Pla的製作方法

2023-05-01 20:27:26

專利名稱：Pla的製作方法
阿耳茨海默氏病是人腦退化的病症。臨床上它表現為進行性痴呆。其組織病理學的特徵是神經元退化、神經膠質增生和蛋白在腦中的異常沉積。病理學特點包括神經元纖維纏結(配對螺旋絲)和澱粉樣蛋白在實質和腦脈管系統中沉積。
儘管對神經元纖維纏結的化學性質沒有一般性的一致意見，澱粉樣蛋白斑核和congophilic血管病的澱粉樣蛋白的主要結構表明為最初被稱為β-蛋白或澱粉樣蛋白A4的4500道爾頓蛋白。在此文獻中該蛋白被稱作β-澱粉樣肽或蛋白。
β-澱粉樣肽是由透膜蛋白，即澱粉樣蛋白前體蛋白經蛋白水解衍生的。不同縫接形式的澱粉樣蛋白前體蛋白是由廣泛表達的基因編碼的。參見例如K.Beyreuther和B.Muller-Hill，Annual Reviews in Biochemistry，58287-307(1989)。β-澱粉樣肽最長由42或43個胺基酸殘基組成。J.Kang等，Nature(London)，325733-736(1987)。但是，這些肽因其末端胺基酸的不同而變化。C.Hilbich等，Journal of Molecular Biology，218149-163(1991)。
由於老年斑總是被營養不良的軸突包圍，早先提出β-澱粉樣肽與阿耳茨海默氏病中出現的神經元細胞損失有關。B.Yankner及其合作者首先證明合成的β-澱粉樣肽在體外和體內具有神經毒性。B.A.Yankner等，Science，245417(1989)；還參見N.W.Kowall等，Proceedings of the NationalAcademy of Sciences，U.S.A.，887247(1991)。然而其他研究小組未能一致性地證明β-澱粉樣肽的直接毒性。參見例如Neurobiology of Aging，13535(K.Kosik和P.Coleman，eds.1992)。甚至有些小組由普通來源的β-澱粉樣肽得出了相反的結果。D.Price等，Neurobiology of Aging，13623-625(1991)(上述文獻引入本文作為參考)。
由於阿耳茨海默氏病的致衰弱效應，一直需要有效的治療方法。本發明提供了治療哺乳動物阿耳茨海默氏病的方法。
目前的研究已表明阿耳茨海默氏病病理學的主要原因是慢性炎症。參見例如J.Schnabel，Science，2601719-1720(1993)。實際上，病理學研究已經證明在患有阿耳茨海默氏病患者腦的感染區域中存在神經膠質機能亢進的、急性期蛋白和補體因子。服用非甾類抗炎性藥物表現出減緩阿耳茨海默氏病的進程。(文獻出處同上)。應該理解，阿耳茨海默氏病的這種炎性成分因此將導致推進對治療患有該疾病患者的新方法的研製。
炎性疾病是許多致衰弱疾病的原因。炎症，例如關節炎、牛皮癬、哮喘和可能起源於關節、皮膚和血管的炎性反應的動脈粥樣硬化。據信，炎性反應的主要作用是產生被稱作eicosanoids的磷脂代謝物。eicosanoids代表了一類重要的介質，例如白三烯、前列腺素、lipoxins、羥基二十碳四烯酸和血栓烷。據信，eicosanoids的產生取決於通過磷脂酶A2的作用由磷脂釋放的花生四烯酸的可獲量(EC 3.1.1.4)。
磷脂酶A2(PLA2)是磷脂2-醯基水解酶的常用名，它催化磷酸甘油酯的sn-2-醯基酯鍵水解，結果導致等摩爾量溶血磷脂和游離脂肪酸的產生。參見E.A.Dennis，″The Enzymers″，Vol.16，Academic Press，New York，(1983)。在所有有生命的物種中均發現了磷脂酶A2，並且形成各種各樣類型的酶。已經對超過40種磷脂酶A2的結構特徵進行了特徵分析，結果它們表現出高度的序列同源性。J.Chang等，Biochemical Pharmacology，362429-2436，(1987)。
最特徵化的各種PLA2酶是分泌形式的，它們被釋放到細胞外環境中，在此它們有助於生物物質的消化。這種分泌形式的酶的分子量約為12-15,000(Chang等，上文)。相反，在細胞中發現了少量細胞溶質磷脂酶A2，並且它們在生物合成途徑中起著重要的作用，導致血小板活化因子和eicosanoids的產生。D.Mobilio和L.A.Marshall，Annual Reports in Medicinal Chemistry，24；157-166，(1989)。
細胞溶質磷脂酶A2的分子量約為85,000道爾頓。J.D.Clark等，Cell，651043-105l(1991)。游離花生四烯酸是產生eicosanoids的速度限制前體，並且通過細胞溶質PLA2的作用從其膜磷脂儲庫中釋放出來。E.A.Dennis，Drug Pevelopment and Research，10205-220，(1987)。同樣的酶促步驟還產生溶血磷脂，這些磷脂可被轉化為血小板活化因子。因此，據信細胞溶質PLA2對於調節炎症的有效的類脂介質的生物合成途徑是重要的。
由於細胞溶質磷脂酶A2在阿耳茨海默氏病的炎性組成中所扮演的重要作用，需要鑑別該酶的新的抑制劑，並描述其特徵。
本發明描述了治療或預防哺乳動物阿耳茨海默氏病的方法，該方法包括給需要所述治療的哺乳動物施用有效量的磷脂酶A2活性抑制劑或所述抑制劑的可藥用鹽。
本發明還描述了治療或預防哺乳動物阿耳茨海默氏病的方法，該方法包括給需要所述治療的哺乳動物施用有效量的式I化合物或其可藥用鹽 其中R1是氫，C1-C6烷氧羰基，C1-C6烷氧基，C2-C6鏈烷醯基，C1-C6烷基，或苯基，所述苯基任選地被一個或多個滷素取代基取代；R2是羥基，C1-C6烷氧基，氫，或C1-C6烷基；R3是C1-C6烷基或氫；A是-O-或-CH2-；X1和X2各自為-CH2-或者結合在一起形成-CH＝CH-；n是0至6；B是-O-，-CH2-，或-C(R5R6)-；其中R5和R6獨立地為C1-C6烷基；R4是苯基、呫噸基、四唑基、或3，4-二氫苯並吡喃基，所述苯基、呫噸基或3，4-二氫苯並吡喃基任選地被一個或多個選自下列的取代基取代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、氧、羧基、C1-C6烷氧羰基、羧基-(C1-C6烷氧基)-、羧基-(C1-C6烷基)-、NR7R8-C(O)-(C1-C6烷基)-、 其中R7和R8獨立地為氫，C1-C6烷基，C1-C6烷基磺醯基，或苯基磺醯基。
本發明另一個具體實施方案提供了治療或預防與磷脂酶A2活性過量有關的疾病的方法，該方法包括給需要該治療的哺乳動物施用有效量的式I化合物或其可藥用鹽。
本文所述的所有溫度均為攝氏度(℃)。除了對液體使用體積單位之外，本文所使用的所有測量單位均為重量單位。
本文所用術語「C1-C6烷基」表示具有1-6個碳原子的直鏈或支鏈烷基鏈。典型的C1-C6烷基包括甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、新戊基和己基等。術語「C1-C6烷基」在其定義範圍內包括術語「C1-C4烷基」。
「滷素」表示氯、氟、溴或碘。
「C1-C6烷氧基」表示具有1-6個碳原子、與氧原子連接的直鏈或支鏈烷基鏈。典型的C1-C6烷氧基包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、叔丁氧基和戊氧基等。術語「C1-C6烷氧基」在其定義範圍內包括術語「C1-C4烷氧基」。
「C2-C6鏈烷醯基」表示具有1-5個碳原子、與羰基連接的直鏈或支鏈烷氧基鏈。典型的C2-C6鏈烷醯基包括乙醯基、丙醯基、異丙醯基、丁醯基、叔丁醯基、戊醯基、己醯基和3-甲基戊醯基等。
「C1-C4烷氧羰基」表示具有1-4個碳原子、與羰基連接的直鏈或支鏈烷氧基鏈。典型的C1-C4烷氧羰基包括甲氧羰基、乙氧羰基、丙氧羰基、異丙氧羰基、丁氧羰基和叔丁氧羰基等。
本文所用術語「羧基-(C1-C6烷氧基)-」是指結構如下的基團HOOC-(CH2)m-O-其中m是1-6，包括1和6。
本文所用術語「羧基-(C1-C6烷基)-」是指結構如下的基團HOOC-(CH2)m-其中m是1-6，包括1和6。
本文所用術語「羥基保護基」是指在與該化合物上的其他官能團反應時，用於阻斷或保護羥基官能團的常用的羥基取代基。該羥基保護基的實例包括甲氧基甲基、苄氧基甲基、甲氧基乙氧基甲基、2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基甲基、甲硫基甲基、2，2-二氯-1，1-二氟乙基、四氫吡喃基、苯乙醯基、氯丙基甲基、烯丙基、C1-C6烷基、2，6-二甲基苄基、鄰硝基苄基、4-吡啶甲基、二甲基甲矽烷基、叔丁基二甲基甲矽烷基、乙醯丙酸酯基、新戊酸酯基、苯甲酸酯基、二甲基磺酸酯基、二甲基氧膦基、異丁酸酯基、金剛烷酸酯基(adamantoate)、和四氫呋喃基。這類基團的其他實例可參見T.W.Greene和P.G.M.Wuts，″Protective Groups in Organic Synthesis″(1991)第3章。
本文所用術語「離去基團」是指在親核取代反應中通過進行親核進攻被從碳原子上置換下來的原子基團。本文所用術語「離去基團」包括、但不限於活化基團。
本文所用術語「活化基團」是指象游離酸一樣，當與和其相連的羰基(-C＝O)結合時比沒有該基團存在時更可能參與醯化反應的離去基團。這種活化基團是本領域眾所周知的，並且優選的是例如琥珀醯亞氨氧基、鄰苯二甲醯亞氨氧基、苯並三唑氧基或-O-CO-(C4-C7烷基)。
本發明方法所用的化合物可以具有一個或多個不對稱中心。由於這些手性中心的存在，本發明化合物以對映體混合物、外消旋體、外消旋體混合物和單個對映體的形式出現。所有的不對稱形式、單個異構體及其混合物均包括在本發明範圍內。
如上文所述，本發明包括使用式I所定義的化合物的可藥用鹽的方法。本發明所使用的化合物可以具有足夠酸性的基團、足夠鹼性的基團或者兩種官能團，因此與許多任何無機鹼和無機與有機酸反應，形成可藥用的鹽。
本文所用術語「可藥用的鹽」是指基本上對活的生物體無毒的式I化合物的鹽。典型的可藥用鹽包括那些通過本發明化合物與可藥用無機或有機酸或無機鹼反應製備的鹽。這些鹽是已知的酸加成鹽和鹼加成鹽。
通常用於形成酸加成鹽的酸是無機酸例如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸和磷酸等，和有機酸例如對甲苯磺酸、甲磺酸、草酸、對溴苯磺酸、碳酸、琥珀酸、檸檬酸、苯甲酸和乙酸等。這種可藥用鹽的實例是硫酸鹽、焦磷酸鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸鹽、亞硫酸氫鹽、磷酸鹽、磷酸一氫鹽、磷酸二氫鹽、偏磷酸鹽、焦磷酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸鹽、丙酸鹽、癸酸鹽、辛酸鹽、丙烯酸鹽、甲酸鹽、異丁酸鹽、己酸鹽、庚酸鹽、丙炔酸鹽、草酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、辛二酸鹽、癸二酸鹽、富馬酸鹽、馬來酸鹽、丁炔-1，4-二酸鹽、己炔-1，6-二酸鹽、苯甲酸鹽、氯苯甲酸鹽、甲基苯甲酸鹽、二硝基苯甲酸鹽、羥基苯甲酸鹽、甲氧基苯甲酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、磺酸鹽、二甲苯磺酸鹽、苯乙酸鹽、苯丙酸鹽、苯丁酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、g-羥基丁酸鹽、乙醇酸鹽、酒石酸鹽、甲磺酸鹽、丙磺酸鹽、萘-1-磺酸鹽、萘-2-磺酸鹽和扁桃酸鹽等。優選的可藥用酸加成鹽是那些與無機酸例如鹽酸和氫溴酸形成的鹽，以及那些與有機酸例如馬來酸和甲磺酸形成的鹽。
鹼加成鹽包括那些從無機鹼例如銨或鹼金屬或鹼土金屬氫氧化物、碳酸鹽和碳酸氫鹽等衍生的鹽。適用於製備本發明鹽的這些鹼包括氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化銨、碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、氫氧化鈣和碳酸鈣等。特別優選的是鉀鹽和鈉鹽、應該認識到，形成本發明鹽的一部分的具體的抗衡離子通常不是關鍵的，只要該鹽作為整體是可藥用的，並且只要不使鹽的整體具有不需要的性質。
