作為抗癌劑的變麴黴素衍生物的製作方法

2023-05-09 15:28:36

專利名稱：作為抗癌劑的變麴黴素衍生物的製作方法
技術領域：
本發明涉及抗腫瘤化合物，尤其是變麴黴素B和脫氧變麴黴素B的新的抗腫瘤同系物。本發明還涉及合成方法，尤其是製備本發明的新化合物以及已知的變麴黴素B和脫氧變麴黴素B化合物的合成方法，包括形成這些合成方法部分的新中間體。另外，本發明涉及已知變麴黴素化合物的新的、先前未公開的適應症。
背景技術：
變麴黴素是從稀少的、難於得到的南極海綿動物kirkpatrickavarialosa中分離出的一類新的海洋生物鹼，其中變麴黴素B(1)是一個典型的例子。
變麴黴素都含有稠合的吡啶並[3』，2』4，5]吡咯並[1，2-c]嘧啶核(2)，或者帶有雜芳環或者在C5上連接酯基，如在變麴黴素B(1)和變麴黴素D(3)中所示。
已公開變麴黴素具有抗腫瘤活性和其它有用的性質。這些變麴黴素及相關化合物的完整結構和抗腫瘤活性由N.B.Perry等在Tetrahedron，1994，50，3987-92以及G.Trimurtulu等在Tetrahedron，1994，50，3993-4000中公開。但是，這些文獻中所述的變麴黴素僅證實顯示出有限範圍的抗腫瘤活性。
天然產物的有限的可利用度引起對所尋找的所述天然化合物及相關同系物的其它合成方法的研究。
M.Alvarez等在Tetrahedron Lett，2001，42，315-317中描述了製備相關脫氧變麴黴素B(4)的合成方法(該公開先於本申請的申請日，但後於優先權日)。
該參考文獻中所述的脫氧變麴黴素B的合成途徑一共包括至少十四個步驟，其中稠合的三環吡啶並吡咯並嘧啶核由7-氮雜吲哚構建，然後採用雜芳基偶合反應引入第四個芳環，得到中間體(5)。用氨基取代衍生的碸基團(6)，得到脫氧變麴黴素B(4) 但是，如前所示，這種合成法步驟長且複雜。另外，變麴黴素B(或任何天然的變麴黴素)的合成法尚未見報導。
因此，需要提供一種步驟數比上述方法更少的能夠合成脫氧變麴黴素B及其衍生物的方法。
還需要提供一種能夠合成變麴黴素B本身及其脫氧衍生物的方法。
還需要提供可與天然變麴黴素B的抗腫瘤活性相當甚或具有更優的抗腫瘤活性的新化合物。
本發明的合成方法提供製備變麴黴素B(1)的第一方法，並提供了簡便、快速製備脫氧變麴黴素B(4)和中間體如(5)和(6)的方法。這些中間體已用於製備包含所述變麴黴素的稠合三環吡啶並吡咯並嘧啶核的新的抗腫瘤化合物。
發明概述根據本發明，利用這些化合物隱藏的對稱元素的優點，研製了製備變麴黴素B、脫氧變麴黴素B以及類似化合物的合成方法。這些新的方法以比先前領域合成法更少的步驟，合成了由在C5上帶有雜芳環的稠合吡啶並吡咯並嘧啶核組成的所述變麴黴素核的骨架。
因此，可能將簡單的單雜芳族分子轉化為一系列具有潛在抗腫瘤治療活性的新的和已知的變麴黴素衍生物。
因此，在第一方面，本發明提供一種式(I)化合物及其鹽和酯 其中R1和R2各自獨立選自H、OH、OR』、SH、SR』、SOR』、SO2R』、NO2、NH2、NHR』、N(R』)2、NHCOR』、N(COR』)2、NHSO2R』、CN、滷素、C(＝O)H、C(＝O)R』、CO2H、CO2R』、C1-C12烷基、C1-C12滷代烷基、C2-C12鏈烯基、C2-C12炔基、取代的或未取代的芳基、取代的或未取代的芳基烷基以及取代的或未取代的雜芳基；和R3選自H、OH和OMe；其中所述基團R』或各個R』獨立選自OH、C1-C12烷基、C1-C12滷代烷基、C2-C12鏈烯基、C2-C12炔基、取代的或未取代的芳基、取代的或未取代的芳基烷基、取代的或未取代的芳基鏈烯基以及取代的或未取代的雜芳基，並且其中基團R1、R2或R3是式N(R』)2或N(COR』)2的基團，各R』基團可以相同或不同，或者兩個R』基團與其相連的氮原子一起可以形成一個5-14元雜環；芳基和芳基烷基和芳基鏈烯基的芳基部分是在一個碳環或二或多個稠合環上具有6-14個碳原子的碳環芳基；所述芳基烷基是被如上定義的芳基取代的C1-C6烷基；所述芳基鏈烯基是被如上定義的芳基取代的C2-C6鏈烯基；所述雜芳基是在一個環中或二或多個稠合環上具有5-14個環原子的雜環芳基，其中至少一個環原子選自氮、氧和硫，並且該雜環芳基與如上定義的芳基稠合；所述芳基和雜芳基以及所述芳基烷基和芳基鏈烯基的芳基部分上的取代基選自C1-C12烷基、C1-C12滷代烷基、C1-C12烷氧基、C1-C12烷硫基、NH2、C1-C4烷基氨基、二(C1-C4烷基)氨基、C1-C4烷醯基氨基、二(C1-C4烷醯基)氨基、NO2、CN和滷素；及其衍生物，其中所述氮原子被季銨化，但排除以下化合物，其中R1是氨基、硫代甲基、甲基亞磺醯基或甲磺醯基，R2是氨基和R3是氫；或R1和R2是氨基，且R3是羥基。
本發明還提供製備以上所述式(I)的新變麴黴素衍生物以及已知變麴黴素衍生物(如先前領域所述的那些化合物)的合成方法。
因此，在第二方面，本發明提供製備式(I)化合物及其鹽和酯的方法 其中
R1和R2各自獨立選自H、OH、OR』、SH、SR』、SOR』、SO2R』、NO2、NH2、NHR』、N(R』)2、NHCOR』、N(COR』)2、NHSO2R』、CN、滷素、C(＝O)H、C(＝O)R』、CO2H、CO2R』、C1-C12烷基、C1-C12滷代烷基、C2-C12鏈烯基、C2-C12炔基、取代的或未取代的芳基、取代的或未取代的芳基烷基以及取代的或未取代的雜芳基；和R3選自H、OH和OMe；其中所述R』或各個R』獨立選自OH、C1-C12烷基、C1-C12滷代烷基、C2-C12鏈烯基、C2-C12炔基、取代的或未取代的芳基、取代的或未取代的芳基烷基、取代的或未取代的芳基鏈烯基以及取代的或未取代的雜芳基，並且其中基團R1、R2或R3是式N(R』)2或N(COR』)2的基團，各R』基團可以相同或不同，或者兩個R』基團與其相連的氮原子一起可以形成一個5-14元雜環；芳基和芳基烷基和芳基鏈烯基的芳基部分是在一個碳環或二或多個稠合環上具有6-14個碳原子的碳環芳基；所述芳基烷基是可被如上定義的芳基取代的C1-C6烷基；所述芳基鏈烯基是可被如上定義的芳基取代的C2-C6鏈烯基；所述雜芳基是在一個環中或二或多個稠合環上具有5-14個環原子的雜環芳基，其中至少一個環原子選自氮、氧和硫，並且該雜環芳基可與以上定義的芳基稠合；所述芳基和雜芳基以及所述芳基烷基和芳基鏈烯基的芳基部分上的取代基選自C1-C12烷基、C1-C12滷代烷基、C1-C12烷氧基、C1-C12烷硫基、NH2、C1-C4烷基氨基、二(C1-C4烷基)氨基、C1-C4烷醯基氨基、二(C1-C4烷醯基)氨基、NO2、CN和滷素；及其衍生物，其中所述氮原子被季銨化，
該方法包括式(II)中間體的製備 其中R1a、R2a和R3a分別代表R1、R2和R3所代表的任何基團，並且所有這些基團的活性官能團被保護；Y1和Y2為能被消除以生成稠合的三環吡啶並吡咯並嘧啶環結構的基團。
如下所述，式(I)新化合物呈現出抗哺乳動物癌細胞系的生物學活性。這些化合物的抗腫瘤活性包括白血病、肺癌、結腸癌、腎癌、前列腺癌、卵巢癌、乳腺癌、肉瘤和黑素瘤。另外，已知的式(I)化合物呈現出以前未公開的更寬的抗癌譜。
因此，在第三方面，本發明提供一種治療或預防哺乳動物癌症的方法，該方法包括給予需要此種治療的哺乳動物有效量的本發明的新化合物。
另外，在第四方面，本發明提供一種治療或預防哺乳動物的選自卵巢癌、腎癌、前列腺癌、乳腺癌和黑素瘤的癌症的方法，該方法包括給予需要此種治療的哺乳動物有效量的本發明的新化合物或者現有技術的變麴黴素化合物。
另一方面，本發明提供某些優選化合物(在以下詳細說明)以及中間體化合物(尤其是以上式(II)化合物)的合成步驟。
優選實施方案詳述在本中請所用的定義中，烷基可以是直或支鏈基團，並優選具有1-約12個碳原子，更優選1-約8個碳原子，還更優選1-約6個碳原子，最優選1、2、3或4個碳原子。在本發明化合物中，甲基、乙基和丙基(包括異丙基)是特別優選的烷基。除另有改動，此處所用術語烷基指環狀和非環狀基團，雖然環狀基團至少含有3個環碳原子。
滷代烷基是被一或多個滷原子(優選氟、氯、溴或碘)取代的如上定義的烷基(包括環烷基)，並優選具有1-約12個碳原子，更優選1-約8個碳原子，還更優選1-約6個碳原子，最優選1、2、3或4個碳原子。在本發明化合物中，特別優選的滷代烷基是被1、2或3個可以相同或不同的滷原子取代的甲基、乙基和丙基(包括異丙基)，尤其是氟甲基、氟氯甲基、三氟甲基和三氯甲基。
本發明化合物中優選的鏈烯基和炔基具有一或多個不飽和鍵，並具有2-約12個碳原子，更優選2-約8個碳原子，還更優選2-約6個碳原子，最優選2、3或4個碳原子。此處所用術語鏈烯基和炔基指環狀和非環狀基團，雖然一般更優選直或支鏈非環狀基團。
本發明化合物中優選的烷氧基包括具有一或多個(但優選僅具有1個)氧鍵並優選具有1-約12個碳原子，更優選1-約8個碳原子，還更優選1-約6個碳原子，最優選1、2、3或4個碳原子的基團。
本發明化合物中優選的烷硫基具有一或多個(但優選僅具有1個)硫醚鍵並具有1-約12個碳原子，更優選1-約8個碳原子，還更優選1-約6個碳原子。特別優選具有1、2、3或4個碳原子的烷硫基。
本發明化合物中優選的烷基亞磺醯基包括具有一或多個亞碸基(SO)，並具有1-約12個碳原子，更優選1-約8個碳原子，還更優選1-約6個碳原子的基團。特別優選具有1、2、3或4個碳原子的烷基亞磺醯基。
本發明化合物中優選的烷基磺醯基包括具有一或多個磺醯基(SO2)的基團，並具有1-約12個碳原子，更優選1-約8個碳原子，還更優選1-約6個碳原子。特別優選具有1、2、3或4個碳原子的烷基磺醯基。
本發明化合物中優選的烷醯基包括具有一或多個羰基(CO)的基團，並具有1-約12個碳原子，更優選1-約8個碳原子，還更優選1-約6個碳原子(包括羰基碳)。特別優選具有1、2、3或4個碳原子的烷醯基，尤其是甲醯基、乙醯基、丙醯基、丁醯基和異丁醯基。
