一種提高免疫力的配方驢奶粉的製作方法

2023-12-09 08:33:41

一種提高免疫力的配方驢奶粉的製作方法
【專利摘要】本發明公開了一種提高免疫力的配方驢奶粉，配方以驢奶粉為主，添加藥食同源可用的山藥、百合、核桃和葛根，並輔以添加含低聚果糖和低聚半乳糖的益生元和鼠李糖乳桿菌和植物乳桿菌兩種益生菌。該配方驢奶粉能顯著增加免疫力，具體體現在顯著地提高淋巴細胞的轉化能力（細胞免疫功能），增加血清溶血素的生成量（體液免疫功能），增強碳廓清能力（單核巨噬細胞功能）和NK細胞的殺傷活性（NK細胞活性）。
【專利說明】一種提高免疫力的配方驢奶粉
【技術領域】
[0001]本發明屬於保健領域，具體來說是一種增強機體免疫力的配方驢奶粉。
【背景技術】
[0002]驢奶的營養成分全面，與人乳最為接近。驢奶蛋白質中胺基酸的種類齊全，數量充足，其賴氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸(蛋氨酸)、蘇氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、纈氨酸、組氨酸等9種人體必需胺基酸(組氨酸為嬰兒必需胺基酸)佔總胺基酸的比例為40.8%，和人乳(43%)相近。脂肪酸是乳脂的主要組成成分，其中亞油酸和α-亞麻酸是必需脂肪酸(EFA)0人體缺乏必需脂肪酸(EFA)會減緩機體代謝，造成生長緩慢，生殖障礙等多種疾病。驢乳富含EFA，含量約為40 mg/100 g，尤其是亞油酸，其含量是牛乳中亞油酸含量的2.5倍(15 mg/100 g)。驢奶中不僅含有多種常量元素，而且富含微量元素。常量元素中，Ca含量豐富，Na、Mg次之；微量元素中，硒含量較高,是牛奶的5.2倍。驢奶與人奶成分間的微小差異，比較容易通過配料進行調整。然而，目前對驢奶的研究主要集中於其營養成分的分析，而在驢奶的綜合開發利用方面上缺乏深入系統的研究。因此，開展驢奶粉複合配方的應用基礎研究，拓寬其應用途徑，具有重要的社會經濟效益。

【發明內容】

[0003]本發明提供如下技術路線:
本發明旨在為驢奶的市場開發提供新途徑，以驢奶粉為基質，添加藥食同源可用的山藥、百合、核桃和葛根，並輔以添加含低聚果糖和低聚半乳糖的益生元和鼠李糖乳桿菌和植物乳桿菌兩種益生菌。本發明包括如下技術方案:
一種提高免疫力的配方驢奶粉，依照如下步驟製備:
(1)選用外形圓整、表面光滑、無蟲害黴爛的新鮮山藥作為製備原料；先洗去山藥表面的泥土，用刮皮刀將山藥表皮去除乾淨並用水加以衝洗；用不鏽鋼刀將去皮後的山藥切為I Cm左右的薄片，並迅速放入清水中浸泡，切片要快捷，以免在空氣中暴露時間過長引起褐變；山藥切片在0.2 g /100 mL檸檬酸護色液中(98±2)°C下護色10 min左右，既能得到良好護色效果，也可使原料基本成熟而獲得濃鬱的山藥風味；護色完畢後立即用清水衝洗，以去除黏附的檸檬酸；在山藥片中加入3倍質量的水，用粉碎機粉碎成漿狀；將山藥漿按3.6mg/g劑量添加到驢奶中;即每g驢奶加入3.6 mg山藥楽；；
