一種燈盞花素磷脂複合物及其製備方法和應用的製作方法

2023-05-17 13:42:41

專利名稱：一種燈盞花素磷脂複合物及其製備方法和應用的製作方法
技術領域：
本發明屬於藥物製劑領域，涉及一種燈盞花素磷脂複合物及其製備方法，特別涉及一種燈盞花素磷脂複合物脂質製劑的製備方法。
背景技術：
燈盞花素(Brevescapine)是從菊科植物短亭飛蓬(原名燈盞花，又名燈盞細辛，Erigeron Breviscapus)中分離得到的一類黃酮類物質,主要含燈蓋乙素(Scutellarin,化學名為4』，5，6-三羥基黃酮-7-葡萄糖醛酸苷)，少量燈盞甲素及其它黃酮類成分。藥效學研究表明，燈盞花素具有擴張腦血管，降低腦血管阻力及增加腦部血流速度、血流量，改善微循環，提高血腦屏障通透性；抗血小板聚集，抗凝血和抑制血栓形成，改善血液流變性；明顯增加冠脈流量，縮小心肌梗塞範圍和提高機體耐缺氧等作用。在臨床上廣泛用於治療腦血栓形成、腦梗塞、類型未定的中風後癱瘓，以及缺血性心血管疾病等。現有研究表明，燈盞花素溶解性能差，為水不溶解和油不溶解性藥物，燈盞花素在有機溶劑中的溶解度也很小。其在正己烷及氯仿中基本不溶，水中的溶解度為(79.35±0.68) μ g/mL,在乙醇中的溶解度為(184.34±1.47) μ g/mL石森林，徐蓮英，毛展凱，等.燈盞花素理化性質及其穩定性影響因素研究，中國中藥雜誌，2009, 34(7): 843-847，為一特殊難溶性藥物；燈盞花素在正辛醇_水中的油/水分配係數為0.466 (250C )和0.923 (37°C)盧秀霞，何琳，陳莉，等.燈盞花素溶解度及油水分配係數的測定，廣東藥學院學報，2011, 27(1): 1-4，此外燈盞花素還是一弱酸性藥物，在腸道由於解離而使吸收變差。上述理化性質決定了燈盞花素口服生物利用度低，研究報導燈盞花素片口服生物利用度僅為0.40±0.19%葛慶華等.燈盞花素在犬體內的藥動學和絕對生物利用度研究，中國醫藥工業雜誌，2003, 34(12):618-620。FDA(美國食品藥品監督管理局)認為決定藥物口服吸收的生物藥劑學性質主要是藥物溶解度大小和黏膜通透性的高低，並以此為標準將藥物分為1、I1、III和IV類。燈盞花素屬於IV藥物，即溶解度低和黏膜通透性低的藥物，該類藥物口服生物利用度往往較低。因此，提高燈盞花素口服生物利用度的關鍵因素應當是提高其溶解度和腸黏膜通透性。現有技術公開的燈盞花素製劑，大多數缺乏能夠同時解決燈盞花素上述缺陷的具針對性方法，如口 腔崩解片(CN1695629A ；CN1698638A ；CN1429618A ；CN1582955A)分散片(CN1530113A ;CN1416817A)、緩釋或控釋製劑(CN1233327C;CN1212I14C;CN1205940C;CNl172679C;CN1480147A;CN1530I14A;CN1565472A;CN1515264A)、舌下片(CN1634105A)、軟膠囊(CN1069520C)等；有的採用製劑新技術以提高燈盞花素的溶解度或溶出度，如製備滴丸(CN156547IA;CN1480148A;CN1408392A;CN1768763A;CN1437950A;CN1531929A;CN1444947A);採用固體分散技術(C N1102392C);納米技術(CN1364516A);採用環糊精包合技術(CNl739537A);已有研究表明，同時增加燈盞花素黏膜通透性和水溶性而言，磷脂複合物(Phytosome)是一種非常有效的方法。磷脂複合物是藥物與磷脂在非質子溶劑中通過範德華力或氫鍵結合而成的、以一定配比關係結合而形成的複合物。藥物與磷脂結合形成複合物後，常常表現出與原化合物顯著不同的理化性質和生物特性，能顯著地改善藥物的脂溶性和穩定性，進而提高藥物的生物利用度。