本發明優選的方法使用如下的化合物，其中R1是氫，乙醯基，丙醯基，甲氧基，乙氧基，甲氧羰基，乙氧羰基，甲基，乙基，正丙基，異丙基，苯基，一取代的苯基，二取代的苯基和三取代的苯基；R2是羥基，甲氧基，乙氧基，氫，甲基，乙基，正丙基和異丙基；R3是氫，甲基，乙基，正丙基，異丙基和正丁基；n是1至4；B是-O-，-CH2-，或-C(R5R6)-，其中R5和R6獨立地為甲基，乙基或氫；並且R4是苯基、呫噸基、四唑基、或3，4-二氫苯並吡喃基，所述基團被甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、戊氧基、氧代、羧基一取代或二取代。
本發明化合物可以按照本領域已知的標準方法製備。本發明方法中所用的許多化合物可以按照US專利4945099(1990年7月31日)中所述的方法製備，該專利引入本文作為參考。例如，可以採用各種標準方法，由相應的式II中間體製備式I的四唑化合物。 通常，在無活性的溶劑中將腈與疊氮化物試劑反應。優選的條件包括使用在二甲基甲醯胺中的疊氮化鋰、或疊氮化銨，在二甘醇二甲醚和N，N-二甲基乙醇胺鹽酸鹽中的疊氮化鈉，或者在無活性試劑例如二甲氧基乙烷或四氫呋喃中的疊氮化三正丁基錫。在後一條件下，反應通常被加熱至或者接近反應混合物的回流溫度。轉化通常是在這些條件下用2-3天完成。可使用的其他反應條件包括式II的腈與鹼金屬疊氮化物例如疊氮化鈉、氯化銨和(任選的)氯化鋰在無活性的高沸溶劑例如N，N-二甲基甲醯胺中反應，優選反應溫度為約60℃至約125℃。或者，可以使用在溶劑例如四氫呋喃、二甲氧基乙烷、二乙氧基乙烷等中的疊氮化三正丁基錫或疊氮化四甲基呱代替鹼金屬疊氮化物、氯化銨、氯化鋰和N，N-二甲基甲醯胺。
同樣地，本發明的酸由相應的酯或腈製備。採用各種酸性或鹼性條件，優選有水條件，可以使該酯或腈水解。優選的方法包括使用在丙酮與水的溶劑混合物中的氫氧化鋰、在二噁烷中的氫氧化鈉、或者在甲醇與水的混合物中的氫氧化鉀或碳酸鈉。在前一條件下，水解通常在約20-30℃的溫度下用約12-18小時完成，而後一反應通常在20-30℃用1小時完成。
一般優選的是，在同時含有腈和酯官能團的化合物中，在酯水解之前將腈基團轉化為四唑。
根據所需的具體化合物，式I化合物及製備式I化合物的中間體可以採用多種合成途徑製備，這些合成途徑對於本領域專業人員是顯而易見的。對於其中A是-O-的那些化合物，通常使用下列反應方案反應方案I 其中L是好的離去基團例如滷素，特別是氯、溴或碘，並且R2是羥基或者優選被保護的羥基例如苄氧基。
反應方案I的反應通常使用等摩爾量的兩種反應物進行，儘管除等摩爾量之外的比例完全是可操作的。該反應最好是在無活性的溶劑例如酮(特別是丙酮或甲乙酮)或二甲基甲醯胺中，並且在鹼(優選鹼金氫化物或碳酸鹽，優選碳酸鉀)存在下進行。特別是，當L是氯時，加入催化劑例如碘化鉀或碘化鈉以增加反應速度。該反應在大約室溫至反應混合物的沸點之間的溫度進行，優選在室溫進行。
在優選的情況下，如果羥基是被保護的，則在上述偶合方法之後除去該保護基。正如本領域專業人員顯而易見的，脫去羥基保護基的方法取決於選擇使用的保護基。優選的是，如果使用苄基，則通過例如在10％活性碳載鈀存在下、在乙酸乙酯中進行催化氫化除掉苄基，得到所需的酚。通常該偶合反應在R4基團最終脫保護之前進行；但是，顯而易見，根據所包括的官能團，該過程可以反過來進行。因此，在本領域公知的某些條件下進行的上述偶合反應首先包括將腈轉化為5-四唑基，然後使苯酚脫保護。
在反應方案II中描述了類似的反應方案
反應方案II 其中Q是溴、氯、碘、甲磺醯基、甲苯磺醯基或類似的離去基團。該反應方案及其所有的變化一般與上述對反應方案I所討論的情況相同。
化合物的其他相互轉化是本領域專業人員顯而易見的。例如，當R4是滷素時，在無活性溶劑例如二甲基甲醯胺中、用氰化物例如氰化鉀或氰化鈉處理化合物將其轉化為其中R4是-CN的同族物。使用催化量的碘化物加速反應。然後如上所述將該腈轉化為四唑，或者在鹼例如氫氧化鈉或氫氧化鉀存在下、在醇水溶液中進行水解，得到相應的羧酸。將滷化物轉化為腈的另一種方法包括US專利4945099所述在氨基鈉和液氨中被碳陰離子置換。
其他轉化也是有機化學領域專業人員公知的。可以採用標準方法將羧酸酯化，或者將其轉化成醯滷，然後用胺處理醯滷，得到相應的醯胺。類似地，可以將酯、醯胺和腈水解為羧酸。通過用鹼水溶液處理，也可以將腈水解成伯醯胺。
除非另外指明，實施例中所用的術語和縮寫具有其常用的含義。例如「N」是指當量或當量濃度；「mmole」或「mmoles」是指毫摩爾；「g」是指克；「ml」是指毫升；「M」是指摩爾或摩爾濃度；「eqv」是指摩爾當量；「FDMS」是指場解吸質譜；「MS」是指質譜，並且「NMR」是指核磁共振。
下列實施例進一步說明了式I化合物的製備。這些實施例僅僅用於說明本發明、而非以任何方式限制本發明的範圍。根據合成方案，那些化合物中的術語「NMR」或「MS」或該二者表示用核磁共振(NMR)、質譜(MS)或該二者確證該化合物。
實施例1N，N-二甲基-3-(2-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羥基苯氧基)丙氧基)苯基)丙醯胺 將1.5克3-(2-乙基-4-溴-5-苄氧基苯氧基)丙基氯和0.5克四二(三苯膦)鈀(O)在70毫升苯中的溶液與15毫升2.0M碳酸鈉一起攪拌。加入1.1克4-氟苯基硼酸(boronic acid)在15毫升乙醇中的溶液。將該混合物加熱回流16小時。將該混合物冷卻並用乙酸乙酯稀釋。有機相用飽和氯化銨洗滌，用飽和氯化鈉洗滌，用硫酸鈉乾燥，並真空蒸發。殘餘物在矽膠上進行色譜，用己烷/乙醚洗脫得到1.44克(93％)所需的標題中間體。NMR。
將11克間苯二酚、8.8克3-(2-乙基)-4-(4-氟苯基)-5-苄氧基苯氧基)丙基氯和13.8克碘化鉀在150毫升二甲基甲醯胺中的混合物在油浴中、在90℃加熱24小時。將該混合物冷卻，用水稀釋，用乙酸乙酯萃取。有機相用水洗滌，用飽和氯化鈉洗滌，用硫酸鈉乾燥，並真空蒸發。殘餘物在矽膠上進行色譜，用己烷/乙醚洗脫，得到標題中間體，產率34％，NMR。
將375毫克3-(2-(3-(2-乙基)-4-(4-氟苯基)-5-苄氧基苯氧基)丙氧基)苯基)丙酸乙酯在25毫升乙醇中的溶液與5毫升5.0N氫氧化鈉一起攪拌16小時。該混合物用1.0N鹽酸稀釋，並用3∶1的二氯甲烷/異丙醇萃取。有機相用飽和氯化鈉洗滌，用硫酸鈉乾燥，並真空蒸發，得到所需的3-(2-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羥基苯氧基)丙氧基)苯基)丙酸，產率93％。NMR。
將3-(2-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羥基苯氧基)丙氧基)苯基)丙酸和幾當量的亞硫醯氯在二氯甲烷中的溶液在室溫保持3小時，然後倒入攪拌著的40％二甲胺水溶液中。有機層用鹽酸水溶液洗滌，用飽和氯化鈉洗滌，用硫酸鈉乾燥，並真空蒸發。殘餘物在矽膠上進行色譜，用乙酸乙酯洗脫，得到所需的標題產物。NMR，MS。
實施例2N-甲磺醯基-3-(2-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羥基苯氧基)丙氧基)苯基)丙醯胺 將3-(2-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羥基苯氧基)丙氧基)苯基)丙酸和幾當量的亞硫醯氯在二氯甲烷中的溶液在室溫保持3小時以產生醯氯。在-5℃，向在四氫呋喃中的該醯氯中加入10當量N-鋰甲磺醯胺在四氫呋喃中的懸浮液。將該混合物溫熱至室溫，用鹽酸水溶液稀釋，並用乙酸乙酯萃取。將有機溶液乾燥，並真空蒸發。殘餘物在矽膠上進行色譜，用二氯甲烷/甲醇洗脫，得到所需的標題中間體，產率37％。NMR。
實施例3N-苯磺醯基-3-(2-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羥基苯氧基)丙氧基)苯基)丙醯胺 採用實施例2的方法，用N-鋰苯磺醯胺製備標題產物。該產物通過製備C18反相HPLC分離。NMR。
實施例4製備2-苯基-4-乙基-5-[[6-(2H-四唑-5-基)-6-甲基庚基]氧]苯酚 合成1-苄氧基-2-苯基-4-乙基-5-(6-甲基-6-氰基庚氧基)苯A.製備4-苄氧基-2-羥基苯乙酮。
在乾燥的圓底燒瓶中，在氮氣氛下，將2，4-二羥基苯乙酮(15.2克，100毫摩爾)溶於甲乙酮(400毫升)和二甲基亞碸(100毫升)中。向該溶液中加入苄基溴(17.0克，100毫摩爾)和碳酸鉀(27.6克，200毫摩爾)。將反應物加熱回流並攪拌15小時。真空除去甲乙酮，該二甲基亞碸溶液用乙酸乙酯稀釋，並用鹽水洗滌幾次。收集有機物質，乾燥(硫酸鎂)，過濾並濃縮，得到黑色固體。該固體從己烷/甲苯中重結晶，得到標題的苄基醚，為褐色固體(12.8克，55.7％)；mp 143-144.5℃；NMR(CDCl3)δ12.77(s，1H)，7.70(d，1H，J＝7Hz)，7.3-7.5(m，5H)，6.54(d，1H，J＝7Hz)，6.53(s，1H)，5.11(s，2H)，2.58(s，3H).C15H12O3的分析理論值C，74.36；H，5.82；實測值C，74.52；H，5.97。
B.製備2-(6-甲基-6-氰基庚氧基)-4-苄氧基苯乙酮。
向4-苄氧基-2-羥基苯乙酮(9.65克，42毫摩爾)在二甲基甲醯胺(150毫升)中的溶液中加入合適的烷基氯(6.86克，40毫摩爾)、碳酸鉀(10.6克，77毫摩爾)和碘化鉀(1.6克，9.6毫摩爾)。將該攪拌著的溶液加熱至90℃保持24小時。過濾除去固體，真空除去二甲基甲醯胺。殘餘物經Prep-500 HPLC純化，在30分鐘內用在己烷中的5％乙酸乙酯至在己烷中的20％乙酸乙酯作為流動相梯度洗脫，得到標題的醚，為澄清的油(12.1克，79.8％)；NMR(CDCl3)δ7.85(d，1H，J＝7.4Hz)，7.3-7.5(m，5H)，6.60(dd，1H，J＝7.4，1.8Hz)，6.53(d，1H，J＝1.8Hz)，5.12(s，2H)，4.04(t，2H，J＝5.3Hz)，2.61(s，3H)，1.85-1.95(m，2H)，1.5-1.6(m，6H)，1.37(s，6H)；IR(CHCl3)2943，2238，1601cm-1；MS(m/e)379.
C.製備4-苄氧基-2-(6-甲基-6-氰基庚氧基)乙基苯。
向2-(6-甲基-6-氰基庚氧基)-4-苄氧基苯乙酮(12.1克，31.6毫摩爾)在四氯化碳(30毫升)中的溶液中加入三氟乙酸(44.4克，390毫摩爾)和三乙基甲矽烷(21.8克，188毫摩爾)。該溶液在室溫攪拌1.5小時，然後用乙酸乙酯稀釋，並用碳酸鈉水溶液洗滌。收集有機物質，乾燥(硫酸鎂)，過濾並真空濃縮。殘餘物經Prep-500 HPLC純化，在15分鐘內用在己烷中的3-5％乙酸乙酯、然後控制在5％梯度洗脫，得到所需的標題產物(10.6克，91.5％)，為澄清的油；
NMR(CDCl3)δ7.35-7.5(m，5H)，7.06(d，1H，J＝6.5Hz)，6.53(s，1H)，6.52(dd，1H，J＝6.5，2Hz)，5.06(s，2H)，3.96(t，2H，J＝5.3Hz)，2.60(q，2H，J＝6.3Hz)，1.8-1.85(m，2H)，1.5-1.6(m，6H)，1.37(s，6H)，1.20(t，3H，J＝6.3Hz).
D.製備1-溴-2-苄氧基-4-(6-甲基-6-氰基庚氧基)-5-乙基苯。
向4-苄氧基-2-(6-甲基-6-氰基庚氧基)乙基苯(10.6克，28.9毫摩爾)在四氯化碳(125毫升)中的攪拌著的溶液中加入N-溴琥珀醯亞胺(6.0克，33.3毫摩爾)。在室溫繼續攪拌6小時。該混合物用二氯甲烷稀釋，並用水洗滌。收集有機物質，乾燥(硫酸鎂)，過濾並真空濃縮。殘餘物從己烷/乙酸乙酯中重結晶，得到標題的芳基溴(12.6克，97.8％)，為淡黃色固體。NMR(CDCl3)δ7.35-7.5(m，5H)，7.22(s，1H)，6.50(s，1H)，5.17(s，2H)，3.90(t，2H，J＝5.3Hz)，2.58(q，2H，J＝6.3Hz)，1.75-1.85(m，2H)，1.50-1.65(m，6H)，1.37(s，6H)，1.18(t，3H，J＝6.3Hz)；IR(CHCl3)3020，2981，2946，2238，1662，1600cm-1；MS(m/e)444，445，446.
