一種菸草黑脛病抗性的病圃鑑定方法
2024-03-01 16:11:15
專利名稱：：一種菸草黑脛病抗性的病圃鑑定方法
技術領域：
：本發明屬於植物抗病性鑑定
技術領域：
，具體涉及菸草黑脛病抗性的鑑定，特別是涉及一種對菸草黑脛病抗性進行病圃鑑定的方法。
背景技術：
：菸草黑脛病是世界菸草中危害最嚴重的病害之一，同時也是我國菸草主要病害，可以危害烤菸、晾煙、曬煙、白肋煙、香料煙等所有的栽培菸草。美國北卡羅萊納州每年因菸草黑脛病損失的菸葉約佔總產量的1%2%，1995年和1996年兩年間因黑脛病造成的損失就達3610萬美元，佔病害總損失的35.13%，居各病害之首。該病在我國分布範圍很廣，除黑龍江省尚未發現之外，其餘各植煙省區(含臺灣省)均有發生。平均發病率為5%12%，嚴重田塊發病率高達75%，甚至造成絕收。據不完全統計，我國菸草黑脛病平均每年發病面積高達76373hm2，產量損失2869.26萬千克，產值損失超過l.23億元人民幣。生產實踐表明，防治黑脛病最經濟、有效、環保的措施就是選育抗病品種，抗性鑑定自然成為抗源挖掘利用、抗病育種、抗性監測等工作中重要的一環。作物抗病育種有別於其他農藝性狀的選擇，抗病性的表型是作物與病原物在一定的環境條件下互作的表現。與農藝性狀的表型比較，作物抗病性是兩種生物的互作，因此，抗病性的表現則以病原物存在為前提，同時環境條件又必須滿足兩種生物生長發育。菸草黑脛病育種和抗源的篩選評價都必須在黑脛病生態系的選擇壓中選育或檢驗，否則，進行抗黑脛病育種是盲目的、低效的。現有的菸草抗性鑑定方法主要有溫室苗期鑑定接種法和病圃活體菌株人工接種鑑定法。苗期鑑定法通常採用遊動孢子或菌絲體懸浮液浸根接種，但由於各供試菌株之間產生遊動孢子或菌絲體的數量差異較大，這些方法的接菌量不易控制，試驗操作複雜，分級標準不易掌握，且易受遊動孢子或菌絲體的^^度及遊動孢子的遊動時間、生活力和侵入能力等因素的影響。利用該方法鑑定的結果與田間抗性差異大，不能準確反映品種的抗病性。病圃活體菌株人工接種鑑定是目前常用的鑑定方法。目前現有鑑定方法的缺點是接種用菌株的收集、保存與合理選擇是長期、連續、操作技術較高、成本較大的工作，並且接種用的小種數量、種類的多樣性與田間試驗方法相比始終是有限的。且以前的病害調査方法按照抗病性分級標準自然發病於病發初期、盛期和未期各調査一次，若人工接種則於接種後第20天、40天、60天各調査一次。每次均應調査各品種全部植株。由於菸草黑脛病發病部位主要在莖基部，調査起來有些困難。
發明內容本發明的目的在於針對現有技術存在的不足，提供一種菸草黑脛病抗性的病圃鑑定方法，採用歷年病害高發區連作煙田作病圃，通過增加田間溼度為植株發病提供必要條件，減少了菌株分離保存及培養的複雜操作，讓需要鑑定的品種在黑脛病生態系的選擇壓中選育或檢驗，採用烤菸採收後一次性挖根調査的方法，鑑定結果準確，並能準確反映當地當時的實際情況，成本低、操作簡便易行。本發明的目的通過以下技術方案實現一種菸草黑脛病抗性的病圃鑑定方法，包括以下順序步驟一、病圃的選擇(1)、選擇歷史上菸草黑脛病常年流行，發生嚴重，發病率達80%以上地塊；(2)、當地57月份高溫高溼，年平均降雨量大；(3)、連作，自然灌溉條件好，菸草作物種植和管理水平一致，按常規操作和管理。二、田間管理其他農事操作按常規管理。菸草作物種植期間，煙苗移栽後補苗、施肥。確保煙苗全部存活15d後，開始田間灌水，確保田間溝內明水可見，後期根據各品種需肥狀況補肥。三、病害調査與鑑定烤菸採收後挖根調査，按國家標準對鑑定品種進行分級和抗性評價。本發明率先提出了一種具有實用價值的菸草黑脛病圃鑑定方法，實現了不用人工接種，在自然條件下有效鑑定品種抗性。