細胞壞死抑制劑的製作方法

2023-05-24 20:18:36 3

腫瘤壞死因子α(tnf-α)誘導的nf-κb活化在免疫系統和炎性反應中起核心作用。受體相互作用蛋白1(rip1)是涉及介導核因子κb(nf-κb)活化、細胞凋亡和程序性壞死的多功能信號轉導子。rip1的激酶活性關鍵地參與介導細胞程序性壞死，一種不依賴於半胱天冬酶的壞死性細胞死亡通路。holleretal.natimmunol2000；1:489–495；degterevetal.natchembiol2008；4:313–321.

細胞程序性壞死在細胞死亡的多種病理形式中起作用，包括缺血性腦損傷、神經變性疾病和病毒感染。dunai,etal.,dec2011,pathol.oncol.res.:por17(4):791–800.壞死性凋亡抑制劑-1(nec-1)，rip1激酶活性的小分子抑制劑，可以阻斷細胞程序性壞死。degterevetal.natchembiol2005；1:112–119.

相關專利出版物包括：us6756394,us8278344,us2012122889,us2009099242,us2010317701,us2011144169,us20030083386,us20120309795,wo2009023272,wo2010075290,wo2010075561,wo2012125544。

技術實現要素：

本發明提供細胞壞死和/或人受體相互作用蛋白1激酶(rip1)的抑制劑，即如式的醯胺化合物：

其中：

r1是c3-c14環或雜環部分，特別是取代或未取代的，0-3個雜原子c3-c9環烷基，環烯基，環炔基；或取代或未取代的，0-3個雜原子c5-c14芳基；

r2-r4獨立地是：氫原子，取代或未取代的雜原子，取代或未取代的，0-3個雜原子c1-c9烷基，取代或未取代的，0-3個雜原子c2-c9烯基，取代或未取代的，0-3個雜原子c2-c9炔基，和取代或未取代的，0-3個雜原子c5-c14芳基，其中每個雜原子獨立地是氧，磷，硫或氮；或

該醯胺化合物的相應磺醯胺，或

該化合物藥學上可接受的鹽，氫化物或立體異構體；

前提是如果r1是苯基，r3是氫原子，且r4是1,1-二甲基丙基，則r2不是氫原子，優選取代或未取代的雜原子，取代或未取代的，0-3個雜原子c1-c9烷基，取代或未取代的，0-3個雜原子c2-c9烯基，取代或未取代的，0-3個雜原子c2-c9炔基，和取代或未取代的，0-3個雜原子c5-c14芳基，其中每個雜原子獨立地是氧，磷，硫或氮。

本發明還提供了所有一般和特別公開的醯胺的相應磺醯胺，如：

其中s可以是雙鍵連結一個或兩個氧原子，或其藥學上可接受的鹽，氫化物或立體異構體，其中r部分如本文所述，或其藥學上可接受的鹽，氫化物或立體異構體。

本發明提供了包含主題化合物的藥物組合物，以及製備和使用主題化合物的方法，包括抑制細胞壞死和/或者人rip1的方法。組合物可以包含藥學上可接受的賦形劑，以有效的單位劑型，和/或包含另一種不同的用於靶向疾病或病症的治療劑。在實施方案中，本發明提供了用有效量的主題化合物或藥物組合物治療對其有需要的人的方法，並且任選地檢測該人的健康或狀況的改善結果。該方法還可任選地包括確定該人，特別是診斷和適用的疾病或病症(本文)的前提步驟。

本發明包括本文所述的特定實施方案的所有組合。

本發明的具體實施方案的描述

具體實施方案和實施例的以下描述是通過說明而非限制的方式提供的。本領域技術人員將容易地認識到可以改變或修改各種非關鍵參數以產生基本相似的結果。本發明提供了極多的實施方案。

1.本發明提供了細胞壞死和/或人受體相互作用蛋白1激酶(rip1)的醯胺抑制劑。

2.在具體實施方案中，主題化合物具有下式：

其中：

r1是c3-c14環狀或雜環狀部分，優選取代或未取代的，0-3個雜原子c3-c9環烷基，環烯基，環炔基；或取代或未取代的，0-3個雜原子c5-c14芳基；

r2-r4獨立地為：氫原子，取代或未取代的雜原子，取代或未取代的，0-3個雜原子c1-c9烷基，取代或未取代的，0-3個雜原子c2-c9烯基，取代或未取代的，0-3個雜原子c2-c9炔基，和取代或未取代的，0-3個雜原子c5-c14芳基，其中每個雜原子獨立地是氧，磷，硫或氮；或

該醯胺化合物的相應磺醯胺，或

該化合物藥學上可接受的鹽，氫化物或立體異構體。

從本發明的範圍排除的是初始化合物文庫篩選選中的結構式：

例如，式i的化合物包括前提是，如果r1是苯基，r3是h，且r4是1,1-二甲基丙基，那麼r2不是h，即取代或未取代的雜原子，取代或未取代的0-3個雜原子c1-c9烷基，取代或未取代的0-3個雜原子c2-c9烯基，取代或未取代的0-3個雜原子c2-c9炔基，和取代或未取代的0-3個雜原子c5-c14芳基，其中每個雜原子獨立地是氧，磷，硫或氮。

2.在特定方面：

r1是(a)取代或未取代的苯基；

(b)取代或未取代的2-，3-或4-吡啶；

(c)取代或未取代的萘基或3-氮雜萘基；

(d)0-3個雜原子環己基，環戊基，如四氫呋喃；或

(e)0-3個雜原子環戊烯或環戊二烯，如吡咯，唑(例如吡唑，咪唑，三唑，四唑，戊唑，惡唑，異惡唑，噻唑或異噻唑)，呋喃，間二氧雜環戊烯噻吩，二硫雜環戊烯或氧硫雜環戊烯，優選2-部分，如2-唑，2-吡咯，2-唑(例如2-吡唑，2-咪唑，2-惡唑，2-異惡唑，2-噻唑或2-異噻唑)，2-呋喃，2-噻吩，2-氧雜環戊二烯，間二氧雜環戊烯或2-硫雜環戊二烯；和/或

r2是氫原子，羥基，c1-c4烷基(例如甲基，乙基，丙基)或c1-c4烷氧基(例如甲氧基)；和/或

r3是氫原子或甲基，和/或

r4是1-二甲基丙基。

所有可能的組合都包括在內，仿如每個都被明確地列舉；因此，方面和實施方案包括，例如，其中r1是取代或未取代的苯基的組合；r2是氫原子，羥基，c1-c4烷基或c1-c4烷氧基，r3是氫原子或甲基，且r4是1-二甲基丙基。

3.作為這種組合的另一個實例，在一個方面，該化合物具有式：

其中：

r1是(a)取代或未取代的苯基，

(b)取代或未取代的2-，3-或4-吡啶，或

(c)取代或未取代的萘基或3-氮雜萘基；

(d)0-3個雜原子環己基，環戊基，如四氫呋喃基；

(e)0-3雜原子環戊烯或環戊二烯，如吡咯，唑(特別是吡唑，咪唑，三唑，四唑，戊唑，惡唑，異惡唑，噻唑或異噻唑)，呋喃，間二氧雜環戊烯噻吩，二硫雜環戊烯或氧硫雜環戊烯；

r2是氫原子，羥基，c1-c4烷基(例如甲基，乙基，丙基)或c1-c4烷氧基(例如甲氧基)；且

r3是氫原子或甲基；或

該醯胺化合物的相應磺醯胺，或

該化合物藥學上可接受的鹽，氫化物或立體異構體。

4.另一方面，該化合物具有式：

其中：

r1是取代或未取代的苯基；且

r2是氫原子，羥基或取代或未取代的c1-c9烷基；

該醯胺化合物的相應磺醯胺，或

該化合物藥學上可接受的鹽，氫化物或立體異構體。

5.在實施方案中，r1和r2如下：

6.另一方面，該化合物具有式：

其中，

r1是取代或未取代的2-，3-或4-吡啶，且

r2是氫原子，甲基；或

該醯胺化合物的相應磺醯胺，或

該化合物藥學上可接受的鹽，氫化物或立體異構體。

7.在實施方案中，r1如下：

。

8.另一方面，該化合物具有式：

其中，

r1是取代或未取代的環己基；或

該醯胺化合物的相應磺醯胺，或

該化合物藥學上可接受的鹽，氫化物或立體異構體。

9.在實施方案中r1如下：

。

10.另一方面，該化合物具有式：

其中，

r1是取代或未取代的2-唑，2-吡咯，2-呋喃，2-噻吩，2-氧雜環戊二烯，間二氧雜環戊烯或2-硫雜環戊二烯，優選其中2-唑是：2-吡唑，2-咪唑，三唑，四唑，戊唑，2-惡唑，2-異惡唑，2-噻唑或2-異噻唑；

r2是甲基，羥基或甲氧基；且

r3是氫原子或甲基，或者

該醯胺化合物的的相應磺醯胺，或

該化合物藥學上可接受的鹽，氫化物或立體異構體。

11.在實施方案中r1，r2和單鍵或雙鍵如下：

。

12.另一方面，該化合物具有式：

其中，

r1是取代或未取代的萘基或3-氮雜萘基，或

該醯胺化合物的相應磺醯胺，或

該化合物藥學上可接受的鹽，氫化物或立體異構體。

13.在實施方案中r1如下：

。

14.另一方面，該化合物具有式：

其中，

r1是取代或未取代的苯基；優選未取代的苯基，

r2是氫原子，甲基，羥基，羥甲基或甲氧基；且

r3是氫原子，甲基，羥基，羥甲基，甲氧基或取代或未取代的c1-c6烷基，優選未取代的，或

該醯胺化合物的相應磺醯胺，或

該化合物藥學上可接受的鹽，氫化物或立體異構體。

15.在實施方案中，r1，r2和r3如下：

。

16.另一方面，該化合物具有式：

其中，

r2是氫原子，羥基或取代或未取代的c1-c6烷基，且

r4是取代或未取代的，0-3個雜原子c1-c6烷基，取代或未取代的，0-3個雜原子c2-c6烯基，取代或未取代的，0-3個雜原子c2-c6炔基，以及取代或未取代的，0-3個雜原子c6-c14芳基，其中每個雜原子獨立地是氧，磷，硫或氮，

n為0，1，2，3，4或5，或

該醯胺化合物的相應磺醯胺，或

該化合物藥學上可接受的鹽，氫化物或立體異構體。

在實施方案中，r4是1-二甲基丙基，或氟化形式，例如1-二甲基-2-二氟丙基。

17.在實施方案中(f)n,r2和r4如下：

。

18.另一方面，該化合物具有式：

其中，

r1是取代或未取代的苯基；且

r3是取代或未取代的雜原子和取代或未取代的0-3個雜原子c1-c6烷基，其中每個雜原子獨立地是氧，磷，硫或氮；或

該醯胺化合物的相應磺醯胺，或

該化合物藥學上可接受的鹽，氫化物或立體異構體。

19.在實施方案中r1和r3如下：

。

20.另一方面，該化合物具有式：

其中，

r1是取代或未取代的苯基；

r2是氫原子或甲基；且

r3是氫原子或甲基；或

該醯胺化合物的相應磺醯胺，或

該化合物藥學上可接受的鹽，氫化物或立體異構體。

21.在實施方案中r1,r2和r3如下：

。

22.另一方面，化合物具有式：

其中，

r1是取代或未取代的苯基；

r3是h或甲基；且

r4是取代或未取代的c1-c6烷基，或

該醯胺化合物的相應磺醯胺，或

該化合物藥學上可接受的鹽，氫化物或立體異構體。

23.在實施方案中，r1,r2和r3如下：

。

24.另一方面，化合物具有式：

其中，

r1是取代或未取代的苯基；

r2是氫原子，甲基或乙基；且

r3和r4獨立地是氫原子，低級烷基，並且可以連接形成取代或未取代的c3-c8環烷基，或

該醯胺化合物的相應磺醯胺，或

該化合物藥學上可接受的鹽，氫化物或立體異構體。

25.在實施方案中r1,r2,r3和r4如下：

。

26.在實施方案中，主題化合物具有表1的式。

27.在實施方案中，本發明提供了包含單位劑量的主題化合物以及藥學上可接受的賦形劑的藥物組合物。

28.在實施方案中，本發明提供了包含單位劑量的主題化合物和藥學上可接受的賦形劑，以及一種不同的用於細胞壞死相關疾病或病症的治療劑的藥物組合物。

29.在實施方案中，本發明提供了治療細胞壞死相關疾病或病症的方法，包含向有需要的患者施用有效量的主題化合物或組合物。

30.在實施方案中，本發明提供了治療方法，其包含診斷細胞壞死相關疾病或病症的前期步驟，或檢測細胞壞死相關疾病或病症的改善結果的後續步驟。

適用的疾病或病症為細胞壞死(包括細胞程序性壞死)相關的，以及包括中樞或周圍神經系統的神經變性疾病，內毒素/敗血性休克，末端迴腸炎，心肌炎，關節炎，動脈粥樣硬化，急性腸炎，缺血性壞死，由腎衰竭或細胞死亡引起的病理，包括視網膜神經元、心肌或免疫細胞死亡，比如化學或放射性誘導的壞死；肝臟疾病，包括藥物誘發的肝損傷或毒性、急性肝炎等，胰腺疾病，包括壞死性胰腺炎，心臟、腸繫膜、視網膜，肝或腦/大腦缺血性損傷，腎炎，再灌注或器官儲存期間的缺血性損傷，頭部創傷，包括創傷性腦損傷，中風，敗血性休克，冠心病，心肌症，心肌梗塞，股無血管性壞死，鐮狀細胞病，肌肉消瘦，胃腸疾病，結核病，糖尿病，血管病理改變，肌營養不良症，移植物抗宿主疾病，病毒、細菌和真菌感染，克羅恩氏病，潰瘍性結腸炎，哮喘等。

示例性適用的病毒為人免疫缺陷病毒(hiv)，愛潑斯坦-巴爾病毒(ebv)，巨細胞病毒(cmv)5，人皰疹病毒(hhv)，單純性皰疹病毒(hsv)，人t細胞白血病病毒(htlv)5，水痘-帶狀皰疹病毒(vzv)，麻疹病毒，乳頭多瘤空泡病毒(jc和bk)，肝炎病毒，腺病毒，細小病毒，以及人乳頭狀瘤病毒。由病毒感染引起的示例性疾病包括但不限於水痘，巨細胞病毒感染，生殖器皰疹，乙型和C型肝炎，流行性感冒，以及帶狀皰疹。

示例性適用的細菌包括但不僅限於空腸彎曲桿菌，腸桿菌屬，屎腸球菌，糞腸球菌，大腸桿菌(如，大腸桿菌o157：h7)，a組鏈球菌，流感嗜血桿菌，幽門螺桿菌，李斯特菌屬，結核分支桿菌，綠膿假單胞菌，肺炎鏈球菌，沙門氏菌，志賀氏菌，金黃色葡萄球菌，以及表皮葡萄球菌。由細菌感染引起的示例性疾病包括但不限於炭疽，霍亂，白喉，食源性疾病，麻風病，腦膜炎，消化性潰瘍病，肺炎，敗血症，破傷風，結核病，傷寒以及尿路感染。

示例性適用的神經變性疾病是阿爾茲海默症，亨廷頓病，帕金森氏病，肌萎縮性脊髓側索硬化症，hiv相關性痴呆，腦缺血，多發性硬化症，路易體病，menke氏病，，威爾遜氏病，克雅氏病以及fahr疾病。

示例性適用的肌營養不良症或相關疾病是貝克氏肌營養不良症，杜氏肌營養不良症，肌強直性營養不良症，肢帶型肌營養不良症，蘭迪二式肌營養不良，面肩胛肱型肌營養不良(steinert氏病)，先天性肌強直症，湯姆森氏病和龐貝氏症。肌肉消瘦可能與癌症，愛滋病，充血性心力衰竭和慢性阻塞性肺疾病有關，還包括重症監護病人的壞死性肌病。

除非有相反的提示或另有說明，在這些描述和整個說明書中，術語「一個」是指一個或多個，術語「或」指和/或，並且多核苷酸序列應被理解為包括相反鏈以及本文所述的可選擇骨架。此外，屬類為該屬類所有成員的敘述的簡稱；例如，(c1-c3)烷基的敘述是所有c1-c3烷基敘述的簡寫：甲基，乙基和丙基，包括其異構體。

本文所述術語「雜原子」通常是指碳或氫之外的任何原子。優選的雜原子包括氧(o)、磷(p)、硫(s)、氮(n)和滷素，且優選的雜原子官能團為滷代甲醯基、羥基、醛、胺、偶氮、羧基、氰基、硫氰酸鹽、羰基、滷素、過氧羥基、亞胺、醛亞胺、異氰化物、異氰酸酯、硝酸鹽、腈、亞硝酸鹽、硝基、亞硝基、磷酸鹽、膦醯基、硫化物、磺醯基、磺基和巰基。

