用於治療酸性鞘磷脂酶缺乏的劑量遞增酶替代療法的製作方法

2023-04-28 07:07:46 2

專利名稱：用於治療酸性鞘磷脂酶缺乏的劑量遞增酶替代療法的製作方法
用於治療酸性鞘磷脂酶缺乏的劑量遞增酶替代療法本申請要求2009年8月觀日提交的美國臨時專利申請序列號61/238，113的優先權，其通過引用整體納入本文。1.前言本發明涉及使用酸性鞘磷脂酶(ASM)的劑量遞增酶替代療法，以用於治療患有酸性鞘磷脂酶缺乏(ASMD)尤其是患有尼曼-皮克二氏病(NPD)以及(在某些實施方案中)B 型NPD的非神經學表現的人個體。2.背景酸性鞘磷脂酶(E. C. 3.1.4.12, ASM)是一種溶酶體磷酸二酯酶，其將鞘磷脂(在腦、肝、肺、脾和淋巴結中發現的磷脂儲存物質)水解為神經醯胺和磷醯膽鹼。ASM活性的缺乏導致身體無法分解鞘磷脂，導致稱為尼曼-皮克二氏病的溶酶體貯存病形式。尼曼-皮克二氏病是一種遺傳性常染色體隱性的脂質貯存障礙，其特徵是鞘磷脂在諸如巨噬細胞和神經元等細胞的溶酶體中過量累積，損害正常的細胞功能。A型尼曼-皮克二氏病是一種在嬰兒中快速發展的神經變性疾病，並通常導致嬰兒在2至3歲內死亡。B 型尼曼-皮克二氏病導致患者肝和脾增大以及呼吸窘迫，並且通常在成年早期死亡。這兩種與ASM缺乏有關的尼曼-皮克二氏病形式在本文統稱為尼曼-皮克二氏病或ASM缺乏 (ASMD)。其它類型的尼曼-皮克二氏病(例如C型)不涉及ASM基因的突變，並且不直接歸因於ASM的功能。作為A和B亞型的顯著臨床異質性的基礎生化和分子缺陷的性質仍然不明。儘管兩種亞型的患者具有殘餘的ASM活性(正常值的約1_10%)，生化分析不能可靠地區分2種表型。此外，B型NPD的臨床過程是高度可變的，目前不可能將疾病嚴重性與殘餘的ASM活性水平相關聯。與一般群體相比，NPD更多見於德系猶太人(Ashkenazi Jewish)世系的個體中。 據估計，A型疾病在德系猶太人中的發病率是約1/40，000，基因頻率(q)為約1/200，雜合子載步頁(2pq)為 1/100 (Goodman, 1979,"Genetic Disorders Among The Jewish People，，， John Hopkins Univ. Press，Baltimore，第 96-100 頁)。B 型 NPD 在德系猶太人群體中的雜合子載體發病率更低(Goodman，同上)。已經估測，在德系猶太人後代個體中，A和B型NPD 的混合雜合子載頻是約1/70。儘管酶促診斷可以可靠地診斷出具有A或B型NPD的受累患者(Spence和Callahan，同上)，已經證實肯定雜合子的酶促檢測是有問題的，特別是當使用外周白細胞作為酶來源時。據推測，中性鞘磷脂酶在一些來源中的出現和/或由突變體等位基因導致的殘餘ASM活性的存在，已經導致不能可靠地辨別任一種疾病亞型的攜帶者。即使使用培養的皮膚成纖維細胞(其不表達中性鞘磷脂酶)，也不能提供雜合子的明確結果。在單個國家中進行的流行病學研究中，估測A和B型尼曼-皮克二氏病在世界上若干國家中的新生兒混合發病率是在1/167，000至1/250,000範圍內(Miekle等人，1999JAMA 281(3) :249-254 ;Poorthuis 等人，1999Hum Genet 105 151-156 ;Pinto 等人，2004Euro. J. Hum. Gene. 12 :87-92)。認為個體中的雜合子載體比例是在1/200至1/250範圍內。酶替代療法已經被用於其它溶酶體貯存疾病。通過提供外源酶，酶替代療法試圖補充缺乏的酶活性。在將酶替代療法用於尼曼-皮克二氏病的情況下，目的是使得受累個體能夠加工鞘磷脂，並避免其在溶酶體內累積。為了有效，該療法初始需要足夠大量的替代酶以分解所累積的鞘磷脂，並且需要持續補給替代酶以避免鞘磷脂的進一步累積。3.簡介本發明涉及劑量遞增酶替代療法，以用於治療患有ASMD的人個體，尤其是患有 NPD以及(在具體實施方案中)B型NPD的非神經學表現的個體。更具體地，初始時，將無毒低劑量將酶(ASM)施用給這樣的患者，然後在以後的給藥中增加劑量。然後可以將患者耐受的ASM最大劑量用作維持劑量。或者，可以將小於耐受的最大劑量的治療有效劑量用作維持劑量。本發明部分地基於下述發現，即清除人個體(即，ASMD患者或尼曼-皮克二氏患者)中累積的鞘磷脂底物所需的ASM劑量產生有毒副作用(包括中毒的臨床跡象)。在不那麼嚴重的ASMD形式(B型NPD患者，其缺少、但是具有至少一些酶活性)中，這是特別令人驚訝的。更具體地，NPD的治療需要足夠大的劑量，以實現ASM酶在病理器官(例如，具體地，肝、脾、肺、心臟、腎和腦)中的充分分布。在ASM敲除小鼠模型(ASKMCHh^)中的研究表明，大多數施用的重組人ASM(rhASM)分布至肝和脾(在這裡其減少底物)，但是以遠遠更低的程度分布在肺、心臟和腦中(Miranda等人FASEB 2000，14 1988 ；也參見，He等人， 1999,Biochimica et Biophsyica Acta 1432 :251-264 的圖 9B)。隨後在ASMKO小鼠模型中使用更大劑量的rhASM的研究中，在< 3. Omg/kg的劑量，底物減少，且沒有觀察到毒性；實際上，在使用》1 Omg/kg的劑量之前，沒有觀察到毒性的臨床症狀。參見，「Dose Responsive Toxicological Findings Following Intravenous Administration of Recombinant Human Acid Sphingomyelinase(rhASM)to Acid Sphingomyelinase Knock-out (ASMKO) Mice. 」C. Nickerson, J.Murray, A. Vitsky, M.Hawes, S.Ryan, P.Ewing, B. Thurberg, L.Andrews. Dept Pharm/Tox, Pathology, Genzyme Corp. , Framingham, MA. , American Society of Human Genetics 2005 ；禾口"Elevations of Pro-Inflammatory Cytokines and Decreases in Cardiovascular Hemodynamics Following Intravenous Administration of Recombinant Human Acid Sphingomyelinase(rhASM)to Acid Sphingomyelinase Knock-out (ASMKO) Mice. "J. Murray, A. M. D' Angona, C. Nickerson, A. Vitsky, M. Hawes, S. Ryan, P. Ewing, B. Thurberg, L. Andrews. Dept. Pharmacology/Toxicology&Pathology, Genzyme Corp. , Framingham, MA. , Society of Toxicology 2006。基於這些ASKMO數據，我們用在下文的第6部分中所述的保守的最大劑量1. Omg/ kg rhASM治療無神經病的ASMD人個體。非常意外的是，使用低至0. :3mg/kg的劑量，在人個體中觀察到毒性，包括與臨床症狀有關的不利事件的發作。該結果是特別令人驚奇的，因為在敲除的小鼠模型中不存在ASM酶，與具有至少一些酶活性和相對溫和的疾病的這些人個體相比，小鼠模型應當表現為更嚴重的病症。儘管不希望受任何理論的約束，在ASM治療中發生的有毒副作用可能源自ASMD 患者中儲存的鞘磷脂底物的分解，以及產物神經醯胺的釋放，所述神經醯胺是促細胞凋亡的，並誘導促炎症細胞因子應答和高膽紅素血症。為了解決該問題，我們已經開發了一個方案，以允許安全地施用在病理器官中實現充分分布所需的大劑量的ASM酶。根據該方案，初始使用非常低的劑量治療ASM，以實現儲存底物的緩慢降解，這伴有的副作用較少。隨著個體中的底物被消耗(隨著貯存底物被「去堆積(debulked)」)，可以安全地增加劑量。根據該方案，初始將無毒的低劑量的ASM酶施用給NPD病患者，並隨時間增加劑量。隨著ASM酶的劑量增加，可以監測患者的總膽紅素濃度、急性期反應物的產生、炎症介質的產生、和有關不利事件。低劑量的ASM的施用和劑量的增加促進累積的鞘磷脂的去堆積(debulking)。一旦患者被去堆積，可以安全地給患者施用更大的劑量，以確保ASM酶在靶器官(例如，肝、脾、肺、心臟、腎、腦、骨髓、骨骼、關節等)的充分分布。在某些實施方案中，患者耐受的最大劑量可以用作維持劑量。在有些實施方案中，基於患者的病症，所述維持劑量可以隨時間增加或減小。在某些實施方案中，通過測量血漿鞘磷脂水平、血漿神經醯胺水平、「急性期反應物」和炎症介質(它們是炎症應答的度量)的產生、膽紅素濃度(總的、直接的、和間接的) 和/或其它生化標誌物，監測患者的治療，以確保在將劑量升高至下一個水平之前的穩定應答。這些標誌物包括但不限於C-反應蛋白(CRP)或高敏感性CRP(hs-CRP)、細胞因子 (例如，IL-8、IL-6)、降鈣素和鐵蛋白。在具體實施方案中，可以監測患者的一個或多個有關不利事件，這可以包括但不限於全身症狀(例如，發熱、噁心、嘔吐、疼痛、肌痛)和黃疸。小於lmg/kg的劑量對於起始治療而言是優選的。連續地升高初始劑量，直到達到治療劑量。這樣的劑量遞增可以用於測定最高耐受劑量。例如，一旦患者的累積鞘磷脂酶底物被去堆積，可以進一步增加劑量，直到觀察到毒性。因此，可以調整維持劑量，且可以根據患者的狀態不斷地和定期地重新調整。在一個具體的實施方案中，用於治療具有酸性鞘磷脂酶缺乏的人個體的方法包括(a)用於去堆積人個體中累積的鞘磷脂底物的方案，該方案包括(i)將初始的無毒低劑量的ASM施用給所述人個體；(ii)將連續更大劑量的ASM施用給所述人個體，並在每個連續劑量以後監測所述個體的一種或多種不利副作用，如由升高的膽紅素或有關不利事件所提示的副作用；和(b)維持方案，該方案包括施用等於或小於個體耐受的最大劑量的劑量，作為所述個體的維持劑量。在另一個具體實施方案中，用於治療具有酸性鞘磷脂酶缺乏的人個體的方法包括，在遞增給藥方案中施用下述順序劑量rhASM 0. lmg/kg、0. 3mg/kg,0. 6mg/kg、和1. Omg/ kg，其中rhASM的每個劑量施用至少2次，且每個劑量以2周間隔施用，且其中在升大劑量至下一水平之前，監測患者的有毒副作用。在另一個具體實施方案中，本文描述了用於治療人個體的酸性鞘磷脂酶缺乏的酸性鞘磷脂酶(ASM)，其準備如下施用(a)在用於去堆積累積的鞘磷脂底物的方案中的施用，該方案包括(i)施用初始的無毒低劑量的酸性鞘磷脂酶(ASM) ； (ii)施用連續更大劑量的ASM，並在每個連續劑量以後監測所述個體的一種或多種不利副作用，如由升高的膽紅素或有關不利事件所指示的副作用；和(b)在維持方案中的施用，該方案包括施用等於或小於個體耐受的最大劑量的劑量，作為所述個體的維持劑量。在另一個具體實施方案中，本文描述了用於治療人個體的酸性鞘磷脂酶缺乏的重組人ASM，其準備在下述順序劑量的遞增給藥方案中施用0. lmg/kg、0. 3mg/kg,0. 6mg/kg、 和1. Omg/kg，其中每個劑量施用至少2次，且每個劑量以2周間隔施用，且其中在升大劑量至下一水平之前，監測患者的有毒副作用。3. 1.術語
在給定值的上下文中，本文使用的術語「約」和「大約」互換地用於表示在給定值附近的範圍，其中得到的值與明確敘述的值基本上相同。在一個具體的實施方案中，「約」是指在給定的值或範圍的10% ,15^^25%內。本文使用的術語「老年人」表示65歲或以上的人。本文使用的術語「成年人」表示18歲或以上的人。本文使用的術語「未成年人」表示1至18歲的人。本文使用的術語「嬰兒」表示新生兒至1歲的人。本文使用的術語「幼兒」表示1至3歲的人。本文使用的術語「不利事件」表示，在臨床數據交換標準聯合研究數據列表模 Mfeili^ip· v. 3. 1. 1 (Clinical Data Interchange Standards Consortium Study Data Tabulation Model standard terminology v. 3. 1. 1.)中定義的「在施用藥物產品的患者或臨床研究個體中的任何不利的醫學事件」。「有關不利事件」是與治療具有偶然聯繫的不利事件。本文使用的術語「維持劑量」等表示，為了維持希望的治療效果而施用於ASMD患者的劑量。在具體實施方案中，維持劑量維持1、2、3、4或更多種下述的希望的治療效果 (i)脾體積減小，這通過本領域已知的技術(例如，MRI)來評估；(ii)肝鞘磷脂水平降低， 這通過本領域已知的技術(例如，肝樣品的生化分析和/或組織形態測定分析)來評估；
(iii)運動能力增加，這通過本領域已知的技術(例如，周期測力法(cycleerogmetry)的最大工作負荷，包括預測的最大工作負荷百分比、氧耗量峰值和二氧化碳產量)來評估；
(iv)肺功能增加，這通過本領域已知的技術來評估，例如，在美國胸科學會，1991，Am.Rev. Respir Dis. 144 :1202-1218中所述的技術，諸如擴散能力(DLro)，通過例如肺量測定技術測得的預測用力肺活量百分比(FVC)，通過例如肺量測定技術測得的在1秒內的用力呼氣體積(FEV1)，以及總肺容量；(ν)支氣管肺泡灌洗(BAL)鞘磷脂減少；(vi)肝體積減小，這通過本領域已知的技術(例如，MRI)來評估；(vii)肺表象改善，這通過本領域已知的技術 (例如，高解析度計算機體層攝影術(CT)掃描或胸部X射線檢查)來評估；(viii)肝、皮膚、血漿和幹血斑(DBQ中鞘磷脂濃度降低，這通過例如串聯質譜法來測量；(ix)ASMD和/ 或與其有關的症狀的嚴重性的減輕或改善；(χ)與ASMD有關的症狀的持續時間減小；(xi) 與ASMD有關的症狀的復發的預防；(xii)個體住院治療減少；(vi)住院治療時間縮短； (xiii)個體的生存期增加；(xiv)死亡率降低；(XV)住院治療率降低；(xvi)與ASMD有關的症狀的數目減少；(xvii)ASMD患者的無症狀存活期增加；(xviii)神經功能(例如，心理運動功能、社會反應性等)改善；(xix)肺清除改善，這通過例如BAL細胞計數和曲線來測量； (XX)殼三糖苷酶的血清水平降低；(xxi)趨化因子(c-c)基序配體18(CCL18)的血清水平降低；(xxii)脂質特性(例如，HDL、LDL、膽固醇、甘油三酯、和總膽固醇HDL比)的改善； 和(xxiii)提高的生活質量，這通過例如問卷法來評估。在某些實施方案中，所述維持劑量是患者耐受的最高或最大劑量。在有些實施方案中，所述維持劑量是下述範圍內的劑量0. 5mg/kg至1. 5mg/kg、
