生產冬蟲夏草菌飼料添加劑的方法及產品的製作方法

2023-05-23 04:21:46

生產冬蟲夏草菌飼料添加劑的方法及產品的製作方法
【專利摘要】本發明涉及生產冬蟲夏草菌飼料添加劑的方法及產品，屬於飼料發酵【技術領域】，其採用廉價的啤酒乾酵母和啤酒糟為原料、首先通過液體發酵快速生產大量菌絲，再大接種量接種到固體培養基進行固體發酵，發酵採用淺盤式靜態固態發酵設備，其簡易且操作方便，發酵周期短，減少了汙染、降低了生產成本，能高效生產北冬蟲夏草菌絲體作為飼料添加劑。
【專利說明】生產冬蟲夏草菌飼料添加劑的方法及產品

【技術領域】
[0001]本發明涉及生產冬蟲夏草菌飼料添加劑的方法及產品，屬於飼料發酵【技術領域】。

【背景技術】
[0002]冬蟲夏草又名「蟲草」，是我國醫藥寶庫中的一種名貴中藥，其化學成分複雜。冬蟲夏草除了含粗蛋白25.32%，粗纖維18.53%，碳水化合物28.9%，脂肪8.4%，灰分4.1%，水分10.84%。其中蟲草菌素、核苷類、胺基酸、多肽、多糖類、糖醇、留醇類、脂肪酸、酯、烷烴、多胺類物質、超氧化物歧化酶(S0D)、胺基酸、維生素及多種微量元素等活性成分，具有多種藥理及活性功能，已報導其具有抗癌、增強免疫力、免疫調節、降血糖和抑制mRNA翻譯的作用(陳桂寶等，1997 ;Seldin等，1997 ;李祝等，2002 ;陳暢等，2004)。還可以顯著降低顱壓、促進新陳代謝，抗疲勞(都興範等，2003 ;王志高等2007 ;賁松彬等2009)，其中留醇類有抗瘧疾作用(PAN等，1999)。冬蟲夏草可明顯減少小白鼠自發性活動，延長戊巴比妥鈉睡眠時間和鎮靜，抗驚厥等作用(雷堅，1992 ;郭亭芳，2000 ;許愛榮等，2001)。程顯好、白毓謙報導冬蟲夏草發酵液中含有耐熱的廣譜性抗菌物質，能夠拮抗革蘭氏陰性及陽性菌、芽孢菌和非芽孢菌、鏈黴菌，對酵母及絲狀真菌則沒有抗菌活性(程顯好等，1995)，張正使用感染B肝病毒的幼鴨實驗證明，冬蟲夏草對B肝病毒HBV-FDNAP抑制率可達85%，抑制細胞系PLC/PRF/5細胞分泌HbsAg作用超過50%，並能抑制鴨體內的鴨B肝病毒(DHBV)感染，因此它具有抑菌、抗病毒和抗癌作用(靳朝霞等，2005)，另外，藥用真菌具有分解纖維素、澱粉、蛋白質、脂類等物質的強大酶系(許正宏，2010)。
[0003]2008年中國添加劑預混料約500萬t，產值約300億元-400億元，美國飼料添加劑年消費量650萬t，歐共體560萬t。世界各國飼料添加劑總量中營養性添加劑佔55%?60%，獸藥佔30%?35%，生物製品佔10%-15%。獸藥抗生素添加劑在飼料中使用已有50多年的歷史，在美國調查表明，使用抗生素提高各種畜產品的產量，使消費者每年的食品開支節約55億美元，購買肉、蛋及乳製品可節省開支9%，年國民生產總值增加了 100億美元(朱蓓蕾，1994)。但由於抗生素的大量使用，隨之出現的負面效應也日益突出，人與動物的病原體存在交叉耐藥性，耐藥性增加、藥物在動物產品中殘留對人類的生命和財產是一個巨大的危脅。1980-1983年對豬屠宰場的調查表明，1%豬肉樣品中的抗生素殘留超標。毒理學試驗表明有些抗生素有致癌、致畸形和致突變的作用。由於抗生素的耐藥性和殘留問題，歐共體禁止在飼料中使用青黴素、四環素、奧沃黴素、螺旋黴素、桿菌肽鋅、維吉尼亞黴素、泰樂菌素、氯氟苄腺嘌呤和異丙硝達唑。瑞典和瑞士全面禁止在飼料中使用抗生素。這些國家的實踐可能導致世界範圍內飼用抗生素的全面禁用。