除非另外說明，術語「烷基」本身或作為另一取代基的一部分，是指直鏈或支鏈或者環狀烴基，或其組合，其為完全飽和的具有指定碳原子數(即c1-c8指1至8個碳)。烷基的實例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、叔丁基、異丁基、仲丁基、環己基、(環己基)甲基、環丙基甲基，以及如正戊基、正己基、正庚基、正辛基等同系物和異構體。

術語「烯基」本身或作為另一取代基的一部分，是指直鏈或支鏈或環狀烴基或其組合，其可以是單不飽和或多不飽和的，具有指定的碳原子數(即c2-c8指2至8個碳)和一個或多個雙鍵。烯基的實例包括乙烯基、2-丙烯基、巴豆基、2-異戊烯基、2-(丁二烯基)、2,4-戊二烯基、3-(1,4-戊二烯基)及其高級同系物和異構體。

術語「炔基」本身或作為另一取代基的一部分，是指直鏈或支鏈烴基或其組合，其可以是單不飽和或多不飽和的，具有指定的碳原子數(即c2-c8指2至8個碳)和一個或多個三鍵。炔基的實例包括乙炔基、1-和3-丙炔基、3-丁炔基及其高級同系物和異構體。

術語「亞烷基」本身或作為另一取代基的一部分是指衍生自烷基的二價基團，例如以-ch2-ch2-ch2-ch2-實例。通常，烷基(或亞烷基)基團將具有1至24個碳原子，在本發明中優選具有10個或更少碳原子的那些基團。「低級烷基」或「低級亞烷基」為較短鏈的烷基或亞烷基，通常具有8個或更少的碳原子。

術語「烷氧基」，「烷基氨基」和「烷硫基」(或硫代烷氧基)以其常規含義使用，並且分別指的是通過氧原子、氨基或硫原子與分子剩餘部分連接的那些烷基。

除非另外說明，術語「雜烷基」本身或與另一術語組合是指穩定的直鏈或支鏈或環狀烴基或其組合，由確定數目的碳原子和一至三個選自氧、氮、磷、矽和硫的雜原子組成，其中氮、硫和磷原子可任選地被氧化，且氮雜原子可任選地被季銨化。雜原子氧、氮、磷和硫可置於雜烷基的任何內部位置。雜原子矽可置於雜烷基的任何位置，包括烷基與分子剩餘部分連接的位置。實例包括-ch2-ch2-o-ch3，-ch2-ch2-nh-ch3,，-ch2-ch2-n(ch3)-ch3，-ch2-s-ch2-ch3，-ch2-ch2，-s(o)-ch3，-ch2-ch2-s(o)2-ch3，-ch＝ch-o-ch3，-si(ch3)3，-ch2-ch＝n-och3，和-ch＝ch-n(ch3)-ch3。最多兩個雜原子可以是連續的，例如-ch2-nh-och3和-ch2-o-si(ch3)3。

類似地，術語「雜亞烷基」本身或作為另一取代基的一部分是指衍生自雜烷基的二價基團，例如以-ch2-ch2-s-ch2-ch2-和-ch2-s-ch2-ch2-nh-ch2-為實例。對於雜亞烷基，雜原子也可以佔據鏈末端的任一個或兩個(例如亞烷基氧基、亞烷基二氧基、亞烷基氨基、亞烷基二氨基等)。此外，對於亞烷基和雜亞烷基連接基團，沒有暗示連接基團的取向。

除非另外說明，術語「環烷基」和「雜環烷基」自身或與其它術語組合，分別表示「烷基」和「雜烷基」的環狀形式。相應地，環烷基具有指定的碳原子數(即c3-c8表示3至8個碳)，並且還可以具有一個或兩個雙鍵。雜環烷基由指定的碳原子數和選自氧，氮，矽和硫的一至三個雜原子組成，並且其中氮和硫原子可任選地被氧化，且氮雜原子可任選地被季銨化。另外，對於雜環烷基，雜原子可以佔據雜環與分子的剩餘部分連接的位置。環烷基的實例包括環戊基、環己基、1-環己烯基、3-環己烯基、環庚基等。雜環烷基的實例包括1-(1,2,5,6-四氫吡啶基)、1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-嗎啉基、3-嗎啉基、四氫呋喃-2-基、四氫呋喃-3-基、四氫噻吩-2-基、四氫噻吩-3-基、1-哌嗪基、2-哌嗪基等。

除非另有說明，術語「滷代」和「滷素」本身或作為另一取代基的一部分，是指氟，氯，溴或碘原子。另外，術語例如「滷代烷基」是指包括被一個到(2m'+1)的數目範圍內的相同或不同的滷素原子取代的烷基，其中m'是烷基中碳原子的總數。例如，術語「滷代(c1-c4)烷基」是指包括三氟甲基、2,2,2-三氟乙基、4-氯丁基、3-溴丙基等。因此，術語「滷代烷基」包括單滷代烷基(被一個滷素原子取代的烷基)和多滷代烷基(被2至(2m'+1)個滷素原子取代的烷基，其中m'為烷基中碳原子的總數)。除非另外說明，術語「全滷代烷基」是指被(2m'+1)個滷素原子取代的烷基，其中m'是烷基中的碳原子的總數。例如術語「全滷代(c1-c4)烷基」是指包括三氟甲基、五氯乙基、1,1,1-三氟-2-溴-2-氯乙基等。

術語「醯基」是指通過除去酸的羥基部分衍生自有機酸的那些基團。相應地，醯基是指包括如乙醯基、丙醯基、丁醯基、癸醯基、新戊醯基、苯甲醯基等。

除非另外說明，術語「芳基」是指多不飽和的，通常為芳香族的烴取代基，其可以是稠合在一起或共價連接的單環或多環(至多三個環)。芳基的非限制性實例包括苯基、1-萘基、2-萘基、4-聯苯基和1,2,3,4-四氫萘。

術語「雜芳基」是指含有0至4個選自氮，氧和硫的雜原子的芳基(或環)，其中氮和硫原子任選地被氧化，且氮雜原子任選地被季銨化。雜芳基可以通過雜原子連接到分子的剩餘部分。雜芳基的非限制性實例包括1-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、3-吡唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、吡嗪基、2-惡唑基、4-惡唑基、2-苯基-4-惡唑基、5-惡唑基、3-異惡唑基、4-異惡唑基、5-異惡唑基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、2-呋喃基、3-呋喃基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-苯並噻唑基、嘌呤基、2-苯並咪唑基、5-吲哚基、1-異喹啉基、5-異喹啉基、2-喹喔啉基、5-喹喔啉基、3-喹啉基和6-喹啉基。

為簡便起見，當與其它術語(例如芳氧基芳基硫氧基芳基烷基)組合使用時，術語「芳基」包括如上定義的芳環和雜芳基環。因此，術語「芳基烷基」是指包括其中芳基連接至烷基的那些基團(例如苄基、苯乙基、吡啶基甲基等)，所述烷基包括其碳原子(例如亞甲基基團)被例如氧原子替代的烷基基團(如苯氧基甲基、2-吡啶基氧基甲基、3-(1-萘氧基)丙基等)。

上述術語(如「烷基」、「雜烷基」、「芳基」和「雜芳基」)中的每一個是指包含所示基團的取代和未取代兩種形式。每種類型的基團的優選取代基提供如下。

烷基和雜烷基(以及被稱為亞烷基、烯基、雜亞烷基、雜烯基、炔基、環烷基、雜環烷基、環烯基和雜環烯基的那些基團)的取代基可以是選自以下的各種基團：-or'、＝o、＝nr'、＝n-or'、-nr'r"、-sr'、滷素、-sir'r"r″′、-oc(o)r'、-c(o)r'、-co2r'、-conr'r"、-oc(o)nr'r"、-nr"c(o)r'、-nr'-c(o)nr"r″′、-nr'-so2nr″′、-nr"co2r'、-nh-c(nh2)＝nh、-nr'c(nh2)＝nh、-nh-c(nh2)＝nr'、-s(o)r'、-so2r'、-so2nr'r"、-nr"so2r，-cn和-no2，數量範圍從0至3，那些具有0、1或2個取代基的基團是特別優選的。r'、r"和r″′每個獨立地指氫、未取代的(c1-c8)烷基和雜烷基、未取代的芳基、被一至三個滷素取代的芳基、未取代的烷基、烷氧基或硫代烷氧基，或芳基-(c1-c4)烷基基團。當r'和r"連接到相同的氮原子時，它們可以與氮原子組合形成5-，6-或7-元環。例如，-nr'r"是指包括1-吡咯烷基和4-嗎啉基。通常，烷基或雜烷基具有0至3個取代基，在本發明中優選具有兩個或更少取代基的那些基團。更優選地，烷基或雜烷基將是未取代的或單取代的。最優選地，烷基或雜烷基是未取代的。從上述取代基的討論中，本領域技術人員將理解術語「烷基」意指包括例如三滷代烷基(例如，-cf3和-ch2cf3)的基團。

烷基和雜烷基的優選取代基選自：-or'、＝o、-nr'r"、-sr'、滷素、-sir'r"r″′、-oc(o)r'、-c(o)r'、-co2r'、-conr'r"、oc(o)nr'r"、-nr"c(o)r'、-nr"co2r'、-nr'-so2nr"r″′、-s(o)r'、-so2r'、-so2nr'r"、-nr"so2r、-cn和-no2，其中r'和r"如上面所定義的。進一步優選的取代基選自：-or'、＝o、-nr'r"、滷素、-oc(o)r'、-co2r'、-conr'r"、-oc(o)nr'r"、-nr"c(o)r'、-nr"co2r'、-nr'-so2nr"r″′、-so2r'、-so2nr'r"、-nr"so2r，-cn和-no2。

類似地，芳基和雜芳基的取代基是不同的，並且選自：滷素、-or'、-oc(o)r'、-nr'r"、-sr'、-r'、-cn、-no2、-co2r'、-conr'r"、-c(o)r'、-oc(o)nr'r"、-nr"c(o)r'、-nr"co2r'、-nr'-c(o)nr"r″′、-nr'-so2nr"r″′、-nh-c(nh2)＝nh、-nr'c(nh2)＝nh、-nh-c(nh2)＝nr'、-s(o)r'、-so2r'、-so2nr'r"、-nr"so2r、-n3、-ch(ph)2，全氟(c1-c4)烷氧基和全氟(c1-c4)烷基，數量範圍為0至芳族環系統上的開放化合價的總數；並且其中r'，r"和r″′獨立地選自氫、(c1-c8)烷基和雜烷基、未取代的芳基和雜芳基、(未取代的芳基)-(c1-c4)烷基和(未取代的芳基)氧基-(c1-c4)烷基。當芳基是1,2,3,4-四氫萘時，它可以被取代或未取代的(c3-c7)螺環烷基取代。(c3-c7)螺環烷基可以以本文對「環烷基」所定義的相同方式取代。通常，芳基或雜芳基具有0至3個取代基，在本發明中優選具有兩個或更少取代基的那些基團。在本發明的一個實施方案中，芳基或雜芳基是未取代的或單取代的。在另一個實施方案中，芳基或雜芳基將是未取代的。

芳基和雜芳基的優選取代基選自：滷素、-or'、-oc(o)r'、-nr'r"、-sr'、-r'、-cn、-no2、-co2r'、-conr'r"、-c(o)r'、-oc(o)nr'r"、-nr"c(o)r'、-s(o)r'、-so2r'、-so2nr'r"、-nr"so2r、-n3、-ch(ph)2、全氟(c1-c4)烷氧基和全氟(c1-c4)烷基，其中r'和r"如上所定義。進一步優選的取代基選自：滷素、-or'、-oc(o)r'、-nr'r"、-r'、-cn、-no2、-co2r'、-conr'r"、-nr"c(o)r'、-so2r'、-so2nr'r"、-nr"so2r，全氟(c1-c4)烷氧基和全氟(c1-c4)烷基。

本文所用的取代基-co2h包括其生物電子等排置換；參見例如thepracticeofmedicinalchemistry；wermuth，c.g.，ed.；academicpress:newyork,1996；p.203。

芳環或雜芳基環的相鄰原子上的兩個取代基可任選地被式-t-c(o)-(ch2)q-u-的取代基替代，其中t和u獨立地為-nh-、-o-，-ch2-或單鍵，且q為0-2的整數。或者，芳環或雜芳基環的相鄰原子上的兩個取代基可任選地被式-a-(ch2)r-b-的取代基替代，其中a和b獨立地為-ch2-、-o-、-nh-、-s-、-s(o)-、-s(o)2-，-s(o)2nr'-或單鍵，且r為1-3的整數。如此形成的新環的單鍵之一可任選地被雙鍵代替。或者，芳環或雜芳基環的相鄰原子上的兩個取代基可任選地被式-(ch2)s-x-(ch2)t-的取代基替代，其中s和t獨立地為0至3的整數，並且x為-o-、-nr'-、-s-、-s(o)-，-s(o)2-或-s(o)2nr'-。-nr'-和-s(o)2nr'-中的取代基r'選自氫或未取代的(c1-c6)烷基。

本文公開了優選的取代基並在表格、結構，實施例和權利要求中舉例說明，並且取代基可以應用於本發明的不同化合物，即任何給定化合物的取代基可以與其它化合物組合使用。

在具體的實施方案中，適用的取代基獨立地為取代或未取代的雜原子，取代或未取代的、0-3個雜原子c1-c6烷基，取代或未取代的、0-3個雜原子c2-c6烯基，取代或未取代的、0-3個雜原子c2-c6炔基，或取代或未取代的、0-3個雜原子c6-c14芳基，其中每個雜原子獨立地為氧、磷，硫或氮。

在更具體的實施方案中，適用的取代基獨立地為醛、醛亞胺、烷醯氧基、烷氧基、烷氧基羰基、烷氧基、烷基、胺、偶氮、滷素、氨基甲醯基、羰基、甲醯氨基、羧基、氰基、酯、滷代、滷代甲醯基、過氧烴基、羥基、亞胺、異氰化物、異氰酸酯、n-叔丁氧羰基、硝酸鹽、腈、亞硝酸鹽、硝基、亞硝基、磷酸酯、膦醯基、硫化物、磺醯基、磺基、巰基、硫醇、硫氰基，三氟甲基或三氟甲基醚(ocf3)。

術語「藥學上可接受的鹽」意指包括用相對無毒的酸或鹼製備的活性化合物的鹽，這取決於在本文所述化合物上發現的具體取代基。當本發明的化合物含有相對酸性的官能團時，鹼加成鹽可以通過使這種化合物的中性形式與足量的所需鹼(要麼是純的要麼在合適的惰性溶劑中)接觸來獲得。藥學上可接受的鹼加成鹽的實例包括鈉、鉀、鈣、銨，有機胺或鎂鹽，或類似的鹽。當本發明的化合物含有相對鹼性的官能團時，酸加成鹽可以通過將這種化合物的中性形式與足量的所需酸(要麼是在純的要麼在合適的惰性溶劑中)接觸來獲得。藥學上可接受的酸加成鹽的實例包括那些衍生自無機酸的如鹽酸、氫溴酸、硝酸、碳酸、一氫碳酸、磷酸、一氫磷酸、二氫磷酸、硫酸、一氫硫酸，氫碘酸或亞磷酸等，和衍生自相對無毒的有機酸如乙酸、丙酸、異丁酸、草酸、馬來酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、富馬酸、扁桃酸、鄰苯二甲酸、苯磺酸、對甲苯磺酸、檸檬酸、酒石酸，甲磺酸等的鹽。還包括胺基酸，例如精氨酸等的鹽，以及有機酸，如葡糖醛酸或半乳糖醛酸等的鹽。本發明的某些特定化合物同時含有鹼性和酸性官能團，其允許化合物轉化為鹼或酸加成鹽。

化合物的中性形式可以通過使鹽與鹼或酸接觸並以常規方式分離母體化合物來再生成。化合物的母體形式在某些物理特性，例如在極性溶劑中的溶解度方面，不同於各種鹽的形式，但是對於本發明的目的而言，這些鹽等同於化合物的母體形式。

除了鹽形式之外，本發明提供了前藥形式的化合物。本文所述的化合物的前藥是指在生理條件下經過化學變化以提供本發明化合物的那些化合物。另外，前藥可以在體外環境中通過化學或生物化學方法轉化為本發明的化合物。例如，當與合適的酶或化學試劑共同置於透皮貼劑儲庫中時，前藥可被緩慢轉化為本發明的化合物。前藥通常是有用的，因為在一些情況下，它們可能比母體藥物更容易施用。例如，它們可能比母體藥物更具口服生物利用度。前藥在藥物組合物中也可能有比母體藥物改善的溶解性。本領域已知各種各樣的前藥衍生物，例如依賴於水解裂解或氧化活化的那些前藥。前藥的一個非限制性實例是本發明中的一個化合物作為酯(「前藥」)給藥，但隨後代謝水解成羧酸，即活性形式。另外的實例包括本發明化合物的肽基衍生物。

本發明的某些化合物可以非溶劑化形式以及溶劑化形式存在，包括水合物形式。通常，溶劑化形式等同於非溶劑化形式，並且包括在本發明的範圍內。本發明的某些化合物可以以多種結晶或無定形形式存在。通常，所有物理形式對於本發明考慮的用途是等效的，並且包含在本發明的範圍內。

