從咖啡果中分離2-(4-甲氧基苯氧基)-丙酸的工業化方法

2023-05-23 13:45:11

專利名稱：從咖啡果中分離2-(4-甲氧基苯氧基)-丙酸的工業化方法
技術領域：
本發明屬於食品添加劑中的2-(4-甲氧基苯氧基)-丙酸，特別是涉及一種具有抑 制甜味、從咖啡果中分離2- -甲氧基苯氧基)_丙酸的方法，產品純度高達99. 9%以上， 2-(4-甲氧基苯氧基)_丙酸可作為新型食品添加劑應用於月餅、糖果、蜜餞等高糖食品中 用以抑制過高的甜味。
背景技術：
甜味抑制劑是通過阻塞甜度和味覺的受體，從而控制或降低含糖食品的甜度的一 類新型添加劑。國內很多傳統食品，如蜜餞、月餅、巧克力等，都是以蔗糖作為防腐劑的，在 達到防腐的同時，不同程度的存在著過甜的問題。而使用了甜味抑制劑後，既能發揮蔗糖的 防腐、改善質構等功能，又不會使食品過甜而影響口感。因此甜味抑制劑的應用前景十分廣 泛。我們在中國發明專利ZL200510101321. 1已報導過一種天然甜味抑制劑三萜烯糖 苷的工業化生產方法。它是從森林匙羹藤酸(Glymnemic acid)、Hodulcin (存在於鼠李科 植物Hoveniadulcis Thumb.的葉子中)及某些棗屬植物(如大棗、酸棗)葉、種子、果實中 分離出來的。本專利報導的2-(4-甲氧基苯氧基)_丙酸是另一種對蔗糖、葡萄糖及其他所有甜 味物質都有效的甜味抑制劑。目前，國內外生產2- -甲氧基苯氧基)_丙酸主要採用化學 合成法，該過程易產生有毒副產物及有毒化學異構體，給食品安全造成隱患。已知2- -甲 氧基苯氧基)-丙酸天然存在於咖啡豆中，但天然咖啡豆中的2- (4-甲氧基苯氧基)-丙酸 含量僅為0. 55 1. ang/kg，顯然沒有經濟價值。世界上第一株咖啡樹是在非洲之角發現的，咖啡的種植始於15世紀。它在植物分 類學中屬於茜草科常綠灌木，側枝水平伸展，對生，偶有三枝輪生者；單葉對生，花是2 10 朵叢生於葉腋。果實是核果橢圓形，初果為深綠色，成熟時黃紅色或紫紅色，咖啡的果實是 由外皮、果肉、內果皮、銀皮，和被上述幾層包在最裡面的種子(咖啡豆)所形成，種子位於 果實中心部份。到目前為止，尚未發現以咖啡果實為原料，生產出具有抗甜活性的2- -甲氧基 苯氧基)_丙酸的專利文獻報導。本發明中採用溶劑提取和大孔樹脂純化相結合的方法，制 得高純度的天然2- -甲氧基苯氧基)_丙酸提取物。

發明內容
本發明所要解決的技術問題在於針對上述問題，利用植物細胞培養技術，通過咖 啡豆細胞懸浮培養法生產2- (4-甲氧基苯氧基)-丙酸，具有生產周期短，產率高，成本低等 特點。本發明涉及一種抑制甜味、天然高純度2- (4-甲氧基苯氧基)-丙酸的工業化生產 方法。該提取物中抗甜活性的2- -甲氧基苯氧基)-丙酸含量達99.9%以上。製成的產品可用於抑制某些食品如糖果、蜜餞、月餅等過高的甜度。本發明的目的通過如下技術方案實現從咖啡果中分離2- -甲氧基苯氧基)_丙酸的方法，包括如下步驟(1)選擇咖啡子葉作為外植體，誘導愈傷組織產生咖啡子葉經過消毒，接種於添 加1 lOymol/L 2，4-二氯苯氧乙酸作為生長素和0.4 0.5 μ mol/L 6-呋喃甲基腺嘌呤 作為細胞分裂素的MS基礎培養基上，溫度為25 30°C，培養3 5周，產生愈傷組織，愈傷 組織經過繼代培養後，挑選優選質地鬆散、顏色黃白、表面溼潤的顆粒狀愈傷組織，生長良 好的愈傷組織培養形成細胞懸浮培養體系，用Co6°r射線以4000r、7000r、10000r、15000r、 20000r和25000r五個不同輻射劑量進行輻射處理，篩選出2- -甲氧基苯氧基)_丙酸 含量高的培養物，分離出原生質，近一步培養獲得完整植株，獲得遺傳性穩定一致的突變咖 啡種苗品種1 ；該品種咖啡果實中的2-4-(甲氧基苯氧基)_丙酸平均含量達到0. 