E.聯芳基偶合反應的典型方法。
方法A在圓底燒瓶中，將合適的芳基溴(1當量)溶於苯中。向該溶液中加入Pd(PPh3)4(10毫摩爾％)和2.0M碳酸鈉水溶液(10當量)。在另一個燒瓶中，將芳基硼酸(2當量)溶於乙醇中。向芳基硼酸溶液中加入芳基溴溶液，將該混合物加熱回流並攪拌16小時。該混合物用乙酸乙酯稀釋，並用飽和氯化銨水溶液洗滌。收集有機物質，乾燥(硫酸鎂)，過濾並濃縮。殘餘物經閃色譜純化(在己烷中的6％乙酸乙酯)，得到所需的聯芳基。
方法B將合適的芳基溴在四氫呋喃中的溶液冷卻至-78℃。向該溶液中加入叔丁基鋰(2當量)。在-78℃攪拌反應物30分鐘，然後加入氯化鋅(1當量)的四氫呋喃溶液。將該混合物溫熱至室溫並攪拌15分鐘。在另一個燒瓶中，製備在四氫呋喃中含有合適的芳基滷(1當量)和Pd(PPh3)4(10毫摩爾％)的溶液。向該溶液中加入芳基鋅溶液，並在室溫攪拌該混合物2-18小時。反應物用乙酸乙酯稀釋，並用氯化銨水溶液洗滌。收集有機物質，乾燥(硫酸鎂)，過濾並濃縮。殘餘物經閃色譜純化(在己烷中的6％乙酸乙酯)，得到所需的聯芳基。
F.製備1-苄氧基-2-苯基-4-乙基-5-(6-甲基-6-氰基庚氧基)苯。
用方法A製備該化合物，產率75％。
NMR(CDCl3)δ7.60(d，2H，J＝6.5Hz)，7.3-7.5(m，8H)，7.18(s，1H)，6.59(s，1H)，5.04(s，2H)，3.95(t，2H，J＝5.3Hz)，2.63(q，2H，J＝6.3Hz)，1.8-1.9(m，2H)，1.5-1.65(m，6H)，1.38(s，6H)，1.25(t，3H，J＝6.3Hz)；IR(CHCl3)3013，2977，2943，2238，1611，1488cm-1；MS(m/e)439.C30H35NO2的分析計算值C，81.59；H，7.99；N，3.17；實測值C，81.34；H，8.18；N，3.05。
向腈(1當量)在二甘醇二甲醚中的溶液中加入N，N-二甲基乙醇胺鹽酸鹽(2當量)和疊氮化鈉(4當量)。將該懸浮液加熱至130℃並攪拌最多72小時。該混合物用二氯甲烷稀釋，用稀鹽酸酸化。收集有機物質，乾燥(硫酸鎂)，過濾並真空濃縮。將所得物質溶於乙醇中，向該溶液中加入氫氧化鈉水溶液(4當量)。該反應物在室溫攪拌30分鐘，然後真空除去溶劑。用HP-20反相MPLC系統純化殘餘物，首先用水作流動相，然後用在甲醇中40％水洗脫。合併所需餾分並真空濃縮。然後將殘餘物凍幹，得到產物四唑的鈉鹽。
2-苯基-4-乙基-5-[6-(2H-四唑-5-基)-6-甲基庚氧基]苯酚鈉鹽，產率34.3％。
NMR(DMSO-d6)δ7.55(d，2H，J＝6.5Hz)，7.35(t，2H，J＝6.5Hz)，7.20(t，1H，J＝6.5Hz)，6.98(s，1H)，6.60(s，1H)，3.82(t，2H，J＝5.3Hz)，2.65(q，2H，J＝6.3Hz)，1.55-1.70(m，6H)，1.25-1.35(m，8H)，1.10(t，3H，J＝6.3Hz)；IR(KBr)3192，2970，2937，1617，1488，1453，1214cm-1；MS(m/e)439.C23H29N4NaO2·2H2O的分析計算值C，59.87；H，7.16；N，12.25；實測值C，60.28；H，7.45；N，12.07。
實施例52-[3-[3-[(5-乙基-2-羥基[[1，1』-聯苯基]-4-基)氧]丙氧基]-2-丙基苯氧基]丙酸 A.製備2-丙基-1，3-二甲氧基苯。
將在200毫升無水四氫呋喃中的1，3-二甲氧基苯(20克，145毫摩爾)冷卻至-10℃。在-10℃，用20分鐘，向該溶液中加入正丁基鋰(100毫升，在己烷中的1.6M溶液，160毫摩爾)。然後在0℃攪拌該反應物2.5小時。在0℃，用15分鐘緩緩地加入丙基碘(24.65克，145毫摩爾)。添加完成後，使反應物溫熱至室溫並攪拌過夜。攪拌過夜後，將反應物回流1.5小時，然後冷卻至室溫並用冰驟冷。真空除去四氫呋喃，所得水層用乙醚萃取幾次。有機提取物用硫酸鎂乾燥並過濾，除去溶劑後，得到澄清的油(26.11克)。通過真空蒸餾純化該油，得到標題的中間體(24.0克，92％)。在10mmHg的沸點為80-82℃。NMR(CDCl3)δ7.16(t，1，J＝8.30Hz)，6.58(d，2，J＝8.30Hz)，3.85(s，6)，2.67(t，2，J＝7.57Hz)，1.56(m，2)，0.99(t，3，J＝7.35Hz).
B.製備2-丙基-1，3-二羥基苯。
將固體1，3-二甲氧基-2-丙基苯(33.70克，190毫摩爾)和固體吡啶鹽酸鹽(150克，1.30摩爾)的混合物加熱至180℃。7.5小時後，將反應物冷卻至110℃，緩緩地加熱50毫升水。將反應物冷卻至室溫後，用100毫升水稀釋，並用乙酸乙酯萃取幾次。乙酸乙酯提取物用2N鹽酸洗滌一次，然後用硫酸鎂乾燥。過濾並除去溶劑，得到38.5克橙色固體。通過從二氯甲烷中重結晶純化標題產物，得到11.86克(41％)黃色結晶。NMR(CDCl3)δ6.94(t，1，J＝8.10Hz)，6.40(d，2，J＝8.10Hz)，4.84(s，2)，2.63(t，2，J＝7.57Hz)，1.62(m，2)，1.01(t，3，J＝7.33Hz).
C.製備2-(2-丙基-3-羥基苯氧基)丙酸乙酯。
在氬氣氛下，用15毫升無水己烷洗滌氫化鈉(1.08克，60％油分散液，27毫摩爾)。用注射器除去己烷上清液。向氫化鈉中加入無水四氫呋喃(60毫升)，並且在室溫和攪拌下加入在40毫升四氫呋喃中的2-丙基-1，3-二羥基苯(4.08克，27毫摩爾)。在室溫攪拌25分鐘後，迅速加入2-溴丙酸乙酯(4.64克，26毫摩爾)。在室溫攪拌17小時後，用飽和氯化銨水溶液使反應物驟冷，真空除去四氫呋喃。所得含水混合物用乙酸乙酯萃取幾次。有機提取物用硫酸鎂乾燥，過濾並除去溶劑，得到橙色的油。該油在矽膠上經閃色譜純化，用20％乙酸乙酯/己烷洗脫。得到所需的標題的酯，為白色固體(2.43克，36％)。TLCRf＝0.47(30％乙酸乙酯/己烷)NMR(CDCl3)δ6.93(dd，1，J＝8.00Hz)，6.45(d，1，J＝8.00Hz)，6.30(d，1，J＝8.00Hz)，5.77(s，1)，4.76(q，1，J＝6.76Hz)，4.23(q，2，J＝7.02Hz)，2.69(m，2)，1.63(d，3，J＝6.70Hz)，1.60(m，2)，1.28(t，3，J＝7.50Hz)，0.99(t，3，J＝7.50Hz)；IR(KBr)3435，2955，2872，1733，1600，1500，1465cm-1；質譜(FD)(m/z)253(M++1)。C14H20O4的分析計算值C，66.65；H，7.99實測值C，66.41；H，8.04。
D.製備2-[3-[3-[(2-苄氧基-1-溴-5-乙基-4-基)氧]丙氧基]-2-丙基苯氧基]丙酸乙酯。
將2-(2-丙基-3-羥基苯氧基)丙酸乙酯溶於甲乙酮(60毫升)中，加入固體碘化鈉(20克，133毫摩爾)。在氬氣氛下使反應混合物回流18小時。將反應物冷卻至室溫，用水驟冷，然後用乙醚萃取三次。合併有機提取液，用硫酸鎂乾燥並過濾，得到6.27克黃色的油。
在氮氣氛下，向在10毫升無水二甲基甲醯胺中的氫化鈉(324毫克，8.1摩爾，60％油分散液)懸浮液中加入在二甲基甲醯胺(5毫升)中的3，4-二氫-7-羥基-8-丙基-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸乙酯(2.1克，8.1毫摩爾)。攪拌反應混合物30分鐘後，加入上述製備的烷基碘(3.8克，8.1毫摩爾)和18-冠-6(110毫克，0.4毫摩爾)。在室溫攪拌反應物1.5小時。用水使反應驟止，然後用乙酸乙酯萃取幾次。有機物質用硫酸鎂乾燥，過濾並真空濃縮。所得產物在矽膠上經閃色譜純化，用6％乙酸乙酯/己烷洗脫，得到標題的中間體，為澄清的油(2.90克，產率68％)。TLCRf＝0.47(30％乙酸乙酯/己烷)NMR(CDCl3)δ7.56-7.37(m，6)，7.12(t，1，J＝8.20Hz)，6.62(d，1，J＝8.35Hz)，6.59(s，1)，6.45(d，1，J＝8.31Hz)，5.16(s，2)，4.80(q，1，J＝6.90Hz)，4.26(q，2，J＝7.20Hz)，4.18(dd，4，J＝5.91，12.02Hz)，2.80(m，2)，2.62(q，2，J＝7.47Hz)，2.31(m，2)，1.69(d，3，J＝6.70Hz)，1.65(m，2)，1.30(t，3，J＝7.20Hz)，1.22(t，3，J＝7.54Hz)，1.03(t，3，J＝7.35Hz)；IR(CHCl3)3015，2967，2930，2780，1752，1595，1500，1464cm-1；質譜(FAB)(m/z)559(M+)。C32H39BrO6的分析計算值C，64.11；H，6.56；Br，13.33；實測值C，64.01；H，6.56；Br，13.06。
E.製備2-[3-[3-[(2-苄氧基-5-乙基[1，1』-聯苯]-4-基)氧]丙氧基]-2-丙基苯氧基]丙酸乙酯。
在氬氣氛下，將2-[3-[3-[(2-苄氧基-1-溴-5-乙基-4-基)氧]丙氧基]-2-丙基苯氧基]丙酸乙酯(1.3克，2.24毫摩爾)在40毫升苯中攪拌。向該溶液中加入四二(三苯膦)鈀(0)(0.40克，0.35毫摩爾)和碳酸氫鈉(10毫升，2M水溶液)。向上述反應混合物中加入苯基硼酸(1.3克，10.7毫摩爾)的乙醇溶液(10毫升)，然後使該反應混合物回流21小時。將反應物冷卻至室溫，用飽和氯化銨水溶液驟冷，用水稀釋，然後用乙酸乙酯萃取。有機層用硫酸鎂乾燥並過濾。真空濃縮濾液，得到1.3克棕色油。將固體溶於20％乙酸乙酯/己烷中，並通過35克Merck 60矽膠過濾，用500毫升20％乙酸乙酯/己烷洗脫。所得的1.0克黃色油在矽膠上經閃色譜純化，用18％乙酸乙酯/己烷洗脫。得到所需的標題的酯，產率47％，為澄清的油。TLCRf＝0.48(30％乙酸乙酯/己烷)NMR(CDCl3)δ7.10(d，2，J＝8.06Hz)，7.44(m，8)，7.27(s，1)，7.15(t，1，J＝8.14Hz)，6.72(s，1)，6.66(d，1，J＝8.27Hz)，6.48(d，1，J＝8.27Hz)，5.11(s，2)，4.83(q，1，J＝6.71Hz)，4.28(m，6)，2.78(m，4)，2.38(m，2)，1.72(d，3，J＝6.96Hz)，1.69(m，2)，1.32(t，3，J＝7.29Hz)，1.31(t，3，J＝7.30Hz)，1.08(t，3，J＝7.36Hz)；IR(CHCl3)3015，2966，2930，2880，1750，1594，1488，1464cm-1；質譜(FAB)(m/z)597(M++1)，596(M+)。C38H44O6的分析計算值C，76.48；H，7.43；實測值C，76.42；H，7.52。
F.製備2-[3-[3-[(5-乙基-2-羥基[1，1』-聯苯]-4-基)氧]丙氧基]-2-丙基苯氧基]丙酸乙酯。
向含有0.14克10％活性碳載鈀催化劑的2-[3-[3-[(2-苄氧基-5-乙基[1，1』-聯苯]-4-基)氧]丙氧基]-2-丙基苯氧基]丙酸乙酯的10毫升乙酸乙酯溶液中鼓泡通入氫氣15分鐘。使反應混合物保持在氫氣氛下，將反應物攪拌4天。反應物在燒結玻璃漏鬥中經硅藻土墊過濾，用乙酸乙酯洗滌催化劑。從濾液中除去溶劑，得到澄清的油。該油在矽膠上經閃色譜純化，用20％乙酸乙酯/己烷洗脫。得到標題的中間體，產率53％，為澄清的油。TLCRf＝0.36(30％乙酸乙酯/己烷)NMR(CDCl3)δ7.43(m，5)，7.06(d，1，J＝8.84Hz)，6.56(s，1)，6.37(d，1，J＝8.28Hz)，5.20(s，1)，4.74(q，1，J＝6.73Hz)，4.20(m，6)，2.71(m，2)，2.61(q，2，J＝7.58Hz)，2.33(t，2，J＝6.05Hz)，1.61(d，3，J＝6.94Hz)，1.58(m，2)，1.25(t，3，J＝7.30Hz)，1.19(t，3，J＝7.40Hz)，0.96(t，3，J＝7.35Hz)；IR(CHCl3)3558，3029，3011，2964，2935，2873，1745，1625，1593，1488，1464cm-1；質譜(FAB)(m/z)507(M++1)，506(M+)。C31H38O6的分析計算值C，73.49；H，7.56；實測值C，73.70；H，7.67。
G.製備2-[3-[3-[(5-乙基-2-羥基[[1，1』-聯苯基]-4-基)氧]丙氧基]-2-丙基苯氧基]丙酸。
用1.10毫升2N氫氧化鈉溶液處理2-[3-[3-[(5-乙基-2-羥基[1，1』-聯苯]-4-基)氧]丙氧基]-2-丙基苯氧基]丙酸乙酯在4毫升二噁烷中的溶液，並在室溫攪拌。在室溫攪拌1.25小時後，真空除去二噁烷，剩餘的水溶液用水稀釋，並用5N鹽酸酸化至pH1。所得懸浮液用乙酸乙酯萃取。有機提取液用硫酸鎂乾燥並過濾。所得白色固體從甲苯/己烷中重結晶。標題產物從甲苯/己烷中結晶，得到白色簇狀物(0.582克，80％)。TLCRf＝0.21(10％甲醇/二氯甲烷)NMR(CDCl3)δ7.45(m，5)，7.09(t，1，J＝8.16Hz)，7.03(s，1)，6.60(d，1，J＝8.28Hz)，6.56(s，1)，6.42(d，1，J＝8.29Hz)，4.79(q，1，J＝7.00Hz)，4.20(m，4)，2.70(m，2)，2.62(q，2，J＝7.49Hz)，2.33(t，2，J＝6.00Hz)，1.67(d，3，J＝6.93Hz)，1.56(m，2)，1.20(t，3，J＝7.39Hz)，0.96(t，3，J＝7.30Hz)；IR(KBr)3381，2964，2871，1707，1615，1594，1490，1461cm-1；質譜(FAB)(m/z)479(M++1)，478(M+)。C29H34O6的分析計算值C，72.78；H，7.16；實測值C，73.39；H，7.29。
