一種防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑及其製備方法與流程
2023-12-09 01:30:51 1
本發明屬於水產養殖
技術領域：
，尤其是涉及一種防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑。
背景技術：
：錦鯉體格健美、色彩豔麗、花紋多變、泳姿雄然，是一種具有較高觀賞價值及經濟價值的魚類，目前我國已成為世界錦鯉的主要生產國和出口國。隨著其養殖規模不斷擴大，集約化程度不斷提高，其病害發生也有增加的趨勢，錦鯉的各種病毒性傳染疾病尤其是錦鯉皰疹病毒病開始廣泛傳播。錦鯉皰疹病毒病1998年首次爆發在以色列，但在1999年才確認其真正病原是錦鯉皰疹病毒(Koiherpesvirus，KHV)。此後在英國、歐洲大陸、美國、日本也都有暴發。近年來，錦鯉皰疹病毒病的廣泛傳播，造成錦鯉養殖業巨大的經濟損失，已經成為制約錦鯉養殖業可持續發展的重要因素之一。流行病學研究表明，KHV傳播迅速，可感染任何年齡的錦鯉與鯉，感染KHV的病魚典型臨床症狀是行動遲緩、食欲不振、平衡失調、體表多黏液、在皮膚和鰭基部出現出血症狀、眼球凹陷、鰓蒼白或顏色不規則並伴有中度至嚴重的鰓壞死，感染後7～10d開始出現死亡，2～3周後死亡率可達100％。該病毒造成病魚的死亡率極高，疫情難以控制。目前，治療這種病毒的方式有高溫治療、疫苗防治等，但治療效果不佳，西藥副作用大；中藥品種能有效治療病毒性疾病尤其是錦鯉皰疹病毒的品種少且效率低。技術實現要素：本發明的目的在於克服現有技術的不足之處，提供一種防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑，可增強該魚種的免疫力、有效防治錦鯉的病毒性疾病尤其是錦鯉皰疹病毒，促進其生長。本發明實現目的的技術方案如下:一種防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑，按重量份數計包括如下中藥組份：刺五加10-20份、黨參5-10份、杜仲5-10份、茯苓5-10份、板藍根5-10份、芒果葉5-15份、穿心蓮提取物10-20份。進一步地，上述防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑，按重量份數計包括如下組份：刺五加15份、黨參8份、杜仲8份、茯苓8份、板藍根8份、芒果葉10份、穿心蓮提取物15份。其中上述穿心蓮提取物，按質量百分比計，含有穿心蓮內酯含量至少為40％及脫水穿心蓮內酯含量至少為2％。此外，本發明還提供了上述防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑的製備方法，包括如下製備步驟：1)將芒果葉乾燥粉碎至，用9倍量的乙醇回流提取2次，每次3小時，合併每次所得提取液，回收溶劑，用真空乾燥箱50℃乾燥，得芒果葉提取物；2)將刺五加、黨參、杜仲、茯苓、板藍根按量稱取，混合、粉碎過篩成40目的粉末，放入煎煮容器內，加入4-6倍質量的水，浸泡2小時，然後煎熬2小時，過濾，將藥汁倒出；再次向藥渣內加入相對於粉末質量2-4倍的水，煎熬1小時，過濾，得藥汁；將兩次過濾所得藥汁混合，得中藥混合液；3)將芒果葉提取物加入到步驟2)所得中藥混合液中，攪拌混合均勻，置入真空濃縮設備中進行濃縮，濃縮溫度為60℃，濃縮時間為30分鐘，冷卻後得混合濃縮液；4)將穿心蓮提取物加入步驟3)所得混合濃縮液，混合均勻，得防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑待用液。此外上述步驟還包括將步驟4所製得的待用液，經過噴霧乾燥，得到防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑乾粉。此外，本發明還提供了上述防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑在製備防治病毒性疾病提高錦鯉免疫機能的飼料中的應用，上述飼料添加劑在基礎飼料中的添加量為基礎飼料總質量的1-10％。