2% 0. 8% ；(2)將經過步驟⑴原生質誘變育種的咖啡樹所結的咖啡果實幹燥、粉碎，過60 80目篩，用重量濃度為60% 95%的乙醇回流提取2 5次，每次回流1 4h ；濾去濾渣， 提取液真空濃縮至不含乙醇，用60°C 90°C熱水溶解後溶劑萃取2 5次；所述的溶劑為 石油醚、乙醚、乙酸乙酯、正己烷、環己烷、氯仿和/或二氯甲烷；(3)水層用水飽和的正丁醇萃取2 5次，合併萃取液，減壓濃縮並乾燥得 2-(4-甲氧基苯氧基)丙酸粗提物；(4)將粗提物用60°C 90°C熱水溶解，上大孔吸附樹脂柱，先用2 5倍柱體積 的水洗，棄去洗脫液，再用2 5倍柱體積的重量濃度為10% 40%的乙醇洗脫，棄去洗脫 液，最後用2 5倍柱體積的質量濃度為40% 80%的乙醇洗脫，收集洗脫液；(5)減壓回收乙醇，真空乾燥或噴霧乾燥得2- -甲氧基苯氧基)_丙酸精提物；(6)精提物在pH = 2-6的酸性條件下進行2 3次重結晶，製得2- -甲氧基苯 氧基)_丙酸。所述的咖啡果實包括外皮、果肉、內果皮、銀皮和咖啡豆。愈傷組織繼代培養方法是優選生長良好，祛除發黃的愈傷組織，接種於與愈傷組 織誘導相同的培養基中，溫度為25 30°C，暗培2 3周，期間更換培養基1 3次。所述細胞懸浮培養體系的形成是在愈傷組織繼代培養後，將篩選出的愈傷組織放 入與愈傷組織誘導相同的液體培養基中，溫度為25 30°C，轉速為120r/min，暗培養8 12天，培養出懸浮單細胞系。大孔吸附樹脂包括ZTC-I、XAD-4、AB-8、X_5、D-10U D-16、DA-201、S_8、H-103、 NK-107、CAD-40和SIP系列各種規格和型號大孔吸附樹脂。本發明涉及的抗甜活性的2- -甲氧基苯氧基)_丙酸的生產工藝如下(1)將植物原料乾燥、粉碎，過60 80目篩，用60% 95%的乙醇回流提取2 5次，每次回流1 4h;(2)濾去濾渣，提取液真空濃縮至無醇味，用熱水溶解後溶劑萃取2 5次；(3)水層用水飽和的正丁醇萃取2 5次，合併萃取液，減壓濃縮並乾燥得 2-(4-甲氧基苯氧基)丙酸粗提物；(4)將粗提物用熱水溶解，上大孔吸附樹脂柱，先用2 5倍柱體積的水洗，棄去洗脫液，再用2 5倍柱體積的10% 40%的乙醇洗脫，棄去洗脫液，最後用2 5倍柱體積 的40 % 80 %的乙醇洗脫，收集40 % 80 %乙醇洗脫液；(5)減壓回收乙醇，真空乾燥或噴霧乾燥得244-甲氧基苯氧基)丙酸精提物。(6)精提物在pH = 2-6的酸性條件下進行3次重結晶。所使用的原料包括經特別育種的咖啡屬植物的葉、種子、果實各個部位。回流提取 劑乙醇的優選濃度為90%，優選提取次數為3次，每次池。熱水溶解後萃取劑是石油醚、乙 醚、乙酸乙酯、正己烷、環己烷、氯仿、二氯甲烷或它們的複合物(如石油醚/乙酸乙酯、乙醚 /乙酸乙酯)，優選萃取次數為3次。水飽和的正丁醇的優選萃取次數為萃取3次。採用 的大孔吸附樹脂，包括 ZTC-I，XAD-4, AB-8, X_5，D-101，D-16，DA-201，S_8，H-103，NK-107， CAD-40, SIP系列等各種規格和型號，優選的型號為X-5，D-101, AB-8。