本發明某些化合物具有不對稱碳原子(光學中心)或雙鍵；外消旋體、非對映異構體，幾何異構體和單個異構體都旨在包括在本發明的範圍內。

本發明的化合物還可以在構成這種化合物的一個或多個原子處含有非天然比例的原子同位素。例如，化合物可以用放射性同位素放射性標記，例如氚(3h)，碘-125(125i)或碳-14(14c)。本發明化合物的所有同位素變體，無論是否是放射性的，都旨在包括在本發明的範圍內。

術語「治療有效量」是指將在一定程度上引起組織、系統、動物或人的生物或醫學反應的題述化合物的量，這正是研究者、獸醫、醫生或其他臨床醫生所尋求的，例如當施用時，足以預防所治療的病症或障礙的一種或多種症狀的發展或在一定程度上減輕所治療的病症或障礙的一種或多種症狀。治療有效量會根據化合物、疾病及其嚴重程度，以及待治療的哺乳動物的年齡、體重等的不同而變化。

本發明還提供了包含題述化合物和藥學上可接受的賦形劑的藥物組合物，特別是包含單位劑量的題述化合物的組合物，尤其是該組合物與描述組合物用於治療適用疾病或病症(本文中)的說明書共包裝。

施用的組合物可以是散裝液體溶液或懸浮液或散裝粉末的形式。然而，更普遍地，組合物以單位劑型呈現以促進精確給藥。術語「單位劑型」是指適合作為人類受試者和其它哺乳動物的單位劑量的物理上不連續的單位，每個單位含有計算產生所需治療效果的預定量的活性物質，並與合適的藥物輔料結合。典型的單位劑型包括液體組合物的預先填充的、預先測量的安瓿或注射器，或在固體組合物的情況下的丸劑、片劑、膠囊、錠劑等。在這樣的組合物中，化合物通常是次要組分(約從0.1％至50％重量，或優選地約為從1％至40％重量)，其餘是各種載體和加工助劑，有助於形成所需劑量。

合適的賦形劑或載體和用於製備可施用組合物的方法是本領域技術人員已知或顯而易見的，並且在諸如remington'spharmaceuticalscience，mackpublishingco，nj(1991)的出版物中有更詳細地描述。此外，該化合物與本文所述的或本領域已知的其它治療劑、特別是其它抗壞死劑，聯合用藥時可有利地使用。因此，組合物可以單獨、聯合或組合施用於單一劑量單位。

施用量取決於化合物劑型，施用途徑等，並且通常在常規試驗中憑經驗確定，並且根據靶標、宿主和施用途徑等將必然發生變化。通常，根據具體應用，單位劑量製劑中活性化合物的量可以從約1，3，10或30到約30，100，300或1000mg變化或調節。在一個具體實施方案中，單位劑型包裝在適於順序使用的多包裝中，例如泡罩包裝，包括至少6，9或12個單位劑型的片材。所用的實際劑量可以根據患者的需要和所治療的病症的嚴重程度而變化。對於特定情況的適當劑量的確定在本領域的技術範圍內。通常，用小於化合物最佳劑量的較小劑量開始治療。此後，劑量增加少量，直到達到在這種情況下的最佳效果。為了方便起見，如果需要，總日劑量可以分開並在當天內分批給藥。

化合物可以通過多種方法施用，包括但不限於胃腸外、體表、口服或局部施用，例如通過氣霧劑或經皮，用於預防和/或治療性處理。此外，根據熟練臨床醫生的知識，治療方案(例如，給藥的劑量和次數)可以視所觀察到的給予的治療劑對患者的作用及所觀察到的疾病與所施用的治療劑的反應而變化。

在用於治療患者的治療有效方案的過程中，可以以治療有效劑量和總量施用本發明的治療劑。對於更有效的化合物，每千克患者的微克(μg)量可能是足夠的，例如在約1，10或100ug/kg至約0.01，0.1，1，10或100mg/kg的患者體重範圍內，儘管最佳劑量是化合物特定的，並且通常每種化合物是根據經驗確定的。

一般來說，臨床試驗中的常規實驗將確定最佳治療效果的具體範圍，對於每種治療劑，每種給藥方案，並且對特定患者的給藥也將根據患者狀況和對初始劑量的反應被調整到有效和安全的範圍內。然而，最終給藥方案將根據主治臨床醫生的判斷，考慮諸如年齡、病人的狀況和大小以及化合物效力、所治療疾病的嚴重性等因素來調整。例如，化合物的劑量方案可以是以兩至四個(優選兩個)分開的劑量口服給藥，從10毫克至2000毫克/天，優選的是10至1000毫克/天，更優選的是50至600毫克/天。還可以使用間歇治療(例如，三周內一周或四周內三周)。

應理解，本文所述的實施例和實施方案僅用於說明目的，並且鑑於本領域技術人員會聯想到其各種修改或變化，且包括在本申請的精神和範圍以及所附權利要求的範圍內。本文引用的所有出版物、專利和專利申請(包括其中的引用)在此以其全文併入作為參考用於所有目的。

實施例

1.表1.化合物列表

2.化合物的製備

化合物1：n-(2-氟苄基)-2,2-二甲基丁醯胺的製備

在攪拌下，將socl2(30ml)加入到甲苯中的2,2-二甲基丁酸(5.22g)中。然後將反應混合物加熱至80℃保持5小時。除去溶劑後，得到4.268g2,2-二甲基丁醯氯，將其溶解在dcm中，並在0℃滴加到溶於含有tea(4.8g)和溶於dcm中的(2-氟苯基)甲胺(1.698g)中。在室溫下繼續攪拌10小時。在通過tlc判定所有胺消耗後，用冰水猝滅混合物。用dcm萃取，用na2so4乾燥，濃縮並通過矽膠柱色譜純化，得到所需產物(2.57g，72.6％)。1hnmr(cdcl3):δ7.30-7.34(m,1h),7.23-7.25(m,1h),7.00-7.11(m,2h),6.06(br,1h),4.48(d,2h,j＝6.0hz),1.55(q,2h,j＝7.6hz),1.16(s,6h),0.81(t,3h,j＝7.6hz).

化合物2：n-苄基三甲基乙醯胺的製備

苯基甲胺(80.3mg)和三乙胺(0.625ml)溶解在dcm(2ml)中，在0℃下加入新戊醯氯(120mg)，室溫下攪拌3小時。混合物用冰水淬滅。用dcm萃取，用na2so4乾燥，濃縮並通過矽膠柱色譜純化，得到所需產物(58.6mg，40.9％)。1hnmr(cdcl3):δ7.25-7.37(m,5h),5.89(br,1h),4.45(d,2h,j＝5.6hz),1.23(s,9h).

化合物3：n-(2-溴苄基)-2,2-二甲基丁醯胺的製備

根據化合物1概述的步驟，由(2-溴苯基)甲胺(93mg)和2,2-二甲基丁醯氯(80.76mg)製備標題化合物3，產率為58.3％。1hnmr(cdcl3):δ7.55(d,1h,j＝8.0hz),7.37-7.40(m,1h),7.26-7.30(m,1h),7.12-7.17(m,1h)6.14(br,1h),4.50(d,2h,j＝6.0hz),1.55(q,2h,j＝7.6hz),1.16(s,6h),0.80(t,3h,j＝7.6hz).

化合物4：2,2-二甲基-n-(2-(三氟甲基)苄基)丁醯胺的製備

根據化合物1概述的步驟，由2-(三氟甲基)苯基)-甲胺(87.6mg)和2,2-二甲基丁醯氯(105mg)製備標題化合物4，產率為71％。1hnmr(cdcl3):δ7.64-7.66(d,1h,j＝8.0hz),7.50-7.56(m,2h),7.36-7.40(m,1h),5.97(br,1h),4.62(d,2h,j＝4.8hz),1.55(q,2h,j＝7.6hz),1.15(s,6h),0.80(t,3h,j＝7.6hz).

化合物5：n-(3-氟苄基)-2,2-二甲基丁醯胺的製備

根據化合物1概述的步驟，從(3-氟苯基)甲胺(93mg)和2,2-二甲基丁醯氯(80.74mg)製備標題化合物5，產率為70％。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.33–7.27(m,1h),7.04(d,j＝8.0hz,1h),6.93-6.98(m,2h),4.45(d,j＝5.8hz,2h),1.58(q,j＝7.5hz,3h),1.19(s,6h),0.86(t,j＝7.5hz,3h)。

化合物6：n-(3-溴苄基)-2,2-二甲基丁醯胺的製備

根據化合物1概述的步驟，由(3-溴苯基)甲胺(93mg)和2,2-二甲基丁醯氯(105mg)製備標題化合物6，產率為87％。1hnmr(cdcl3):δ7.38-7.41(m,2h),7.17-7.21(m,2h),5.96(br,1h),4.42(d,2h,j＝6.0hz),1.55(q,2h,j＝7.6hz),1.15(s,6h),0.80(t,3h,j＝7.6hz).

化合物7：n-(2,4-二氟苄基)-2,2-二甲基丁醯胺的製備

根據化合物1概述的步驟，由(2,4-二氟苄基)-甲胺(228.8mg)和2,2-二甲基丁醯氯(430.3mg)製備標題化合物7，收率：40.9％。1hnmr(cdcl3):δ7.30-7.36(m,1h),6.77-6.86(m,2h),5.97(br,1h),4.44(d,2h,j＝6.0hz),1.55(q,2h,j＝7.6hz),1.17(s,6h),0.80(t,3h,j＝7.6hz).

化合物8：n-(3,4-二氟苄基)-2,2-二甲基丁醯胺的製備

根據化合物1概述的步驟，由(3,4-二氟苄基)-甲胺(114.4mg)和2,2-二甲基丁醯氯(215mg)製備標題化合物8，收率：71.3％。1hnmr(cdcl3):δ7.06-7.14(m,2h),6.97-7.00(m,1h),5.95(br,1h),4.40(d,2h,j＝6.0hz),1.56(q,2h,j＝7.6hz),1.17(s,6h),0.84(t,3h,j＝7.6hz).

化合物9：2,2-二甲基-n-(吡啶-3-基甲基)丁醯胺的製備

根據化合物1概述的步驟，由吡啶-3-基甲胺(54.07mg)和2,2-二甲基丁醯氯(134.6mg)製備化合物9，收率，51.2％。1hnmr(cdcl3):δ8.52(s,2h)7.61-7.64(m,1h),7.25-7.28(m,1h),6.05(br,1h),4.47(d,2h,j＝6.0hz),1.58(q,2h,j＝7.6hz),1.18(s,6h),0.84(t,3h,j＝7.6hz).

化合物10：n-乙基-n-(2-氟苄基)-2,2-二甲基丁醯胺的製備

將n-(2-氟苄基)-2,2-二甲基丁醯胺(40mg)溶於4ml無水dmf中，在0℃和n2下加入8.61mgnah，並攪拌2小時。加入碘乙烷(56.2mg)，使混合物溫熱至室溫並攪拌11小時。將混合物用冷水淬滅並用dcm萃取，合併的有機層用水，鹽水洗滌，用na2so4乾燥，濃縮，殘餘物通過矽膠柱色譜純化，得到產物(9.3mg，20.6％)。1hnmr(cdcl3):δ7.22-7.26(m,2h),7.03-7.12(m,2h),4.69(s,2h),3.43(d,2h,j＝5.2hz),1.67(q,2h,j＝7.6hz),1.26(s,6h),1.17(t,3h,j＝6.8hz),0.89(t,3h,j＝7.6hz).

化合物11：n-(2-氟苄基)-2,2-二甲基-n-(丙-2-炔-1-基)丁醯胺的製備

按照化合物10概述的步驟，以42％的收率製備n-(2-氟苄基)丙-2-炔-1-胺，使用68.2mg的醯胺作為起始原料，並與2,2-二甲基丁醯氯(170mg)反應，所需化合物11以30％的收率製備。1hnmr(cdcl3):δ7.23-7.26(m,2h),7.03-7.13(m,2h),4.83(s,2h),4.15(d,2h,j＝2.4hz),2.23(t,1h,j＝2.4hz),1.70(q,2h,j＝7.6hz),1.29(s,6h),0.89(t,3h,j＝7.6hz)。

化合物12：n-(2-氟苄基)-2,2-二甲基-n-(3-氧代丁基)丁醯胺的製備

將(2-氟苯基)甲胺(125mg)，多聚甲醛(36mg)，丙酮(116mg)和濃鹽酸(0.1ml)在etoh(1ml)中的混合物在密封的燒瓶中在110℃下加熱16小時。混合物冷卻至室溫，除去溶劑並加入etoac，所得懸浮液劇烈攪拌1小時，然後過濾並用etac洗滌，得到200mg4-((2-氟苄基)氨基)丁-2-酮，其不經進一步純化直接用於下一步驟。

將所得醯胺(200mg)溶於無水thf(10ml)中，加入tea(0.3ml)。將混合物冷卻至0℃，加入2,2-二甲基丁醯氯(274mg)，並在室溫下攪拌4小時。混合物用水淬滅並用etoac萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用na2so4乾燥。除去溶劑後，殘餘物通過矽膠柱色譜純化，得到化合物12(180mg，60％)。1hnmr(cdcl3):δ7.23-7.28(m,1h),7.10-7.19(m,2h),7.02-7.07(m,1h),4.75(s,2h),3.54(br,2h),2.77(t,2h,j＝7.2hz),2.13(s,3h),1.66(q,2h,j＝7.6hz),1.23(s,6h),0.89(t,3h,j＝7.6hz).

化合物13：n-(2-氟苄基)-n,2,2-三甲基丁醯胺的製備

試劑和條件：(a):(1)ch3nh2.hcl，k2co3，meoh，室溫，1.5h；(b):nabh4(c)2,2-二甲基丁醯氯，diea，thf，室溫，2小時。

將k2co3(207mg，1.5mmol)和甲胺鹽酸鹽(202mg，3.0mmol)在5mlmeoh中的混合物在室溫下攪拌30分鐘。然後向混合物中加入2-氟苯甲醛(248mg，2.0mmol)，並在室溫下攪拌1小時。將混合物冷卻至0℃，分批加入nabh4(113.5mg，3.0mmol)。將混合物在0℃下攪拌1小時。將固體過濾並用etoac洗滌。將濾液蒸發至幹，將殘餘物溶於etoac中，用水，鹽水洗滌，用na2so4乾燥。將殘餘物溶於10ml無水thf中。加入diea(264mg，2.05mmol)，在0℃，氮氣下將2,2-二甲基丁醯氯(275mg，2.05mmol)緩慢加入到溶液中，然後在室溫下攪拌2小時。向溶液中加入15ml水，用etoac(10ml×3)萃取。將合併的有機物用1mhcl，鹽水洗滌，用na2so4乾燥並真空濃縮。殘餘物通過矽膠柱色譜法(pe/ea＝1/2)純化，得到230mg褐色固體的1(總產率：45.1％)。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ(ppm)7.22-7.28(m,2h),7.01-7.12(m,2h),4.68(s,2h),3.05(s,3h),1.65(q,2h,j＝7.6hz),1.27(s,6h),0.89(t,3h,j＝7.6hz)lc-ms(esi)[m+h]+c14h20fno計算值,238.2；測得值,238.4。

化合物14：n-(2-氯苄基)-n,2,2-三甲基丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由2-氯苯甲醛(281mg)，甲胺鹽酸鹽(202mg)和2,2-二甲基丁醯氯(275mg)製備標題化合物14，產率48％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.35-7.37(m,1h),7.16-7.25(m,3h),4.74(s,2h),3.05(s,3h),1.70(q,2h,j＝7.6hz),1.28(s,6h),0.91(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c14h20clno,254.2；測得值,254.4。

化合物15：n-(2-甲氧基苄基)-n,2,2-三甲基丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由2-甲氧基苯甲醛(136mg),甲胺鹽酸鹽(101mg)和2,2-二甲基丁醯氯(140mg)製備標題化合物15，產率65％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.21-7.26(m,1h),7.09-7.13(m,1h),6.86-6.95(m,2h),4.66(s,2h),3.83(s,3h),2.99(s,3h),1.68(q,2h,j＝7.6hz),1.26(s,6h),0.90(t,3h,j＝7.6hz)lc-ms(esi)[m+h]+計算值c15h23no2,250.1；測得值250.3。

化合物16：n-(3-氟苄基)-n,2,2-三甲基丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由3-氟苯甲醛(124mg)，甲胺鹽酸鹽(101mg)和2,2-二甲基丁醯氯(140mg)製備標題化合物16，產率65％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.25-7.31(m,1h),6.91-7.01(m,3h),4.61(s,2h),3.01(s,3h),1.69(q,2h,j＝7.6hz),1.29(s,6h),0.90(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c14h20fno,238.1；測得值，238.4。

化合物17：n-(3-氰基苄基)-n,2,2-三甲基丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由3-甲醯基苄腈(131mg)，甲胺鹽酸鹽(101mg)和2,2-二甲基丁醯氯(140mg)，製備標題化合物17，產率62％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.41-7.56(m,4h),4.61(s,2h),3.05(s,3h),1.68(q,2h,j＝7.6hz),1.28(s,6h),0.88(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c15h20n2o,245.1；測得值，245.3。

化合物18：n-(3-氯苄基)-n,2,2-三甲基丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由3-氯苯甲醛(140mg)，甲胺鹽酸鹽(101mg)和2,2-二甲基丁醯氯(140mg)，製備標題化合物18，產率48％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.20-7.26(m,3h),7.10-7.12(m,1h),4.59(s,2h),3.01(s,3h),1.68(q,2h,j＝7.6hz),1.28(s,6h),0.90(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c14h20clno,254.1；測得值254.3。

化合物19：n-(3-溴苄基)-n,2,2-三甲基丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由3-溴苯甲醛(185mg)，甲胺鹽酸鹽(101mg)和2,2-二甲基丁醯氯(140mg)，製備標題化合物19，產率48％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ77.36-7.40(m,2h),7.16-7.22(m,2h),4.59(s,2h),3.01(s,3h),1.69(q,2h,j＝7.6hz),1.29(s,6h),0.90(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c14h20brno,298.1；測得值298.3,300.4。

化合物20：n-(3-甲氧基苄基)-n,2,2-三甲基丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由3-甲氧基苯甲醛(136mg)，甲胺鹽酸鹽(101mg)和2,2-二甲基丁醯氯(140mg)製備標題化合物20，產率57％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.22-7.25(m,1h),6.76-6.81(m,3h),4.61(s,2h),3.78(s,3h),2.98(s,3h),1.69(q,2h,j＝7.6hz),1.29(s,6h),0.91(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c15h23no2,250.2；測得值250.4。

化合物21：n-(3-羥基苄基)-n,2,2-三甲基丁醯胺的製備

根據化合物1概述的步驟，由3-羥基苯甲醛(122mg)，甲胺鹽酸鹽(101mg)和2,2-二甲基丁醯氯(140mg)製備標題化合物21，產率33％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.17(t,1h,j＝7.6hz),6.71-6.79(m,3h),4.58(s,2h),2.98(s,3h),1.68(q,2h,j＝7.6hz),1.29(s,6h),0.90(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+caladforc14h21no2,236.2；found,236.4.