0.75mg/kg 至 1. 25mg/kg、lmg/kg 至 2. 5mg/kg、lmg/kg 至 2. 75mg/kg、1. 5mg/kg 至 2. 5mg/kg、
1.5mg/kg 至 2. 75mg/kg、2mg/kg 至 2. 5mg/kg、2mg/kg 至 2. 75mg/kg、2. 5mg/kg 至 2. 75mg/ kg、2. 5mg/kg 至 3mg/kg、3mg/kg 至 4mg/kg、3mg/kg 至 5mg/kg、4mg/kg 至 5mg/kg、2mg/kg 至5mg/kg或5mg/kg至10mg/kg的ASM。在某些實施方案中，所述維持劑量是下述範圍內的劑量:5mg/kg 至 15mg/kg、10mg/kg 至 15mg/kg、10mg/kg 至 20mg/kg、15mg/kg 至 20mg/kg、 20mg/kg 至 30mg/kg、25mg/kg 至 50mg/kg、30mg/kg 至 40mg/kg、30mg/kg 至 45mg/kg 或 40mg/ kg至50mg/kg的ASM。在有些實施方案中，所述維持劑量是0. 75mg/kg、0. 80mg/kg、0. 85mg/ kg、0. 90mg/kg、0. 95mg/kg、lmg/kg、1. lmg/kg、l. 2mg/kg、l. 25mg/kg、l. 3mg/kg、l. 4mg/kg、
1.5mg/kg、1. 75mg/kg、或ang/kg的ASM。在某些實施方案中，所述維持劑量是2. 5mg/ kg、2. 75mg/kg、3mg/kg、3. 25mg/kg、3. 5mg/kg、3. 75mg/kg、4mg/kg、4. 25mg/kg、4. 5mg/kg、 4. 75mg/kg、5mg/kg、5. 5mg/kg、6mg/kg、6. 5mg/kg、7mg/kg、7. 5mg/kg、8mg/kg、8.5mg/kg、 9mg/kg、9. 5mg/kg或lOmg/kg的ASM。在有些實施方案中，所述維持劑量是1 lmg/kg、Umg/ kg、13mg/kg、14mg/kg、15mg/kg、20mg/kg、25mg/kg、30mg/kg、35mg/kg、40mg/kg、45mg/kg 或 50mg/kg的ASM。在有些實施方案中，所述維持劑量是至少lmg/kg、至少ang/kg、至少!Bmg/ kg、至少4mg/kg、至少5mg/kg、至少6mg/kg、至少7mg/kg、至少8mg/kg的ASM，最大劑量是 10mg/kg的ASM。在某些實施方案中，所述維持劑量是至少10mg/kg、至少15mg/kg、至少 20mg/kg、至少 25mg/kg、至少 30mg/kg、或至少 35mg/kg 的 ASM，最大劑量是 50mg/kg。本文使用的術語「無毒劑量」等表示，施用給ASMD患者不會產生下述情況中的 1種、2種、3種或所有情形的劑量(i)由臨床症狀確定的中等的或嚴重的有關不利事件， 其幹擾正常的日常功能，並需要額外的監測、幹預、或治療，或者，臨床上關注的異常的實驗室值或程序結果，其需要進一步監測、治療、或研究。參見，例如，臨床數據交換標準聯合研究數據列表模型標準術語v. 3. 1. 1 ； (ii)在施用所述劑量的ASM以後，總膽紅素值大於 1. 5mg/dL、l. 75mg/dL、2. 0mg/dL、2. lmg/dL、2. 2mg/dL、2. 3mg/dL、2. 4mg/dL、2. 5mg/ dL、2. 6mg/dL、2. 7mg/dL、2. 75mg/dL、2. 8mg/dL、2. 9mg/dL、3. 0mg/dL、3. lmg/dL、3. 2mg/dL、 3. 3mg/dL、3. 4mg/dL、3. 5mg/dL、3. 6mg/dL、3. 7mg/dL、3. 8mg/dL、3. 9mg/dL 或 4mg/dL 或在
2.lmg/dL 至 2. 5mg/dL、2. lmg/dL 至 3. Omg/dL、或 2. lmg/dL 至 4mg/dL 範圍內，且持續超過 18小時、24小時、36小時、48小時或72小時、5天、1周、2周或3周；(iii)在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、10小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或 72 小時，血漿神經醯胺濃度大於 8. 2μ g/dL、8. 3μ g/dL、8. 4μ g/dL、8. 5μ g/dL、8. 75 μ g/ dL,9y g/dL,9. 5 μ g/dLUOy g/dLUl μ g/dLU2y g/dLU3y g/dLU4y g/dLU5y g/ dL、16y g/dL、17y g/dL、18y g/dL、19y g/dL、20y g/dL、25y g/dL、30y g/dL、35y g/dL、 40 μ g/dL,45 μ g/dL,50 μ g/dL,55 μ g/dL,60 μ g/dL,65 μ g/dL,70 μ g/dL,75 μ g/dL、或 80 μ g/dL 或在 8. 2 μ g/dL 至 10 μ g/dL,8. 5 μ g/dL 至 10 μ g/dL,9 μ g/dL 至 12 μ g/dL、 10 μ g/dL 至 12 μ g/dL、10 μ g/dL 至 15 μ g/dL、10 μ g/dL 至 20 μ g/dL、15 μ g/dL 至 20 μ g/ dL、或20 μ g/dL至30 μ g/dL範圍內；或(iv)急性期應答/反應。ASM的「無毒劑量」可以隨下述因素而異例如，使用的酶的穩定性、使用的酶的活性、和/或酶的給藥途徑。例如， 活性增加的修飾過的ASM酶的劑量可以低於未修飾的ASM的劑量。基於所述酶的穩定性、 所述酶的活性、和/或所述酶的給藥途徑，本領域技術人員能夠調整施用的酶的劑量。急性期反應是施用ASM以後的早期反應(通常，例如，在12至72小時內)，其指示炎症應答。通過急性期反應物(例如，CRP/hs-CRP、鐵蛋白、纖維蛋白原、鐵或轉鐵蛋白) 的濃度變化、嗜中性粒細胞百分比的變化、凝血酶原時間的變化、或部分促凝血酶原激酶時間的變化，可以評估急性期應答。在一個具體的實施方案中，與施用ASM之前患者的CRP/hs-CRP濃度相比，施用一定劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，CRP/hs-CRP濃度的增加，可以用作急性期應答的測量。在另一個具體實施方案中，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，大於正常血漿CRP/hs-CRP濃度的血漿CRP/hs-CRP濃度，可以用作急性期應答的測量。在某些實施方案中，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、 12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，大於大約8. lmg/L、8. 2mg/ L、8. 3mg/L、8. 4mg/L、8. 5mg/L、9mg/L、9. 5mg/L、10mg/L、llmg/L、或 12mg/L 或在 8. 5mg/L 至 10mg/L、或 8. 5mg/dL 至 l^ig/L、或 lOmg/L 至 12mg/L 範圍內的血漿 CRP/hs-CRP 濃度，可以用作急性期應答的測量。在一個具體的實施方案中，與施用ASM之前患者的鐵蛋白濃度相比，在施用一定劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、M小時、36小時、48小時或72小時鐵蛋白濃度的增加，可以用作急性期應答的測量。在另一個具體實施方案中，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時大於正常血漿鐵蛋白濃度的血漿鐵蛋白濃度，可以用作急性期應答的測量。在某些實施方案中，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、M小時、36小時、48小時或 72 小時，大於大約 300ng/mL、325ng/mL、;350ng/mL、375ng/mL、400ng/mL、425ng/mL、450ng/ mL、475ng/mL、500ng/mL、525ng/mL、550ng/mL、575ng/mL、600ng/mL、625ng/mL、650ng/mL、 675ng/mL、700ng/mL、725ng/mL、750ng/mL、775ng/mL、800ng/mL、850ng/mL、900ng/mL、 950ng/mL、1000ng/mL、1050ng/mL、1100ng/mL、1150ng/mL、或 1200ng/mL 或在 600ng/mL 至 800ng/mL、650ng/mL 至 850ng/mL、600ng/mL 至 1000ng/mL、600ng/mL 至 1200ng/mL、800ng/ mL 至 1000ng/mL、900ng/mL 至 1000ng/mL、或 lOOOng/mL 至 1200ng/mL 範圍內的血漿鐵蛋白濃度，可以用作急性期應答的測量。在一個具體的實施方案中，與施用ASM之前患者的IL-8濃度相比，在施用一定劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時血漿或血清IL-8濃度的增加，可以用作急性期應答的測量。在另一個具體實施方案中，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72 小時，大於正常血漿IL-8濃度的血漿或血清IL-8濃度，可以用作急性期應答的測量。在某些實施方案中，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36 小時、48 小時或 72 小時，大於大約 Mpg/mL、50pg/mL、75pg/mL、100pg/mL、200pg/mL、 300pg/mL、400pg/mL、500pg/mL、600pg/mL、700pg/mL、800pg/mL、或 900pg/mL 的血漿 IL-8 濃度，可以用作急性期應答的測量。在一個具體的實施方案中，與施用ASM之前患者的IL-6濃度相比，在施用一定劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時血漿或血清IL-6濃度的增加，可以用作急性期應答的測量。在另一個具體實施方案中，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、18小時、M小時、36小時、48小時或72小時，大於正常血漿或血清IL-6濃度的血漿或血清IL-6濃度，可以用作急性期應答的測量。 在某些實施方案中，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、 24 小時、36 小時、48 小時或 72 小時，大於大約 4. 4pg/mL、6pg/mL、8pg/mL、10pg/mL、15pg/ mL、20pg/mL、25pg/mL、或30pg/mL的血漿IL_6濃度，可以用作急性期應答的測量。
在一個具體的實施方案中，與施用ASM之前患者的降鈣素濃度相比，在施用一定劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時血漿或血清降鈣素濃度的增加，可以用作急性期應答的測量。在另一個具體實施方案中， 在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72 小時，大於正常血漿降鈣素濃度的血漿或血清降鈣素濃度，可以用作急性期應答的測量。在某些實施方案中，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24 小時、36 小時、48 小時或 72 小時,大於大約 9. 4pg/mL、20pg/mL、30pg/mL、40pg/mL、50pg/mL、 75pg/mL、100pg/mL、150pg/mL、200pg/mL、或250pg/mL的血眾降I丐素濃度，可以用作急性期應答的測量。在一個具體的實施方案中，與施用ASM之前患者的纖維蛋白原濃度相比，在施用一定劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或 72小時纖維蛋白原濃度的增加，可以用作急性期應答的測量。在另一個具體實施方案中， 在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48 小時或72小時，大於正常血漿纖維蛋白原濃度的血漿纖維蛋白原濃度，可以用作急性期應答的測量。在某些實施方案中，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，大於大約350mg/dL、375mg/dL、400mg/dL、 425mg/dL、或 450mg/dL 或在 350mg/dL 至 400mg/dL、350mg/dL 至 450mg/dL 或 400mg/dL 至 450mg/dL範圍內的血漿纖維蛋白原濃度，可以用作急性期應答的測量。在一個實施方案中，與施用ASM之前患者的嗜中性粒細胞佔總白血細胞的百分比相比，在施用一定劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時嗜中性粒細胞佔總白血細胞的百分比的增加，可以用作急性期應答的測量。在另一個實施方案中，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、 18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，大於嗜中性粒細胞佔總白血細胞濃度的正常百分比的嗜中性粒細胞佔總白血細胞的百分比的增加，可以用作急性期應答的測量。在某些實施方案中，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，是70%、75%、80%、85%、90%、95%或更大的嗜中性粒細胞佔總白血細胞的百分比的增加，可以用作急性期應答的測量。在初始劑量或施用給個體的劑量的背景下，本文使用的術語「無毒低劑量」等表示這樣的劑量它是施用給個體來治療ASMD的ASM的第一無毒劑量。在某些實施方案中，無毒低劑量是這樣的劑量0. 001mg/kg 至 O. 01mg/kg、0. 001mg/kg 至 O. 01mg/kg、0. 001mg/kg 至 0. 05mg/kg、0. 001mg/kg 至 0. lmg/kg、0. OOlmg/kg 至 0. 5mg/kg、0. 05mg/kg 至 0. 275mg/kg、 0. 075mg/kg 至 0. 275mg/kg、0. 05mg/kg 至 0. 2mg/kg、0. 075mg/kg 至 0. 2mg/kg、0. lmg/kg 至 0.275mg/kg、0. lmg/kg 至 0. 25mg/kg、0. lmg/kg 至 lmg/kg、0. 5mg/kg 至 lmg/kg、0. 75mg/kg 至 lmg/kg、0. lmg/kg 至 2mg/kg、0. 5mg/kg 至 2mg/kg、0. 75mg/kg至 2mg/kg、lmg/kg 至 2mg/kg 或 I. 25mg/kg 至 2mg/kg、I. 5mg/kg 至 2mg/kg 或 I. 75mg/kg 至 2mg/kg 的 ASM。在一些具體的實施方案中，無毒低劑量是這樣的劑量0. 001mg/kg、0. 005mg/kg、0. 0075mg/kg、0. Olmg/ kg、0. 0125mg/kg、0. 025mg/kg、0. 05mg/kg、0. 075mg/kg、0. lmg/kg、0. 125mg/kg、0. 15mg/kg、