本發明化合物中優選的烷基氨基具有一或多個(但優選僅具有1個)NH鍵，並優選具有1-約12個碳原子，更優選1-約8個碳原子，還更優選1-約6個碳原子。特別優選具有1、2、3或4個碳原子的烷基氨基，尤其是甲氨基、乙氨基、丙氨基和丁氨基。
本發明化合物中優選的二烷基氨基具有一或多個(但優選僅具有1個)與兩個烷基結合的氮原子，這兩個烷基各自可具有1-約12個碳原子，更優選1-約8個碳原子，還更優選1-約6個碳原子。該烷基可以相同或不同。特別優選其中各烷基具有1、2、3或4個碳原子的二烷基氨基，尤其是二甲氨基、二乙氨基、N-甲基乙氨基、N-乙基丙氨基、二丙氨基、二丁基氨基和N-甲基丁氨基。
本發明化合物中優選的烷醯基氨基具有一個與烷基相結合的NH-CO-鍵，該烷基具有1-約12個碳原子，更優選1-約8個碳原子，還更優選1-約6個碳原子。特別優選具有1、2、3或4個碳原子的烷醯基氨基，尤其是甲醯氨基、乙醯氨基、丙醯氨基和丁醯氨基。特別優選乙醯氨基。
本發明化合物中優選的二烷醯基氨基具有一個與兩個如上定義的烷醯基連接的氮原子，各烷基可以相同或不同，各自可具有1-約12個碳原子，更優選1-約8個碳原子，還更優選1-約6個碳原子。特別優選其中各烷醯基具有1、2、3或4個碳原子的二烷醯基氨基，尤其是二甲醯基氨基、甲醯基乙醯基氨基、二乙醯基氨基、二丙醯基氨基和二丁醯基氨基。特別優選二乙醯基氨基。
本發明化合物中優選的烷基磺醯基氨基具有一個與烷基相結合的NH-SO2-鍵，該烷基具有1-約12個碳原子，更優選1-約8個碳原子，還更優選1-約6個碳原子。特別優選具有1、2、3或4個碳原子的烷基磺醯基氨基，尤其是甲磺醯基氨基、乙磺醯基氨基、丙磺醯基氨基和丁磺醯基氨基。
在式(I)化合物中，R1優選選自OH、OR』、SH、SR』、SOR』、SO2R』、NH2、NHR』、N(R』)2、NHCOR』、N(COR』)2、NHSO2R』、C(＝O)R』、CO2H、CO2R』、C1-C12烷基和C1-C12滷代烷基。
所述R』或各R』獨立選自OH、C1-C12烷基、C1-C12滷代烷基、芳基(可任選被選自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、NH2、C1-C6烷基氨基、二(C1-C6烷基)氨基、NO2、CN和滷素的基團取代)、芳基烷基或芳基鏈烯基(其芳基部分可任選被選自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、NH2、C1-C6烷基氨基、二(C1-C6烷基)氨基、NO2、CN和滷素的基團取代)，並且其中基團R1是式N(R』)2或N(COR』)2的基團，所述各R』基團可以相同或不同，或者兩個R』基團與其相連的氮原子一起形成一個5-12元雜環。
更優選R1選自OR』、SR』、SOR』、NH2、NHR』、N(R』)2、NHCOR』、N(COR』)2和NHSO2R』，所述R』或各R』獨立選自C1-C6烷基、C1-C6滷代烷基、芳基(可任選被選自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和滷素的基團取代)、芳基烷基(其芳基部分可任選被選自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和滷素基團取代)、芳基鏈烯基(其芳基部分可任選被選自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和滷素的基團取代)，並且其中基團R1是式N(R』)2或N(COR』)2的基團，所述兩個R』基團與其相連的氮原子一起形成一個5-10元雜環。
更優選R1選自C1-C4烷氧基、C1-C4烷硫基、C1-C4烷基亞磺醯基、氨基、C1-C4烷基氨基、二(C1-C4烷基)氨基、C1-C4烷醯基氨基、二(C1-C4烷醯基)氨基、C1-C4滷代烷醯基氨基、芳基氨基(其中芳基部分可任選被C1-C4烷氧基取代)、苄基氨基(其中苄基的苯基部分可任選被C1-C4烷氧基取代)、肉桂醯基氨基或二肉桂醯基氨基(其中所述或各肉桂醯基的苯基部分可任選被C1-C4烷氧基取代)，或者是通過其氮原子與該分子其餘部分相連的5-7元含氮雜環。
還更優選R1選自甲氧基、硫代甲基、甲基亞磺醯基、氨基、甲氨基、乙氨基、苄氨基、乙醯基氨基、三氟乙醯基氨基、二乙醯基氨基、肉桂醯基氨基、二肉桂醯基氨基、對甲氧基苄氨基和哌啶子基。
最優選R1選自氨基、苄氨基、乙醯基氨基、三氟乙醯基氨基、二乙醯基氨基、肉桂醯基氨基、二肉桂醯基氨基和對甲氧基苄氨基。
R2優選選自OH、OR』、SH、SR』、SOR』、SO2R』、NH2、NHR』、N(R』)2、NHCOR』、N(COR』)2、NHSO2R』、O(＝O)R』、CO2H、CO2R』、C1-C12烷基和C1-C12滷代烷基。
所述R』或各R』獨立選自OH、C1-C12烷基、C1-C12滷代烷基、芳基(可任選被選自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、NH2、C1-C6烷基氨基、二(C1-C6烷基)氨基、NO2、CN和滷素的基團取代)、芳基烷基或芳基鏈烯基(其芳基部分可任選被選自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、NH2、C1-C6烷基氨基、二(C1-C6烷基)氨基、NO2、CN和滷素的基團取代)，並且其中基團R2是式N(R』)2或N(COR』)2的基團，各R』基團可以相同或不同，或者兩個R』基團與其相連的氮原子一起形成一個5-12元雜環。
更優選R2選自OR』、SR』、SOR』、NH2、NHR』、N(R』)2、NHCOR』、N(COR』)2和NHSO2R』，所述R』或各R』獨立選自 C1-C6烷基、C1-C6滷代烷基、芳基(可任選被選自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和滷素的基團取代)、芳基烷基(其芳基部分可任選被選自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和滷素的基團取代)、芳基鏈烯基(其芳基部分可任選被選自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和滷素的基團取代)，並且其中基團R2是式N(R』)2或N(COR』)2的基團，兩個R』與其相連的氮原子一起可以形成一個5-10元雜環。
更優選R2選自C1-C4烷氧基、C1-C4烷硫基、C1-C4烷基亞磺醯基、氨基、C1-C4烷基氨基、二(C1-C4烷基)氨基、C1-C4烷醯基氨基、二(C1-C4烷醯基)氨基、C1-C4滷代烷醯基氨基、芳基氨基(其中芳基部分可任選被C1-C4烷氧基取代)、苄基氨基(其中其苄基的苯基部分可任選被C1-C4烷氧基取代)、肉桂醯基氨基或二肉桂醯基氨基(其中所述或各肉桂醯基的苯基部分可任選被C1-C4烷氧基取代)，或者是通過其氮原子與該分子其餘部分相連的5-7元含氮雜環。
還更優選R2選自硫代甲基、甲基亞磺醯基、氨基、甲氨基、乙氨基、乙醯基氨基、二乙醯基氨基、肉桂醯基氨基和對甲氧基苄氨基。最優選R2選自氨基、乙醯基氨基、二乙醯基氨基和對甲氧基苄氨基。
優選R3是H。
本領域技術人員將容易理解，上述R1、R2和R3的優選定義可以以各種方式組合，並且將由以上優選定義的這些組合所涵蓋的化合物認定為本發明的一部分。優選這些定義中的兩個的組合，特別優選所有三個優選定義的組合。
最優選下列化合物1N』-二乙醯基脫氧變麴黴素；2N』-二乙醯基-N-乙醯基脫氧變麴黴素；3N』-二乙醯基-N-二乙醯基脫氧變麴黴素；4N』-乙醯基脫氧變麴黴素；5N』-乙醯基-N-乙醯基脫氧變麴黴素；6N』-二肉桂醯基脫氧變麴黴素；7N』-二肉桂醯基-N-肉桂醯基脫氧變麴黴素；8N』-甲磺醯基脫氧變麴黴素；9N』-三氟乙醯基脫氧變麴黴素；10 2』-甲氧基脫氧變麴黴素；11 2』-哌啶基脫氧變麴黴素；12 N』-乙基脫氧變麴黴素；13 N』-丁基-N』-甲基脫氧變麴黴素；和14 N』-苄基脫氧變麴黴素。
式(I)化合物包含鹼性基團，因此可形成鹽。對於本發明來講，這些鹽的性質並不關鍵，條件是，當該化合物用於治療目的時，所述鹽是藥學上可接受的，即與游離鹼化合物相比，生理活性更高、生理活性相當或者生理活性不過度地降低，同時與所述游離鹼化合物相比，毒性更小、毒性相當或者毒性不過度增高。這一點可通過對於本領域技術人員很易明白的簡單的試驗容易地確證。但是，當該化合物用於其它目的(如作為製備其它化合物的中間體)時，甚至並不實行這種限制。適當鹽的實例包括無機酸鹽，如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽和磷酸鹽；有機酸鹽，如乙酸鹽、苯甲酸鹽、草酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽和琥珀酸鹽；以及磺酸鹽，如甲磺酸鹽、苯磺酸鹽和對甲苯磺酸鹽。優選的鹽包括鹽酸鹽、氫溴酸鹽、酒石酸鹽和琥珀酸鹽。
某些式(I)化合物包含羧基，因此可形成酯。對於本發明來講，這些酯的性質並不關鍵，條件是，當該化合物用於治療目的時，所述酯是藥學上可接受的，即與所述游離酸化合物相比，生理活性更高、生理活性相當或者生理活性不過度地降低，同時與所述游離酸化合物相比，毒性更小、毒性相當或者毒性不過度增高。優選該酯基是生理上可除去的基團，即在體內該酯很易轉化為游離酸。這一點可通過對於本領域技術人員很易明白的簡單的試驗容易地確證。
本發明化合物含有至少4個叔氨基，其中一或多個(但優選僅一個)可被季銨化以形成季銨鹽。在這種情況下，也存在相反離子；適當相反離子的實例參考以上對鹽的定義。對於本領域技術人員來講，氮原子的季銨化的步驟是很容易明白的。與形成季銨類的叔氨基相連的基團優選為C1-C6烷基，最優選甲基。