[0004]與化學合成相比，生物添加劑如益生菌、中藥的研製周期短，成本低，副作用小，作為飼料添加劑在飼料工業應該具有廣闊的應用前景。隨著我國畜牧業由傳統粗放型向現代化集約型生產經營的轉變，以及對動物性食品品質的要求日益增高，以防病保健、促進生產、無耐藥性、無副作用、無殘留等優勢特點的中藥飼料添加劑替代飼料抗生素是發展必然趨勢。我國使用的5000多種中草藥中已有200餘種用於中草藥飼料添加劑，但未見研究冬蟲夏草作為飼用添加劑。這是由於天然冬蟲夏草產量極少，遠不足人類的使用，更何談畜禽類享用。如，仔豬早期斷奶在現代養豬業已成為一項常規技術，早期斷奶對仔豬是一種很大的應激(郭芳彬，1996)，表現為食欲不振、消化不良、活動增加、飲欲增加、鳴叫、打鬥，生長速度下降，容易患病。豬斷奶時容易發生腹瀉，仔豬從斷奶到肥育前期，斷奶腹瀉造成的損失佔全部的75% (Svensm等，1989)。目前主要是改善飼養管理和在糧中添加抗生素，但是抗生素的耐藥性和殘留問題日益引起關注，抗生素替代品益生素、酶製劑、酸製劑等的研究與開發成為近年來綠色飼料添劑的熱點(黃滄海，2003)。由於冬蟲夏草自身蟲體營養物質豐富，不僅含較高蛋白營養物質為動物所利用，還含有各種生理活性物質，具有增強免疫力、蟲草菌素有廣譜抑菌、抗病毒、對中樞神經系統的作用具有鎮靜，抗驚厥等作用(雷堅，1992 ;郭亭芳，2000 ;許愛榮等，2001)。因此，冬蟲夏草用於飼用也是非常理想的生物飼料添加劑。
[0005]研究證實蟲草無性型發酵菌絲體的主要有效成份含量與野生型的有效成分含量大致相同，功效相似，甚至某些成分還高於野生蟲草(林群英，2006 ;王建芳，2005)。迄今為止，由於冬蟲夏草特殊的生態環境和嚴格的寄生性及人工培育技術不成熟，造成產量低、資源緊缺，價格昂貴，現在多採用人工培養其菌絲體作為替代物。人工培養是一種獲得蟲草素和菌體多糖的好途徑，國內外一直致力於蟲草菌絲體的人工培養研究(銀濤，2011 ;鍾思敏，2011)。但在蛹蟲草的規模化栽培中發現，蛹蟲草的人工栽培需要消耗大量的人力物力，且產量不高。
[0006]冬蟲夏草能否用於飼用的關鍵是成本問題。北冬蟲夏草菌絲體既可以通過液體深層發酵來生產，也可以通過固態發酵來生產。固體培養基上培養的報導不多(Holliday，
2004;靳朝霞，2005)。相對於液體深層發酵，固體培養具有設備簡單、發酵條件易控制、培養物中全部營養和保健成分均可充分利用等優點，但作為人類食品，它不能分離純菌絲體且培養周期較長(靳朝霞，2005)，限制了其應用。而作為飼料添加劑，則可以直接烘乾，培養基也可以不像人類食品要求那麼高(如異味等)，成本較低，值得推廣應用。
[0007]設備的選擇:北冬蟲夏草固態發酵一般以室內淺盤、室外大床和塑膠袋培養，無需複雜的設備，生產方簡單易行，且成本低，但生產周期長，汙染率高，品質低下且不穩定，如果採用傳統的開放式固態淺盤發酵，不僅容易造成發酵中雜菌汙染，而且溫度、溼度等培養條件難以控制，隨氣溫變化的影響大，產品質量不一致(繆文等，1993)，所以難以滿足商品化生產和製劑加工需要，研製自動化、密封的固態發酵裝置是解決上述問題的關鍵。在研製固態發酵罐時，應考慮許多方面的問題:(1)和液態深層發酵相比，固態發酵的培養基水分含量少，氣相多，而空氣的熱導率比水低的多，因此，固態發酵反應器的限制因素包括:氧傳質、溫度和固體培養基含水量等。(2)冬蟲夏草固態發酵反應器設計還需要考慮真菌的形態學和對機械攪拌的抗力。
