一種新的子宮頸癌細胞的標記技術的製備方法及裝置的製作方法
2023-07-20 04:59:36 2
專利名稱：一種新的子宮頸癌細胞的標記技術的製備方法及裝置的製作方法
技術領域：
本發明實施例涉及生物醫學技術領域，具體涉及一種新的子宮頸癌細胞的標記技術的製備方法及裝置。
背景技術：
子宮頸癌是最常見的惡性腫瘤之一，發病率位於女性腫瘤的第二位。全世界每年大約有20萬婦女死於這種疾病，而對子宮頸癌前病變的早期診斷和治療可以降低其發生率。目前國際上較先進的一種宮頸癌細胞學檢查技術是新柏氏液基細胞學檢測(TCT，Thinprep Cytologic Test), TCT檢查是採用液基薄層細胞檢測系統檢測宮頸細胞並進行細胞學分類診斷的方法，與傳統的宮頸刮片巴氏塗片檢查相比明顯提高了標本的滿意度及宮頸異常細胞檢出率，同時還能發現部分癌前病變，微生物感染如黴菌、滴蟲、病毒、衣原體
坐寸ο然而利用新柏氏液基細胞學檢測進行病理診斷不但需要經驗豐富的專家，而且即使這樣，還是會出現誤診和漏診。因此開發簡便快速檢測癌細胞的技術有很大的臨床意義。
發明內容
本發明實施例提供了一種新的子宮頸癌細胞的標記技術的製備方法及裝置，可以簡單、快速和準確地對子宮頸癌細胞進行鑑別診斷。本發明實施例提供的新的子宮頸癌細胞的標記技術的製備方法，包括製備膠體金；利用所述膠體金和抗上皮細胞粘附分子的抗體製備免疫金；利用所述免疫金對預收集的樣本中的上皮細胞粘附分子進行標記；對所述樣本進行製片。可選地，所述膠體金的製備方法包括(I)將氯金酸配製成濃度為O. 005%-0. 015%的水溶液並取100-200ml加熱至沸騰；(2)攪拌氯金酸水溶液，並向所述氯金酸水溶液加入3_6ml濃度為O. 5-1. 5%的檸檬酸三鈉水溶液；(3)將經過步驟(2)處理之後的溶液加熱煮沸15-20分鐘；(4)冷卻經過步驟(3)處理之後的溶液2-10分鐘至室溫後用雙蒸餾水恢復所述經過步驟(3)處理之後的溶液的體積至原體積，得到膠體金溶液。可選地，所述利用膠體金和抗上皮細胞粘附分子的抗體製備免疫金的方法包括(I)調節所述膠體金溶液的pH值為7. 5至8. 5 ;(2)將所述抗上皮細胞粘附分子的抗體置入透析袋內後放入雙蒸餾水中透析2-4小時或過夜；
(3)對經過步驟(2)處理之後的溶液在4°C下進行離心力為50000-100000g的離心沉澱50-70分鐘並去除所述溶液中的聚合物；(4)取經過步驟(3)處理之後的溶液的上清液，調整所述上清液的蛋白質至O. 5-lmg/ml的濃度並將調整後的上清液作為抗上皮細胞粘附分子的抗體儲存液；(5)用濃度為O. 004-0. 006mol/l pH值為8. 5-9. 5的硼酸鹽緩衝液將所述抗上皮細胞粘附分子的抗體儲存液作系列稀釋後，取O. 05-0. 15ml抗上皮細胞粘附分子的抗體系列稀釋液加到O. 5-1. 5ml所述膠體金溶液中，另設一管不加所述抗上皮細胞粘附分子的抗體系列稀釋液的對照管，4-6分鐘後分別向各管中加入O. 05-0. 15ml濃度為8-12%的NaCl溶液，混勻各管的溶液後靜置1. 5-2. 5小時，在能使膠體金穩定的蛋白量上再加9%-11%並將所述蛋白量記為最佳標記蛋白量；(6)調整所述上清液中蛋白量含量為所述最佳標記蛋白量並加入所述膠體金溶液並充分混合15-30分鐘；(7)向經過步驟(6)處理之後的溶液中加入濃度為2%_4%的PEG-2000使所述溶液的PEG-2000最終濃度為O. 