式(I)變麴黴素衍生物(包括已知的變麴黴素化合物)可通過構成本發明部分的新方法製備。
本發明方法的組成包括下式(II)的中間體的形成 在式(II)中間體中，R1a、R2a或R3a分別代表R1、R2或R3所代表的任何基團，並且所有這些基團中的活性官能團被保護；Y1和Y2是能被消除以生成稠合的三環吡啶並吡咯並嘧啶環結構的基團。式(II)中間體是新化合物，也構成本發明的一部分。
可用本領域已知的任何保護基形成具有保護的活性官能團的R1a、R2a和R3a。關於這一點，可參考T.W.Greene等的「Protective Groupsin Organic Synthesis(有機合成的保護基團)」，John Wiley Sons，1991。
能被消除以生成稠合的三環吡啶並吡咯並嘧啶環結構的任何基團都可用作基團Y1和Y2。優選基團Y1是羥基或者不穩定的酯基，如乙酸酯、甲磺酸酯、對甲苯磺酸酯或三氟甲磺酸酯，更優選為羥基。優選Y2基團是滷原子，更優選是氯原子。
優選式(II)中間體是對稱的，即R1a與R2a相同如下所述，這可通過向前體中加入兩當量的試劑形成該中間體；同時這縮短了合成步驟。更優選，R1a和R2a都是甲硫基。
式(II)中間體可通過許多方法製備。一種優選的方法是使式(IV)中間體化合物
其中R3a和Y2定義同上且M為金屬，與式(V)化合物反應製備 其中R1a和R2a定義同上。
在上式(IV)化合物中，金屬原子M的性質並不特別關鍵，條件是該化合物有足夠的活性足以與式(V)化合物進行加成反應。適當金屬化基團的實例包括那些其中M是Li、Na、K、Mg或Zn的基團；在帶有二價金屬離子的金屬化基團情況下，也可存在相反離子，如滷素，或者該化合物可以以二有機化金屬基團的形式存在。M優選為Li。
式(IV)化合物一般可通過在原處將對應的滷代化合物金屬化製備。適當的試劑是本領域中熟知的，實例包括金屬本身或其它活性更高的金屬化合物，如烷基金屬衍生物。優選烷基鋰衍生物，最優選丁基鋰。
式(V)化合物優選通過使式(VI)中間體化合物 其中R1a定義同上且M為金屬，與式L1-CO-L2化合物反應製備，其中L1和L2相同或不同，各自代表離去基團。
在式(VI)化合物中，金屬原子M的性質並不特別關鍵，條件是該化合物的活性足以與式L1-CO-L2化合物進行加成反應。適當金屬化基團的實例包括那些在以上式(IV)化合物中定義和舉例的基團。M優選為Li。
式(VI)化合物一般可通過在原處將對應的滷代化合物，即式(VIII)
化合物 其中R1a定義同上，X是滷原子，優選溴和碘，進行金屬化製備。
其中R1a是甲硫基且X為氯的式(VIII)化合物由市售提供。其中X為其它滷原子的對應化合物可由對應的氯代化合物，根據文獻說明製備，見Majeed，A.J.；Antonsen.O.；Benneche，T.；Undheim，K.Tetrahedron，1989，45，993和以下參考實施例1。
在本領域中，將式(VIII)化合物金屬化生成式(VI)化合物的適當的試劑和方法是熟知的。實例包括金屬本身或其它活性更高的金屬化合物，如烷基金屬衍生物。優選烷基鋰衍生物，最優選丁基鋰。
在式L1-CO-L2化合物中，L1和L2可以相同或不同，各自代表離去基團，其準確的性質並不特別關鍵。適當離去基團的非限定實例包括滷素、C1-C6烷氧基、二(C1-C6烷基)氨基、含氮雜環(尤其是咪唑)或不穩定的酯基，如以上對Y1定義的有關基團。式L1-CO-L2化合物的特別優選實例為碳酸二乙基酯。
在另一優選實施方案中，式(II)化合物通過使如上所述的式(VI)中間體化合物與式(VII)中間體化合物反應製備 其中R3a和Y2定義同上，和Z為離去基團。
在式(VII)化合物中，基團Z為離去基團，其實例為以上對Y1、L1和L2定義的基團。當兩當量的式(VI)金屬化合物完全加入到式(VII)化合物中時，特別優選Z是滷原子，尤其是氯。
在基團Y1和Y2的消除中，式(II)中間體優選環合生成式(III)中間體 其中R1a、R2a和R3a定義同上。
基團Y1和Y2的消除優選通過使式(II)中間體與式RaRbRcSiH的三烷基矽烷反應進行，其中Ra、Rb和Rc可以相同或不同，各自代表C1-C12烷基。優選採用三乙基矽烷作為試劑。
該反應優選在酸存在下進行，該酸的準確性質並不特別關鍵。優選強有機酸，如對甲苯磺酸或三氟乙酸，特別優選三氟乙酸。
然後通過官能團的相互轉化，可將式(III)中間體化合物轉化為式(I)化合物，該轉化的一般性質對本領域技術人員來講是熟知的。舉例來說，如下流程I及實例所示，可以容易地將通過本發明方法製備的已知化合物脫氧變麴黴素B(4)的氨基轉化為各種官能化的衍生物。
流程I 在另一方法中，另一組同系物可通過所述變麴黴素的C5雜芳環的官能作用產生。這可以很容易地通過將中間體(5)氧化為碸(6)或亞碸(22)，然後進行親核取代反應來實現，如流程II所示。
流程II 以前未公開的所述變麴黴素的兩個特別重要的轉化。
因此，本發明另一方面提供製備式(I)化合物的方法，其中R1和R2是氨基，R3定義同上，所述方法包括a)將其中R1a和R2a是甲基亞磺醯基，R3a定義同上的式(III)化合物，用其中Prot是氨基保護基的式NH2Prot化合物處理，生成其中R1a和R2a是被保護的氨基，R3a定義同上的式(III)化合物；b)除去氨基保護基，得到式(I)化合物，其中R1和R2是氨基，R3定義同上。
所述氨基保護基的性質並不特別關鍵。適當的保護基、其連接及其除去的實例在結合到本發明中作為參考的T.W.Greene等，「Protective Groups in Organic Synthesis」，John Wiley Sons，1991中給出。
所述保護基優選是取代或未取代的苄基或苯二甲醯亞胺基，尤其是對甲氧基苄基(PMB)。該基團可通過任何常用的途徑除去，例如在酸性條件(尤其是強有機酸，如三氟甲磺酸或三氟乙酸)下、在氧化條件(如二氯二氰基苯醌(DDQ))或還原條件(如用氫氣和鈀催化劑)下。
該方法的優選實施方案在以下流程III中說明，其中二亞碸(20)向脫氧變麴黴素B(4)的轉化用兩步，通過二胺(29)實現。
流程III 在另一方面，本發明提供由其中R1a和R2a是甲硫基，R3a如權利要求19中定義的式(III)化合物，製備其中R1是甲硫基或氨基、R2是氨基，R3如權利要求1中定義的式(I)化合物的方法，所述方法包括a)任選將其中R1a和R2a是甲硫基的式(III)化合物氧化成其中R1a和R2a是甲基亞磺醯基的式(III)化合物；和b)將其中R1a和R2a是甲硫基或甲基亞磺醯基的式(III)化合物，用選自疊氮化鈉和氨的試劑處理。
可用任何能將硫醚氧化成亞碸的氧化劑完成上述方法的步驟a)的任選氧化。適當氧化劑的非限定實例包括過氧化氫、過氧化鈉、t-BuOCl、過硼酸鈉和過氧酸，如過乙酸、間氯過苯甲酸(mCPBA)或單過氧鄰苯二甲酸鎂(MMPP)，其中優選過氧酸，最優選mCPBA。
該方法的一個實施方案在以下流程IV中說明，其中中間體(19)用單一步驟，經所述亞碸中間體(20)，被轉化為脫氧變麴黴素B(4)
流程IV 從簡單的單雜芳族原料(7)至脫氧變麴黴素B(4)的合成，用於構建所述變麴黴素母核骨架的新方法總共僅用5步完成。該方法比先前領域中所述製備脫氧變麴黴素B的步驟明顯縮短。
在該方法的另一實施方案中，見以下流程V所示，可通過用氨溶液處理，一步完成二硫醚中間體(19)向硫代脫氧變麴黴素(5)的轉化流程V 本發明方法的特別優選實施方案在以下流程VI中說明。準確的條件在實施例、方法實施例和參考實施例中更詳細地說明。
本發明的新合成方法從簡單的單雜芳族原料(7)開始，僅用4步完成所述變麴黴素母核骨架(如(13)中所示)的構建，該骨架由在C5上帶有雜芳環的稠和吡啶並吡咯並嘧啶核組成。
流程VI 然後再用4步進行簡單的官能團的操作，將中間體(13)轉化為所知的化合物變麴黴素B(1)，見以下流程VII所示流程VII 這種從市售提供的原料(7)開始的8步較短的方法代表首次報導的製備變麴黴素B的合成方法。
本發明提供了快速製備用於合成脫氧變麴黴素B及相關同系物的關鍵中間體(19)的類似方法，如以下流程VIII中說明，並在實施例、方法實施例和參考實施例中更詳細地說明。
流程VIII 一般可將以上說明的製備變麴黴素B或脫氧變麴黴素B的途徑改變，以形成其它衍生物。更詳細地講，本發明提供新化合物，它可以由通過作為本發明部分的新方法製備的中間體製得。
因此，根據本發明，我們現在提供製備變麴黴素B(1)、脫氧變麴黴素B(4)以及相關中間體如(5)的合成路線，並提供由此製備變麴黴素類似物的合成方法。本發明的合成路線各自包括一系列製備所要求產物的轉化步驟。各步驟本身都為本發明的方法。本發明並不限定於所列舉的路線，例如在適當時，可通過改變轉化步驟的順序，提供其它路線。
更詳細地講，本發明特別優選的實施方案的變麴黴素B的合成包括下列8個步驟a)將市售獲得的的4-氯-2-硫代甲基嘧啶(7)轉化為碘代化合物(8)，b)使(8)與碳酸二乙酯反應，得到對稱酮(9)，c)將(9)加入到吡啶衍生物(11)的鋰化形式的溶液中，形成三芳基醇(12)，d)採用三乙基矽烷和三氟乙酸混合物，順序進行三芳基醇(12)的脫氧化和環化反應，e)用mCPBA將中間體(13)氧化成二亞碸(14)，f)用對甲氧基苄胺處理(14)，得到雙胺(15)，g)用乙硫醇鈉，將(15)的甲氧基轉化為醇(16)，h)用三氟乙酸，除去(16)的對甲氧基苄基保護基，得到變麴黴素B(1)。
該合成在以下流程IX中說明。所用方法的更多細節在實施例、方法實施例和參考實施例中說明。
流程IX 在另一優選的修改方法中，將原料(7)轉化為脫氧變麴黴素B，該方法包括以下5個步驟。