化合物22：n-(3-(2-羥基乙氧基)苄基)-n,2,2-三甲基丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由4-(2-羥基乙氧基)苯甲醛(166mg)，甲胺鹽酸鹽(101mg)和2,2-二甲基丁醯氯(140mg)製備標題化合物22，產率48％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.14-7.17(m,2h),6.85-6.89(m,2h),4.56(s,2h),4.06-4.08(m,2h),3.94-3.96(m,2h),2.96(s,3h),1.67(q,2h,j＝7.6hz),1.27(s,6h),0.88(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c16h25no3,280.2；測得值,280.4。

化合物23：3-((n,2,2-三甲基丁醯氨基)甲基)苯甲酸甲酯的製備

根據化合物13概述的步驟，由3-甲醯基苯甲酸甲酯(164mg)，甲胺鹽酸鹽(101mg)和2,2-二甲基丁醯氯(140mg)，製備標題化合物23，產率46％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.87-7.94(m,2h),7.38-7.45(m,2h),4.66(s,2h),3.90(s,3h),3.01(s,3h),1.69(q,2h,j＝7.6hz),1.29(s,6h),0.90(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c16h23no3,278.2；測得值,278.4。

化合物24：n-(2,4-二氟苄基)-n,2,2-三甲基丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由2,4-二氟苯甲醛(284mg)，甲胺鹽酸鹽(202mg)和2,2-二甲基丁醯氯(275mg)製備標題化合物24，產率56％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.25-7.31(m,1h),6.76-6.86(m,2h),4.60(s,2h),3.06(s,3h),1.65(q,2h,j＝7.6hz),1.26(s,6h),0.85(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c14h19f2no,256.1；測得值,256.3。

化合物25：n-(2,5-二氟苄基)-n,2,2-三甲基丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由2,5二氟苯甲醛(284mg)，甲胺鹽酸鹽(202mg)和2,2-二甲基丁醯氯(275mg)製備標題化合物25，產率59％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ6.89-7.02(m,3h),4.63(s,2h),3.08(s,3h),1.68(q,2h,j＝7.6hz),1.28(s,6h),0.88(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值:c14h19f2no,256.1；測得值,256.4。

化合物26：n-(3,4-二氟苄基)-n,2,2-三甲基丁醯胺的製備

根據化合物1概述的步驟，由3,5-二氟苯甲醛(284mg)，甲胺鹽酸鹽(202mg)和2,2-二甲基丁醯氯(275mg)製備標題化合物14，產率59％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ6.89-6.75(m,3h),4.57(s,2h),3.04(s,3h),1.69(q,2h,j＝7.6hz),1.29(s,6h),0.90(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值:c14h19f2no,256.1；測得值,256.3。

化合物27：n-(4-氯-2-氟苄基)-n,2,2-三甲基丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由4-氯-2-氟苯甲醛(316mg)，甲胺鹽酸鹽(202mg)和2,2-二甲基丁醯氯(275mg)製備標題化合物27，產率59％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.21-7.26(m,1h),7.05-7.11(m,2h),4.60(s,2h),3.06(s,3h),1.65(q,2h,j＝7.6hz),1.26(s,6h),0.85(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c14h19clfno,272.1；測得值,272.4。

化合物28：n-(2-氟-4-甲氧基苄基)-n,2,2-三甲基丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由2-氟-4-甲氧基苯甲醛(208mg)，甲胺鹽酸鹽(202mg)和2,2-二甲基丁醯氯(275mg)製備標題化合物28，產率57％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.20(t,1h,j＝8.8hz),6.57-6.67(m,2h),4.59(s,2h),3.78(s,3h),3.01(s,3h),1.65(q,2h,j＝7.6hz),1.26(s,6h),0.86(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值:c15h22fno2,268.2；測得值,268.4。

化合物29：n-(2,4-二氟苄基)-n-乙基-2,2-二甲基丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由2,4-二氟苯甲醛(284mg)，乙胺鹽酸鹽(248mg)and2,2-二甲基丁醯氯(275mg)製備標題化合物29，產率57％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.22-7.26(m,1h),6.74-6.83(m,2h),4.59(s,2h),3.41-3.42(m,2h),1.63(q,2h,j＝7.6hz),1.23(s,6h),1.15(t,3h,j＝7.6hz),0.85(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值:c15h21f2no,270.2；測得值,270.4。

化合物30：n,2,2-三甲基-n-(3-硝基-4-(哌啶-1-基)苄基)丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由3-硝基-4-(哌啶-1-基)苯甲醛(234mg)，甲胺鹽酸鹽(101mg)和2,2-二甲基丁醯氯(193mg)製備標題化合物30，產率66％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.61(d,1h,j＝2.4hz),7.35(dd,1h,j＝8.4,2.4hz),7.16(d,1h,j＝8.4hz),4.54(s,2h),3.03-3.06(m,7h),1.73-1.77(m,4h),1.68(q,2h,j＝7.6hz),1.57-1.62(m,2h),1.28(s,6h),0.89(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值:c19h29n3o3,348.2；測得值，348.4。

化合物31：n-(2,3-二甲基苄基)-n,2,2-三甲基丁醯胺(31)的製備

根據化合物13概述的步驟，由2,3-二甲基苯甲醛(134mg)，甲胺鹽酸鹽(101mg)和2,2-二甲基丁醯氯(134mg)製備標題化合物31，產率76％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.05-7.09(m,2h),6.93-6.95(m,1h),4.65(s,2h),2.97(s,3h),2.29(s,3h),2.16(s,3h),1.69(q,2h,j＝7.6hz),1.28(s,6h),0.92(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值:c16h25no,248.2；測得值，248.4。

化合物32：n-(3,5-二甲基苄基)-n,2,2-三甲基丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由3,5-二甲基苯甲醛(134mg)，甲胺鹽酸鹽(101mg)和2,2-二甲基丁醯氯(134mg)製備標題化合物32，產率76％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ6.89(s,1h),6.82(s,2h),4.57(s,2h),2.96(s,3h),2.29(s,6h),1.69(q,2h,j＝7.6hz),1.29(s,6h),0.91(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值:c16h25no,248.2；測得值248.4。

化合物33：n-(2-氟-3-(三氟甲氧基)苄基)-n,2,2-三甲基丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，從2-氟-3-(三氟甲氧基)苯甲醛(192mg)，甲胺鹽酸鹽(101mg)和2,2-二甲基丁醯氯(134mg)製備標題化合物33，收率76％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.51(t,2h,j＝7.2hz),7.20(t,1h,j＝7.6hz),4.68(s,2h),3.11(s,3h),1.68(q,2h,j＝7.6hz),1.27(s,6h),0.86(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c15h19f4no2,322.1；測得值，322.3。

化合物34：n,2,2-三甲基-n-(吡啶-4-基甲基)丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由異煙醛(214mg)，甲胺鹽酸鹽(202mg)和2,2-二甲基丁醯氯(289mg)製備標題化合物34，產率86％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ8.55(brs,2h),7.13(d,2h,j＝5.6hz),4.59(s,2h),3.05(s,3h),1.69(q,2h,j＝7.6hz),1.28(s,6h),0.89(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c13h20n2o,221.2；測得值,221.4.

化合物35：n,2,2-三甲基-n-(吡啶-3-基甲基)丁醯胺的製備

根據化合物概述的步驟13，由菸鹼醛(214mg)，甲胺鹽酸鹽(202mg)和2,2-二甲基丁醯氯(289mg)製備標題化合物35，產率86％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ8.48-8.51(m,2h),7.58-7.61(m,1h),7.24-7.27(m,1h),4.59(s,2h),3.03(s,3h),1.66(q,2h,j＝7.6hz),1.27(s,6h),0.86(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c13h20n2o,221.2；測得值,221.4。

化合物36：n-((3-氟吡啶-4-基)甲基)-n,2,2-三甲基丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由3-氟異煙醛(125mg)，甲胺鹽酸鹽(101mg)和2,2-二甲基丁醯氯(134mg)製備標題化合物36，產率78％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ8.41(d,1h,j＝1.6hz),8.35(d,1h,j＝4.8hz),7.18(dd,1h,j＝6.0,5.2hz),4.65(s,2h),3.12(s,3h),1.68(q,2h,j＝7.6hz),1.27(s,6h),0.87(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c13h19fn2o,239.1；測得值，239.3。

化合物37：n-((2-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-n,2,2-三甲基丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由2-甲氧基吡啶甲醛(137mg)，甲胺鹽酸鹽(101mg)和2,2-二甲基丁醯氯(160mg)製備標題化合物37，產率72％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ8.06(dd,1h,j＝5.2,2.0hz),7.40(d,1h,j＝7.2hz),6.86(dd,1h,j＝7.2,5.2hz),4.56(s,2h),3.97(s,3h),3.05(s,3h),1.67(q,2h,j＝7.6hz),1.25(s,6h),0.87(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c14h22n2o2,251.2；測得值，251.4。

化合物38：n-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-n,2,2-三甲基丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由6-甲氧基吡啶甲醛(137mg)，甲胺鹽酸鹽(101mg)和2,2-二甲基丁醯氯(160mg)製備標題化合物38，收率72％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ8.01-8.02(m,1h),7.53(d,1h,j＝8.4),6.71(d,1h,j＝8.4),4.51(s,2h),3.92(s,3h),3.00(s,3h),1.66(q,2h,j＝7.6hz),1.26(s,6h),0.85(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c14h22n2o2,251.2；測得值251.4.

化合物39：n-(環己基甲基)-n,2,2-三甲基丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由環己基甲醛(112mg)，甲胺鹽酸鹽(101mg)和2,2-二甲基丁醯氯(160mg)製備標題化合物39，收率62％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δδ3.16(d,2h,j＝6.8hz),3.07(s,3h),1.92(m,1h),1.63-1.73(m,8h),1.24(s,6h),1.08-1.19(m,4h),0.87(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c14h27no,226.2；測得值，226.4。

化合物40：n,2,2-三甲基-n-(噻吩-2-基甲基)丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由噻吩-2-甲醛(224mg)，甲胺鹽酸鹽(101mg)和2,2-二甲基丁醯氯(119mg)製備標題化合物40，產率62％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.21(dd,1h,j＝4.8,1.6hz),6.92-6.95(m,2h),4.71(s,2h),3.05(s,3h),1.66(q,2h,j＝7.6hz),1.27(s,6h),0.86(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c12h19nos,226.1；測得值，226.4。

化合物41：n,2,2-三甲基-n-((3-甲基噻吩-2-基)甲基)丁醯胺的製備

根據化合物13概述的方法，由3-甲基噻吩-2-甲醛(200mg)，甲胺鹽酸鹽(161mg)和2,2-二甲基丁醯氯(218mg)製備標題化合物41，產率42％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.11(d,1h,j＝5.2hz),6.78(d,1h,j＝5.2hz),4.68(s,2h),3.03(s,3h),2.23(s,3h),1.67(q,2h,j＝7.6hz),1.27(s,6h),0.89(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c13h21nos,234.1；測得值，234.4。

化合物42：n,2,2-三甲基-n-((5-甲基噻吩-2-基)甲基)丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由5-甲噻吩-2-甲醛(200mg)，甲胺鹽酸鹽(161mg)和2,2-二甲基丁醯氯(218mg)製備標題化合物42，產率42％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ6.72(d,1h,j＝3.2hz),6.56-6.57(m,1h),4.62(s,2h),3.03(s,3h),2.43(d,3h,j＝1.2hz),1.661(q,2h,j＝7.6hz),1.269(s,6h),0.877(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c13h21nos,234.1；測得值，234.4。

化合物43：n-(呋喃-2-基甲基)-n,2,2-三甲基丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由呋喃-2-甲醛(500mg)，甲胺鹽酸鹽(527mg)和2,2-二甲基丁醯氯(714mg)製備標題化合物43，產率22％。1hnmr(cdcl3,400mhz):7.34-7.35(m,1h),6.31-6.33(m,1h),6.21-6.22(m,1h),4.57(s,2h),3.06(s,3h),1.63(q,2h,j＝7.6hz),1.27(s,6h),0.85(t,3h,j＝7.6hz)lc-ms(esi)[m+h]+計算值c12h19no2,210.1；測得值210.3。

化合物44：n,2,2-三甲基-n-((2-甲基噻唑-5-基)甲基)丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由2-甲基噻唑-5-甲醛(60mg),甲胺鹽酸鹽(48mg)和2,2-二甲基丁醯氯(74mg)製備標題化合物44，產率23％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.50(s,1h),4.59(s,2h),3.07(s,3h),2.67(s,3h),1.64(q,2h,j＝7.6hz),1.25(s,6h),0.84(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c12h20n2os,241.1；測得值241.4。

化合物45：n,2,2-三甲基-n-((1-甲基-1h-吡唑-3-基)甲基)丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由n,1-二甲基-1h-吡唑-3-胺(30mg)和2,2-二甲基丁醯氯(48mg)製備標題化合物45，產率23％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.26(d,1h,j＝4.0hz),6.12(d,1h,j＝4.0hz),4.57(s,2h),3.85(s,3h),3.01(s,3h),1.65(q,2h,j＝7.6hz),1.26(s,6h),0.85(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c12h21n3o,224.2；測得值，224.4。

化合物46：n,2,2-三甲基-n-(萘-2-基甲基)丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由2-萘甲醛(312mg)，甲胺鹽酸鹽(202mg)和2,2-二甲基丁醯氯(275mg)製備標題化合物46，收率74％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.80(m,3h),7.63(m,1h),7.46(m,3h),4.78(s,2h),3.00(s,3h),1.70(q,2h,j＝7.6hz)),1.30(s,6h),0.93(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c18h23no,270.2；測得值，270.4。

化合物47：n,2,2-三甲基-n-(喹啉-3-基甲基)丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由喹啉-3-甲醛(157mg),甲胺鹽酸鹽(101mg)2,2-二甲基丁醯氯(175mg)，參照化合物13的合成方法合成，收率60％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ8.85(d,1h,j＝4.4hz),8.13(d,1h,j＝8.4hz),7.97(d,1h,j＝8.4hz),7.68-7.73(m,1h),7.53-7.57(m,1h),7.155(d,1h,j＝4.4hz),5.10(s,2h),3.07(s,3h),1.70(q,2h,j＝7.6hz),1.29(s,6h),0.91(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c17h22n2o,271.2；測得值271.4.

