一種穩定的烏司他丁水針劑藥物組合物的製作方法

2023-11-03 05:36:42

專利名稱：：一種穩定的烏司他丁水針劑藥物組合物的製作方法
技術領域：
：本發明涉及一種水針劑藥物組合物，具體涉及含有有效劑量的烏司他丁和一定比例的輔料組成。
背景技術：
：烏司他丁(Ulinastatin，尿胰蛋白酶抑制劑UrlinaryTrypsinInhibitor,UTI)是從健康成年男性尿液中提取的一種糖蛋白，由143個胺基酸組成，N端為丙氨酸，C端為亮氨酸，在第10位絲氨酸和45位天冬氨酸有糖鏈。絲氨酸上的O-糖苷鏈包含多個硫酸軟骨素單元。烏司他丁的分子量經HPLC法測定為60-70KD，經SDS-PAGE測定為40-50KD，等電點為2.6，是一種對熱穩定的酸性蛋白。烏司他丁對胰蛋白酶、透明質酸酶、纖溶酶等多種酶具有抑制作用，對細胞膜、溶酶體膜有明顯的穩定作用，臨床上常用於治療急性胰腺炎、急性器官功能衰竭等。目前臨床使用的烏司他丁大多是凍乾粉針劑，配置過慢容易導致生物活性的降低、且有微生物汙染的可能性，嚴重影響病人的治療效果。特別是，烏司他丁用於急性器官功能衰竭的治療時，用藥時間是至關重要的，等到將凍乾粉針溶解配製好，可能已經延誤了病人的最佳治療時間。
發明內容本發明的目的是提供一種穩定、使用方便的烏司他丁水針劑藥物組合物，以解決上述烏司他丁粉針劑在臨床使用中存在的問題。為達到上述目的，本發明人採用的技術方案是，選取能夠對烏司他丁活性起保護作用，且不與烏司他丁藥理作用產生拮抗、可以用於靜脈注射的輔料，與烏司他丁按照一定比例製備成一定pH值範圍的注射液，在臨床使用時可直接用於靜脈輸注。輔料可選自甘露醇、氯化鈉、醋酸鈉、醋酸中的一種或幾種，pH值範圍選自4.2-6.0。本發明所述的含有烏司他丁的藥物組合物，其特徵在於烏司他丁和輔料的配比為IO萬單位0.02-0.2g，pH為4.2-6.0;優選的配比為10萬單位0.05-0.15g，pH為4.8-5.8;比較優選的配比為IO萬單位O.lg，pH為5.0-5.5。本發明優選的含有烏司他丁的藥物組合物的組成及配比烏司他丁和甘露醇，優選的配比為10萬單位0.05-0.15g，pH4.8-5.8，比較優選的配比為10萬單位O.lg,pH5.0-5.5;或者為烏司他丁、甘露醇和氯化鈉，優選的配比為10萬單位0.05-0.15g:0細3-0.02g，pH4.8誦5.8，比較優選的配比為10萬單位O.lg:0.015-0.016g，pH5.0-5.5;或者為烏司他丁、甘露醇、氯化鈉、醋酸鈉和醋酸，優選的配比為10萬單位0.05-0.15g:0.0003-0.02g:0.0005-0.01g:0.0001-0.001g，pH4.2-5.8，比較優選的配比為10萬單位O.lg:0.015-0.016g:0.0035-0.004g:0.00065-0.0007g、pH4.8-5.8。在本文中，烏司他丁單位被定義為2ixg胰蛋白酶活性50n/。被抑制時烏司他丁的量為1個單位。如上所述的任一藥物組合物，可以注射劑形式存在，尤其可以水針劑形式存在。本發明藥物組合物的配製方法(1)稱取所需烏司他丁，加入配液桶內，加入少量約95%的注射用水溶解；(2)將配製所需的輔料加入到配液桶內，混勻；(3)用lmol/L的氫氧化鈉或lmol/L的鹽酸溶液調節pH值至4.2-6.0;(4)加入剩餘的注射用水，混勻；(5)過濾除菌，灌封，包裝。按照上述組成、配比及製備方法配製的烏司他丁注射劑，在臨床應用時，可直接作靜脈直接輸入。根據患者的病情，治療劑量為30萬-300萬單位，給藥次數每天1-4次。發明人應用本發明的配方製備的烏司他丁注射液進行了穩定性研究，結果表明25'C放置兩年，烏司他丁的效價仍保持在97%以上。特別是，按照優選配方，如烏司他丁5000萬單位、甘露醇50g製備的烏司他丁注射液，25'C放置兩年，烏司他丁的效價保持在99.9%以上，且在放置過程中，藥液仍保持無色澄明。而未使用輔料的烏司他丁注射液，經過兩年，效價降至81%以下，失去藥用價值。