a)將市售獲得的的4-氯-2-硫代甲基嘧啶(7)轉化為碘代化合物(8)，b)使(8)與吡啶衍生物(17)反應，得到三芳基醇(18)，c)採用三乙基矽烷和三氟乙酸混合物，順序進行三芳基醇(18)的脫氧化和環化反應，d)用mCPBA將二硫醚(19)氧化成二亞碸(20)，e)用氨溶液處理(20)，得到脫氧變麴黴素B(4)。
該合成在以下流程X中說明。所用方法的更多細節在實施例、方法實施例和參考實施例中給出。
流程X 技術熟練的專家很容易明白，可以以多種方式修飾和/或合併此處所述的反應流程，由此所生成的化合物被認作本發明的部分。尤其是，可改變原料和/或試劑和反應以適合式(I)-(VIII)中取代基的其它組合。
藥用組合物藥用組合物的實例包括帶有適當組合物的任何固體(片劑、丸劑、膠囊劑、顆粒劑等)或液體(溶液劑、混懸液或乳劑)或者口服、局部或非腸道給藥的組合物，它們可包含所述純的化合物或者與任何載體或其它藥理活性化合物相結合。當非腸道給藥時，這些組合物可需要滅菌。
所述化合物的準確劑量將根據具體的劑型、應用的方式以及所治療的具體的部位、宿主和腫瘤而定。其它因素如年齡、體重、性別、飲食、給藥時間、排洩率、宿主的症狀、聯合使用的藥物、反應的敏感性以及疾病的嚴重程度應考慮在內。在最大耐受劑量範圍內，可連續性或周期性進行給藥。
可通過任何適當的方法，如靜脈輸注、口服劑型、腹膜內和靜脈內給藥，給予本發明化合物或組合物。
細胞毒活性根據以下所述方案，測試本發明化合物。
已有報導採用應用硫氰酸胺B(SRB)反應的比色試驗法進行細胞生長和成活率的定量測定見Skehan，P.A.等，J.Natl.Cancer Inst，1990，82，1107-1112。該試驗採用96孔的9mm直徑的細胞培養微量滴定板(Faircloth，G.T.，；Stewart，D和Clement，J.J.，Journal of Tissueand Culture Methods，1983，11，201-205；Mosmann，T.Journal ofImmunological Methods，1983，65，55-63)。
所述細胞系的大多數源於不同類型人癌，由American TypeCulture Collection(ATCC)提供。將細胞保存在補充0.1g/l青黴素和0.1g/l硫酸鏈黴素的RPMI 1640 10％ FBS中，然後在37℃、5％ CO2和98％溼度下培養。為進行試驗，可用胰蛋白酶從分會合培養中收集細胞，然後在平板接種前懸浮於新鮮培養基中。
在195μl培養基等份液中，以每孔5×103個細胞的量，將細胞接種於96孔微量滴定板中，然後通過使其在無藥物培養基中生長18小時，至該滴定板表面。然後以溶於DMSO/EtOH(0.2％的PS緩衝液)中的10至10-8μg/ml的範圍，每等份液5μl中加入樣本。暴露48小時後，通過SRB方法測定抗腫瘤活性通過加入50μl冷50％(w/v)三氟乙酸(TCA)，固定細胞，然後在4℃下培養60分鐘。將培養板用去離子水洗滌，乾燥。向每個微量滴定孔中加入100μl SRB溶液(0.4％w/v的1％乙酸液)，然後在室溫下培養10分鐘。用1％乙酸洗滌，除去未結合的SRB。將滴定板空氣乾燥，用Tris緩衝液溶解結合的染色劑。用自動分光光度滴定板讀數計，在單波長490nm處讀取光密度。
計算得自一式三份孔內的數據的平均+/-SD值。可計算細胞響應的某些參數GI＝生長抑制率，TGI＝總生長抑制率(抑制細胞效應)和LC＝細胞殺死率(細胞毒效應)。
結果見下表1和2。雖然化合物(1)、(4)、(5)和(6)本身並不屬於本發明的部分，但表中公開的結果表明的不是這些化合物以前公開的抗腫瘤活性。
該申請要求2000年7月11日申請的GB申請號0017055.5和2000年12月15日申請的00306894的優先權。將兩文獻內容結合到本發明中作為參考，其中的公開內容在本申請中顯然未再重複。
表1體外抗腫瘤數據GI50 50％生長抑制率TG1總生長抑制率(抑制細胞效應)LC50 50％淨細胞殺死率(細胞毒性效應)腫瘤類型NSCL結腸黑素瘤化合物細胞系A-549HT-29SW-620MEL-28變麴黴素B1GI50(M) 7.E-07 7.E-071.E-077.E-07(天然來源)TGI(M)1.E-06 1.E-063.E-071.E-06LC50(M) 3.E-06 3.E-062.E-062.E-06脫氧變麴黴素4 GI50(M) 1.E-07 7.E-087.E-087.E-08TGI(M)2.E-07 2.E-073.E-071.E-07LC50(M) 4.E-07 1.E-051.E-053.E-07硫代脫氧變麴黴素5 GI50(M) 1.E-06 6.E-073.E-066.E-08TGI(M)3.E-06 2.E-061.E-053.E-07LC50(M) 1.E-05 1.E-053.E-056.E-06
表1(續表)腫瘤類型 卵巢 腎 前列腺乳房化合物 細胞系ONCAR-3A498DU-145MCF-7MB-231變麴黴素B1 GI50(M) 1.E-07 1.E-07 7.E-07 3.E-07(天然來源) TGI(M)3.E-07 3.E-07 2.E-06 1.E-06LC50(M) 2.E-06 1.E-06 2.E-06 3.E-06脫氧變麴黴素4 GI50(M)1.E-07 7.E-08 1.E-07 1.E-07 7.E-08TGI(M) 3.E-07 2.E-07 3.E-07 3.E-07 3.E-07LC50(M)4.E-07 7.E-07 7.E-06 4.E-06 3.E-05硫代脫氧變麴黴素5 GI50(M)1.E-06 6.E-07 3.E-07 2.E-06 2.E-06TGI(M) 2.E-06 2.E-06 1.E-06 6.E-06 6.E-07LC50(M)3.E-06 3.E-06 3.E-06 3.E-05 1.E-05
表2-體外抗腫瘤數據(M)
表2(續表)
實施例以下實施例說明製備本發明化合物及中間體的方法。在所述方法實施例中，說明本發明製備已知化合物的方法。在參考實施例中，說明非本發明部分的中間體化合物的製備。
通用試驗細節除另有說明，所有反應均在惰性氣氛下、在預先乾燥的玻璃儀器中進行。所有有機提取物都用水和鹽水洗滌，經MgSO4乾燥，然後真空濃縮。熔點採用Kofler程序加熱儀測定，未經校正。
實施例1化合物13 將三芳基醇12(100mg，0.237mmol)(按以下實施例16中說明製備)和三氟乙酸(37μL，0.48mmol)的混合物溶解於1，2-二氯乙烷(0.5mL)中。將得到的橙色溶液轉移至裝有三乙基矽烷(0.30mL，1.9mmol)的裝配有橡膠隔片的楊氏管中。在強氬氣氣流下，用Teflon旋帽替換該隔片，在100℃下，將該密封的反應容器加熱43h。冷卻後，打開容器，將內容物用CH2Cl2(12mL)稀釋。將該溶液用5％的NaHCO3溶液(8mL)中和，分離各相。將水層重複用CH2Cl2提取，根據標準方法處理有機提取液。經矽膠快速層析，用梯度洗脫液(48-75％ EtOAc/己烷)純化該粗品，按順序從洗脫液得到(1)黃色固體的變麴黴素母核結構13(41mg，47％)Mp192-194℃；1H NMR(500MHz，CDCl3)δ2.65(s，3H) 2.70(s，3H)，4.03(s，3H)，6.92(d，J＝5.4Hz，1H)，7.40(d，J＝5.4Hz，1H)，7.71(d，J＝6.8Hz，1H)，7.98(d，J＝6.8Hz，1H)，8.48(m，2H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)δ14.1，14.9，55.6，101.9，102.5，108.5，110.8，117.7，135.9，138.6，143.5，144.3，154.2，155.6，159.6，161.1，171.2；HRMSC17H15N5O32S2(M+)計算值369.0718，實測值369.0720。和(2)粘稠膠狀物的未環合的醚13a(28mg，28％) 1H NMR(500MHz，CDCl3)δ2.36(s，3H)，2.44(s，3H)，3.84(s，3H)6.57(d，J＝5.9Hz，1H)，6.80(d，J＝5.9Hz，1H)，7.17(d，J＝4.9Hz，1H)，7.79(s，1H)，8.27(d，J＝5.9Hz，1H)，8.30(d，J＝5.9Hz，1H)，8.49(d，J＝4.9Hz，1H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)δ14.0(x2)，56.2，71.8，103.5，106.4，112.9，120.8，150.7，152.5，157.1，158.0，166.0，167.1，167.3，172.1，172.4；HRMSC17H1635ClN5O232S2(M+)計算值421.0434，實測值421.0444。
實施例2化合物14和15 在大氣壓條件下，將二-硫化物13(37mg，0.10mmol)溶解於CHCl3(5mL)中，然後在-40℃外浴中冷卻。向該溶液中滴加預先冷卻(-40℃)的間氯過苯甲酸的CHCl3溶液(10mg/mL)，直至TLC分析表明原料完全消耗(約使用2當量m-CPBA)。將該溶液溫熱至室溫，用飽和NaHCO3溶液中和。重複用CH2Cl2提取，經標準後處理後，得到黃色固體。主要為非對映體二-亞碸的混合物。該粗產物不經進一步純化，但二-亞碸14具有下列光譜特徵1H NMR(500MHz，CDCl3)(所述非對映體大多數信號一致，但是，由於它們代表一個以上的化合物，所以都被表示為多重峰)δ3.02(m，3H)，3.19(m，3H)，4.12(m，3H)，7.00-7.01(m，1H)，7.98-7.99(m，1H)，8.12-8.14(m，1H)，8.48-8.49(m，1H)，8.64-8.67(m，1H)，8.79-8.81(m，1H).
