銀柴顆粒的檢測方法

2023-05-20 17:32:51 2

銀柴顆粒的檢測方法
【專利摘要】本發明涉及一種銀柴顆粒的檢測方法，包括性狀、鑑別、檢查項目，其中，鑑別包括薄荷腦的薄層鑑別、忍冬藤的薄層鑑別、柴胡的薄層鑑別、大葉柴胡的薄層鑑別，針對目前還沒有一套完善的檢測方法對其有效成份進行相應的檢測，導致無法監測不法廠商少投或不投相應原料和監測偽品大葉柴胡的混入，本發明制定了科學合理、切實可行的成分鑑別方法，保證了銀柴顆粒的臨床療效，讓幾種藥材有了明確的質量指標，確保了銀柴顆粒中忍冬藤、薄荷、柴胡的使用，從而保證了藥品的療效；另一方面，柴胡的偽品大葉柴胡也能有效的檢測，避免了大葉柴胡中含有的柴胡毒素和乙醯柴胡毒素這兩種有毒成份危害患者的健康。
【專利說明】銀柴顆粒的檢測方法
【技術領域】:
[0001]本發明涉及一種銀柴顆粒的檢測方法。
【背景技術】:
[0002]銀柴顆粒是《衛生部藥品標準》中藥成方製劑第十三冊收載的品種，標準編號為WS3-B-2612-97，處方為忍冬藤、蘆根、薄荷、柴胡、枇杷葉，是純中藥的顆粒劑，它具有清熱、解表、止咳的作用，臨床上用於治療風熱感冒、發熱咳嗽等疾病，是目前市場上用於治療風熱感冒、發熱咳嗽等疾病的常用藥品。但是到目前為止，還沒有一套完善的檢測方法對其有效成份進行相應的檢測，那麼可能導致不法廠商在生產藥品時不嚴格按照處方的劑量配料，肆意減少價格高的原料，致使藥品的療效明顯下降，影響藥品的安全有效，嚴重損害患者的利益。另一方面，本藥品的處方來源於《傷寒雜病論》中的名方銀柴蘆根湯，處方中柴胡用量較大，佔整個處方量的三四之一，其功效主要是和解少陽，扶正祛邪。由於近年來柴胡的使用量較大，但其產量有限，其偽品大葉柴胡也被有意或者無意混入使用，大葉柴胡中含有柴胡毒素和乙醯柴胡毒素，這兩種成份都是有毒物質，已經多次發生因服用混有大葉柴胡的藥品而中毒的藥害事件，所以控制大葉柴胡很有必要。《山東醫藥工業》於2003年第二十二卷第5期發表了《對中國藥典2000年版柴胡檢驗方法的補充》一文，探討過藥典上大葉柴胡藥材的鑑別控制問題，但是其方法有明顯的不足，文中披露放置24小時，其檢測時間太長，不利於藥品生產過程控制和藥品質量監督檢查；柴胡毒素和乙醯柴胡毒素含量相對較低，點樣僅2 μ 1，點樣量過少，影響檢驗的準確性；柴胡毒素和乙醯柴胡毒素含量相對較低，在紫外燈下檢視，不用顯色劑顯色來觀察，觀察效果不好，更主要的是銀柴顆粒處方藥味多、所含成份複雜，其它成份會產生混淆和幹擾，所以，尋找一種更好的辦法來控制大葉柴胡的混入已是當務之急。

【發明內容】
:
[0003]本發明的目的，是提供一種銀柴顆粒的檢測方法，可有效地監測不法廠商少投或不投相應原料，同時監測偽品大葉柴胡的混入，防止服用後中毒的藥害事件的發生，使該藥品安全有效，並保證了銀柴顆粒的臨床療效。
[0004]本發明的技術方案是這樣的:
[0005]本銀柴顆粒的處方是:忍冬藤300g、蘆根300g、薄荷100g、柴胡300g、枇杷葉200go
[0006]本銀柴顆粒的檢測方法，包括性狀、鑑別、檢查項目；其中，鑑別包括對薄荷藥材中的薄荷腦的鑑別、忍冬藤的鑑別、柴胡的鑑別、大葉柴胡中柴胡毒素和乙醯柴胡毒素的鑑別。
[0007]薄荷藥材的薄荷腦的鑑別:以薄荷腦為對照品，以苯一醋酸乙酯為展開劑，用薄層色譜法鑑別；
[0008]忍冬藤的鑑別:以忍冬藤對照藥材為對照，以乙酸丁酯-甲酸-水為展開劑，用薄層色譜法鑑別；
[0009]柴胡的鑑別:以柴胡對照藥材為對照，以乙酸乙酯-乙醇-水為展開劑，用薄層色譜法鑑別；
[0010]柴胡毒素和乙醯柴胡毒素的鑑別:以柴胡毒素、乙醯柴胡毒素為對照品，以正已烷-乙酸乙酯為展開劑，用薄層色譜法鑑別；
[0011]檢測方法如下:
[0012](I)薄荷腦的鑑別
[0013]取本品12g，加60?90°C石油醚30ml，密塞，超聲處理30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液，另取薄荷腦對照品，加60?90°C石油醚製成每Iml含2mg的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液10?20 μ 1、對照品溶液10 μ 1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以苯:醋酸乙酯=17?21:0.8?1.2為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以2%香草醛硫酸溶液:乙醇=1:4的混合溶液，在100°C烘5?10分鐘，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；
[0014](2)忍冬藤的鑑別
[0015]取本品3g，研細，加甲醇15ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液置水浴上蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液，另取忍冬藤對照藥材3g，粉碎成粗粉，加甲醇15ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液置水浴上蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為對照藥材溶液，照薄層色譜試驗，吸取供試品溶液與對照藥材溶液各5?10 μ 1，分別點於同一矽膠H薄層板上，以乙酸丁酯:甲酸:水=8?12:4?6:3.5?4.5的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，置波長為365nm的紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點；
[0016](3)柴胡的鑑別