因此，磷脂複合物被認為是改善難溶性藥物口服生物利用度的一種有效手段。己成功被製備成磷脂複合物的包括丹酚酸B、小檗鹼、水飛薊賓、薑黃素、苦參素和黃芩苷等中藥活性成分，且體內藥動學研究證實磷脂複合物可有效促進藥物的吸收，提高血藥濃度和口服生物利用度。劉安昌，趙麗霞，翟光喜等，薑黃素磷脂複合物的製備及其形成機制研究，中國中藥雜誌[J]，2008，33(17):2112-2117.專利CN1359682A公開了一種「燈盞花素磷脂複合物及其製備方法」，其權利要求1限定了燈盞花素與磷脂的重量比為1:0.5 50，但是通過對其說明書及實施例進行分析，發現其實施例中燈盞花素與磷脂的重量比大多在1:1.5 4，磷脂的比重相對來說比較大。磷脂複合物在實際應用中存在如下問題:一是由於磷脂本身具有較高的粘性，形成的磷脂複合物在胃腸液中極易成團，很難在胃腸道中分散並穿透胃腸道生物膜；二是磷脂複合物由於具有較強的疏水性，很難分散在普通製劑中。如果磷脂複合物中磷脂的比重越大，一方面所形成的磷脂複合物就具有更高的粘性，上述磷脂複合物的2個問題就更加突出；另外一方面，複合物磷脂比重越高，意味著藥物的比重就越小，那麼製備的磷脂複合物載藥量也比較低。同時，磷脂本身容易被氧化，專利CN1359682A採用「加熱回流」並且沒有加入抗氧化穩定劑的方法容易導致磷脂被氧化，從而導致磷脂複合物的結合率低下。專利CN1359682A說明書中也缺乏其製備的燈盞花素磷脂複合物改善吸收的支持性數據，由於以上幾個問題，該專利最終沒有獲得授權。此外，製備成磷脂複合物後比較粘稠，流動性差，限制了實際的工業化生產，以及開發成其他製劑的前景。因此，在製備成磷脂複合物以後有必要尋找一些能有效改善複合物的分散性以及流動性的相關技術。

發明內容
本發明的目的之一就是克服現有技術的不足，提供一種載藥量高、質量穩定、分散性好、生物膜透過性好、生物利用度高、毒副反應小的燈盞花素磷脂複合物及其製備方法。本發明的另一目的是提供一種燈盞花素磷脂複合物油溶液和自微乳脂質製劑及其製備方法。本發明還有一個目的是提供上述燈盞花素磷脂複合物在藥物製劑中的應用。本發明的目的通過以下技術方案實現:本發明所涉及的燈盞花素磷脂複合物由燈盞花素與磷脂組成，其中燈盞花素與磷脂的質量比為1:0.5 1.2。本發明採用的磷脂為天然磷脂、合成磷脂或二者的混合物。其中，天然磷脂為大豆磷脂、蛋黃卵磷脂或二者的混合物；合成磷脂為氫化大豆磷脂、氫化卵磷脂、二棕櫚醯磷脂醯膽鹼、二棕櫚醯磷脂醯乙醇胺中的一種或其混合物。本發明的燈盞花素磷脂複合物的製備方法是:(I)、取適量燈盞花 素與相當於燈盞花素0.5 1.2倍重量的磷脂，加入到適量有機溶劑中，然後再加入適量抗氧化劑；(2)、於一定溫度下磁力攪拌，得澄明溶液；
(3)、將步驟(2)製備的澄明溶液減壓濃縮除去有機溶劑，得黃褐色固體物質，真空乾燥即得燈盞花素磷脂複合物。在本發明中所述的抗氧化穩定劑選自亞硫酸氫鈉、焦硫酸氫鈉、維生素C、EDTA及其鹽或維生素E及其衍生物的一種或其混合物。所述的有機溶劑選自氯仿、二氯甲烷、石油醚、乙醚、二氧六環、四氫呋喃、乙酸乙酯、正己烷、C1-C6直鏈或者支鏈的低級烷醇中的一種或一種以上的混合物。其中，C1-C6直鏈或者支鏈的低級烷醇選自甲醇、乙醇、丙醇或丁醇。所述的有機溶劑其用量為應使燈盞花素的反應濃度為10-30mg/mL。在本發明中，步 驟(2)的反應溫度為20_60°C，反應時間為0.5-2.0小時。步驟(3)減壓濃縮溫度為30-50°C、真空乾燥溫度為20-50°C、乾燥時間為3.0 — 5.0小時。