在85℃下，將該粗氧化物與過量對甲氧基苄胺(0.15mL，1.1mmol)加熱15h。粗紅色糊狀物經矽膠快速層析純化，用梯度洗脫液(2.5-4％MeOH/CH2Cl2)，將黃色部分用梯度洗脫液(50％ EtOAc/CH2Cl2至100％EtOAc)再層析，得到黃色固體的二胺15(43mg，兩步78％)。Mp74-77℃；1H NMR(500MHz，CDCl3)δ3.81(s，6H)，3.99(s，3H)，4.66(d，J＝5.6Hz，2H)，4.85(d，J＝5.5Hz，2H)，5.51(m，1H)，6.82(d，J＝5.6Hz，1H)，6.89-6.91(m，4H)，7.00(d，J＝5.2Hz，1H)，7.29(m，1H)，7.34(d，J＝8.5Hz，2H)，7.39(d，J＝8.5Hz，2H)，7.43(m，1H)，8.16(d，J＝5.6Hz，1H)，8.26(d，J＝5.2Hz，1H)，10.39(m，1H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)δ44.3，44.9，55.3(2×CH3)，55.5，101.3，101.6，101.8，111.4，112.2，114.0(x2)，128.5，128.8，130.5，131.4，137.5，141.5，141.9，144.7，148.7，154.6(br)，158.7，158.9，159.4，160.9，162.6；HRMSC31H29N7O3(M+)計算值547.2332，實測值547.2334。
實施例3化合物16 將NaH(60％，60mg，1.5mmol)用石油醚洗滌3次，然後混懸於無水DMF(1.5mL)中。將該攪拌的混懸液在冰中冷卻，滴加乙硫醇(0.14mL，1.9mmol)。停止放出氣體後，室溫下，將該澄清溶液攪拌10分鐘。向二胺15(40mg，0.073mmol)的無水DMF(1.5mL)溶液中，分次加入NaSEt溶液(1.1mL)，在50℃下，將該混合液攪拌7h。冷卻後，加入NH4Cl水溶液，將該混合液用EtOAc(x3)提取。將有機提取液用水洗滌3次除去DMF，然後常規處理。得到的黃色固體經矽膠快速層析純化，用3％MeOH/CH2Cl2為洗脫液，得到黃色固體的醇16(34mg，87％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ3.80(s，3H)，3.81(s，3H)，4.61(d，J＝5.5Hz，2H)，4.85(d，J＝5.4Hz，2H)，5.35(m，1H)，6.76(d，J＝5.5Hz，1H)，6.88-6.92(m，4H)，7.03(d，J＝6.8Hz，1H)，7.06(d，J＝5.7Hz，1H)，7.32(d，J＝8.4Hz，2H)，7.40(d，J＝8.4Hz，2H)，7.68(d，J＝6.8Hz，1H)，8.05(d，J＝5.5Hz，1H)，8.29(d，J＝5.7Hz，1H)，10.94(m，1H)，15.75(br s，1H)13C NMR(75MHz，CDCl3)δ44.3，45.2，55.3(2×CH3)，100.3，100.5，106.9，107.5，111.4，114.1(2×C)，128.8，129.2，130.2(2×C)，137.5，142.8，143.8，145.4，149.7，158.6，158.9，159.0，159.5，159.8，160.0；HRMSC30H27N7O3(M+)計算值533.2175，實測值533.2185。
實施例4化合物19 將醇18(按以下實施例17中說明製備)(1.04g，2.65mmol)、三乙基矽烷(3.4ml，21.5mmol)和三氟乙酸(0.81ml，10.6mmol)的混合液回流3h。冷卻後，將紅色殘留物溶於CH2Cl2(40ml)中，加入NaHCO3飽和溶液。室溫下，將該棕色混合液攪拌1h，分離各層。將水層用CH2Cl3(3×50ml)提取，將合併的有機層乾燥，過濾，減壓濃縮。紅色殘留物經快速層析純化，用乙酸乙酯∶己烷1∶4-乙酸乙酯∶己烷1∶3為洗脫劑，得到淺黃色固體的吡啶並吡咯並嘧啶19(0.3g，33％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)8.64(dd，J＝8.1和1.7Hz，1H)，8.60(dd，J＝4.6和1.7Hz，1H)，8.51(d，J＝5.4Hz，1H)，8.06(d，J＝6.4Hz，1H)，7.82(d，J＝6.6Hz，1H)，7.51(dd，J＝8.5和4.6Hz，1H)，7.34(d，J＝5.4Hz，1H)，2.73(s，3H)，2.68(s，3H).
實施例5化合物20和29 根據以上實施例2中說明的相同方法，將二-硫化物19氧化成二亞碸20。
在95℃下，將對甲氧基苄胺(2ml)和二亞磺醯基脫氧變麴黴素20(30mg，8.1×10-5mol)的混合物攪拌2h，減壓蒸發。紅色殘留物經快速層析純化，用DCM/MeOH(0.2％)至DCM/MeOH(2％)為洗脫劑，得到黃色油狀物的N』，N-二(對甲氧基苄基)脫氧變麴黴素29(21mg，49％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)10.4(brs，1H)，8.56(d，J＝7.8Hz，1H)，8.31(d，J＝5.4，1H)，8.27(dd，J＝5.2和1.1Hz，1H)，7.63(d，J＝6.8Hz，1H)，7.42-7.33(m，12H)，6.98(d，J＝5.4Hz，1H)，6.93-6.89(m，4H)，5.52(brs，1H)，4.89(d，J＝5.4Hz，2H)，4.69(d，J＝5.9Hz，2H)，3.81(s，3H)，3.80(s，3H).
實施例6化合物28a 將哌啶(0.04ml，0.4mmol)加入到亞磺醯基脫氧變麴黴素22(7mg，2.1×10-5mol)(按以下方法實施例5中說明製備)的THF(2ml)溶液中。在70℃下，將該黃色溶液攪拌過夜，減壓蒸發。黃色殘留物經快速層析純化，用DCM/MeOH(2％)至DCM/MeOH(3％)為洗脫劑，得到黃色油狀物的哌啶基脫氧變麴黴素28a(5.6mg，78％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)8.63(dd，J＝8.4和1.5Hz，1H)，8.38(dd，J＝4.8和1.7Hz，1H)，8.35(d，J＝5.4，1H)，7.60(d，J＝6.6Hz，1H)，7.50(d，J＝6.6Hz，1H)，7.46(dd，J＝8.0和4.6Hz，1H)，6.84(d，J＝5.4Hz，1H)，3.92(brs，4H)，1.73(brs，6H).MS(電子噴霧離子化，ESI)346(M+1).
實施例7化合物28b 將乙胺(0.34ml，2M的MeOH溶液)加入到亞磺醯基脫氧變麴黴素22(按以下方法實施例5中說明製備)(11mg，3.4×10-5mol)的THF(2ml)溶液中。在70℃下，將該黃色溶液攪拌過夜，減壓蒸發。黃色殘留物經快速層析純化，用DCM/MeOH(2％)至DCM/MeOH(4％)為洗脫劑，得到黃色油狀物的N』-乙基脫氧變麴黴素28b(5.5mg，53％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)8.67(dd，J＝7.9和1.4Hz，1H)，8.36(d，J＝4.4，1H)，8.22(d，J＝4.8，1H)，7.52(brs，2H)，7.45(dd，J＝7.8和4.1Hz，1H)，6.93(d，J＝5.1Hz，1H)，3.54(d，J＝6.8Hz，2H)，1.29(t，J＝7.0，3H).(ESI)306(M+1).
實施例8化合物28c
將丁基甲胺(0.029ml，0.24mmol)加入到亞磺醯基脫氧變麴黴素22(按以下方法實施例5中說明製備)(8mg，2.4×10-5mol)的THF(2ml)溶液中。在70℃下，將該黃色溶液攪拌過夜，減壓蒸發。黃色殘留物經快速層析純化，用DCM/MeOH(2％)至DCM/MeOH(4％)為洗脫劑，得到黃色油狀物的N』-丁基甲基脫氧變麴黴素28c(2mg，62％以回收的原料計算)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)8.75(d，1H)，8.41(dd，1H)，8.39(d，J＝5.5，1H)，7.78(d，J＝6.5Hz，1H)，7.68(d，J＝6.5Hz，1H)，7.42(dd，J＝8.0和4.5Hz，1H)，6.89(d，J＝5.6Hz，1H)，3.60(brs，2H)，3.41(s，3H)，1.62(brs，4H)，1.05(brs，3H).(ESI)348(M+1).
實施例9化合物28d 將苄胺(0.050ml，0.45mmol)加入到亞磺醯基脫氧變麴黴素22(4mg，1.2×10-5mol)的THF(1.5ml)溶液中。在70℃下，將該黃色溶液攪拌過夜，減壓蒸發。黃色殘留物經快速層析純化，用DCM/MeOH(2％)至DCM/MeOH(4％)為洗脫劑，得到黃色油狀物的N』-苄基脫氧變麴黴素28d(2.1mg，47％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)8.81(brs，1H)，8.75(d，J＝7.1，1H)，8.64(d，J＝6.0Hz，1H)，7.49-7.31(m，8H)，6.99(d，J＝6.2Hz，1H)，4.78(d，J＝5.8Hz，2H).(ESI)368(M+1).
實施例10化合物27 在0℃下，將磺醯基脫氧變麴黴素6(按以下方法實施例5中說明製備)(5.8mg，1.7×10-5mol)的MeOH(2ml)溶液加入到甲醇鈉的MeOH(2ml)溶液中。在24℃下，將該黃色溶液攪拌4小時，用飽和NH4Cl溶液猝滅，用乙酸乙酯(3×10ml)提取。將合併的有機層乾燥，過濾，減壓蒸發。黃色殘留物經快速層析純化，用DCM/MeOH(1％)至DCM/MeOH(3％)為洗脫劑，得到黃色固體的甲氧基脫氧變麴黴素27(2.6mg，53％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)8.78(dd，J＝8.1和1.5Hz，1H)，8.51(d，J＝5.43Hz，1H)，8.41(dd，J＝4.6和1.5Hz，1H)，7.69(d，J＝6.6Hz，1H)，7.63(d，J＝6.6Hz，1H)，7.50(dd，J＝8.1和4.6Hz，1H)7.34(d，J＝5.4Hz，1H)，4.14(s，3H).(ESI)293(M+1).
實施例11化合物26 將三氟乙酸酐(6μl，4.3×10-5mol)加入到脫氧變麴黴素4(4mg，1.4×10-5mol)的THF(1.5ml)溶液中。在24℃下，將該黃色溶液攪拌過夜，減壓蒸發。將黃色殘留物溶於DCM(5ml)中，用NaHCO3的飽和溶液(4ml)洗滌。將有機層乾燥，過濾，減壓蒸發。黃色殘留物經快速層析純化，用DCM/MeOH(2％)至DCM/MeOH(4％)為洗脫劑，得到黃色油狀物的N』-三氟乙醯基脫氧變麴黴素26(0.9mg，43％以回收的原料計算)。
1H NMR (300MHz，CDCl3)8.99(dd，J＝8.4和1.1Hz，1H)，8.57(d，J＝5.6Hz，1H)，8.42(dd，J＝4.6和1.3Hz，1H)，7.91(d，J＝6.7Hz，1H)，7.79(d，J＝6.6Hz，1H)，7.58(dd，J＝8.3和4.3Hz，1H)，7.52(d，J＝5.6Hz，1H).(ESI)374(M+1).
實施例12化合物25 將甲磺醯氯(5.5μl，5×10-5mol)加入到脫氧變麴黴素4(根據以下方法實施例2或4中說明製備)(5mg，1.8×10-5mol)和Et3N(5μl，3.6×10- 5mol)的THF(1.5ml)溶液中。在24℃下，將該黃色溶液攪拌過夜，減壓蒸發。將黃色殘留物溶於DCM(5ml)中，用NaHCO3的飽和溶液(4ml)洗滌。將有機層乾燥，過濾，減壓蒸發。將黃色殘留物經快速層析純化，用DCM/MeOH(2％)至DCM/MeOH(4％)為洗脫劑，得到黃色油狀物的N』-甲磺醯基脫氧變麴黴素25(1.5mg，46％以回收的原料計算)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)8.89(dd，J＝7.9和1.1Hz，1H)，8.76(d，J＝5.7Hz，1H)，8.42(dd，J＝4.2和1.2Hz，1H)，7.78(d，J＝6.4Hz，1H)，7.72(d，J＝6.5Hz，1H)，7.64(d，J＝5.6Hz，1H)，7.57(dd，J＝8.3和4.3Hz，1H)，3.15(s，3H).