通過提供有利條件誘發病害發生，減少繁雜的菌種保存培養、接種體制定與接種等工作，其菌株來源於大田，接種用的小種數量、種類理論上說是無限的，多樣性、代表性較好，接種條件也是自然控制，故鑑定結果較能準確反映當地當時的實際情況；採用烤菸採收後一次性挖根調查的方法，大大減少了工作量，節省了成本，鑑定結果準確可靠，並能準確反映當地當時的實際情況，具有成本低、操作簡便易行的特點，是一種較為經濟實用的方法，具有良好的市場應用前景。具體實施方式實施例l:1.1田間自然誘發病圃的選址與建立有利於發病、發病穩定的地理生態環境是病圃的基礎。病菌以厚垣孢子和休眠菌絲體在病株殘體、土壤、糞肥中越冬，可以存活3年左右。帶菌的土壤、類肥、灌溉水及病苗是菸草黑脛病的主要初侵染源。病菌借風雨、灌溉水、農事操作等進行重複再侵染，使病害越來越重，進而蔓及全田。菸草黑脛病菌主要集中在距土表下05cm的土層中活動，通過傷口或直接侵入，侵染部位主要是莖基部，感病階段主要在現蕾前。高溫高溼有利於病害發生，而溼度是流行的關鍵因素。在溫度2432。C，相對溼度80%以上35(1，田間就會出現一個發病高峰，溼度越大，發病癒快愈重。l丄l病圃的地理及生態要求根據黑脛病發生的最適生態條件及其他因素，確立如下病圃目標歷史上黑脛病常年流行，發生嚴重；57月份高溫高溼，年平均降雨量大；病圃面積在2~3畝左右，連作，自然灌溉條件好，作物種植和管理水平一致；交通方便。l丄2選址過程1丄2.1被選區黑脛病史及主要氣象資料調研根據選址目標，確立昆明、玉溪作為被選目的區。1.1.2.2現場考察2005年5月至7月iH值菸草黑脛病發病高峰期，先後考察了昆明草甸、昆明施甸、玉溪市紅塔區、玉溪江川、玉溪澄江、玉溪華寧等地，了解了當地歷年發病情況，在病害高發區採集了黑脛病標樣，並記載地名，拍攝了照片。1.1.2.3選址的初步確定根據選址目標，確立玉溪市江川縣雄關鎮、玉溪市紅塔區研和鎮煙科所試驗基地、昆明市尋甸縣科技推廣站試驗基地有3地塊是黑脛病歷年常發區，發病5率達80%以上，為連作田。被選區的地理位置及氣象資料如下玉溪市江川縣雄關鎮地理位置海拔1932米，北緯24。20'，北諱30°，年均氣溫16.7。C，年降雨量749.2毫米；玉溪市紅塔區研和鎮煙科所試驗基地試驗田地理位置N:24。14.382'，E:102°30.024，，海拔1635m，年平均氣溫16-17。C，年降雨量880900毫米；昆明市尋甸縣科技推廣站試驗基地試驗田地理位置N:25°30.759，，E:103°15.910，，海拔1878m，年均氣溫14.7。C，年降雨量1352.2毫米。1.1.3病圃的檢驗與建立，試驗驗證-1材料與方法1.1供試品種玉溪研和與玉溪江川有18個品種，其分別為L8、NC1071、N.nes叩hila、N.nudicaudis、N.plumbaginifolia、G28、K326、NC95、MD609、小黃金1025、革新三號、金星6007、紅大、N.stocktonii、落地黃、Barley37、Barley21、筑波l號。昆明尋甸點共有13個品種，其分別為L8、NC1071、N.nesophila、N.nudicaudis、N.Plumbaginifolia、G28、K326、NC95、MD609、1025、革新三號、金星6007、紅大。以雲南品種K326為高抗對照品種，紅大為感病對照品種。1.2試驗測定方法玉溪研和在雲南省菸草科學研究所研和試驗基地進行試驗測定。利用有病連作煙田作病圃，誘其自然發病。小區隨機排列，三次重複，每品種每重複種植一行，每行35株。田間布置圖南I131761814831691510411112II181014813615114112162179III北121154732981361171410161518昆明尋甸點在昆明尋甸科技推廣站試驗基地進行試驗測定，N:25°30.759'，E:103°15.910，，海拔1878m。