在本發明中所述的燈盞花素磷脂複合物的油溶液和自微乳製劑的製備方法為:將上述得到的燈盞花素磷脂複合物進一步溶解在油相或加入兩性親表面活性劑的油相中，製成磷脂複合物的油溶液；或將燈盞花素磷脂複合物溶於一定比例的乳化劑、助乳化劑和油相中製成自微乳製劑。從而增強燈盞花素磷脂複合物的穩定性、增強磷脂複合物與胃腸道的接觸面積和穿透生物膜的能力，使藥物的生物利用度得到顯著提高，並形成均一、穩定的口服製劑，最終增強其藥理作用與臨床療效。在本發明中所述的油溶液的油相為中鏈和/或長鏈脂肪酸甘油酯，其中，所述的中鏈脂肪酸甘油酯選自具有8-10個碳原子鏈長的脂肪酸甘油單、雙、三或其混合物；所述的長鏈脂肪酸甘油酯選自具有12-18個碳原子鏈長的甘油單、雙、三酯或其混合物；所述的兩性親表面活性劑物質選自油酸聚乙二醇甘油酯(Labrafi I M1944CS)、聚甘油油酸酯(Plurol Oleique CC497)、聚乙二醇辛基苯基醚、單硬脂酸丙二醇、單硬脂酸乙二酯、司盤60、司盤80或司盤80中的一種或幾種。本發明所述自微乳製劑的油相為天然植物油或動物油、中鏈脂肪酸甘油三酯、中鏈脂肪酸單_，二-或單/ 二-甘油酯、脂肪酸的單價烷醇酯、油酸、亞油酸或者其中幾種的混合物；所述的乳化劑為聚氧乙烯蓖麻油，聚氧乙烯氫化蓖麻油，聚山梨酯20，聚山梨酯80，聚山梨酯85，辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯中的一種或其混合物；所述的助乳化劑為二乙
二醇單乙基醚、聚乙二醇400、聚乙二醇200、聚乙二醇600、異丙醇、丙二醇、丙三醇、無水乙醇和辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯中的一種或其混合物。本發明所述的燈盞花素磷脂複合物油溶液，可用軟膠囊囊材包裹製成軟膠囊；或加入吸附型材料使其固化後製成各種製劑如片劑、膠囊、微丸、顆粒劑、凝膠劑、栓劑、貼劑等，可通過胃腸道、口腔、直腸、皮膚等給藥途徑應用。本發明所述的燈盞花素磷脂複合物自微乳組合物，可直接或者通過水性介質分散成液體製劑，或通過固體吸附材料吸附後製備成固體製劑後，用於口服、注射、外用或者粘
膜給藥。本發明所製備燈盞花素磷脂複合物可以加入藥用輔料，製備成各種製劑，如膠囊、片劑、顆粒劑、混懸劑、栓劑、凝膠劑、貼劑等劑型，可通過胃腸道、口腔、直腸、皮膚等給藥途徑應用。本發明將燈盞花素與磷脂製備成磷脂複合物，燈盞花素與磷脂的極性基團部分發生了較強的相互作用，抑制了分子中單鏈的自由轉動，而磷脂的兩個長脂肪酸鏈不參與複合反應，可自由移動，包裹了磷脂的極性部分形成一個親脂性的表面，使複合物表現出較強的脂溶性，改善了燈盞花素的理化性質，提高了燈盞花素的脂溶性，改善了燈盞花素與磷脂雙分子構成的細胞膜的親和性，從而改善了燈盞花素腸黏膜通透性，提高了燈盞花素生物利用度。本發明進一步將燈盞花素磷脂複合物製備成油溶液和自微乳製劑，改善了磷脂複合物的分布、分散狀態，增大磷脂複合物與胃腸道的接觸面積和穿透生物膜的能力，使藥物的生物利用度得到顯著提高，使磷脂複合物能夠形成均一、穩定的製劑，從而達到進一步提高生物利用度的效果，最終增強其藥理作用與臨床療效。與現有技術相比，本發明具有以下優點:1、本發明製備的燈盞花素磷脂複合物磷脂含量低，由現有技術的燈盞花素-磷脂質量比為1:1.5 4降低至1:0.5 1.2 ;載藥量高，燈盞花素磷脂複合物的載藥量為45% 67%，高於專利CN1359682A製備的燈盞花素磷脂複合物載藥量20% 40%，本發明製備的燈盞花素磷脂複合物由於磷脂用量少而產生粘度更低、分散性更好的效果；2、本發明採用的燈盞花素磷脂複合物製備方法為低溫磁力攪拌，並且反應中加入了抗氧化穩定劑，克服了專利CN1359682A加熱回流溫度高並且沒有使用抗氧化穩定劑而致使反應中磷脂被氧化最終導致複合率低、磷脂使用量大的缺點；3、本發明進一步將燈盞花素磷脂複合物製備成油溶液或自微乳製劑，克服了燈盞花素磷脂複合物分散性差、流動性差的缺點，增強燈盞花素磷脂複合物的穩定性、增強磷脂複合物與胃腸道的接觸面積和穿透生物膜的能力，使藥物的生物利用度得到顯著提高；4、燈盞花素是一弱酸性藥物，在胃腸道由於pH的影響而穩定性較差，同時燈盞花素容易被胃腸道內的酶所酶解，從而導致口服吸收較差。