[0017]取本品6g，加水20ml，攪拌使溶解，離心，取上清液，加入聚醯胺柱a，分別用水、20%乙醇和50%乙醇各IOOml洗脫，收集50%乙醇洗脫液，蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液，另取柴胡對照藥材lg，加水適量，煎煮1.5小時，濾過，濾液濃縮至10ml，加入聚醯胺柱b，分別用水IOOml和50%乙醇150ml洗脫，收集50%乙醇洗脫液，蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為對照藥材溶液，照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液2?IOul和對照藥材溶液2ul,分別點於同一娃膠G薄層板上，以乙酸乙酯:乙醇冰=10?14:1.8?2.2:0.9?1.1為展開劑,展開,取出，晾乾,噴以5%對二甲氨基苯甲醒的10%硫酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰，置波長為365nm的紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點；
[0018](4)大葉柴胡的鑑別:
[0019]取本品10g，加60?90°C石油醚30ml，浸泡10分鐘，超聲處理15分鐘，濾過，濾液揮至1ml，作為供試品溶液，另取柴胡毒素、乙醯柴胡毒素對照品，加甲醇製成每Iml含柴胡毒素、乙醯柴胡毒素對照品各Img的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10 μ 1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以正已烷:乙酸乙酯=7?9:0.8?
1.2為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%磷鑰酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，不得顯相同顏色的斑點。
[0020]更具體的檢測方法如下:[0021](I)薄荷腦的鑑別
[0022]取本品12g，加60?90°C石油醚30ml，密塞，超聲處理30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液，另取薄荷腦對照品，加60?90°C石油醚製成每Iml含2mg的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液10?20 μ 1、對照品溶液10 μ 1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以苯:醋酸乙酯=19:1為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以2%香草醛硫酸溶液:乙醇=1:4的混合溶液，在100°C烘5?10分鐘，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；
[0023](2)忍冬藤的鑑別
[0024]取本品3g，研細，加甲醇15ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液置水浴上蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液，另取忍冬藤對照藥材3g，粉碎成粗粉，加甲醇15ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液置水浴上蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為對照藥材溶液，照薄層色譜試驗，吸取供試品溶液與對照藥材溶液各5?10 μ 1，分別點於同一矽膠H薄層板上，以乙酸丁酯:甲酸:水=10:5:4的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，置波長為365nm的紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點；
[0025](3)柴胡的鑑別
[0026]取本品6g，加水20ml，攪拌使溶解，離心，取上清液，加入聚醯胺柱a，分別用水、20%乙醇和50%乙醇各IOOml洗脫，收集50%乙醇洗脫液，蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液，另取柴胡對照藥材lg，加水適量，煎煮1.5小時，濾過，濾液濃縮至10ml，加入聚醯胺柱b，分別用水IOOml和50%乙醇150ml洗脫，收集50%乙醇洗脫液，蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為對照藥材溶液，照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液2?IOul和對照藥材溶液2ul，分別點於同一矽膠G薄層板上，以乙酸乙酯:乙醇:水=12:2:1為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5%對二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰，置波長為365nm的紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點；
[0027](4)大葉柴胡的鑑別:
[0028]取本品10g，加60?90°C石油醚30ml，浸泡10分鐘，超聲處理15分鐘，濾過，濾液揮至1ml，作為供試品溶液，另取柴胡毒素、乙醯柴胡毒素對照品，加甲醇製成每Iml含柴胡毒素、乙醯柴胡毒素對照品各Img的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10 μ 1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以正已烷:乙酸乙酯=8:1為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%磷鑰酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，不得顯相同顏色的斑點。
[0029]所述聚醯胺柱a為聚醯胺過100?200目篩，稱取過篩後的聚醯胺Sg，選擇內徑為2.5?3cm的層析柱,溼法裝柱。
[0030]所述聚醯胺柱b為聚醯胺過100?200目，稱取過篩後的聚醯胺4g，選擇內徑為2cm的層析柱,溼法裝柱。
[0031]性狀:本品為掠揭色的顆粒；氣香，味微甜、略苦。
[0032]檢查:應符合顆粒劑項下有關的各項規定(《中國藥典》2010年版一部附錄I C)。