化合物48：n,2,2-三甲基-n-(2,4,6-三氟苄基)丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，2,4,6-三氟苯甲醛(320mg),甲胺鹽酸鹽(202mg)和2,2-二甲基丁醯氯(275mg)製備標題化合物48，產率63％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ6.61-6.69(m,2h),4.64(s,2h),3.06(s,3h),1.64(q,2h,j＝7.6hz),1.24(s,6h),0.82(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c14h18f3no,274.1；測得值，274.3。

化合物49：n,2,2-三甲基-n-(2,3,4-三氟苄基)丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由2,3,4-三氟苯甲醛(160mg)，甲胺鹽酸鹽(101mg)和2,2-二甲基丁醯氯(175mg)製備標題化合物49，產率66％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.03-7.05(m,1h),6.88-6.95(m,1h),4.61(s,2h),3.09(s,3h),1.66(q,2h,j＝7.6hz),1.26(s,6h),0.84(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c14h18f3no,274.1；測得值274.3。

化合物50：n-(2,6-二氟-3-甲基苄基)-n,2,2-三甲基丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由2,6-二氟-3-甲基苯甲醛(156mg)，甲胺鹽酸鹽(101mg)和2,2-二甲基丁醯氯(140mg)製備標題化合物50，產率66％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.06(q,1h,j＝8.4hz),6.77(t,1h,j＝8.8hz),4.71(s,2h),3.02(s,3h),2.22(s,3h),1.66(q,2h,j＝7.6hz),1.26(s,6h),0.85(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]計算值c15h21f2no,270.2；測得值，270.4。

化合物51：n,2,2-三甲基-n-(2,3,5,6-四氟苄基)丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由2,3,5,6-四氟苯甲醛(178mg)，甲胺鹽酸鹽(101mg)2,2-二甲基丁醯氯(140mg)製備標題化合物51，產率66％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ6.95-7.03(m,1h)4.70(s,2h),3.16(s,3h),1.65(q,2h,j＝7.6hz),1.24(s,6h),0.83(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c14h17f4no,292.1；測得值，292.4。

化合物52：2,2-二甲基-n-(1-苯乙基)丁醯胺的製備

將1-苯基乙胺(1g，8.26mmol)和三乙胺(0.918g，9.09mmol)溶解在20ml無水ch2cl2中。在0℃和氮氣下，將2,2-二甲基丁醯氯(1.223g，9.09mmol)在2mlch2cl2中緩慢加入到該溶液中。將混合物在室溫下攪拌2小時，用ch2cl2和水稀釋。有機層用飽和nahco3和鹽水洗滌，用na2so4乾燥並濃縮。殘餘物通過色譜法純化，得到化合物52(1.35g，74.6％)，為白色固體。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.26-7.34(m,5h),5.77(brs,1h),5.10-5.17(m,1h),1.545(q,2h,j＝8hz),1.485(d,3h,j＝4hz),1.15(s,6h),0.82(t,3h,j＝8hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c14h21no,220.2；測得值，220.4.

化合物53：n,2,2-三甲基-n-(1-苯乙基)丁醯胺的製備

在0℃和氮氣下向化合物52(50mg)的無水thf(1ml)溶液中加入氫化鈉(13.7mg)。將混合物在0℃下攪拌30分鐘，然後加入碘甲烷(38.9mg)。該混合物在室溫下攪拌2小時，用冷水淬滅並用ch2cl2萃取。合併的有機層用水洗滌，用na2so4乾燥並濃縮。殘餘物通過色譜法純化，得到化合物53(8mg，15％)，為無色油狀物。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.32-7.35(m,2h),7.22-7.27(m,3h),5.62-6.30(m,1h),2.70(s,3h),1.68(q,2h,j＝7.6hz),1.51(d,3h,j＝6.0hz),1.30(s,3h),1.29(s,3h),0.91(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c15h23no,234.2；測得值，234.4。

化合物54：2,2-二甲基-n-(1-苯基環丙基)丁醯胺的製備

根據化合物52概述的步驟，由1-苯基環丙胺(106mg)和2,2-二甲基丁醯氯(160mg)製備標題化合物54，產率96％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.22-7.29(m,4h),7.15-7.19(m,1h),6.25(brs,1h),1.54(q,2h,j＝7.6hz),1.24-1.29(m,2h),1.18-1.22(m,2h),1.16(s,6h),0.81(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c15h21no,232.1；測量值，232.4。

化合物55：n,2,2-三甲基-n-(1-苯基環丙基)丁醯胺的製備

根據化合物53概述的步驟，由化合物42(90mg),氫化鈉(32mg)和碘甲烷(85.2mg)製備標題化合物55，收率30％。1hnmr(cdcl3,400mhz):7.28-7.30(m,2h),7.15-7.19(m,3h),3.12(s,3h),1.67(q,2h,j＝7.6hz),1.30-1.32(m,2h),1.26(s,6h),1.24-1.25(m,1h),0.81(t,3h,j＝7.6hz)。lc-ms(esi)[m+h]+計算值c16h23no,246.1；測得值,246.4。

化合物56：n-(2-溴-5-氟苄基)-n,2,2-三甲基丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由2-溴-5-氟苯甲醛(500mg)，甲胺鹽酸鹽(249mg)和2,2-二甲基丁醯氯(317mg)製備標題化合物56，產率56％。1hnmr(cdcl3,400mhz):7.48-7.52(m,1h),7.04-7.10(m,2h),4.80(s,2h),3.15(s,3h),1.71(q,2h,j＝7.6hz),1.30(s,6h),0.91(t,3h,j＝7.6hz)。lc-ms(esi)[m+h]+計算值c14h19brfno,316.1；測得值,316.1,318.2。

化合物57：n-(2-氰基-5-氟苄基)-n,2,2-三甲基丁醯胺的製備

將化合物56(30mg)，碘化鈉(1.4mg)和氰化銅(i)(22mg)的無水dmf(1ml)混合物在180℃下攪拌6小時。將混合物用飽和nahco3水溶液(2ml)稀釋，水層用二氯甲烷(5ml×3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用na2so4乾燥，過濾並濃縮。殘餘物通過預tlc純化，得到化合物57(18mg，72％)。1h-nmr(cdcl3,400mhz):δ7.64-7.67(m,1h),6.83-6.88(m,2h),4.65(s,2h),3.09(s,3h),1.71(q,2h,j＝7.6hz),1.29(s,6h),0.93(t,3h,j＝7.6hz)ms(es)[m+h]+計算值c15h19fn2o,263.1；測得值,263.3。

化合物58：n-苄基-2,2-二甲基丁醯胺的製備

根據化合物52概述的步驟，由苯甲胺(107mg)和3,3-二甲基丁醯氯(140mg)製備標題化合物58，產率84％。1hnmr(cdcl3):δ7.25-7.36(m,5h),5.88(br,1h),4.45(d,2h,j＝8.0hz),1.58(q,2h,j＝5.6hz),1.19(s,6h),0.81(t,3h,j＝5.6hz)。

化合物59：n-(2-氟苄基)-n，3,3-三甲基丁醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由2-氟苯甲醛(124mg)，甲胺鹽酸鹽(101mg)和3,3-二甲基丁醯氯(140mg)製備標題化合物59，產率34％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.22-7.36(m,2h),7.01-7.15(m,2h),4.65(s,2h),2.97(s,3h),2.31(s,2h),1.07(s,9h).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c14h20fno,238.2；測得值，238.4。

化合物60：n-(2-氟苄基)-n-甲基環己烷甲醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由2-氟苯甲醛(124mg)，甲胺鹽酸鹽(101mg)和環己烷碳醯氯(153mg)製備標題化合物60，產率66％。1hnmr(cdcl3,400mhz):7.23-7.28(m,2h),7.01-7.11(m,2h),4.63(s,2h),2.97(s,3h),2.51-2.56(m,1h),1.52-1.79(m,7h),1.24-1.31(m,3h).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c15h20fno,250.2；測得值,250.4。

化合物61：n-(2-氟苄基)-n-甲基苯醯胺的製備

根據化合物1概述的步驟，由2-氟苯甲醛(124mg)，甲胺鹽酸鹽(101mg)和苯甲醯氯(147mg)製備標題化合物61，產率56％。1hnmr(dmso,400mhz):δ7.20-7.42(m,9h),4.70(s,1h),4.50(s,1h),2.84(s,3h).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c15h14fno,244.1；測得值，244.3。

化合物62：n-(2-氟苄基)-n-甲基環丙烷甲醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由2-氟苯甲醛(124mg)，甲胺鹽酸鹽(101mg)和環丙烷甲醯氯(147mg)製備標題化合物62，產率54％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.25-7.27(m,2h),7.03-7.14(m,2h),4.76(s,2h),3.11(s,3h),1.69-1.83(m,1h),1.01-1.05(m,2h),0.69-0.86(m,2h).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c12h14fno,208.1；測得值,208.3。

化合物63：n-(3-氟苄基)-n-(3-甲氧基丙基)-2,2-二甲基丁醯胺的製備

在dmf(5ml)中的(2-氟苯基)甲胺(125mg)，碳酸鉀(414mg)和1-氯-3-甲氧基丙烷(108mg)的混合物在100℃下攪拌16小時。將混合物用ch2cl2稀釋，用h2o洗滌，用na2so4乾燥。除去溶劑後，得到粗的n-(3-氟苄基)-3-甲氧基丙-1-胺(200mg)。將所得化合物溶於無水thf(10ml)中，加入dipea(193mg)。將混合物冷卻至0℃，加入2,2-二甲基丁醯氯(201mg)，並在室溫下攪拌4小時。將混合物用水淬滅並用etoac萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌並用na2so4乾燥。除去溶劑後，殘餘物通過矽膠色譜純化，得到化合物63(177mg，60％)。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.27-7.31(m,1h),6.88-6.98(m,3h),4.66(s,2h),3.41(m,2h),3.36(t,2h,j＝6.0hz),3.29(s,3h),1.84-1.86(m,2h),1.67(q,2h,j＝7.6hz),1.28(s,6h),0.90(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c17h26fno2,296.2；測得值，296.4。

化合物64：n-(環丙基甲基)-n-(3-氟苄基)-2,2-二甲基丁醯胺的製備

根據化合物63概述的步驟，由(2-氟苯基)甲胺(125mg)，(溴甲基)環丙烷(135mg)和2,2-二甲基丁醯氯(201mg)製備標題化合物64，產率54％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.24-7.30(m,1h),6.88-6.98(m,3h),4.81(s,2h),3.24(d,2h,j＝6.4hz),1.70(q,2h,j＝7.6hz),1.29(s,6h),0.94(t,3h,j＝7.6hz),0.87-0.90(m,1h),0.51(m,2h),0.13(m,2h).lc-ms(esi)[m+h]+caladforc17h24fno,278.2；found278.3.

化合物65：n,1-二甲基-n-(2,3,5-三氟苄基)環己烷甲醯胺的製備

n-甲基-1-(2,3,5-三氟苯基)甲胺(37mg，0.211mmol)，其根據化合物13概述的步驟，由2,3,5-三氟苯甲醛和甲胺鹽酸鹽製備得到，且1-甲基環己烷羧酸(30mg，0.211mmol)溶於無水dmf(1ml)中，2-(7-氮雜-1h-苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸鹽(119.7mg，0.315mmol)和n，n-二異丙基乙胺(54.2mg，0.42mmol)加入到該溶液中。將混合物在室溫下攪拌16小時。在減壓下除去溶劑，殘餘物通過柱色譜法純化，得到12mg無色油狀的期望化合物65(產率為19.5％)。1hnmr:(cdcl3,400mhz)δ(ppm)6.80-6.82(m,1h),6.72-6.76(m,1h),4.65(s,2h),3.10(s,3h),2.06-2.11(m,2h),1.36-1.54(m,8h),1.27(s,3h).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c16h20f3no,300.1；測得值，300.3。

化合物66：3-羥基-n,2,2-三甲基-n-(3,4,5-三氟苄基)丙醯胺的製備

根據化合物65概述的步驟，標題化合物66由n-甲基-1-(3,4,5-三氟苯基)甲胺(447mg)，其為由3,4,5-三氟苯甲醛和甲胺鹽酸鹽根據化合物13概述的步驟製得，和3-羥基-2,2-二甲基丙酸(300mg)製得，產率34％。1hnmr:(cdcl3,400mhz):δ6.82(m,2h),4.52(s,2h),3.57(s,2h),3.06(s,3h),1.32(s,6h).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c13h16f3no2,276.1；測得值，276.3。

化合物67：2-甲氧基-n,2-二甲基-n-(2,3,5-三氟苄基)丙醯胺的製備

根據化合物65概述的步驟，由2-甲氧基-2-甲基丙酸(300mg)和n-甲基-1-(2,3,5-三氟苯基)甲胺(447mg)製備標題化合物67，產率14％。1hnmr:(cdcl3,400mhz):δ7.01-7.04(m,2h),4.64(s,2h),3.42(s,3h),3.37(s,3h),1.62(s,6h).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c13h16f3no2,276.1；測得值，276.3。

化合物68：n,2,2-三甲基-3-(甲基氨基)-n-(3,4,5-三氟苄基)丙醯胺的製備

將3-氯-n,2,2-三甲基-n-(3,4,5-三氟苄基)丙醯胺(60mg)，甲胺鹽酸鹽(27mg)，碳酸鉀(138mg)和碘化鉀(33.2mg)在甲基腈(5ml)的混合物回流過夜。混合物用水(2ml)稀釋，水層用二氯甲烷(5ml×3)萃取。合併有機層並濃縮。殘餘物通過pre-hplc純化，得到2mg化合物68，為tfa鹽。1hnmr:(cdcl3,400mhz)δ6.80-6.88(m,2h),4.51(s,2h),4.22(brs,1h),3.00-3.16(m,5h),2.82(s,3h),1.51(s,6h).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c14h19f3n2o,289.2；測得值，289.4。

化合物69：n-甲基-n-(3,4,5-三氟苄基)三甲基乙醯胺的製備

根據化合物65概述的步驟，由新戊酸(14.6mg)和n-甲基-1-(3,4,5-三氟苯基)甲胺(25mg)製備標題化合物69，產率27％。1hnmr:(cdcl3,400mhz):δ6.79-6.86(m,2h),4.52(s,2h),3.05(s,3h),1.33(s,9h).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c13h16f3no,260.1；測得值，260.3。

化合物70：2,2-二甲基-n-(2,3,5-三氟苄基)丁醯胺的製備

根據化合物52概述的步驟，從(2,3,5-三氟苯基)甲胺(30mg)和2,2-二甲基丁醯氯(27.6mg)製備標題化合物58，產率41.5％。1hnmr:(cdcl3,400mhz):δ6.81-6.87(m,2h),6.02(brs,1h),4.50(d,1h,j＝1.2hz),4.48(d,1h,j＝1.2hz),1.56(q,2h,j＝7.6hz),1.18(s,6h),0.82(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c13h16f3no,260.1；測得值，260.3。

化合物71：3-甲氧基-n,2,2-三甲基-n-(3,4,5-三氟苄基)丙醯胺的製備

根據化合物65概述的步驟，由3-甲氧基-2,2-二甲基-丙酸(14mg)和n-甲基-1-(3,4,5-三氟苯基)甲胺(447mg)製備標題化合物71，產率13％。1hnmr:(cdcl3,400mhz):δ6.84-6.88(m,2h),4.54(s,2h),3.48(s,2h),3.36(s,3h),3.04(s,3h),1.33(s,6h).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c14h18f3no2,290.1；測得值,290.4。

化合物72：2-乙基-n,2-二甲基-n-(3,4,5-三氟苄基)丁醯胺的製備

根據化合物65概述的步驟，由n-甲基-1-(3,4,5-三氟苯基)甲胺(20mg)和2-乙基-2-甲基丁酸(15mg)製備標題化合物72，收率18％。1hnmr:(cdcl3,400mhz):δ6.87-6.91(m,2h),4.50(s,2h),3.05(s,3h),1.77-1.84(m,2h),1.47-1.56(m,2h),1.23(s,3h),0.87(t,6h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+caladforc15h20f3no,288.1；found288.3.

