α－澱粉酶抑制劑在製備預防和治療高脂血症及動脈粥樣硬化藥物中的應用的製作方法

2023-07-06 05:48:01 1

專利名稱：α－澱粉酶抑制劑在製備預防和治療高脂血症及動脈粥樣硬化藥物中的應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及α-澱粉酶抑制劑的應用，特別是涉及從天然植物中提取出的α-澱粉酶抑制劑在製備預防和治療高脂血症及動脈粥樣硬化藥物中的應用。
背景技術：
高脂血症是高膽固醇血症和高甘油三酯血症的統稱。血脂以膽固醇酯(CE)和甘油三酯(TG)為核心，外包膽固醇(CH)和磷脂(PL)構成球形顆粒，再與載脂蛋白(Apo)相結合，形成脂蛋白(LP)溶於血漿進行轉運與代謝。LP可分為乳糜微粒(CM)，極低密度脂蛋白(VLDL)，中間密度脂蛋白(IDL)，低密度脂蛋白(LDL)及高密度脂蛋白(HDL)。血脂或LP經常超出正常界限，即總膽固醇(TC)，TG，LDL膽固醇(LDL-C)分別高於240mg/dl，500mg/dl和160mg/dl，或HDL膽固醇低於35mg/dl就稱為高脂血症(劉國卿主編，藥理學，2000，中國醫藥出版社)。
高脂血症易致動脈粥樣硬化(AS)，AS主要累及冠狀動脈，腦動脈和腎動脈，是缺血性心腦血管疾病的病理基礎。高血脂症的主要特點是動脈內膜出現粥樣斑塊，斑塊中沉積著大量脂質，使管腔變得狹窄，加之高血脂症的血液黏度增高，流速減慢，最後形成血栓，堵塞動脈導致冠心病和腦血管疾病。由於其病死率很高，所以該病是現代醫學研究的一個重要課題。有效的調血脂藥不僅可以調節血脂，減少冠心病危險因素，而且可延遲動脈粥樣硬化病變的進展，或使動脈粥樣硬化病逆轉，使冠心病患者的心血管事件(心肌梗死、猝死、需施行冠脈搭橋)的發生率降低(黃震華，中國綜合臨床，1999；15(2)97-99)。
目前臨床上常用的調血脂藥按其結構與作用特點可分為以下幾類(1)膽酸絡合劑為陰離子交換樹脂，包括考來烯胺(消膽胺)和考來替泊(降膽寧)等，可降低血總膽固醇及低密度脂蛋白膽固醇，適用於低密度脂蛋白、膽固醇中度升高患者的一級預防和必須進行藥物治療的年輕成年男性和絕經前婦女，也可與他汀類藥物聯合應用治療嚴重高膽固醇血症。主要的不良反應有噁心、腹脹、便秘或腹瀉，腸梗阻等。(2)HMG-CoA還原酶抑制劑該類藥物包括洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀等。主要作用機制是抑制膽固醇的肝內合成。適用於各種類型的高膽固醇血症，但不宜用於單純甘油三酯血症。(3)煙酸及其同類藥以阿西莫司為代表，這類藥物的作用機制是降低肝內VLDP的合成，降低血漿TG和LDLC濃度，同時具有明顯升高HDLC的作用，是能同時降低心血管病和死亡率的降脂藥物。常見不良反應為皮膚潮紅、搔癢、皮疹、誘發消化性潰瘍等。(4)苯氧酸類最早應用的為氯貝丁酯(安妥明)，雖有一定調血脂作用，但對冠心病防治效果並不理想，且藥物不良反應明顯，甚至增加死亡率。新近出現的尚有苄氯貝特、氯煙貝特、環丙貝特及克利貝特、吡貝特、普拉貝特等，能明顯降低病人血漿TG、VLDL、IDL的含量，而使HDL升高，可降低心肌梗死的發生率和病死率。主要的不良反應有噁心、腹脹、頭痛、皮疹、肌痛、轉氨酶升高等。(5)多不飽和脂肪酸類存在於多種植物油中，但其調血脂作用及抗動粥作用尚不肯定，僅用於輔助治療。(6)粘多糖及多糖類該類藥物中發現最早的藥物之一為肝素，肝素具有調血脂、抗血栓、保護動脈內皮、抑制動脈壁平滑肌細胞增生等作用。但因其抗凝作用強，可導致出血等不良反應及體內半衰期短等，限制了其臨床抗動粥應用。類肝素藥物如藻酸雙酯鈉(PSS)、甘糖酯、硫酸軟骨素A等均具有調血脂作用。該類藥物調血脂作用以降低血甘油三酯為主，其臨床抗動粥作用有待進一步大規模研究。(7)其它調脂藥普羅布考(丙丁酚)可降低血總膽固醇、血甘油三酯，缺點是亦可降低高密度脂蛋白膽固醇。泛硫乙胺具有降低血總膽固醇、血甘油三酯及升高高密度脂蛋白膽固醇作用，已被國內外研究證實(周瑞海，高海青，中國臨床藥理學雜誌，1999；15(1)58-62)。(8)中藥製劑此類藥均屬天然藥物，不良反應小，而且有多種功能(如降脂、抗凝、抗血小板聚集及抗衰老等)，但其降血脂的作用尚需臨床進一步驗證。目前，我國上市此類藥物有血脂康膠囊、脂青膠囊、絞股藍總苷膠囊、金水寶膠囊、地奧脂必妥片、決明降脂茶、活血降脂顆粒、天保寧、心腦健等(金梅，中國醫院藥學雜誌，2000；20(1)37-40)。
高脂血症作為中老年常見病，嚴重危害人類健康，是造成動脈硬化的首要危險因素，進而導致心腦血管疾病發生。據美國心腦血管研究院7年防治研究證實，降脂藥物可減少心腦病死率24％，減少非致死性心臟病發作率19％。由於西藥長時間應用多存在一定副作用，因此，尋找療效明顯、副作用小、病人耐受性好的調脂及抗動脈粥樣硬化的天然藥物，探索高脂血症的治療，具有深遠意義。
α-澱粉酶抑制劑是最近一段時期倍受廣大藥物研究者關注的多肽之一。α-澱粉酶抑制劑是一種純天然生物活性物質，屬於糖水解酶抑制劑的一種，存在於植物種子的胚乳中(呂鳳霞，陸兆新，食品科學，2002；23(3)152-155)，國外稱之為「starch blocker」。飲食中的碳水化合物大多是澱粉，由唾液、胰液中的澱粉酶在短時間內水解成麥芽糖，再以葡萄糖的形成在腸道內吸收。在胃腸道中，經過初步純化的、劑量足夠的α-澱粉酶抑制劑能抑制腸胃道內唾液和胰澱粉酶的活性，阻礙或延緩其對食物中主要的碳水化合物澱粉的消化作用，降低食物中澱粉糖類物質的分解吸收，從而起減低血糖、血脂的作用，抑制血糖濃度的升高，從而有利於配合糖尿病人的飲食治療。對於肥胖患者，可減少糖向脂肪轉化，延緩腸道的排空，增加脂肪消耗以減少體重(P LAYER，V L W GO，EP DIMAGNO，Gut，1989；301279-1284)。因此，能用α-澱粉酶抑制劑來防止和治療肥胖症、脂肪過多症、動脈硬化症、高脂血症及糖尿病等。並且它只能單純抑制澱粉的消化，對於脂肪、蛋白質、酒精、維生素、礦物質並無作用，也就是說澱粉酶抑制劑完全不會破壞人體對於其它營養物質的吸收。
從小麥粉中提取的α-澱粉酶抑制劑比從豆類中提取的α-澱粉酶抑制劑對胰澱粉酶有更強的抑制作用，並且成熟小麥中的α-澱粉酶抑制劑的含量較其它種類植物要高([嚴哲、陳繩亮、毛孫忠.溫州醫學院學報，2002；132(1)57-59]，並且在國內來源廣泛。關於α-澱粉酶抑制劑和α-澱粉酶的作用機理，目前認為，α-澱粉酶抑制劑並不是一種蛋白分解酶，也不是通過與α-澱粉酶競爭澱粉而起到抑制作用，而是直接與α-澱粉酶結合改變它的構象，從而使其失去分解澱粉的能力(JOHN MARSHALL etc，J Biol Chem，1975，250(20)8030～8037)。
南京工業大學製藥與生命科學學院運用雙水相萃取體系從天然植物中提取的α-澱粉酶抑制劑(詳見公開號為CN1597944A，申請號為200410041455.4，名稱為「一種雙水相萃取體系及應用此體系分離純化α-澱粉酶抑制劑的方法」)，與目前臨床上同類藥相比，具有純天然，無毒性，副作用較少，耐受性好，適宜患者長期服用等優點，但該專利沒有公開所提取的α-澱粉酶抑制劑在預防和治療高脂血症及動脈粥樣硬化方面的應用，本發明在此基礎上進行進一步的研究。