利用有病連作煙田作病圃，誘其自然發病。小區隨機排列，三次重複，每品種每重複種植一行，每行20株。田間布置圖I7111928436101213II851061134791112in13481059621112133玉溪江川利用有病連作煙田作病圃，誘其自然發病。小區隨機排列，三次重複，每品種每重複種植行，每行25株。田間布置圖I417618148169151013U712II1810148136151174112162179m121154732981361171410161518栽培管理常規漂浮育苗、適齡移栽，煙苗成活後田間多澆水，保證田間溼度，施肥按常規管理。植株生長期均不施用殺菌劑，蟲害管理與大田管理相同。病害嚴重度分級應符合YC/T39的規定。自然發病於病發初期、盛期和未期各調査一次，每次均應調査各品種全部植株，並計算各品種的病株率、病情指數，然後以病情指數為主要依據評定各品種的抗病能力。病害嚴重度分級按中華人民共和國菸草行業標準YC/T39的規定。抗性評價標準按中華人民共和國菸草行業標準YC/T41-1996的方法進行。病害分級標準(以整株為單位)0級全株無病；1級莖部病斑不超過莖圍1/2，或半數以下葉片輕度凋萎，或下部少數葉片出現病斑；2級莖部病斑超過莖圍的1/2，或半數以上葉片調萎；73級莖部病斑環繞莖圍，或2/3以上葉片凋萎；4級病株全部葉片凋萎或枯死。病情指數計算病指=E(各級病株數x該病級值y(調查總株數X最高級值)X1001.3統計分析對病指作方差分析，測定各鑑定材料間病指的差異。2結果與分析表2-3研和田間病害抗病性顯著分析tableseeoriginaldocumentpage8以上3個不同地點田間自然鑑定結果表明，感病品種紅大、小黃金1025與抗病品種K326、G28及革新三號間差異極顯著。感病對照紅大在玉溪研和點、玉溪江川點、昆明尋甸點的病指分別為60.95、35.67、27.5，抗病對照K326病指分別為0、1.67、1.67，高感種質最高病指分別為99.05、94.00、79.17。玉溪研和的發病程度較高。從表2-3看3個試驗均能較一致地反應出各供試品種對菸草黑脛病的抗病性，抗感病差異明顯。這說明在上述地點建立菸草黑脛病自然抗性鑑定圃是可行的，其結果可基本評判供試品種的抗病性差異。鑑於玉溪江川點和昆明尋甸點紅大感病對照品種病指偏低，雲南菸草黑脛病菌生理小種組成單一，3地塊測定結果基本一致，僅保留了玉溪研和地塊作病圃，繼續進行抗病種質資源的篩選研究。從玉溪研和20062008年的鑑定結果看，該病圃發病程度高，2007年紅大病指達61.43，K326病指為24.52，2008年紅大病指達76.85，K326病指為7.87,抗感病差異極顯著，年度間發病差異較小，試驗數據準確、完整、連續，作物種植和管理水平一致，遠離農民煙田，說明在此建立自然誘發病圃，用於鑑定種質資源抗病性是可行的。病圃建好後，儘量保全其原生態環境，避免小環境的人為改變。U.3.220062008年度主耍氣象資料(表2-4)表2-420062008年5-9月主要氣象資料tableseeoriginaldocumentpage91丄3.3輔助設施基於病圃的試驗和主要參數的檢驗，選址玉溪市紅塔區研和鎮煙科所試驗基地完全符合病圃的要求。病圃的農田園化建設，包括噴灌系統、田埂水泥硬化及進排水圍溝清瘀等有基地統一改建。l丄4病圃的特點和功能U.4.1地理氣候位於玉溪市紅塔區研和鎮煙科所試驗基地，N:2f14.382'，E:102°30.024'，海拔1635m,年平均氣溫16-17°C，年降雨量880900毫米。