磷脂複合物改善了燈盞花素的理化性質，減小了 PH值對燈盞花素的影響，保護燈盞花素免於胃腸道中酸和酶的降解；5、燈盞花素磷脂複合物提高了燈盞花素的脂溶性，增強了燈盞花素生物膜透過性，提高其吸收轉運的作用，從而提高了燈盞花素口服生物利用度。本發明所述的燈盞花素磷脂複合物對動物體內吸收效果藥代動力學研究如下:取燈盞花素磷脂複合物(本發明實施例3製備)、燈盞花素磷脂複合物油溶液(本發明實施例8製備)，以市售燈盞花素片(規格20mg/片)為參比製劑:將6隻Beagle犬按體重隨機分成三組，實驗前12h禁食，給藥後4h後統一進食。採用5mg/kg單劑量(以燈盞花素計算)口服燈盞花素片、燈盞花素磷脂複合物和燈盞花素磷脂複合物自微乳，進行三周期三交叉實驗。實驗間隔I周。於給藥前及給藥後於不同時間點犬前肢靜脈採集血液2mL肝素納抗凝,高速離心(5000rpm) 15min得血楽:lmL。所得血漿_20°C保存，並及時進行血漿樣品的預處理和測定。由AUC計算相對生物利用度，燈盞花素磷脂複合物對燈盞花素片的相對生物利用度為375.4%，燈盞花素磷脂複合物油溶液對燈盞花素的相對生物利用度為635.6%，見圖1，結果表明，燈盞花素磷脂複合物與燈盞花素磷脂複合物油溶液相對於燈盞花素片，顯著提高了燈盞花素口服生物利用度。


圖1為Beagle犬口服燈盞花素片、 燈盞花素磷脂複合物和燈盞花素磷脂複合物油溶液(本發明實施例8製備)後的體內血藥濃度一時間曲線圖。圖2燈盞花素磷脂複合物與混合物的紫外分析結果比較(a.磷脂；b.燈盞花素；C.磷脂複合物；d.混合物)圖3燈盞花素磷脂複合物與混合物的HPLC分析結果比較(a.磷脂；b.燈盞花素；c.磷脂複合物；d.混合物)圖4燈盞花素磷脂複合物與混合物的IR分析結果比較(a.磷脂；b.燈盞花素；c.磷脂複合物；d.混合物)圖5燈盞花素磷脂複合物與混合物的DSC分析結果比較(a.磷脂；b.燈盞花素；c.磷脂複合物；d.混合物)
具體實施例方式下面結合附圖對本發明的實施例作詳細說明:本實施例在以本發明技術方案為前提下進行實施，給出了詳細的實施方式和具體的操作過程，但本發明的保護範圍不限於下述的實施例。實施例1取燈盞花素0.5g，加入25ml的乙醇，加入蛋黃卵磷脂0.60g和0.05g亞硫酸氫鈉，50°C水浴加熱，磁力攪拌，保溫50°C反應0.5小時後，過濾除去亞硫酸氫鈉，濾液減壓除去乙醇，得黃褐色固體物質，40°C真空乾燥即得燈盞花素磷脂複合物。實施例2取燈蓋花素0.5g、加入50mL的甲醇,加入蛋黃卵磷脂0.55g和0.05g亞硫酸氫鈉，55°C水浴加熱，磁力攪拌，保溫55°C反應1.5小時後，過濾除去亞硫酸氫鈉，濾液減壓除去甲醇，得黃褐色固體物質，40°C真空乾燥即得燈盞花素磷脂複合物。實施例3取燈蓋花素0.5g,加入50ml的四氫呋喃,加入蛋黃卵磷脂0.4g和0.05g亞硫酸氫鈉，50°C水浴加熱，磁力攪拌，保溫50°C反應0.5小時後，過濾除去亞硫酸氫鈉，濾液減壓除去四氫呋喃，得黃褐色固體物質，40°C真空乾燥即得燈盞花素磷脂複合物。對燈盞花素、磷脂，本實施例製備的燈盞花素磷脂複合物及混合物進行紫外掃描，結果見附圖2。由紫外掃描結果可以看出，磷脂在250-400nm波長範圍內無吸收；燈盞花素及其磷脂複合物和物理混合物的紫外掃描圖譜形狀幾乎相同，在284nm和335nm處均有吸收峰。