實施例68-丙基-7-[3-[4-(4-氟苯基)-2-乙基-5-羥基苯氧基]丙氧基]-3，4-二氫-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸 A.製備8-丙基-7-[3-[2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-苄氧基苯氧基]丙氧基]-3，4-二氫-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸乙酯。
在氬氣氛下，向7-[3-[(2-苄氧基-1-溴-5-乙基-4-基)氧]丙氧基]-3，4-二氫-8-丙基-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸乙酯(2.163克，3.5毫摩爾)的30毫升苯溶液中加入四二(三苯膦)鈀(0)(0.659克，0.6毫摩爾)和碳酸鈉水溶液(20毫升，2M溶液)。將反應物回流17小時，然後冷卻至室溫，並用乙酸乙酯萃取。有機提取物用硫酸鎂乾燥，過濾並真空除去溶劑。粗產物經Waters Prep500矽膠色譜純化，在50分鐘內用5％-20％乙酸乙酯/己烷梯度洗脫。得到所需的標題的聯苯，為澄清的油(1.722克，78％)。NMR(CDCl3)δ7.51(m，2)，7.32(m，5)，7.09(m，3)，6.83(d，1，J＝8.32Hz)，6.62(s，1)，6.49(d，1，J＝8.50Hz)，5.02(s，2)，4.75(dd，1，J＝4.10，6.50Hz)，4.22(m，6)，2.69(m，6)，2.25(m，4)，1.59(m，2)，1.30(t，3，J＝7.10Hz)，1.21(t，3，J＝7.42Hz)，0.96(t，3，J＝7.33Hz)；IR(CHCl3)3019，2968，1745，1611，1495cm-1；質譜(FAB)(m/z)627(M++1)，626(M+)，536。C39H43O6的分析計算值C，74.74；H，6.91；F，3.03；實測值C，74.98；H，7.05；F，3.39。
B.製備8-丙基-7-[3-[4-(4-氟苯基)-2-乙基-5-羥基苯氧基]丙氧基]-3，4-二氫-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸乙酯。
向含有1.0克10％活性碳載鈀催化劑的8-丙基-7-[3-[2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-苄氧基苯氧基]丙氧基]-3，4-二氫-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸乙酯(1.610克，2.57毫摩爾)的30毫升乙酸乙酯溶液中鼓泡通入氫氣10分鐘。在室溫和氫氣氛下攪拌反應混合物2小時。反應混合物在燒結玻璃漏鬥中經硅藻土墊過濾，用乙酸乙酯洗滌催化劑。從濾液中除去溶劑，得到1.242克澄清的油。該油在矽膠上經閃色譜純化，用20％乙酸乙酯/己烷洗脫。得到所需的標題的酚，產率74％(1.020克)，為白色固體。TLCRf＝0.35(30％乙酸乙酯/己烷)NMR(CDCl3)δ7.43(m，2)，7.16(dd，2，J＝5.97，5.97Hz)，6.98(s，1)，6.82(d，1，J＝8.44Hz)，6.53(s，1)，6.46(d，1，J＝9.43Hz)，5.07(s，1)，4.76(m，1)，4.21(m，6)，2.67(m，6)，2.26(m，4)，1.58(m，2)，1.29(t，3，J＝6.96Hz)，1.91(t，3，J＝7.35Hz)，0.96(t，3，J＝7.27Hz)；IR(KBr)3434，2962，2869，1738，1614，1588，1502cm-1；質譜(FAB)(m/z)537(M++1)，536(M+)。C32H37O6的分析計算值C，71.62；H，6.95；實測值C，71.63；H，7.06。
C.製備8-丙基-7-[3-[4-(4-氟苯基)-2-乙基-5-羥基苯氧基]丙氧基]-3，4-二氫-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸。
在室溫用氫氧化鈉(2.71毫升，2N溶液)處理8-丙基-7-[3-[4-(4-氟苯基)-2-乙基-5-羥基苯氧基]丙氧基]-3，4-二氫-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸乙酯(0.968克，1.8毫摩爾)在二噁烷(12毫升)中的溶液。在室溫攪拌2.5小時後，從反應混合物中除去二噁烷，剩餘的物質用水稀釋，並用5N鹽酸酸化至pH1。然後將所得白色乳狀懸浮液與乙酸乙酯一起攪拌，然後用乙酸乙酯萃取。有機提取液用硫酸鎂乾燥，過濾並除去溶劑，得到白色固體(1.098克)。該固體從乙酸乙酯/己烷中重結晶，得到標題的酸，為白色針狀結晶(0.568克，62％)。TLCRf＝0.31(10％甲醇/二氯甲烷)NMR(CDCl3)δ7.42(m，2)，7.15(dd，2，J＝8.68)，6.98(s，1)，6.85(d，1，J＝8.30Hz)，6.53(s，1)，6.52(d，1，J＝6.98Hz)，4.77(dd，1，J＝3.63，7.43Hz)，4.18(m，4)，2.70(m，6)，2.27(m，4)，1.56(m，2)，1.19(t，3，J＝7.42Hz)，0.95(t，3，J＝7.30Hz)；IR(KBr)3421，2959，2871，1706，1615，1500cm-1；質譜(FAB)(m/z)509(M++1)，508(M+)。C30H33O6的分析計算值C，70.78；H，6.54；實測值C，70.05；H，6.82。
實施例77-羧基-9-氧代-3-[3-(2-乙基-5-羥基-4-苯基苯氧基)丙氧基]-9H-呫噸-4-丙酸二鈉鹽一7水合物 將2-苄氧基-1-苯基-5-乙基-4-(3-氯-1-丙氧基)苯(749毫克，1.97毫摩爾)、7-乙酯基-3-羥基-9-氧代-9H-呫噸-4-丙酸乙酯(729毫克，1.97毫摩爾)、碳酸鉀(1.36克，9,85毫摩爾)和碘化鉀(33毫克，0.20毫摩爾)的混合物回流24小時。加入二甲基亞碸(2毫升)，並繼續加熱24小時。將反應混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯稀釋，並用水洗滌一次。有機層用硫酸鈉乾燥，過濾並真空濃縮，得到褐色固體。將該物質溶於乙酸乙酯(30毫升)中，並用氮氣吹掃所得溶液。向該溶液中加入10％碳載鈀(120毫克)，並在1個大氣壓下氫化所得懸浮液。將該溶液過濾並真空濃縮，得到無色的油。將該物質溶於1∶1的甲醇/四氫呋喃溶液(30毫升)中，並在室溫用5N氫氧化鈉溶於(2毫升)處理18小時。所得溶液用乙酸乙酯萃取一次，並用5N鹽酸溶液酸化水層。經吸濾收集所得沉澱。該物質轉化為二鈉鹽，經HP-20樹脂純化，得到390毫克(56％)所需的標題產物，為鬆散的白色固體NMR(DMSO-d6)12.65(s，1H，-OH)，8.65(s，1H)，8.28(dd，J＝8.5，2.0Hz，1H)，8.01(d，J＝8.9Hz，1H)，7.50(m，3H)，7.29(t，J＝7.8Hz，2H)，7.17(m，2H)，6.93(s，1H)，6.89(s；1H)，4.26(m，4H)，3.12(m，2H)，2.47(m，2H)，2.23(m，2H)，1.10(t，J＝7.4Hz，3H)；MS-FAB m/e 627(24，p)，605(40)，583(24)，331(24)，309(100)；IR(KBr，cm-1)3419(b)，2962，1612，1558，1443，1390，1277，1084.C34H28O9Na2·H2O的分析計算值C，63.34；H，4.69；實測值C，63.36；H，4.50。
實施例82-[2-丙基-3-[3-[2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羥基苯氧基]丙氧基]苯氧基]苯甲酸 A.製備2-[2-丙基-3-[3-[2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-(苯基甲氧基)苯氧基]丙氧基]苯氧基]苯甲酸甲酯。
將2-苄氧基-1-4-(氟苯基)-5-乙基-4-(3-氯-1-丙氧基)苯(20.0克，50.2毫摩爾)和碘化鈉(75.3克，502毫摩爾)在2-丁酮(200毫升)中的混合物回流6小時。該混合物用乙醚稀釋，並用水洗滌一次。有機層用硫酸鈉乾燥，過濾並真空濃縮，得到無色的油。將該物質溶於二甲基甲醯胺(100毫升)中，在室溫用2-(3-羥基-2-丙基苯氧基)苯甲酸甲酯(14.4克，50.2毫摩爾)和碳酸鉀(20.8克，151毫摩爾)處理24小時。該混合物用水稀釋，並用乙醚萃取兩次。分離水層，用乙酸乙酯反萃取一次。合併的有機層用硫酸鈉乾燥，過濾並真空濃縮，得到黃色的油。進行矽膠色譜，得到25.4克(78％)所需的標題中間體，為淡金色的油NMR(CDCl3)7.91(d，J＝7.8Hz，1H)，7.54(d，J＝8.6Hz，1H)，7.52(d，J＝8.5Hz，1H)，7.25-7.43(m，6H)，7.03-7.38(m，5H)，6.84(d，J＝8.3Hz，1H)，6.71(d，J＝8.1Hz，1H)，6.63(s，1H)，6.47(d，J＝8.1Hz，1H)，5.03(s，2H)，4.24(t，J＝5.7Hz，2H)，4.21(t，J＝5.8Hz，2H)，3.86(s，3H)，2.69(t，J＝7.8Hz，2H)，2.64(t，J＝7.7Hz，2H)，2.34(quintet，J＝6.0Hz，2H)，1.60(hextet，J＝5.0Hz，2H)，1.22(t，J＝7.5Hz，3H)，0.94(t，J＝7.5Hz，3H)；MS-FD m/e 648(p)；IR(CHCl3，cm-1)2960，1740，1604，1497，1461，1112.C41H41O6F的分析計算值C，75.91；H，6.37；實測值C，75.15；H，6.45。B.製備2-[2-丙基-3-[3-[2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羥基苯氧基]丙氧基]苯氧基]苯甲酸甲酯。
如上對實施例7的製備所述，將2-[2-丙基-3-[3-[2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-(苯基甲氧基)苯氧基]丙氧基]苯氧基]苯甲酸甲酯(33.0克，50.9毫摩爾)去苄基，得到27.3克(96％)標題的中間體，為琥珀色的油NMR(CDCl3)7.90(dd，J＝7.8，1.7Hz，1H)，7.42(m，3H)，7.05-7.23(m，4H)，6.99(s，1H)，6.84(d，J＝8.1Hz，1H)，6.70(d，J＝8.1Hz，1H)，6.55(s，1H)，6.46(d，J＝8.1Hz.1H)，5.05(s，1H，-OH)，4.23(m，4H)，3.86(s，3H)，2.68(t，J＝7.4Hz，2H)，2.62(q，J＝7.5Hz，2H)，2.36(quintet，J＝6.0Hz，2H)，1.60(hextet，J＝7.7Hz，2H)，1.20(t，J＝7.6Hz，3H)，0.94(t，J＝7.4Hz，3H)；MS-FDm/e 558(p)；IR(CHCl3，cm-1)2965，1727，1603，1496，1458，1306，1112.C34H35O6F的分析計算值C，73.10；H，6.31；實測值C，73.17；H，6.42。C.製備2-[2-丙基-3-[3-[2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羥基苯氧基]丙氧基]苯氧基]苯甲酸鈉鹽。
如上對實施例7的製備所述，將2-[2-丙基-3-[3-[2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羥基苯氧基]丙氧基]苯氧基]苯甲酸甲酯(21.5克，38.5毫摩爾)水解。將酸轉化為鈉鹽，並如實施例7所述進行純化，得到16.7克(77％)所需的標題產物，為白色非晶形固體NMR(DMSO-d6)10.50(bs，1H，-OH)，7.51(m，3H)，7.20(t，J＝7.4Hz，1H)，7.13(m，2H)，7.00(m，2H)，6.95(s，1H)，6.67(dd，J＝8.2，3.3Hz，2H)，6.62(s，1H)，6.26(d，J＝8.2Hz，1H)，4.14(t，J＝5.8Hz，2H)，4.02(t，J＝5.7Hz，2H)，2.60(t，J＝6.8Hz，2H)，2.47(q，J＝7.3Hz，2H)，2.16(t，J＝5.9Hz，2H)，1.45(hextet，J＝7.5Hz，2H)，1.07(t，J＝7.5Hz，3H)，0.81(t，J＝7.4Hz，3H)；MS-FAB m/e 568(38，p+1)，567(100，p)，544(8 6)，527(77)，295(65)，253(45)；IR(KBr，cm-1)3407(b)，2962，1603，1502，1446，1395，1239，1112.C33H32O6FNa的分析計算值C，69.95；H，5.69；F，3.35；實測值C，69.97；H，5.99；F，3.52。