1丄4.2地理隔離條件優越與農田隔離。1丄4.3鑑定規模可用於病圃面積2.3畝，一次性能同時鑑定60份種質材料。1丄4.4交通及灌溉方便。交通便利、灌溉方便，距玉溪約17公裡，途徑玉元高速公路。灌溉常年能滿足需要。實施例2:菸草種質資源抗黑脛病鑑定菸草黒脛病是由菸草疫黴[Phytophthoraparasiticavar.nicotianae(BredadeHean)Tucker]引起的一種世界性菸草毀滅性真菌病害。病原菌屬鞭毛菌亞門疫黴屬，是喜高溫高溼的兼性寄生菌，可以危害所有的菸草類型，在菸草生長的任何階段都能侵染根、莖、葉，引起萎蔫、莖損傷和植株死亡。近年來，由於連作煙田面積擴大以及連作年限的增長，菸草黑脛病有加重流行的趨勢。為減輕該病造成的損失，人們曾用農業防治、化學防治、抗病育種等多種不同方法控制菸草黑脛病，但由於該病菌的遊動孢子形成速度快且數量大，侵染煙株後潛育期短、發病快，在一個生長季節可以發生多次再侵染，同時該病有時還與其它病害混合發生，一旦病害流行則難以控制。如果防治措施不到位黑脛病引起的損失可達100%。針對目前菸草黑脛病的嚴重危害，研究抗病新品種已成為當今防治菸草黒脛病的重點。本申請利用有病連作煙田作病圃，誘其自然發病，建立自然抗性鑑定圃，進行種質資源的抗病性鑑定，旨在為有效控制菸草黒脛病的發生、減小經濟損失提供理論依據。1材料與方法1.1試驗條件本研究田間試驗於20062008年在雲南省菸草科學研究所研和試驗基地進行，屬亞熱帶內陸高原型氣候，年平均氣溫15.523.7°C，年平均降雨量700卯Omm。栽培土壤為紅壤土，根作層3545cm。前茬作物為梢子。1.2材料06年共有18個品種，分別為L8、NC1071、N,nesophila、N.nudicaudis、N.plumbaginifolia、G28、K326、NC95、MD609、小黃金1025、革新三號、金星6007、紅大、N.stocktonii、落地黃、Barley37、Barley21、筑波1號。07年供試品種21個，分別為NC2514、筑波1號、Islangold、CV78-5、密葉尖、金星6007、大紅星、晉太7615、CV78-4、烏江1號、CV16-2、大柳葉2014、落地黃、DarisSpecial、Q1236:HicksQ46、長把黃光板、許金7號、柳葉尖和BlackShankResistant。08年供試品種39個，分別為CV16-2、Islangold、CV78-5、晉太7615、烏江1號、筑波1號、CV78-4、DarisSpecial、落地黃、NC2514、小黃金1025、MD609、革新三號、N.plumbaginifolia、G28、NC95、NC1071、L8、N.nudicaulis、CokerTobacco、H80A432、安選79-l、潘圓黃、NC86、、M二>卜、NC陽22-NF、BL-921、日本烤菸l、龍巖C2、津引1號、COM煙、OX414、RG12、K358、RG17、DlOl、0X2028。以K326為抗病對照品種，紅花大金元為感病對照品種。1.3試驗設計06年在雲南省菸草科學研究所硏和試驗基地進行試驗測定。利用有病連作煙田作病圃，誘其自然發病。小區隨機排列，三次重複，每個品種種植一行，行株距為1.2mX0.5m，每行35株。07年採用單因素完全隨機區組設計，每一品種(系)為1處理，3次重複，每個品種種植l行，每行35株。行株距為1.2mX0.5m，啤酒瓶定位理墒。08年採用單因素完全隨機區組設計，每一品種(系)為一處理，三次重複，每品種種植3墒，每墒18株，行株距為120cmX50cm，試驗田面積為2.3畝。11試驗採用育苗盤直播，漂浮育苗，每種質播種二盤，並於移栽前一星期進行煉苗，三次剪葉，苗齡67天，5月6日移栽，移栽時已達到壯苗標準。