化合物73：2-乙基-2-甲基-n-(2,3,5-三氟苄基)丁醯胺的製備

根據化合物65概述的步驟，從(2,3,5-三氟苯基)甲胺(30mg)和2-乙基-2-甲基丁酸(24.4mg)製備標題化合物73，產率12％。1hnmr:(cdcl3,400mhz):δ6.82-6.88(m,2h),6.03(brs,1h),4.49(d,2h,j＝6.0hz),1.61-1.69(m,2h),1.39-1.48(m,2h),1.12(s,3h),0.80(t,6h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c14h18f3no,274.1；測得值，274.3。

化合物74：n-乙基-n-(2,3,5-三氟苄基)環己烷甲醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由2,3,5-三氟苯甲醛(320mg)，乙胺鹽酸鹽(244mg)和2,2-二甲基丁醯氯(275mg)製備標題化合物74，產率53％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ6.77-683(m,1h),6.59-6.75(m,1h),4.61(s,2h),3.35(q,2h,j＝7.2hz),2.47-2.54(m,1h),1.41-1.95(m,10h),1.20(t,3h,j＝7.2hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c16h20f3no,300.1；測得值,300.3。

化合物75：n,2,2-三甲基-n-(2,3,5-三氟苄基)丁醯胺的合成的製備

根據化合物13概述的步驟，由2,3,5-三氟苯甲醛(320mg)，甲胺鹽酸鹽(202mg)和2,2-二甲基丁醯氯(275mg)製備標題化合物75，產率50％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ6.75-6.85(m,2h),4.64(s,2h),3.11(s,3h),1.68(q,2h,j＝7.6hz),1.28(s,6h),0.88(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c14h18f3no,274.1；測得值，274.3。

化合物76：n-甲基-n-(2,3,5-三氟苄基)金剛烷-1-甲醯胺的製備

根據化合物13概述的步驟，由2,3,5-三氟苯甲醛(50mg)，甲胺鹽酸鹽(29mg)和金剛烷-1-碳醯氯(40mg)製備標題化合物76，產率16％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.30-7.51(m,1h),6.66-6.70(m,1h),4.58(s,2h),3.10(s,3h),1.93-1.96(m,10h),1.64-1.67(m,4h).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c19h22f3no,338.2；測得值，338.4。

化合物77：n-(2-羥乙基)-2,2-二甲基-n-(2,3,5-三氟苄基)丁醯胺的製備

根據化合物52概述的步驟，從2-((2,3,5-三氟苄基)氨基)乙醇(50mg)和2,2-二甲基丁醯氯(33mg)製備標題化合物77，產率30％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ6.92-6.97(m,1h),6.80-6.87(m,1h),4.21(t,2h,j＝5.2hz),3.92(s,2h),2.89(t,2h,j＝5.2hz),1.57(q,2h,j＝7.2hz),1.16(s,6h),0.83(t,3h,j＝7.2hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c15h20f3no2,304.1；測得值，304.3。

化合物78：n,2-二甲基-n-(2,3,5-三氟苄基)丙烷-2-亞磺醯胺的製備

根據化合物52概述的步驟，由n-甲基-1-(2,3,5-三氟苯基)甲胺(50mg)和2,2-二甲基丁醯氯(57mg)製備標題化合物78，收率30％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ6.83-6.94(m,2h),4.23-4.32(m,2h),2.64(s,3h),1.21(s,9h).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c12h16f3nos,280.1；測得值,280.2。

化合物79：n-甲基-n-(2,3,5-三氟苄基)環己烷磺醯胺的製備

根據化合物52概述的步驟，由n-甲基-1-(2,3,5-三氟苯基)甲胺(20mg)和環己烷磺醯氯(30mg)製備標題化合物79，產率11％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.02-7.07(m,1h),6.84-6.91(m,1h),4.46(s,2h),2.99-3.05(m,1h),2.86(s,3h),1.95-2.15(m,2h),1.91-1.94(m,2h),1.57-1.74(m,5h),1.21-1.28(m,1h).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c14h18f3no2s,322.1；測得值，322.3.

化合物80：n,1-二甲基-n-(2,3,5-三氟苄基)環丙烷甲醯胺的製備

根據化合物65概述的步驟，從1-甲基環丙烷羧酸(20mg)和n-甲基-1-(2,3,5-三氟苯基)甲胺(35mg)製備標題化合物80，產率35％。1hnmr:(cdcl3,400mhz):δ6.80-6.83(m,2h),4.52(s,2h),3.05(s,3h),1.34(s,3h),0.98(t,2h,j＝4.8hz),0.63(t,2h,j＝4.8hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c13h14f3no,258.1；測得值，258.3。

化合物81：n,2,2,3,3-五甲基-n-(3,4,5-三氟苄基)-環丙烷甲醯胺的製備

根據化合物65概述的步驟，由2,2,3,3-四甲基環丙烷甲酸(30mg)和n-甲基-1-(3,4,5-三氟苯基)甲胺(37mg)製備標題化合物81，產率28.5％。1hnmr:(cdcl3,400mhz):δ6.83-6.87(m,2h),4.50(s,2h),2.96(s,3h),1.21(s,6h),1.18(s,6h).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c16h20f3no,300.1；測得值，300.3。

化合物82：n-甲基-1-苯基-n-(2,3,5-三氟苄基)環丙烷甲醯胺的製備

根據化合物65概述的步驟，由苯基環丙烷甲酸(50mg)和n-甲基-1-(2,3,5-三氟苯基)甲胺(55mg)製備標題化合物82，產率30％。1hnmr:(cdcl3,400mhz):δ7.26-7.30(m,1h),7.16-7.26(m,3h),6.74-6.94(m,3h),4.65(s,2h),2.85(s,3h),1.43-1.46(m,2h),1.23(m,2h).lc-ms(esi)[m+h]+測得值c18h16f3no,320.1；測得值，320.3。

化合物83：n-甲基-n-(2,3,5-三氟苄基)環丁烷甲醯胺的製備

根據化合物65概述的步驟，由環丁烷羧酸(20mg)和n-甲基-1-(2,3,5-三氟苯基)甲胺(35mg)製備標題化合物83，產率29.2％。1hnmr:(cdcl3,400mhz):δ6.76-6.86(m,2h),4.61(s,2h),3.29-3.33(m,1h),2.89(s,3h),2.32-2.41(m,2h),2.17-2.22(m,2h),1.86-1.99(m,2h).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c13h14f3no,258.2；測得值，258.4。

化合物84：n-甲基-n-(2,3,5-三氟苄基)-1-(三氟甲基)環丁烷甲醯胺的製備

根據化合物65概述的步驟，由1-(三氟甲基)環丁烷甲酸(30mg)和n-甲基-1-(2,3,5-三氟苯基)甲胺(31mg)製備標題化合物84，產率25.9％。1hnmr:(cdcl3,400mhz):δ6.80-6.89(m,1h),6.74-6.77(m,1h),4.66(s,2h),2.92(s,3h),2.68-2.77(m,2h),2.52-2.58(m,2h),2.08-2.16(m,1h),1.83-1.87(m,1h).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c14h13f6no,326.1；測得值，326.4。

化合物85：n-甲基-n-(3,4,5-三氟苄基)環戊烷甲醯胺的製備

根據化合物65概述的步驟，從環戊烷甲酸(30mg)和n-甲基-1-(3,4,5-三氟苯基)甲胺(46mg)製備標題化合物85，產率25.2％。1hnmr:(cdcl3,400mhz):δ6.28-6.86(m,2h),4.50(s,2h),2.99(s,3h),2.93-2.97(m,1h),1.73-1.89(m,6h),1.57-1.62(m,2h).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c14h16f3no,272.1；測得值，272.3。

化合物86：n-甲基-n-(2,3,5-三氟苄基)-1-(三氟甲基)環戊烷甲醯胺的製備

根據化合物65概述的步驟，由1-(三氟甲基)環戊烷甲酸(30mg)和n-甲基-1-(2,3,5-三氟苯基)甲胺(29mg)製備標題化合物86，產率26.9％。1hnmr:(cdcl3,400mhz):δ6.79-6.85(m,1h),6.65-6.69(m,1h),4.65(s,2h),3.07(s,3h),2.38-2.44(m,2h),2.15-2.21(m,2h),1.59-1.74(m,4h).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c15h15f6no,340.1；測得值,340.3。

化合物87：n-甲基-1-苯基-n-(2,3,5-三氟苄基)環戊烷甲醯胺的製備

根據化合物65概述的步驟，由1-苯基環戊烷甲酸(50mg)和n-甲基-1-(2,3,5-三氟苯基)甲胺(47mg)製備標題化合物87，產率29.5％。1hnmr:(cdcl3,400mhz):δ7.19-7.31(m,5h),6.74-6.77(m,2h),4.60(s,2h),2.54(s,3h),2.37-2.43(m,2h),2.02-2.05(m,2h),1.66-1.77(m,4h).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c20h20f3no,348.1；測得值，348.3。

化合物88：1-n-乙基-n-甲基-n-(3,4,5-三氟苄基)環丁烷甲醯胺的製備

根據化合物65概述的步驟，從1-乙基環丁烷羧酸(18mg)和n-甲基-1-(3,4,5-三氟苯基)甲胺(25mg)製備標題化合物88，產率19.7％。1hnmr:(cdcl3,400mhz):δ6.74-6.94(m,2h),4.46(s,2h),2.82(s,3h),2.46-2.55(m,2h),1.74-1.98(m,6h),0.88(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c15h18f3no,286.1；測得值，286.4。

化合物89：1-n-乙基-n-甲基-n-(3,4,5-三氟苄基)環戊烷甲醯胺的製備

根據化合物65概述的步驟，由1-乙基環戊烷羧酸(20mg)和n-甲基-1-(3,4,5-三氟苯基)甲胺(25mg)製備標題化合物89，產率18.7％。1hnmr:(cdcl3,400mhz):δ6.82-6.90(m,2h),4.50(s,2h),2.99(s,3h),2.18-2.27(m,2h),1.66(q,2h,j＝7.6hz),1.57-1.62(m,6h),0.84(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c16h20f3no,300.2；測得值，300.4。

化合物90：n-苄基-n,2,2-三甲基丁醯胺的製備

根據化合物10概述的步驟，由n-(2-氟苄基)-2,2-二甲基丁醯胺(1.312g)和碘甲烷(1g)製備標題化合物90，收率72％。1hnmr(cdcl3):δ7.21-7.33(m,5h),4.64(s,2h),2.99(s,3h),1.68(q,2h,j＝7.6hz),1.29(s,6h),0.90(t,3h,j＝7.6hz).

化合物91：n-(3,4-二氟苄基)-n,2,2-三甲基丁醯胺的製備

根據化合物10概述的步驟，由化合物8(71.7mg)和碘甲烷(84.5mg)製備標題化合物91，收率45％。1hnmr(cdcl3):δ7.03-7.14(m,2h),6.94-6.98(m,1h),4.55(s,2h),3.02(s,3h),1.69(q,2h,j＝7.6hz),1.29(s,6h),0.89(t,3h,j＝7.6hz)。

化合物92：n-苄基-n-羥基-2,2-二甲基丁醯胺的製備

將正苄基羥胺鹽酸鹽(100mg)溶於2mlthf/h2o(1/1)和0.45ml飽和nahco3水溶液中。將溶液冷卻至0℃，加入2,2-二甲基丁醯氯(81mg)，將混合物在室溫下攪拌16小時。混合物用etoac萃取，合併的有機層用鹽水洗滌，乾燥(na2so4)並真空濃縮。通過矽膠色譜純化，得到化合物80(60mg，43.3％)，為白色固體。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.34-37(m,2h),7.31-7.33(m,3h),4.89(s,2h),1.69(q,2h,j＝7.6hz),1.26(s,6h),0.86(t,6h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c13h19no2,222.1；測得值，222.4。

化合物93：n-羥基-2,2-二甲基-n-(2,3,5-三氟苄基)丁醯胺的製備

試劑與條件；(a)(叔丁氧基羰基)氧基氨基甲酸叔丁酯，1nnaoh,tbab,dcm；(b)tfa,dcm；(c)2,2-二甲基丁醯氯，nahco3水溶液,thf,水。

將叔丁基(叔丁氧基羰基)氧基氨基甲酸酯(104mg)和1-(溴甲基)-2,3,5-三氟苯(100mg)溶解在ch2cl2(10ml)中。加入1mnaoh(4.5ml)和四丁基溴化銨(7mg)，並在室溫下攪拌過夜。將所得混合物用水洗滌並用na2so4乾燥，真空濃縮，通過矽膠色譜純化，得到(叔丁氧基羰基)氧基(2,3,5-三氟苄基)-氨基甲酸酯(150mg，89％)。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ6.95-6.98(m,1h),6.81-6.89(m,1h),4.82(s,2h),1.50(s,9h),1.49(s,9h).

將上述中間體溶於二氯甲烷(2.5ml)中，在0℃下加入tfa(0.8ml)。將混合物在室溫下攪拌4小時並濃縮，得到作為tfa鹽的n-(2,3,5-三氟苄基)羥胺(100mg)，其不經進一步純化而使用。

將上述中間體溶於thf(3ml)中，加入水(3ml)，加入1ml飽和nahco3水溶液。將混合物在室溫下攪拌30分鐘，然後冷卻至0℃，加入2,2-二甲基丁醯氯(54mg)並攪拌過夜。混合物用etoac萃取，用鹽水洗滌，乾燥(na2so4)，真空濃縮，通過矽膠色譜純化，得到化合物93(80mg，總產率65％)。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ9.80(s,1h),7.41-7.48(m,1h),6.91-6.96(m,1h),4.74(s,2h),1.64(q,2h,j＝7.6hz),1.13(s,6h),0.72(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c13h16f3no2,276.1；測得值,276.2.

化合物94：n-(4-氟苄基)-n-羥基-2,2-二甲基丁醯胺的製備

根據化合物93概述的步驟，由叔丁基(叔丁氧基羰基)氧基氨基甲酸叔丁酯(247mg)，1-(溴甲基)-4-氟苯(200mg)和2,2-二甲基丁醯氯(135mg)製備標題化合物94，產率71％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.27-7.31(m,2h),7.02-7.06(m,2h),4.85(s,2h),1.68(q,2h,j＝7.6hz),1.26(s,6h),0.84(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值，c13h18fno2,240.1；測得值，240.2。

化合物95：n-(3,4-二氟苄基)-n-羥基-2,2-二甲基丁醯胺的製備

根據化合物93概述的步驟，由叔丁基(叔丁氧基羰基)氧基氨基甲酸酯(225mg)，4-(溴甲基)-1,2-二氟苯(200mg)和2,2-二甲基丁醯氯(135mg)製備標題化合物95，產率71％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.10-7.17(m,2h),7.02-7.06(m,1h),4.81(s,2h),1.68(q,2h,j＝7.6hz),1.25(s,6h),0.84(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c13h17f2no2,258.1；測得值，258.2。

化合物96：n-(2,4-二氟苄基)-n-羥基-2,2-二甲基丁醯胺的製備

根據化合物93概述的步驟，由(叔丁氧基羰基)氧基氨基甲酸叔丁酯(225mg)，1-(溴甲基)-2,4-二氟苯(200mg)和2,2-二甲基丁醯氯(135mg)製備標題化合物96，產率65％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ77.32-7.38(m,1h),6.80-6.90(m,2h),4.90(s,2h),1.68(q,2h,j＝7.6hz),1.25(s,6h),0.84(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c13h17f2no2,258.1；測得值，258.2。

化合物97：n-羥基-2,2-二甲基-n-(2,3,4-三氟苄基)丁醯胺的合成的製備

根據化合物93概述的步驟，由叔丁基(叔丁氧基羰基)氧基氨基甲酸叔丁酯(104mg)，1-(溴甲基)-2,3,4-三氟苯(100mg)和2,2-二甲基丁醯氯(54mg)製備標題化合物97，收率65％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.08-7.14(m,1h),6.93-7.00(m,1h),4.92(s,2h),1.68(q,2h,j＝7.6hz),1.25(s,6h),0.84(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值，c13h16f3no2,276.1；測得值，276.2。

化合物98：n-羥基-2,2-二甲基-n-(2,4,5-三氟苄基)丁醯胺的合成的製備

根據化合物93概述的步驟，由叔丁基(叔丁氧基羰基)氧基氨基甲酸叔丁酯(104mg)，1-(溴甲基)-2,4,5-三氟苯(100mg)和2,2-二甲基丁醯氯(54mg)製得標題化合物98，產率65％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.19-7.24(m,1h),6.91-6.98(m,1h),4.88(s,2h),1.68(q,2h,j＝7.6hz),1.25(s,6h),0.84(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c13h16f3no2,276.1；測得值，276.2。

化合物99：n-羥基-2,2-二甲基-n-(3,4,5-三氟苄基)丁醯胺的合成的製備

根據化合物93概述的步驟，由叔丁基(叔丁氧基羰基)氧基氨基甲酸叔丁酯(104mg)，5-(溴甲基)-1,2,3-三氟苯(100mg)和2,2-二甲基丁醯氯(54mg)製得標題化合物99，產率65％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ6.92-7.00(m,2h),4.79(s,2h),1.68(q,2h,j＝7.6hz),1.26(s,6h),0.85(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+caladforc13h16f3no2,276.1；found,276.2.

化合物100：(s)-3-(2,2-二甲基丁醯氨基)-3-苯基丙酸甲酯的製備

(s)-3-氨基-3-苯基丙酸(1g)溶於甲醇(10ml)中，在0℃下加入1ml亞硫醯氯。將混合物回流4小時。將溶劑蒸發至幹，所得固體用石油醚洗滌。將粗產物和三乙胺(0.7ml)溶於15mlch2cl2中，在0℃，氮氣下緩慢加入2,2-二甲基丁醯氯(1g)。將混合物在室溫下攪拌4小時。除去溶劑後，通過矽膠柱色譜純化，得到化合物100(110mg，32％)。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.31-7.35(m,2h),7.23-7.28(m,3h),5.40-5.45(m,1h),3.62(s,3h),2.87(m,2h),1.57(q,2h,j＝7.6hz),1.19(s,3h),1.18(s,3h),0.83(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c16h23no3,278.2；測得值，278.4。

化合物101：(s)-2,2-二甲基-n-(3-(二甲基氨基)-3-氧代-1-苯基丙基)丁醯胺的製備

將化合物100(840mg)溶於30ml甲醇中，加入1mnaoh(40ml)。將混合物在室溫下攪拌5小時。除去溶劑並用1nhcl酸化。水相用二氯甲烷萃取。合併的有機層用水洗滌，用na2so4乾燥。過濾並蒸發至幹，得到褐色油狀的(s)-3-(2,2-二甲基丁醯氨基)-3-苯基丙酸(780mg，98％)。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.31-7.34(m,2h),7.24-7.28(m,3h),6.75(d,1h,j＝8.4hz),5.40-5.45(m,1h),2.83-2.93(m,2h),1.55(q,2h,j＝7.6hz),1.16(s,1h),1.15(s,1h),0.81(t,3h,j＝7.6hz).