採用本方法製備所得的含有烏司他丁注射劑，進行了藥效學試驗，結果表明本發明所述的注射劑具有較好的治療急性胰腺炎、急性器官功能衰竭等功效。具體實施例方式發明人通過以下的實施例來進一步詳細闡述本發明，但並不限於此實施範圍。實施例l烏司他丁注射液的製備本發明的所述的烏司他丁可按照專利"純化的烏司他丁及其製備方法和含有該烏司他丁的藥物組合物"(ZL200610000200.2)中公開的製備方法製備而得。以新鮮人尿為原料，通過以下工藝步驟製備a.將尿泵入攪拌池中，調節pH至4.5-6，加入甲殼素吸附，用硫酸銨溶液洗脫，洗脫液進行抽濾，抽乾產品為烏司他丁粗製品；b.取烏司他丁粗製品加2-3倍水溶解後，過濾，取上清液，調節pH為6-7.5後用乙醇沉澱，將沉澱用水溶解過濾，所得濾液上陰離子交換柱，用含有0.1-2mol/LNaCl及0.1-0.5mol/L磷酸鹽的緩衝液洗脫，收集洗脫液；c.調節該洗脫液pH至7.0-9.0，然後上金屬螯合柱，用含有0.1-2mol/LNaCl及0.1-0.5mol/L磷酸鹽的緩衝液洗脫，收集洗脫液；d.調節洗脫液pH至4.0-6.0，上疏水柱吸附，用含有0.1-2mol/LNaCl及0.1-0.5mol/L磷酸鹽的緩衝液進行梯度洗脫，收集洗脫液；e.調整洗脫液pH至5.0-6.0,上陰離子交換柱，用含有0.1-2mol/LNaCl及0.1-0.5mol/L磷酸鹽緩衝液洗脫，洗脫液用超濾膜超濾；f.將超濾液pH調至6.0-8.0，上凝膠柱，用含有0.5%-5%NaCl及0.1-0.5mol/L磷酸鹽的緩衝液洗脫，收集洗脫液；g.洗脫液用超濾膜超濾，即得純化的烏司他丁，濃度為5萬單位/ml的溶液，純度>99.9%;以上述方法製備的烏司他丁(溶液或者凍幹後的粉末)為原料，按照以下方法製備烏司他丁注射液處方h烏司他丁10000萬單位，甘露醇100g，pH5.0-5.5二者配比為10萬單位O.lg，pH為5.0-5.5製備方法(1)稱取所需原料，加入配液桶內，加入約95%(l卯0ml)的注射用水溶解；(2)將配製所需的甘露醇注射液(或甘露醇)加入到配液桶內，混勻；(3)用lmol/L的氫氧化鈉或lmol/L的鹽酸溶液調節pH值至5.0-5.5;(4)加入注射用水至2000ml，混勻；(5)過濾除菌，分裝成1000支(每支10萬單位/2ml)，灌封，包裝。實施例2:烏司他丁注射液的製備處方2-10配比如下:tableseeoriginaldocumentpage6處方2-10烏司他丁注射液製備方法按照實施例1所述的方法製備。實施例3穩定性試驗取按照處方1-10法製備的IO萬單位烏司他丁注射液劑各一支，另取按照實施例1製備方法製備而得的不含有輔料的10萬單位烏司他丁注射液1支；25°C放置2年後，採用以下方法測定烏司他丁的活性，按照下式計算烏司他丁的活性殘留率活性殘留率-放置後活性/放置前活性X100%烏司他丁活性測定方法標準品溶液的製備精密稱取烏司他丁標準品適量，加0.2mol/L三乙醇胺緩衝液(取三乙醇胺29.8g，加水900ml溶解，用4mol/L鹽酸溶液調pH至7.8，加水至1000ml，搖勻，即得。)製成每lml中含50單位的溶液。供試品溶液的配製精密稱取本品適量，加0.2mol/L三乙醇胺緩衝液製成.每lml中約含50烏司他丁單位的溶液。結晶胰蛋白酶溶液精密稱取結晶胰蛋白酶(每lmg含750010000BAEE單位)適量，加冷的氯化鈣鹽酸溶液(取氯化鈣2.94g加0.001mol/L鹽酸溶液1000ml溶解即得)製成每lml含0.lmg的溶液，臨用配製，並置4'C保存。苯甲醯一L一精氨酸一P—對硝基苯胺鹽酸溶液取苯甲醯一L一精氨酸—P一對硝基苯胺鹽酸鹽適量，加水製成每lml中含lmg的溶液，臨用時配製並置暗處保存。測定法取0.2mol/L三乙醇胺緩衝液(預熱至25±0.1°C)1.6ml，至比色池中，加標準品溶液0.2ml，加結晶胰蛋白酶溶液0.2ml，混勻，保溫5分鐘，使比色池內溫度保持在25±0.rc,加苯甲醯一L一精氨酸一p—對硝基苯胺鹽酸鹽溶液1.0ml(預熱至25土0.rC)立即計時並搖勻，以水為空白，照分光光度法(中國藥典2005年版二部附錄IV)在405nm波長處，每隔1分鐘測定吸收度，共5分鐘，吸收度的變化率應恆定。