0.175mg/kg、0. 2mg/kg、0. 225mg/kg、0. 25mg/kg、0. 275mg/kg、0. 3mg/kg、0. 4mg/kg、0. 5mg/ kg、0. 6mg/kg、0. 7mg/kg、0. 75mg/kg、0. 8mg/kg、0. 9mg/kg 或 lmg/kg 的 ASM。
術語「個體」和「患者」在本文中互換地用於表示人。在一個具體的實施方案中， 所述人具有或已經被診斷為患有ASMD。在給個體施用一定劑量的ASM的背景下，本文使用的術語「治療上有效的」表示， 產生有益效果或治療效果的ASM的量。在具體實施方案中，在給個體施用一定劑量的ASM的背景下，術語「治療上有效的」表示，足以實現至少1種、2種、3種、4種或更多種下述作用的 ASM的量(i)脾體積減小，這通過本領域已知的技術(例如，MRI)來評估；(ii)肝鞘磷脂水平降低，這通過本領域已知的技術(例如，肝樣品的生化分析和/或組織形態測定分析)來評估；(iii)運動能力增加，這通過本領域已知的技術(例如，周期測力法的最大工作負荷， 包括預測的最大工作負荷百分比、氧耗量峰值和二氧化碳產量)來評估；(iv)肺功能增加， 這通過本領域已知的技術來評估，例如，在美國胸科學會，1991，Am. Rev. Respir. Dis. 144 1202-1218中所述的技術，諸如擴散能力(DLro),通過例如肺量測定技術測得的預測的用力肺活量百分比(FVC)，通過例如肺量測定技術測得的在1秒內的用力呼氣體積(FEV1)，以及總肺容量；(ν)支氣管肺泡灌洗(BAL)鞘磷脂減少；(vi)肝體積減小，這通過本領域已知的技術(例如，MRI)來評估；(vii)肺表象改善，這通過本領域已知的技術(例如，高解析度CT 掃描或胸部χ射線檢查)來評估；(viii)皮膚、血漿和幹血斑(DBS)中鞘磷脂濃度降低，這通過例如串聯質譜法來測量；(ix) ASMD和/或與其有關的症狀的嚴重性的減輕或改善；(χ) 與ASMD有關的症狀的持續時間減小；(xi)與ASMD有關的症狀的復發的預防；(xii)個體住院治療減少；(vi)住院治療時間縮短；(xiii)個體的生存期增加；(xiv)死亡率降低；(xv) 住院治療率降低；(xvi)與ASMD有關的症狀的數目減少；(xvii)ASMD患者的無症狀存活期增加；(xviii)神經功能(例如，心理運動功能、社會反應性等)改善；(xix)肺清除改善，這通過例如BAL細胞計數和曲線來測量；(XX)殼三糖苷酶的血清水平降低；(XXi)CCLlS的血清水平降低；(xxii)脂質特性(例如，HDL、LDL、膽固醇、甘油三酯、和總膽固醇HDL比)的改善；和(xxiii)提高的生活質量，這通過例如問卷法來評估。本文使用的術語「療法」和「治療」可以表示，可以用於治療、控制、或改善ASMD或與其有關的病症或症狀的任意方案、方法、組合物、製劑、和/或藥劑。在某些實施方案中， 術語「療法」和「治療」表示，可用於治療、控制、預防、或改善ASMD或與其有關的病症或症狀的生物療法、支持療法、和/或其它療法。在實施方案中，術語「療法」表示實現下述1項、2 項或更多項的療法(i)增加ASM向病理部位的遞送，(ii)增加ASM的活性，和(iii)增加 ASM的穩定性。在某些實施方案中，術語「療法」表示除了 ASM以外的療法。在具體實施方案中，「其它療法」和「其它治療」表示除了 ASM以外的療法。本文使用的術語「毒效應」等表示，在施用一定劑量的ASM以後，下述的1項、2 項、3項或全部(i)由臨床症狀確定的中等的或嚴重的有關不利事件，其幹擾正常的日常功能，並需要額外的監測、幹預、或治療，或者，臨床上關注的異常的實驗室值或程序結果， 其需要進一步監測、治療、或研究。參見，例如，臨床數據交換標準聯合研究數據列表模型標準術語v. 3. 1. 1 ； (ii)在施用所述劑量的ASM以後，總膽紅素值大於1. 5mg/dL、l. 75mg/ dL、2. 0mg/dL、2. lmg/dL、2. 2mg/dL、2. 3mg/dL、2. 4mg/dL、2. 5mg/dL、2. 6mg/dL、2. 7mg/dL、
2.75mg/dL、2. 8mg/dL、2. 9mg/dL、3. 0mg/dL、3. lmg/dL>3. 2mg/dL、3. 3mg/dL、3. 4mg/dL、
3.5mg/dL、3. 6mg/dL、3. 7mg/dL、3. 8mg/dL、3. 9mg/dL 或 4mg/dL 或在 2. lmg/dL 至 2. 5mg/dL、 2. lmg/dL至3. Omg/dL、或2. lmg/dL至4mg/dL範圍內，且持續超過16小時、18小時、24小
12時、36小時、48小時或72小時、5天、I周、2周或3周；(iii)在施用所述劑量的ASM以後持續6小時、8小時、10小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時， 血漿神經醯胺濃度大於 8. 2 μ g/dL、8. 3 μ g/dL、8. 4 μ g/dL、8. 5 μ g/dL、8. 75 μ g/dL、9 μ g/ dL、9.5 μ g/dL、10 μ g/dL、11 μ g/dL、12 μ g/dL、13 μ g/dL、14 μ g/dL、15 μ g/dL、16 μ g/ dL、17 μ g/dL、18 μ g/dL、19 μ g/dL、20 μ g/dL、25 μ g/dL、30 μ g/dL、35 μ g/dL、40 μ g/dL、 45 μ g/dL、50 μ g/dL、55 μ g/dL、60 μ g/dL、65 μ g/dL、70 μ g/dL、75 μ g/dL、或 80 μ g/dL 或在 8. 2 μ g/dL 至 10 μ g/dL、8. 5 μ g/dL 至 10 μ g/dL、9μ g/dL 至 12 μ g/dL、10 μ g/dL 至 12 μ g/dL、10 μ g/dL 至 15 μ g/dL、10 μ g/dL 至 20 μ g/dL、15 μ g/dL 至 20 μ g/dL、或 20 μ g/ dL至30 μ g/dL範圍內；或(iv)急性期應答。通過急性期反應物(例如，C-反應蛋白、鐵蛋白、白蛋白、IL-8、11-6、降鈣素、纖維蛋白原、鐵或轉鐵蛋白)的濃度變化、嗜中性粒細胞百分比的變化、凝血酶原時間的變化、 或部分促凝血酶原激酶時間的變化，可以評估急性期應答。在一個具體的實施方案中，與施用ASM之前患者的CRP/hs-CRP濃度相比，在施用一定劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時CRP/hs-CRP濃度的增加，可以用作急性期應答的測量。在另一個具體實施方案中，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，大於正常血漿CRP/hs-CRP濃度的血漿CRP/hs-CRP濃度，可以用作急性期應答的測量。在某些實施方案中，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時， 大於大約 8. lmg/dL、8. 2mg/dL、8. 3mg/dL、8. 4mg/dL、8. 5mg/dL、8. 6mg/dL、8. 7mg/dL、8. 8mg/ dL、8. 8mg/dL、8. 9mg/dL、9mg/dL、9. 5mg/dL、10mg/dL、llmg/dL、或 12mg/dL 或在 8. 5mg/dL 至 10mg/dL、或 8. 5mg/dL 至 12mg/dL、或 lOmg/dL 至 12mg/dL 範圍內的血眾 CRP/hs-CRP 濃度， 可以用作急性期應答的測量。在一個具體的實施方案中，與施用ASM之前患者的鐵蛋白濃度相比，在施用一定劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72 小時鐵蛋白濃度的增加，可以用作急性期應答的測量。在另一個具體實施方案中，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，大於正常血漿鐵蛋白濃度的血漿鐵蛋白濃度，可以用作急性期應答的測量。在某些實施方案中，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、 48 小時或 72 小時，大於大約 600ng/mL、625ng/mL、650ng/mL、675ng/mL、700ng/mL、725ng/ mL、750ng/mL、775ng/mL、800ng/mL、850ng/mL、900ng/mL、950ng/mL、1000ng/mL、1050ng/ mL、1100ng/mL、1150ng/mL、或 1200ng/mL 或在 600ng/mL 至 800ng/mL、650ng/mL 至 850ng/ mL、600ng/mL 至 1000ng/mL、600ng/mL 至 1200ng/mL、800ng/mL 至 1000ng/mL、900ng/mL 至 1000ng/mL、或lOOOng/mL至1200ng/mL範圍內的血眾鐵蛋白濃度,可以用作急性期應答的測量。在一個具體的實施方案中，與施用ASM之前患者的纖維蛋白原濃度相比，在施用一定劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或 72小時纖維蛋白原濃度的增加，可以用作急性期應答的測量。在另一個具體實施方案中， 在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48 小時或72小時，大於正常血漿纖維蛋白原濃度的血漿纖維蛋白原濃度，可以用作急性期應答的測量。在某些實施方案中，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，大於大約350mg/dL、375mg/dL、400mg/dL、 425mg/dL、或 450mg/dL 或在;350mg/dL 至 400mg/dL、;350mg/dL 至 450mg/dL 或 400mg/dL 至 450mg/dL範圍內的血漿纖維蛋白原濃度，可以用作急性期應答的測量。在一個具體的實施方案中，與施用ASM之前患者的白蛋白濃度相比，在施用一定劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時白蛋白濃度的降低，可以用作急性期應答的測量。在某些實施方案中，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，從正常範圍3. 5至5. Og/dL降低0. 2,0. 4,0. 6、1、1. 5,2. Og/dL的白蛋白濃度量值，可以用作急性期應答的測量。在一個具體的實施方案中，與施用ASM之前患者的鐵蛋白濃度相比，在施用一定劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時鐵蛋白濃度的降低，可以用作急性期應答的測量。在某些實施方案中，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，從正常範圍60至170mcg/dL降低20、40、60、80、100、120、140、160mcg/dL的鐵蛋白濃度量值，可以用作急性期應答的測量。在一個具體的實施方案中，與施用ASM之前患者的轉鐵蛋白濃度相比，在施用一定劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時轉鐵蛋白濃度的降低，可以用作急性期應答的測量。在某些實施方案中，在施用所述劑量的 ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，從正常範圍 202 至 336mg/dL 降低 20、40、60、80、100、120、140、160、180mg/dL 的轉鐵蛋白濃度量值，可以用作急性期應答的測量。在一個實施方案中，與施用ASM之前患者的嗜中性粒細胞佔總白血細胞的百分比相比，在施用一定劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，嗜中性粒細胞佔總白血細胞的百分比的增加，可以用作急性期應答的測量。在另一個實施方案中，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、M小時、36小時、48小時或72小時，大於嗜中性粒細胞佔總白血細胞濃度的正常百分比的嗜中性粒細胞佔總白血細胞的百分比的增加，可以用作急性期應答的測量。在某些實施方案中，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24 小時、36小時、48小時或72小時，是70%、75%、80%、85%、90%、95%或更大的嗜中性粒細胞佔總白血細胞的百分比的增加，可以用作急性期應答的測量。
4.