(2)取新鮮百合，選用大而整齊、潔白肥厚的百合，剔除黴爛、病蟲的百合；去除外圍枯老鱗片及莖底盤，用流動水清洗乾淨；取清洗的百合，加入5倍水，按100 g百合加入0.4 g異VC-Na和0.1%的檸檬酸，加熱至100°C處理5?10 min，至百合晶亮透明為止，立即冷卻，進行破碎打漿；以膠體磨處理百合漿2次，至無百合粗顆粒；調節百合漿的pH值至6.0，加入耐高溫α-澱粉酶，用量為200 U/g，在95°C下液化25 min ;調節的pH至5.5，加入糖化酶，用量為100?300 U/g，在60?70°C下處理I?3 h ;經過酶解處理的百合水解液，在100°C保持5 min進行滅酶處理；將滅酶處理的百合眾按7.2 mg/g添加到驢奶中； (3)選用肉質飽滿、無損傷無蟲蛀、無黴變的新鮮核桃仁除去碎殼和隔膜等雜質，再用清水漂洗核桃仁；核桃仁仁用0.2% NaOH煮沸3 min後用弱酸中和，然後用水衝洗；脫去種皮的核桃仁在高速組織搗碎機中搗碎，料液比為1:4，然後用膠體磨細磨；膠體磨間距大小適當，一般選擇5?8 μ m ;將研磨後的核桃粉按3.0 mg/g劑量添加到驢奶中；
(4)稱取處理好的葛根粉約2g，倒入浸提回流裝置中，加入60 mL濃度為50%的乙醇，其中固液比為1:30，於90°C的水浴鍋中回流浸提3 h，抽濾並收集濾液，將抽濾得到的澄清液轉入棕色瓶中保存；葛根黃酮按0.24 mg/g劑量添加到驢奶中；
(5)菊苣低聚果糖按0.985 mg/g劑量添加到驢奶粉；
(6)益生菌凍幹活菌粉的製備:首先配製質量百分比濃度為10%的脫脂奶乳濁液，分裝於4隻500 mL三角瓶內，每瓶200 mL，121°C滅菌20 min冷卻至37°C，分別按2%體積比例接種鼠李糖乳桿菌和植物乳桿菌，37°C厭氧培養24-28 h，檢測2株益生菌培養液的活菌數，各培養液活菌數>109 CFU/mL,則可停止培養，如果活菌數〈109 CFU/mL,繼續培養直至達至IJIO9 CFU/mL;將培養液在無菌條件下導入玻璃安瓶中，液面高度0.8 cm至I cm，加蓋瓶塞後放入-30°C冰櫃速凍，凍結後將玻璃安瓶用託盤盛裝，放入凍幹機進行冷凍乾燥，製備粉末凍幹菌種；鼠李糖乳桿菌凍幹菌粉按0.4 mg/g劑量添加驢奶中,植物乳桿菌按0.2 mg/g劑量添加到驢奶中；
(7)將添加了上述材料的驢奶混合物進行均質，均質壓力和溫度分別為20-25MPa和45-50°C ;將均質後的驢奶混合物，進行噴霧乾燥；噴霧乾燥條件控制為:進風溫度為130-160°C優選為150°C，塔溫為75°C，排風溫度為70_75°C。
[0004]為評價本發明在驢奶粉的基礎上進一步增強機體免疫力，通過對免疫低下小鼠進行分組灌胃，含生理鹽水組，驢奶粉組和配方驢奶粉組。
[0005]在採用腹腔注射環磷醯胺製備免疫低下小鼠後，按灌胃組別分別連續灌胃28天。灌胃結束後，取小鼠脾臟，研磨得到脾淋巴細胞，添加ConA刺激淋巴細胞，觀察不同灌胃組別小鼠的淋巴細胞的轉化能力。灌胃結束後，通過尾靜脈注射墨汁，評價不同灌胃組別小鼠的碳廓清能力；在灌胃結束前的第四天，腹腔注射綿陽血紅細胞，待灌胃結束後取小鼠脾臟研磨得到脾淋巴細胞，評價NK細胞對靶細胞YAC-1的殺傷能力；在灌胃結束前的第四天，腹腔注射綿陽血紅細胞，待灌胃結束後取血，測定血清溶血素的生成。