[0008]培養基的選擇:目前研究北冬蟲夏草培養基的碳源採用葡萄糖的較多(Mao等.2005;Masuda等，2006)。氮源以酵母提取物(Shih等.2007)或者酵母提取物與蛋白腖混合物(Masuda等，2006 ；Gu等.2007)為主，Xie等(2009)以農副產品糙米糊、麥芽汁和大豆汁作為培養基也得到了較高產量的蟲草素。張顯科等(1997)研究認為高粱米，小米，玉米渣和蠶蛹可以代替大米栽培蛹蟲草，劉守華等(1999)實驗得出大米加豬血培養基更適宜蟲草菌絲的生長，使產量有所提高。邵愛娟等(1994)研究得出蟲草菌絲在進行菌絲髮酵時氮源以蛋白腖為最優。人們還在柞蠶活蛹、桑蠶活蛹、家蠶、蓖麻蠶蛹(蔣本律，1996)以及大米、高粱米、小米、玉米渣等多種基質上培養出蛹蟲草子實體(鄭貴朝，2008)。以有機氮源蛋白腖、牛肉膏、酵母膏為氮源時，蟲草素產量明顯比無機氮源高。添加腺嘌呤也能加大蟲草素產量(Masuda等，2007)。趙明文等(2000)優化玉米粉、黃豆粉、酵母粉、無機離子和培養條件，認為碳源因子對胞外多糖的產生影響顯著。陳晉安等(2001)優化了蔗糖、玉米漿、酵母膏、無機離子，認為蔗糖為碳源最好，以酵母膏為氮源，菌體產量最高。李燁(2003)研究認為蛹蟲草菌絲的生長可以利用多種碳源和氮源，在以紅糖碳源、奶粉為氮源的液體培養基中生長最佳。柴建萍等(2004)通過實驗得出玉米粉為最優碳源，蠶蛹粉為最優氮源，MgSO4S最優無機鹽。美國和日本人，用大米在塑膠袋和玻璃瓶中培養蟲草，但大米培養基能產生阻礙生長的代謝物，使蟲草素含量低。燕麥、小米、白高粱+小米比大米更有利於活性物質的生成(Holliday，2004)。賁松彬(2010)報導組氨酸、精氨酸、賴氨酸是對蛹蟲草生長影響較大的3種鹼性胺基酸。Masuda等(2007)發現在液體發酵培養基內添加甘氨酸，L-天門冬氨酸以及L-穀氨醯胺可以提高蛹蟲草的產量，最大可以達到2.5g/L。另有報導真菌激發子培養液加入到蛹擬青黴的培養物中，發現疫黴、灰黴做激發子菌株可提高蟲草素的含量(李祝等2006)。
[0009]啤酒酵母的利用:在啤酒發酵過程中產生大量的啤酒酵母泥，一般都作為廢液排放，回收啤酒酵母可減少啤酒廢水汙染負荷50% (COD)(鄒法俊，2002)。啤酒酵母細胞內含有豐富的蛋白質、核酸、維生素、碳水化合物、類脂物質、礦物質等多種營養成分(李興革等，1998)，酵母菌體含蛋白質之高是任何動植物無可比量的，乾物質含有50%的蛋白質，含有18種胺基酸等，還有人體必需的8種胺基酸；富含維生素V B2、B6、B12，達到酵母乾重的0.7%，而且多以磷酸酯形式存在，還含有維生素D、E (管教儀，1982)、麥留醇、煙酸、葉酸、泛酸、肌醇等；含有有機酸、糖和14種礦物質磷、鐵、鈣、鈉、鉀、鎂等，以及豐富的酶系蛋白酶、磷脂酶、胰蛋白酶及輔酶A和生理活性物質，如輔酶A、輔酶Q、輔酶1、細胞色素C、凝血質、穀胱甘肽等。目前我國的啤酒產量連續多年位居世界第一，生產已經形成集團化、規模化，但有效成分沒有得到充分利用，造成了資源浪費，汙染了環境。日本在啤酒酵母約有12% -13%用於強化飼料生產，50%用於混合飼料生產。上述已報導酵母是冬蟲夏草的良好培養基，可提供良好的氮源、維生素、促生長因子等，本專利擬採用廉價的啤酒廢酵母培養蟲草，達到降低成本，廢物利用的目的。
