用於使用人乳寡糖調節細胞介導的免疫的方法

2023-07-15 05:51:41

用於使用人乳寡糖調節細胞介導的免疫的方法【專利摘要】公開了使用包括人乳寡糖的營養組合物增強個體中的細胞介導的免疫的方法。人乳寡糖是唾液酸化的人乳寡糖、巖藻糖基化的人乳寡糖、或兩者的組合。人乳寡糖可以增強T細胞介導的應答和T細胞調節性應答。【專利說明】用於使用人乳寡糖調節細胞介導的免疫的方法[0001]相關申請的交叉引用本申請在此要求2012年3月27日提交的序列號61/616,230的相同標題的臨時專利申請的權益，所述申請以其整體通過引用併入本文。[0002]公開領域本公開涉及人乳寡糖用於調節和增強細胞介導的免疫的用途。更具體地，本公開涉及使用唾液酸化的人乳寡糖、巖藻糖基化的人乳寡糖、或唾液酸化的人乳寡糖和巖藻糖基化的人乳寡糖兩者的組合以調節和增強個體中的細胞介導的免疫的方法。[0003]背景免疫應答是機體中細胞和/或非細胞（體液）組分兩者間對機體的感知損害或威脅作出反應的多面性系列的相互作用。具體而言，細胞介導的免疫主要針對吞噬細胞中存活的微生物和感染非吞噬細胞（即黏膜上皮細胞）的微生物，或展示改變的自身抗原的細胞，諸如癌細胞。細胞介導的免疫在去除病毒感染的細胞中是最有效的，而且還參與抵禦真菌、原生動物、癌症和細胞內細菌。[0004]參與細胞介導的免疫應答的一種免疫細胞類型是胸腺來源的淋巴細胞或T細胞。在細胞介導的免疫的背景下，T細胞通過誘導在其表面上展示外來抗原的表位的機體細胞(諸如病毒感染的細胞，具有細胞內細菌的細胞，和展示腫瘤抗原的癌細胞）的凋亡而提供保護。T細胞還產生影響參與所有類型的免疫應答（細胞介導的或體液，先天或適應性免疫應答）的其它細胞的功能的細胞因子。因此，功能性細胞介導的應答是個體中最佳健康的先決條件。[0005]儘管如上所述是有益的，但不受控制的、不恰當的或失調的免疫應答牽涉於慢性炎性疾病，諸如過敏、易激性腸症候群、自身免疫性疾病等。因此，最佳的健康需要用適當的調節免疫應答平衡的功能性效應免疫應答。[0006]因此，提供供應將增強細胞介導的免疫應答的個別組分的營養組合物將是期望的。如果可以提供細胞介導的免疫應答的增強而不生成過度惡化的免疫應答，諸如不受控制的炎症（其可以具有許多不利結果，並最終超過有益方面），將是進一步有利的。[0007]概述本公開涉及使用人乳寡糖增強個體（包括嬰兒、兒童、成人和老年人）中的細胞介導的免疫的方法。在一些實施方案中，使用的人乳寡糖是唾液酸化的人乳寡糖。在其它實施方案中，人乳寡糖是巖藻糖基化的人乳寡糖。在又其它實施方案中，唾液酸化和巖藻糖基化的人乳寡糖的組合被用來增強個體的細胞介導的免疫。人乳寡糖增強T細胞介導的應答並增強的T細胞調節性應答。[0008]在一些實施方案中，本公開涉及增強有其需要的個體中的細胞介導的免疫的方法。該方法包括向有其需要的個體施用包含足以增強T細胞介導的應答的量的唾液酸化的人乳寡糖的營養組合物。[0009]在其它實施方案中，本公開涉及增強有其需要的個體中的細胞介導的免疫的方法。該方法包括向有其需要的個體施用包含足以增強T細胞調節性應答的量的巖藻糖基化的人乳寡糖的營養組合物。[0010]在其它實施方案中，本公開涉及增強有其需要的個體中的細胞介導的免疫的方法。該方法包括向有其需要的個體施用包含足以增強T細胞介導的應答的量的唾液酸化的人乳寡糖和足以增強T細胞調節性應答的量的巖藻糖基化的人乳寡糖的營養組合物。[0011]在其它實施方案中，本公開涉及增強有其需要的個體中的T細胞介導的應答的方法。該方法包括向有其需要的個體施用包含足以增強T細胞介導的應答的量的唾液酸化的人乳寡糖的營養組合物。[0012]在其它實施方案中，本公開涉及增強有其需要的個體中的T細胞調節性應答的方法。該方法包括向有其需要的個體施用包含足以增強T細胞調節性應答的量的巖藻糖基化的人乳寡糖的營養組合物。[0013]已經發現，人乳寡糖影響細胞介導的免疫，並且不是所有人乳寡糖都以相同方式影響細胞介導的免疫。具體地，已經發現，唾液酸化的人乳寡糖以不同於巖藻糖基化的人乳寡糖的方式影響T細胞免疫應答；兩者都以積極的方式影響。