[0033]本發明所述的展開劑之比以體積比計。
[0034]本發明的技術效果:[0035]本發明通過對銀柴顆粒中薄荷腦的鑑別、忍冬藤的鑑別、柴胡的鑑別、大葉柴胡的鑑別，讓幾種藥材有了明確的質量指標，確保了銀柴顆粒中忍冬藤、薄荷、柴胡的使用，從而保證了藥品的療效；另一方面，柴胡的偽品大葉柴胡也能有效的檢測，避免了大葉柴胡中含有的柴胡毒素和乙醯柴胡毒素這兩種有毒成份危害患者的健康。本發明能更好更全面地監測銀柴顆粒的質量，而且能有效地控制不法廠商生產偽劣銀柴顆粒，從而保證了藥品的療效和安全，保證了患者的利益，本發明科學合理、切實可行。
【具體實施方式】:
[0036]實施例1:
[0037]【處方】忍冬藤300g蘆根300g薄荷100g柴胡300g枇杷葉200g [0038]【製法】以上五味，薄荷提取揮髮油，蒸餾後的水溶液另器保存，藥渣與其餘忍冬藤等四味加水煎煮二次，每次2小時，合併煎液，濾過，靜置，取上清液與蒸餾後的水溶液合併，在50~55°C溫度下，濃縮成相對密度為1.33~1.36的清膏，加入適量的蔗糖粉和糊精，用乙醇制顆粒，乾燥，加入薄荷油，混勻，製成650g，即得。
[0039]【性狀】本品為棕褐色的顆粒；氣香，味微甜、略苦。
[0040]【鑑別】⑴薄荷腦的鑑別
[0041]取本品12g，加60~90°C石油醚30ml，密塞，超聲處理30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液，另取薄荷腦對照品，加60~90°C石油醚製成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液10~20 μ 1、對照品溶液10 μ 1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以苯:醋酸乙酯=17:0.8為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以2%香草醛硫酸溶液:乙醇=1:4的混合溶液，在100°C烘5~10分鐘，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；
[0042](2)忍冬藤的鑑別
[0043]取本品3g，研細，加甲醇15ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液置水浴上蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液，另取忍冬藤對照藥材3g，粉碎成粗粉，加甲醇15ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液置水浴上蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為對照藥材溶液，照薄層色譜試驗，吸取供試品溶液與對照藥材溶液各5~10 μ 1，分別點於同一矽膠H薄層板上，以乙酸丁酯:甲酸:水=8:4:3.5的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，置波長為365nm的紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點；
[0044](3)柴胡的鑑別
[0045]取本品6g，加水20ml，攪拌使溶解，離心，取上清液，加入聚醯胺柱a(聚醯胺過100~200目篩，稱取過篩後的聚醯胺Sg，選擇內徑為2.5~3cm的層析柱，溼法裝柱)，分別用水、20%乙醇和50%乙醇各100mL洗脫，收集50%乙醇洗脫液，蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液，另取柴胡對照藥材lg，加水適量，煎煮1.5小時，濾過，濾液濃縮至10ml，加入聚醯胺柱b (聚醯胺過100~200目，稱取過篩後的聚醯胺4g，選擇內徑為2cm的層析柱，溼法裝柱)，分別用水100mL和50%乙醇150ml洗脫，收集50%乙醇洗脫液，蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為對照藥材溶液，照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液2~IOul和對照藥材溶液2ul，分別點於同一矽膠G薄層板上，以乙酸乙酯:乙醇:水=10:1.8:0.9為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5%對二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰，置波長為365nm的紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點；
[0046](4)大葉柴胡的鑑別:
[0047]取本品10g，加60~90°C石油醚30ml，浸泡10分鐘，超聲處理15分鐘，濾過，濾液揮至1ml，作為供試品溶液，另取柴胡毒素、乙醯柴胡毒素對照品，加甲醇製成每1ml含柴胡毒素、乙醯柴胡毒素對照品各Img的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10 μ 1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以正已烷:乙酸乙酯=7:0.8為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%磷鑰酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，不得顯相同顏色的斑點。
[0048]【檢查】應符合顆粒劑項下有關的各項規定(《中國藥典》2010年版一部附錄IC)。
[0049]實施例2:
[0050]【處方】忍冬藤300g蘆根300g薄荷100g柴胡300g枇杷葉200g
[0051]【製法】以上五味，薄荷提取揮髮油，蒸餾後的水溶液另器保存，藥渣與其餘忍冬藤等四味加水煎煮二次，每次2小時，合併煎液，濾過，靜置，取上清液與蒸餾後的水溶液合併，在50~55°C溫度下，濃縮成相對密度為1.33~1.36的清膏，加入適量的蔗糖粉和糊精，用乙醇制顆粒，乾燥，加入薄荷油，混勻，製成650g，即得。
[0052]【性狀】本品為棕褐色的顆粒；氣香，味微甜、略苦。