實施例13化合物24a和24b 將肉桂醯氯(9μl，5.4×10-5mol)加入到脫氧變麴黴素4(5mg，1.8×10-5mol)(根據以下方法實施例2或4中說明製備)和Et3N(12μl，5.4×10-5mol)的THF(2ml)溶液中。立即一次性加入DMAP(1mg，0.9×10-5mol)，在24℃下，將該黃色溶液攪拌過夜，減壓蒸發。將黃色殘留物溶於DCM(5ml)中，用NaHCO3(4ml)的飽和溶液洗滌。將有機層乾燥，過濾，減壓蒸發。將黃色殘留物經快速層析純化，用DCM/MeOH(1％)至DCM/MeOH(4％)為洗脫劑，得到黃色油狀物的N』-二肉桂醯基脫氧變麴黴素24a(11mg，21％以回收的原料計算)和N』-二肉桂醯基-N-肉桂醯基脫氧變麴黴素24b(0.6mg，9％以回收的原料計算)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)8.78(d，J＝6.4，1H)，8.69(dd，J＝7.4和1.1Hz，1H)，8.38(dd，J＝4.6和1.2Hz，1H)，7.91(d，J＝15.3Hz，2H)，7.64-7.32(m，14H)，6.90(d，J＝15.6Hz，2H).(ESI)560(M+Na)，538(M+1).
1H NMR(300MHz，CDCl3)1H NMR(300MHz，CDCl3)8.82(d，J＝6.4，1H)，8.79(dd，J＝7.4和1.1Hz，1H)，8.58(dd，J＝4.6和1.3Hz，1H)，8.01-7.82(m，4H)，7.71(d，J＝15.3Hz，2H)，7.64(dd，J＝8.3和4.2Hz，1H)，7.58-7.31(m，16H)，6.90(d，J＝15.6Hz，3H).(ESI)668(M+1)，690(M+Na).
實施例14化合物23a、23b和23c 將乙醯氯(3.5μl，4.8×10-5mol)加入到脫氧變麴黴素4(9mg，3.2×10-5mol)(根據以下方法實施例2或4中說明製備)和Et3N(9μl，6.5×10-5mol)的THF(2ml)溶液中。在24℃下，將該橙色漿狀液攪拌過夜，減壓蒸發。將黃色殘留物溶於DCM(5ml)中，用NaHCO3的飽和溶液(4ml)洗滌。將有機層乾燥，過濾，減壓蒸發。將黃色殘留物經快速層析純化，用DCM/MeOH(2％)至DCM/MeOH(5％)為洗脫劑，得到黃色油狀物的N』-二乙醯基脫氧變麴黴素23a(1mg，26％以回收的原料計算)、N』-二乙醯基-N-乙醯基脫氧變麴黴素23b(1mg，23％以回收的原料計算)和N』-二乙醯基-N-二乙醯基脫氧變麴黴素23c(0.5mg，10％以回收的原料計算)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)8.76(d，J＝5.6，1H)，8.68(dd，J＝6.9和1.1Hz，1H)，8.42(dd，J＝4.1和1.2Hz，1H)，7.73(d，J＝6.6Hz，1H)，7.66(d，J＝6.6Hz，1H)，7.54-7.42(m，2H)，2.41(s，6H).(ESI)384(M+Na).
1H NMR(300MHz，CDCl3)8.82(d，J＝5.6Hz，1H)，8.72(dd，J＝7.8和1.2Hz，1H)，8.53(dd，J＝4.4和1.2Hz，1H)，7.90(d，J＝6.4Hz，1H) 7.87(d，J＝6.5Hz，1H)，7.70(d，J＝5.4Hz，1H)，7.60(dd，J＝8.3和4.9Hz，1H)，2.68(s，3H)，2.40(s，6H).(ESI)426(M+Na)，404(M+1).
1H NMR(300MHz，CDCl3)8.88(d，J＝5.4Hz，1H)，8.63(dd，J＝8.3和1.7H2，1H)，8.56(dd，J＝4.6和1.3Hz，1H)，8.36(d，J＝6.7Hz，1H)，7.99(d，J＝6.6Hz，1H)，7.75(d，J＝5.5Hz，1H)，7.58(dd，J＝8.3和4.6Hz，1H)，2.43(s，12H).(ESI)468(M+Na).
實施例15化合物23d和23e 在-78℃下，將乙醯氯(1.5μl，1.8×10-5mol)加入到脫氧變麴黴素4(根據以下方法實施例2或4中說明製備)(5mg，1.8×10-5mol)和Et3N(4μl，2.7×10-5mol)的THF(1.5ml)溶液中。將該橙色漿狀液攪拌過夜，期間慢慢增加溫度至室溫，然後減壓蒸發。將黃色殘留物溶於DCM(5ml)中，用NaHCO3的飽和溶液(4ml)洗滌。將有機層乾燥，過濾，減壓蒸發。將黃色殘留物經快速層析純化，用DCM/MeOH(1％)至DCM/MeOH(4％)為洗脫劑，得到黃色油狀物的N』-乙醯基-N-乙醯基脫氧變麴黴素23d(1mg，26％)和N』-乙醯基脫氧變麴黴素23e(0.5mg，10％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)8.83(dd，J＝7.4和1.4Hz，1H)，8.52(d，J＝6.2，1H)，8.41(dd，J＝4.2和1.4Hz，1H)，7.75-7.71(m，2H)，7.56-7.48(m，1H)，7.39(d，J＝6.3Hz，1H)，2.43(s，3H).(ESI)342(M+Na).
1H NMR(300MHz，CDCl3)8.91(dd，J＝7.4和1.4Hz，1H)，8.58(d，J＝6.2，1H)，8.52(dd，J＝4.2和1.4Hz，1H)，8.19(d，J＝6.4Hz，1H)，8.03(brs，1H)，7.85(d，J＝6.5Hz，1H)，7.61(dd，J＝8.3和4.9Hz，1H)，7.39(d，J＝6.1Hz，1H)，2.65(s，3H)，2.43(s，3H).(ESI)384(M+Na).
實施例16化合物12 將2-氯-4-甲氧基吡啶(11)(參考實施例3)(0.633g，4.41mmol)溶解於新蒸餾的THF(18mL)中，將該反應物冷卻至-90℃以下。用17分鐘將n-BuLi的己烷液(1.6M，2.9mL，4.5mmol)加入到所述攪拌的溶液中，期間保持溫度低於-97℃。然後在-78℃下，將該橙色溶液攪拌1h，此時溶液變成酒紅色。將該反應混合液再冷卻至-90℃以下，用11分鐘加入酮(9)(1.14g，4.09mmol)的THF(10mL)溶液，期間保持溫度低於-90℃。在-78℃下，將該深色混合物攪拌3.5h，然後用甲醇猝滅，溫熱至室溫。將該反應混合液與NH4Cl水溶液一起振搖，用乙酸乙酯(x3)提取，然後進行標準處理。將該粗混合液經矽膠快速層析純化，經梯度洗脫(70-75％EtOAc/己烷)，得到三芳基醇12，為乳白色固體(1.32g，76％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ2.49(s，6H)，3.43(s，3H)，6.55(s，1H)，6.76(d，J＝5.4Hz，1H)，7.39(d，J＝5.4Hz，2H)，8.25(d，J＝5.4Hz，1H)，8.46(d，J＝5.4Hz，2H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)δ14.1，55.8，78.0，107.1，113.7，124.8，149.8，152.3，157.2，165.9，171.0，171.1；IR(CDCl3溶液)3344cm-1；HRMSC17H1635ClN5O232S2(M+)計算值421.0434，實測值421.0448。
實施例17化合物18 在-100℃下，將BuLi(6.9mL，2.5M的己烷液)滴加到碘代嘧啶8(參考實施例1)(4.3g，17mmol)的THF(50ml)溶液中。在相同溫度下，將該黑色溶液攪拌30分鐘。通過導管加入預先冷卻至-78℃的2-氯煙醯氯17(1g，5.7mmol)的THF(7ml)溶液。在-95℃下，將該深紅色混合物攪拌3h，加入NH4Cl的飽和水溶液(50ml)。分離各層，將水層用乙醚(3×100ml)提取。將合併的有機層乾燥，過濾，減壓濃縮。紅色殘留物經快速層析純化，用乙酸乙酯∶己烷1∶3.5-乙酸乙酯∶己烷1∶1.5為洗脫劑，得到淺橙色固體的醇18(1.3g，58％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)8.56(d，J＝5.1H，2H)，8.37(dd，J 4.7和1.5，1H)，7.39(d，J＝5.1Hz，2H)，7.22(dd，J＝7.8和1.9，1H)，7.17(dd，J＝7.8和4.4Hz，1H)，2.48(s，6H).
方法實施例1化合物1(變麴黴素)(該化合物不是本發明的部分) 在大氣壓力條件下，將醇16(按以上實施例3說明製備)(33mg，0.062mmol)溶解於純的三氟甲磺酸(triflic acid)(0.4mL)中。將該燒瓶密封，將該深紅色溶液於室溫下放置5h。將燒瓶置於冰中冷卻，滴加入MeOH(2mL)。加入濃氨水(2mL)，得到亮黃色沉澱。將該混懸液上樣於含有已用50％MeOH/水平衡的反相矽膠的色譜柱的頂端。用20％MeOH/水(50mL)，將黃色混懸液上樣於柱上。將該洗脫溶劑系統的極性降低至80％MeOH/水(50mL)，然後降低至含0.1％TFA的85％MeOH/水，此時黃色產物開始洗脫。合併亮黃色部分，真空濃縮得到變性黴素B的三氟乙酸鹽。加入MeOH(10ml)，接著加入濃氨水(1-2mL)，得到游離鹼。減壓除去溶劑，接著乾燥(35℃，0.03mmHg)過夜得到變性黴素B(1)(10mg，55％)，它與天然物質在各方面均一致。
方法實施例2化合物4(脫氧變麴黴素)(該化合物不是本發明的部分) 將預先用Na2SO4乾燥的mCPBA(Aldrich 70％)(98mg，0.39mmol)的DCM(4ml)溶液滴加到二硫醚19(實施例4)(61mg，0.18mmol)的DCM(5ml)的冷(-30℃)溶液中。在0℃下，將該黃色溶液攪拌15分鐘。加入Na2S2O3飽和水溶液(5ml)，將有機層用NaHCO3的飽和溶液(5ml)洗滌。將合併的水層用DCM(3×10ml)提取。將合併的有機提取液乾燥，過濾，濃縮。將黃色殘留物倒入裝有二氧六環(4ml)的密封管中，加入32％氨溶液(8ml)。在85℃下，將該棕色混合液攪拌14h。將得到的黃色混合液真空蒸發，加入DCM/MeOH(10∶1)(11ml)，將該溶液乾燥，減壓蒸發溶劑。該黃色固體經快速層析純化，用DCM/MeOH(2％)至DCM/MeOH(5％)為洗脫劑，得到黃色固體的脫氧變麴黴素4(14mg，29％，2步)。
1H NMR(300MHz，DMSO)8.92(dd，J＝8.1和1.5Hz，1H)，8.45(dd，J＝4.6和1.4Hz，1H)，8.22(d，J＝5.5，1H)，7.68(d，J＝6.6Hz，1H)，7.63(d，J＝6.6Hz，1H)，7.58(dd，J＝8.1和4.6Hz，1H)，7.06(d，J＝5.4Hz，1H).(ESI)278(M+1).