根據化合物65概述的步驟，由(s)-3-(2,2-二甲基丁醯胺基)-3-苯基丙酸(30mg)和鹽酸甲胺(9.2mg)製備標題化合物101，收率55％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.83(brs,1h),7.26-7.33(m,3h),7.21-7.25(m,2h),5.92(brs,1h),5.26-5.31(m,1h),3.67-3.72(m,1h),3.12-3.19(m,1h),2.71(d,3h,j＝4.8hz),1.58(m,2h),1.20(s,3h),1.19(s,3h),0.82(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c15h21no3,277.2；測得值277.4.

化合物102：(s)-n-(3–((2-(2-甲氧基乙氧基)乙基)氨基)-3-氧代-1-苯基丙基)-2,2-二甲基丁醯胺的製備

根據化合物101概述的步驟，由(s)-3-(2,2-二甲基丁醯胺基)-3-苯基丙酸(30mg)和2-(2-甲氧基乙氧基)乙胺(16.3mg)製備標題化合物102，產率51％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.98-8.01(brs,1h),7.27-7.33(m,4h),7.21-7.25(m,1h),6.41-6.45(brs,1h),5.27-5.32(m,1h),3.67-3.74(m,1h),3.40-3.56(m,5h),3.36(s,3h),3.13-3.19(m,2h),2.78-2.83(m,1h),2.68-2.73(m,1h),1.54-1.62(m,2h),1.22(s,3h),1.21(s,3h),0.83(t,3h,j＝7.2hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c20h32n2o4,365.2；測得值，365.4.。

化合物103：(s)-n-(3-(乙基氨基)-3-氧代-1-苯基丙基)-2,2-二甲基丁醯胺的製備

根據化合物101概述的步驟，從(s)-3-(2,2-二甲基丁醯胺基)-3-苯基丙酸(30mg)和鹽酸乙胺(11mg)製備標題化合物103，產率39％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ1h-nmr(cdcl3)δ7.87-7.89(brs,1h),7.27-7.32(m,4h),7.23-7.25(m,1h),5.74(brs,1h),5.28-5.32(m,1h),3.12-3.24(m,2h),2.757(dd,1h,j＝4.8,14.4hz),2.582(dd,1h,j＝5.6,14.4hz),1.56-1.62(qd,2h,j＝7.2,1.6hz),1.21(s,3h),1.21(s,3h),1.006(t,3h,j＝7.2hz),0.823(t,3h,j＝7.2hz)lc-ms(esi)[m+h]+計算值c17h26n2o2,291；測得值，291.2。

化合物104：(s)-n-(3-(環己基氨基)-3-氧代-1-苯基丙基)-2,2-二甲基丁醯胺的製備

根據化合物101概述的步驟，由(s)-3-(2,2-二甲基丁醯氨基)-3-苯基丙酸(30mg)和環己胺(14mg)製備標題化合物104，產率21％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.95(brs,1h),7.27-7.31(m,3h),7.20-7.24(m,2h),5.41(brs,1h),5.28-5.32(m,1h),3.62-3.71(m,1h),2.73(dd,1h,j＝4.8,14.4hz),2.50(dd,1h,j＝4.8,14.4hz),1.79-1.82(m,2h),1.56-1.67(m,6h),1.26-1.36(m,2h),1.21(s,3h),1.20(s,3h),1.01-1.13(m,2h),0.82(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c21h32n2o2,345.2；測得值，345.4。

化合物105：(s)-2,2-二甲基-n-(3-氧代-1-苯基-3-(哌啶-1-基)丙基)丁醯胺的製備

根據化合物101概述的步驟，從(s)-3-(2,2-二甲基丁醯胺基)-3-苯基丙酸(30mg)和哌啶(14mg)製備標題化合物105，產率29％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.99(brs,1h),7.27-7.32(m,4h),7.19-7.23(m,1h),5.32(m,1h),3.56-3.60(m,1h),3.32-3.39(m,1h),3.17-3.24(m,2h),3.033(dd,1h,j＝5.6,14.4hz),2.679(dd,1h,j＝4.8,14.4hz),1.55-1.61(m,2h),1.50-1.54(m,2h),1.36-1.48(m,3h),1.20(s,3h),1.19(s,3h),1.04-1.10(m,1h),0.83(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c20h30n2o2,331.2,測得值331.4.

化合物106：(s)-2,2-二甲基-n-(3-氧代-1-苯基-3-(苯基氨基)丙基)丁醯胺的製備

根據化合物101概述的步驟，從(s)-3-(2,2-二甲基丁醯胺基)-3-苯基丙酸(30mg)和苯胺(13mg)製備標題化合物106，產率28％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.65(brs,1h),7.27-7.40(m,9h),7.106(t,1h,j＝7.2hz),5.41-5.45(m,1h),2.83-2.99(m,2h),1.578(q,2h,j＝7.6hz),1.19(s,6h),0.81(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c21h26n2o2,339.2；測得值,339.4。

化合物107：(s)-n-(3-(苄基氨基)-3-氧代-1-苯基丙基)-2,2-二甲基丁醯胺的製備

根據化合物101概述的步驟，從(s)-3-(2,2-二甲基丁醯胺基)-3-苯基丙酸(30mg)和苯基甲胺(15mg)製備標題化合物107，產率28％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.91(brs,1h),7.28-7.39(m,8h),7.02-7.04(m,2h),6.29(brs,1h),5.33-5.36(m,1h),4.39(d,2h,j＝5.2hz),2.84-2.91(m,1h),2.71-2.76(m,1h),1.59(qd,2h,j＝1.2,7.6hz),1.21(s,3h),1.20(s,3h),0.83(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c22h28n2o2,353.2；測得值,353.4.

化合物108：(s)-2,2-二甲基-n-(3-氧代-3-(苯乙基氨基)-1-苯基丙基)丁醯胺的製備

根據化合物101概述的步驟，從(s)-3-(2,2-二甲基丁醯胺基)-3-苯基丙酸(30mg)和苯基甲胺(16mg)製備標題化合物108，產率31％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.96-7.98(brs,1h),7.27-7.34(m,4h),7.17-7.25(m,4h),6.94-6.97(m,2h),5.59(brs,1h),5.28-5.32(m,1h),3.46-3.55(m,1h),3.25-3.33(m,1h),2.67-2.75(m,2h),2.49-2.61(m,2h),1.58(qd,2h,j＝2.0,7.6hz),1.22(s,3h),1.21(s,3h),0.84(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c23h30n2o2,367.2；測得值,367.4。

化合物109：(r)-n-(2-羥基-1-苯基乙基)-2,2-二甲基丁醯胺的製備

將(r)-2-氨基-2-苯基乙醇(50mg，0.365mmol)和nahco3(91.9mg，1.0945mmol)溶於2mlthf/h2o(v/v＝1/1)。在0℃，氮氣下將2,2-二甲基丁醯氯(43mg，0.398mmol)緩慢加入到溶液中。將混合物在室溫下攪拌16小時，並用etoac(15ml×3)萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用na2so4乾燥。過濾並蒸發至幹。殘餘物通過柱色譜純化，得到合物109，為白色固體(45mg，59.2％)。1hnmr:(cdcl3,400mhz):δ(ppm)7.35-7.39(m,2h),7.28-7.32(m,3h),6.26(brs,1h),5.05-5.09(m,1h),3.87-3.94(m,2h),2.70(brs,1h),1.59(q,2h,j＝7.6hz),1.20(s,3h),1.19(s,3h),0.87(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c14h21no2,236.2；測得值，236.3。

化合物110：n-(2-羥基-1-苯基乙基)-2,2-二甲基丁醯胺的製備

根據化合物109概述的步驟，由2-氨基-2-苯基乙醇(50mg)和2,2-二甲基丁醯氯(54mg)製備標題化合物110，產率78.3％。1hnmr:(cdcl3,400mhz)δ7.36-7.40(m,2h),7.28-7.33(m,3h),6.27(brs,1h),5.07(dd,1h,j＝5.6,10.8hz),3.88-3.92(m,2h),2.72(brs,1h),1.58(q,2h,j＝7.6hz),1.20(s,3h),1.19(s,3h),0.87(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c15h23no2,236.2；測得值，236.3。

化合物111：n-(2-羥基-1-苯基乙基)-n，2,2-三甲基丁醯胺的製備

根據化合物109概述的步驟，從2-(甲基氨基)-2-苯基乙醇(50mg)和2,2-二甲基丁醯氯(48mg)製備標題化合物111，產率9.8％。1hnmr:(meod,400mhz)δ7.43-7.44(m,3h),7.28-7.38(m,2h),4.29-4.38(m,2h),5.88(m,1h),2.43(s,3h),1.528(q,2h,j＝7.6hz),1.11(s,6h),0.75(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c15h23no2,250.2；測得值，250.3。

化合物112：n-(2-甲氧基-1-苯基乙基)-n,2,2-三甲基丁醯胺的製備

將n-(2-羥基-1-苯基乙基)-2,2-二甲基丁醯胺(40mg，0.17mmol)溶於2ml無水thf中。在0℃，氮氣下，將nah(20.4mg，0.51mmol，60％，在原料油中)分批加入到該溶液中。在0℃下攪拌0.5小時後，加入碘甲烷(72.5mg，0.51mmol)。將混合物在室溫下攪拌16小時，用水(1ml)淬滅並用etoac萃取。將合併的有機層蒸發至幹，殘餘物通過柱色譜純化，得到化合物112(20mg，44.7％)。1hnmr:(cdcl3,400mhz)δ7.31-7.35(m,2h),7.22-7.28(m,3h),5.70-6.20(m,1h),3.81-3.90(m,2h),3.41(s,3h),2.84(s,3h),1.63-1.73(m,2h),1.29(s,3h),1.28(s,3h),0.91(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c16h25no2,264.2；測得值,264.4。

化合物113：3-環己基-1-(2-氟苄基)-1-甲基脲的製備

向1-(2-氟苯基)-n-甲基甲胺(97mg)的thf(10ml)溶液中加入n，n-二異丙基乙胺(135mg)，然後加入在thf(1ml)中的異氰酸根合環己烷(131mg)。將混合物攪拌過夜並用水稀釋。水層用ch2cl2萃取，合併的有機層用水和鹽水洗滌，乾燥(na2so4)並真空濃縮。殘餘物通過柱色譜純化，得到化合物113(65mg，35％)。1hnmr:(cdcl3,400mhz):δ7.22-7.34(m,2h),7.02-7.14(m,2h),4.53(s,2h),3.59-3.71(m,1h),2.90(s,3h),1.91-1.97(m,2h),1.57-1.71(m,3h),1.31-1.42(m,2h),1.03-1.18(m,3h).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c15h21fn2o,265.2；測得值，265.4。

化合物114：1-(2-氟苄基)-3-異丙基-1-甲基脲的製備

根據化合物113概述的步驟，從2-異丙基異氰酸酯(92mg)和1-(2-氟苯基)-n-甲基甲胺(97mg)製備標題化合物117，產率30％。1hnmr:(cdcl3,400mhz):δ7.22-7.32(m,2h),7.02-7.14(m,2h),4.53(s,2h),3.96-4.03(m,1h),2.89(s,3h),1.15(d,6h,j＝6.4hz),lc-ms(esi)[m+h]+計算值c12h17fn2o,225.1；測得值，225.2。

化合物115：1-乙基-3-異丙基-3-甲基-1-(2,3,5-三氟苄基)脲的製備

在0℃，氮氣下，向有三光氣(154mg)的二氯甲烷(4ml)溶液中加入n-甲基丙-2-胺(40mg)。將混合物在0℃下攪拌4小時。然後除去溶劑，加入n-(2,3,5-三氟苄基)-乙胺(60mg)的二氯甲烷(2ml)溶液。將混合物在35℃下攪拌過夜，用水稀釋。水層用etoac(5ml×3)萃取。將合併的有機層用飽和nahco3和鹽水洗滌，用na2so4乾燥，過濾並蒸發至幹。殘餘物通過柱色譜純化，得到化合物115(4mg，2.5％)，為黃色油狀物。1hnmr:(cdcl3,400mhz):δ6.86-6.89(m,1h),6.76-6.81(m,1h),4.38(s,2h),4.07(m,1h),3.09-3.14(q,2h,j＝7.2hz),2.70(s,3h),1.13-1.17(m,9h).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c14h19f3n2o,289.1；測得值，289.2。

化合物116：2-乙基-n-甲基-n-(2,3,5-三氟苄基)哌啶-1-甲醯胺的製備

根據化合物115概述的步驟，由三光氣(77.1mg)，2-乙基哌啶(29.4mg)和n-甲基-1-(2,3,5-三氟苯基)甲胺(30mg)製備標題化合物116，產率14.9％。1hnmr:(cdcl3,400mhz):δ6.79-6.88(m,2h),4.45(d,1h,j＝15.6hz),4.29(d,1h,j＝15.6hz),3.72-3.74(m,1h),3.43-3.48(m,1h),2.94-3.01(m,1h),2.77(s,3h),1.57-1.70(m,8h),0.98(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c16h21f3n2o,315.2；測得值，315.3。

化合物117：n,2-二甲基-n-(2,3,5-三氟苄基)哌啶-1-甲醯胺的製備

根據化合物115概述的步驟，由三光氣(77.1mg)，2-甲基哌啶(25.71mg)和n-甲基-1-(2,3,5-三氟苯基)甲胺(30mg)製備標題化合物117，產率15.6％。1hnmr:(cdcl3,400mhz):δ6.78-6.84(m,2h),4.43(d,1h,j＝16hz),4.34(d,1h,j＝16hz),3.90-3.93(m,1h),3.32-3.36(m,1h),2.95-3.02(m,1h),2.76(s,3h),1.44-1.68(m,6h),1.18(d,3h,j＝4hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c15h19f3n2o,301.1；測得值，301.3。

化合物118：n,3-二甲基-n-(2,3,5-三氟苄基)哌啶-1-甲醯胺的製備

根據化合物115概述的步驟，從三光氣(84.8mg)，2-甲基哌啶(28.3mg)和n-甲基-1-(2,3,5-三氟苯基)甲胺(30mg)製備標題化合物118，產率9.7％。1hnmr:(cdcl3,400mhz):δ7.05-7.07(m,1h),6.89-6.91(m,1h),4.42-4.84(m,2h),2.80(s,3h),3.49-3.53(m,2h),2.75-2.77(m,2h),1.77-1.79(m,1h),1.57-1.67(m,4h),0.98(d,3h,j＝6.4hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c15h19f3n2o,301.1；測得值，301.3。

化合物119：1,1-二異丙基-3-甲基-3-(2,3,5-三氟苄基)脲的製備

根據化合物115概述的步驟，由三光氣(84.8mg)，二異丙基胺(26.86mg)和n-甲基-1-(2,3,5-三氟苯基)甲胺(30mg)製備標題化合物119，產率19.3％。1hnmr:(cdcl3,400mhz):δ6.79-6.82(m,2h),4.30(s,2h),3.58-3.62(m,2h),2.68(s,3h),1.26(d,12h,j＝6.4hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c15h21f3n2o,303.2；測得值，303.4。

化合物120：異丙基-1,3-二甲基-3-(2,3,5-三氟苄基)脲的製備

根據化合物115概述的步驟，由三光氣(84.8mg)，n-甲基丙-2-胺(20.86mg)和n-甲基-1-(2,3,5-三氟苯基)甲胺(30mg)製備標題化合物120，產率20.8％。1hnmr:(cdcl3,400mhz):δ6.80-6.87(m,2h),4.38(s,2h),4.00-4.11(m,1h),2.75(s,3h),2.67(s,3h),1.10(d,6h,j＝6.4hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c13h17f3n2o,275.1；測得值，275.2。

化合物121：n,2,6-三甲基-n-(2,3,5-三氟苄基)哌啶-1-甲醯胺的製備

根據化合物115概述的步驟，由三光氣(84.8mg)，2,6-二甲基哌啶(32.28mg)和n-甲基-1-(2,3,5-三氟苯基)甲胺(30mg)製備標題化合物121，收率14.5％。1hnmr:(cdcl3,400mhz):δ6.80-6.90(m,2h),4.61(s,2h,),3.18-3.23(m,2h),2.97(s,3h),1.70-1.75(m,1h),1.59-1.65(m,2h),1.32-1.45(m,1h),1.22-1.39(m,2h),1.12(d,6h,j＝6.4hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c16h21f3n2o,315.2；測得值，315.4。

化合物122：(r)-2,2-二甲基-n-(2-(甲基氨基)-2-氧代-1-苯乙基)丁醯胺的製備

根據化合物65概述的步驟，由(r)-2-(2,2-二甲基丁醯胺基)-2-苯基乙酸(30mg)，其為根據化合物101概述的步驟由(r)-2-氨基-2-苯基乙酸製備得到，和鹽酸甲胺鹽酸鹽(10mg)製備標題化合物122，收率35％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.28-7.38(m,5h),7.14(brs,1h),6.38(brs,1h),5.52(d,j＝6.8hz,1h),2.77(d,j＝4.8hz,3h),1.51-1.60(m,2h),1.18(s,3h),1.17(s,3h),0.78(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c15h22n2o2,263.2；測得值,263.3。