圖1是方案設計的圖解表示。圖2顯示了在下述方案中登記的患者的人口統計和基線特徵。圖3A、3B、和3C描繪了在施用不同劑量的rhASM的不同患者中，隨時間變化的神經醯胺的血漿水平(圖3A)和鞘磷脂的血漿水平(圖:3B)以及幹血斑中的鞘磷脂水平(圖 3C)。圖的右軸描繪了患者數目和rhASM的劑量。圖4描繪了在所述方案過程中在施用不同劑量的rhASM的不同患者中隨時間測定的總膽紅素水平。圖的右軸描繪了患者數目和rhASM的劑量。圖5A-5G描繪了在所述方案過程中在施用不同劑量的rhASM的不同患者中隨時間測定的CRP/hs-CRP的水平(圖5A)、嗜中性粒細胞百分比(圖5B)、纖維蛋白原(圖5C)、鐵蛋白(圖5D)、IL-8(圖5E)、IL-6(圖5F)、和降鈣素(圖5G)。圖的右軸描繪了患者數目和 rhASM的劑量。圖6描繪了各自施用不同劑量rhASM的4位患者突然出現的治療不利事件，所述事件被認為是治療有關的(可能、很可能、或確定)。圖7顯示了患有ASMD的患者的2階段rhASM重複劑量方案的第一治療期(由劑量遞增期和劑量維持期組成)。5.發明詳述本發明涉及劑量遞增酶替代療法，以用於治療患有ASMD的人個體，尤其是患有非神經學表現的NPD以及在某些實施方案中B型NPD的個體。更具體地，初始將無毒低劑量酶(ASM)施用給這樣的患者，然後在以後的給藥中增加劑量。然後可以將患者耐受的ASM 最大劑量用作維持劑量。或者，可以將小於耐受的最大劑量的治療有效劑量用作維持劑量。NPD的治療需要足夠大的劑量，以實現ASM酶在病理器官(例如，脾、肺、心臟、腎和腦)中的充分分布。在給ASMKO小鼠靜脈內施用重組人ASM以後，大多數ASM活性分布至肝，在其它病理器官(諸如脾、心臟、腎和肺)中檢測到小量ASM酶活性(參見，例如，He等 A, 1999,Biochimia et Biophsyica Acta 1432 :251-264 的圖 9B)。因而，需要非常大的劑量來確保施用的酶向患者與ASMD或尼曼-皮克二氏病相關的肺、心臟和腎的分布和遞送。在ASM敲除的小鼠模型(ASKM0小鼠)中的研究表明，大多數施用的rhASM分布至肝和脾(在這裡其減少底物)，但是以遠遠更低的程度分布在肺、心臟和腦中(Miranda 等人FASEB 2000,14:1988)。隨後在ASMKO小鼠模型中使用更大劑量的rhASM的研究中，在< 3. Omg/kg的劑量，底物被減少，且沒有觀察到毒性；實際上，在使用》IOmg/ kg的劑量之前，沒有觀察到毒性的臨床症狀。參見，「Dose Responsive Toxicological Findings Following Intravenous Administration of Recombinant Human Acid Sphingomyelinase(rhASM)to Acid Sphingomyelinase Knock-out (ASMKO) Mice. "C. Nickerson, J. Murray, A. Vitsky, M. Hawes, S.Ryan, P. Ewing, B.Thurberg, L.Andrews. Dept Pharm/Tox, Pathology, Genzyme Corp. , Framingham, MA. , American Society of Human Genetics 2005 ； 禾口 "Elevations of Pro-Inflammatory Cytokines and Decreases in Cardiovascular Hemodynamics Following Intravenous Administration of Recombinant Human Acid Sphingomyelinase(rhASM)to Acid Sphingomyelinase Knock-out (ASMKO) Mice. "J. Murray, A. M. D' Angona, C. Nickerson, A. Vitsky, M. Hawes, S. Ryan, P. Ewing, B. Thurberg, L. Andrews. Dept. Pharmacology/Toxicology&Pathology, Genzyme Corp. , Framingham, MA. , Society of Toxicology 2006。基於這些ASKMO數據，我們用在下文的第6部分中所述的保守的最大劑量1. Omg/ kg治療無神經病的ASMD人個體。非常意外的是，使用低至0. 3mg/kg的劑量，觀察到在人個體中的毒性，包括與臨床症狀有關不利事件的發生。該結果是特別令人驚奇的，因為在敲除的小鼠模型中不存在ASM酶，與具有至少一些酶活性和相對溫和的疾病的人個體相比，小鼠應當反映更嚴重的病症。
不希望受任何理論的約束，將大劑量的ASM施用給NH)患者，可以導致大量鞘磷脂水解成高濃度的神經醯胺，後者可以產生在那些NPD患者中觀察到的有毒副作用。ASM 酶將鞘磷脂水解成神經醯胺和磷醯膽鹼，所述鞘磷脂是細胞質膜的主要組分(參見，例如， Milaus等人，2010FEBS Letters 584:1887-1894)。已知神經醯胺在細胞死亡中起作用，且已知是促細胞凋亡劑(參見，例如，Smith和Schuchman，2008，FASEB 22 :3419-3431)。此外，不同於與特徵性的溶酶體貯存疾病有關的其它溶酶體酶，ASM在中性pH(見於血漿中)和酸性pH(見於溶酶體中)水解鞘磷脂(參見，例如，Schissel等人，1998. J. Biol. Chem. 273 :2738-2746)。ASM酶在血漿中起作用的能力，可以導致在脂蛋白和細胞質膜中存在的鞘磷脂的水解，這可以增加分解產物神經醯胺的量，後者可能造成在施用大劑量的ASM酶的NPD患者中觀察到的有毒副作用。為了解決下述問題實現ASM酶向病理器官的充分分布，同時避免與施用大劑量的酶有關的毒性或使所述毒性最小化，本發明人開發了本文所述的方案，其中初始將無毒低劑量的ASM酶施用給NPD患者，並隨時間增加劑量。隨著ASM酶劑量的增加，可以監測患者的總的/直接的/間接的膽紅素濃度、急性期反應物的產生、炎症介質的產生、和有關不利事件。低劑量的ASM的施用和酶的增加促進累積的鞘磷脂的去堆積。一旦患者被去堆積， 可以安全地給患者施用更大劑量的ASM酶，以確保ASM酶向靶器官(例如，肝、脾、肺、心臟、 腎、腦、骨髓、骨骼、關節等)的充分分布。在某些實施方案中，患者耐受的最大劑量可以用作維持劑量。或者，小於耐受的最大劑量的治療有效劑量可以用作維持劑量。在一些實施方案中，基於患者的病症，可以增加或減小維持劑量。在某些實施方案中，通過測量血漿鞘磷脂水平、血漿神經醯胺水平、「急性期反應物」和炎症介質(它們是炎症應答的度量)的產生、膽紅素濃度(總的、直接的和間接的) 和/或其它生化標誌物，可以監測患者的治療，以確保在將劑量升高至下一個水平之前的穩定應答。這些標誌物包括但不限於CRP/hs-CRP、細胞因子(例如，IL-8、11-6)、降鈣素、 和鐵蛋白。在具體實施方案中，可以監測患者的一個或多個有關不利事件，這可以包括但不限於全身症狀(例如，發熱、噁心、嘔吐、疼痛、肌痛和黃疸)。5. I.劑量遞增方案描述了用於治療ASMD的方法，所述方法包括給個體施用一次或多次初始的無毒低劑量的ASM，以減少在個體中已經累積的鞘磷脂的量。在特定時間段以後，可以增加ASM 的劑量，直到達到個體耐受的治療上有效的最大劑量。一旦鑑別出該劑量，它可以用作維持劑量來治療個體。所述維持劑量可以每周、每2周、或每月施用給個體，以治療ASMD。在一些實施方案中，每3個月、每6個月或每年監測接受維持劑量的個體的下述I項、2項、3項或全部(i)有關不利事件；( )總的/直接的/間接的膽紅素濃度；(iii)血漿神經醯胺濃度；或(iv)急性期應答。如果個體經歷中等強度的有關不利事件(例如，有關的中等的不利事件)，總膽紅素值大於沒有ASMD的人(例如，健康人)的總膽紅素濃度、血漿神經醯胺濃度大於沒有ASMD的人(例如，健康人)的血漿神經醯胺濃度、或急性期應答，則可以由醫師或其它醫學專業人員評價施用給個體的劑量，以確定所述劑量是否應當調整。在一個實施方案中，用於治療具有酸性鞘磷脂酶缺乏的人個體的方法包括(a) 用於去堆積人個體中累積的鞘磷脂底物的方案，該方案包括(i)將初始的無毒低劑量的 ASM施用給所述人個體；(ii)將連續更大劑量的ASM施用給所述人個體，並在每個連續劑量以後監測所述個體的一種或多種不利副作用，如由升高的膽紅素或有關不利事件所指示的；和(b)維持方案，該方案包括施用等於或小於個體耐受的最大劑量的劑量，作為所述個體的維持劑量。在某些實施方案中，所述初始劑量範圍是0. lmg/kg至0. 5mg/kg或 0. lmg/kg至lmg/kg的ASM。在一些實施方案中，在前次劑量之後1、2、3或4周施用連續更大劑量。在某些實施方案中，連續更大劑量比前次劑量高大約0. lmg/kg、0. 2mg/kg,0. 3mg/kg, 0. 4mg/kg、0. 5mg/kg、0. 6mg/kg、0. 7mg/kg、0. 8mg/kg、0. 9mg/kg、lmg/kg、1. 2mg/kg、l. 5mg/ kg、l. 75mg/kg、ang/kg、3mg/kg、^ig/kg或5mg/kg。在一些實施方案中，連續更大劑量比前次劑量高 0. 1 至 0. 5mg/kg、0. lmg/kg 至 lmg/kg、0. 5mg/kg 至 lmg/kg、0. 5mg/kg 至 2mg/kg、 lmg/kg至ang/kg、2mg/kg至％ig/kg或ang/kg至5mg/kg。在某些實施方案中，個體耐受的最大劑量是lmg/kg至2. 5mg/kg。在一些實施方案中，將最大劑量施用給人個體，作為維持劑量。在某些實施方案中，用於治療患有ASMD的人個體的方法包括(a)去堆積ASM給藥，以減少在人個體中已經累積的鞘磷脂的量，其中所述去堆積ASM給藥包括(i)將無毒低劑量的ASM施用給人個體；和(ii)如果所述人個體沒有表現由升高的總膽紅素濃度、升高的血漿神經醯胺濃度、急性期反應物的產生、炎症介質的產生、或不利事件指示的一種或多種不利副作用(例如，如臨床數據交換標準聯合研究數據列表模型標準術語v. 3. 1. 1所定義)，將連續更大劑量的ASM施用給所述人；和(b)維持ASM施用，其中所述維持ASM施用包括將維持劑量的ASM重複施用給所述人個體。在一些實施方案中，在施用一定劑量的 ASM以後，監測所述患者的一種或多種不利副作用或總膽紅素一段時間(例如，6小時、12小時、16小時、24小時、48小時、72小時、每周、或直到下一劑量)。在某些實施方案中，在患者的療程期間，可以調整施用的維持劑量。在一些實施方案中，施用給個體的維持劑量是個體耐受的最大劑量。在一個具體實施方案中，用於治療ASMD的方法包括給有此需要的個體施用初始的無毒低劑量的 ASM(例如，劑量為 0. lmg/kg、0. 2mg/kg、0. 3mg/kg、0. 4mg/kg、0. 5mg/kg、 0. 6mg/kg、0. 7mg/kg、0. 8mg/kg、0. 9mg/kg、lmg/kg、0. lmg/kg 至 0. 5mg/kg、或 0. 5 至 lmg/ kg的ASM)，且在特定時間段(例如，3天、1周、2周、或3周)以後，連續增加施用給個體的ASM的劑量，直到一個或多個病理器官中的ASM活性水平是沒有ASMD的個體(例如，健康個體或5、10、15、20、30、40、50、75、100、150、175或更多個個體的群體)的對應器官中的 ASM 活性的至少 5%,6%,7%,8%,9%,10%,12%,15%,20%,25%,30%,35%,40%, 50%、75%、80%、85%、90%、95%或更多，這通過本領域已知的技術來測量，例如，在He等人，2003，Analytical Biochemistry314 :116-120中所述的技術。在另一個實施方案中， 用於治療ASMD的方法包括給有此需要的個體施用劑量為0. lmg/kg的ASM，且在特定時間段(例如，3天、1周、2周、或3周)以後，連續增加施用給個體的ASM的劑量，直到一個或多個下述病理器官中的ASM活性水平是沒有ASMD的個體(例如，健康個體或5、10、15、20、 30、40、50、75、100、150、175或更多個個體的群體)的對應器官中的正常ASM活性的5%至 10%、5%至15%、5%至20%、10%至15%、10%至20%、15%至20%、15%至25%、25% 至50%、50%至75%、或75%至95%，這通過本領域已知的技術來測量，例如，在He等人， 2003,Analytical Biochemistry314 :116-120中所述的技術。在某些實施方案中，如果總膽紅素濃度小於或等於2. Omg/dL或2. lmg/dL,且所述個體沒有經歷中等的或嚴重的有關不利事件，則連續增加所述劑量。在具體實施方案中，使用在Horinouchi等人，1995, Nature Genetics 10 :288-293 (它通過引用整體納入本文)中所述的試驗，基於健康小鼠的類似器官中的ASM活性，估測正常健康個體的腦、心臟、腎、和肝中的ASM活性是大約20至40單位/mg蛋白質。在某些實施方案中，使用在Horinouchi等人，1995, Nature Genetics 10: 288-293中所述的試驗，基於健康小鼠的類似器官中的ASM活性，估測正常健康個體的肺中的ASM活性是大約15至25單位/mg蛋白質,脾中的ASM活性是大約10至15單位/mg蛋白質。在某些實施方案中，一旦一個或多個病理器官中的ASM活性達到正常值或正常值的特定百分比，可以將等於或小於個體耐受的最大劑量的劑量施用給個體，作為維持劑量。根據個體的健康，可以隨時間調整維持劑量。根據個體的情況，可以增加或減小維持劑量。在一個實施方案中，用於治療ASMD的方法包括(a)給有此需要的人施用初始的無毒低劑量的ASM ;和(b)在施用一定劑量的ASM以後，如果所述人沒有表現1、2、3或 4種下述的副作用，則施用連續更大劑量的ASM (i)嚴重的有關不利事件，例如，由臨床數據交換標準聯合研究數據列表模型標準術語V. 3. I. I定義的；(ii)在施用所述劑量的 ASM 以後，總膽紅素值大於 I. 5mg/dL、l. 75mg/dL、2. 0mg/dL、2. lmg/dL、2. 2mg/dL、2. 3mg/ dL、2. 4mg/dL、2. 5mg/dL、2. 6mg/dL、2. 7mg/dL、2. 75mg/dL、2. 8mg/dL、2. 9mg/dL、3. Omg/ dL、3. lmg/dL、3. 2mg/dL、3. 3mg/dL、3. 4mg/dL、3. 5mg/dL、3. 6mg/dL、3. 7mg/dL、3. 8mg/dL、 3. 