[0053]【鑑別】⑴薄荷腦的鑑別
[0054]取本品12g，加60~90°C石油醚30ml，密塞，超聲處理30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液，另取薄荷腦對照品，加60~90°C石油醚製成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液10~20 μ 1、對照品溶液10 μ 1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以苯:醋酸乙酯=19:1為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以2%香草醛硫酸溶液:乙醇=1:4的混合溶液，在100°C烘5~10分鐘，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；
[0055](2)忍冬藤的鑑別
[0056]取本品3g，研細，加甲醇15ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液置水浴上蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液，另取忍冬藤對照藥材3g，粉碎成粗粉，加甲醇15ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液置水浴上蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為對照藥材溶液，照薄層色譜試驗，吸取供試品溶液與對照藥材溶液各5~10 μ 1，分別點於同一矽膠H薄層板上，以乙酸丁酯:甲酸:水=10:5:4的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，置波長為365nm的紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點；
[0057](3)柴胡的鑑別
[0058]取本品6g，加水20ml，攪拌使溶解，離心，取上清液，加入聚醯胺柱a(聚醯胺過100~200目篩，稱取過篩後的聚醯胺Sg，選擇內徑為2.5~3cm的層析柱，溼法裝柱)，分別用水、20%乙醇和50%乙醇各100mL洗脫，收集50 %乙醇洗脫液，蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液，另取柴胡對照藥材lg，加水適量，煎煮1.5小時，濾過，濾液濃縮至10ml，加入聚醯胺柱b (聚醯胺過100~200目，稱取過篩後的聚醯胺4g，選擇內徑為2cm的層析柱，溼法裝柱)，分別用水100mL和50%乙醇150ml洗脫，收集50%乙醇洗脫液，蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為對照藥材溶液，照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液2~IOul和對照藥材溶液2ul，分別點於同一矽膠G薄層板上，以乙酸乙酯:乙醇:水=12:2:1為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5%對二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰，置波長為365nm的紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點；
[0059](4)大葉柴胡的鑑別:
[0060]取本品10g，加60~90°C石油醚30ml，浸泡10分鐘，超聲處理15分鐘，濾過，濾液揮至1ml，作為供試品溶液，另取柴胡毒素、乙醯柴胡毒素對照品，加甲醇製成每1ml含柴胡毒素、乙醯柴胡毒素對照品各Img的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10 μ 1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以正已烷:乙酸乙酯=8:1為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%磷鑰酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，不得顯相同顏色的斑點。
[0061]【檢查】應符合顆粒劑項下有關的各項規定(《中國藥典》2010年版一部附錄IC)。
[0062]實施例3:
[0063]【處方】忍冬藤300g蘆根300g薄荷100g柴胡300g枇杷葉200g
[0064]【製法】以上五味，薄荷提取揮髮油，蒸餾後的水溶液另器保存，藥渣與其餘忍冬藤等四味加水煎煮二次，每次2小時，合併煎液，濾過，靜置，取上清液與蒸餾後的水溶液合併，在50~55°C溫度下，濃縮成相對密度為1.33~1.36的清膏，加入適量的蔗糖粉和糊精，用乙醇制顆粒，乾燥，加入薄荷油，混勻，製成650g，即得。
[0065]【性狀】本品為棕褐色的顆粒；氣香，味微甜、略苦。
[0066]【鑑別】⑴薄荷腦的鑑別
[0067]取本品12g，加60~90°C石油醚30ml，密塞，超聲處理30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液，另取薄荷腦對照品，加60~90°C石油醚製成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液10~20 μ 1、對照品溶液10 μ 1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以苯:醋酸乙酯=21:1.2為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以2%香草醛硫酸溶液:乙醇=1:4的混合溶液，在100°C烘5~10分鐘，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；
[0068](2)忍冬藤的鑑別
