15?25%乙醇水溶液洗脫劑從吸附柱洗脫，得到的洗脫液在旋轉蒸發器中在減壓蒸餾 的條件下處理得到桅子苷； D、 製備螺旋藻多糖與螺旋藻多肽 將新鮮螺旋藻在低溫細胞破碎機中在4°C?6°C低溫條件下處理12?18分鐘，得到 的處理液再經過低溫超速離心機在溫度4°C?6°C條件下進行離心處理，接著使用低溫過 濾設備在溫度2°C?5°C的條件下過濾，然後在溫度2°C?8°C的條件下使用截留分子量為 10kD的滲透膜進行膜滲透處理，得到螺旋藻多糖與螺旋藻多肽； E、 配製殼聚糖噴霧劑 將2. 5?3. 2重量份在步驟A得到的改性殼聚糖溶解於6?15重量份濃度以重量計 0. 8?1. 2%醋酸水溶液中，然後往所得到的溶液中加入0. 8?1. 2重量份吐溫60、0. 8? 1. 2重量份月桂醯胺丙基甜菜鹼，混合均勻，再加入0. 3?0. 8重量份在步驟C得到的桅子 苷、0. 1?0. 4重量份在步驟B得到的桅子油、0. 1?0. 4重量份在步驟D得到的螺旋藻多 肽、0. 1?0. 4重量份在步驟D得到的螺旋藻多糖，混合均勻，最後加入0. 1?0. 4重量份烯 丙基三丁基溴化膦，用蒸餾水將其總重量達到100重量份。
2. 根據權利要求1所述的製備方法，其特徵在於在步驟A中，脫乙醯度80%殼聚糖在 醋酸水溶液中在攪拌速度250?350rpm的條件下溶解5?15min。
3. 根據權利要求1所述的製備方法，其特徵在於在步驟A中，得到的溶液在超聲頻率 22kHz與超聲功率為200W的條件下超聲處理35?45min。
4. 根據權利要求1所述的製備方法，其特徵在於在步驟B中，所述的濾渣在第1次超聲 提取時，桅子粉與石油烴的重量比是90?110 :750?850 ;在第2次或第3次超聲提取時， 桅子粉與石油烴的重量比是90?110 :550?650。
5. 根據權利要求1所述的製備方法，其特徵在於在步驟C中，所述的大孔吸附樹脂是由 苯乙烯與二乙烯苯共聚合製備得到的非極性D10ULX-60或LX-20型樹脂；所述的聚醯胺是 由己內醯胺或己二酸與己二胺合成製備得到的高分子聚醯胺。
6. 根據權利要求1所述的製備方法，其特徵在於在步驟C中，所述大孔吸附樹脂柱的洗 脫劑或所述聚醯胺柱的洗脫劑是濃度以體積計18?22%乙醇水溶液。
7. 根據權利要求1所述的製備方法，其特徵在於在步驟C中，所述的滲透膜是由聚醚 碸、三醋酸纖維素或再生纖維素製備的滲透膜。
8. 根據權利要求1所述的製備方法，其特徵在於在步驟D中，所述的低溫超速離心機的 轉速是20000?30000轉/分鐘。
9. 根據權利要求1所述的製備方法，其特徵在於改性殼聚糖、吐溫60、月桂醯胺丙基甜 菜鹼、桅子苷、桅子油、螺旋藻多肽、螺旋藻多糖與烯丙基三丁基溴化膦的重量比是2. 8? 3. 0 :0. 85 ?1. 12 :0. 85 ?1. 12 :0. 45 ?0. 65 :0. 15 ?0. 24 :0. 15 ?0. 26 :0. 15 ?0. 25 : 0. 15 ?0. 24。
10. 根據權利要求1-9中任一項權利要求所述製備方法得到的抗菌改性殼聚糖噴霧 齊?，其特徵在於它對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、大腸桿菌、鏈球菌、白色念珠菌、綠膿桿菌 或其它真菌的抗菌能力達到99%以上。
【文檔編號】A61P17/02GK104042719SQ201410318861
【公開日】2014年9月17日 申請日期:2014年7月7日 優先權日:2014年7月7日
【發明者】湯瑞明, 耿在雲 申請人:江蘇瑞京科技發展有限公司