一種用於煙梗處理的短小芽孢桿菌製劑的製作方法
2023-10-31 21:20:37 2
專利名稱：一種用於煙梗處理的短小芽孢桿菌製劑的製作方法
技術領域：
本發明屬於煙用添加劑的技術領域，更具體地說，本發明涉及一種微生物製劑。同時還涉及所述微生物製劑的製備方法及其在菸草工業中的應用。
背景技術：
隨著我國捲菸工藝技術水平的提高和菸草行業減害降焦的持續開展，膨脹梗絲在捲菸配方中的應用更加廣泛。在配方中加入膨脹梗絲後，由於其填充值較高，可以減少捲菸菸絲用量，不僅節約捲菸成本，也可以起到降低捲菸焦油量的作用。然而，目前對煙梗資源綜合利用的技術水平較為落後，閒置煙梗浪費大，梗絲在捲菸配方中的摻兌比例低，對菸葉的依存度高，捲菸配方成本較高，還未能更好地發揮其在捲菸產品中提質降耗、減害降焦的效果。因此，改善梗絲質量，提高梗絲的綜合利用率，對捲菸減害降焦工作和降低製造成本具有重要的現實意義。另一方面，煙梗的主要成分是細胞壁物質，約佔40%以上，其包括木質素、纖維素、 半纖維素和果膠等。這類物質的熱裂解產物具有強烈的刺激性，雜氣重、嗆咳、澀口、香氣量少，嚴重影響了捲菸的吸味品質，直接限制了梗絲在葉組配方中所佔的比例。因此，降低梗絲燃燒產生的不良氣息，提高梗絲吸味是提高梗絲綜合利用率的關鍵問題。近期研究表明，通過微生物或生物酶處理具有明顯消除菸葉的青雜氣，減輕刺激性的作用，對菸葉香氣質量的改善也有一定的幫助。利用木質素降解菌和降解酶對煙梗進行處理能減輕梗絲的木質氣、刺激性。但現有技術中，關於添加微生物製劑直接作用於梗絲並提高梗絲抽吸品質的研究鮮見報導。經文獻檢索，尚未發現與本發現內容相同的報導。
發明內容
本發明的目的在於針對現有梗絲處理技術的不足，提供一種新的微生物製劑。本發明的另一目的是提供所述微生物製劑的製備方法。本發明進一步的目的是提供所述微生物製劑在梗絲處理中的應用。本發明的目的通過下述技術方案予以實現。*除非另有說明，本發明所採用的百分數均為質量百分數。A.本發明提供了一種新的微生物製劑，該微生物製劑是採用下述方法製備獲得 取從烤菸葉面上分離得到細菌Van35的液體菌種，按照0. 的接種量接種於200ml的LB 液體培養基中，在37°C搖床，轉速180r/min振蕩培養至OD值=2. 0 ;3500rpm/min離心 lOmin，用無菌水洗滌沉澱，離心，然後用20mL無菌水振蕩均勻，使用時稀釋10倍即為所需的微生物製劑；其中，所述的細菌Van35的液體菌種，經鑑定屬於短小芽孢桿菌，該菌株命名為 Bacillus pumilus。B.本發明提供了一種所述微生物製劑的製備方法，該方法採用下述步驟(1)烤菸葉面上分離得到細菌Van35的液體菌種；(2)取液體菌種，按照0. 1 %的接種量接種於200ml的LB液體培養基中；
(3)在 37 "C 搖床，轉速 180r/min 振蕩培養至 OD 值=2. 0 ； 3500rpm/min 離心 IOmin ；(4)用無菌水洗滌沉澱，離心，然後用20mL無菌水振蕩均勻，使用時稀釋10倍即為菌劑。C.本發明提供了所述微生物製劑在梗絲處理中的應用。與現有技術相比，本發明具有以下突出的優點(1)本發明提供的微生物製劑能明顯提高梗絲的香氣量、愉悅性等品質，雜氣、刺激性等下降，煙氣濃度和勁頭減少，餘味變得舒適。(2)本發明成本低、可控性強、操作簡單，便於實現大規模工業化生產，具有良好的開發應用前景。保藏牛物材料的說明本發明涉及的短小芽孢桿菌Van35的菌株已經保存在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；地址中國.北京市朝陽區北辰西路1號院3號；保藏日期2009 年11月5日；保藏號為CGMCC No. 3411。
具體實施例方式為了使本發明的目的、技術方案及優點更加清楚明白，以下通過實施例及試驗數據，對本發明作進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅用以解釋本發明， 並不用於限定本發明的保護範圍。實施例1——試管斜面培養採用Luria-Bertani(LB)培養基，配方為蛋白腖10g，氯化鈉10g，酵母提取物 5g，瓊脂20g，蒸餾水定容到1000ml。121°C滅菌25分鐘，擺成斜面。接種Van35，28°C培養 Mh，獲得試管種。實施例2——種子培養採用Luria-Bertani(LB)培養基，配方為蛋白腖10g，氯化鈉10g，酵母提取物 5g，蒸餾水定容到1000ml。121°C滅菌25分鐘。接種Van35試管種，培養12h，獲得液體菌種