由此表明燈盞花素與磷脂形成複合物後，其原有的發色團結構並未發生改變，也說明了燈盞花素磷脂複合物並不是一種新的化合物。採用甲醇-0.1%磷酸溶液(40:60)為流動相、檢測波長為335nm、十八烷基鍵合矽膠為填充劑的色譜條件對燈盞花素、卵磷脂、本實施例製備的燈盞花素磷脂複合物及燈盞花素與磷脂的物理混合物進行HPLC分析，結果見圖3。結果表明，燈盞花素磷脂複合物與燈盞花素在此色譜條件下的色譜行為一致，保留時間分別為7.16min和7.133min，說明燈盞花素與磷脂形成的複合物不是新的化合物。分別取燈盞花素、磷脂、本實施例製備的燈盞花素磷脂複合物及燈盞花素與磷脂的物理混合物少許，採用KBr壓片法制樣，於4000-4000^1範圍內測定紅外吸收光譜，結果見圖4。從燈盞花素的紅外光 譜圖上可以看出酚-OH的收峰在3377.24CHT1，C=C吸收峰在 1661.54CHT1，苯環上的 C=C 吸收峰為 1608.35cm_1,1573.TAcm1, 1498.75cm_1, 1467.39cπΓ1 ;磷脂的特徵吸收峰有非極性端飽和長脂肪鏈的C-H伸縮振動峰2923.90cm-1, C=O吸收峰1736.96CHT1，P=O吸收峰1239.29CHT1，等等；由圖可以看出，燈盞花素與磷脂混合物的紅外圖譜基本是燈盞花素和磷脂主要峰的疊加，說明燈盞花素與磷脂的混合物中二者之間並沒有相互作用的發生。混合物中OH吸收峰3385.99cm—1，複合物中OH吸收峰3422.ΟδαιΓ1，明顯向移向高波數，說明複合物中燈盞花素的酚-OH可能與磷脂的某些基團發生了相互作用；磷脂本身的P=O吸收峰在1239.29CHT1，磷脂複合物的P=O吸收峰峰位雖然基本沒什麼變化，但是峰強度均明顯減弱，峰形被鈍化，說明可能是燈盞花素的酚羥基與磷脂的P=O發生了一定程度的締合作用；而磷脂中的C=O吸收峰位於1736.96CHT1，與混合物和複合物中C=O吸收峰位幾乎沒有變化，說明磷脂中的羰基並沒有參與燈盞花素磷脂複合物的形成。紅外光譜分析結果表明磷脂複合物中燈盞花素與磷脂基本化學結構沒有發生根本的改變，未形成新的化合物，但也不是兩者間簡單的物理混合物，這也說明燈盞花素磷脂複合物中燈盞花素是和磷脂以分子間力相結合的物態形式存在。採用差示掃描量熱法(DSC)對燈盞花素、磷脂、本實施例製備的燈盞花素磷脂複合物及燈盞花素與卵磷脂的物理混合物進行了熱分析，結果見圖5。從圖5所示的DSC圖譜可以看出，燈盞花素的熔點為181.74 °C，190度左右開始分解；磷脂出現26.540C ,65.790C ,90.04°C，125.52°C四個相變溫度，由於磷脂為一混合物，四個相變溫度可能表示其不同組分隨外界溫度的升高而呈現的相應熱量變化，而磷脂在200°C以內沒有明顯的熔點吸收峰；燈盞花素磷脂複合物在0-140°C檢測到一個較寬範圍的吸熱峰，可能是製備工藝中殘留的溶劑·揮發的吸熱峰，燈盞花素181.74°C特徵吸收熔融峰消失；而燈盞花素與磷脂的物理混合物的DSC圖譜可以看出是蛋黃卵磷脂與燈盞花素特徵吸收峰出現重疊，可能燈盞花素與磷脂之間相互影響，燈盞花素熔點吸收峰由181.74°C前移至143.39°C，雖然燈盞花素熔點吸收峰在磷脂的影響下前移，但仍然存在。因此，由以上分析結果可以說明燈盞花素與磷脂形成的燈盞花素磷脂複合物不是一種簡單的物理混合，而是一種新的結合狀態。實施例4取燈蓋花素0.8g,加入40ml的無水乙醇,加入大豆磷脂0.96g和0.08g維生素E,55°C水浴加熱，磁力攪拌，保溫55°C回流反應0.5小時後，減壓除去無水乙醇，得黃褐色固體物質，40°C真空乾燥即得燈盞花素磷脂複合物。