[0006]本發明的有益效果:
1、本發明配方驢奶粉具有提高免疫力的效果；
2、本發明配方驢奶粉味道清新，口感好，更易為普通群眾接受，易於推廣。
【具體實施方式】
[0007]實施例1
一種提高免疫力的配方驢奶粉，依照如下步驟製備:
(I)選用外形圓整、表面光滑、無蟲害黴爛的新鮮山藥作為製備原料；先洗去山藥表面的泥土，用刮皮刀將山藥表皮去除乾淨並用水加以衝洗；用不鏽鋼刀將去皮後的山藥切為I Cm左右的薄片，並迅速放入清水中浸泡，切片要快捷，以免在空氣中暴露時間過長引起褐變；山藥切片在0.2 g/100 mL檸檬酸護色液中(98±2)°C下護色10 min左右，既能得到良好護色效果，也可使原料基本成熟而獲得濃鬱的山藥風味；護色完畢後立即用清水衝洗，以去除黏附的檸檬酸；在山藥片中加入3倍質量的水，用粉碎機粉碎成漿狀；將山藥漿按3.6mg/g劑量添加到驢奶中;即每g驢奶加入3.6 mg山藥楽；；
(2)取新鮮百合，選用大而整齊、潔白肥厚的百合，剔除黴爛、病蟲的百合；去除外圍枯老鱗片及莖底盤，用流動水清洗乾淨；取清洗的百合，加入5倍水，按100 g百合加入0.4 g異VC-Na和0.1%的檸檬酸，加熱至100°C處理5~10 min，至百合晶亮透明為止，立即冷卻，進行破碎打漿；以膠體磨處理百合漿2次，至無百合粗顆粒；調節百合漿的pH值至6.0，加入耐高溫α-澱粉酶，用量為200 U/g，在95°C下液化25 min ;調節的pH至5.5，加入糖化酶，用量為100~300 U/g，在60~70°C下處理I~3 h ;經過酶解處理的百合水解液，在100°C保持5 min進行滅酶處理；將滅酶處理的百合楽；按7.2 mg/g添加到驢奶中；
(3)選用肉質飽滿、無損傷無蟲蛀、無黴變的新鮮核桃仁除去碎殼和隔膜等雜質，再用清水漂洗核桃仁；核桃仁仁用0.2% NaOH煮沸3 min後用弱酸中和，然後用水衝洗；脫去種皮的核桃仁在高速組織搗碎機中搗碎，料液比為1:4，然後用膠體磨細磨；膠體磨間距大小適當，一般選擇5~8 μ m ;將研磨後的核桃粉按3.0 mg/g劑量添加到驢奶中；
(4)稱取處理好的葛根粉約2g，倒入浸提回流裝置中，加入60 mL濃度為50%的乙醇，其中固液比為1:30，於90°C的水浴鍋中回流浸提3 h，抽濾並收集濾液，將抽濾得到的澄清液轉入棕色瓶中保存；葛根黃酮按0.24 mg/g劑量添加到驢奶中；
(5)菊苣低聚果糖按0.985 mg/g劑量添加到驢奶粉；
(6)益生菌凍幹活菌粉的製備:首先配製質量百分比濃度為10%的脫脂奶乳濁液，分裝於4隻500 mL三角瓶內，每瓶200 mL，12rC滅菌20 min冷卻至37°C，分別按2%體積比例接種鼠李糖乳桿菌和植物乳桿菌，37°C厭氧培養24-28 h，檢測2株益生菌培養液的活菌數，各培養液活菌數>109 CFU/mL,則可停止培養，如果活菌數〈109 CFU/mL,繼續培養直至達到IO9 CFU/mL ;將培養液在無菌條件下導入玻璃安瓶中，液面高度0.8 cm至I cm，加蓋瓶塞後放入-30°C冰櫃速凍，凍結後將玻璃安瓶用託盤盛裝，放入凍幹機進行冷凍乾燥，製備粉末凍幹菌種；鼠李糖乳桿菌凍幹菌粉按0.4 mg/g劑量添加驢奶中，植物乳桿菌按0.2mg/g劑量添加到驢奶中；