化合物123：(r)-n-(2-(二甲基氨基)-2-氧代-1-苯基乙基)-2,2-二甲基丁醯胺的製備

根據化合物65概述的步驟，由(r)-2-(2,2-二甲基丁醯胺基)-2-苯基乙酸(30mg)和二甲胺(6.48mg)製備標題化合物123，產率35％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.28-7.41(m,5h),5.80(d,1h,j＝6.8hz),2.99(s,3h),2.89(s,3h),1.45-1.55(m,2h),1.13(s,3h),1.12(s,3h),0.70(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c16h24n2o2,277.2；測得值,277.4。

化合物124：(r)-n-(2-(苄基氨基)-2-氧代-1-苯乙基)-2,2-二甲基丁醯胺的製備

根據化合物65概述的步驟，由(r)-2-(2,2-二甲基丁醯胺基)-2-苯基乙酸(30mg)和苯基甲胺(15.4mg)製備標題化合物124，產率37％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.28-7.38(m,5h),7.23-7.26(m,2h),7.07-7.12(m,3h),6.14(brs,1h),5.49(d,1h,j＝6.4hz),4.42(d,2h,j＝5.2hz),1.49-1.55(m,2h),1.16(s,3h),1.15(s,3h),0.76(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c21h26n2o2,339.2；測得值,339.4。

化合物125：(r)-2,2-二甲基-n-(2-氧代-2-(苯乙基氨基)-1-苯基乙基)丁醯胺的製備

根據化合物65概述的步驟，從(r)-2-(2,2-二甲基丁醯胺基)-2-苯基乙酸(30mg)和2-苯基乙胺(17.4mg)製備標題化合物125，收率38％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.28-7.35(m,5h),7.17-7.23(m,3h),7.11-7.12(brs,1h),6.92-6.94(m,2h),5.57(brs,1h),5.25-5.27(d,1h,j＝6.0hz),3.57-3.65(m,1h),3.32-3.40(m,1h),2.63-2.77(m,2h),1.50-1.56(qd,2h,j＝7.6,2.0hz),1.16(s,3h),1.15(s,3h),0.76(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c22h28n2o2,353.2；測得值,353.4。

化合物126：(s)-2,2-二甲基-n-(3-氧代-3-((2-苯氧基乙基)氨基)-1-苯基丙基)丁醯胺的製備

根據化合物65概述的步驟，從(s)-3-(2,2-二甲基丁醯氨基)-3-苯基丙酸(30mg)和2-苯氧基乙胺(19mg)製備標題化合物126，產率42％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.79-7.81(brs,1h),7.27-7.31(m,2h),7.19-7.26(m,4h),7.09-7.13(m,1h),6.95-7.00(m,1h),6.78-6.81(m,2h),5.94(brs,1h),5.31-5.35(m,1h),3.90-3.94(m,1h),3.79-3.84(m,1h),3.50-3.61(m,2h),2.77(dd,1h,j＝4.8,14.4hz),2.62(dd,1h,j＝4.8,14.4hz),1.56-1.63(m,2h),1.21(s,3h),1.20(s,3h),0.83(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c23h30n2o3,383.2,測得值,383.4。

化合物127：(r)-2,2-二甲基-n-(2-氧代-2-((2-苯氧基乙基)氨基)-1-苯乙基)丁醯胺的製備

根據化合物65概述的步驟，從(r)-2-(2,2-二甲基丁醯胺基)-2-苯基乙酸(30mg)和2-苯氧基乙胺(20mg)製備標題化合物127，產率40％。1hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.27-7.36(m,5h),7.23-7.25(m,1h),6.92-7.00(m,2h),6.77-6.80(m,2h),6.10(brs,1h),5.41(d,1h,j＝6.4hz),3.94-4.03(m,2h),3.57-3.71(m,2h),1.51-1.57(m,2h),1.17(s,3h),1.16(s,3h),0.77(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c22h28n2o3,369.2；測得值,369.4。

化合物128：n-((4,5-二甲基噻唑-2-基)甲基)-n，2,2-三甲基丁醯胺的製備

根據化合物52概述的步驟，由1-(4,5-二甲基噻吩-2-基)-n-甲基甲胺(60mg)，其為根據化合物13概述的步驟由4,5-二甲基噻吩-2-甲醛和甲胺製備得到，和2,2-二甲基丁醯氯(57mg)製備標題化合物128，產率36％。1hnmr:(cdcl3,400mhz):δ6.61(s,1h),4.58(s,2h),3.03(s,3h),2.28(s,3h),2.07(s,3h),1.66(q,2h,j＝7.6hz),1.27(s,6h),0.88(t,3h,j＝7.6hz).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c14h23nos254.2；測得值，254.3。

化合物129：2,6-二氯-n-甲基-n-(3,4,5-三氟苄基)苯甲醯胺的製備

按照化合物52概述的步驟，由n-甲基-1-(3,4,5-三氟苯基)甲胺(30mg)和2,6-二氯苯甲醯氯(39.5mg)製備標題化合物129，產率77％。1hnmr:(cdcl3,400mhz):δ7.33-7.36(m,2h),7.26-7.29(m,1h),7.04-7.07(m,2h),4.72(s,2h),2.77(s,3h).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c15h10cl2f3no,348.0；測得值,348.2。

化合物130-135和151：

化合物130-135根據方案1的方法製備：

方案1：試劑和條件：(a):naoh,二甲基硫酸鹽,dcm/水

化合物136-147：

化合物136-147根據方案2的方法製備：

方案2：試劑和條件：(a):nh2oh*hcl；na2co3；(b):na(cn)bh3；(c)2,2-二甲基丁醯氯或2,2-二甲基丁-3-烯醯氯,nahco3,thf/水,0℃30分鐘,室溫,16小時。

化合物148和149：

化合物148和149根據方案3的方法製備：

方案3：試劑和條件：(a):nahco3,碳酸氯乙酯,thf/dcm(b)lialh4,thf,室溫,16小時(c):2,2-二甲基丁醯氯nahco3,thf/水，0℃30分鐘，室溫，16小時。

化合物150：

化合物150根據方案3的方法製備：

方案4：條件和試劑：(a):nahco3,碳酸氯乙酯,thf/dcm,0℃30分鐘,室溫,16小時。

化合物s1：n-(2,3,5-三氟苄基)三甲基乙醯胺的製備

(2,3,5-三氟苯基)甲胺(42mg，0.263mmol)和三乙胺(53.2mg，0.526mmol)溶於2ml無水ch2cl2中。在氮氣，0℃下，將新戊醯氯(38mg，0.316mmol)緩慢加入溶液中。將混合物在室溫下攪拌2小時，用ch2cl2和水稀釋。有機層用飽和nahco3溶液，鹽水洗滌，用na2so4乾燥並濃縮。物殘餘通過色譜法純化，得到化合物s1(49mg，74％)，為淡黃色油狀物。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.86–6.77(m,2h),4.47(d,j＝4.9hz,2h),1.21(s,9h).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c12h15f3no,246.11；測得值,246.17。

化合物s2：n-甲基-n-(2,3,5-三氟苄基)三甲基乙醯胺的製備

將化合物s1(70mg)溶於2ml無水thf中，在0℃和n2下加入17mgnah(60％)，並攪拌2小時。加入碘甲烷(0.026ml)，使混合物溫熱至室溫並攪拌12小時。混合物用冷水淬滅並用dcm萃取，合併的有機層用水，鹽水洗滌，用na2so4乾燥，濃縮，殘餘物通過制tlc純化，得到產物s2(35mg,47％).1hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.82-6.71(m,2h),4.65(s,2h),3.11(s,3h),1.33(s,9h).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c13h17f3no,260.13；測得值,260.19。

化合物s3：n-乙醯氧基-n-苄基-2,2-二甲基丁醯胺的製備

將正苄基羥胺鹽酸鹽(100mg)溶於2mlthf/h2o(1:1)和0.45ml飽和nahco3水溶液中。將溶液冷卻至0℃，加入2,2-二甲基丁醯氯(81mg)，將混合物在室溫下攪拌16小時。混合物用etoac萃取，合併的有機層用鹽水洗滌，乾燥(na2so4)並真空濃縮。通過矽膠色譜純化，得到為白色固體的n-苄基-n-羥基-2,2-二甲基丁醯胺(60mg，43.3％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.37-7.34(m,2h),7.33-7.31(m,3h),4.89(s,2h),1.69(q,j＝7.6hz,2h),1.26(s,6h),0.86(t,j＝7.6hz,6h).

將n-苄基-n-羥基-2,2-二甲基丁醯胺(800mg)和tea(2.5ml)溶解在20mldcm中。在0℃下將乙醯氯(0.283ml)緩慢加入到混合物中，將混合物在室溫下攪拌16小時，濃縮，殘餘物通過色譜法純化，得到產物s3(260mg,27.3％).1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.33–7.23(m,5h),4.89(s,2h),2.09(s,3h),1.53(q,j＝7.5hz,2h),1.16(s,6h),0.80(t,j＝7.5hz,3h).

化合物s4：n-苄基-n-甲氧基-2,2-二甲基丁醯胺的製備

將n-苄基-n-羥基-2,2-二甲基丁醯胺(800mg)，碘甲烷(565.2mg)和koh(179.4mg)加入到30ml乙醇中。將混合物在50℃下攪拌5小時並蒸發至幹。殘餘物用ch2cl2和水稀釋。有機層用鹽水洗滌，用na2so4乾燥並濃縮。殘餘物通過色譜法純化，得到化合物s4(210mg,28.2％).1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.34–7.22(m,5h),4.79(s,2h),3.64(s,3h),1.63(q,j＝7.5hz,2h),1.20(s,6h),0.79(t,j＝7.5hz,3h).

化合物s5：3,3-二氟-n,2,2-三甲基-n-(2,3,5-三氟苄基)丁醯胺的製備

將k2co3(324mg，2.35mmol)和甲胺鹽酸鹽(316mg，4.69mmol)在10mlmeoh中的混合物在室溫下攪拌30分鐘。然後向混合物中加入2,3,5-三氟苯甲醛(500mg，3.125mmol)，在室溫下攪拌2小時。將混合物冷卻至0℃，分批加入nabh4(178.2mg，4.69mmol)。將混合物在0℃下攪拌1小時，升溫至室溫並攪拌12小時。將固體過濾並用etoac洗滌。將濾液蒸發至幹，將殘餘物溶於etoac中，有機層用水，鹽水洗滌，用na2so4乾燥，濃縮，得到n-甲基-1-(2,3,5-三氟苯基)甲胺(260mg)，其不經進一步純化用於下一步驟。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.94–6.87(m,1h),6.86–6.76(m,1h),3.81(d,j＝1.4hz,2h),2.44(s,3h).

向n-甲基-1-(2,3,5-三氟苯基)甲胺(44mg)和3,3-二氟-2,2-二甲基丁酸(38mg)的無水dmf(1ml)溶液，加入2-(7-氮雜-1h-苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸鹽(142mg)和diea(0.08ml)。將混合物在室溫下攪拌12小時並真空濃縮，殘餘物用ch2cl2和水稀釋。水層用ch2cl2萃取。合併的有機層用飽和食鹽水洗滌，用na2so4乾燥並濃縮，殘餘物通過預tlc純化，得到化合物s5(36mg，46％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.88–6.78(m,1h),6.71(m,1h),4.67(s,2h),3.15(s,3h),1.66(t,j＝19.4hz,3h),1.46(s,6h).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c14h17f5no,310.12；測得值,310.21.

化合物s6：n-苄基-3,3-二氟-n-羥基-2,2-二甲基丁醯胺的製備

向正苄基羥胺鹽酸鹽(36.8mg)和3,3-二氟-2,2-二甲基丁酸(35mg)的無水dmf(1ml)溶液中加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(66mg)和diea(0.16ml)。將混合物在室溫下攪拌12小時並真空濃縮。殘餘物用二氯甲烷和水稀釋。水層用二氯甲烷萃取。有機層用飽和食鹽水洗滌，用na2so4乾燥並濃縮，殘餘物通過預tlc純化，得到化合物s6(10mg，17％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.34–7.25(m,5h),4.64(s,2h),1.73(t,j＝19.8hz,3h),1.38(s,6h).

化合物s7：n-(4-氟苄基)-n,2,2-三甲基丁醯胺的製備

將k2co3(207mg，1.5mmol)和甲胺鹽酸鹽(202mg，3.0mmol)在5mlmeoh中的混合物在室溫下攪拌30分鐘，然後向混合物中加入4-氟苯甲醛(248mg，2.0mmol)，並在室溫下攪拌1小時。將混合物冷卻至0℃，分批加入nabh4(113.5mg，3.0mmol)。將混合物在0℃下攪拌1小時，升溫至室溫並攪拌2小時。將固體過濾並用etoac洗滌。將濾液蒸發至幹，將殘餘物溶於etoac中，有機層用水，鹽水洗滌，用na2so4乾燥。將殘餘物溶於10ml無水thf中。加入diea(264mg，2.05mmol)，在0℃，氮氣下，將2,2-二甲基丁醯氯(275mg，2.05mmol)緩慢加入到溶液中，然後在室溫下攪拌2小時。向溶液中加入15ml水，用etoac(10ml×3)萃取。將合併的有機物用1mhcl，鹽水洗滌，用na2so4乾燥並真空濃縮。殘餘物通過矽膠柱色譜法(pe/ea＝1/2)純化，得到189mg作為棕色固體的s7(總產率＝40％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.21–7.12(m,2h),6.98-6.93(m,2h),4.54(s,2h),2.95(s,3h),1.64(q,j＝7.5hz,2h),1.24(s,6h),0.84(t,j＝7.5hz,3h).lc-ms(esi)[m+h]+計算值:c14h21f2no,256.16；測得值,256.18.

化合物s8：n-(2,3-二氟苄基)-n,2,2-三甲基丁醯胺的製備

根據化合物s7概述的步驟，由2,3-二氟苯甲醛(284mg)，甲胺鹽酸鹽(202mg)和2,2-二甲基丁醯氯(275mg)製備化合物s8，產率56％。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.11–6.94(m,3h),4.66(s,2h),3.06(s,3h),1.66(q,j＝7.5hz,2h),1.25(s,6h),0.85(t,j＝7.5hz,3h).lc-ms(esi)[m+h]+計算值c14h20f2no,256.15；測得值,256.18。

化合物s9-s20：

化合物s9-s20根據方案1中概述的步驟製備：

方案5：試劑和條件；(a)叔丁基(叔丁氧基羰基)氧基氨基甲酸叔丁酯,1nnaoh,tbab,dcm；(b)tfa,dcm；(c)3,3-二氟-2,2-二甲基丁酸,edci,diea,dmf,室溫,12小時(d)nah,mei,thf.

3.ripk1的激酶測定

材料：具有n端gst-標籤(目錄編號#r07-34g)的重組全長ripk1蛋白購自signalchem。adp-glotm激酶測定試劑盒(目錄編號#v9102)來自promega。mbp蛋白(目錄編號#m2295)和其它所有化學試劑來自sigma。384孔測試板(目錄編號#3674，白板，不透明)購自corning。

激酶活性測定和數據分析：ripk1激酶測定在白色384孔板中進行。測試緩衝液含有25mmhepes(ph7.2)，20mm氯化鎂，12.5mm氯化錳，5mmegta，2mmedta，12.5mmβ-甘油磷酸和2mmdtt。首先將ripk1與化合物或dmso對照孵育15分鐘，之後加入atp/mbp的底物混合物以引發反應。ripk1的終濃度為161nm，atp終濃度為50μm，mbp為20μm。室溫下反應90分鐘後，按adp-glotm激酶測定試劑盒(promega)的技術手冊添加adp-glo試劑和檢測溶液，在perkinelmerenspire上測量發光。數據使用graphpadprim(graphpad軟體：www.graphpad.com)進行分析。使用具有s型劑量反應的非線性回歸模型擬合曲線。

結果：hrip1激酶測定的pic50與我們的細胞壞死測定的pec50相關。示例性數據如下所示：

4.4.細胞壞死測定

方法：

在mccoy’s5a培養基(invitrogen)中培養ht-29細胞。第一天，ht-29細胞以每孔2500-3500個細胞的密度覆蓋在96孔分析板中。第二天，通過加入20ng/mltnf-α(t)，100nmsmac模擬物(s)，和20mmz-vad(z)誘導細胞壞死。同時，將來自約20萬個化合物的化學文庫的10mm化合物輸送到每孔中。處理24小時後，通過使用celltiter-glo發光細胞活力測定試劑盒測量atp水平來測定細胞活性。根據製造商的說明進行celltiter-glo測定(promega)，化學發光使用perkinelmerenspire多模式讀數器記錄。將存活的細胞歸一化為用dmso處理的那些細胞。nec-1作為篩選壞死抑制劑的陽性對照。數據表示為重複的平均值±標準偏差。

通過如上所述測量atp水平來測定ht-29細胞中化合物對壞死的劑量依賴型抑制。

化合物壞死的活性數據如下：