[0069]取本品3g，研細，加甲醇15ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液置水浴上蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液，另取忍冬藤對照藥材3g，粉碎成粗粉，加甲醇15ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液置水浴上蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為對照藥材溶液，照薄層色譜試驗，吸取供試品溶液與對照藥材溶液各5~10 μ 1，分別點於同一矽膠H薄層板上，以乙酸丁酯:甲酸:水=12:6:4.5的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，置波長為365nm的紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點；
[0070](3)柴胡的鑑別
[0071]取本品6g，加水20ml，攪拌使溶解，離心，取上清液，加入聚醯胺柱a(聚醯胺過100~200目篩，稱取過篩後的聚醯胺Sg，選擇內徑為2.5~3cm的層析柱，溼法裝柱)，分別用水、20%乙醇和50%乙醇各100mL洗脫，收集50%乙醇洗脫液，蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液，另取柴胡對照藥材lg，加水適量，煎煮1.5小時，濾過，濾液濃縮至10ml，加入聚醯胺柱b (聚醯胺過100~200目，稱取過篩後的聚醯胺4g，選擇內徑為2cm的層析柱，溼法裝柱)，分別用水100mL和50%乙醇150ml洗脫，收集50%乙醇洗脫液，蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為對照藥材溶液，照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液2~IOul和對照藥材溶液2ul，分別點於同一矽膠G薄層板上，以乙酸乙酯:乙醇:水=14:2.2:1.1為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5%對二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰，置波長為365nm的紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點；
[0072](4)大葉柴胡的鑑別:
[0073]取本品10g，加60~90°C石油醚30ml，浸泡10分鐘，超聲處理15分鐘，濾過，濾液揮至1ml，作為供試品溶液，另取柴胡毒素、乙醯柴胡毒素對照品，加甲醇製成每1ml含柴胡毒素、乙醯柴胡毒素對照品各Img的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10 μ 1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以正已烷:乙酸乙酯=9:1.2為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%磷鑰酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，不得顯相同顏色的斑點。 [0074]【檢查】應符合顆粒劑項下有關的各項規定(《中國藥典》2010年版一部附錄IC)。
【權利要求】
1.一種銀柴顆粒的檢測方法，包括性狀、鑑別、檢查項目，其特徵在於:所述鑑別包括薄荷腦的鑑別、忍冬藤的鑑別、柴胡的鑑別、大葉柴胡的鑑別，檢測方法包括以下: (1)薄荷腦的鑑別 取本品12g，加60~90°C石油醚30ml，密塞，超聲處理30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液，另取薄荷腦對照品，加60~90°C石油醚製成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液10~20 μ 1、對照品溶液10 μ 1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以苯:醋酸乙酯=17~21:0.8~1.2為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以2%香草醛硫酸溶液:乙醇=1:4的混合溶液，在100°C烘5~10分鐘，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點； (2)忍冬藤的鑑別 取本品3g，研細，加甲醇15ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液置水浴上蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液，另取忍冬藤對照藥材3g，粉碎成粗粉，加甲醇15ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液置水浴上蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為對照藥材溶液，照薄層色譜試驗，吸取供試品溶液與對照藥材溶液各5~10 μ 1，分別點於同一矽膠H薄層板上，以乙酸丁酯:甲酸:水=8~12:4~6:3.5~4.5的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，置波長為365nm的紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點； (3)柴胡的鑑別 取本品6g，加 水20ml，攪拌使溶解，離心，取上清液，加入聚醯胺柱a，分別用水、20%乙醇和50%乙醇各100mL洗脫，收集50%乙醇洗脫液，蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液，另取柴胡對照藥材lg，加水適量，煎煮1.5小時，濾過，濾液濃縮至10ml，加入聚醯胺柱b，分別用水100mL和50%乙醇150ml洗脫，收集50%乙醇洗脫液，蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為對照藥材溶液，照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液2~IOul和對照藥材溶液2ul，分別點於同一矽膠G薄層板上，以乙酸乙酯:乙醇:水=10~14:1.8~2.2:0.9~1.1為展開劑,展開,取出，晾乾,噴以5%對二甲氨基苯甲醒的10%硫酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰，置波長為365nm的紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點； (4)大葉柴胡的鑑別: 