進一步地，上述添加劑在基礎飼料中的添加量為基礎飼料總質量的7％。病毒是病原微生物中最小的一種，在細胞內繁殖，其核心是核糖核酸(RNA)或脫氧核糖核酸(DNA)，外殼是蛋白質，不具有細胞結構。病毒寄生於寄主細胞內，依賴寄主細胞代謝系統進行增殖複製。在病毒基因提供的遺傳信息調控下合成病毒核酸和蛋白質，然後在胞漿內裝配為成熟的感染性病毒體，以各種方式自細胞釋放出而感染其他細胞，病毒核酸有時整合於細胞，不易消除，因此抗病毒藥研究發展緩慢。錦鯉皰疹病毒，簡稱KHV，因其主要是由DNA類皰疹濾過性病毒感染所引起，又名鯉魚腎炎及鰓壞疽病毒，該病的發病迅速，死亡速度快。一旦發現KHV，目前常用的處理方法是將魚殺滅，切斷病毒源，因此該病的預防工作也具有非常重要的意義，其中預防工作的重點之一就是日常需要注意增強提高魚體的自身免疫力。本發明所提供的防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑中，穿心蓮提前物主要有效成分為心蓮內酯含量、脫水穿心蓮內酯，具有極強的抗菌消炎活性。本發明中穿心蓮提取物的製備參照專利2012105014849所提供的穿心蓮提取物提前方法製備而得，在製備獲得上述穿心蓮提前物的同時，去除了穿心蓮中的色素等雜質成分，避免了穿心蓮製劑毒副作用的發生，增加了在水產養殖中使用的安全性。同時由於穿心蓮內酯類活性成分在加熱過程中容易分解損失，本發明在製備過程中避免了高溫加熱、高溫乾燥等環節，最大程度的避免了其有效成分受熱分解；芒果葉資源豐富、價格低廉、分布地域廣，四季可採，其提取物中主要有效成為芒果苷，是一種黃酮類化合物。通過本發明提供製備方法獲得的芒果葉提取物，具有很強的抗氧化活性，具有抗氧化、抑菌抗病毒、抗炎性、免疫調節、提高免疫功能和促進生長的作用；目前對穿心蓮提取物提取物、芒果葉提取物同時作為水產飼料添加劑原料配伍使用的研究較少，還未有將其用來防止錦鯉皰疹性病毒疾病的相關報導。通過採用本發明提供的上述飼料添加劑配方來代替化學合成添加劑，經過研發人員對錦鯉各生長指標進行反覆試驗論證，發現使用本發明所提供的添加劑，該品類魚不僅無不良反應，可增強該魚種的免疫力、有效防治錦鯉的病毒性疾病尤其是錦鯉皰疹病毒，並促進其生長，毒副作用小，同時對水質環境的汙染也降至低點，大大提升了該品類魚的存活率。具體實施方式下面通過具體實施例對本發明作進一步詳述，以下實施例只是描述性的，不是限定性的，不能以此限定本發明的保護範圍。實施例1：一種防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑，有如下中藥組份：刺五加15kg、黨參8kg、杜仲8kg、茯苓8kg、板藍根8kg、芒果葉10kg、穿心蓮提取物15kg。其中穿心蓮提取物，按質量百分比計含有穿心蓮內酯40％及脫水穿心蓮內酯2％。其製備方法為：1)將芒果葉乾燥粉碎至，用9倍量的乙醇回流提取2次，每次3小時，合併每次所得提取液，回收溶劑，用真空乾燥箱50℃乾燥，得芒果葉提取物；2)將刺五加、黨參、杜仲、茯苓、板藍根按量稱取，混合、粉碎過篩成40目的粉末，放入煎煮容器內，加入4-6倍質量的水，浸泡2小時，然後煎熬2小時，過濾，將藥汁倒出；再次向藥渣內加入相對於粉末質量2-4倍的水，煎熬1小時，過濾，得藥汁；將兩次過濾所得藥汁混合，得中藥混合液；3)將芒果葉提取物加入到步驟2)所得中藥混合液中，攪拌混合均勻，置入真空濃縮設備中進行濃縮，濃縮溫度為60℃，濃縮時間為30分鐘，冷卻後得混合濃縮液；4)將穿心蓮提取物加入步驟3)所得混合濃縮液，混合均勻，得防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑待用液；5)將步驟4)所製得的待用液，經過噴霧乾燥，得到防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑乾粉。