[0010]啤酒糟的利用:啤酒糟為啤酒生產過程糖化階段的廢棄物，主要成分是麥芽殼和未糖化的不溶性高分子物質，含18種胺基酸，含有大量纖維素、半纖維素和麥膠等大分子物質(管敦儀，1998);還含有豐富的B族維生素(宋正明等，1999)，此外還含有Ca、鉀、P等微量元素，其營養價值及開發價值極高(邱峰，2007)。
[0011]因此急需要研究發明一種利用啤酒酵母、啤酒糟作為固態發酵的培養基，變廢為寶生產冬蟲夏草菌飼料添加劑的方法及產品，以減少環境汙染。


【發明內容】

[0012]本發明的目的是提供一種利用啤酒糟作為固態發酵的培養基生產冬蟲夏草菌飼料添加劑的方法及產品；
本發明的目的是以如下方式實現的:一種生產冬蟲夏草菌飼料添加劑的方法:其採用啤酒乾酵母和啤酒糟為固態發酵培養基，以液態發酵大量培養北冬蟲夏草菌種後大量接種量於啤酒廢棄物固態培養基，於一種淺盤式的固體發酵設備上淺盤培養冬蟲夏草菌菌絲體，讓蟲草生長到菌絲體覆蓋滿培養基並完成轉色後即乾燥粉碎作為飼料添加劑，生產步驟:
一級種子培養:採用三角瓶培養；培養基(g /L):馬鈴薯200，葡萄糖20，蛋白腖2，KH2PO4 0.5，MgSO4.7H20 1.0,瓊脂20 ; pH自然；斜面轉接北冬蟲夏草菌株於200mL/500 mL三角瓶中，接種量5%-10%，放在搖床上，轉速130 r/min -150 r/min，於(18-25)±1 °C 培養 3 d-5 d ;
二級種子培養:採用液體機械攪拌發酵罐培養；培養基:啤酒糟30 g-50 g、葡萄糖20g、啤酒乾酵母 5 g-20 g, KH2PO4 3 g、MgS04.7H20 1.5 g，加水至 1000 mL，pH 5.5-6.5,121°C滅菌30 min -45 min ;接入一級菌種，接種量5%_10%，通風V/V:0.5-0.8 ;轉速:130 r/min -160 r/min ;罐壓:0.05 MPa, 20°C _25°C培養 3 d -5 d ;
固體培養基的配製:含水80%啤酒糟25%-30%或幹啤酒糟10%-20%，大米粉0%_5%、麥麩 40%-60%、蠶蛹粉或豆柏 0%-10%、啤酒乾酵母 10%-20%、KH2PO4 0.05%-0.1%、MgSO40.05%-0.1%，固體原料與水的重量比為1:0.5-0.6，pH值5.0-7.0 ;採用蒸汽121°C滅菌45min,熟化30 min,滅菌後培養基含水55%_60% ；
接種室內接種:接種室內採用臭氧消毒器消毒，消毒後通入無菌空氣；接種量按重量比8%-15%接入二級菌種，接入液體菌種後拌勻，接種後的培養基溼度應低於65 %，在帶假底的淺盤(14)上裝料厚度5 cm-10 cm，輕輕刮平培養基表面，每10 cm -15 cm見方四角各鑽一個直徑2 cm粗的孔到培養基底部；然後裝在靜態固態發酵生物反應器罐體(12)內的帶孔的固定床(13)上進行發酵培養；