實施例93-(2-(4-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羥基苯氧基)丁氧基)苯基)丙酸 將375毫克3-(2-(4-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羥基苯氧基)丁氧基)苯基)丙酸乙酯在25毫升乙醇中的溶液與5毫升5.0N氫氧化鈉混合，並攪拌16小時。該混合物用1.0N鹽酸稀釋，並用3∶1二氯甲烷/異丙醇萃取。有機相用飽和氯化鈉洗滌，用硫酸鈉乾燥，並真空蒸發，得到所需的標題產物，產率72％。NMR。
實施例10製備1-[5-乙基-2-羥基-4-[[6-甲基-6-(1H-四唑-5-基)庚基]氧]苯基]乙酮 如US 4945099(1990年7月31日出版)所述製備該標題化合物，該專利引入本文作為參考。
實施例11製備2，4-二乙基-5-[[6-甲基-6-(1H-四唑-5-基)庚基]氧]苯酚
如US 4945099(1990年7月31日出版)所述製備該標題化合物，該專利引入本文作為參考。
實施例12製備3，4-二氫-8-丙基-7-[3-(2-乙基-5-羥基-4-乙氧基-苯氧基)丙氧基]-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸 A.製備5-乙基-2，4-二羥基苯甲醛。
在氬氣氛下，將二甲基甲醯胺(250毫升)冷卻至0℃。在攪拌下，向N，N-二甲基甲醯胺中緩緩加入磷醯氯(18.60毫升，0.20摩爾)。在0℃攪拌幾分鐘後，將反應混合物溫熱至室溫，並向反應混合物中加入二氯甲烷以使該固體溶解。然後將反應混合物再冷卻至0℃。向反應混合物中加入4-乙基間苯二酚(25.0克，0.181摩爾)的200毫升二氯甲烷溶液。在0℃攪拌10分鐘後，將反應物溫熱至室溫，然後回流16小時。將反應物冷卻至室溫，緩緩加入乙酸鈉(50克)的100毫升水溶液。將該混合物回流40分鐘，然後冷卻至室溫。水層用二氯甲烷洗滌數次。合併有機相，並用1N鹽酸溶液和鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥。過濾並除去溶劑，從甲苯和己烷中重結晶後得到橙色固體(17克，56％)。TLC Rf＝0.39(30％乙酸乙酯/己烷)1HNMR(CDCl3)δ11.30(s，1)，9.71(s，1)，7.29(s，1)，6.36(s(br)，1)，2.61(q，2，J＝7.48Hz)，1.25(t，3，J＝7.54Hz)B.製備1-(3-氯丙氧基-1-基)-3-羥基-4-甲醯-5-乙基苯。
在室溫攪拌5-乙基-2，4-二羥基苯甲醛(8.00克，48.1毫摩爾)、3-氯丙醇(45.5克，48.1毫摩爾)和三苯膦(12.62克，48.1毫摩爾)的190毫升無水四氫呋喃溶液。向該溶液中加入偶氮二羧酸二乙酯(7.60毫升，48.1毫摩爾)的10毫升四氫呋喃溶液。在室溫攪拌該反應物17小時，然後真空除去溶劑。將粗產物吸附在125克60微米的矽膠上，然後用1升30％乙酸乙酯/己烷經100毫升活塞洗脫矽膠。所得黃色油然後進一步在矽膠上經Waters Prep 500色譜純化，在45分鐘內，用5％-30％乙酸乙酯/己烷梯度洗脫。得到所需產物，為澄清的油(7.03克，61％)。TLCRf＝0.47(30％乙酸乙酯/己烷)1HNMR(CDCl3)δ11.40(s，1)，9.71(s，1)，7.2 6(s，1)，6.42(s，1)，4.18(t，2，J＝5.80Hz)，3.77(t，2，J＝6.28Hz)，2.57(q，2，J＝7.41Hz)，2.30(m，2)，1.96(t，3，J＝7.54Hz)IR(CHCl3)3021，2971，2937，1643，1586，1494cm-1質譜(FD)m/e 243(M+)C12H15O3Cl的分析理論值C，59.33；H，6.23；Cl，14.61；實測值C，59.24；H，6.18；Cl，14.69。C.製備1-苄氧基-3-[3-氯丙氧基]-4-乙基-6-甲醯苯。
將用己烷洗滌的氫化鈉(2.40克，60％油分散液，60毫摩爾)在無水N，N-二甲基甲醯胺中的懸浮液在氬氣氛和室溫下攪拌。向該氫化鈉懸浮液中緩緩加入1-(3-氯丙氧基-1-基)-3-羥基-4-甲醯-5-乙基苯(6.92克，28.6毫摩爾)的50毫升無水N，N-二甲基甲醯胺溶液，並在室溫攪拌該混合物30分鐘。向醇鹽溶液中加入苄基溴(9.78克，57.2毫摩爾)，並在室溫下繼續攪拌。三小時後，小心地用飽和氯化銨使反應物驟冷，然後用水稀釋反應物，並用乙酸乙酯萃取幾次。有機提取物用水洗滌，用硫酸鎂乾燥。過濾並除去溶劑，得到黃色固體。該固體使用矽膠載體經Waters Prep 500色譜純化，在45分鐘內，用5％-40％乙酸乙酯/己烷梯度洗脫。得到所需的產物，為白色固體(7.14克，75％)。TLCRf＝0.34(30％乙酸乙酯/己烷)1HNMR(CDCl3)δ10.41(s，1)，7.68(s，1)，7.42(m，5)，6.49(s，1)，5.20(s，2)，4.17(t，2，J＝5.78Hz)，3.78(t，2，J＝6.22Hz)，2.57(q，2，J＝7.53Hz)，2.29(m，2)，1.18(t，3，J＝7.50Hz)IR(CHCl3)3013，2971，2875，1667，1607，1505，1465cm-1質譜(FD)m/e 332(M+)C19H21O3Cl的分析理論值C，68.57；H，6.36；Cl，10.65；實測值C，68.68；H，6.54；Cl，10.53。D.製備1-苄氧基-3-[3-氯丙氧基]-4-乙基-6-羥基苯。
在室溫下，用間氯過苯甲酸(1.1當量)處理上述製備的醛在二氯甲烷(0.18M)中的溶液，並在室溫攪拌該反應物。30分鐘後，形成沉澱。5小時後反應完全。過濾除去沉澱，真空除去溶劑，所得固體溶於四氫呋喃(0.28M)中，並以2N氫氧化鈉(2.5當量)一起攪拌過夜。然後，真空除去四氫呋喃，所得含水混合物用水稀釋，並1N鹽酸酸化至pH1。該乳狀懸浮液用乙酸乙酯萃取幾次。有機提取物用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌幾次，然後用鹽水洗滌。有機層用硫酸鎂乾燥。過濾並除去溶劑，得到8.70克棕色的油。該油經矽膠色譜純化。
由1-苄氧基-2-[3-氯丙氧基]-4-乙基-6-甲醯苯得到1-苄氧基-2-[3-氯丙氧基]-4-乙基-6-羥基苯，產率66％。TLCRf＝0.46(30％乙酸乙酯/己烷)1HNMR(CDCl3)δ7.44(m，5)，6.79(s，1)，6.58(s，1)，5.25(s，1)，5.10(s，2)，4.03(t，2，J＝5.77Hz)，3.78(t，3，J＝6.36Hz)，2.56(q，2，J＝7.56Hz)，2.23(m，2)，1.17(t，3，J＝7.59Hz).IR(CHCl3)3552，3012，2969，2934，1511，1469cm-1質譜(FAB)m/e 320(M+)C18H2103Cl的分析理論值C，67.39；H，6.60；Cl，11.05；實測值C，67.09；H，6.56；Cl，10.82。E.製備1-苄氧基-3-[3-氯丙氧基]-4-乙基-6-乙氧基苯。
在氬氣氛和室溫下攪拌用己烷洗滌的氫化鈉(2.10當量)在無水N，N-二甲基甲醯胺(1.3M溶液)中的懸浮液。向氫化鈉溶液中緩緩加入苯酚在無水N，N-二甲基甲醯胺(0.15M)中的溶液。在室溫攪拌反應物30分鐘。向反應物中加入18-冠-6，然後滴加烷基滷(5.0當量)。在室溫攪拌幾小時後，用飽和氯化銨溶液使反應驟冷，用水稀釋並用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯提取物用水洗滌，然後用硫酸鎂乾燥。過濾並除去溶劑，得到粗產物，該粗產物經矽膠閃色譜純化。
由1-苄氧基-2-[3-氯丙氧基]-4-乙基-6-羥基苯和乙基碘得到1-苄氧基-2-[3-氯丙氧基]-4-乙基-6-乙氧基苯，產率77％。TLCRf＝0.48(30％乙酸乙酯/己烷)1HNMR(CDCl3)δ7.40(m，5)，6.80(s，1)，6.56(s，1)，5.16(s，2)，4.10(q，2，J＝6.97Hz)，4.00(t，2，J＝5.70Hz)，3.77(t，z，J＝6.73Hz)，2.60(q，2，J＝7.50Hz)，2.21(m，2)，1.43(t，3，J＝6.97Hz)，1.20(t，3，J＝7.46Hz)IR(CHCl3)3011，2971，2950，2890，1620，1507，1471cm-1質譜(FAB)m/e 348(M+)C20H25O3Cl的分析理論值C，68.86；H，7.22實測值C，69.35；H，7.38。F.製備色酮在氬氣氛和室溫下，用1小時，向225毫升無水乙醇溶液中加入16.56克金屬鈉。所有的金屬鈉加完後，使反應混合物回流1小時，然後冷卻至室溫。用25分鐘，向乙醇鈉溶液中加入2，4-二羥基苯乙酮(34.82克，0.180摩爾)、diethyloxylate(54.57克，0.41摩爾)、無水乙醇(45毫升)和乙醚(45毫升)的混合物。然後使所得深慄色混合物回流2.5小時，並冷卻至室溫。將反應混合物倒入約600毫升1N鹽酸中，然後用乙醚萃取幾次。從提取物中除去乙醚，並將所得的膠溶於135毫升乙醇中。向該溶液中加入2.25毫升濃鹽酸，然後回流45分鐘。將反應物冷卻至室溫，減壓除去乙醇，得到棕色固體。將該固體溶於乙酸乙酯中，並用水洗滌一次，用飽和碳酸氫鈉洗滌兩次，用水洗滌一次，然後用硫酸鎂乾燥。過濾並除去溶劑，得到87克棕色固體，將其從乙酸乙酯/石油醚中重結晶。重結晶得到24.07克(48％)褐色固體色酮。TLCRf＝0.27(40％乙酸乙酯/己烷)1H NMR(CDCl3)δ8.80(s(br)，1)，7.98(d，1，J＝8.78Hz)，7.13(d，1，J＝8.78Hz)，7.13(s，1)，4.47(q，2，J＝7.11Hz)，2.96(t，2，J＝7.25Hz)，1.73(m，2)，1.46(t，3，J＝7.16Hz)，1.02(t，3，J＝7.11Hz).G.製備3，4-二氫-8-丙基-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸乙酯。
在Parr瓶中，將色酮(12.07克，0.044摩爾)溶於210毫升乙酸中。向該溶液中加入催化劑(10％鈀/活性碳，7.2克)，用52psi的氫氣對該瓶加壓。攪拌反應物23小時。在燒結玻璃漏鬥中經硅藻土墊過濾除去催化劑。催化劑用乙酸乙酯洗滌。從濾液中除去溶劑，所得的油與甲苯共沸，得到12克棕色油。該物質在裝有矽膠柱的Waters Prep 500 HPLC上純化，在50分鐘內以250毫升/分鐘的流速、用5％至40％乙酸乙酯/己烷梯度洗脫，收集500毫升餾分。得到純化的苯並二氫吡喃，為粉紅色的油(10克，86％)。TLCRf＝0.50(40％乙酸乙酯/己烷)1H NMR(CDCl3)δ6.73(d，1，J＝8.20Hz)，6.37(d，1，J＝8.20Hz)，4.78(s(br)，1)，4.75(m，1)，4.25(m，2)，2.68(m，4)，2.16(m，2)，1.60(m，2)，1.29(t，3，J＝7.07Hz)，0.99(t，3，J＝7.34Hz).H.製備[3-[(1-苄氧基-4-乙基-2-乙氧基-5-基)氧]丙氧基]-3，4-二氫-8-丙基-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸乙酯。
在氬氣氛下，向1-苄氧基-3-[3-氯丙氧基]-4-乙基-6-乙氧基苯(1.0克，2.87毫摩爾)在丙酮(8.0毫升)中的溶液中加入碘化鈉(4.31克，28.7毫摩爾)。使反應混合物回流8小時，然後冷卻至室溫。從反應混合物中真空除去丙酮，將殘餘物溶於乙醚中，用水洗滌。乙醚提取物用硫酸鎂乾燥並過濾。除去溶劑，得到1.09克碘化物，為黃色油，該油在-4℃放置即固化。