9mg/dL 或 4mg/dL 或在 2. lmg/dL 至 2. 5mg/dL、2. lmg/dL 至 3. Omg/dL、或 2. lmg/dL 至 4mg/dL範圍內，且持續大於18小時、24小時、36小時、48小時或72小時、5天、I周、2周或3 周在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、10小時、12小時、16小時、18小時、24 小時、36小時、48小時或72小時，血漿神經醯胺濃度大於8. 2 μ g/dL、8. 3 μ g/dL、8. 4 μ g/ dL、8.5 μ g/dL、8.75 μ g/dL、9 μ g/dL、9. 5 μ g/dL、10 μ g/dL、11 μ g/dL、12 μ g/dL、13 μ g/ dL、14 μ g/dL、15 μ g/dL、16 μ g/dL、17 μ g/dL、18 μ g/dL、19 μ g/dL、20 μ g/dL、25 μ g/dL、 30 μ g/dL、35 μ g/dL、40 μ g/dL、45 μ g/dL、50 μ g/dL、55 μ g/dL、60 μ g/dL、65 μ g/dL、 70 μ g/dL、75 μ g/dL、或 80 μ g/dL 或在 8· 2 μ g/dL 至 10 μ g/dL,8. 5 μ g/dL 至 10 μ g/dL、 9 μ g/dL 至 12 μ g/dL、10 μ g/dL 至 12 μ g/dL、10 μ g/dL 至 15 μ g/dL、10 μ g/dL 至 20 μ g/dL、 15 μ g/dL至20 μ g/dL或20 μ g/dL至30 μ g/dL範圍內；或(iv)急性期應答。根據該實施方案，可以給有此需要的人連續施用更大劑量的ASM，只要所述人沒有表現項目(i)至(iv) 中的任意一項或多項。在人表現項目(i)至(iv)中的任意一項或多項的情況下，則根據表現的嚴重性，可以重複產生項目(i)至(iv)的表現的相同劑量，或可以將劑量降低至前次劑量。在另一個實施方案中，用於治療ASMD的方法包括(a)給有此需要的人施用初始劑量為O. lmg/kg的ASM ;(b)在施用所述劑量的ASM以後，在所述人中監測下述一項或多項(i)總膽紅素濃度，( )有關不利事件的表現；(iii)急性期應答；或(iv)血漿神經醯胺濃度；(c)基於項目(i)至(iv)中的一項或多項，確定是否調整(例如，增加或減小)或維持ASM的劑量；和(d)在施用在前一步驟(c)中確定的劑量的ASM以後，重複步驟(b)和 (C)。在另一個實施方案中，用於治療ASMD的方法包括(a)給有此需要的人施用2次初始劑量為O. lmg/kg的ASM，間隔2至4周；(b)在施用每個劑量的ASM以後，在所述人中監測下述一項或多項(i)總膽紅素濃度，(ii)有關不利事件的表現；(iii)急性期應答；或(iv) 血漿神經醯胺濃度；(c)基於項目(i)至(iv)中的一項或多項，確定是否調整(例如，增加或減小)或維持ASM的劑量；和(d)在施用前一步驟(c)中確定的劑量的ASM以後，重複步驟(b)和(C)。根據這些實施方案，如果0. lmg/kg的初始劑量或在步驟(c)中確定的調整劑量導致下述情況，可以給人施用更大劑量的ASM 1次或多次，間隔2至4周(i)在施用另一劑量ASM的截止時間之前，總膽紅素濃度小於或等於2. Omg/dL ； (ii)沒有有關不利事件或僅輕度的有關不利事件；(iii)在施用最後一次劑量的ASM 6小時、8小時、12小時、16 小時、18小時、24小時、48小時、或72小時，血漿神經醯胺在正常範圍內；或(iv)沒有急性期應答或統計上不顯著的急性期應答。但是，如果0. lmg/kg的初始劑量或在步驟(c)中確定的調整的劑量導致下述情況，可以維持或降低劑量(i)在施用另一劑量ASM的截止時間之前，總膽紅素濃度為2. lmg/dL或更大；(ii)有關不利事件；(iii)在施用最後一次劑量的ASM 6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、48小時、或72小時，血漿神經醯胺超過正常範圍；或(iv)統計上顯著的急性期應答。在另一個實施方案中，用於治療ASMD的方法包括(A)給有此需要的人施用2次初始劑量0. lmg/kg,間隔2周；(B)在施用每個初始劑量的ASM以後，監測人的(i)總膽紅素濃度、( )有關不利事件的表現、(iii)⑴和( ) 二者；(C)基於項目⑴至(iii)中的一項或多項，確定是否調整(例如，增加或減小)或維持ASM的劑量；和(d)在施用前一步驟(c)中確定的劑量的ASM以後，重複步驟(b)和(c)，其中(a)如果總膽紅素濃度小於或等於2. Omg/dL或所述人呈現輕度的有關不利事件，則增加施用給人的劑量；(b)如果總膽紅素濃度是2. lmg/dL至3. lmg/dL或所述人呈現中等的有關不利事件，則所述人繼續接受當前劑量1至4次，間隔2至4周，如果在最後一次施用劑量以後總膽紅素濃度維持大於 2. Omg/dL,則維持該劑量；(c)如果總膽紅素濃度大於:3mg/dL或所述人呈現嚴重的有關不利事件，則降低施用給人的劑量，或不再施用ASM。在另一個實施方案中，用於治療ASMD的方法包括(A)給有此需要的人施用2次初始劑量0. 3mg/kg,間隔2周；(B)在施用每個劑量的ASM以後，監測人的(i)總膽紅素濃度、( )有關不利事件的表現、(iii)⑴和( ) 二者；(C)基於項目⑴至(iii)中的一項或多項，確定是否調整(例如，增加或減小)或維持ASM的劑量；和(D)在施用前一步驟 (C)中確定的劑量的ASM以後，重複步驟(B)和(C)，其中(a)如果總膽紅素濃度小於或等於 2. Omg/dL或所述人呈現輕度的有關不利事件，則增加施用給人的劑量；(b)如果總膽紅素濃度是2. lmg/dL至3. lmg/dL或所述人呈現中等的有關不利事件，則所述人繼續接受當前劑量1至4次，間隔2至4周，如果在最後一次施用劑量以後總膽紅素濃度維持大於2. Omg/ dL，則維持該劑量；(c)如果總膽紅素濃度大於:3mg/dL或所述人呈現嚴重的有關不利事件， 則降低施用給人的劑量，或不再施用ASM。在一個具體的實施方案中，用於治療ASMD的方法包括給有此需要的個體施用劑量為0. lmg/kg的ASM，並在2周以後，每2周施用劑量為0. 3mg/kg的ASM。在另一個具體實施方案中，用於治療ASMD的方法包括給有此需要的個體施用劑量為0. lmg/kg的ASM，在施用0. lmg/kg劑量的ASM以後2周，施用劑量為0. 3mg/kg的ASM，並在施用0. 3mg/kg劑量的ASM以後2周，施用劑量為0. 6mg/kg的ASM。在另一個具體實施方案中，用於治療ASMD 的方法包括給有此需要的個體施用劑量為0. lmg/kg的ASM，在施用0. lmg/kg劑量的ASM 以後2周，施用劑量為0. 3mg/kg的ASM，在施用0. 3mg/kg劑量的ASM以後2周，施用劑量為0. 6mg/kg的ASM,並在施用0. 6mg/kg劑量的ASM以後2周，施用劑量為lmg/kg的ASM。在某些實施方案中，可以重複每個劑量至少2次，優選2至4次，然後加大劑量至下一水平。 根據這些實施方案，如果總膽紅素值等於或小於2. Omg/dL和/或所述個體經歷輕度的有關不利事件，增加劑量。如果總膽紅素值是在2. I至3mg/dL和/或所述個體經歷中等的有關不利事件，不增加劑量。如果總膽紅素值大於3. Omg/dL總膽紅素和/或所述個體經歷嚴重的有關不利事件，將劑量降低至以前耐受的劑量。在具體實施方案中，根據在下文第8部分或第9部分以及以後部分中所述的方案或類似方案，治療患者的ASMD。在一個具體的實施方案中，用於治療ASMD的方法包括給有此需要的個體施用劑量為 O. lmg/kg、0. 2mg/kg、0. 3mg/kg、0. 4mg/kg、0. 5mg/kg.、0· 6mg/kg、0. 7mg/kg、0. 8mg/kg、
0.9mg/kg、lmg/kg、或 0. lmg/kg 至 0. 5mg/kg 或 0. lmg/kg 至 lmg/kg 的 ASM,且在特定時間段 (例如，3天、I周、2周、3周或4周)以後，如果總膽紅素濃度小於或等於2. lmg/dL且所述個體沒有經歷中等的或嚴重的有關不利事件，則連續增加施用給個體的ASM的劑量。在一些實施方案中，連接增加ASM的劑量，直到達到個體耐受的治療上有效的最大或最大劑量。 在某些實施方案中，施用這樣的耐受的最高或最大劑量，直到諸如病理器官中的累積的鞘磷脂被去堆積的時間，此後給個體施用維持劑量，所述維持劑量低於耐受的最大劑量且仍然是治療上有效的。在一些實施方案中，隨著患者病症的改善，隨時間減小所述維持劑量。在一個具體的實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療 ASMD且不造成下述情況的最大劑量1種、2種或更多種嚴重的有關不利事件或由例如臨床數據交換標準聯合研究數據列表模型標準術語V. 3. I. I定義的有關不利事件。在另一個實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不造成下述情況的最大劑量與施用ASM之前患者的總膽紅素濃度相比，總膽紅素濃度增加，所述增加持續大於 2天、3天、5天、I周、2周、或3周。在另一個實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不造成下述情況的最大劑量在施用所述劑量的ASM以後，總膽紅素濃度大於正常總膽紅素濃度，且持續大於18小時、24小時、36小時、48小時或72小時、5 天、I周、2周或3周。在沒有ASMD的人(例如，健康人)中的正常總膽紅素濃度小於大約
1.2mg/dL。在某些實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不造成下述情況的最大劑量在施用所述劑量的ASM以後，總膽紅素濃度大於大約I. 5mg/ dL>I. 75mg/dL、2. Omg/dL>2. lmg/dL、2. 2mg/dL、2. 3mg/dL、2. 4mg/dL、2. 5mg/dL、2. 6mg/dL、
2.7mg/dL、2. 75mg/dL、2. 8mg/dL、2. 9mg/dL、3. Omg/dL、3. lmg/dL、3. 2mg/dL、3. 3mg/dL、
3.4mg/dL、3. 5mg/dL、3. 6mg/dL、3. 7mg/dL、3. 8mg/dL、3. 9mg/dL 或 4mg/dL 或在 2. lmg/dL 至
2.5mg/dL、2. lmg/dL 至 3. Omg/dL、或 2. lmg/dL 至 4mg/dL 範圍內，且持續大於 18 小時、24 小時、36小時、48小時或72小時、5天、I周、2周或3周。在另一個實施方案中，所述耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不導致下述情況的最大劑量在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24 小時、36小時、48小時或72小時，血漿神經醯胺濃度大於正常血漿神經醯胺濃度。在沒有 ASMD的人(例如，健康人)中的正常血漿神經醯胺濃度是大約I. 5-8 μ g/dL。在某些實施方案中，所述耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不導致下述情況的最大劑量在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、10小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、 48小時或72小時，血漿神經醯胺濃度大於大約8. 2 μ g/dL、8. 3 μ g/dL、8. 4 μ g/dL、8. 5 μ g/dL、8. 75 μ g/dL、9y g/dL、9. 5 μ g/dL、10 μ g/dL、11 μ g/dL、12 μ g/dL、13 μ g/dL、14y g/ dL、15y g/dL、16 μ g/dL、17 μ g/dL、18 μ g/dL、19 μ g/dL、20y g/dL、25y g/dL、30y g/dL、 35 μ g/dL、40 μ g/dL、45 μ g/dL、50 μ g/dL、55 μ g/dL、60 μ g/dL、65 μ g/dL、70 μ g/dL、 75 μ g/dL、或 80 μ g/dL 或在 8. 2 μ g/dL 至 10 μ g/dL、8. 5 μ g/dL 至 10 μ g/dL、9 μ g/dL 至 12 μ g/dL、10 μ g/dL 至 12 μ g/dL、10 μ g/dL 至 15 μ g/dL、10 μ g/dL 至 20 μ g/dL、15 μ g/dL 至 20 μ g/dL、或 20 μ g/dL 至 30 μ g/dL 範圍內。在另一個實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不造成急性期應答的最大劑量。通過急性期反應物濃度的變化、凝血酶原時間的變化、部分促凝血酶原激酶時間的變化、或嗜中性粒細胞百分比的變化，可以評估急性期應答。例如， 通過與給個體施用ASM之前的那些因素相比，或與沒有ASMD的人(例如，健康人)中的那些因素相比，在給個體施用ASM以後下述因素中的一種或多種的增加，可以評估急性期應答嗜中性粒細胞百分比、凝血酶原時間(PT)、部分促凝血酶原激酶時間(PTT)、總膽紅素濃度、C-反應蛋白(CRP/hs-CRP)濃度、血清澱粉樣蛋白A(SAA)、血清澱粉樣蛋白P組分、血管緊張素轉換酶(ACE)、鐵蛋白濃度、IL-濃度、IL-8濃度、降鈣素濃度、白蛋白濃度、或纖維蛋白原濃度。通過與ASM施用之前個體中的鐵濃度或白蛋白濃度相比，或與沒有ASMD的人 (例如，健康人)中的鐵濃度或白蛋白濃度相比，在給個體施用ASM之後鐵濃度或白蛋白濃度的降低，也可以評估急性期應答。在一個具體的實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療 ASMD且不造成下述情況的最大劑量與施用ASM之前患者的CRP/hs-CRP濃度相比，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或 72小時，CRP/hs-CRP濃度增加。在另一個具體實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不導致下述情況的最大劑量在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，血漿CRP/hs-CRP 濃度大於正常血漿CRP/hs-CRP濃度。