05%-0. 1%並攪拌所述溶液10-15分鐘；(8)取經過步驟(7)處理之後的溶液中的沉澱部分並用含O. 5%-1. 5%的BSA和O. 01%-0. 03% 的 NaN3 的濃度為 O. 01-0. 03mol/l pH 值為 7. 0-7. 4 的 Tris-HCl 的緩衝液稀釋所述沉澱部分，得到免疫金；(9)回收所述免疫金並用微孔濾膜進行過濾除菌。可選地，在步驟所述利用所述免疫金對預收集的樣本中的上皮細胞粘附分子進行標記之後和步驟所述對樣本進行製片之前還包括對玻片進行預處理；對樣本細胞的抗體進行孵育；所述對玻片進行預處理包括用濃度為93%_97%的乙醇浸泡處理所述玻片；用雙蒸餾水清洗所述玻片；用3-氨丙基-3-乙氧基甲矽烷包被玻片。可選地，在步驟所述對樣本進行製片之後還包括利用顯微鏡對所述製片進行觀察。可選地，在步驟所述對樣本進行製片之後還包括對所述製片進行染色；利用顯微鏡對所述製片進行觀察。本發明實施例提供的新的子宮頸癌細胞的標記技術的製備裝置，包括製備單元一，用於製備膠體金；製備單元二，用於利用所述膠體金和抗上皮細胞粘附分子的抗體製備免疫金；標記單元，用於利用所述免疫金對預收集的樣本中的上皮細胞粘附分子進行標記；製片單元，用於對所述樣本進行製片。可選地，所述裝置還包括預處理單元，用於對玻片進行預處理；
孵育單元，用於對樣本細胞的抗體進行孵育。本發明實施例中，首先製備膠體金；然後利用所述膠體金和抗上皮細胞粘附分子的抗體製備免疫金；接著利用所述免疫金對預收集的樣本中的上皮細胞粘附分子進行標記；最後對所述樣本進行製片。由於膠體金顆粒子在普通光學顯微鏡下可見，當利用膠體金與抗上皮細胞粘附分子的抗體製備的免疫金去標記上皮細胞粘附分子時，通過直接觀察就可以確定上皮細胞粘附分子的性質，由於子宮頸癌細胞與其表面的上皮細胞粘附分子的表達水平相關度很高，所以可以簡單、快速和準確地對子宮頸癌細胞進行鑑別診斷。
圖1為本發明實施例中新的子宮頸癌細胞的標記技術及其製備方法第一實施例流程圖；圖2為本發明實施例中新的子宮頸癌細胞的標記技術及其製備方法第二實施例流程圖；圖3為本發明實施例中新的子宮頸癌細胞的標記技術及其製備裝置實施例結構圖。
具體實施例方式本發明實施例提供了一種新的子宮頸癌細胞的標記技術的製備方法及裝置，可以簡單、快速和準確地對癌細胞和間皮細胞進行鑑別診斷。請參閱圖1，本發明實施例中新的子宮頸癌細胞的標記技術的製備方法的第一實施例包括101、製備膠體金；膠體金的成份主要是氯金酸，製備方法可以採用檸檬酸三鈉還原法，通常採用的還原劑有檸檬酸三鈉、鞣酸、抗壞血酸、白磷和硼氫化鈉。102、利用膠體金和抗上皮細胞粘附分子的抗體製備免疫金；製備好膠體金之後，可以利用膠體金和抗上皮細胞粘附分子的抗體製備免疫金。103、利用免疫金對預收集的樣本中的上皮細胞粘附分子進行標記；製備好免疫金之後，可以利用免疫金對預收集的樣本中的上皮細胞粘附分子進行 己 O104、對樣本進行製片。利用免疫金對預收集的樣本中的上皮細胞粘附分子進行標記之後，可以對樣本進行製片。本發明實施例中，首先製備膠體金；然後利用膠體金和抗上皮細胞粘附分子的抗體製備免疫金；接著利用免疫金對預收集的樣本中的上皮細胞粘附分子進行標記；最後對樣本進行製片。