在氬氣氛和室溫下，用上述製備的碘化物的4.0毫升N，N-二甲基甲醯胺溶液處理3，4-二氫-8-丙基-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸乙酯(0.545克，2.06毫摩爾)和碳酸鉀(0.854克，6.18毫摩爾)在4.0毫升無水N，N-二甲基甲醯胺中的混合物。在室溫攪拌42小時後，用水使反應物驟冷，然後用乙酸乙酯萃取幾次。乙酸乙酯提取物用水洗滌，然後用硫酸鎂乾燥。過濾並除去溶劑，得到1.30克黃色油。該油在矽膠上經閃色譜純化，用20％乙酸乙酯/己烷洗脫。得到所需的偶合產物(0.932克)，產率79％，為黃色油。TLCRf＝0.48(30％乙酸乙酯/己烷)1HNMR(CDCl3)δ7.43(m，5)，6.85(d，1，J＝8.37Hz)，6.82(s，1)，6.60(s，1)，6.50(d，1，J＝8.37Hz)，5.13(s，2)，4.78(m，1)，4.26(m，2)，4.13(m，6)，2.67(m，6)，2.24(m，4)，1.62(m，2)，1.46(t，3，J＝7.00Hz)，1.32(t，3，J＝7.09Hz)，1.21(t，3，J＝7.47Hz)，0.98(t，3，J＝7.34Hz)IR(CHCl3)3027，3010，2966，2930，2867，1750，1611，1507，1469cm-1質譜(FAB)m/e 486(M+)C35H44O7的分析理論值C，72.89；H，7.69實測值C，72.85；H，7.40。I.製備[3-[(6-乙基-4-乙氧基-3-羥基-1-基)氧]丙氧基]-3，4-二氫-8-丙基-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸乙酯。
向苄基醚在乙酸乙酯或甲醇(0.14M溶液)中的溶液中加入10％鈀/活性碳(15％w/w)。向該溶液中鼓泡通入氫氣15分鐘。在室溫和氫氣氛下攪拌反應物。在原料消耗後，向該反應混合物中鼓泡通入氬氣15分鐘。反應混合物在燒結玻璃漏鬥中經硅藻土墊過濾，催化劑用乙酸乙酯洗滌。所得粗產物經閃色譜純化，用矽膠作固體載體，用乙酸乙酯/己烷混合物洗脫。
由[3-[(1-苄氧基-4-乙基-2-乙氧基-5-基)氧]丙氧基]-3，4-二氫-8-丙基-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸乙酯製備[3-[(6-乙基-4-乙氧基-3-羥基-1-基)氧]丙氧基]-3，4-二氫-8-丙基-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸乙酯，產率87％，為白色固體。TLCRf＝0.32(30％乙酸乙酯/己烷)1HNMR(CDCl3)δ6.85(d，1，J＝8.37Hz)，6.74(s，1)，6.62(s，1)，6.52(d，1，J＝8.37Hz)，4.79(m，1)，4.19(m，8)，2.68(m，8)，2.26(m，4)，1.62(m，2)，1.45(t，3，J＝6.96Hz)，1.33(t，3，J＝7.14Hz)，1.21(t，3，J＝7.54Hz)，1.00(t，3，J＝7.33Hz)IR(CHCl3)3540，3026，2965，2934，2873，1750，1611，1509，1492cm-1質譜(FD)m/e 486(M+)C28H38NO7的分析理論值C，69.11；H，7.87實測值C，69.00；H，8.00。J.製備3，4-二氫-8-丙基-7-[3-(2-乙基-5-羥基-4-乙氧基-苯氧基)丙氧基]-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸。
將該乙基酯在二噁烷(0.14M溶液)中於室溫下攪拌。用3.0當量氫氧化鈉(2N水溶液)處理該溶液。在室溫攪拌該反應物2.5小時，然後真空除去二噁烷。將所得殘餘物溶於水中，並用5N鹽酸酸化至pH1(形成白色ppt.)。該含水混合物用乙酸乙酯萃取幾次，然後用硫酸鎂乾燥。過濾並除去溶劑，得到粗產物。
通過從乙酸乙酯/己烷中重結晶純化3，4-二氫-8-丙基-7-[3-(2-乙基-5-羥基-4-乙氧基-苯氧基)丙氧基]-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸。得到所需的酸，為白色結晶(0.436克，71％)。TLCRf＝0.49(6.5/3.4/0.1乙酸乙酯/己烷/AcOH)1HNMR(CDCl3)δ6.84(d，1，J＝8.44Hz)，6.69(s，1)，6.56(s，1)，6.50(d，1，J＝8.44Hz)，5.65(s(br)，1)，4.77(dd，1，J＝7.62，3.72Hz)，4.10(m，6)，2.77(m，2)，2.62(m，4)，2.22(m，4)，1.54(m，2)，1.42(t，3，J＝6.98Hz)，1.16(t，3，J＝7.48Hz)，0.94(t，3，J＝7.30Hz)IR(KBr)3215(br)，2956，2930，2870，1706，1613，1589，1516cm-1質譜(FD)m/e 458(M+)C26H34O7的分析理論值C，68.10；H，7.47實測值C，68.13；H，7.56。
實施例13製備7-[3-(4-乙醯基-2-乙基-5-羥基苯氧基)丙氧基]-3，4-二氫-8-丙基-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸 A.製備色酮在氬氣氛和室溫下，用1小時，向225毫升無水乙醇中加入16.56克金屬鈉。所有的金屬鈉加完後，使反應混合物回流1小時，然後冷卻至室溫。用25分鐘，向乙醇鈉溶液中加入2，4-二羥基苯乙酮(34.82克，0.180摩爾)、diethyloxylate(54.57克，0.41摩爾)、無水乙醇(45毫升)和乙醚(45毫升)的混合物。然後使所得深慄色混合物回流2.5小時，並冷卻至室溫。將反應混合物倒入約600毫升1N鹽酸中，然後用乙醚萃取幾次。從提取物中除去乙醚，並將所得的膠溶於135毫升乙醇中。向該溶液中加入2.25毫升濃鹽酸，然後回流45分鐘。將反應物冷卻至室溫，減壓除去乙醇，得到棕色固體。將該固體溶於乙酸乙酯中，並用水洗滌一次，用飽和碳酸氫鈉洗滌兩次，用水洗滌一次，然後用硫酸鎂乾燥。過濾並除去溶劑，得到87克棕色固體，將其從乙酸乙酯/石油醚中重結晶。重結晶得到24.07克(48％)褐色固體色酮。TLCRf＝0.27(40％乙酸乙酯/己烷)1H NMR(CDCl3)δ8.80(s(br)，1)，7.98(d，1，J＝8.78Hz)，7.13(d，1，J＝8.78Hz)，7.13(s，1)，4.47(q，2，J＝7.11Hz)，2.96(t，2，J＝7.25Hz)，1.73(m，2)，1.46(t，3，J＝7.16Hz)，1.02(t，3，J＝7.11Hz).B.製備3，4-二氫-8-丙基-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸乙酯。
在壓力瓶中，將色酮(12.07克，0.044摩爾)溶於210毫升乙酸中。向該溶液中加入催化劑(10％鈀/活性碳，7.2克)，用52psi的氫氣對該瓶加壓。攪拌反應物23小時。在燒結玻璃漏鬥中經硅藻土墊過濾除去催化劑。催化劑用乙酸乙酯洗滌。從濾液中除去溶劑，所得的油與甲苯共沸，得到12克棕色油。該物質在裝有矽膠柱的Waters Prep 500 HPLC上純化，在50分鐘內以250毫升/分鐘的流速、用5％至40％乙酸乙酯/己烷梯度洗脫，收集500毫升餾分。得到純化的苯並二氫吡喃，為粉紅色的油(10克，86％)。TLCRf＝0.50(40％乙酸乙酯/己烷)1H NMR(CDCl3)δ6.73(d，1，J＝8.20Hz)，6.37(d，1，J＝8.20Hz)，4.78(s(br)，1)，4.75(m，1)，4.25(m，2)，2.68(m，4)，2.16(m，2)，1.60(m，2)，1.29(t，3，J＝7.07Hz)，0.99(t，3，J＝7.34Hz).C.製備7-(3-氯丙氧基)-3，4-二氫-8-丙基-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸乙酯。
在氬氣氛和室溫下，將3，4-二氫-8-丙基-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸乙酯在無水N，N-二甲基甲醯胺中的溶液(0.3M)與固體碳酸鉀(1.75當量)一起攪拌。向該懸浮液中加入1-溴-2-氯丙烷(2.5當量)。在室溫攪拌該反應物20小時，然後用水驟冷。反應混合物用乙酸乙酯萃取三次，乙酸乙酯提取物用水洗滌，然後用硫酸鎂乾燥。過濾並除去溶劑，得到油狀粗產物，該粗產物在矽膠上經閃色譜純化，用15％乙酸乙酯/己烷洗脫。得到產率72％的7-(3-氯丙氧基)-3，4-二氫-8-丙基-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸乙酯。1H NMR(CDCl3)δ6.83(d，1，J＝8.96Hz)，6.48(d，1，J＝8.96Hz)，4.77(t，1，J＝5.52Hz)，4.67(m，2)，4.10(t，2，J＝5.52Hz)，3.80(t，2，J＝5.50Hz)2.70(m，4)，2.26(m，4)，1.6(m，2)，1.28(t，3，J＝7.36Hz)，0.98(t，3，J＝6.44Hz)IR(CHCl3)2963，2933，1749，1728，1612cm-1質譜(FAB)(m/z)341(M++H)，340(M+)。D.7-[3-(4-乙醯基-2-乙基-5-羥基苯氧基)丙氧基]-3，4-二氫-8-丙基-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸乙酯。
在室溫，向2，4-二羥基-4-乙基苯乙酮在5∶1的甲乙酮和二甲基亞碸(0.45M溶液)中的溶液中加入氯丙基醚(1.0當量)、碳酸鉀(1.75當量)和碘化鉀(0.20當量)。然後使反應物回流20小時。將反應物冷卻至室溫，用水驟冷。該反應混合物用乙酸乙酯萃取三次，該提取物用水洗滌，然後用硫酸鎂乾燥。過濾並除去溶劑，得到所需產物，該粗產物在矽膠上經閃色譜純化，用20％乙酸乙酯/己烷洗脫。得到產率為73％的7-[3-(4-乙醯基-2-乙基-5-羥基苯氧基)丙氧基]-3，4-二氫-8-丙基-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸乙酯。1H NMR(CDCl3)δ7.43(s，1)，6.81(d，1，J＝8.39Hz)，6.47(d，1，J＝8.39Hz)，6.42(s，1)，4.75(m，1)，4.24(m，4)，4.14(t，2，J＝5.98Hz)，2.64(m，6)，2.58(s，3)，2.35(m，2)，2.20(m，2)，1.55(m，2)，1.29(t，3，J＝7.14Hz)，1.18(t，3，J＝7.47Hz)，0.93(t，3，J＝7.34Hz).IR(CHCl3)2961，2931，2862，1746，1715，1631，1569cm-1質譜(FAB)(m/z)485(M++H)，484(M+)C28H36O7的分析理論值C，69.40；H，7.49實測值C，70.23；H，8.08。E.7-[3-(4-乙醯基-2-乙基-5-羥基苯氧基)丙氧基]-3，4-二氫-8-丙基-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸。
用2N氫氧化鈉(3.0當量)處理7-[3-(4-乙醯基-2-乙基-5-羥基苯氧基)丙氧基]-3，4-二氫-8-丙基-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸乙酯在二噁烷(3.5M溶液)中的溶液，並在室溫下攪拌。攪拌4小時後，從反應物中除去二噁烷，剩餘的溶液用水稀釋，並用5N鹽酸酸化。所得乳狀溶液用乙酸乙酯萃取。該乙酸乙酯提取物用硫酸鎂乾燥並過濾。除去溶劑，得到白色固體。該固體在矽膠上經閃色譜純化，用50％乙酸乙酯/己烷洗脫，並將所得固體從乙酸乙酯和己烷中結晶。得到所需的酸，產率47％。1H NMR(CDCl3)δ12.72(s，1)，7.44(s，1)，6.86(d，1，J＝8.30Hz)，6.51(d，1，J＝8.30Hz)，6.40(s，1)，4.75(dd，1，J＝9.18Hz，4.59Hz)，4.23(t，2，J＝5.74Hz)，4.15(t，2，J＝5.74Hz)，2.80(m，1)，2.62(m，2)，2.60(s，3)，2.58(m，2)，2.35(m，2)，2.13(m，1)，1.55(m，2)，1.31(t，3，J＝6.90Hz)，1.20(t，3，J＝8.04Hz)，0.95(t，3，J＝8.04Hz)IR(CCl4)3020，3000，2945，3000，1775，1725，1633，1615cm-1質譜(FD)(m/z)456(M+)C26H32NO7的分析理論值C，68.40；H，7.06實測值C，68.61；H，7.22
實施例14製備2-[3-[3-(4-乙醯基-2-乙基-5-羥基苯氧基)丙氧基)-2-丙基苯氧基]丁酸 A.2-[2-丙基-3-羥基苯氧基]丁酸乙酯。
在氬氣氛下，用15毫升無水己烷洗滌氫化鈉(0.97克，60％油分散液，24毫摩爾)。用注射器除去己烷上清液。向氫化鈉中加入無水四氫呋喃(40毫升)，並且在室溫和攪拌下加入在40毫升四氫呋喃中的二羥基丙基苯(3.68克，24毫摩爾)。在室溫攪拌25分鐘後，迅速加入2-溴丙酸乙酯(4.48克，23毫摩爾)。在室溫攪拌17小時後，用飽和氯化銨水溶液使反應物驟冷，真空除去四氫呋喃。所得含水混合物用乙酸乙酯萃取幾次。有機提取物用硫酸鎂乾燥。過濾並除去溶劑，得到橙色的油。該油在矽膠上經Waters Prep 500色譜純化，用5％-30％乙酸乙酯/己烷梯度洗脫。得到所需的產物，為澄清的油(2.10克，33％)。TLCRf＝0.39(30％乙酸乙酯/己烷，矽膠)1H NMR(CDCl3)δ6.96(t，1，J＝8.2Hz)，6.45(d，1，J＝8.12Hz)，6.28(d，1，J＝8.12Hz)，4.88(s，1)，4.59(t，1，J＝6.04Hz)，4.20(q，2，J＝7.52Hz)，2.69(m，2)，2.02(m，2)，1.63(m，2)，1.24(t，3，J＝7.03Hz)，1.10(t，3，J＝7.43Hz)，0.99(t，3，J＝7.40Hz)IR(CHCl3)3603，3009，2966，2936，2873，1748，1728，1596cm-1質譜(FAB)(m/z)267(M++H)，266(M+)。B.2-[2-丙基-3-(3-氯丙氧基)苯氧基]丁酸乙酯。