發明內容
本發明的目的是提供一種α-澱粉酶抑制劑在製備預防和治療高脂血症及動脈粥樣硬化藥物中的應用。
本發明的理論依據α-澱粉酶抑制劑能有效地抑制胃腸道內唾液及胰澱粉酶的活性，延緩食物中碳水化合物的水解，大量未吸收的碳水化合物到達遠端小腸被消化，這一過程使胃排空時間延長，病人產生飽足感，食慾下降，進食量減少，從而降低食物中澱粉糖類物質的攝取，起到降低血糖、減肥及治療糖尿病的作用。α-澱粉酶抑制劑調節血脂的機制與其抑制澱粉酶活性有關，澱粉糖類物質的攝取減少，可以使脂類在體內的合成減少，並可以使一部分脂類轉化成糖以供機體生理的需要，從而起到降低血脂的作用。
本發明的目的可通過下列措施來實現的α-澱粉酶抑制劑在製備預防和治療高脂血症藥物中的應用。
α-澱粉酶抑制劑在製備預防和治療動脈粥樣硬化藥物中的應用。
所述的α-澱粉酶抑制劑是從小麥、大麥、小米、高梁、穀物、花生、大豆、芋頭根或其它天然植物中分離提取得到的。
α-澱粉酶抑制劑可以與藥學上允許的輔料製成任何一種藥劑學上允許的劑型，其劑型包括但不限於水溶液、凍幹劑、片劑、膠囊劑、顆粒劑、膠丸、栓劑、注射劑或吸入粉劑，其中α-澱粉酶抑制劑的含量從0.001～99.999wt％。
本發明的有益效果研究表明，自由基誘導的脂質過氧化是動脈粥樣硬化的最危險因素。α-澱粉酶抑制劑可降低血清及肝臟MDA含量，升高SOD活性，表明其可通過抑制脂質過氧化物的產生及提高自身抗氧化酶活性，從而發揮抗動脈粥樣硬化作用。此外，α-澱粉酶抑制劑還可改善血液流變學，降低血漿和全血粘度，有效防止血液處於高黏、高凝狀態(詳見本發明提供的α-澱粉酶抑制劑是從天然植物中提取的一種純天然蛋白活性物質，與現有的調脂或抗動脈粥樣硬化的藥物相比，具有安全、無毒，耐受性好，尤其適合長期給藥以預防或治療高脂血症及其引起的動脈粥樣硬化。
具體實施例方式
以下通過實施例對本發明作進一步的闡述。
本發明實施例中採用的α-澱粉酶抑制劑是根據公開號為CN1597944A，申請號為200410041455.4，名稱為「一種雙水相萃取體系及應用此體系分離純化α-澱粉酶抑制劑的方法」的專利申請公開的方法製備得到的。
實施例1α-澱粉酶抑制劑預防高脂血症的作用50隻雄性SD大鼠隨機分成5組，每組10隻。正常對照組以正常飼料餵養；高脂模型組以高脂飼料餵養；α-澱粉酶抑制劑低、中、高劑量組餵養高脂飼料的大鼠同時分別灌胃α-澱粉酶抑制劑25、50、100mg/kg，連續給藥9周。分別於給藥6周及9周後，大鼠禁食12小時，經大鼠眼眶取血，用試劑盒測定TC、TG、HDL-C及LDL-C含量，並根據AI＝(TC-HDL-C)/HDL-C，計算動脈粥樣硬化指數。結果見表1和表2。
表1服用α-澱粉酶抑制劑6周後對血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C和AI濃度的影響(x±s，n＝10)