唾液酸化的人乳寡糖增強T細胞介導的應答，而巖藻糖基化的人乳寡糖增強T細胞調節性應答。因此，唾液酸化的人乳寡糖促進T-細胞介導的抗病毒、抗細菌、抗真菌、抗原生動物和抗癌應答，而巖藻糖基化的人乳寡糖誘導防止或抑制慢性炎性疾病的調節性應答。[0014]此外，已經出乎意料地發現，唾液酸化的人乳寡糖和巖藻糖基化的人乳寡糖的組合表現出增加的T細胞介導的功能和增加的調節兩者的益處，使得唾液酸化的人乳寡糖和巖藻糖基化的人乳寡糖的功能性不互相排斥。因此，已經發現，唾液酸化和巖藻糖基化的人乳寡糖可以組合使用，以通過防止或抑制感染性疾病和癌症而增強平衡的免疫應答，而不誘導慢性炎性狀況。此外，通過改變當組合使用時唾液酸化和巖藻糖基化的人乳寡糖的比率，現在可能在不誘導總體免疫抑制的情況下抑制慢性炎性狀況，或在不誘導炎症的情況下增強受抑制的免疫狀況。因為如本文所述的人乳寡糖的使用不是抗原（像疫苗，例如）特異性的，所以它們可以產生平衡的細胞介導的免疫的總體增強。[0015]附圖簡述被併入本說明書中並構成本說明書的一部分的附圖連同上面給出的一般說明，說明實施方案，並且，下面給出的實施方案的詳述，用於解釋本公開的原理。[0016]圖1是描述如實施例11中分析的在個別HMOs和HMO混合物存在的情況下PBMC的PHA刺激的應答的圖。[0017]圖2是描述如實施例11中分析的在個別HMOs和HMO混合物存在的情況下PBMC的增殖應答的圖。[0018]圖3是描述如實施例12中分析的補充和不補充2'FL的小鼠的腸繫膜淋巴結中T調節性細胞的百分比的圖。[0019]詳述本公開涉及用於提供個體中的細胞介導的免疫的總體增強的方法。不像利用一種或多種特定營養組分或合成藥物通過增強的T細胞介導的應答或增強的T細胞調節性應答來增強個體中的細胞介導的免疫的許多其它常規方法，本公開的方法通過同時增強T細胞介導的應答和增強T細胞調節性應答兩者而提供細胞介導的免疫的增強。這使個體具有增強的免疫學益處，而沒有不想要的炎症的增加的風險。[0020]在本公開的方法中，通過在營養組合物中使用人乳寡糖的組合來獲得這些雙重益處。因為已經出乎意料地發現，所述雙重益處不是相互排斥的，並且可以在單一營養組合物中提供，所以本公開的方法是特別有益的。在一些實施方案中，所述營養組合物包括第一唾液酸化的人乳寡糖和第二巖藻糖基化的人乳寡糖。根據對個體的期望的結果，兩種人乳寡糖的量和比率可以變化以產生期望的結果。[0021]下文詳細描述營養組合物和方法的這些和其它特點，以及許多任選的變化和增加中的一些。[0022]除非另外規定，如本文中所使用，術語"細胞介導的免疫"和"T細胞介導的免疫"，是指當幼稚或致敏的T細胞直接攻擊外來抗原並分泌引發機體的體液免疫應答的細胞因子時產生的免疫應答。[0023]術語"蒸煮包裝"和"蒸煮滅菌"在本文中可互換使用，且除非另外規定，是指如下常用操作：用營養液填充容器，最通常為金屬罐或其它類似包裝，然後使該填充液體的包裝經受必要的熱滅菌步驟，以形成經滅菌的、蒸煮包裝的營養液產品。[0024]除非另外規定，如本文中所使用，術語"無菌包裝"是指不依靠上述蒸煮包裝步驟來製造包裝產品，其中營養液和包裝在填充之前分別進行滅菌，然後在滅菌或無菌處理條件下組合以形成經滅菌的、無菌包裝的營養液產品。[0025]除非另外規定，如本文中所使用，術語"脂肪"和"油"可互換用於指來源於植物或動物或由植物或動物加工的脂質物質。這些術語也包括合成脂質物質，只要此類合成物質適於口服施用於人。[0026]除非另外規定，如本文中所使用，術語"人乳寡糖"或"ΗΜ0"通常是指人母乳中發現的許多複雜碳水化合物，其可呈酸性或中性形式，以及是指其前體。示例性非限制性人乳寡糖包括3'-唾液酸乳糖、6'-唾液酸乳糖、3'-巖藻糖基乳糖、2'-巖藻糖基乳糖以及乳醯-N-新四糖。示例性人乳寡糖前體包括唾液酸和/或巖藻糖。[0027]除非另外規定，如本文中所使用，術語"儲存穩定（shelfstable)"是指營養產品，其經包裝然後在18_24°C下儲存至少3個月（包括約6個月至約24個月，並且也包括約12個月至約18個月）後保持商業穩定。