上大孔吸附樹脂柱 時，先用4倍柱體積的水洗，再用3倍柱體積的20% 30%的乙醇洗脫，最後用3倍柱體積 的70% 80%的乙醇洗脫。製得的2- -甲氧基苯氧基)丙酸精提物，其特徵為白色至淺 黃色，粉末狀，甜味，總得率0. 0.5%，純度80% 85%。精提物在pH = 2-6的酸性 條件下進行3次重結晶，純度提高至99. 9%。本發明的甜味抑制試驗顯示該提取物具有很 好的抗甜活性，比文獻報導的效果要好。與現有技術相比，本發明具有如下優點1、生產成本較低。育種後咖啡果實中的2-4-(甲氧基苯氧基)_丙酸平均含量達 到0. 2% 0. 8 %，含量較自然咖啡果中的含量高很多，具備工業化生產的經濟價值；2、提取工藝簡單。採用此提取工藝步驟少，提取過程中有效成分損失少，提取過程 所用的有機溶劑，可以收集循環使用，不存在副產物汙染環境問題。具體實施方法下面結合實施例對本發明作進一步的說明，但是實施例並不構成對本發明要求保 護範圍的限制。實施例1採用原生質誘變育種2- -甲氧基苯氧基)_丙酸含量高的咖啡種苗。首先選 擇咖啡子葉作為外植體，誘導愈傷組織產生，具體工藝為咖啡子葉經過消毒，接種於添加 1 μ mol/L 2，4_ 二氯苯氧乙酸作為生長素和0. 5 μ mol/L 6-呋喃甲基腺嘌呤作為細胞分裂 素的MS基礎培養基上(以在培養基中的濃度計，MS基礎培養基成分組成為(單位mg/L) KNO3 1900, NH4NO3 1650, K2HPO4 170，MgSO4 ·7Η20 370，CaCl2 ·2Η20 440, KI 0. 83, H3BO3 6.2， MnSO4 · 4Η20 22. 3，ZnS04 · 7H20 8. 6，NaMoO4 · 2H20 0. 25，CuS04 · 5H20 0. 025，CoCl2 · 6H20 0. 025，Na2 .EDTA 37. 3，FeSO4 ·7Η20 27. 8，蔗糖 30000，肌醇 100，鹽酸 0. 5，鹽酸吡哆醇 0. 5， 鹽酸硫胺素0. 4，甘氨酸幻，溫度為^°C，培養4周，產生愈傷組織，愈傷組織經過繼代培養 後(具體工藝為優選生長良好，祛除發黃的愈傷組織，接種於與愈傷組織誘導相同的培養 基中，溫度為，暗培3周，期間更換培養基1次)，挑選優選質地鬆散、顏色黃白、表面溼 潤的顆粒狀愈傷組織，生長良好的愈傷組織培養形成細胞懸浮培養體系(具體工藝為將 篩選出的愈傷組織放入與愈傷組織誘導相同的液體培養基中，溫度為^°C，轉速為120r/ min,暗培養10天，培養出懸浮單細胞系)，用Co6°r射線以不同輻射劑量4000r，7000r, IOOOOr, 15000r, 20000r, 25000r五個劑量進行輻射處理，篩選出2- (4-甲氧基苯氧基)-丙 酸含量高的培養物，分離出原生質，近一步培養獲得完整植株，從而獲得遺傳性穩定一致的
5突變咖啡種苗品種PK。經測試，該品種咖啡果實中的2-4-(甲氧基苯氧基)_丙酸平均含量 達到0. 2% 0. 8%，已達到工業化分離的經濟要求。取1 品種的咖啡豆粗粉500kg，用90%的乙醇回流提取3次，每次回流池。濾去 濾渣，提取液真空濃縮至無醇味；用70°C熱水溶解後經乙醚萃取3次，所得水層再用水飽和 的正丁醇萃取3次，合併萃取液，減壓濃縮並乾燥得粗提物；將其用70°C熱水溶解，上D-101 型大孔吸附樹脂柱，先用4倍柱體積的水洗，再用3倍柱體積20%質量濃度的乙醇洗脫，棄 去洗液，最後用3倍柱體積80%質量濃度的乙醇洗脫，收集80%質量濃度的乙醇洗脫液，減 壓回收乙醇，真空乾燥得2-(4-甲氧基苯氧基)丙酸精提物2. ^ig。