方法實施例3化合物5(硫代脫氧變麴黴素)(該化合物不是本發明的部分) 將32％氨溶液(3ml)加入到二硫醚19(實施例4)(12mg，0.035mmol)的二氧六環(2ml)溶液中。在85℃下，在密封管中，將該棕色混合液攪拌14h。將得到的黃色混合液真空蒸發，加入DCM(5ml)，將該溶液乾燥，減壓蒸發溶劑。該黃色固體經快速層析純化，用DCM/MeOH(2％)至DCM/MeOH(3％)為洗脫劑，得到黃色固體的硫代脫氧變麴黴素5(8mg，73％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)8.72(dd，J＝8.1和1.5Hz，1H)，8.48(d，J＝5.4Hz，1H)，8.39(dd，J＝4.8和1.6Hz，1H)，7.66(d，J＝6.8Hz，1H)，7.56(d，J＝6.7Hz，1H)，7.48(dd，J＝8.1和4.6Hz，1H)，7.32(d，J＝5.3Hz，1H)，2.67(s，3H).(ESI)309(M+1).
方法實施例4化合物4(脫氧變麴黴素)(該化合物不是本發明的部分) 在24℃下，將N，N』-雙(對甲氧基苄基)脫氧變麴黴素29(實施例5)(15mg，2.9×10-5mol)用純的三氟甲磺酸(1.5mL)處理，並攪拌17h。將該黑色溶液減壓蒸發，將該黑色漿狀物溶於DCM(4mL)中，用NaHCO3的飽和溶液(5ml)洗滌。將水層用DCM(3×5ml)提取，將合併的有機層乾燥，過濾，蒸發。該棕色殘留物經快速層析純化，用DCM/MeOH(1％)至DCM/MeOH(5％)為洗脫劑，得到黃色固體的脫氧變麴黴素4(1.5mg，19％)。
1H NMR(300MHz，DMSD)8.92(dd，J＝8.1和1.5Hz，1H)，8.45(dd，J＝4.6和1.4Hz，1H)，8.22(d，J＝5.5，1H)，7.68(d，J＝6.6Hz，1H)，7.63(d，J＝6.6Hz，1H)，7.58(dd，J＝8.1和4.6Hz，1H)，7.06(d，J＝5.4Hz，1H).(ESI)278(M+1).
方法實施例5化合物6和22(這些化合物不是本發明的部分) 將預先用Na2SO4乾燥的mCPBA(Aldrich 70％)(70mg，0.30mmol)的DCM(3ml)溶液滴加到硫代脫氧變麴黴素5(39mg，0.13mmol)的DCM(7ml)的溶液中。在24℃下，將該黃色溶液攪拌2h。加入Na2S2O3飽和水溶液(5ml)，將有機層用NaHCO3的飽和溶液(5ml)洗滌。將合併的水層用DCM(3×20ml)提取。將合併的有機提取液乾燥，過濾，濃縮。該黃色殘留物經快速層析純化，用DCM/MeOH(2％)至DCM/MeOH(5％)為洗脫劑，得到黃色油狀物的亞磺醯基脫氧變麴黴素22(15mg，35％)和黃色固體的磺醯基脫氧變麴黴素6(25mg，58％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)8.86(dd，J＝8.1和1.5Hz，1H)，8.74(d，J＝5.6Hz，1H)，8.43(dd，J＝4.6和1.3Hz，1H)，7.77(d，J＝6.8Hz，1H)，7.72(d，J＝6.6Hz，1H)，7.67(d，J＝5.8Hz，1H)，7.54(dd，J＝8.0和4.6Hz，1H)，3.02(s，3H).(ESI)325(M+1).
1H NMR(300MHz，CDCl3)8.80(dd，J＝8.1和1.4Hz，1H)，8.71(d，J＝5.6Hz，1H) 8.41(dd，J＝4.8和1.4Hz，1H)，7.76(d，J＝5.6Hz，1H)，7.74(d，J＝6.4Hz，1H)，7.64(d，J＝6.4Hz，1H)，7.52(dd，J＝8.2和4.8Hz，1H)，3.40(s，3H).
參考實施例1化合物8 按照文獻Majeed，A.J.；Antonsen.O.；Benneche，T.；Undheim，K.Tetrahedron 1989，45，993中說明的實驗方法，製備碘代嘧啶8。
參考實施例2化合物9 用21分鐘，將預先冷卻(-97℃)的n-BuLi的己烷溶液(1.55M，10.0mL，15.5mmol)，慢慢加入到-97℃下(甲醇/液N2浴)的4-碘-2-甲硫基嘧啶(8)(3.90g，15.5mmol)的新蒸餾的THF(47ml)溶液中。小心進行防止溫度升至-97℃以上。加入完畢後，在-97℃下，將該深色混合物攪拌30分鐘，然後用約3分鐘的時間加入預先冷卻(-97℃)的碳酸二乙酯(0.94mL，7.8mmol)的THF(4mL)溶液。在-97℃下15分鐘後，用2小時將外浴溫度升至-35℃，然後升至室溫。將反應混合液與NH4Cl水溶液一起振搖，用EtOAc(x3)提取。常規處理後，在kügelrohr裝置(160℃，0.03mmHg)中，將粗產物經真空蒸餾部分純化。經矽膠快速層析進一步純化，經梯度洗脫(25、30、最後50％EtOAc/己烷)得到黃色固體的純酮9(1.14g，53％)。Mp106-107℃；1H NMR(500MHz，CDCl3)δ2.51(s，6H)，7.54(d，J＝4.9Hz，2H)，8.79(d，J＝4.9Hz，2H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)δ14.2，114.9，158.8，159.2，173.2，190.7；IR(KBr膜法)1695cm-1；HRMSC11H10N4O32S2(M+)計算值278.0296，實測值278.0289。
參考實施例3化合物11 將4-甲氧基-2-吡啶酮(10)(0.805g，6.43mmol)和新蒸餾的POCl3(8mL)加熱回流15小時。真空除去過量的POCl3，將剩餘的粘性油狀物在冰中冷卻，用飽和NaHCO3溶液小心中和。將該混合液用EtOAc(x3)提取，按標準方法處理提取物，得到棕色油狀物。在kügelrohr裝置(100℃，0.07mmHg)中，將該物質經真空蒸餾部分純化。將蒸餾液用石油醚研磨，過濾白色沉澱。濃縮濾液，經矽膠快速層析最後純化，用30％EtOAc/己烷為洗脫劑，得到無色油狀物的2-氯-4-甲氧基吡啶(11)(0.586g，63％)。
權利要求
1.一種式(I)化合物及其鹽和酯 其中R1和R2各自獨立選自H、OH、OR』、SH、SR』、SOR』、SO2R』、NO2、NH2、NHR』、N(R』)2、NHCOR』、N(COR』)2、NHSO2R』、CN、滷素、C(＝O)H、C(＝O)R』、CO2H、CO2R』、C1-C12烷基、C1-C12滷代烷基、C2-C12鏈烯基、C2-C12炔基、取代的或未取代的芳基、取代的或未取代的芳基烷基以及取代的或未取代的雜芳基；和R3選自H、OH和OMe；其中所述基團R』或各R』獨立選自OH、C1-C12烷基、C1-C12滷代烷基、C2-C12鏈烯基、C2-C12炔基、取代的或未取代的芳基、取代的或未取代的芳基烷基、取代的或未取代的芳基鏈烯基以及取代的或未取代的雜芳基，並且其中基團R1、R2或R3是式N(R』)2或N(COR』)2的基團，各R』基團可以相同或不同，或者兩個R』基團與其相連的氮原子一起可以形成一個5-14元雜環；所述芳基和芳基烷基和芳基鏈烯基的芳基部分是在一個碳環或二或多個稠合環上具有6-14個碳原子的碳環芳基；所述芳基烷基是被如上定義的芳基取代的C1-C6烷基；所述芳基鏈烯基是被如上定義的芳基取代的C2-C6鏈烯基；所述雜芳基是在一個環上或二或多個稠合環上具有5-14個環原子的雜環芳基，其中至少一個環原子選自氮、氧和硫，並且該雜環芳基與如上定義的芳基稠合；所述芳基和雜芳基以及所述芳基烷基和芳基鏈烯基的芳基部分上的取代基選自C1-C12烷基、C1-C12滷代烷基、C1-C12烷氧基、C1-C12烷硫基、NH2、C1-C4烷基氨基、二(C1-C4烷基)氨基、C1-C4烷醯基氨基、二(C1-C4烷醯基)氨基、NO2、CN和滷素；及其衍生物，其中所述氮原子被季銨化，但排除以下化合物，其中R1是氨基、硫代甲基、甲基亞磺醯基或甲磺醯基，R2是氨基和R3是氫；或R1和R2是氨基，及R3是羥基。
2.根據權利要求1的化合物，其中R1選自OH、OR』、SH、SR』、SOR』、SO2R』、NH2、NHR』、N(R』)2、NHCOR』、N(COR』)2、NHSO2R』、C(＝O)R』、CO2H、CO2R』、C1-C12烷基和C1-C12滷代烷基，所述基團R』或各R』獨立選自OH、C1-C12烷基、C1-C12滷代烷基、芳基(所述芳基可任選被選自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、NH2、C1-C6烷基氨基、二(C1-C6烷基)氨基、NO2、CN和滷素的基團取代)、芳基烷基或芳基鏈烯基(其芳基部分可任選被選自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、NH2、C1-C6烷基氨基、二(C1-C6烷基)氨基、NO2、CN和滷素的基團取代)，並且其中基團R1是式N(R』)2或N(COR』)2的基團，各R』基團可以相同或不同，或者兩個R』基團與其相連的氮原子一起形成一個5-12元雜環。
3.根據權利要求1的化合物，其中R1選自OR』、SR』、SOR』、NH2、NHR』、N(R』)2、NHCOR』、N(COR』)2和NHSO2R』，所述基團R』或各R』獨立選自C1-C6烷基、C1-C6滷代烷基、芳基(所述芳基可任選被選自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和滷素的基團取代)、芳基烷基(其芳基部分可任選被選自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和滷素的基團取代)、芳基鏈烯基(其芳基部分可任選被選自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和滷素的基團取代)，並且其中基團R1是式N(R』)2或N(COR』)2的基團，兩個R』基團與其相連的氮原子一起可以形成一個5-10元雜環。
4.根據權利要求1的化合物，其中R1選自C1-C4烷氧基、C1-C4烷硫基、C1-C4烷基亞磺醯基、氨基、C1-C4烷基氨基、二(C1-C4烷基)氨基、C1-C4烷醯基氨基、二(C1-C4烷醯基)氨基、C1-C4滷代烷醯基氨基、芳基氨基(其中芳基部分可任選被C1-C4烷氧基取代)、苄基氨基(其中苄基的苯基部分可任選被C1-C4烷氧基取代)、肉桂醯基氨基或二肉桂醯基氨基(其中所述肉桂醯基或各肉桂醯基的苯基部分可任選被C1-C4烷氧基取代)，或者是通過其氮原子與該分子其餘部分相連的5-7元含氮雜環。
5.根據權利要求1的化合物，其中R1選自甲氧基、硫代甲基、甲基亞磺醯基、氨基、甲氨基、乙氨基、苄氨基、乙醯基氨基、三氟乙醯基氨基、二乙醯基氨基、肉桂醯基氨基、二肉桂醯基氨基、對甲氧基苄氨基和哌啶子基。