移栽的當天噴施農藥(功夫200mni/畝次)防治蟲害。各品種施肥種類和總量一致，N:P205:K20=1:1:2.5，氮肥、鉀肥和磷肥的基肥與追肥比例為3:1。白肋煙L8適當增加肥料。田間每次使用的肥料都為雲南省菸葉公司生產的菸草專用複合肥。移栽後團棵期進行高培土，整個大田期共噴施防蟲農藥4次，並未噴施抗菌類農藥。其他栽培管理措施均按照雲南省菸草科學研究所的生產技術方案要求進行o1.1.4抗病性測定利用有病連作煙田作病圃，進行田間灌水，保持溼度，誘其自然發病。病害嚴重度分級應符合YC/T39的規定。自然發病後，進行多次病害分級調查，每次均應調査各品種的全部植株，並計算各品種發病率和病情指數，以病情指數作為抗性指標，根據抗性劃分標準，評價各測定品種的抗病能力。並對平均病指作方差分析，測定各鑑定材料間抗感程度的差異。種質資源的抗病性評價，根據最後菸葉採收完畢，挖根調査，計算病情指數來判斷。l丄5田間發病規律研究利用有病連作煙田作病圃，採用田間灌水，誘其自然發病。病害嚴重度分級應符合YC/T39的規定。自然發病後每隔10d進行一次病害分級調查，每次均應調查各品種的全部植株，並計算各品種的發病率和病情指數，繪出田間消長曲線，判斷出病害的盛發期。根據抗性劃分標準，評價各測定品種的抗病能力。並對平均病指作方差分析，測定各鑑定材料間抗病的差異。病害調査分級標準0級全株無病；l級莖部病斑不超過莖圍的二分之一，或半數以下葉片輕度凋萎，或下部少數葉片出現病斑。2級莖部病斑超過莖圍的二分之一，或半數以下葉片凋萎。3級莖部病斑環繞莖圍，或三分之二以上葉片凋萎。4級病株全部葉片凋萎或枯死。12根據病株調査數據，按如下公式計算病株率(普遍率)和病情指數(嚴重度)。病株率(％)=發病株數/調査總株數*100;病情指數=2(各級病株數*該病級)/(調査總株數*最高病級)*100。(2)抗性評價標準高抗病情指數05，用HR表示；抗病病情指數為5.0125，用R表示；中抗病情指數25.0150，用MR表示；中感50.0175，用MS表示；感病病情指數75以上，用S表示。l丄6數據處理試驗數據用浙江大學唐啟義、馮明光編的實用統計分析及其DPS數據處理系統進行分析。2結果與分析2.1鑑定材料間的抗性差異根據田間最後一次調査結果，計算病情指數，根據抗性評價標準評價種質資源抗病性。從表2-5可知2006年供試的18個品種有5個高抗品種，分別為NC歴、NC95、落地黃、G28、K326，有5個抗病品種，分別為N.nesophila、N.plumbaginifolia、MD609、革新三號、筑波1號，有2個中抗品種金星6007和N.stocktoii，有2個中感品種紅大與小黃金1025，有4個感病品種Barley21、Barley37、L8與N.nudicauUs。Barley21、Barley37、L8與N.nudicaulis表現感病，其感病程度重於對照品種紅大與小黃金1025，差異極顯著。NC1071、NC95、落地黃高抗，與對照抗病品種G28、K326、革新三號差異不顯著。抗病品種N.plumbaginifolia、MD609表現抗病，與對照抗病品種G28、K326、革新三號差異不顯著。其餘品種抗性居中。表2-52006菸草種質資源的抗性評價品種名稱2006似j指抗性品種名稱2006病指抗性Barley2199.05士8.24aAS筑波1號15.24士7.19eERBarle》'3798.10土0.00aABSMD6099.52土1.65efER92.38土17.14abABs革新三號7.62土6.60effiR80.95士20.00bBs6.66士1.65effiR紅人60.95±7.19cCMS落地黃4.76±15.12efBHR小黃金102550.48士1.65cdCDMSG280.95土3.30ffiHR13tableseeoriginaldocumentpage14注f為中後期欄多重比較(SSR)結果。"