實施例3——製備微生物製劑取液體菌種，按照0. 1 %的接種量接種於200ml的LB液體培養基中，在37°C搖床， 轉速180r/min振蕩培養至OD值=2. 0。3500rpm/min離心lOmin，用無菌水洗滌沉澱，離心，最後用20mL無菌水振蕩均勻，使用時稀釋10倍即為菌劑。應用實施例——微生物製劑對梗絲的作用用製備好的微生物製劑對梗絲進行處理，具體實驗步驟如下1)稱取含水率在11% -13%的梗絲100g。2)取菌劑20ml，用小型噴霧器將其均勻地噴灑到IOOg梗絲上，密封，以防止水分
4蒸發。3)直接噴灑等量的無菌水作為對照。4)將樣品封入密封袋，以防止水分蒸發，30°C恆溫乩。5)將梗絲置於120°C烘箱中烘乾，使含水率達到11^-13 ^
6)將梗絲於22°C相對溼度為60 %的恆溫恆溼箱平衡48h。7)取出部分菸絲，檢測主要化學成分含量和致香物質。8)將剩餘的菸絲手工卷製成煙支，樣品和對照隨機編號，由評吸專家組成的評吸小組進行感官評吸。常規化學成分的檢測結果表明經所述的微生物製劑處理後，梗絲的生物大分子化合物的含量發生了較大的改變，其中還原糖和總糖的含量發生了明顯的提高，同時還檢測到纖維素和木質素的含量發生了下降。致香成分檢測結果表明經微生物製劑處理後，梗絲的致香成分，包括苯甲醇、茄酮、香蘭素、大馬酮、二氫獼猴桃內酯、巨豆三烯酮、西柏三烯二醇和新植二烯等的含量較對照顯著提高。感官評吸結果表明梗絲經微生物製劑處理後，香氣量、愉悅性較對照顯著提升， 雜氣、刺激性等下降，煙氣濃度和勁頭減少，餘味變得舒適。試驗結果表明，該發明的微生物製劑具有明顯降低梗絲刺激性、掩蓋雜氣、細膩醇和煙氣的效果，能夠達到提高梗絲抽吸品質，提高梗絲在捲菸中的摻配量的目的。
權利要求
1.一種微生物製劑，其特徵在於，該微生物製劑是採用下述方法製備獲得取從烤菸葉面上分離得到細菌Van35的液體菌種為原料，按照0. 的接種量接種於200ml的LB液體培養基中，在37°C搖床，轉速180r/min振蕩培養至OD值=2. 0 ；3500rpm/min離心lOmin， 用無菌水洗滌沉澱，離心，然後用20mL無菌水振蕩均勻，使用時稀釋10倍即為所需的微生物製劑；其中，所述的細菌Van35的液體菌種，經鑑定屬於短小芽孢桿菌，該菌株命名為 Bacillus pumilus。
2.—種權利要求1所述的微生物製劑的製備方法，該方法採用下述步驟(1)烤菸葉面上分離得到細菌Van35的液體菌種；(2)取液體菌種，按照0.的接種量接種於200ml的LB液體培養基中；(3)在37°C搖床，轉速 180r/min 振蕩培養至 OD 值=2. O ；3500rpm/min 離心 IOmin ；(4)用無菌水洗滌沉澱，離心，最後用20mL無菌水振蕩均勻，使用時稀釋10倍即為所需菌劑。
3.一種權利要求1所述的微生物製劑在梗絲處理中的應用。
全文摘要
本發明公開了一種煙用微生物製劑及其製備方法和應用，屬於煙用添加劑的技術領域。本發明採用生產菌株液體經發酵培養後得到相應的微生物製劑。所述生產菌株為短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus.Van35)，該菌株已於2009年11月5日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號為CGMCC No.3411。本發明的微生物製劑，能夠明顯提高梗絲的香氣量、愉悅性等品質，使雜氣、刺激性等下降，煙氣濃度和勁頭減少，餘味變得舒適，從而進一步提高梗絲在捲菸中的摻配量，達到減害降焦、降低捲菸生產成本的目的。
文檔編號C12N1/20GK102250813SQ20111020049
公開日2011年11月23日 申請日期2011年7月17日 優先權日2011年7月17日
發明者段焰青, 王家俊, 王慶華, 王明鋒, 王素娟, 者為, 範多青, 陳興, 陳玉芸 申請人:紅雲紅河菸草(集團)有限責任公司