[0028]如本文中所使用，術語"營養製劑"或"營養組合物"可互換使用且除非另外規定，是指合成配方，包括營養液、營養粉、營養固體、營養半固體、營養半液體、營養補充劑和如本領域中已知的任何其它營養食品。營養粉可重構以形成營養液，其均包含脂肪、蛋白質和碳水化合物中的一種或多種且適於人口服食用。[0029]除非另外規定，如本文中所使用，術語"營養液"是指呈即飲型液體形式、濃縮形式的營養產品，和通過在使用之前重構本文所述的營養粉所製備的營養液。[0030]除非另外規定，如本文中所使用，術語"營養粉"是指呈可流動或可S取形式的營養產品，其可在食用之前用水或另一含水液體重構且包括噴霧乾燥和幹混/幹摻的粉末。[0031]除非另外規定，如本文中所使用，術語"營養半固體"是指性質（諸如剛性）介於固體與液體之間的營養產品。一些半固體實例包括布丁、明膠和生麵團。[0032]除非另外規定，如本文中所使用，術語"營養半液體"是指性質（諸如流動性質）介於液體與固體之間的營養產品。一些半液體實例包括稠奶昔（thickshakes)和液體凝膠。[0033]除非另外規定，如本文中所使用，術語"易患"和"處於風險中"意指對某種狀況或疾病具有極小抗性，包括具有該狀況或疾病的遺傳傾向、具有其家族史和/或具有其症狀。[0034]除非另外規定，如本文中所使用，術語"調節（modulating)"或"調節(modulation)"或"調節（modulate)"是指對所選特徵的定向變動。[0035]產品形式本公開的方法中使用的營養組合物包括唾液酸化的人乳寡糖、巖藻糖基化的人乳寡糖、或唾液酸化和巖藻糖基化的人乳寡糖的組合，並且可以以任何已知的或其它合適的口服產品形式進行配製和施用。任何固體、液體、半固體、半液體或粉末產品形式（包括其組合或變體）適於本文使用，條件是此類形式允許安全和有效地將如本文又定義的成分口服遞送至個體。[0036]本公開的方法中使用的營養組合物被期望地配製成膳食產品形式，其在本文中定義為呈以下產品形式的包含本公開成分的那些實施方案，所述產品形式又含有脂肪、蛋白質和碳水化合物中的至少一種，且優選還含有維生素、礦物質或其組合。[0037]營養組合物可以用足夠種類和量的營養素配製以提供營養的唯一、主要或補充來源，或提供用於患有特定疾病或狀況的個體的或具有如下文所述的目標營養益處的特定營養產品。[0038]可以適合於根據本公開使用的特定產品的一些示例性、非限制性的實例包括早產兒配方、足月兒配方、人乳強化劑、兒童配方、成人營養配方、老年人營養配方、醫療配方、老年營養配方、糖尿病營養配方等等。[0039]營養液營養液包括濃縮和即食型營養液。這些營養液最通常配製成懸浮液或乳狀液，儘管其它液體形式也在本公開的範圍內。[0040]適合使用的營養乳狀液可以是包含蛋白質、脂肪和碳水化合物的含水乳狀液。這些乳狀液通常在約I11C至約25°C下為可流動或可飲用液體且通常呈水包油、油包水或複雜含水乳狀液形式，儘管此類乳狀液最通常呈具有連續水相和不連續油相的水包油乳狀液形式。[0041]營養乳狀液可為且通常為儲存穩定的。營養乳狀液通常含有營養乳狀液的至多95重量％的水，包括約50重量％至95重量％,也包括約60重量％至約90重量％,且也包括約70重量％至約85重量％的水。營養乳狀液可具有各種產品密度，但最通常具有密度大於1.03g/mL，包括大於1.04g/mL，包括大於1.055g/mL，包括約1.06g/ml至約1.12g/mL，且也包括約1.085g/ml至約1.10g/mL。[0042]營養乳狀液可具有適合最終使用者的營養需求的熱量密度，儘管在大多數情況下，乳狀液通常包含至少19kcal/floz(660kcal/升），更通常為約20kcal/floz(675-680kcal/升）至約25kcal/floz(820kcal/升），甚至更通常為約20kcal/floz(675-680kcal/升）至約24kcal/floz(800-810kcal/升）。