實施例5取燈盞花素0.5g，加入50ml的四氫呋喃，加入蛋黃卵磷脂0.lg，二棕櫚醯磷脂醯膽鹼0.15g和0.05g維生素E，50°C水浴加熱，磁力攪拌，保溫50°C反應2小時後，減壓除去四氫呋喃，得黃褐色固體物質，40°C真空乾燥即得燈盞花素磷脂複合物。實施例6取燈蓋花素0.9g,加入30ml的四氫呋喃和甲醇(四氫呋喃:甲醇體積比為1:1),加入蛋黃卵磷脂0.9g和0.09g維生素E，50°C水浴加熱，磁力攪拌，保溫50°C反應0.5小時後，減壓除去四氫呋喃和甲醇的混合溶液，得黃褐色固體物質，40°C真空乾燥即得燈盞花素磷脂複合物。實施例7取燈盞花素0.5g，加入50ml的三氯甲烷，加入蛋黃卵磷脂0.5g和0.05g維生素E，50°C水浴加熱，磁力攪拌，保溫50°C反應0.5小時後，減壓除去三氯甲烷，得黃褐色固體物質，40°C真空乾燥即得燈盞花素磷脂複合物。實施例8取燈蓋花素0.5g,加入50ml的乙酸乙酯,加入蛋黃卵磷脂0.5g和0.05g維生素E，50°C水浴加熱，磁力攪拌，保溫50°C反應0.5小時後，減壓除去乙酸乙酯，得黃褐色固體物質，40°C真空乾燥即得燈盞花素磷脂複合物。實施例9取燈蓋花素0.5g,加入50ml的二氧六環,加入蛋黃卵磷脂0.5g和0.05g的亞硫酸氫鈉，50°C水浴加熱，磁力攪拌，保溫50°C反應0.5小時後，過濾除去亞硫酸氫鈉，濾液減壓除去二氧六環，得黃褐色固體物，40°C真空乾燥即得燈盞花素磷脂複合物。實施例10取燈蓋花素0.5g,加入25ml的二氧六環和25ml的甲基叔丁基醚,加入二棕櫚醯磷脂醯乙醇胺0.5g和0.05g的亞硫酸氫鈉，50°C水浴加熱，磁力攪拌，保溫50°C反應0.5小時後，過濾除去亞硫酸氫鈉，濾液減壓除去二氧六環和甲基叔丁基醚的混合液，得黃褐色固體物，40°C真空乾燥即得燈盞花素磷脂複合物。實施例11取燈盞花素0.5g，加入25ml的乙酸乙酯和25ml石油醚，加入大豆磷脂0.6g和
0.06g的亞硫酸氫鈉，50°C水浴加熱，磁力攪拌，保溫50°C反應0.5小時後，過濾除去亞硫酸氫鈉，濾液減壓除去乙酸乙酯和石油醚的混合液，得黃褐色固體物，40°C真空乾燥即得燈盞花素磷脂複合物。 實施例12稱取燈盞花素磷脂複合物lg(實施例1製備)，加入IOg的中鏈脂肪酸甘油酯及5g聚甘油油酸酯(Plurol⑧Oleique CC497)，攪拌至形成透明的溶液狀，得到磷脂複合物的油溶液組合物。實施例13稱取燈盞花素磷脂複合物Ig (實施例3製備)，加入6g的中鏈脂肪酸甘油酯及3g司盤80，攪拌至形成透明的溶液狀，得到磷脂複合物的油溶液組合物。實施例14稱取燈盞花素磷脂複合物1.0g (實施例3製備)，加入6g的月桂酸聚乙二醇甘油酯及3g辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯，攪拌至形成透明的溶液狀，得到磷脂複合物的油溶液組合物。實施例15取燈盞花素磷脂複合物1.0g (實施例3製備)，加入4.5g亞油酸甘油酯和4.5g維生素E，攪拌混合均勻，得燈盞花素磷脂複合物的油溶液組合物。實施例16稱取質量比為5.32%的燈盞花素磷脂複合物，加入5-10倍量的無水乙醇，在20-60°C下攪拌溶解均勻至透明油狀液體，得燈盞花素磷脂複合物乙醇溶液。向燈盞花素磷脂複合物乙醇溶液中加入12.63%的亞油酸甘油酯、12.63%的中鏈甘油三酯(MCT)、20.72%的聚氧乙烯氫化蓖麻油、11.10%的辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯、37.6 %的聚乙二醇400，磁力攪拌或者超聲攪拌均勻至澄清透明油狀液體，得燈盞花素磷脂複合物自微乳溶液。再將燈盞花素磷脂複合物自微乳在200-1500bar壓力條件下通過高壓均質機或微射流均質機循環均質2-10次，然後再減壓濃縮，除去無水乙醇，即得燈盞花素磷脂複合物自微乳組合物。