由於膠體金顆粒子在普通光學顯微鏡下可見，當利用膠體金與抗上皮細胞粘附分子的抗體製備的免疫金去標記上皮細胞粘附分子時，通過直接觀察就可以確定上皮細胞粘附分子的性質，由於子宮頸癌細胞與其表面的上皮細胞粘附分子的表達水平相關度很高，所以可以簡單、快速和準確地對子宮頸癌細胞進行鑑別診斷。上面簡單介紹了本發明新的子宮頸癌細胞的標記技術的製備方法的第一實施例，下面對本發明新的子宮頸癌細胞的標記技術的製備方法的第二實施例進行詳細的描述，請參閱圖2，本發明實施例中新的子宮頸癌細胞的標記技術的製備方法的第二實施例包括:201、製備膠體金；膠體金的成份主要是氯金酸，製備方法可以採用檸檬酸三鈉還原法，通常採用的還原劑有檸檬酸三鈉、鞣酸、抗壞血酸、白磷和硼氫化鈉。原理與具體操作方法如下:2HAuC14+3C6H807=2Au+3C5H605+8HC1+3C02製備膠體金的具體方法包括:將氯金酸(HAuCl4)配製成濃度為0.005%-0.015%，可以為0.01%的水溶液並取100-200ml，可以為IOOml加熱至沸；攪拌氯金酸水溶液，並向氯金酸水溶液加入3-6ml，可以為5ml，濃度為0.5-1.5%，可以為I %的檸檬酸三鈉水溶液；接著繼續加熱煮沸上述溶液15-20分鐘，可以為15分鐘；最後將上述得到的溶液進行冷卻2-10分鐘，可以為5分鐘至室溫後用雙蒸餾水恢復至原體積，可以得到膠體金。202、利用膠體金和抗上皮細胞粘附分子的抗體製備免疫金；製備好膠體金之後，可以利用膠體金和抗上皮細胞粘附分子的抗體製備免疫金。具體製備免疫金的方法可以為:首先可以用濃度為0.2mol/l的K2CO3或濃度為0.lmol/1的HCl調節膠體金溶液的pH至選定值，可以為7.5至8.5 ;然後將抗上皮細胞粘附分子的抗體置入透析袋內後，放入雙蒸餾水中透析2-4小時或過夜，接著將上述溶液在4°C下進行離心力為50000-100000g，可以為IOOOOOg的離心沉澱50-70分鐘，可以為60分鐘並去除所述溶液中的聚合物，取上述溶液的上清液，調整所述上清液的蛋白質至0.5-lmg/ml的濃度並將上述上清液作為抗上皮細胞粘附分子的抗體儲存液。得到抗上皮細胞粘附分子的抗體儲存液後，用濃度為0.004-0.006mol/l，可以為0.005mol/l，鹼 度為8.5-9.5，可以為9.0的硼酸鹽緩衝液將抗上皮細胞粘附分子的抗體儲存液作系列稀釋後，取0.05-0.15ml，可以為0.1ml抗上皮細胞粘附分子的抗體系列稀釋液加到0.5-1.5ml，可以為Iml膠體金溶液中，另設一支不加抗上皮細胞粘附分子的抗體質系列稀釋液的對照管，4-6分鐘，可以為5分鐘後分別向各支試管中加入0.05-0.15ml，可以為
0.1ml濃度為8-12%，可以為10%的NaCl溶液，混勻各管的溶液後靜置1.5-2.5小時，可以為2小時，在能使膠體金穩定的蛋白量上再加9%-11%，可以為10%並將上述蛋白量記為最佳標記蛋白量。得到最佳標記蛋白量後，調整上清液中蛋白量含量為最佳標記蛋白量，取上述上清液加入膠體金溶液並充分混合15-30分鐘，可以為15分鐘，接著加入濃度為2%_4%，可以為3%的PEG-2000使上述溶液中的PEG-2000最終濃度為0.05%-0.1 %，可以為0.05%,並攪拌上述溶液10-15分鐘，取樣品並吸取上清液，然後取管底沉澱部分，用含0.5%-1.5%，可以為1%的BSA和0.01%-0.03%,可以為0.02%的NaN3的濃度為0.01-0.03mol/l,可以為0.02mol/lpH值為7.0-7.4，可以為7.2的Tris-HCl的緩衝液稀釋上述沉澱部分，得到免疫金，最終免疫金的回收量為原體積的10%。接著還可以用0.22um的微孔濾膜過濾除菌，分裝，並在4°C下保存備用。203、利用免疫金對預收集的樣本中的上皮細胞粘附分子進行標記；製備好免疫金之後，可以利用免疫金對預收集的樣本中的上皮細胞粘附分子進行