在沒有ASMD的人(例如，健康人)中的正常血漿CRP/ hs-CRP濃度小於大約8mg/dL。在某些實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是， 有效地治療ASMD且不造成下述情況的最大劑量在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，血漿CRP/hs-CRP濃度大於大約 8. lmg/dL、8. 2mg/dL、8. 3mg/dL、8. 4mg/dL、8. 5mg/dL、8. 6mg/dL、8. 7mg/dL、8. 8mg/ dL、8. 8mg/dL、8. 9mg/dL、9mg/dL、9. 5mg/dL、10mg/dL、llmg/dL、或 12mg/dL 或在 8. 5mg/dL 至 10mg/dL、或 8. 5mg/dL 至 12mg/dL、或 lOmg/dL 至 12mg/dL 範圍內。在一個具體的實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療 ASMD且不造成下述情況的最大劑量與施用ASM之前患者的鐵蛋白濃度相比，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，鐵蛋白濃度增加。在另一個具體實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不導致下述情況的最大劑量在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、 12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，血漿鐵蛋白濃度大於正常血漿鐵蛋白濃度。在沒有ASMD的人(例如，健康人)中的正常血漿鐵蛋白濃度是10至30ng/ mL。在某些實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不造成下述情況的最大劑量在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，血漿鐵蛋白濃度大於大約300ng/mL、325ng/mL、350ng/ mL、375ng/mL、400ng/mL、425ng/mL、450ng/mL、475ng/mL、500ng/mL、525ng/mL、550ng/mL、 575ng/mL、600ng/mL、625ng/mL、650ng/mL、675ng/mL、700ng/mL、725ng/mL、750ng/mL、 775ng/mL、800ng/mL、850ng/mL、900ng/mL、950ng/mL、1000ng/mL、1050ng/mL>I100ng/mL、 1150ng/mL、或 1200ng/mL 或在 600ng/mL 至 800ng/mL、650ng/mL 至 850ng/mL、600ng/mL 至 1000ng/mL、600ng/mL 至 1200ng/mL、800ng/mL 至 1000ng/mL、900ng/mL 至 1000ng/mL、或 1000ng/mL、或lOOOng/mL至1200ng/mL範圍內，其可以用作急性期應答的測量。在一個具體的實施方案中，與施用ASM之前患者的IL-8濃度相比，在施用一定劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，血漿或血清IL-8濃度增加，可以用作急性期應答的測量。在另一個具體實施方案中，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72 小時，大於正常血漿IL-8濃度的血漿或血清IL-8濃度，可以用作急性期應答的測量。在某些實施方案中，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36 小時、48 小時或 72 小時，大於大約 24pg/mL、50pg/mL、75pg/mL、100pg/mL、200pg/mL、 300pg/mL、400pg/mL、500pg/mL、600pg/mL、700pg/mL、800pg/mL、或 900pg/mL 的血眾 IL-8 濃度，可以用作急性期應答的測量。在一個具體的實施方案中，與施用ASM之前患者的IL-6濃度相比，在施用一定劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，血漿或血清IL-6濃度增加，可以用作急性期應答的測量。在另一個具體實施方案中，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，大於正常血漿或血清IL-6濃度的血漿或血清IL-6濃度，可以用作急性期應答的測量。 在某些實施方案中，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、 24 小時、36 小時、48 小時或 72 小時，大於大約 4. 4pg/mL、6pg/mL、8pg/mL、10pg/mL、15pg/ mL、20pg/mL、25pg/mL、或30pg/mL的血漿IL_6濃度，可以用作急性期應答的測量。在一個具體的實施方案中，與施用ASM之前患者的降鈣素濃度相比，在施用一定劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72 小時，血漿或血清降鈣素濃度增加，可以用作急性期應答的測量。在另一個具體實施方案中，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，大於正常血漿降鈣素濃度的血漿或血清降鈣素濃度，可以用作急性期應答的測量。在某些實施方案中，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24 小時、36 小時、48 小時或 72 小時，大於大約 9. 4pg/mL、20pg/mL、30pg/mL、40pg/mL、 50pg/mL、75pg/mL、100pg/mL、150pg/mL、200pg/mL、或 250pg/mL 的血眾降I丐素濃度，可以用作急性期應答的測量。在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24 小時、36 小時、48 小時或 72 小時，600ng/mL、625ng/mL、650ng/mL、675ng/mL、700ng/ mL、725ng/mL、750ng/mL、775ng/mL、800ng/mL、850ng/mL、900ng/mL、950ng/mL、1000ng/mL、 1050ng/mL、1100ng/mL、1150ng/mL、或 1200ng/mL 或在 600ng/mL 至 800ng/mL、650ng/mL 至 850ng/mL、600ng/mL至 1000ng/mL、600ng/mL至 1200ng/mL、800ng/mL至 1000ng/mL、900ng/ mL 至 1000ng/mL、或 lOOOng/mL 至 1200ng/mL 範圍內。在一個具體的實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不造成下述情況的最大劑量與施用ASM之前患者的纖維蛋白原濃度相比，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時， 纖維蛋白原濃度增加。在另一個具體實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不導致下述情況的最大劑量在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、 12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，血漿纖維蛋白原濃度大於正常血漿纖維蛋白原濃度。在沒有ASMD的人(例如，健康人)中的正常血漿纖維蛋白原濃度是150mg/dL至300mg/dL。在某些實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不造成下述情況的最大劑量在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12 小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，血漿纖維蛋白原濃度大於大約 350mg/dL、375mg/dL、400mg/dL、425mg/dL、或 450mg/dL 或在 350mg/dL 至 400mg/dL、350mg/ dL 至 450mg/dL 或 400mg/dL 至 450mg/dL 範圍內。在一個具體的實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療 ASMD且不造成下述情況的最大劑量與施用ASM之前患者的嗜中性粒細胞佔總白血細胞的百分比相比，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、 36小時、48小時或72小時，嗜中性粒細胞佔總白血細胞的百分比的增加。在另一個具體實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不導致下述情況的最大劑量在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36 小時、48小時或72小時，嗜中性粒細胞佔總白血細胞的百分比大於嗜中性粒細胞佔總白血細胞濃度的正常百分比。在沒有ASMD的人(例如，健康人)中的嗜中性粒細胞佔總白血細胞的正常百分比是45%至60%。在某些實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不造成下述情況的最大劑量在施用所述劑量的ASM以後6小時、8 小時、12小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，嗜中性粒細胞佔總白血細胞的百分比的增加是70%、75%、80%、85%、90%、95%或更大。在另一個實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不造成下述情況的最大劑量針對施用的ASM的抗體增加。在另一個實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不造成超敏反應的最大劑量。在另一個實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不造成細胞因子釋放症候群的最大劑量。在某些實施方案中，所述治療上有效的個體耐受的最大劑量是lmg/kg至2. 5mg/ kg、2mg/kg 至 3mg/kg、3mg/kg 至 5mg/kg、5mg/kg 至 10mg/kg、10mg/kg 至 15mg/kg、15mg/kg 至 20mg/kg、15mg/kg 至 25mg/kg、20mg/kg 至 30mg/kg、或 25mg/kg 至 50mg/kg。在一些實施方案中，所述治療上有效的個體耐受的最大劑量是lmg/kg、2mg/kg、3mg/kg、4mg/kg、5mg/kg、 6mg/kg、7mg/kg、8mg/kg、9mg/kg、10mg/kg、1lmg/kg、12mg/kg、13mg/kg、14mg/kg、或 15mg/ kg。在某些實施方案中，所述治療上有效的個體耐受的最大劑量是20mg/kg、25mg/kg、30mg/ kg、35mg/kg、40mg/kg、45mg/kg、或 50mg/kgo在一個具體的實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療 ASMD且不造成下述情況的最大劑量1種、2種或更多種嚴重的有關不利事件或如例如臨床數據交換標準聯合研究數據列表模型標準術語v. 3. 1. 1所定義的有關不利事件。在另一個實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不造成下述情況的最大劑量與施用ASM之前患者的總膽紅素濃度相比，總膽紅素濃度增加，所述增加持續大於2天、3天、5天、I周、2周、或3周。在另一個實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不造成下述情況的最大劑量在施用所述劑量的ASM以後，總膽紅素濃度大於正常總膽紅素濃度，且持續大於18小時、24小時、36小時、48小時或 72小時、5天、I周、2周或3周。在沒有ASMD的人(例如，健康人)中的正常總膽紅素濃度是小於大約1.2mg/dL。在某些實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不造成下述情況的最大劑量在施用所述劑量的ASM以後，總膽紅素濃度大於大約 I. 5mg/dL、I. 75mg/dL、2. Omg/dL、2. lmg/dL、2. 2mg/dL、2. 3mg/dL、2. 4mg/dL、2. 5mg/ dL、2. 6mg/dL、2. 7mg/dL、2. 75mg/dL、2. 8mg/dL、2. 9mg/dL、3. 0mg/dL、3. lmg/dL、3. 2mg/dL、
3.3mg/dL、3. 4mg/dL、3. 5mg/dL、3. 6mg/dL、3. 7mg/dL、3. 8mg/dL、3. 9mg/dL 或 4mg/dL 或在