精提物再在pH3，15°C的 酸性條件重結晶3次，得到2- -甲氧基苯氧基)丙酸結晶物1. 9kg。全過程得率0. 38%, 終產品為白色粉末，純度99. 9 %。實施例2採用原生質誘變育種2- -甲氧基苯氧基)_丙酸含量高的咖啡種苗。首先選 擇咖啡子葉作為外植體，誘導愈傷組織產生，具體工藝為咖啡子葉經過消毒，接種於添加 5umol/L 2，4-二氯苯氧乙酸作為生長素和0.4 μ mol/L 6-呋喃甲基腺嘌呤作為細胞分裂 素的MS基礎培養基(以在培養基中的濃度計，MS基礎培養基成分組成為(單位mg/L) KNO3 1900, NH4NO3 1650, K2HPO4 170，MgSO4 ·7Η20 370，CaCl2 ·2Η20 440, KI 0. 83, H3BO3 6.2， MnSO4 · 4Η20 22. 3，ZnS04 · 7H20 8. 6，NaMoO4 · 2H20 0. 25，CuS04 · 5H20 0. 025，CoCl2 · 6H20 0. 025，Na2 · EDTA 37. 3，FeSO4 · 7H20 27. 8，蔗糖 30000，肌醇 100，鹽酸 0. 5，鹽酸吡哆醇 0. 5，鹽酸硫胺素0.4，甘氨酸幻上，溫度為25°C，培養6周，產生愈傷組織。愈傷組織經過 繼代培養後(具體工藝為優選生長良好，祛除發黃的愈傷組織，接種於與愈傷組織誘導相 同的培養基中，溫度為25°C，暗培3周，期間更換培養基2次)，挑選優選質地鬆散、顏色黃 白、表面溼潤的顆粒狀愈傷組織，生長良好的愈傷組織培養形成細胞懸浮培養體系(具體 工藝為將篩選出的愈傷組織放入與愈傷組織誘導相同的液體培養基中，溫度為25V，轉 速為120r/min，暗培養12天，培養出懸浮單細胞系)，用Co6°r射線以不同輻射劑量4000r， 7000r, IOOOOr, 15000r, 20000r, 25000r五個劑量進行輻射處理，篩選出2- -甲氧基苯氧 基)_丙酸含量高的培養物，分離出原生質，近一步培養獲得完整植株，從而獲得遺傳性穩 定一致的突變咖啡種苗品種Hi。該品種咖啡果實中的2-4-(甲氧基苯氧基)_丙酸平均含 量達到0. 2% 0. 8%，已達到工業化分離的經濟要求。取1 品種的咖啡果外層果肉粉500kg，用85%的乙醇回流提取2次，每次回流2h。 濾去濾渣，提取液真空濃縮至無醇味；用80°C熱水溶解後經乙酸乙酯萃取2次，所得水層 再用水飽和的正丁醇萃取2次，合併萃取液，減壓濃縮並乾燥得粗提物；將其用80°C熱水溶 解，上D-101型大孔吸附樹脂柱，先用3倍柱體積的水洗，再用3倍柱體積15%的乙醇洗脫， 棄去洗液，最後用3倍柱體積75%的乙醇洗脫，收集75%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，噴霧 乾燥得2-甲氧基苯氧基)丙酸精提物3. ^g。精提物再在pH2，10°C的酸性條件重結晶 3次，得到2- -甲氧基苯氧基)丙酸結晶物2』kg。全過程得率0.5%，終產品為白色粉 末，純度99.9%。實施例3採用原生質誘變育種2-(4-甲氧基苯氧基)_丙酸含量高的咖啡種苗。首先選擇咖 啡子葉作為外植體，誘導愈傷組織產生，具體工藝為子葉經過消毒，接種於添加ΙΟμπιοΙ/L 2，4_ 二氯苯氧乙酸作為生長素和0.5ymol/L 6-呋喃甲基腺嘌呤作為細胞分裂素的 MS基礎培養基(以在培養基中的濃度計，MS基礎培養基成分組成為(單位mg/L) =KNO3 1900，NH4NO3 1650，K2HPO4 170，MgSO4 · 7H20 370，CaCl2 · 2H20 440，KI 0. 