己 O204、對玻片進行預處理；
上述對玻片進行預處理可以包括首先用濃度為93%_97%，可以為95%的乙醇浸泡處理玻片；接著用雙蒸餾水清洗玻片；最後用3-氨丙基-3-乙氧基甲矽烷包被玻片即可完成對玻片的預處理，上述的預處理過程可以設定在步驟206之前的任一步驟之前或之後，而不限定與本實施例中的在步驟203之後。205、對樣本細胞的抗體進行孵育；上述具體的孵育過程可以為，將膠體金包被的抗體與樣本孵育在35_39°C，可以為370C的恆溫孵育箱中，反應一段時間，可以為2小時或者在4°C的恆溫孵育箱中過夜，然後取出後依次用清洗液，可以用濃度為l%Tween20的PBS清洗，最後在轉速，可以為IOOOrpm的離心機中離心若干次，可以為3次，每次持續若干時間，可以為5分鐘。206、對樣本進行製片。完成對樣本細胞進行抗體孵育之後，可以對樣本進行製片。具體的製片方法為現有技術中的內容，在此處不再贅述。對所述樣本進行製片之後，可以對上述製片進行觀察。在對上述製片進行觀察之前，還可以對所述製片進行染色，然後再進行觀察。本發明實施例中，首先製備膠體金；然後利用膠體金和抗上皮細胞粘附分子的抗體製備免疫金；接著利用免疫金對預收集的樣本中的上皮細胞粘附分子進行標記；最後對樣本進行製片。其中還可以對玻片進行預處理和對樣本細胞進行抗體孵育。由於膠體金顆粒子在普通光學顯微鏡下可見，當利用膠體金與抗上皮細胞粘附分子的抗體製備的免疫金去標記上皮細胞粘附分子時，通過直接觀察就可以確定上皮細胞粘附分子的性質，由於子宮頸癌細胞與其表面的上皮細胞粘附分子的表達水平相關度很高，所以可以簡單、快速和準確地對子宮頸癌細胞進行鑑別診斷。上面對本發明新的子宮頸癌細胞的標記技術及其製備方法的第二實施例作了詳細描述，特別是製備膠體金和免疫金的過程，下面介紹本發明新的子宮頸癌細胞的標記技術及其製備裝置實施例，請參閱圖3，本發明實施例中新的子宮頸癌細胞的標記技術及其製備裝置實施例包括製備單元一 301，用於製備膠體金；製備單元二 302，用於利用膠體金和抗上皮細胞粘附分子的抗體製備免疫金；標記單元303，用於利用免疫金對預收集的樣本中的上皮細胞粘附分子進行標記；製片單元304，用於對樣本進行製片。所述裝置還包括預處理單元305，用於對玻片進行預處理；孵育單元306，用於對樣本細胞的抗體進行孵育。首先製備單元一 301製備膠體金，膠體金的成份主要是氯金酸，製備方法可以採用檸檬酸三鈉還原法，通常採用的還原劑有檸檬酸三鈉、鞣酸、抗壞血酸、白磷和硼氫化鈉。原理與具體操作方法如下 2HAuC14+3C6H807=2Au+3C5H605+8HC1+3C02製備膠體金的具體方法包括將氯金酸(HAuCl4)配製成濃度為O. 005%-0. 015%，可以為O. 01%的水溶液並取100-200ml，可以為IOOml加熱至沸；攪拌氯金酸水溶液，並向氯金酸水溶液加入3-6ml，可以為5ml，濃度為O. 5-1. 