通常，22-24kcal/floz配方更常用於早產兒或低出生體重嬰兒（lowbirthweightinfants),且20-21kcal/fIoz(675-680至700kcal/升）配方更常用於足月兒。在一些實施方案中，乳狀液的熱量密度可為約50-100kcal/升至約660kcal/升，包括約150kcal/升至約500kcal/升。在一些特定實施方案中，乳狀液的熱量密度可為25、或50、或75、或100kcal/升。[0043]營養乳狀液的pH值可在約3.5至約8的範圍內，但最有利地在約4.5至約7.5的範圍內，包括約5.5至約7.3,包括約6.2至約7.2。[0044]儘管營養乳狀液的食用份量（servingsize)可根據許多變量而變化，但典型食用份量通常為至少ImL，或甚至至少2mL，或甚至至少5mL，或甚至至少10mL，或甚至至少25mL，包括在ImL至約300mL的範圍內，包括約4mL至約250mL，且包括約10mL至約240ml,η[0045]營養固體營養固體可呈任何固體形式，但通常呈可流動或實質上可流動微粒組合物或至少微粒組合物形式。特別適合的營養固體產品形式包括噴霧乾燥、聚結和/或幹摻的粉末組合物。所述組合物可輕易用勺或類似其它裝置S取和測量，且可輕易由預期使用者用適合的含水液體（通常為水）重構，以形成供立即口服或腸道使用的營養組合物。在此情形下，"立即"使用通常意指在約48小時內，最通常在約24小時內，優選在重構後立刻。[0046]營養粉可在使用之前用水重構至適合最終使用者的營養需求的熱量密度，儘管在大多數情況下所述粉末用水重構以形成包含至少19kcal/flοζ(660kcal/升），更通常為約20kcal/floz(675-680kcal/升）至約25kcal/floz(820kcal/升），甚至更通常為約20kcal/flοζ(675-680kcal/升）至約24kcal/flοζ(800-810kcal/升）的組合物。通常，22-24kcal/floz配方更常用於早產兒或低出生體重嬰兒，且20-21kcal/floz(675-680至700kcal/升）配方更常用於足月兒。在一些實施方案中，重構粉末的熱量密度可為約50-100kcal/升至約660kcal/升，包括約150kcal/升至約500kcal/升。在一些特定實施方案中，乳狀液的熱量密度可為25、或50、或75、或100kcal/升。[0047]增強細胞介導的免疫的方法本公開的方法使用唾液酸化的人乳寡糖、巖藻糖基化的人乳寡糖、或其組合以調節和/或增強個體的細胞介導的免疫應答。如所指出，細胞介導的免疫主要針對吞噬細胞中存活的微生物和感染非吞噬細胞（即黏膜上皮細胞）的微生物，或展示改變的自身抗原的細胞，諸如癌細胞。細胞介導的免疫在去除病毒感染的細胞中是最有效的，但還防禦真菌、原生動物、癌症和細胞內細菌。本公開的調節和/或增強細胞介導的免疫的方法對於廣泛範圍的個體是有益的，包括早產兒、嬰兒、兒童個體、青少年、成人和老年人（至少50歲或更大歲齡的成人）。[0048]在本公開的一些實施方案中，通過向個體施用增強個體中的T細胞介導的應答的有效量的唾液酸化的人乳寡糖而增強個體中的細胞介導的免疫。在向個體施用之後，唾液酸化的人乳寡糖促進個體中的T細胞介導的抗病毒、抗細菌、抗真菌、抗原生動物和抗癌應答，以增強個體中的細胞介導的應答。[0049]可以將唾液酸化的人乳寡糖施用於總體健康的個體，或可以施用於需要增強的T細胞介導的應答的個體子集。特別需要增強的T細胞介導的應答的一些個體可以包括易於過敏的嬰兒、兒童、青少年或成人（易患過敏或處於過敏的升高風險中的嬰兒、兒童、青少年或成人），易患自身免疫性疾病的嬰兒、兒童、青少年或成人（易患自身免疫性疾病或處於自身免疫性疾病的升高風險中的嬰兒、兒童、青少年或成人），非母乳餵養的嬰兒，補充有配方或人乳強化劑的母乳餵養的嬰兒，免疫衰老的成人和老年人，絕經期婦女，絕經後的婦女，化療後的患者，免疫系統受損的個體，具有AIDS的個體等。