發酵培養:固體發酵開始溫度控制在15 0C -20 °C，每日通風30 min-45 min，陰暗下通氣培養3 d左右，菌絲基本布滿培養基，橙色光50 Ix -100 Ix每日光照14 h，溫度控制在20°C -25°C，空氣溼度70%-85%，每日通風80 min-120 min，分3次通風，第6 d_8 d菌絲徹底布滿培養基，培養基完全轉色發酵結束，開始乾燥；
乾燥:在靜態固態發酵生物反應器內直接通風乾燥，乾燥控制溫度在30°C -40°C，鼓風乾燥12 h以上，水份小於10%;菌絲體連同固體培養基幹燥後，粉碎過40目-60目篩，得蟲草粉含蟲草素5 mg/g -8.8 mg/g,多糖含量3.5%-7% ；
復配製成添加劑產品:以麥飯石、澱粉為稀釋保護劑，預混合上述乾燥過篩後的蟲草粉得飼料添加劑預混料，使預混料每克含蟲草粉10%-20% ;產品呈白色的粉末狀，具有冬蟲夏草蟲體特有的味道，無異味；混合均勻，各衛生指標符合國標。
[0013]上述工藝使用發酵設備:為淺盤式靜態固態發酵設備，其包括罐體(12)，罐體
(12)內有帶孔的固定床(13)、帶孔的固定床(13)是多層帶孔的層格，帶假底的淺盤(14)置於帶孔的固定床(13)上、帶假底的淺盤(14)是網狀假底孔徑小於Imm的淺盤，帶孔的固定床(13)每層間距35 cm -50 cm,每層帶孔的固定床的下方設有照明燈(5);罐體(12)內底層設有無菌空氣及蒸汽管(4)，其經過無菌空氣入口(6)與加熱、冷卻和增溼自動節裝置
(I)和無菌膜過濾裝置(2)與空壓機(3)相聯接。罐體(12)上還聯接有溫度、溼度自動測量和調節系統(7)、空氣出口(8)、蒸汽排出口(9)、蒸汽入口(10)、壓力表(11);通過無菌空氣的增溼或加熱或冷卻或綜合調整、循環(15)來調整控制發酵罐內的溫、溼度和氧等條件；在罐內直接採用空氣乾燥，實現發酵、乾燥在一個罐內完成。
[0014]本專利採用廉價的啤酒乾酵母和啤酒糟為原料、首先通過液體發酵快速生產大量菌絲，再大接種量接種到固體培養基進行固體發酵，不僅可以提高培養基碳源、胺基酸、維生素等，還可以提高培養基的透氣性，促進冬蟲夏草對氧的吸收和熱的傳質，可以起到變廢為寶的作用，減少環境汙染，是綠色的生產工藝。其縮短了發酵周期，減少汙染，降低生產成本，能高效生產低成本的北冬蟲夏草菌絲體作為飼料添加劑。
[0015]下面將結合附圖對本發明進一步說明。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0016]圖1工藝流程圖圖2固態發酵罐示意圖
圖3帶孔的固定床與帶假底的盤示意圖
1加熱、冷卻和增溼自動可循環調節裝置；2無菌膜過濾裝置；3空壓機；4環形側孔無菌空氣及蒸汽管；5照明燈；6無菌空氣入口 ；7溫度、溼度自動測量和調節系統；8空氣出口 ；9蒸汽排出口 ；10蒸汽入口 ；11壓力表；12罐體；13帶孔的固定床；14帶假底的淺盤；15、增溼或加熱或冷卻或綜合調整循環。

【具體實施方式】
[0017]實旋例1
一級種子培養:培養基(g /L):馬鈴薯200，葡萄糖20，蛋白腖2，KH2P04 0.5，MgS04.7Η20 1.0，瓊脂20，pH自然。斜面轉接北冬蟲夏草菌株與高壓蒸汽滅菌的含上述培養基200 mL/500 mL三角瓶中，放在搖床上，轉速150 r/min，於18 °C培養4 d。