5%，可以為I %的檸檬酸三鈉水溶液；接著繼續加熱煮沸上述溶液15-20分鐘，可以為15分鐘；最後將上述得到的溶液進行冷卻2-10分鐘，可以為5分鐘至室溫後用雙蒸餾水恢復至原體積，可以得到膠體金。製備單元一 301製備好膠體金之後，製備單元二 302可以利用膠體金和抗上皮細胞粘附分子的抗體製備免疫金。製備單元二 302具體製備免疫金的方法可以為首先可以用濃度為O. 2mol/l的K2CO3或濃度為O. lmol/1的HCl調節膠體金溶液的pH至選定值，可以為7. 5至8. 5 ;然後將抗上皮細胞粘附分子的抗體置入透析袋內後，放入雙蒸餾水中透析2-4小時或過夜，接著將上述溶液在4°C下進行離心力為50000-100000g，可以為IOOOOOg的離心沉澱50-70分鐘，可以為60分鐘並去除所述溶液中聚合物，取上述溶液的上清液，調整上清液的蛋白質至O. 5-lmg/ml的濃度並將上述上清液作為抗上皮細胞粘附分子的抗體儲存液。得到抗上皮細胞粘附分子的抗體儲存液後，用濃度為O. 004-0. 006mol/l，可以為
O.005mol/l，鹼度為8. 5-9. 5，可以為9. O的硼酸鹽緩衝液將抗上皮細胞粘附分子的抗體儲存液作系列稀釋後，取O. 05-0. 15ml，可以為O.1ml抗上皮細胞粘附分子的抗體系列稀釋液加到O. 5-1. 5ml，可以為Iml膠體金溶液中，另設一支不加抗上皮細胞粘附分子的抗體系列稀釋液的對照管，4-6分鐘，可以為5分鐘後分別向各支試管中加入O. 05-0. 15ml，可以為O.1ml濃度為8-12%，可以為10%的NaCl溶液，混勻各管的溶液後靜置1. 5-2. 5小時，可以為2小時，在能使膠體金穩定的蛋白量上再加9%-11%，可以為10%並將上述蛋白量記為最佳標記蛋白量。得到最佳標記蛋白量後，調整上清液中蛋白量含量為最佳標記蛋白量，取上述上清液加入膠體金溶液並充分混合15-30分鐘，可以為15分鐘，接著加入濃度為2%-4%，可以為3%的PEG-2000使所述溶液的PEG-2000最終濃度為O. 05%-0.1 %，可以為O. 05%，並攪拌所述溶液10-15分鐘，取樣品並吸取上清液，然後取管底沉澱部分，用含O. 5%-1. 5%，可以為1%的BSA和O. 01%-0. 03%，可以為O. 02%的NaN3的濃度為O. 01-0. 03mol/l，可以為O. 02mol/lpH值為7. 0-7. 4，可以為7. 2的Tris-HCl的緩衝液稀釋上述沉澱部分，得到膠體金標記複合物，最終膠體金標記複合物的回收量為原體積的10%。接著還可以用O. 22um的微孔濾膜過濾除菌，分裝，並在4°C下保存備用。製備單元二 302製備好免疫金之後，標記單元303可以利用免疫金對預收集的樣本中的上皮細胞粘附分子進行標記，標記單元303完成利用免疫金對預收集的樣本中的上皮細胞粘附分子進行標記之後預處理單元305可以對玻片進行預處理。上述對玻片進行預處理可以包括首先用濃度為93%_97%，可以為95%的乙醇浸泡處理玻片；接著用雙蒸餾水清洗玻片；最後用3-氨丙基-3-乙氧基甲矽烷包被玻片即可完成對玻片的預處理。預處理單元305完成玻片預處理過程之後，孵育單元306可以對樣本細胞的抗體進行孵育。上述具體的孵育過程可以為，將膠體金包被的抗體與樣本孵育在35-39°C，可以為370C的恆溫孵育箱中，反應一段時間，可以為2小時或者在4°C的恆溫孵育箱中過夜，然後取出後依次用清洗液，可以用濃度為l%Tween20的PBS清洗，最後在轉速，可以為IOOOrpm的離心機中離心若干次，可以為3次，每次持續若干時間，可以為5分鐘。