土"前面數字代表病情指數平均值；後面數字表示標準差。大寫字母示P〈0.01水平1:差異顯著性，小寫字母示P0.05水平上差異顯著性。下同。2007年菸葉採收完畢後，挖根調査，計算病情指數，根據抗性評價標準評價種質資源的抗病性。07年各品種平均病指間的差異顯著性檢驗結果表明不同菸草種質對黑脛病的抗性有明顯差異，菸草品種柳葉尖的病情指數最高，為95.00，K326的最低，為24.52。感病品種柳葉尖、BlackShankResistant和許金7號的病指極顯著的高於對照品種紅花大金元；品種Q1236:HicksQ46、K把黃光板與感病對照無顯著差異，但品種長把黃光板的病指低於感病對照。各抗病品種與對照品種K326的差異性結果表明品種密葉尖、大柳葉2014的病指極顯著的高於對照；品種大紅星、金星6007、CV16-2、Islangold、CV78-5、病指顯著高於對照；品種晉太7615、烏江1號、筑波1號、CV78-4、DarisSpecial、落地黃、NC2514與對照無顯著差異，但病指均高於對照。NC2514與K326病情指數最低，可推薦抗病育種選用。表2-62007各鑑定材料病指間的差異顯著性tableseeoriginaldocumentpage14表2-72008各鑑定材料病指間的差異顯著性處理08年病指抗性處理08年病指抗性BL-92199.07±1.61aASNC-22-NF8.33±481ijklIJR紅大(CK)76.85±18.85bABSDarisSpecial7.87±5.26ijklIJR潘圓黃76.85±11.97bABsNC10717.87±4.01ijklIJR晉太761573.15土13.49bBCMSK326(CK)7.87±6.85ijklIJRCV78隱554.63±25.20cBCDMSCokerTobacco7.87土7.13ijklI.IRIslangold51.39±33.36cdBCDEMSD1017.41±6.99jklIJRMD60942.59±3.20cdeDEFMR落地黃6.02土7.13jklIJR烏江1號38.42±11.65cdefDEFGMRRG126.02±0.80jklIJR筑波iy.36.58±7.90cdefgDEFGHMR津引1號6.02±2.89jkllJR小黃金102532.87±4.88defghDEFGHIMR"二A卜5.09±2.l2jkllJR革新二號29.17±)7.07efghiDEFGHIJMRN.plumbaginifolia4.17±7.22jklJHRCV16-225.00±12.50efghijEFGHIJRNC863.70±5.26jklJHR24.07士0.80e鵬kFGHIJRK3583.70±2.89jklJHRN.nudicaulis22.22士0.00e妙ijklFGHIJROX4143.24±4.46jklJHR安選79-119.91士11.14鵬klFGHIJRCOM煙2.31±4.01klJHRH80A43216.67±l1.87ghijklFGHIJRG281.85±3.211JHRNC251415.28±13.25hijklFGHIJRNC951.39±1.391JHR龍巖C214.35±17.69hijklGHIJR曰本烤菸11.39±1.39UHROX202813.43±14.72hijklGHURRG170.93±1.611JHRCV78-49.26±13.63ijklHIJR菸葉採收完畢後，挖根調查，計算病情指數，根據抗性評價標準評價種質資源的抗病性。