一株鄰苯二甲酸二丁酯降解菌的製造方法與工藝

2023-04-25 01:10:00

本發明涉及一株降解鄰苯二甲酸二丁酯的菌株。

背景技術：
DBP是有毒汙染物酞酸酯的一種，在環境中普遍存在，是全球性的有機汙染物，同時被美國國家環保局列為優控汙染物。DBP毒性較高具「三致危害」可以通過食物鏈在生物體內富集，引起神經、免疫、肝臟、生殖等毒性作用。DBP是一種重要的增塑劑，是塑料農膜的重要成分，在中國塑料農膜的使用量位居世界前列，所以在設施土壤中已大量檢測出DBP的存在。而且DBP不易溶於水，其固體吸附係數較大，遷移性較差，在自然環境中的性質非常穩定，不易降解，可以吸附在植物根系，並通過積累直接影響作物品質，對農作物造成毒害，導致減產，嚴重威脅農業生產環境的生態健康。經過國內外學者的研究，發現生物降解是使DBP完全礦化的主要手法，本發明為減少農業土壤中的DBP含量，採用特殊培養的方法分離提取了一株DBP降解菌，並對其高效性和降解速率進行了探討和研究，不但為消除環境中的DBP的汙染問題提供了可行性，而且為其應用提供了理論依據。

技術實現要素：
本發明提供一株降解鄰苯二甲酸二丁酯的菌株，具有高效降解鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)的能力，為有效解決DBP的汙染問題提供微生物基礎。本發明鄰苯二甲酸二丁酯降解菌為假單胞菌(Pseudomonassp.)DNB-S1，保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址是北京市朝陽區北辰西路1號院3號，保藏日期為2014年11月6日，保藏編號為CGMCCNo.9526。本發明假單胞菌DNB-S1為革蘭氏陰性菌，菌落為白色，呈圓形，邊緣為鋸齒狀，光滑溼潤，中心凸起；該菌的澱粉水解試驗、油脂水解試驗、明膠水解試驗、甲基紅試驗、伏-普實驗均為陽性，硫化氫試驗、尿素測定試驗、吲哚試驗、檸檬酸鹽試驗為陰性，能利用DBP為唯一碳源和能源進行生長繁殖。本發明假單胞菌DNB-S1的培養方法簡單，可在無機鹽培養基中生長，生長迅速，很難發生變異，其菌液可以直接作用於被DBP汙染的土壤。該菌的最適生長條件為：溫度35℃，pH值7，搖床轉速為125r/m，接菌量為3％，DBP濃度為500mg/L。本發明假單胞菌DNB-S1通過16SrDNA序列比對分析，與假單胞菌屬(Pseudomonassp.)有極高的同源性，同源性為99％。通過結合菌體形態特徵、生長條件、生理生化鑑定結果確定假單胞菌DNB-S1屬於假單胞菌屬(Pseudomonassp.)。將假單胞菌DNB-S1放在最適生長條件下培養(溫度35℃，pH值7，搖床轉速為125r/m，接菌量為3％，DBP濃度為500mg/L)，48h內DBP的降解率能達到90％，效果顯著，為有效解決DBP的汙染問題提供工具。同時，在排除DBP濃度對其生長過程抑制作用的基礎上，對其生長過程中12-33h進行動力學研究，發現假單胞菌DNB-S1對DBP的降解過程符合一級反應模型，其動力學方程為c＝6.444-0.032t(R2＝0.9942)(為DBP濃度，t為反應時間)。本發明假單胞菌DNB-S1屬於假單胞菌屬，保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址是北京市朝陽區北辰西路1號院3號...