(7)將添加了上述材料的驢奶混合物進行均質，均質壓力和溫度分別為20-25MPa和45-50°C ;將均質後的驢奶混合物，進行噴霧乾燥；噴霧乾燥條件控制為:進風溫度為130-160°C，塔溫為75°C，排風溫度為70_75°C。
[0008]實施例2免疫試驗
免疫低下小鼠的製備:購買BALB/c小鼠72隻，放置動物房觀察一周後，隔日腹腔注射環磷醯胺溶液，第一天按100 mg/kg劑量注射,第三天按80 mg/kg劑量注射,製備免疫低下小鼠。
[0009]小鼠灌胃組別的設置:將小鼠隨機分成3組，每組10隻，依次為空白組，驢奶組，配方驢奶粉組。每組小鼠灌胃期均為28天，每隻小鼠的灌胃量為300 μ!7日。空白組的小鼠灌胃0.85%的無菌生理鹽水，驢奶粉組和配方驢奶粉組(取實施例1製備的配方驢奶粉)的小鼠按5 g/kg的劑量灌胃。
[0010]脾細胞懸液的製備:採用勁椎脫臼法處死小鼠，用75%的乙醇浸泡2 min中，消毒處理。將小鼠置於解剖託盤中，沿腹膜解剖小鼠，無菌取脾，置於盛有適量無菌Hank’s液平皿中，去除脾臟上粘連的結締組織，並輕輕洗滌後將脾轉移至無菌Hank’s液平皿中。用鑷子將脾在40目紗布上輕輕磨碎，經200目篩網過濾後獲得單細胞懸液。細胞懸液經1000r/min離心10 min後,按10:1比例加入紅細胞裂解液,輕輕吹打混勻,裂解時間約5 min左右。1000 r/min離心10 min，去除上清液，細胞沉澱用無菌Hank’s液洗滌2次。將細胞懸浮於I mL RPMI1640完全培養液中，用臺盼蘭染色計數活細胞數(應在95%以上)，調整細胞濃度為3 X IO6個/mL。
[0011]細胞免疫功能的測定——小鼠淋巴細胞轉化實驗:將每一份脾細胞懸液分4孔加入24孔細胞培養板中，每孔I mL，其中3個孔作為平行樣孔，均加入50 μ L ConA液(相當於5 yg/mL)，剩餘I孔中加入50 μ L細胞培養液代替ConA液作為空白孔。置5% C02，37°C孵箱中培養72 h ;培養結束前4 h，每孔輕輕吸去0.7 mL上清液，再加入0.7 mL不含血清的RPMI1640培養液，同時每孔加入50 μ L MTT溶液(5 mg/mL)，繼續培養4 h。培養結束後，每孔加入I mL酸性異丙醇，充分吹打混勻，使紫色結晶完全溶解。然後分裝到96孔培養板中，每個孔作3個平行孔，於酶標儀570 nm波長下測量各孔的吸光OD值並記錄。實驗結果如表1所示，結果表明:與生理鹽水組相比，灌胃單一組分的驢奶粉不能提高脾淋巴細胞的轉化率(P>0.05)，而灌胃配方驢奶粉組小鼠的脾淋巴細胞轉化率顯著高於驢奶粉組的小鼠(P〈0.05)。
[0012]表1不同的灌胃組別對Con-A誘導的脾淋巴細胞轉化的影響(X土SD)
【權利要求】