[0018]二級種子培養:採用鎮江東方生物工程設備技術有限責任公司生產7 L液體機械攪拌發酵罐培養。培養基:啤酒糟35 g、葡萄糖20 g、啤酒乾酵母10 g、KH2P04 3 g、MgS04.7Η20 1.5 g，加水至 1000 mL，pH 6.5，121 °C滅菌 40 min。通風 V/V:0.6 ;轉速:150r/min ;罐壓:0.05 MPa，20°C培養 3.5 d。
[0019]固體培養基配方:幹啤酒糟15%，大米粉5%、麥麩65%、蠶蛹粉5%、啤酒乾酵母10%、ΚΗ2Ρ04 0.05%、MgS04 0.05%，料水比為 1:0.6，pH值7.0。1211:蒸汽滅菌45 min，熟化30 min,即可。接種室採用臭氧消毒器，消毒後通入無菌空氣。接種量按重量比10%，接入二級菌種，接入液體菌種後拌勻，接種後的培養基溼度65%，在帶假底的淺盤(14)上裝料厚度6.5 cm,輕輕刮平培養基表面，每10 cm見方四角各鑽一個直徑2 cm粗的孔到培養基底部；然後裝在靜態固態發酵生物反應器罐體(12)內的帶孔的固定床(13)上進行發酵培養。
[0020]發酵開始溫度控制在15 V-20 °C，每日通風30 min，陰暗下通氣培養3 d後，菌絲基本布滿培養基，橙色光100 lx每日光照14 h，溫度控制在20 °C,空氣溼度75 %，每日通風100 min，分早、午、晚三次通風，第7 d菌絲徹底布滿培養基，培養基完成轉色發酵結束。
[0021]乾燥:發酵結束後，在罐內直接開始乾燥。溫度乾燥控制在30 °C，鼓風乾燥16 h，水份8%。菌絲體連同固體培養基幹燥後，粉碎過40目篩，得蟲草粉含蟲草素5.58 mg/g，多糖含量5.3%。
[0022]稱量蟲草粉30 kg與70 kg的澱粉進行一級預混至100 kg。後稱取100 kg麥飯石粉加入混合機中，再加100 kg澱粉，開機預混2 min，停機；再加入上述I中混合物100kg，開機預混2 min，停機，放料。最終添加劑產品含冬蟲夏草菌線絲體10%。產品呈白色的粉末狀，具有冬蟲夏草蟲體特有的味道，無異味，各衛生指標符合國標。
[0023]選擇12頭28 ±2 d斷奶的仔豬，體重7.65 ± 1.0 kg，隨機分成2組，試驗組仔豬每隻每天在日常飼料中混合50 g的上述冬蟲夏草添加劑，對照組多添加50 g日常飼料。2wk試驗組仔豬腹瀉發病率比對照組分別下降43.1%。對照組在攻毒後第二天即有第一頭仔豬發生腹瀉，而服用冬蟲夏草添加劑組一直到第7 d才發現第一頭仔豬腹瀉。用冬蟲夏草添加劑餵仔豬，日增重提高5.4%，而對照組則日增重提高2.3%，冬蟲夏草添加劑餵仔豬飼料轉化率提高5.8%。這可能是由於冬蟲夏草蟲草具有增加免疫力，抗應激和抗菌作用。
【權利要求】