#P＜0.01；與正常組比較，*p＜0.05，與高脂模型組比較結果顯示服用α-澱粉酶抑制劑6周後，α-澱粉酶抑制劑能降低TC、TG及LDL-C含量，升高HDL-C含量，尤其是高劑量組具有顯著性差異(p＜0.05)。
表2.服用α-澱粉酶抑制劑9周後對血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C和AI濃度的影響(x±s，n＝10)

#P＜0.01；與正常組比較，*p＜0.05，與高脂模型組比較結果顯示服用α-澱粉酶抑制劑9周後，與模型組相比，各給藥組仍能使血清TC、TG、LDL-C含量及AI值降低，並呈一定的劑量相關性，其中中劑量組和高劑量組療效較明顯(p＜0.05)。
以上結果表明α-澱粉酶抑制劑可以明顯抑制TC、TG、LDL-C及AI的升高，抑制HDL-C的降低，對大鼠實驗性高脂血症有預防作用。
實施例2α-澱粉酶抑制劑抗動脈粥樣硬化的作用按實施例1的給藥方法給藥63天後(即末次給藥後)，測定大鼠血清和肝臟中MDA濃度和SOD活性，同時做血液流變學檢查。此外，剪取主動脈弓，HE染色，光鏡觀察動脈粥樣硬化病變情況。結果表明(1)α-澱粉酶抑制劑高劑量組能使大鼠血清及肝臟MDA顯著降低，SOD活性顯著升高(p＜0.05)，表明α-澱粉酶抑制劑有一定的抗氧化能力(結果見表3)。
表3.α-澱粉酶抑制劑對血清和肝臟中MDA濃度和SOD活性的影響(x±s，n＝10)