水稀釋100倍後，採用馬爾文粒度電位測定儀(Nano-ZS90)測定粒徑分布為26.71nm。實施例17燈盞花素磷脂複合物幹混懸劑的製備取燈盞花素磷脂複合物80g(實施例6製備)，羥丙甲纖維素100g，羧甲基纖維素鈉40g分別粉碎過100目篩，用等量遞加法將燈盞花素磷脂複合物與羥丙甲纖維素、羧甲基纖維素鈉和750g甘露醇混合均勻，再加入微粉化滑石粉10g，硬脂酸鎂10g，矯味劑10g，充分混合均勻，分裝，得1000袋。實施例18燈盞花素磷脂複合物乳劑的製備取實施實例6製備的燈盞花素磷脂複合物0.Sg,大豆油10g，油酸0.5g，甘油2g，吐溫1.5g,注射用水適量，合計100g。採用高剪切機製備初乳，在200-1500bar壓力條件下通過高壓均質機或微射流均質機循環均質2-10次，0.45 μ m濾膜過濾，灌裝即得乳劑。實施例19用燈盞花素磷脂複合物油溶液製備軟膠囊將燈盞花素磷脂複合物油溶液0.45g(約相當於20mg燈盞花素)(實施例9製備)及明膠、甘油、山梨醇、水配製明膠溶液，置鋪展箱中備用。在室溫25±2°C、相對溼度40%的條件下用滴製法製成軟膠囊，在25±2°C、相對溼度40%的條件下冷風乾燥24小時即得。實施例20燈盞花素磷脂複合物製備硬膠囊取實施實例6製備的燈盞花素磷脂複合物40g(相當於燈盞花素20g)，澱粉120g，微晶纖維素40g，微分矽膠2g，交聯羧甲澱粉鈉10g，將上述物料混合均勻，填充膠囊，得1000 粒。實施例21用燈盞花素磷脂複合物製備片取實施例3製備的燈盞花素磷脂複合物36g (相當於燈盞花素20g)，加入微晶纖維素32g，乳糖32g，羧甲基澱粉鈉5g，以95%乙醇為潤溼劑溼法制粒，烘乾，外加硬脂酸鎂
0.5g，壓片，得1000片。實施例22燈盞花素磷脂複合物製備顆粒劑取實施實例6製備的燈盞花 素磷脂複合物80g (相當於燈盞花素40g)，加入微晶400g,鹿糖400g,香精20g,交聯羧甲澱粉鈉50g,混勻後用30%的乙醇為潤溼劑溼法制粒,過40目篩，烘乾，分裝，得1000袋。
權利要求
1.一種燈盞花素磷脂複合物，其特徵在於該磷脂複合物由燈盞花素與磷脂組成，其中燈盞花素與磷脂的質量比為1:0.5 — 1.2，所述的磷脂為天然磷脂、合成磷脂或二者的混合物。
2.根據權利要求1所述的燈盞花素磷脂複合物，其特徵在於其所述的天然磷脂為大豆磷脂、蛋黃卵磷脂或二者的混合物；所述的合成磷脂為氫化大豆磷脂、氫化卵磷脂、二棕櫚醯磷脂醯膽鹼、二棕櫚醯磷脂醯乙醇胺中的一種或其混合物。
3.根據權利要求1或2所述的燈盞花素磷脂複合物的製備方法，包括以下步驟: (1)、取燈盞花素與相當於燈盞花素0.5 - 1.2倍重量的磷脂，加入到有機溶劑中，然後再加入相當於燈盞花素0.05-0.15倍重量的抗氧化劑，所述的有機溶劑的用量應使燈盞花素的反應濃度為10 — 30mg/mL ； (2)、於20— 60°C、300-600r/min條件下磁力攪拌，得澄明溶液，反應時間為0.5-2.0小時； (3)、將步驟(2)製備的澄明溶液在30- 50°C條件下減壓濃縮直至無有機溶劑蒸出，得黃褐色固體物質，真空乾燥即得燈盞花素磷脂複合物，真空乾燥溫度為20 - 50°C，乾燥時間為3.0 — 5.0小時。
4.根據權利要求3所述的燈盞花素磷脂複合物的製備方法，其特徵在於所述的抗氧化劑為亞硫酸氫鈉、焦硫酸氫鈉、維生素C、EDTA及其鹽或維生素E及其衍生物的一種或其混合物；所述的有機溶劑選 自氯仿、二氯甲烷、石油醚、乙醚、二氧六環、四氫呋喃、乙酸乙酯、正己烷、甲基叔丁基醚、C1 - C6直鏈或者支鏈的低級烷醇中的一種或一種以上的混合物。
5.根據權利要求4所述的燈盞花素磷脂複合物的製備方法，其特徵在於所述的C1- C6直鏈或者支鏈的低級烷醇選自甲醇、乙醇、丙醇或丁醇。