取本品IOgJP 60~90°C石油醚30ml，浸泡10分鐘，超聲處理15分鐘，濾過，濾液揮至1ml，作為供試品溶液，另取柴胡毒素、乙醯柴胡毒素對照品，加甲醇製成每1ml含柴胡毒素、乙醯柴胡毒素對照品各Img的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10 μ 1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以正已烷:乙酸乙酯=7~9:0.8~1.2為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%磷鑰酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，不得顯相同顏色的斑點。
2.根據權利要求1所述的銀柴顆粒的檢測方法，其特徵在於:更具體的檢測方法如下: (I)薄荷腦的鑑別 取本品12g，加60~90°C石油醚30ml，密塞，超聲處理30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液，另取薄荷腦對照品，加60~90°C石油醚製成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液10~20 μ 1、對照品溶液10 μ 1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以苯:醋酸乙酯=19:1為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以2%香草醛硫酸溶液:乙醇=1:4的混合溶液，在100°C烘5~10分鐘，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點； (2)忍冬藤的鑑別 取本品3g，研細，加甲醇15ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液置水浴上蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液，另取忍冬藤對照藥材3g，粉碎成粗粉，加甲醇15ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液置水浴上蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為對照藥材溶液，照薄層色譜試驗，吸取供試品溶液與對照藥材溶液各5~10 μ 1，分別點於同一矽膠H薄層板上，以乙酸丁酯:甲酸:水=10:5:4的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，置波長為365nm的紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點； (3)柴胡的鑑別 取本品6g，加水20ml，攪拌使溶解，離心，取上清液，加入聚醯胺柱a，分別用水、20%乙醇和50%乙醇各100mL洗脫，收集50%乙醇洗脫液，蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液，另取柴胡對照藥材lg，加水適量，煎煮1.5小時，濾過，濾液濃縮至10ml，加入聚醯胺柱b，分別用水100mL和50%乙醇150ml洗脫，收集50%乙醇洗脫液，蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為對照藥材溶液，照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液2~IOul和對照藥材溶液2ul，分別點於同一矽膠G薄層板上，以乙酸乙酯:乙醇:水=12:2:1為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5%對二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰，置波長為365nm的紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點； (4)大葉柴胡的鑑別: 取本品IOgJP 60~90°C石油醚30ml，浸泡10分鐘，超聲處理15分鐘，濾過，濾液揮至1ml，作為供試品溶液，另取柴胡毒素、乙醯柴胡毒素對照品，加甲醇製成每1ml含柴胡毒素、乙醯柴胡毒素對照品各Img的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10 μ 1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以正已烷:乙酸乙酯=8:1為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%磷鑰酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，不得顯相同顏色的斑點。
3.根據權利要求1或2所述的銀柴顆粒的檢測方法，其特徵在於:步驟(3)所述聚醯胺柱a為聚醯胺過100~200目篩，稱取過篩後的聚醯胺Sg，選擇內徑為2.5~3cm的層析柱，溼法裝柱。
4.根據權利要求1或2所述的銀柴顆粒的檢測方法，其特徵在於:步驟(3)所述聚醯胺柱b為聚醯胺過100~200目，稱取過篩後的聚醯胺4g，選擇內徑為2cm的層析柱，溼法裝柱。
【文檔編號】G01N30/90GK103954725SQ201410175789
【公開日】2014年7月30日 申請日期:2014年4月28日 優先權日:2014年4月28日
【發明者】鍾茂團, 黎勇, 吳詩惠, 林劍 申請人:四川逢春製藥有限公司