以反應時間為橫坐標，吸收度為縱坐標作圖，求出每1分鐘的吸收度變化率(AAs)。分別取0.2mol/L三乙醇胺緩衝液和供試品溶液0.2ml，代替標準品溶液同法操作，分別求出吸收度變化率AA。和AAt。按下式計算每lmg供試品中烏司他丁的單位數。△A0—AAtBu/mg=X△A0—厶AsW式中AA。為三乙醇胺緩衝液對照管吸收度的變化率。AAt為供試品溶液吸收度的變化率。△As為標準品溶液吸收度的變化率。B:每lml標準品溶液中含烏司他丁單位數。W:每lml供試品溶液中含供試品的mg數。結果如表l:表l烏司他丁25'C放置2年的穩定性試驗結果tableseeoriginaldocumentpage8本實驗結果說明，烏司他丁注射液中含有上述處方i一io中的輔料，可以有效保持烏司他丁的活性，優選處方l中輔料和pH的最佳組合使得其中烏司他丁的活性殘留率大於99.9%，且能夠保持無色澄明，pH值基本不變，仍維持在5.0一5.5之間；而沒有添加輔料的烏司他丁注射液中，烏司他丁易發生降解，常溫放置2年後其活性殘留率降至80%左右，不宜應用於臨床。權利要求1、一種含有烏司他丁的藥物組合物，其特徵在於是由有效劑量的烏司他丁和選自甘露醇、氯化鈉、醋酸鈉、醋酸中的一種或幾種輔料組成，pH值範圍選自4.2-6.0。2、根據權利要求1所述的藥物組合物，其特徵在於烏司他丁和輔料的配比為10萬單位0.02-0.2g，pH為4.2-6.0。3、根據權利要求2所述的藥物組合物，其特徵在於烏司他丁和輔料的配比為10萬單位0.05-0.15g，pH為4.8-5.8。4、根據權利要求3所述的藥物組合物，其特徵在於烏司他丁和輔料的配比為10萬單位0.lg，pH為5.0-5.5。5、根據權利要求1所述的藥物組合物，其特徵在於組合物中組成及配比為烏司他丁和甘露醇，配比為10萬單位0.05-0.15g,pH4.8-5.8;或者，烏司他丁、甘露醇和氯化鈉，配比為10萬單位0.05-0.15g:0.0003-0.02g，pH4.8-5.8;或者，烏司他丁、甘露醇、氯化鈉、醋酸鈉和醋酸，配比為10萬單位0.05-0.15g-0.0003-0.02g:0.0005-0.01g:0.0001-O.OOlg，pH4.2-5.8。6、根據權利要求5所述的藥物組合物，其特徵在於組合物中組成及配比為-烏司他丁和甘露醇，配比為10萬單位O.lg，pH5.0-5.5;或者，烏司他丁、甘露醇和氯化鈉，配比為10萬單位O.lg:0.015-0.016g，pH5.0-5.5;或者，烏司他丁、甘露醇、氯化鈉、醋酸鈉和醋酸，配比為10萬單位O.lg:0.015-0.016g:0.0035-0.004g:0.00065-0.0007g、pH4.8-5.8。7、根據權利要求l一6所述的任一藥物組合物，其特徵在於該組合物以注射劑形式存在。8、根據權利要求7所述的任一藥物組合物，其特徵在於該組合物以水針劑形式存在。9、一種含有烏司他丁的藥物組合物的配製方法，其特徵在於，(1)稱取所需烏司他丁，加入配液桶內，加入少量注射用水溶解；(2)將配製所需的輔料加入到配液桶內，混勾；(3)用lmol/L的氫氧化鈉或lmol/L的鹽酸溶液調節pH值至4.2-6.0;(4)加入剩餘的注射用水，混勻；(5)過濾除菌，灌封，包裝。全文摘要本發明公開了一種穩定的烏司他丁藥物組合物，它包含有效劑量的烏司他丁以及一定比例的藥用輔料。其中輔料可為可選自甘露醇、氯化鈉、醋酸鈉、醋酸中的一種或幾種，pH值範圍選自4.2-6.0。該組合物通常以注射劑的形式使用，臨床應用時可直接作靜脈輸入，能明顯改善烏司他丁凍乾粉針製劑在配製時活性易降低的問題。文檔編號A61K47/02GK101439181SQ20081018770公開日2009年5月27日申請日期2008年12月31日優先權日2008年12月31日發明者侯永敏,許文勤,瑤雷申請人:廣東天普生化醫藥股份有限公司