實施例2：一種防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑，由如下組分刺五加10kg、黨參5kg、杜仲5kg份、茯苓5kg、板藍根5kg、芒果葉5kg、穿心蓮提取物10kg。其中穿心蓮提取物，按質量百分比計含有穿心蓮內酯40％及脫水穿心蓮內酯2％。其製備方式與實施例1一致。實施例3一種防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑，由如下組分刺五加20kg、黨參10kg、杜仲10kg份、茯苓10kg、板藍根10kg、芒果葉15kg、穿心蓮提取物20kg。其中穿心蓮提取物，按質量百分比計含有穿心蓮內酯40％及脫水穿心蓮內酯2％。其製備方式與實施例1一致。實施例4將實施例1所制防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑添加到市售基礎飼料中，添加量為基數飼料的1％。實施例5將實施例1所制防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑添加到市售基礎飼料中，添加量為基數飼料的7％。實施例6將實施例1所制防治錦鯉病毒性疾病的飼料添加劑添加到市售基礎飼料中，添加量為基數飼料的10％。對比例1在實施例5的飼料添加劑配方中，不添加芒果葉和穿心蓮提取物，其餘與實施例5一致。對比例2在實施例5的飼料添加劑配方中，僅保留有芒果葉和穿心蓮提取物，其他組分不添加，其餘與實施例5一致。臨床試驗：實驗一自染病養殖場，選取感染有皰疹病毒的錦鯉，其症狀為：多數病魚表現為眼球及頭部皮膚凹陷。感染發生後，體表出現斑紋，背鰭似乎重疊，之後，體表分泌大量黏液。選取染病錦鯉隨機分為6組，每組中4個重複，每個重複25尾魚。4組中1組空白組為僅投餵市售基礎飼料；3組為實驗組，實驗組分實驗1、2、3組，對應在市售基礎飼料中分別添加7％(質量百分數)的本發明所示實施例1、2、3飼料添加劑；2組為對比組，對比組分為對比1、2組，分別對應添加了對比例1所述飼料、添加了對比例2所述飼料；對照組與實驗組的飼養環境和飼料質量嚴格保持一致，連續投餵三周，各實驗組死亡率均大大降低。其中實驗組1在第一周治癒率就到達85％，兩周治癒率達93％，死亡率極低，即染病錦鯉獲得了較強的免疫保護。對比1、2也起到一定的治療效果，但其遠不如本發明所採用各組分配伍的效果。表1實驗二自養殖場選取體重相當的健康錦鯉，對照組用的飼料中均不添加本發明飼料添加劑，下設3個重複；實驗組分實驗1、2、3組，對應所用飼料中分別添加5％(質量百分數)的本發明產品實施例1、2、3，實驗1、2、3組分別下設3個重複。對照組與實驗組的飼養環境和飼料質量嚴格保持一致，飼養60天。實驗初期測定魚體長度及魚體質量，並記錄，試驗結束時，再對魚體長度和魚體質量進行測定；觀察兩組魚的誘食反應，同時收集試驗組魚的排洩物和餌料殘渣，烘乾後稱質量。結論:從下表2、3可看出，試驗組在誘食效果、魚體長度、質量增長及肥滿度方面比對照組有顯著的提升；錦鯉的免疫指標(免疫指標吞噬指數、溶菌酶活力和補體活力)均顯著高於對照組；且實驗組1的整體效果要高於實驗2、3組。組別誘食反應增長率％增重率％肥滿度％對照組一般2.3％7.3％5.5％實驗組1強6.2％20％9.3％實驗組2好於一般4.5％13％6.7％實驗組3強5.6％16％8.9％表2表3實驗三此外，分別在全國不同區域兩處進行大田養殖試驗，兩處錦鯉的養殖實驗以及對照組的實驗均分別在4口塘進行，每口塘的平均面積均為3畝，對照組飼料中不添加本發明的基礎飼料，實驗組分別為飼餵實施例4-6所述飼料。經過180天的飼養實驗後，魚的成活率、錦鯉體內3種主要免疫指標(吞噬指數、溶菌酶活力和補體活力)結論與在試驗場室內循環養殖系統中進行的實驗結論一致，實施例5所在實驗組，在染病機率、成活率、免疫指標方面明顯高於其他實驗組別。以上對本發明的較佳實施例進行了詳細說明，但所述內容僅為本發明的較佳實施例，不能被認為用於限定本發明的實施範圍。凡依本發明申請範圍所作的均等變化與改進等，均應仍歸屬於本發明的專利涵蓋範圍之內。當前第1頁1 2 3