2.lmg/dL 至 2. 5mg/dL、2. lmg/dL 至 3. Omg/dL、或 2. lmg/dL 至 4mg/dL 範圍內，且持續大於 18小時、24小時、36小時、48小時或72小時、5天、I周、2周或3周。在另一個實施方案中，所述耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不導致下述情況的最大劑量在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24 小時、36小時、48小時或72小時，血漿神經醯胺濃度大於正常血漿神經醯胺濃度。在沒有 ASMD的人(例如，健康人)中的正常血漿神經醯胺濃度是大約I. 5至8 μ g/dL。在某些實施方案中，所述耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不導致下述情況的最大劑量在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、10小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、 48小時或72小時，血漿神經醯胺濃度大於大約8. 2 μ g/dL、8. 3 μ g/dL、8. 4 μ g/dL、8. 5 μ g/ dL、8. 75 μ g/dL、9 μ g/dL、9. 5 μ g/dL、10 μ g/dL、11 μ g/dL、12 μ g/dL、13 μ g/dL、14 μ g/ dL、15 μ g/dL、16 μ g/dL、17 μ g/dL、18 μ g/dL、19 μ g/dL、20 μ g/dL、25 μ g/dL、30 μ g/dL、 35 μ g/dL、40 μ g/dL、45 μ g/dL、50 μ g/dL、55 μ g/dL、60 μ g/dL、65 μ g/dL、70 μ g/dL、 75 μ g/dL、或 80 μ g/dL 或在 8· 2 μ g/dL 至 10 μ g/dL、8. 5 μ g/dL 至 10 μ g/dL、9 μ g/dL 至 12 μ g/dL、10 μ g/dL 至 12 μ g/dL、10 μ g/dL 至 15 μ g/dL、10 μ g/dL 至 20 μ g/dL、15 μ g/dL 至 20 μ g/dL、或 20 μ g/dL 至 30 μ g/dL 範圍內。在另一個實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不造成急性期應答的最大劑量。通過急性期反應物濃度的變化，凝血酶原時間的變化、部分促凝血酶原激酶時間的變化、或嗜中性粒細胞百分比的變化，可以評估急性期應答。例如， 通過與給個體施用ASM之前的那些因素相比，或與沒有ASMD的人(例如，健康人)中的那些因素相比，在給個體施用ASM以後下述因素中的一種或多種的增加，可以評估急性期應答嗜中性粒細胞百分比、凝血酶原時間(PT)、部分促凝血酶原激酶時間(PTT)、總膽紅素濃度、C-反應蛋白(CRP/hs-CRP)濃度、血清澱粉樣蛋白A(SAA)、血清澱粉樣蛋白P組分、血管緊張素轉換酶(ACE)、鐵蛋白濃度、白蛋白濃度或纖維蛋白原濃度。通過與ASM施用之前個體中的鐵濃度或白蛋白濃度相比，或與沒有ASMD的人(例如，健康人)中的鐵濃度或白蛋白濃度相比，在給個體施用ASM之後鐵濃度或白蛋白濃度的降低，也可以評估急性期應答。在一個具體的實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療 ASMD且不造成下述情況的最大劑量與施用ASM之前患者的CRP/hs-CRP濃度相比，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，CRP/hs-CRP濃度增加。在另一個具體實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不導致下述情況的最大劑量在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，血漿CRP/hs-CRP 濃度大於正常血漿CRP/hs-CRP濃度。在沒有ASMD的人(例如，健康人)中的正常血漿CRP/ hs-CRP濃度是小於大約8mg/dL。在某些實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不造成下述情況的最大劑量在施用所述劑量的ASM以後6小時、8 小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，血漿CRP/hs-CRP濃度大於大約 8. lmg/dL、8. 2mg/dL、8. 3mg/dL、8. 4mg/dL、8. 5mg/dL、8. 6mg/dL、8. 7mg/dL、8. 8mg/ dL、8. 8mg/dL、8. 9mg/dL、9mg/dL、9. 5mg/dL、10mg/dL、llmg/dL、或 12mg/dL 或在 8. 5mg/dL 至 10mg/dL、或 8. 5mg/dL 至 12mg/dL、或 lOmg/dL 至 12mg/dL 範圍內。在一個具體的實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療 ASMD且不造成下述情況的最大劑量與施用ASM之前患者的鐵蛋白濃度相比，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，鐵蛋白濃度增加。在另一個具體實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不導致下述情況的最大劑量在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、 12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，血漿鐵蛋白濃度大於正常血漿鐵蛋白濃度。在沒有ASMD的人(例如，健康人)中的正常血漿鐵蛋白濃度是10至30ng/ mL。在某些實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不造成下述情況的最大劑量在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、 24小時、36小時、48小時或72小時，血漿鐵蛋白濃度大於大約600ng/mL、625ng/mL、650ng/ mL、675ng/mL、700ng/mL、725ng/mL、750ng/mL、775ng/mL、800ng/mL、850ng/mL、900ng/mL、 950ng/mL、1000ng/mL、1050ng/mL、1100ng/mL、1150ng/mL、或 1200ng/mL 或在 600ng/mL 至 800ng/mL、650ng/mL 至 850ng/mL、600ng/mL 至 1000ng/mL、600ng/mL 至 1200ng/mL、800ng/ mL 至 1000ng/mL、900ng/mL 至 1000ng/mL、或 1000ng/mL 至 1200ng/mL 範圍內。在一個具體的實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療 ASMD且不造成下述情況的最大劑量與施用ASM之前患者的纖維蛋白原濃度相比，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時， 纖維蛋白原濃度增加。在另一個具體實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不導致下述情況的最大劑量在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、 12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，血漿纖維蛋白原濃度大於正常血漿纖維蛋白原濃度。在沒有ASMD的人(例如，健康人)中的正常血漿纖維蛋白原濃度是150mg/dL至300mg/dL。在某些實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不造成下述情況的最大劑量在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12 小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，血漿纖維蛋白原濃度大於大約 350mg/dL、375mg/dL、400mg/dL、425mg/dL、或 450mg/dL 或在 350mg/dL 至 400mg/dL、350mg/ dL 至 450mg/dL 或 400mg/dL 至 450mg/dL 範圍內。在一個具體的實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療 ASMD且不造成下述情況的最大劑量與施用ASM之前患者的嗜中性粒細胞佔總白血細胞的百分比相比，在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，嗜中性粒細胞佔總白血細胞的百分比增加。在另一個具體實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不導致下述情況的最大劑量在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、16小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，嗜中性粒細胞佔總白血細胞的百分比大於嗜中性粒細胞佔總白血細胞濃度的正常百分比。在沒有ASMD的人(例如，健康人)中的嗜中性粒細胞佔總白血細胞的正常百分比是45%至60%。在某些實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是， 有效地治療ASMD且不造成下述情況的最大劑量在施用所述劑量的ASM以後6小時、8小時、12小時、18小時、24小時、36小時、48小時或72小時，嗜中性粒細胞佔總白血細胞的百分比的增加是70%、75%、80%、85%、90%、95%或更大。在另一個實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不造成下述情況的最大劑量針對施用的ASM的抗體增加。在另一個實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不造成超敏反應的最大劑量。在另一個實施方案中，所述治療上有效的耐受的最大劑量是，有效地治療ASMD且不造成細胞因子釋放症候群的最大劑量。在某些實施方案中，所述治療上有效的個體耐受的最大劑量是lmg/kg至2. 5mg/ kg、2mg/kg 至 3mg/kg、3mg/kg 至 5mg/kg、5mg/kg 至 10mg/kg、10mg/kg 至 15mg/kg、15mg/kg 至 20mg/kg、15mg/kg 至 25mg/kg、20mg/kg 至 30mg/kg、或 25mg/kg 至 50mg/kg。在一些實施方案中，所述治療上有效的個體耐受的最大劑量是lmg/kg、2mg/kg、3mg/kg、4mg/kg、5mg/kg、 6mg/kg、7mg/kg、8mg/kg、9mg/kg、10mg/kg、Ilmg/kg、12mg/kg、13mg/kg、14mg/kg、或 15mg/ kg。在某些實施方案中，所述治療上有效的個體耐受的最大劑量是20mg/kg、25mg/kg、30mg/ kg、35mg/kg、40mg/kg、45mg/kg、或 50mg/kgo在某些實施方案中，每3天、每4天、每5天、每6天、每周、每8天、每9天、每10 天、每11天、每12天、每13天、每2周、每3周、每4周、或每5周給個體施用本文所述的 ASM的劑量。在一些實施方案中，每3至5天、每3至7天、每5至7天、每5至10天、每5 至14天、每7至14天、每2至4周、或每3至5周給個體施用本文所述的ASM的劑量。在某些實施方案中，ASM的劑量的施用頻率隨著劑量的調整而變化。例如，可以每周或每2周施用O. 3mg/kg的劑量,且可以每2周或每3周施用lmg/kg的劑量。在一些實施方案中，給個體施用一定劑量的ASM(例如，維持劑量)，且持續12周、 20 周、25 周、30 周、35 周、40 周、45 周、50 周、52 周、I 年、I. 5 年、2 年、2. 5 年、3 年、3. 5 年、4 年的時間，或直到患者經歷有關不利事件、總膽紅素值大於沒有ASMD的人(例如，健康人) 的膽紅素值、血漿神經醯胺濃度大於沒有ASMD的人(例如，健康人)的血漿神經醯胺濃度、 或急性期應答。在某些實施方案中，每3天、每4天、每5天、每6天、每周、每8天、每9天、每10 天、每11天、每12天、每13天、每2周、每3周、每4周、或每5周給個體施用初始的無毒低劑量的ASM。在一些實施方案中，每3至5天、每3至7天、每5至7天、每5至10天、每5 至14天、每7至14天、每2至4周、或每3至5周給個體施用本文所述的ASM的劑量。在某些實施方案中，施用所述初始的無毒低劑量的ASM 4周、6周、8周、12周、14周或更長的時段。在某些實施方案中，ASM劑量的連續增加是，比前次劑量高大約O. lmg/kg、0. 2mg/kg、0. 3mg/kg、0. 4mg/kg、0. 5mg/kg、0. 6mg/kg、0. 7mg/kg、0. 8mg/kg、0. 9mg/kg、lmg/kg、