6.一種燈盞花素磷脂複合物的油溶液的製備方法，其特徵在於將權利要求3得到的燈盞花素磷脂複合物進一步溶解在油相或加入到兩性親表面活性劑的油相中，製成磷脂複合物的油溶液。
7.一種燈盞花素磷脂複合物的自微乳製劑的製備方法，其特徵在於將權利要求3得到的燈盞花素磷脂複合物溶於質量百分比為10 - 50%的乳化劑、10 - 55%的助乳化劑和10 — 40%的混合油相中製成自微乳製劑。
8.根據權利要求6所述的燈盞花素磷脂複合物的油溶液的製備方法，其特徵在於所述燈盞花素磷脂複合物與油相或者加入兩親性表面活性劑的油相的質量比為1:1 15。
9.根據權利要求6或8所述的燈盞花素磷脂複合物油溶液，其特徵在於燈盞花素磷脂複合物與兩親性表面活性劑的重量比為1:0.5 10。
10.根據權利要求6或7所述的燈盞花素磷脂複合物的油溶液和自微乳製劑的製備方法，其特徵在於所述的油相是中鏈和/或長鏈脂肪酸甘油酯，其中所述的中鏈脂肪酸甘油酯選自具有8 10個碳原子鏈長的脂肪酸甘油單、雙、三或其混合物；所述的長鏈脂肪酸甘油酯選自具有12 18個碳原子鏈長的甘油單、雙、三酯或其混合物。
11.根據權利要求6所述的燈盞花素磷脂複合物的油溶液的製備方法，其特徵在於所述的兩親性表面活性劑，選自油酸聚乙二醇甘油酯、聚甘油油酸酯、聚乙二醇辛基苯基醚、單硬脂酸丙二醇、單硬脂酸乙二酯、司盤60、司盤80或辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯中的一種或幾種。
12.根據權利要求7所述的燈盞花素磷脂複合物的自微乳製劑的製備方法，其特徵在於所述自微乳製劑的油相為天然植物油或動物油、中鏈脂肪酸甘油三酯、中鏈脂肪酸單_，二 -或單/ 二-甘油酯、脂肪酸的單價烷醇酯、油酸、亞油酸或者其中幾種的混合物；所述的乳化劑為聚氧乙烯蓖麻油，聚氧乙烯氫化蓖麻油，聚山梨酯20，聚山梨酯80，聚山梨酯85，辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯中的一種或其混合物；所述的助乳化劑為二乙二醇單乙基醚、聚乙二醇400、聚乙二醇200、聚乙二醇600、異丙醇、丙二醇、丙三醇、無水乙醇和辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯中的一種或其混合物。
13.根據權利要求1或2所述的燈盞花素磷脂複合物，其特徵在於所述的磷脂複合物油溶液用軟膠囊囊材包裹製成軟膠囊，或加入吸附型材料製成可製成經胃腸道、口腔黏膜、直腸或皮膚途徑給藥的製劑。
14.根據權利要求1或2所述的燈盞花素磷脂複合物，其特徵在於所述的磷脂複合物自微乳可直接或者通過水性介質分散成液體製劑，或通過固體吸附材料吸附後製備成固體製劑後，用於口服、注射、外用或者黏膜給藥。
15.根據權利要求1或2所述的燈盞花素磷脂複合物，其特徵在於所述的燈盞花素磷脂複合物加入藥學 上適合的輔料，製成顆粒劑、片劑、硬膠囊、軟膠囊或口服混懸液。
全文摘要
本發明提供了一種燈盞花素磷脂複合物及其製備方法和應用，所述的磷脂複合物由燈盞花素與磷脂按質量比1∶0.5－1.2複合而成。利用本發明的製備方法製備的燈盞花素磷脂複合物改變了燈盞花素的理化性質，增強其脂溶性、穩定性和水分散性，改善其跨膜轉運性能，從而提高其生物利用度。本發明製備工藝簡單、重現性好，適合工業化生產。
文檔編號A61K31/7048GK103083683SQ20131004714
公開日2013年5月8日 申請日期2013年2月5日 優先權日2013年2月5日
發明者陳小新, 龍超峰, 謝稱石, 吳雄, 廖小英, 周曉麗, 原素 申請人:廣東華南藥業集團有限公司