#P＜0.01；與正常組比較，*p＜0.05，與高脂模型組比較(2)α-澱粉酶抑制劑中、高劑量組均能明顯降低血粘，表明其有良好的改善血液流變作用(結果見表4)。
表4.α-澱粉酶抑制劑對全血和血漿粘度的影響(x±s，n＝10)

#P＜0.01；與正常組比較，*p＜0.05，與高脂模型組比較(3)通過動脈光鏡觀察正常對照組血管壁三層結構明顯，內膜光滑，內皮下無脂質沉積。高脂模型組血管壁三層結構可見，內膜多見增厚，可見泡沫細胞，中膜彈力膜清晰，平滑肌排列紊亂，可見大小不等、形態不規則泡沫細胞，顯示明顯的動脈粥樣硬化特徵。α-澱粉酶抑制劑各組血管壁三層結構清晰，內膜少量增厚，少見泡沫細胞，中、外膜結構少見異常，其中高劑量組病變最輕，表明α-澱粉酶抑制劑可以抑制動脈粥樣硬化的生成。
實施例3α-澱粉酶抑制劑調節血脂的作用將50隻高脂大鼠分為高脂模型組，陽性對照組(月見草油2.5mg/kg)，α-澱粉酶抑制劑低、中、高劑量組(25、50、100mg/kg)。陽性對照組和α-澱粉酶抑制劑低、中、高劑量組每日給藥一次，連續3周。測定血清TC、TG、HDL-C、LDL-C濃度、肝脂(TC、TG)及肝重，計算肝重/體重，結果見表5和表6。
(1)對血清脂質的影響表5.服用α-澱粉酶抑制劑3周後對血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C濃度的影響(x±s，n＝10)

#P＜0.01；與正常組比較，*p＜0.05，與高脂模型組比較由表5可知，高劑量(10mg/kg)α-澱粉酶抑制劑對高脂血症有治療作用，且具與陽性藥有相似的治療效果。
(2)對肝脂及肝重的影響表6α-澱粉酶抑制劑對肝臟中TC和TG濃度的影響(x±s，n＝10)

#P＜0.01；與正常組比較，*p＜0.05，與高脂模型組比較由表6可知陽性藥組和α-澱粉酶抑制劑高劑量組能顯著降低肝重和肝脂含量(p＜0.05)，且陽性藥組和α-澱粉酶抑制劑高劑量組二組間比較無明顯差異。
以上實施例證實無論是預防性還是治療性給藥，α-澱粉酶抑制劑對調節大鼠的血脂都有較好的療效，可作為一種天然的調脂藥物。
實施例4取本發明α-澱粉酶抑制劑10g，按顆粒劑常規工藝加入常規填充劑、崩解劑混合均勻，加入粘合劑制軟材、烘乾、整粒，製成顆粒劑，用以預防和調節高脂血症。
實施例5取本發明α-澱粉酶抑制劑10g，按膠囊劑常規工藝加入常規輔料混合均勻，灌裝膠囊，製成膠囊劑，用以預防和治療動脈粥樣硬化。
實施例6取本發明α-澱粉酶抑制劑10g，按片劑常規工藝加入常規填充劑、崩解劑混合均勻，加入粘合劑制軟材、烘乾、整粒，加入潤滑劑後，壓製成片劑，用以預防和調節高脂血症。
權利要求
1.α-澱粉酶抑制劑在製備預防和治療高脂血症藥物中的應用。
2.α-澱粉酶抑制劑在製備預防和治療動脈粥樣硬化藥物中的應用。
3.根據權利要求1或2所述的應用，其特徵是所述的α-澱粉酶抑制劑是從天然植物中分離提取得到的，這些天然植物有小麥、大麥、小米、高梁、穀物、花生、大豆或芋頭根。
全文摘要
本發明屬於製藥領域，公開了α－澱粉酶抑制劑在製備預防和治療高脂血症及動脈粥樣硬化藥物中的應用。採用本發明製備的含α－澱粉酶抑制劑的藥物可以預防和治療高脂血症，也可以預防和治療動脈粥樣硬化，具有安全、無毒，耐受性好，尤其適合長期給藥。
文檔編號A61K38/55GK1814197SQ200510095570
公開日2006年8月9日 申請日期2005年11月24日 優先權日2005年11月24日
發明者應漢傑, 歐陽平凱, 張琪 申請人:南京工業大學