I.2mg/kg、l. 5mg/kg、l. 75mg/kg、2mg/kg、3mg/kg、4mg/kg 或 5mg/kg。在一些實施方案中， ASM劑量的連續增加是比前次劑量高O. I至O. 5mg/kg、0. lmg/kg至lmg/kg、0. 5mg/kg至 lmg/kg、0. 5mg/kg 至 2mg/kg、lmg/kg 至 2mg/kg、2mg/kg 至 4mg/kg 或 2mg/kg 至 5mg/kg。通過可用於實現治療效果的任意途徑，可以施用本文所述的ASM劑量。ASM劑量的具體給藥途徑包括但不限於靜脈內、心室內、真皮內、透皮、皮下、肌肉內、鼻內、吸入、肺內、表面、透黏膜、顱內、鞘內、硬膜外和滑膜內。在一個實施方案中，給有此需要的個體全身地(例如，腸胃外地)施用ASM劑量。在另一個實施方案中，給有此需要的個體局部地施用 ASM劑量。有效地治療ASMD的身體(非中樞神經系統)表現的ASM酶的劑量不能有效地穿透血腦屏障。因而，在具體實施方案中，將ASM在心室內或鞘內施用給M3D患者的腦。關於溶酶體貯存酶向腦的心室內遞送的方法，參見，例如，美國專利申請公開號2009/0130079 和2009/0123451，它們通過弓I用整體納入本文。在某些實施方案中，將ASM腦室內施用給患者。關於腦室內輸注ASM的方法,參見,例如，Dodge等人,2009, Experimental Neurology 215 :349-357,它通過引用整體納入本文。在一些實施方案中，通過間接腦實質內注射，將 ASM 施用給患者。參見，例如，Yang 等人，2007, Experimental Neurology 207 :258_266。在一些實施方案中，將修飾形式的ASM(其使所述酶靶向腦，諸如在下文第5. 2部分中所述) 施用給患者，以治療ASMD。施用給患者的ASM酶中僅小部分到達肺。因而，在具體實施方案中，將ASM施用至患者的肺。在某些實施方案中，通過鼻內或吸入途徑，將ASM施用給患者。關於ASM的鼻內施用的信息，參見，例如，Ziegler 等人，2009, Molecular Genetics and Metabolism 97: 35-42，它通過引用整體納入本文。在一些實施方案中，將修飾形式的ASM (其使所述酶靶向肺，諸如在下文第5. 2部分中所述)施用給患者，以治療ASMD。在某些實施方案中，使用噴霧器，將ASM施用給患者。通過支氣管鏡、計量劑量吸入器、或噴霧器而進行肺內注射，可以將ASM遞送至肺。在某些實施方案中，將ASM酶全身地施用給患者，以及局部地施用給特定器官，諸如腦和肺。在一些實施方案中，所述ASM酶的局部施用補充所述酶的全身施用。在具體實施方案中，在已經通過全身施用(例如，靜脈內施用)去堆積患者中累積的鞘磷脂以後，將 ASM酶局部地施用至例如腦或肺。在某些實施方案中，在施用ASM之前，測定患者的基因型。在一些實施方案中，在施用ASM之前，測定患者表達的ASM的糖基化模式。施用與患者內源表達的ASM類似/相容的ASM，可以減小免疫原性的潛力。在某些實施方案中，在施用ASM之前，測定內源表達的ASM的活性。使用本領域技術人員已知的技術，可以在DBS中和在培養的成纖維細胞中測量內源表達的ASM的活性。在一個具體的實施方案中，本文提供的用於治療ASMD的方法減小脾體積，這通過本領域已知的技術(例如，MRI)來評估。在另一個具體實施方案中，本文提供的用於治療 ASMD的方法降低肝鞘磷脂水平，這通過本領域已知的技術(例如，肝樣品的生化分析和/或組織形態測定分析)來評估。在另一個具體實施方案中，本文提供的用於治療ASMD的方法增加運動能力，這通過本領域已知的技術來評估，例如，周期測力法的最大工作負荷，包括預測的最大工作負荷百分比、氧耗量峰值、和二氧化碳產量。在另一個具體實施方案中，本文提供的用於治療ASMD的方法增加肺功能，這通過本領域已知的技術來評估，例如，DLco, FVC、FEV、和/或TLC。在另一個具體實施方案中，本文提供的用於治療ASMD的方法減少支氣管肺泡灌洗(BAL)鞘磷脂。在另一個具體實施方案中，本文提供的用於治療ASMD的方法減小肝體積，這通過本領域已知的技術(例如，MRI)來評估。在另一個具體實施方案中，本文提供的用於治療ASMD的方法改善肺表象，這通過本領域已知的技術來評估，例如，高解析度CT掃描或胸部X射線檢查。在另一個具體實施方案中，本文提供的用於治療ASMD的方法改善肺清除。在另一個具體實施方案中，本文提供的用於治療ASMD的方法降低肝、皮膚、 血漿和DBS中的鞘磷脂濃度。在另一個具體實施方案中，本文提供的用於治療ASMD的方法降低血清殼三糖苷酶水平。在另一個具體實施方案中，本文提供的用於治療ASMD的方法降低血清CCL18水平。在另一個具體實施方案中，本文提供的用於治療ASMD的方法改善患者的脂質特性(例如，降低膽固醇)。在另一個具體實施方案中，本文提供的用於治療ASMD的方法減輕或改善ASMD和/或與其有關的症狀的嚴重性。在另一個具體實施方案中，本文提供的用於治療ASMD的方法減小與ASMD有關的症狀的持續時間。在另一個具體實施方案中， 本文提供的用於治療ASMD的方法預防與ASMD有關的症狀的復發。在另一個具體實施方案中，本文提供的用於治療ASMD的方法減少個體的住院治療。在另一個具體實施方案中，本文提供的用於治療ASMD的方法減小住院治療時間。在另一個具體實施方案中，本文提供的用於治療ASMD的方法增加個體的存活期。在另一個具體實施方案中，本文提供的用於治療 ASMD的方法降低個體的死亡率。在另一個具體實施方案中，本文提供的用於治療ASMD的方法降低個體的住院治療率。在另一個具體實施方案中，本文提供的用於治療ASMD的方法減少與ASMD有關的症狀的數目。在另一個具體實施方案中，本文提供的用於治療ASMD的方法增加ASMD患者的無症狀存活期。在另一個具體實施方案中，本文提供的用於治療ASMD 的方法改善個體的神經功能(例如，心理運動功能、社會反應性等)。在另一個具體實施方案中，本文提供的用於治療ASMD的方法提高患者的生活質量。在某些具體實施方案中，如下評估本文提供的用於治療ASMD的方法對患者生活質量的提高，例如，簡單的疲勞清單(BFI ;Mendoza等人，1999，Cancer 85(5) :1186-1196)、
簡單的疼痛清單-簡短形式(BPI-SF ;Cleeland 等人，1994, Ann Acad Med Singapore
23 (2) :129-138) ,ASM-健康評估問卷法(它是BFI、BPI_SF、和簡短形式-36健康測量的複合體)、用於評估呼吸困難和疲勞的自我管理標準化的慢性呼吸道疾病問卷法(CRQ-SAS ； Schunemann 等人，2005，Eur. Respir J. 25 :31-40)、以及急性後護理的活性測量(AM-PAC)、 評估功能能動性(例如，可動性、自我護理、和應用的認知)的計算機適應性測試。酸性鞘磷脂酶ASM表示保留將鞘磷脂水解成神經醯胺和磷醯膽鹼的能力的酸性鞘磷脂酶的任意形式，所述能力通過本領域技術人員已知的技術來評估，所述技術諸如在美國專利號 4，039，388,4, 082，781,5, 686，240、和 7，563，591 以及國際公開號 WO 2007/078806 和 WO 2006/058385(它們通過引用整體納入本文)中所述的那些。在一個具體的實施方案中，在 He等人,2003, Analytical Biochemistry 314 :116-120所述的基於突光的高效液相色譜測定法中，酸性鞘磷脂酶具有將鞘磷脂水解成神經醯胺和磷醯膽鹼的能力。在一個具體的實施方案中，通過例如在He等人,2003,Analytical Biochemistry 314 :116-120中所述的試驗測得，酸性鞘磷脂酶具有ASM-I (SEQ ID N0:1，下文)的活性的至少30%、35%、40%、 45%、50%、75%、80%、85%、80%、90%、95% 或 98%或30%至50%、40%至50%、50%至 75%、50% 至 90%、75% 至 80%、75% 至 90%、75% 至 95%、或 85% 至 95%。在一個具體的實施方案中，所述ASM是人ASM。人ASM存在由選擇性剪接產生的不同同工型。人ASM同工型之一是人ASM同工型I (有時稱作ASM-1)，其具有在UniProtKB/ Swiss-Prot登記號P17405-1中發現的胺基酸序列。另一種人ASM同工型是人同工型2 (有時稱作ASM-2)，其具有在UniProtKB/Swiss-Prot.登記號P17405-2中發現的胺基酸序列。 第三種人ASM同工型是人同工型3 (有時稱作ASM-3)，其具有在UniProtKB/Swiss-Prot.登記號P17405-3中發現的胺基酸序列。下面提供了 ASM-I (它是最豐富的同工型)的胺基酸
序列
權利要求
1.一種用於治療具有酸性鞘磷脂酶缺乏的人個體的方法，所述方法包括(a)用於去堆積人個體中累積的鞘磷脂底物的方案，所述方案包括(i)將初始的無毒低劑量的酸性鞘磷脂酶(ASM)施用給所述人個體；( )將連續更大劑量的ASM施用給所述人個體，並在每個連續劑量以後監測所述個體的一種或多種不利副作用，如由升高的膽紅素或有關不利事件所指示的；和(b)維持方案，所述維持方案包括施用等於或小於所述個體耐受的最大劑量的劑量， 作為所述個體的維持劑量。
2.一種用於治療人個體的酸性鞘磷脂酶缺乏的酸性鞘磷脂酶(ASM)，所述酸性鞘磷脂酶準備如下施用(a)在用於去堆積累積的鞘磷脂底物的方案中，所述方案包括(i)施用初始的無毒低劑量的酸性鞘磷脂酶(ASM)；( )施用連續更大劑量的ASM，並在每個連續劑量以後監測所述個體的一種或多種不利副作用，如由升高的膽紅素或有關不利事件所指示的；和(b)在維持方案中，所述維持方案包括施用等於或小於所述個體耐受的最大劑量的劑量，作為所述個體的維持劑量。
3.如權利要求1所述的方法，其中所述ASM是重組人ASM(rhASM)。
4.如權利要求3所述的方法，其中所述初始劑量範圍是0.lmg/kg至lmg/kg的rhASM。
5.如權利要求3所述的方法，其中所述初始劑量是0.lmg/kg至0. 5mg/kg的rhASM。
6.如權利要求3所述的方法，其中所述初始劑量是0.lmg/kg的rhASM。
7.如權利要求1或3至6中任一項所述的方法，其中在前次劑量之後1、2、3或4周施用所述連續更大劑量。
8.如權利要求7所述的方法，其中在所述前次劑量之後1周施用所述連續更大劑量。
9.如權利要求7所述的方法，其中在所述前次劑量之後2周施用所述連續更大劑量。
10.如權利要求7、8和9中任一項所述的方法，其中所述連續更大劑量比所述前次劑量高大約0. 1至1. Omg/kg。
11.如權利要求7、8和9中任一項所述的方法，其中所述連續更大劑量比所述前次劑量高大約0. 1至0. 5mg/kg。
12.如權利要求1和3至10中任一項所述的方法，其中所述人個體耐受的最大劑量是 lmg/kg 至 3mg/kg。
13.如權利要求1至11中任一項所述的方法，其中給所述人個體施用所述耐受的最大劑量作為所述維持劑量。
14.如權利要求1至11中任一項所述的方法，其中所述維持劑量是小於所述耐受的最大劑量的治療有效劑量。
15.如權利要求1至13中任一項所述的方法，所述方法另外包括在所述維持方案期間監測所述個體的一種或多種不利副作用，如由升高的膽紅素或有關不利事件所指示的； 並調整所述維持劑量。
16.如權利要求13至15中任一項所述的方法，其中每2至4周給所述個體施用所述維持劑量。
17.如權利要求2所述的ASM，它是rhASM。
18.如權利要求17所述的rhASM，其中所述初始劑量範圍是0.lmg/kg至lmg/kg的 rhASMo
19.如權利要求17所述的rhASM，其中所述初始劑量是0.lmg/kg至0. 5mg/kg的rhASM。
20.如權利要求17所述的rhASM，其中所述初始劑量是0.lmg/kg的rhASM。
21.如權利要求2和17至20中任一項所述的ASM，其中在所述前次劑量之後1、2、3或 4周施用所述連續更大劑量。
22.如權利要求21所述的ASM，其中在所述前次劑量之後1周施用所述連續更大劑量。
23.如權利要求21所述的ASM，其中在所述前次劑量之後2周施用所述連續更大劑量。
24.如權利要求21、22和23中任一項所述的ASM，其中所述連續更大劑量比所述前次劑量高大約0. 1至1. Omg/kg。
25.如權利要求21、22和23中任一項所述的ASM，其中所述連續更大劑量比所述前次劑量高大約0. 1至0. 5mg/kg。
26.如權利要求2和17至沈中任一項所述的ASM，其中所述人個體耐受的最大劑量是 lmg/kg 至 3mg/kg。
27.如權利要求2和17至沈中任一項所述的ASM，其中給所述人個體施用所述耐受的最大劑量作為維持劑量。
28.如權利要求27所述的ASM，其中所述維持劑量是小於所述耐受的最大劑量的治療有效劑量。
29.如權利要求27所述的ASM，其中每2至4周給所述個體施用所述維持劑量。
30.一種用於治療具有酸性鞘磷脂酶缺乏的人個體的方法，所述方法包括，以下述順序劑量在遞增給藥方案中施用rhASM (a)0.lmg/kg,(b)0.3mg/kg，和(c)0.6mg/kg ；其中rhASM的每個劑量施用至少2次，且每個劑量以2周間隔施用，且其中在升高所述劑量至下一水平之前，監測所述個體的有毒副作用。
31.如權利要求30所述的方法，所述方法另外包括在所述遞增給藥方案中lmg/kg的順序劑量。
32.如權利要求31所述的方法，所述方法另外包括在所述遞增給藥方案中ang/kg的順序劑量。
33.如權利要求32所述的方法，所述方法另外包括在所述遞增給藥方案中:3mg/kg的順序劑量。
34.一種用於治療人個體的酸性鞘磷脂酶缺乏的rhASM，所述rhASM準備以下述順序劑量在遞增給藥方案中施用(a)0.lmg/kg,(b)0.3mg/kg，和(c)0.6mg/kg ；其中每個劑量施用至少2次，且每個劑量以2周間隔施用，且其中在升高所述劑量至下一水平之前，監測所述個體的有毒副作用。
35.如權利要求34所述的rhASM，其另外包括在所述遞增給藥方案中lmg/kg的順序劑量。
36.如權利要求35所述的rhASM，其另外包括在所述遞增給藥方案中ang/kg的順序劑量。
37.如權利要求36所述的rhASM，其另外包括在所述遞增給藥方案中:3mg/kg的順序劑量。
38.如權利要求1、3至16和30至33中任一項所述的方法，其中靜脈內施用所述劑量。
39.如權利要求1、3至16和30至33中任一項所述的方法，其中真皮內、皮下地或肌肉內施用所述劑量。
40.如權利要求1、3至16和30至33中任一項所述的方法，其中所述酸性鞘磷脂酶缺乏是A型尼曼-皮克二氏病(NPD)。
41.如權利要求1、3至16和30至33中任一項所述的方法，其中所述酸性鞘磷脂酶缺乏是B型NPD。
42.如權利要求1、3至16和30至33中任一項所述的方法，其中所述人個體具有在編碼酸性鞘磷脂酶的基因中的錯義突變。
43.如權利要求1、3至16和30至33中任一項所述的方法，其中所述突變是L302P、 H421Y 或 R496L。
44.如權利要求1、3至16和30至33中任一項所述的方法，其中所述人個體具有在編碼酸性鞘磷脂酶的基因中的突變，且所述突變是△ R608。
45.如權利要求2、17至四和34至37中任一項所述的ASM，其中靜脈內施用所述劑量。
46.如權利要求2、17至四和34至37中任一項所述的ASM，其中皮下地或肌肉內施用所述劑量。
47.如權利要求2、17至四和34至37中任一項所述的ASM，其中所述酸性鞘磷脂酶缺乏是A型尼曼-皮克二氏病(NPD)。
48.如權利要求2、17至四和34至37中任一項所述的ASM，其中所述酸性鞘磷脂酶缺乏是B型NPD。
49.如權利要求2、17至四和34至37中任一項所述的ASM，其中所述人個體具有在編碼酸性鞘磷脂酶的基因中的錯義突變。
50.如權利要求2、17至四和34至37中任一項所述的ASM，其中所述突變是L302P、 H421Y 或 R496L。
51.如權利要求2、17至四和34至37中任一項所述的ASM，其中所述人個體具有在編碼酸性鞘磷脂酶的基因中的突變，且所述突變是△ R608。
全文摘要
本發明涉及使用酸性鞘磷脂酶(ASM)的劑量遞增酶替代療法，以用於治療具有酸性鞘磷脂酶缺乏(ASMD)的人個體，和尤其是具有尼曼-皮克二氏病(NPD)以及(在某些實施方案中)B型NPD的非神經學表現的患者。
文檔編號A61K38/43GK102596232SQ201080043910
公開日2012年7月18日 申請日期2010年8月28日 優先權日2009年8月28日
發明者蘿拉·P·安德魯斯, 傑拉爾德·F·考克斯, 愛德華·H·舒克曼, 羅伯特·J·德斯尼克, 詹姆斯·M·默裡 申請人:基酶有限公司, 西奈山醫學院