1.一種生產冬蟲夏草菌飼料添加劑的方法:其特徵是採用啤酒乾酵母和啤酒糟為固態發酵培養基，以液態發酵大量培養北冬蟲夏草菌種後大量接種量於啤酒廢棄物固態培養基，於一種淺盤式的固體發酵設備上淺盤培養冬蟲夏草菌菌絲體，讓蟲草生長到菌絲體覆蓋滿培養基並完成轉色後即乾燥粉碎作為飼料添加劑，生產步驟: 一級種子培養:採用三角瓶培養；培養基(g /L):馬鈴薯200，葡萄糖20，蛋白腖2，KH2PO4 0.5，MgSO4.7H20 1.0,瓊脂20 ; pH自然；斜面轉接北冬蟲夏草菌株於200mL/500 mL三角瓶中，接種量5%-10%，放在搖床上，轉速130 r/min -150 r/min，於(18-25)±1 °C 培養 3 d-5 d ; 二級種子培養:採用液體機械攪拌發酵罐培養；培養基:啤酒糟30 g-50 g、葡萄糖20g、啤酒乾酵母 5 g-20 g, KH2PO4 3 g、MgS04.7H20 1.5 g，加水至 1000 mL，pH 5.5-6.5,121°C滅菌30 min -45 min ;接入一級菌種，接種量5%_10%，通風V/V:0.5-0.8 ;轉速:130 r/min -160 r/min ;罐壓:0.05 MPa, 20°C _25°C培養 3 d -5 d ; 固體培養基本配製:含水80%啤酒糟25%-30%或幹啤酒糟10%-20%，大米粉0%_5%、麥麩 40%-60%、蠶蛹粉或豆柏 0%-10%、啤酒乾酵母 10%-20%、KH2PO4 0.05%-0.1%、MgSO40.05%-0.1%，固體原料與水的重量比為1:0.5-0.6，pH值5.0-7.0 ;採用蒸汽121°C滅菌45min,熟化30 min,滅菌後培養基含水55%_60% ； 接種室內接種:接種室內採用臭氧消毒器消毒，消毒後通入無菌空氣；接種量按重量比8%-15%接入二級菌種，接入液體菌種後拌勻，接種後的培養基溼度應低於65 %，在帶假底的淺盤(14)上裝料厚度5 cm-10 cm，輕輕刮平培養基表面，每10 cm -15 cm見方四角各鑽一個直徑2 cm粗的孔到培養基底部；然後裝在靜態固態發酵生物反應器罐體(12)內的帶孔的固定床(13)上進行發酵培養； 發酵培養:固體發酵開始溫度控制在15 0C -20 °C，每日通風30 min-45 min，陰暗下通氣培養3 d左右，菌絲基本布滿培養基，橙色光50 Ix -100 Ix每日光照14 h，溫度控制在20°C -25°C，空氣溼度70%-85%，每日通風80 min-120 min，分3次通風，第6 d_8 d菌絲徹底布滿培養基，培養基完全轉色發酵結束，開始乾燥； 乾燥:在靜態固態發酵生物反應器內直接通風乾燥，乾燥控制溫度在30°C -40°C，鼓風乾燥12 h以上，水份小於10%;菌絲體連同固體培養基幹燥後，粉碎過40目-60目篩，得蟲草粉含蟲草素5 mg/g -8.8 mg/g,多糖含量3.5%-7% ； 復配製成添加劑產品:以麥飯石、澱粉為稀釋保護劑，預混合上述乾燥過篩後的蟲草粉得飼料添加劑預混料，使預混料每克含蟲草粉10%-20% ;產品呈白色的粉末狀，具有冬蟲夏草蟲體特有的味道，無異味，混合均勻，各衛生指標符合國標。
2.—種冬蟲夏草菌飼料添加劑，其特徵是採用上述方法生產的一種冬蟲夏草菌飼料添加劑。
【文檔編號】A23K1/18GK104381615SQ201410757452
【公開日】2015年3月4日 申請日期:2014年12月12日 優先權日:2014年12月12日
【發明者】鄒雙全, 鄒芳芳, 胡敏傑, 黃福墩, 吳麗雲, 馮力彪, 李丹, 賴慧玲, 季豔林, 梁文賢, 黃銘星 申請人:福建農大科技開發總公司