在氬氣氛和室溫下，將2-[2-丙基-3-羥基苯氧基]丁酸乙酯在無水N，N-二甲基甲醯胺中的溶液(0.3M)與固體碳酸鉀(1.75當量)一起攪拌。向該懸浮液中加入1-溴-2-氯丙烷(2.5當量)。在室溫攪拌反應物20小時，然後用水使反應物驟冷。該反應混合物用乙酸乙酯/己烷萃取三次，乙酸乙酯提取物用水洗滌，然後用硫酸鎂過濾。過濾並除去溶劑，得到粗產物，為油狀，該粗產物在矽膠上經閃色譜純化，用15％乙酸乙酯/己烷洗脫。得到產率為85％的2-[2-丙基-3-(3-氯丙氧基)苯氧基]丁酸乙酯。1H NMR(CDCl3)δ7.05(t，1，J＝8.26Hz)，6.55(d，1，J＝8.18Hz)，6.35(d，1，J＝8.27Hz)，4.60(t，1，J＝6.02Hz)，4.20(q，2，J＝7.13Hz)，4.11(t，2，J＝5.75Hz)，3.79(t，2，J＝6.36Hz)，2.72(m，2)，2.26(m，2)，2.01(m，2)，1.59(m，2)，1.25(t，3，J＝7.18Hz)，1.11(t，3，J＝7.39Hz)，0.97(t，3，J＝7.35Hz)IR(CHCl3)3020，2967，2935，2872，1749，1727，1594cm-1質譜(FAB)(m/z)343(M++H)，342(M+)。C18H27O4Cl的分析理論值C，63.06；H，7.94；Cl，10.34；實測值C，63.19；H，7.84；Cl，10.58。
C.2-[3-[3-(4-乙醯基-2-乙基-5-羥基苯氧基)丙氧基]-2-丙基苯氧基]丁酸乙酯。
在室溫下，向2，4-二羥基-4-乙基苯乙酮在5∶1的甲乙酮和二甲基亞碸(0.45M)中的溶液中加入2-[2-丙基-3-(3-氯丙氧基)苯氧基]丁酸乙酯(1.0當量)、碳酸鉀(1.75當量)和碘化鉀(0.20當量)。然後使該反應物回流20小時。將反應物冷卻至室溫，並用水驟冷。該反應混合物用乙酸乙酯萃取三次，提取物用水洗滌，然後用硫酸鎂乾燥。過濾並除去溶劑，得到粗產物，該粗產物在矽膠上經閃色譜純化，用20％乙酸乙酯/己烷洗脫。得到產率為78％的2-[3-[3-(4-乙醯基-2-乙基-5-羥基苯氧基)丙氧基]-2-丙基苯氧基]丁酸乙酯。1H NMR(CDCl3)δ12.72(s，1)，7.43(s，1)，7.04(t，1，J＝8.29Hz)，6.55(d，1，J＝8.30Hz)，6.42(s，1)，6.34(d，1，J＝8.30Hz)，4.58(t，1，J＝5.98Hz)，4.20(m，6)，2.72(m，2)，2.57(s，3)，2.56(m，2)，2.32(m，2)，2.01(m，2)，1.53(m，2)，1.23(t，3，J＝7.06Hz)，1.18(t，3，J＝7.45Hz)，1.10(t，3，J＝7.38Hz)，0.94(t，3，J＝7.33Hz).IR(CHCl3)2969，2931，1754，1730，1633，1595cm-1質譜(FD)(m/z)486(M+)。C28H38O7的分析理論值C，69.11；H，7.87；實測值C，69.08；H，8.05。
D.2-[3-[3-(4-乙醯基-2-乙基-5-羥基苯氧基)丙氧基)-2-丙基苯氧基]丁酸。
用2N氫氧化鈉(3.0當量)處理2-[2-丙基-3-[[3-(4-乙醯基-2-乙基-5-羥基苯氧基)丙基]氧]苯氧基]丁酸乙酯在二噁烷(3.5M溶液)中的溶液，並在室溫攪拌。在室溫攪拌4小時後，從反應物中除去二噁烷，剩餘的水溶液用水稀釋，並用5N鹽酸酸化。所得乳狀溶液用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯提取液用硫酸鎂乾燥並過濾。除去溶劑得到白色固體。該固體通過從乙醚和己烷中重結晶進行純化。得到所需的酸，產率69％。1H NMR(CDCl3)δ12.72(s，1)，7.43(s，1)，7.07(t，1，J＝8.28Hz)，6.58(d，1，J＝8.28Hz)，6.48(s，1)，6.38(d，1，J＝8.28Hz)，4.63(t，1，J＝5.98Hz)，4.23(t，2，J＝6.00Hz)，4.17(t，2，J＝5.98Hz)，2.68(m，2)，2.58(s，3)，2.56(m，2)，2.33(m，2)，2.05(m，2)，1.54(m，2)，1.18(t，3，J＝7.42Hz)，1.12(t，3，J＝7.36Hz)，0.94(t，3，J＝7.29Hz)IR(KBr)2966，2930，2871，1705，1641，1593cm-1質譜(FD)(m/z)458(M+)。C26H34O7的分析理論值C，68.10；H，7.47；實測值C，68.01；H，7.51。
採用體外分析評價式I化合物的生物學活性，該分析用於測量這些化合物對細胞溶質磷脂酶A2的抑制活性。該分析基本上按照R.Kramer等在Journalof Biological Chemistry，2265268-5272(1991)中所述的方法進行，不同的是向反應混合物中加入的式I化合物的量不同。
如下製備含有摩爾比為2∶1的1-棕櫚醯-2[14C]花生四烯醯-sn-甘油醯-3-膽鹼磷酸([14C]PC，55mCi/mmol，得自NEN Research Products)和sn-二油醯甘油(DG，Avanti Polar Lipids，Birmingham，Alabama)的聲處理脂質體。將[14C]PC(20微摩爾，1×106dpm，55μCi/ml的甲苯/乙醇溶液)和DG(10微摩爾，100μg/ml的氯仿溶液)在氮氣氛下乾燥。通過用Microson探針聲處理器(probe-sonicator，Heat Systems Ultrasonics)在4℃進行4×15秒聲處理，間隔為45秒，將類脂分散於1毫升150mM氯化鈉、50mM HEPES(pH7.5，分析緩衝液)中。加入基本上不含脂肪酸的牛血清白蛋白(100毫克/毫升在水中的儲液，Sigma)至最終濃度為4毫克/毫升。用於進行cPLA2活性分析的樣品與50μl脂質體(含有0.25微摩爾DG的0.5微摩爾[14C]PC，50,000dpm)和不同濃度的式I化合物在總體積為0.2毫升的分析緩衝液(該緩衝液含有1mM氯化鈣和1mM 2-巰基乙醇)中進行培養。該培養在37℃進行15分鐘，通過加入2毫升Dole’s試劑(2-丙醇/庚烷/0.5M硫酸，40∶10∶1，含有10μg/ml硬脂酸)終止培養。
混合後，加入1.2毫升庚烷和1毫升水。將該混合物簡單地渦旋，並將上面的相轉入含有2毫升庚烷和150毫克Bio-Sil(Bio-Rad Laboratories)的試管中，其中的Bio-Sil在使用前於130℃活化。將該試管徹底渦旋並離心(1000×g，5分鐘)。將上清液倒入閃爍管中。加入10毫升液體閃爍cocktail(ReadyProtein，Beckman)後，用LS 7000型Backman液體閃爍計數器對放射性計數。高放射性數與酶活性有關。
上面表I中描述了一系列該實驗的結果。第一欄給出了試驗用抑制劑的實施例編號。第二欄給出了50％抑制細胞溶質磷脂酶A2活性的試驗化合物的濃度(微摩爾量)。
表I細胞溶質磷脂酶A2的抑制人細胞溶質PLA2實施例IC50(μM)218317439.45126981293510 4311 5412 2813 1314 14免疫細胞化學免疫細胞化學證明患有阿耳茨海默氏病的患者腦中星形細胞中含有細胞溶質磷脂酶A2的活性星形細胞數增加。免疫化學在患有阿耳茨海默氏病的患者和正常人的人枕骨皮質石蠟切片上進行。在每種情況下，僅僅將組織簡單地固定(60-90分鐘)，然後在包埋之前轉入Tris緩衝的鹽水中幾天。採用標準技術使抗純化U937細胞的cPLA的單克隆抗體M12增加。在BALB/c小鼠中產生腹水，用Protein A Fast FlowTM樹脂對抗體進行親核純化。抗體M12識別天然形式的cPLA2，並且也是中和抗體。使用對抗神經膠質原纖維酸性蛋白的兔抗血清(GFAP；Biogenex Labs，San Ramon，California)標記星形細胞。
組織切片的免疫印染(10μM)採用常規的免疫過氧化酶技術，並且使用抗生物素蛋白-生物素過氧化酶體系(ABC，Vector Laboratories，Burlingame，California)。用0.1毫克/毫升M12抗體使cPLA2定位。所得到的抗-GFAP用作預稀釋的抗血清。通過隨後免疫印染進行二重定位。用採用FastRedTM作為Chromgen的鹼性磷酸酶-抗生蛋白鏈菌素體系使兔抗體(GFAP)定位，用氯化鎳加強的DAB(Vector Laboratories)檢測過氧化物酶標記的小鼠抗cPLA2。
這些免疫化學研究證明了灰質中原生質星形細胞中cPLA2的定位，並且進一步表明了這些類型的細胞對腦中炎性過程的重要性。正常成熟腦與患有阿耳茨海默氏病患者的腦相比表明了細胞溶質磷脂酶A2對該疾病炎性組元的作用。
由於本發明所使用的化合物有效地抑制細胞溶質磷脂酶A2，這些化合物在治療各種臨床疾病中是有價值的。本發明提供了治療或預防哺乳動物阿耳茨海默氏病的方法，該方法包括給需要該治療的哺乳動物施用有效量的式I化合物。
式I化合物通常以藥物組合物的形式施用。這些化合物可以通過各種途徑施用，包括經口、直腸、透皮、皮下、靜脈內、肌內和鼻內施用。這些化合物的可注射和口服組合物都是有效的。所述組合物按照藥物領域眾所周知的方法製備，並且含有至少一種活性化合物。
在製備本發明所用的組合物中，通常將活性成分與賦形劑混合，用賦形劑稀釋或者用可以是膠囊、香囊、紙或其他容器形式的載體包封。當賦形劑用作稀釋劑時，它可以是固體、半固體或液體物質，用作賦形劑、載體或活性成分的基質。因此，該組合物可以是片劑、丸劑、粉末、錠劑、香囊、扁囊劑、酏劑、懸浮液、乳液、溶液、糖漿、氣霧劑(以固體形式或在液體基質中)、含例如最多10％(重量)活性化合物的油膏、軟和硬明膠膠囊、栓劑、無菌注射液和無菌包裝的粉末。
在製備製劑時，可能需要研磨活性化合物以在與其他成分混合物之前提供合適的粒度。如果活性化合物基本上不溶，通常將其研磨成小於200目的粒度。如果活性化合物基本上溶於水，則通常通過研磨調整粒度，以使其基本上均勻地分布在製劑中，例如粒度為約40目。
合適賦形劑的某些實例包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、澱粉、阿拉伯膠、磷酸鈣、藻酸鹽、黃蓍膠、明膠、矽酸鈣、微晶纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素、水、糖漿和甲基纖維素。該製劑還可以包括潤滑劑例如滑石、硬脂酸鎂和礦物油；潤溼劑；乳化劑和懸浮劑；防腐劑例如羥基苯甲酸甲酯和羥基苯甲酸丙酯；甜味劑；和調味劑。採用本領域已知的方法，可以將本發明的組合物配製成在給患者施用後迅速、持續或延遲釋放活性成分的製劑。
該組合物優選配製成單位劑型，每一劑量含有約5至約100毫克、更通常是約10至約30毫克活性成分。術語「單位劑量」是指適於用作對人和其他哺乳動物給藥的單一劑量的可物理分割單位，每一單位含有預定量的計算產生所需療效的活性物質以及合適的藥物賦形劑。
活性化合物在很寬的劑量範圍內是有效的。例如，每日劑量通常為約0.5至約30毫克/公斤體重。在治療成年人時，尤其優選的劑量為約1至約15毫克/公斤/天，分單次或多次給藥。但是，應該理解，該化合物的實際施用量將由醫生根據有關的情況決定，這些情況包括所治療的疾病、所選擇的給藥途徑、實際施用的化合物、每個患者的年齡、體重和反應以及患者症狀的嚴重程度，因此，上述劑量範圍不是對本發明範圍的任何限制。在某些情況下，劑量水平低於上述範圍的下限可能是合適的，而在其他情況下，甚至可以使用更大的劑量而不致引起任何有害的副作用，條件是，首先將此更大的劑量分成幾個較小的劑量，在一天內給藥。
製劑1製備含有下列成分的硬明膠膠囊成分 量(毫克/膠囊)2-[2-丙基-3-[3-[2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羥基苯氧基]丙氧基]苯氧基]苯甲酸30.0澱粉 305.0硬脂酸鎂 5.0將上述成分混合併裝入硬明膠膠囊中，重340毫克。
製劑2用下列成分製備片劑成分 量(毫克/片)3-[5-甲氧基-2-(4-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羥基苯氧基]丁氧基]苯氧基]丙酸 25.0微晶纖維素 200.0膠態二氧化矽 10.0硬脂酸 5.0將上述成分混合併壓成片，每片重240毫克。
製劑3製備含有下列成分的乾粉吸入劑成分 重量％8-丙基-7-[3-[4-(4-氟苯基)-2-乙基-5-羥基苯氧基]丙氧基]苯氧基]-3，4-二氫-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸 5乳糖 95將活性成分與乳糖混合，並將該混合物加入乾粉吸入器具中。