83，H3BO3 6. 2， MnSO4 · 4H20 22. 3，ZnS04 · 7H20 8. 6，NaMoO4 · 2H20 0. 25，CuS04 · 5H20 0. 025，CoCl2 · 6H20 0. 025，Na2 .EDTA 37. 3，FeSO4 ·7Η20 27. 8，蔗糖 30000，肌醇 100，鹽酸 0. 5，鹽酸吡哆醇 0. 5， 鹽酸硫胺素0. 4，甘氨酸2. 0)上，溫度為30°C，培養3周，產生愈傷組織)，愈傷組織經過 繼代培養後(具體工藝為優選生長良好，祛除發黃的愈傷組織，接種於與愈傷組織誘導相 同的培養基中，溫度為30°C，暗培2周，期間更換培養基1次)，挑選優選質地鬆散、顏色黃 白、表面溼潤的顆粒狀愈傷組織，生長良好的愈傷組織培養形成細胞懸浮培養體系(具體 工藝為將篩選出的愈傷組織放入與愈傷組織誘導相同的液體培養基中，溫度為30°C，轉 速為120r/min，暗培養8天，培養出懸浮單細胞系)，用Co6°r射線以不同輻射劑量4000r， 7000r, IOOOOr, 15000r, 20000r, 25000r五個劑量進行輻射處理，分離出原生質，近一步培養 獲得完整植株，從而獲得遺傳性穩定一致的突變咖啡種苗品種冊。該品種咖啡果實中的 2-4-(甲氧基苯氧基)_丙酸平均含量達到0. 2% 0. 8%，已達到工業化分離的經濟要求。取1 品種的咖啡果內果皮粗粉500kg，用95 %的乙醇回流提取2次，每次回 流1.證。濾去濾渣，提取液真空濃縮至無醇味；用90°C熱水溶解後經石油醚/乙酸乙酯 (1 l，v/v)萃取3次，所得水層再用水飽和的正丁醇萃取3次，合併萃取液，減壓濃縮並幹 燥得粗提物；將其用90°C熱水溶解，上XAD-4型大孔吸附樹脂柱，先用4倍柱體積的水洗， 再用3倍柱體積30 %的乙醇洗脫，棄去洗液，再用3倍柱體積70 %的乙醇洗脫，收集70 %乙 醇洗脫液，減壓回收乙醇，噴霧乾燥得2- -甲氧基苯氧基)丙酸精提物1.9kg。精提物再 在pH2，10°C的酸性條件重結晶2次，得到244-甲氧基苯氧基)丙酸結晶物1. 3kg。全過 程得率0.沈％，終產品為白色粉末，純度99. 9 %。試驗例1 本發明分離的2- -甲氧基苯氧基)丙酸對各種甜味物質的甜度抑制作用。選 定20名味覺良好的受試者，試驗用的甜味劑為蔗糖、結晶果糖、阿斯巴甜三種，濃度分別為 20%U0%,0. 1%，不加提取物時的甜度均設為100。向上述試驗樣中加入不同量的提取物 (50、100、150、200mg/kg)，混勻後，受試者品嘗並得出各樣品相當於參照樣甜度的分數。用 甜度分數的平均值來評定抑制效果，結果見表1。在品嘗任意兩個樣品或參照樣之間，都用 蒸餾水漱口，以保證不被前一次殘留的味感幹擾。結論本發明244-甲氧基苯氧基)丙酸提取物對蔗糖、結晶果糖、阿斯巴甜均有 很好的甜度抑制作用。用量為100mg/kg時，即可使上述甜味劑的甜度下降一半左右；用量 為200mg/kg時，甜度基本消失。該提取物對甜味的抑制不僅具有廣泛性和高效性，而且不 會引入任何雜味。表1 2-(4-甲氧基苯氧基)丙酸對各種甜物質的甜度抑制作用
權利要求