早產兒、嬰兒、兒童、青少年、成人和老年人可能由於家族史、年齡、環境和/或生活方式而易患狀況或疾病或處於狀況或疾病的升高風險中。基於上述情況，因為本公開的一些利用唾液酸化的人乳寡糖的方法實施方案涉及經鑑定的個體的特定子集或亞類（即，在解決本文中指出的一種或多種特定疾病或特定狀況中"需要"幫助的個體的子集或亞類），所以不是所有個體都將落在對於某些疾病或狀況的本文所述的個體的子集或亞類中。[0050]在本公開的其它實施方案中，通過向個體施用增強個體中的T細胞調節性應答的有效量的巖藻糖基化的人乳寡糖而增強個體中的細胞介導的免疫。在向個體施用之後，巖藻糖基化的人乳寡糖誘導防止或抑制慢性疾病或炎症的調節性應答，以增強個體中的T細胞調節性應答。[0051]可以將巖藻糖基化的人乳寡糖施用於總體健康的個體，或可以施用於需要增強的T細胞調節性應答的個體子集。特別需要增強的T細胞調節性應答的一些個體可以包括易於過敏的嬰兒、兒童、青少年或成人（易患過敏或處於過敏的升高風險中的嬰兒、兒童、青少年或成人），易患自身免疫性疾病的嬰兒、兒童、青少年或成人（易患自身免疫性疾病或處於自身免疫性疾病的升高風險中的嬰兒、兒童、青少年或成人），非母乳餵養的嬰兒，補充有配方或人乳強化劑的母乳餵養的嬰兒，老年人，免疫衰老的成人和老年人，絕經期婦女，絕經後的婦女，具有慢性炎性腸病的個體等。早產兒、嬰兒、兒童、青少年、成人和老年人可能由於家族史、年齡、環境和/或生活方式而易患狀況或疾病或處於狀況或疾病的升高風險中。基於上述情況，因為本公開的一些使用巖藻糖基化的人乳寡糖的方法實施方案涉及經鑑定的個體的特定子集或亞類（即，在解決本文中指出的一種或多種特定疾病或特定狀況中"需要"幫助的個體的子集或亞類），所以不是所有個體都將落在對於某些疾病或狀況的本文所述的個體的子集或亞類中。[0052]在本公開的另一個期望的實施方案中，通過向個體施用有效量的增強個體中的T細胞介導的應答的唾液酸化的人乳寡糖和誘導個體中的調節性應答的巖藻糖基化的人乳寡糖的組合而增強個體中的細胞介導的免疫。在向個體施用之後，唾液酸化的人乳寡糖促進個體中的T細胞介導的抗病毒、抗細菌、抗真菌、抗原生動物和抗癌應答，以增強個體中的細胞介導的應答，且巖藻糖基化的人乳寡糖誘導防止或抑制慢性疾病或炎症的調節性應答。出乎意料地，唾液酸化和巖藻糖基化的人乳寡糖的組合表明增加的T細胞介導的應答/功能和增加的調節兩者的益處。因此，已經令人驚訝地發現，唾液酸化和巖藻糖基化的人乳寡糖的功能性不是相互排斥的，且它們可以組合使用，以通過防止或抑制感染性疾病和癌症且不誘導可以降低來自施用人乳寡糖的總體益處的慢性炎症應答或狀況而增強個體中平衡的免疫應答。此外，通過改變施用於個體的營養組合物中唾液酸化和巖藻糖基化的人乳寡糖的量的比率，現在可能在不誘導總體免疫抑制的情況下抑制慢性炎性狀況，或在不誘導不想要的炎症的情況下增強受抑制的免疫狀況。[0053]可以將唾液酸化和巖藻糖基化的人乳寡糖的組合施用於總體健康的個體，或可以施用於需要增強的T細胞介導的應答和T細胞調節性應答的個體子集。特別需要增強的T細胞介導的應答和增強的T細胞調節性應答的一些個體可以包括易於過敏的嬰兒、兒童、青少年或成人（易患過敏或處於過敏的升高風險中的嬰兒、兒童、青少年或成人），易患自身免疫性疾病的嬰兒、兒童、青少年或成人（易患自身免疫性疾病或處於自身免疫性疾病的升高風險中的嬰兒、兒童、青少年或成人），非母乳餵養的嬰兒，補充有配方或人乳強化劑的母乳餵養的嬰兒，老年人，免疫衰老的成人和老年人，絕經期婦女，絕經後的婦女，化療後的患者，免疫系統受損的個體，具有AIDS的個體，具有慢性炎性腸病的個體等。早產兒、嬰兒、兒童、青少年、成人和老年人可能由於家族史、年齡、環境和/或生活方式而易患狀況或疾病或處於狀況或疾病的升高風險中。基於上述情況，因為本公開的一些使用唾液酸化和巖藻糖基化的人乳寡糖的方法實施方案涉及經鑑定的個體的特定子集或亞類（即，在解決本文中指出的一種或多種特定疾病或特定狀況中"需要"幫助的個體的子集或亞類），所以不是所有個體都將落在對於某些疾病或狀況的本文所述的個體的子集或亞類中。