製劑4如下製備每片含30毫克活性成分的片劑成分 量(毫克/片)2-苯基-4-7基-5-[[6-(2H-四唑-5-基)-6-甲基庚基]氧]苯酚 30.0毫克澱粉 45.0毫克微晶纖維素 35.0毫克聚乙烯吡咯烷酮(10％水溶液) 4.0毫克羧甲基澱粉鈉 4.5毫克硬脂酸鎂 0.5毫克滑石 1.0毫克總量 120毫克將活性成分、澱粉和纖維素過20目美國篩並充分混合。將聚乙烯吡咯烷酮溶液與所得粉末混合，然後使其通過16目美國篩。如此得到的顆粒在50-60℃乾燥，過16目美國篩。將預先通過30目美國篩的羧甲基澱粉鈉、硬脂酸鎂和滑石加入該顆粒中，混合後在壓片機上壓片，得到每片重150毫克的片劑。
製劑5如下製備每粒含40毫克藥物的膠囊成分 量(毫克/膠囊)3，4-二氫-8-丙基-7-[3-(2-乙基-5-羥基-4-乙氧基苯氧基)丙氧基]-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸40.0毫克澱粉 109.0毫克硬脂酸鎂 1.0毫克總量 150.0毫克將活性成分、纖維素、澱粉和硬脂酸鎂混合，過20目美國篩，並裝入硬明膠膠囊中，重150毫克。
製劑6如下製備每粒含225毫克活性成分的栓劑成分 量2，4-二乙基-5-[[6-甲基-6-(1H-四唑-5-基)庚基]氧]苯酚25毫克飽和脂肪酸甘油酯 至2000毫克將活性成分通過60目美國篩，並懸浮在用最低所需熱量預先熔融的飽和脂肪酸甘油酯中。然後將該混合物倒入2.0克容量的栓劑模子中並使其冷卻。
製劑7如下製備每5.0毫升劑量含50毫克藥物的懸浮液成分 量8-丙基-7-[3-[4-(4-氟苯基)-2-乙基-5-羥基苯氧基]丙氧基]苯氧基]-3，4-二氫-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸乙酯 50.0毫克黃原膠 4.0毫克羧甲基纖維素鈉(11％)微晶纖維素(89％) 50.0毫克蔗糖 1.75克苯甲酸鈉 10.0毫克調味劑和著色劑 適量純化水 至5.0毫升將藥物、蔗糖和黃原膠混合，過10目美國篩，然後與預先製備的微晶纖維素和羧甲基澱粉鈉在水中的溶液混合。苯甲酸鈉、調味劑和著色劑用一些水稀釋，並在攪拌下加入。然後向產物加入足量的水至所需的體積。
製劑8如下製備每粒含15毫克藥物的膠囊成分 量(毫克/膠囊)(E)-5-(3-羧基苯甲醯)-2-[[6-(4-甲氧基苯基-5-己基]氧]苯丙酸15.0毫克澱粉 407.0毫克硬脂酸鎂 3.0毫克總量425.0毫克將活性成分、纖維素、澱粉和硬脂酸鎂混合，過20目美國篩，並裝入硬明膠膠囊中，重560毫克。
製劑9如下製備靜脈內製劑成分 量7-[3-(4-乙醯基-2-乙基-5-羥基苯氧基)丙氧基]-3，4-二氫-8-丙基-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸 250.0毫克等滲鹽水 1000毫升製劑10如下製備局部製劑成分 量3，4-二氫-8-丙基-7-[3-(2-乙基-5-羥基-4-乙氧基-苯氧基)丙氧基]-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸 1-10克乳化蠟 30克液體石蠟 20克白色軟石蠟 至100克將白色軟石蠟加熱至熔融。摻入液體石蠟和乳化蠟，並攪拌至溶解。加入活性成分，並連續攪拌至分散。然後將該混合物冷卻成固體。
製劑11如下製備每片含10毫克活性成分的舌下或頰給藥片劑成分 每片的量活性成分 10.0毫克甘油 210.5毫克水 143.0毫克檸檬酸鈉 4.5毫克聚乙烯醇 26.5毫克聚乙烯吡咯烷酮 15.5毫克總量 410.0毫克通過連續攪拌並保持溫度在約90℃，將甘油、水、檸檬酸鈉。聚乙烯醇和聚乙烯吡咯烷酮混合在一起。當聚合物溶於溶液中時，將該溶液冷卻至約50-55℃，並緩緩地摻入藥物。將該均勻的混合物倒入由惰性物質製備的組成中，形成含藥物的厚約2-4毫米的擴散基質。然後將該擴散基質切成合適大小的單個片劑。
另一種優選的用於本發明方法的製劑採用透皮釋放裝置(「貼劑」)。這種透皮貼可用於提供控制量的連續或不連續擴散的本發明化合物。用於釋放藥物的透皮貼的結構和應用是本領域眾所周知的。參見例如US 5023252，1991年6月11日出版，該專利結合在本文中作為參考。這種貼劑可以製成連續、脈衝或按需釋放藥物的結構。
經常地，需要直接或間接地將該藥物組合引入腦中。直接引入的技術通常包括在宿主的腦室系統內放置藥物釋放導管，以使其通過血腦屏障。在US5011472(1991年4月30日出版)中描述了用於輸送生物因子至體內特殊的解剖區域的一種這樣的可移植釋放系統，該專利引入本文作為參考。
通常優選的間接引入技術一般包括將藥物組合物配製成通過將親水藥物轉化成脂溶性藥物或前藥而提供藥物潛伏發揮作用的形式。潛伏發揮作用通常是通過阻斷藥物中存在的羥基、羰基、硫酸根和伯胺基而使藥物更易溶於脂並能夠經得起輸送通過血腦屏障來實現。或者，親水藥物的釋放可以通過動脈內輸注可瞬時打開血腦屏障的高滲溶液來加強。
權利要求
1.治療哺乳動物阿耳茨海默氏病的方法，該方法包括給需要所述治療的哺乳動物施用有效量的磷脂酶A2活性抑制劑或所述抑制劑的可藥用鹽。
2.按照權利要求1的方法，其中所述的磷脂酶A2活性抑制劑是對細胞溶質磷脂酶A2具有特異性的。
3.下式化合物或其可藥用鹽或溶劑化物在製備用於治療哺乳動物阿耳茨海默氏病的藥物中的應用 其中R1是氫，C1-C6烷氧羰基，C1-C6烷氧基，C2-C6鏈烷醯基，C1-C6烷基，或苯基，所述苯基任選地被一個或多個滷素取代基取代；R2是羥基，C1-C6烷氧基，氫，或C1-C6烷基；R3是C1-C6烷基或氫；A是-O-或-CH2-；X1和X2各自為-CH2-或者結合在一起形成-CH＝CH-；n是0至6；B是-O-，-CH2-，或-C(R5R6)-；其中R5和R6獨立地為氫或C1-C6烷基；R4是苯基、佔噸基、四唑基、或3，4-二氫苯並吡喃基，所述苯基、佔噸基或3，4-二氫苯並吡喃基任選地被一個或多個選自下列的取代基取代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、氧、羧基、C1-C6烷氧羰基、羧基-(C1-C6烷氧基)-、羧基-(C1-C6烷基)-、NR7R8-C(O)-(C1-C6烷基)-、 和 其中R7和R8獨立地為氫，C1-C6烷基，C1-C6烷基磺醯基，或苯磺醯基。
4.如權利要求3的化合物的應用，其中所述化合物選自N，N-二甲基-3-(2-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羥基苯氧基)丙氧基)苯基)丙醯胺、N-甲磺醯基-3-(2-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羥基苯氧基)丙氧基)苯基)丙醯胺、N-苯磺醯基-3-(2-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羥基苯氧基)丙氧基)苯基)丙醯胺、8-丙基-7-[3-[4-(4-氟苯基)-2-乙基-5-羥基苯氧基]丙氧基]-3，4-二氫-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸、2-[2-丙基-3-[3-[2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羥基苯氧基]丙氧基]苯氧基]苯甲酸、3-(2-(4-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羥基苯氧基)丁氧基)苯基)丙酸、2-[3-[3-(4-乙醯基-2-乙基-5-羥基苯氧基)丙氧基)-2-丙基苯氧基]丁酸、7-[3-(4-乙醯基-2-乙基-5-羥基苯氧基)丙氧基]-3，4-二氫-8-丙基-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸、2-苯基-4-乙基-5-[[6-(2H-四唑-5-基)-6-甲基庚基]氧]苯酚、1-[5-乙基-2-羥基-4-[[6-甲基-6-(1H-四唑-5-基)庚基]氧]苯基]乙酮、2，4-二乙基-5-[[6-甲基-6-(1H-四唑-5-基)庚基]氧]苯酚、2-[3-[3-[(5-乙基-2-羥基[[1，1』-聯苯基]-4-基)氧]丙氧基]-2-丙基苯氧基]丙酸、7-羧基-9-氧代-3-[3-(2-乙基-5-羥基-4-苯基苯氧基)丙氧基]-9H-呫噸-4-丙酸、3，4-二氫-8-丙基-7-[3-(2-乙基-5-羥基-4-乙氧基-苯氧基)丙氧基]-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸、2-[3-[3-[(5-乙基-2-羥基[[1，1』-聯苯基]-4-基)氧]丙氧基]-2-丙基苯氧基]丙酸、7-羧基-9-氧代-3-[3-(2-乙基-5-羥基-4-苯基苯氧基)丙氧基]-9H-呫噸-4-丙酸和3，4-二氫-8-丙基-7-[3-(2-乙基-5-羥基-4-乙氧基-苯氧基)丙氧基]-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸，或者任何這些化合物的可藥用鹽或溶劑化物。
5.下式化合物或其可藥用鹽或溶劑化物在製備用於治療或預防與磷脂酶A2過量有關的生理疾病的藥物中的應用 其中R1是氫，C1-C6烷氧羰基，C1-C6烷氧基，C2-C6鏈烷醯基，C1-C6烷基，或苯基，所述苯基任選地被一個或多個滷素取代基取代；R2是羥基，C1-C6烷氧基，氫，或C1-C6烷基；R3是C1-C6烷基或氫；A是-O-或-CH2-；X1和X2各自為-CH2-或者結合在一起形成-CH＝CH-；n是0至6；B是-O-，-CH2-，或-C(R5R6)-；其中R5和R6獨立地為氫或C1-C6烷基；R4是苯基、呫噸基、四唑基、或3，4-二氫苯並吡喃基，所述苯基、呫噸基或3，4-二氫苯並吡喃基任選地被一個或多個選自下列的取代基取代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、氧、羧基、C1-C6烷氧羰基、羧基-(C1-C6烷氧基)-、羧基-(C1-C6烷基)-、NR7R8-C(O)-(C1-C6烷基)-、 其中R7和R8獨立地為氫，C1-C6烷基，C1-C6烷基磺醯基，或苯磺醯基。
6.如權利要求5的化合物的應用，其中所述化合物選自N，N-二甲基-3-(2-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羥基苯氧基)丙氧基)苯基)丙醯胺、N-甲磺醯基-3-(2-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羥基苯氧基)丙氧基)苯基)丙醯胺、N-苯磺醯基-3-(2-(3-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羥基苯氧基)丙氧基)苯基)丙醯胺、8-丙基-7-[3-[4-(4-氟苯基)-2-乙基-5-羥基苯氧基]丙氧基]-3，4-二氫-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸、2-[2-丙基-3-[3-[2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羥基苯氧基]丙氧基]苯氧基]苯甲酸、3-(2-(4-(2-乙基-4-(4-氟苯基)-5-羥基苯氧基)丁氧基)苯基)丙酸、2-[3-[3-(4-乙醯基-2-乙基-5-羥基苯氧基)丙氧基)-2-丙基苯氧基]丁酸、7-[3-(4-乙醯基-2-乙基-5-羥基苯氧基)丙氧基]-3，4-二氫-8-丙基-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸、2-苯基-4-乙基-5-[[6-(2H-四唑-5-基)-6-甲基庚基]氧]苯酚、1-[5-乙基-2-羥基-4-[[6-甲基-6-(1H-四唑-5-基)庚基]氧]苯基]乙酮、2，4-二乙基-5-[[6-甲基-6-(1H-四唑-5-基)庚基]氧]苯酚、2-[3-[3-[(5-乙基-2-羥基[[1，1』-聯苯基]-4-基)氧]丙氧基]-2-丙基苯氧基]丙酸、7-羧基-9-氧代-3-[3-(2-乙基-5-羥基-4-苯基苯氧基)丙氧基]-9H-呫噸-4-丙酸、3，4-二氫-8-丙基-7-[3-(2-乙基-5-羥基-4-乙氧基-苯氧基)丙氧基]-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸、2-[3-[3-[(5-乙基-2-羥基[1，1』-聯苯基]-4-基)氧]丙氧基]-2-丙基苯氧基]丙酸、7-羧基-9-氧代-3-[3-(2-乙基-5-羥基-4-苯基苯氧基)丙氧基]-9H-呫噸-4-丙酸和3，4-二氫-8-丙基-7-[3-(2-乙基-5-羥基-4-乙氧基-苯氧基)丙氧基]-2H-1-苯並吡喃-2-甲酸，或者任何這些化合物的可藥用鹽或溶劑化物。
7.如權利要求5的化合物的應用，其中所述與磷脂酶A2過量有關的生理疾病與細胞溶質磷脂酶A2過量有關。
全文摘要
本發明提供了治療或預防哺乳動物阿耳茨海默氏病的方法，該方法包括給需要所述治療的哺乳動物施用有效量的磷脂酶A
文檔編號A61K31/352GK1142768SQ94195027
公開日1997年2月12日 申請日期1994年12月14日 優先權日1993年12月23日
發明者J·A·克萊門斯, M·J·索菲亞, D·T·施蒂彭森 申請人:伊萊利利公司