通過對39份菸草種質資源抗黑脛病鑑定(表2-7)，抗病對照K326的平均病指7.87，抗性評價在抗病範圍內，感病對照紅大的平均病指為76.85，抗性評價在感病範圍內。菸草品種BL-921發病最重，病情指數最高，達99.07，高於紅大病指，與感病對照紅大間差異顯著，其餘品種發病輕於紅大，其中潘圓黃、晉太7615與紅大間差異不顯著，其餘品種與紅大差異顯著。RG17的病情指數最低，為0.93。高抗品禾中N.plumbaginifolia、G28、NC95、NC86、日本烤菸l、COM煙、OX414、K358、RG17與抗病對照品種K326差異不顯著，所有抗病品種CV16-2、CV78-4、DarisSpecial、落地黃、NC2514、NC1071、L8、N.nudicaulis、CokerTobacco、H80A432、安選79-l、、、<二A卜、NC-22-NF、龍巖C2、津引1號、RG12、DlOl、OX2028與K326差異亦不顯著。感病品種15有BL-921、紅大、潘圓黃、晉太7615、CV78-5、Islangold、MD609、烏江1號、筑波1號、小黃金1025與K326差異極顯著。2.2菸草種質資源抗性鑑定結果2006年供試的18個品種(表2-8)有5個高抗品種，分別為NC1071、NC95、落地黃、G28、K326，有5個抗病品種，分別為W.恥sop/zz7a、iV.p/wwk/g/m/o/z'a、MD609、革新三號、筑波1號，有2個中抗品種金星6007和N.stocktoii，有2個中感品種紅大與小黃金1025，有4個感病品種Barley21、Barley37、L8與7V.2007年從對21個鑑定材料的抗病性鑑定結果(表2-8)，根據對菸草黑脛病菌的抗性大體可分為4類抗病品種、中抗品種、中感品種和感病品種。其中抗病品種有K326和NC2514，佔總鑑定材料的9.52%;中抗品種有筑波l號、Islangold、CV78-5、密葉尖、金星6007、大紅星、晉太7615、CV78-4、烏江1號、CV16-2、大柳葉2014、落地黃和DarisSpecial,共13個，佔61.卯％。中感品種有Q1236:HicksQ46、長把黃光板和紅大，共3個，佔14.29%;感病品種有許金7號、柳葉尖和BlackShankResistant,佔14.29%。2008年對39個鑑定材料抗病性鑑定初步看出，對菸草黑脛病菌的抗性程度大體可分為5類高抗品種、抗病品種、中抗品種、中感品種和感病品種。其中高抗品種有N.plumbaginifolia、G28、NC95、NC86、日本烤菸1、COM煙、0X414、K358、RG17，共9個，佔鑑定材料總數的23.08%;;抗病品種有CV16-2、CV78-4、DarisSpecial、落地黃、NC2514、K326、NC1071、L8、N.nudicaulis、CokerTobacco、H80A432、安選79-l、s、<二A卜、NC-22-NF、龍巖C2、津引1號、RG12、DlOl、OX2028共19個，佔鑑定材料總數的48.72%;;中抗品種有烏江1號、筑波1號、MD609、革新三號，共4個，佔鑑定材料總數的10.26%;中感品種有Islangold、CV78-5、晉太7615、小黃金1025，共4個，佔鑑定材料總數的10.26%;感病品種有紅大、潘圓黃、BL-921，佔鑑定材料總數的7.69%。其中抗病品種所佔比例最高，而感病品種所佔比例最低。鑑定結果見表2-8。