[0054]在本公開的一個實例中，早產兒或足月兒配方可以包括唾液酸化和巖藻糖基化的人乳寡糖兩者的組合，以支持平衡的效應免疫應答。在本公開的另一個實例中，早產兒或足月兒配方可以包括相比於唾液酸化的人乳寡糖更高水平的巖藻糖基化的人乳寡糖，以防止或降低過敏性疾病、自身免疫性疾病或慢性炎性疾病。在本公開的另一個實例中，成人營養物可以包括相比於唾液酸化的人乳寡糖更高水平的巖藻糖基化的人乳寡糖，以抑制過敏性疾病、自身免疫性疾病或慢性炎性疾病。在本公開的另一個實例中，成人營養物可以含有相比於巖藻糖基化的人乳寡糖更高水平的唾液酸化的人乳寡糖，並且與癌症治療或針對HIV和AIDS的治療組合。[0055]唾液酸化和巖藻糖基化的人乳寡糖本公開用於調節細胞介導的免疫的方法利用包括唾液酸化的人乳寡糖、巖藻糖基化的人乳寡糖或唾液酸化的人乳寡糖和巖藻糖基化的人乳寡糖的組合的營養組合物。在一些實施方案中，營養組合物包括唾液酸化的人乳寡糖，且基本上無巖藻糖基化的人乳寡糖。在其它實施方案中，營養組合物包括巖藻糖基化的人乳寡糖，且基本上無唾液酸化的人乳寡糖。[0056]營養組合物可以任選地包括如本文中指出的一種或多種額外的人乳寡糖。營養組合物中使用的一種或多種人乳寡糖可從哺乳動物分泌的乳中分離或富集，所述哺乳動物包括但不限於：人、牛、綿羊、豬或山羊物種。人乳寡糖也可經由微生物發酵、酶促方法、化學合成或其組合來產生。[0057]適合用於營養組合物中使用的唾液酸化的人乳寡糖在寡糖骨架中包括至少一個唾液酸殘基。唾液酸化的人乳寡糖還可以包括兩個或更多個唾液酸殘基。用於本公開中使用的唾液酸化的人乳寡糖的特定非限制性實例包括唾液酸寡糖、唾液酸（即，游離唾液酸、脂質結合唾液酸、蛋白質結合唾液酸）、乳醯唾液酸四糖（Iactosialotetraose)、3'-唾液酸-3-巖藻糖基乳糖、二唾液酸單巖藻糖基乳醯-N-新六糖、單巖藻糖基單唾液酸乳醯-N-八糖（唾液酸Lea)、唾液酸乳醯-N-巖藻六糖II、二唾液酸乳醯-N-巖藻五糖II、單巖藻糖基二唾液酸乳醯-N-四糖）、唾液酸巖藻糖基寡糖、2'-唾液酸乳糖、2-唾液酸乳糖胺、3'-唾液酸乳糖、3'-唾液酸乳糖胺、6'-唾液酸乳糖、6'-唾液酸乳糖胺、唾液酸乳醯-N-新四糖c、單唾液酸乳醯-N-六糖、二唾液酸乳醯-N-六糖I、單唾液酸乳醯-N-新六糖I、單唾液酸乳醯-N-新六糖II、二唾液酸乳醯-N-新六糖、二唾液酸乳醯-N-四糖、二唾液酸乳醯-N-六糖II、唾液酸乳醯-N-四糖a、二唾液酸乳醯-N-六糖I、唾液酸乳醯-N-四糖b、唾液酸-乳醯-N-四糖a、唾液酸-乳醯-N-四糖b、唾液酸-乳醯-N-四糖c、唾液酸-巖藻糖基-乳醯-N-四糖I、唾液酸-巖藻糖基-乳醯-N-四糖II、二唾液酸-乳醯-N-四糖及其組合。特別期望的唾液酸化的人乳寡糖包括3'唾液酸乳糖、6'唾液酸乳糖及其組合。[0058]用於本公開中使用的巖藻糖基化的人乳寡糖的特定非限制性實例包括巖藻糖基寡糖，乳醯-N-巖藻五糖I、乳醯-N-巖藻五糖II、2'-巖藻糖基乳糖、3'-巖藻糖基乳糖、乳醯-N-巖藻五糖III、乳醯-N-二巖藻六糖I、乳醯二巖藻四糖、單巖藻糖基乳醯-N-六糖Π、異構巖藻糖基化乳醯-N-六糖（1)、異構巖藻糖基化乳醯-N-六糖（3)、異構巖藻糖基化乳醜-N-六糖（2)、二巖澡糖基-對-乳醜-N-新六糖、二巖澡糖基-對-乳醜-N-六糖、二巖藻糖基乳醯-N-六糖單巖藻糖基乳醯-新八糖、單巖藻糖基乳醯-N-八糖、二巖藻糖基乳醯-N-八糖I、二巖藻糖基乳醯-N-八糖II、二巖藻糖基乳醯-N-新八糖II、二巖藻糖基乳醯-N-新八糖I、乳醯-N-巖藻五糖V、乳醯-N-十糖（decaose)、三巖藻糖基乳醯-N-新八糖、三巖藻糖基乳醯-N-八糖、三巖藻糖基-異-乳醯-N-八糖、乳醯-N-二巖藻-六糖II及其組合。特別期望的巖藻糖基化的人乳寡糖包括2'-巖藻糖基乳糖、3'巖藻糖基乳糖及其組合。