孵育單元306對樣本細胞進行抗體孵育的過程完成之後，製片單元304對所述樣本進行製片。具體的製片方法為現有技術中的內容，在此處不再贅述。製片單元304對樣本進行製片之後，可以對上述製片進行觀察。在對上述製片進行觀察之前，還可以對製片進行染色，然後再進行觀察。本發明實施例中，製備單元一 301首先製備膠體金；然後製備單元二 302利用膠體金和抗上皮細胞粘附分子的抗體製備免疫金；接著標記單元303利用免疫金對預收集的樣本中的上皮細胞粘附分子進行標記；最後製片單元304對樣本進行製片。其中預處理單元305還可以對玻片進行預處理和孵育單元306對樣本細胞進行抗體孵育。由於膠體金顆粒子在普通光學顯微鏡下可見，當利用膠體金與抗上皮細胞粘附分子的抗體製備的免疫金去標記上皮細胞粘附分子時，通過直接觀察就可以確定上皮細胞粘附分子的性質，由於子宮頸癌細胞與其表面的上皮細胞粘附分子的表達水平相關度很高，所以可以簡單、快速和準確地對子宮頸癌細胞進行鑑別診斷。本領域普通技術人員可以理解實現上述實施例方法中的全部或部分步驟是可以通過程序來指令相關的硬體完成，所述的程序可以存儲於一種計算機可讀存儲介質中，上述提到的存儲介質可以是只讀存儲器，磁碟或光碟等。以上對本發明所提供的一種新的子宮頸癌細胞的標記技術的製備方法及裝置進行了詳細介紹，對於本領域的一般技術人員，依據本發明實施例的思想，在具體實施方式
及應用範圍上均會有改變之處，綜上所述，本說明書內容不應理解為對本發明的限制。
權利要求
1.一種新的子宮頸癌細胞的標記技術的製備方法，其特徵在於，包括: 製備膠體金； 利用所述膠體金和抗上皮細胞粘附分子的抗體製備免疫金； 利用所述免疫金對預收集的樣本中的上皮細胞粘附分子進行標記； 對所述樣本進行製片。
2.根據權利要求1所述的新的子宮頸癌細胞的標記技術的製備方法，其特徵在於，所述膠體金的製備方法包括: (1)將氯金酸配製成濃度為0.005%-0.015%的水溶液並取100-200ml加熱至沸騰； (2)攪拌氯金酸水溶液，並向所述氯金酸水溶液加入3-6ml濃度為0.5-1.5%的檸檬酸三鈉水溶液； (3)將經過步驟(2)處理之後的溶液加熱煮沸15-20分鐘； (4)冷卻經過步驟(3)處理之後的溶液2-10分鐘至室溫後用雙蒸餾水恢復所述經過步驟(3)處理之後的溶液的體積至原體積，得到膠體金溶液。
3.根據權利要求1所述的新的子宮頸癌細胞的標記技術的製備方法，其特徵在於，所述利用膠體金和抗上皮細胞粘附分子的抗體製備免疫金的方法包括: (1)調節所述膠體金溶液的pH值為7.5至8.5 ; (2)將所述抗上皮細胞粘附分子的抗體置入透析袋內後放入雙蒸餾水中透析2-4小時或過夜；` (3)對經過步驟(2)處理之後的溶液在4°C下進行離心力為50000-100000g的離心沉澱50-70分鐘並去除所述溶液中的聚合物； (4)取經過步驟(3)處理之後的溶液的上清液，調整所述上清液的蛋白質至0.5-lmg/ml的濃度並將調整後的上清液作為抗上皮細胞粘附分子的抗體儲存液； (5)用濃度為0.004-0.006mol/l