1.一種提高免疫力的配方驢奶粉，其特徵在於依照如下步驟製備: (1)選用外形圓整、表面光滑、無蟲害黴爛的新鮮山藥作為製備原料；先洗去山藥表面的泥土，用刮皮刀將山藥表皮去除乾淨並用水加以衝洗；用不鏽鋼刀將去皮後的山藥切為I Cm左右的薄片，並迅速放入清水中浸泡；山藥切片在0.2 g/100 mL檸檬酸護色液中(98±2) °C下護色10 min左右；護色完畢後立即用清水衝洗，以去除黏附的檸檬酸；在山藥片中加入3倍質量的水，用粉碎機粉碎成漿狀；將山藥漿按3.6 mg/g劑量添加到驢奶中；即每g驢奶加入3.6 mg山藥眾； (2)取新鮮百合，選用大而整齊、潔白肥厚的百合，剔除黴爛、病蟲的百合；去除外圍枯老鱗片及莖底盤，用流動水清洗乾淨；取清洗的百合，加入5倍水，按100 g百合加入0.4 g異VC-Na和0.1%的檸檬酸，加熱至100°C處理5?10 min，至百合晶亮透明為止，立即冷卻，進行破碎打漿；以膠體磨處理百合漿2次，至無百合粗顆粒；調節百合漿的pH值至6.0，加入耐高溫α -澱粉酶，用量為200 U/g，在95°C下液化25 min ;調節的pH至5.5，加入糖化酶，用量為100?300 U/g，在60?70°C下處理I?3 h ;經過酶解處理的百合水解液，在100°C保持5 min進行滅酶處理；將滅酶處理的百合眾按7.2 mg/g添加到驢奶中； (3)選用肉質飽滿、無損傷、無蟲蛀、無黴變的新鮮核桃仁除去碎殼和隔膜等雜質，再用清水漂洗核桃仁；核桃仁仁用0.2% NaOH煮沸3 min後用弱酸中和，然後用水衝洗；脫去種皮的核桃仁在高速組織搗碎機中搗碎，料液比為1:4，然後用膠體磨細磨；膠體磨間距選擇5?8 μ m ;將研磨後的核桃粉按3.0 mg/g劑量添加到驢奶中； (4)稱取處理好的葛根粉約2g，倒入浸提回流裝置中，加入60 mL濃度為50%的乙醇，其中固液比為1:30，於90°C的水浴鍋中回流浸提3 h，抽濾並收集濾液，將抽濾得到的澄清液轉入棕色瓶中保存；葛根黃酮按0.24 mg/g劑量添加到驢奶中； (5)菊苣低聚果糖按0.985 mg/g劑量添加到驢奶粉； (6)益生菌凍幹活菌粉的製備:首先配製質量百分比濃度為10%的脫脂奶乳濁液，分裝於4隻500 mL三角瓶內，每瓶200 mL，12rC滅菌20 min冷卻至37°C，分別按2%體積比例接種鼠李糖乳桿菌和植物乳桿菌，37°C厭氧培養24-28 h，檢測2株益生菌培養液的活菌數，各培養液活菌數>109 CFU/mL，則可停止培養，如果活菌數〈109 CFU/mL，繼續培養直至達至IJ 109CFU/mL ;將培養液在無菌條件下導入玻璃安瓶中，液面高度0.8 cm至I cm，加蓋瓶塞後放入-30°C冰櫃速凍，凍結後將玻璃安瓶用託盤盛裝，放入凍幹機進行冷凍乾燥，製備粉末凍幹菌種；鼠李糖乳桿菌凍幹菌粉按0.4 mg/g劑量添加驢奶中,植物乳桿菌按0.2 mg/g劑量添加到驢奶中； (7)將添加了上述材料的驢奶混合物進行均質，均質壓力和溫度分別為20-25MPa和45-500C ;將均質後的驢奶混合物，進行噴霧乾燥。
2.如權利要求1所述的配方驢奶粉，其特徵在於步驟(7)噴霧乾燥條件控制為:進風溫度為130-160°C，優選為150°C，塔溫為75°C，排風溫度為70_75°C。
【文檔編號】A23C9/16GK103734338SQ201310693239
【公開日】2014年4月23日 申請日期:2013年12月18日 優先權日:2013年12月18日
【發明者】魏華, 許恆毅, 熊勇華, 彭珊珊, 徐鋒 申請人:南昌大學