1.從咖啡果中分離2- -甲氧基苯氧基)_丙酸的方法，其特徵在於包括如下步驟(1)選擇咖啡子葉作為外植體，誘導愈傷組織產生咖啡子葉經過消毒，接種於添加 1 lOymol/L 2，4-二氯苯氧乙酸作為生長素和0.4 0.5 μ mol/L 6-呋喃甲基腺嘌呤作 為細胞分裂素的MS基礎培養基上，溫度為25 30°C，培養3 5周，產生愈傷組織，愈傷 組織經過繼代培養後，挑選優選質地鬆散、顏色黃白、表面溼潤的顆粒狀愈傷組織，生長良 好的愈傷組織培養形成細胞懸浮培養體系，用Co6°r射線以4000r、7000r、10000r、15000r、 20000r和25000r五個不同輻射劑量進行輻射處理，篩選出2- -甲氧基苯氧基)_丙酸 含量高的培養物，分離出原生質，近一步培養獲得完整植株，獲得遺傳性穩定一致的突變咖 啡種苗品種1 ；該品種咖啡果實中的2-4-(甲氧基苯氧基)_丙酸平均含量達到0. 2% 0. 8% ；(2)將經過步驟(1)原生質誘變育種的咖啡樹所結的咖啡果實幹燥、粉碎，過60 80 目篩，用重量濃度為60% 95%的乙醇回流提取2 5次，每次回流1 4h ；濾去濾渣，提 取液真空濃縮至不含乙醇，用60°C 90°C熱水溶解後溶劑萃取2 5次；所述的溶劑為石 油醚、乙醚、乙酸乙酯、正己烷、環己烷、氯仿和/或二氯甲烷；(3)水層用水飽和的正丁醇萃取2 5次，合併萃取液，減壓濃縮並乾燥得2- -甲氧 基苯氧基)丙酸粗提物；(4)將粗提物用60°C 90°C熱水溶解，上大孔吸附樹脂柱，先用2 5倍柱體積的水 洗，棄去洗脫液，再用2 5倍柱體積的重量濃度為10% 40%的乙醇洗脫，棄去洗脫液， 最後用2 5倍柱體積的質量濃度為40% 80%的乙醇洗脫，收集洗脫液；(5)減壓回收乙醇，真空乾燥或噴霧乾燥得2- -甲氧基苯氧基)_丙酸精提物；(6)精提物在pH= 2-6的酸性條件下進行2 3次重結晶，製得2- -甲氧基苯氧 基)_丙酸。
2.根據權利要求1所述的方法，其特徵在於所述的咖啡果實包括外皮、果肉、內果皮、 銀皮和咖啡豆。
3.根據權利要求1所述的方法，其特徵在於愈傷組織繼代培養方法是優選生長良好， 祛除發黃的愈傷組織，接種於與愈傷組織誘導相同的培養基中，溫度為25 30°C，暗培2 3周，期間更換培養基1 3次。
4.根據權利要求1所述的方法，其特徵在於所述細胞懸浮培養體系的形成是在愈傷 組織繼代培養後，將篩選出的愈傷組織放入與愈傷組織誘導相同的液體培養基中，溫度為 25 30°C，轉速為120r/min，暗培養8 12天，培養出懸浮單細胞系。
5.根據權利要求1所述的方法，其特徵在於使用的是大孔吸附樹脂包括ZTC-l、XAD-4、 AB-8、X-5、D-101、D-16、DA-201、S-8、H-103、NK-107、CAD-40 和 SIP 系列各種規格和型號大 孔吸附樹脂。
全文摘要
本發明公開了從咖啡果中分離2-(4-甲氧基苯氧基)-丙酸的工業化方法。先選擇咖啡子葉作為外植體，誘導愈傷組織產生，將經過原生質誘變育種的咖啡樹所結的咖啡果實幹燥、粉碎，用含水乙醇回流熱提，濾去濾渣，提取液真空濃縮至無醇味；後經溶劑脫脂，水層再用水飽和的正丁醇萃取，減壓濃縮並乾燥得粗提物；待用熱水溶解後，上大孔吸附樹脂柱，先後用水和乙醇洗脫；減壓回收乙醇，真空乾燥或噴霧乾燥，最後在酸性條件下進行2～3次重結晶，產品純度高達99.9％以上。2-(4-甲氧基苯氧基)-丙酸對各種糖和甜味物質都有很好的甜味抑制作用，可作為新型食品添加劑應用於月餅、糖果、蜜餞中以抑制過高的甜味。
文檔編號C12P7/52GK102115770SQ201010527359
公開日2011年7月6日 申請日期2010年10月28日 優先權日2010年10月28日
發明者鄭建仙 申請人:華南理工大學