[0059]用於本公開的方法中使用的營養組合物中可以包括的人乳寡糖的其它合適的實例包括乳醯-N-六糖、對-乳醯-N-六糖、乳醯-N-新六糖、對-乳醯-N-新六糖、乳醯-N-新八糖、對-乳醯-N-八糖（octanose)、異-乳醯-N-八糖、乳醯-N-八糖及其組合。[0060]唾液酸化和巖藻糖基化的人乳寡糖（和任何其它任選的人乳寡糖）以營養組合物中總的人乳寡糖的至少0.001mg/mL，包括至少0.01mg/mL，包括0.001mg/mL至約20mg/mL，包括約0.01mg/mL至約20mg/mL，包括0.001mg/mL至約10mg/mL，包括約0.01mg/mL至約10mg/mL，包括0.001mg/mL至約5mg/mL，包括約0.01mg/mL至約5mg/mL，包括0.001mg/mL至約Img/mL，包括0.001mg/mL至約0.23mg/mL，包括約0.01mg/mL至約0.23mg/mL的營養組合物中人乳寡糖的總量（每mL組合物中人乳寡糖的mg)存在於營養組合物中。通常，營養組合物中存在的特定唾液酸化的人乳寡糖和/或巖藻糖基化的人乳寡糖的量將取決於特定人乳寡糖或營養組合物中存在的人乳寡糖和其它組分的量，包括任何任選的人乳寡糖的量。[0061]在一個實施方案中，當營養組合物為營養粉時，營養粉中人乳寡糖的總濃度為約0.0005%至約5%，包括約0.01%至約1%(以營養粉的重量計）。[0062]在其他實施方案中，當營養產品為即食型營養液時，即食型營養液中人乳寡糖的總濃度為約〇.0001%至約〇.50%，包括約0.001%至約0.15%，包括約0.01%至約0.10%，且進一步包括約0.01%至約0.03%(以即食型營養液的重量計）。[0063]在其他實施方案中，當營養產品為濃縮營養液時，濃縮營養液中人乳寡糖的總濃度為約0.0002%至約0.60%，包括約0.002%至約0.30%，包括約0.02%至約0.20%，且進一步包括約0.02%至約0.06%(以濃縮營養液的重量計）。[0064]長鏈多不飽和脂肪酸（LCPUFAs)除了上述人乳寡糖以外，營養組合物可任選地包括LCPUFAs。LCPUFAs包括在營養組合物中以提供營養支持，以及減少氧化應激並增強腸道上皮及相關免疫細胞群體的生長和功能發育。[0065]用於營養組合物中的示例性LCPUFAs包括例如ω-3LCPUFAs和ω-6LCPUFAs。特定LCPUFAs包括二十二碳六烯酸（DHA)、二十碳五烯酸（EPA)、二十二碳五烯酸（DPA)、花生四烯酸（ARA)、亞油酸、亞麻酸（α亞麻酸）和γ-亞麻酸，其源自油來源（諸如植物油、海洋浮遊生物、真菌油和魚油）。在一個特定實施方案中，LCPUFAs來源於魚油，諸如鯡魚(menhaden)、鮭魚、魴魚、鱈魚、大比目魚、鮪魚或青魚（herring)油。與HMOs-起用於營養組合物中的特別優選的LCPUFAs包括DHA、ARA、EPA、DPA及其組合。[0066]為了減少營養組合物中高劑量LCPUFAs的潛在副作用，LCPUFAs的含量優選不超過營養組合物中總脂肪含量的約3重量％，包括低於總脂肪含量的2重量％，且包括低於總脂肪含量的1重量％。[0067]LCPUFA可作為游離脂肪酸、以甘油三酯形式、以甘油二酯形式、以甘油單酯形式、以磷脂形式、以酯化形式或作為上述中一種或多種的混合物，優選以甘油三酯形式提供。[0068]如本文所述的營養組合物通常將包含總濃度為約0.01mM至約10mM且包括約0.01mM至約ImM的LCPUFA。或者，營養組合物包含總濃度為約0.001g/L至約Ig/L的LCPUFA。[0069]抗氧化劑另外，營養組合物可任選地包含與人乳寡糖組合的一種或多種抗氧化劑以提供營養支持，以及減少氧化應激。[0070]可包括適於口服施用的任何抗氧化劑以用於本公開的營養組合物中，包括例如維生素A、維生素E、維生素C、視黃醇、生育酚和類胡蘿蔔素（包括例如葉黃素、β_胡蘿蔔素、玉米黃素和番茄紅素及其組合）。[0071]營養組合物可包含葉黃素、番茄紅素、玉米黃素和β-胡蘿蔔素中的至少一種以提供約0.001Pg/mL至約10Pg/mL的類胡蘿蔔素總量。