6.根據權利要求1的化合物，其中R1選自氨基、苄氨基、乙醯基氨基、三氟乙醯基氨基、二乙醯基氨基、肉桂醯基氨基、二肉桂醯基氨基和對甲氧基苄氨基。
7.根據權利要求1的化合物，其中R2選自OH、OR』、SH、SR』、SOR』、SO2R』、NH2、NHR』、N(R』)2、NHCOR』、N(COR』)2、NHSO2R』、C(＝O)R』、CO2H、CO2R』、C1-C12烷基和C1-C12滷代烷基，所述基團R』或各R』獨立選自OH、C1-C12烷基、C1-C12滷代烷基、芳基(所述芳基可任選被選自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、NH2、C1-C6烷基氨基、二(C1-C6烷基)氨基、NO2、CN和滷素的基團取代)、芳基烷基或芳基鏈烯基(其芳基部分可任選被選自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、NH2、C1-C6烷基氨基、二(C1-C6烷基)氨基、NO2、CN和滷素的基團取代)，並且其中基團R2是式N(R』)2或N(COR』)2的基團，各R』基團可以相同或不同，或者兩個R』基團與其相連的氮原子一起形成一個5-12元雜環。
8.根據權利要求1的化合物，其中R2選自OR』、SR』、SOR』、NH2、NHR』、N(R』)2、NHCOR』、N(COR』)2和NHSO2R』，所述基團R』或各R』獨立選自C1-C6烷基、C1-C6滷代烷基、芳基(所述芳基可任選被選自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和滷素的基團取代)、芳基烷基(其芳基部分可任選被選自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和滷素的基團取代)、芳基鏈烯基(其芳基部分可任選被選自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和滷素的基團取代)，並且其中基團R2是式N(R』)2或N(COR』)2的基團，兩個R』基團與其相連的氮原子一起可以形成一個5-10元雜環。
9.根據權利要求1的化合物，其中R2選自C1-C4烷氧基、C1-C4烷硫基、C1-C4烷基亞磺醯基、氨基、C1-C4烷基氨基、二(C1-C4烷基)氨基、C1-C4烷醯基氨基、二(C1-C4烷醯基)氨基、C1-C4滷代烷醯基氨基、芳基氨基(其中芳基部分可任選被C1-C4烷氧基取代)、苄基氨基(其中苄基的苯基部分可任選被C1-C4烷氧基取代)、肉桂醯基氨基或二肉桂醯基氨基(其中所述肉桂醯基或各肉桂醯基的苯基部分可任選被C1-C4烷氧基取代)，或者是通過其氮原子與該分子其餘部分相連的5-7元含氮雜環。
10.根據權利要求1的化合物，其中R2選自硫代甲基、甲基亞磺醯基、氨基、甲氨基、乙氨基、乙醯基氨基、二乙醯基氨基、肉桂醯基氨基和對甲氧基苄氨基。
11.根據權利要求1的化合物，其中R2選自氨基、乙醯基氨基、二乙醯基氨基和對甲氧基苄氨基。
12.根據權利要求1的化合物，其中R3是H。
13.根據權利要求1的下列化合物1 N』-二乙醯基脫氧變麴黴素；2 N』-二乙醯基-N-乙醯基脫氧變麴黴素；3 N』-二乙醯基-N-二乙醯基脫氧變麴黴素；4 N』-乙醯基脫氧變麴黴素；5 N』-乙醯基-N-乙醯基脫氧變麴黴素；6 N』-二肉桂醯基脫氧變麴黴素；7 N』-二肉桂醯基-N-肉桂醯基脫氧變麴黴素；8 N』-甲磺醯基脫氧變麴黴素；9 N』-三氟乙醯基脫氧變麴黴素；10 2』-甲氧基脫氧變麴黴素；11 2』-哌啶基脫氧變麴黴素；12 N』-乙基脫氧變麴黴素；13 N』-丁基-N』-甲基脫氧變麴黴素；和14 N』-苄基脫氧變麴黴素。
14.一種製備式(I)化合物及其鹽和酯的方法 其中R1和R2各自獨立選自H、OH、OR』、SH、SR』、SOR』、SO2R』、NO2、NH2、NHR』、N(R』)2、NHCOR』、N(COR』)2、NHSO2R』、CN、滷素、C(＝O)H、C(＝O)R』、CO2H、CO2R』、C1-C12烷基、C1-C12滷代烷基、C2-C12鏈烯基、C2-C12炔基、取代的或未取代的芳基、取代的或未取代的芳基烷基以及取代的或未取代的雜芳基；和R3選自H、OH和OMe；其中所述R』或各R』獨立選自OH、C1-C12烷基、C1-C12滷代烷基、C2-C12鏈烯基、C2-C12炔基、取代的或未取代的芳基、取代的或未取代的芳基烷基、取代的或未取代的芳基鏈烯基以及取代的或未取代的雜芳基，並且其中基團R1、R2或R3是式N(R』)2或N(COR』)2的基團，各R』基團可以相同或不同，或者兩個R』基團與其相連的氮原子一起可以形成一個5-14元雜環；芳基和所述芳基烷基和芳基鏈烯基的芳基部分是在一個碳環或二或多個稠合環上具有6-14個碳原子的碳環芳基；所述芳基烷基是被如上定義的芳基取代的C1-C6烷基；所述芳基鏈烯基是被如上定義的芳基取代的C2-C6鏈烯基；所述雜芳基是在一個環上或二或多個稠合環上具有5-14個環原子的雜環芳基，其中至少一個環原子選自氮、氧和硫，並且該雜環芳基與以上定義的芳基稠合；所述芳基和雜芳基以及所述芳基烷基和芳基鏈烯基的芳基部分上的取代基選自C1-C12烷基、C1-C12滷代烷基、C1-C12烷氧基、C1-C12烷硫基、NH2、C1-C4烷基氨基、二(C1-C4烷基)氨基、C1-C4烷醯基氨基、二(C1-C4烷醯基)氨基、NO2、CN和滷素；及其衍生物，其中所述氮原子被季銨化，該方法包括製備式(II)中間體 其中R1a、R2a和R3a分別代表R1、R2和R3所代表的任何基團，並且所有這些基團中的活性官能團被保護；Y1和Y2能被消除以生成稠合的三環吡啶並吡咯並嘧啶環結構。
15.根據權利要求14的方法，其中Y1是羥基。
16.根據權利要求14或15的方法，其中Y2是氯原子。
17.根據權利要求14-16中任一項的方法，其中R1a＝R2a。
18.根據權利要求17的方法，其中R1a和R2a是甲硫基。
19.根據權利要求14-18中任一項的方法，它還包括將式(II)中間體環合生成式(III)中間體 其中R1a、R2a和R3a如權利要求14中所定義。
20.根據權利要求19的方法，該方法用酸進行催化。
21.根據權利要求19或20的方法，當依據權利要求15時，該方法包括使式(II)中間體與式RaRbRcSiH的三烷基矽烷反應，其中Ra、Rb和Rc可以相同或不同並且各自代表C1-C12烷基或權利要求1中定義的芳基。
22.根據權利要求15-18中任一項的方法，其中式(II)中間體通過使式(IV)中間體化合物 其中R3a和Y2如權利要求21中所定義且M為金屬，與式(V)化合物反應製備 其中R1a和R2a如權利要求21中所定義。
23.根據權利要求17的方法，當依據權利要求15時，其中式(II)中間體通過使式(VI)中間體化合物 其中R1a如權利要求14中所定義且M為金屬，與式(VII)中間體化合物反應製備 其中R3a和Y2如權利要求14中所定義，及Z為離去基團。
24.根據權利要求14的方法，它包括以下步驟a)將式(VIII)化合物 其中R1a定義同上且X為滷原子，轉化為如權利要求23中定義的式(VI)化合物；b)使式(VI)化合物與式L1-CO-L2化合物反應，其中L1和L2相同或不同，各自代表離去基團，得到如權利要求22中定義的式(V)化合物；c)使式(V)化合物與式(IV)化合物反應，生成如權利要求14中定義的式(II)化合物；d)使式(II)化合物環合，形成如權利要求19中定義的式(III)化合物；e)如果必要，將由R1a、R2a和R3a代表的任何基團分別轉化為由R1、R2和R3代表的任何基團。
25.根據權利要求14的方法，它包括以下步驟a)將如權利要求24中定義的式(VIII)化合物轉化為如權利要求23中定義的式(VI)化合物；b)使式(VI)化合物與式(VII)化合物反應，生成如權利要求14中定義的式(II)化合物；c)將式(II)化合物環合，形成如權利要求19中定義的式(III)化合物；d)如果必要，將由R1a、R2a和R3a代表的任何基團分別轉化為由R1、R2和R3代表的任何基團。
26.一種製備式(I)化合物的方法，其中R1和R2是氨基，R3如權利要求1中所定義，所述方法包括a)用其中Prot是氨基保護基的式NH2Prot化合物處理其中R1a和R2a是甲基亞磺醯基和R3a如權利要求19所定義的式(III)化合物，得到式(III)化合物，其中R1a和R2a是被保護的氨基，R3a如權利要求19所定義；和b)除去氨基保護基，得到式(I)化合物，其中R1和R2是氨基和R3如權利要求1所定義。
27.一種由其中R1a和R2a是甲硫基和R3a如權利要求19所定義的式(III)化合物，製備其中R1是甲硫基或氨基、R2是氨基，R3如權利要求1所定義的式(I)化合物的方法，所述方法包括a)任選將其中R1a和R2a是甲硫基的式(III)化合物氧化成其中R1a和R2a是甲基亞磺醯基的式(III)化合物；和b)用選自疊氮化鈉和氨的試劑處理其中R1a和R2a是甲硫基或甲基亞磺醯基的式(III)化合物。
28.一種藥用組合物，它包含有效量的藥理活性化合物及其載體或稀釋劑，其中所述藥理活性化合物為權利要求1-13中任一項的化合物。
29.一種用作藥物的根據權利要求1-13中任一項的化合物。
30.一種用於治療或預防癌症的根據權利要求1-13中任一項的化合物。
31.根據權利要求1-13中任一項的化合物在製備用於治療或預防癌症的藥物中的用途。
32.一種在哺乳動物中治療或預防癌症的方法，該方法包括給予需要此種治療的哺乳動物有效量的權利要求1-13中任一項的化合物。
33.一種用於治療或預防癌症的如權利要求14定義的式(I)化合物，所述癌症選自卵巢癌、腎癌、前列腺癌、乳腺癌和黑素瘤。
34.權利要求14中定義的式(I)化合物在製備用於治療或預防選自卵巢癌、腎癌、前列腺癌、乳腺癌和黑素瘤的癌症的藥物中的用途。
35.一種治療或預防選自卵巢癌、腎癌、前列腺癌、乳腺癌和黑素瘤的癌症的方法，該方法包括給予需要此種治療的哺乳動物有效量的如權利要求14所定義的式(I)化合物。
36.一種式(II)化合物 其中R1a、R2a或R3a、Y1和Y2如權利要求14中所定義。
37.根據權利要求36的化合物，其中Y1是羥基。
38.根據權利要求36或37的化合物，其中Y2是氯原子。
39.根據權利要求36-38中任一項的化合物，其中R1a＝R2a。
40.根據權利要求39的化合物，其中R1a和R2a是甲硫基。
全文摘要
本發明提供式(I)的變麴黴素衍生物，其中R
文檔編號C07D471/14GK1630658SQ01815366
公開日2005年6月22日 申請日期2001年7月11日 優先權日2000年7月11日
發明者J·C·莫裡斯, R·J·安德森, M·雷默恩安, I·曼扎納雷斯 申請人:法馬馬有限公司