表2-8菸草種質資源抗黑脛病結果統計16tableseeoriginaldocumentpage17NC86、日本烤菸l、COM煙、OX414、K358、RG17、NC1071,NC95CV16-2、CV78-4、DarisSpecial、落地黃、NC2514、L8、朋<*//,》、CokerTobacco、H80A432、安選79-l、、、<二凡卜、NC-22-NF、龍巖C2、律弓l1號、RG12,DlOl、0X2028、NC2514、W.鵬—/"、MD609、筑波1號、jV.p/w附6ag,'"^/Za烏江1號、筑波1號、MD609、筑波1號、Islangold、CV78-5、密葉尖、金星6007、大紅星、晉太7615、CV78-4、烏江1號、CV16-2、大柳葉2014、DarisSpecial、金星.6007、N.stocktoiiIslangold、晉太7615、Q1236:HicksQ46、長把黃光板潘圓黃、BL-921、許金7號、柳葉尖、BlackShankResistant、Barley21、Barley37(年度間不一致的幾個品種差異不大，採用平均值判斷抗病性水平)23菸草種質鑑定材料病情消長動態2007年通過對各鑑定品種連續7次發病率調査，分析各品種資源田間發病消長動態。結果表明隨田間生長期的增長，病害呈現總體上升趨勢，各種質發病盛期多集中在5月下旬至6月下旬。21份供試種質因發病高峰所在時間不同可分3種類型第l種類型為感病品種BlackShankResistant、許金7號、柳葉尖發病高峰集中在5月25日至6月5日時間段，6月5日至6月16日發病稍有減緩，6月中旬以後病情穩定，這一類品種發病時間集中在5月下旬至6月中旬。第2種類型為長把黃光板、大柳葉2014、密葉尖、大紅星、金星6007、CV16-2、Q1236:HicksQ46、紅大、晉太7615、筑波1號發病高峰在6月5日至6月16日時間段，這一類品種發病時間集中在5月下旬至6月下旬；第3種類型為大柳葉2014、CV78-5、烏江1號、CV78-4、DarisSpecial、落地黃、NC2514、K326發病盛期在6月16至6月27日，為6月中下旬，這些品種發病時間集中在6月上旬至7月上旬。第三類品種皆為中抗或抗病品種，除大柳葉2014發病較早外，其餘種質皆發病晚抗性高。第一類品種皆為感病品種，發病早而抗性低。由此看出種質資源的抗病性與發病早晚有關，這可能與後期植株粗大、角質層增厚、木質部形成使病菌不易侵入有關。18權利要求1、一種菸草黑脛病抗性的病圃鑑定方法，包括以下順序步驟一、病圃的選擇(1)選擇歷史上菸草黑脛病常年流行，發生嚴重，發病率達80％以上地塊；(2)當地5～7月份高溫高溼，年平均降雨量大；(3)連作，自然灌溉條件好，菸草作物種植和田間管理按常規操作和管理；二、菸草作物採收後挖根調查，按國家標準對鑑定品種進行分級和抗性評價。2、根據權利要求1所述的菸草黑脛病抗性的病圃鑑定方法，其特徵在於菸草作物種植期間，煙苗移栽後補苗和施肥，確保煙苗全部存活15d後，開始田間灌水，確保田間溝內明水可見，後期根據各品種需肥狀況補肥。全文摘要一種菸草黑脛病抗性的病圃鑑定方法，採用歷史上菸草黑脛病病害高發區連作煙田作病圃，通過增加田間溼度誘導植株發病，減少了菌株分離保存及培養的複雜操作，其菌株來源於大田，接種用的小種數量、種類理論上說是無限的，多樣性、代表性較好，接種條件也是自然控制，故鑑定結果較能準確反映當地當時的實際情況；採用烤菸採收後一次性挖根調查的方法，大大減少了工作量，節省了成本，結果準確可靠，具有成本低、操作簡便易行的特點，是一種較為經濟實用的方法，具有良好的市場應用前景。文檔編號A01G7/00GK101491199SQ20091009417公開日2009年7月29日申請日期2009年3月9日優先權日2009年3月9日發明者勇劉,盧秀萍,李梅雲,李永平,高家合申請人:雲南省菸草科學研究所