pH值為8.5-9.5的硼酸鹽緩衝液將所述抗上皮細胞粘附分子的抗體儲存液作系列稀釋後，取0.05-0.15ml抗上皮細胞粘附分子的抗體系列稀釋液加到0.5-1.5ml所述膠體金溶液中，另設一支不加所述抗上皮細胞粘附分子的抗體系列稀釋液的對照管，4-6分鐘後分別向各管中加入0.05-0.15ml濃度為8-12%的NaCl溶液，混勻各管的溶液後靜置1.5-2.5小時，在能使膠體金穩定的蛋白量上再加9%-11%並將所述蛋白量記為最佳標記蛋白量； (6)調整所述上清液中蛋白量含量為所述最佳標記蛋白量並加入所述膠體金溶液並充分混合15-30分鐘； (7)向經過步驟(6)處理之後的溶液中加入濃度為2%-4%的PEG-2000使所述溶液的PEG-2000最終濃度為0.05%-0.1%並攪拌所述溶液10-15分鐘； (8)取經過步驟(7)處理之後的溶液中的沉澱部分並用含0.5%-1.5%的BSA和0.01%-0.03% 的 NaN3 的濃度為 0.01-0.03mol/l pH 值為 7.0-7.4 的 Tris-HCl 的緩衝液稀釋所述沉澱部分，得到免疫金； (9)回收所述免疫金並用微孔濾膜進行過濾除菌。
4.根據權利要求1至3中的任一項所述的新的子宮頸癌細胞的標記技術的製備方法，其特徵在於，在步驟所述利用所述免疫金對預收集的樣本中的上皮細胞粘附分子進行標記之後和步驟所述對樣本進行製片之前還包括:對玻片進行預處理； 對樣本細胞的抗體進行孵育； 所述對玻片進行預處理包括: 用濃度為93%-97%的乙醇浸泡處理所述玻片； 用雙蒸餾水清洗所述玻片； 用3-氨丙基-3-乙氧基甲娃燒包被玻片。
5.根據權利要求4所述的新的子宮頸癌細胞的標記技術的製備方法，其特徵在於，在步驟所述對樣本進行製片之後還包括: 利用顯微鏡對所述製片進行觀察。
6.根據權利要求4所述的新的子宮頸癌細胞的標記技術的製備方法，其特徵在於，在步驟所述對樣本進行製片之後還包括: 對所述製片進行染色； 利用顯微鏡對所述製片進行觀察。
7.一種新的子宮頸癌細胞的標記技術的製備裝置，其特徵在於，包括: 製備單元一，用於製備膠體金； 製備單元二，用於利用所述膠體金和抗上皮細胞粘附分子的抗體製備免疫金； 標記單元，用於利用所述免疫金對預收集的樣本中的上皮細胞粘附分子進行標記； 製片單元，用於對所述樣本進行製片。
8.根據權利要求7所述的新的子宮頸癌細胞的標記技術的製備裝置，其特徵在於，所述裝置還包括: 預處理單元，用於對玻片進行預處理； 孵育單元，用於對樣本細胞的抗體進行孵育。
全文摘要
本發明實施例公開了一種新的子宮頸癌細胞的標記技術的製備方法及裝置，可以簡單、快速和準確地對子宮頸癌細胞進行鑑別診斷。本發明實施例方法包括製備膠體金；利用所述膠體金和抗上皮細胞粘附分子的抗體製備免疫金；利用所述免疫金對預收集的樣本中的上皮細胞粘附分子進行標記；對所述樣本進行製片。由於膠體金顆粒子在普通光學顯微鏡下可見，當利用膠體金與抗上皮細胞粘附分子的抗體製備的免疫金去標記上皮細胞粘附分子時，通過直接觀察就可以確定上皮細胞粘附分子的性質，由於子宮頸癌細胞與其表面的上皮細胞粘附分子的表達水平相關度很高，所以可以通過本發明實施例中的製備方法及裝置簡單、快速和準確地對子宮頸癌細胞進行鑑別診斷。
文檔編號G01N33/531GK103076448SQ201210593378
公開日2013年5月1日 申請日期2012年12月31日 優先權日2012年12月31日
發明者王勇, 羅琪 申請人:廣州鴻琪光學儀器科技有限公司