更具體而言，營養組合物包含葉黃素的量為約〇.001Kg/mL至約10Pg/mL，包括約0.001Pg/mL至約5Pg/mL，包括約0.001Mg/mL至約0.0190Pg/mL，包括約0.001Pg/mL至約0.0140Pg/L，且也包括約0.044Pg/mL至約5Pg/mL的葉黃素。通常也優選的是，營養組合物包含約0.001Pg/mL至約10Pg/mL,包括約0.001Mg/mL至約5Pg/mL，約0.001Pg/mL至約0.0130Pg/mL，包括約0.001Pg/mL至約0.0075Pg/mL，且也包括約0.0185Pg/mL至約5Pg/mL番茄紅素。通常也優選的是，營養組合物包含約IM?/mL至約10Pg/mL，包括約IPg/mL至約5Pg/mL，包括約0.001Mg/mL至約0.025Pg/mL，包括約0.001Pg/mL至約0.011Pg/mL，且也包括約0.034Pg/mL至約5Pg/mLβ-胡蘿蔔素。應理解，這些量的β-胡蘿蔔素、葉黃素、玉米黃素和番茄紅素的任何組合可包括在本公開的營養組合物中。其它類胡蘿蔔素可任選包括在本文所述的營養組合物中。本文所述的營養組合物中所包括的類胡蘿蔔素的任何一種或全部可來自天然來源，或經人工合成。[0072]核苷酸除了人乳寡糖以外，本公開的營養組合物可額外任選地包括核苷酸和/或選自核苷、嘌呤鹼基、嘧啶鹼基、核糖和脫氧核糖的核苷酸前體。所述核苷酸可呈單磷酸鹽、二磷酸鹽或三磷酸鹽形式。核苷酸可為核糖核苷酸或脫氧核糖核苷酸。核苷酸可為單體、二聚的或多聚的（包括RNA和DNA)。核苷酸可以作為游離酸或以鹽（優選為單鈉鹽）形式存在於營養組合物中。[0073]適合用於營養組合物中的核苷酸和/或核苷包括以下一種或多種：5'-單磷酸胞苷、5'-單磷酸尿苷、5'-單磷酸腺苷、5'-1-單磷酸鳥苷和/或5'-單磷酸肌苷，更優選5'-單磷酸胞苷、5'-單磷酸尿苷、5'-單磷酸腺苷、5'-單磷酸鳥苷和5'-單磷酸肌苷。[0074]核苷酸以至少5mg/L，包括至少10mg/L，包括約10mg/L至約200mg/L，包括約42mg/L至約102mg/L，且包括至少約72mg/L營養產品的核苷酸總量存在於營養產品中。[0075]大量營養素包括人乳寡糖的營養組合物可配製為包括蛋白質、脂肪和碳水化合物中的至少一種。在許多實施方案中，營養組合物將包括人乳寡糖與蛋白質、碳水化合物和脂肪。[0076]儘管脂肪、蛋白質和碳水化合物的總濃度或量可根據產品類型（即，人乳強化劑、早產兒配方、嬰兒配方、兒童配方、成人配方、醫療配方等）、產品形式（即，營養固體、粉末、即食型液體或濃縮液體）和預期使用者的目標膳食需求而變化，但此類濃度或量最通常落在以下實施範圍之一內，包括如本文所述的任何其它基本脂肪、蛋白質和/或碳水化合物成分。[0077]對於嬰兒和成人配方，碳水化合物濃度最通常在約5重量％至約40重量％的範圍內，包括約7重量％至約30重量％，包括約10重量％至約25重量％;脂肪濃度最通常在約1重量％至約30重量％的範圍內，包括約2重量％至約15重量％，且也包括約3重量％至約10重量％;和蛋白質濃度最通常在約0.5重量％至約30重量％的範圍內，包括約1重量％至約15重量％,且也包括約2重量％至約10重量％。[0078]本文所述的任何液體營養組合物中碳水化合物、脂肪和/或蛋白質的量也可除了如下表中所示作為佔液體營養組合物總卡路裡的百分數外的方式或以替代方式來表徵。用於本公開液體營養組合物的這些大量營養素最通常在下表中所述的任何熱量範圍（實施方案A-F)內配製（在每個數值前置術語"約"）。【權利要求】1.增強有其需要的個體中細胞介導的免疫的方法，所述方法包括向有其需要的個體施用包含足以增強細胞介導的免疫的量的唾液酸化的人乳寡糖或巖藻糖基化的人乳寡糖的營養組合物。2.權利要求1的方法，其中所述有其需要的個體選自易於過敏的嬰兒、兒童、青少年或成人；易患自身免疫性疾病的嬰兒、兒童、青少年或成人；非母乳餵養的嬰兒；補充有配方或人乳強化劑的母乳餵養的嬰兒；免疫衰老的成人和老年人；絕經期婦女；絕經後的婦女；化療患者；免疫系統受損的個體；具有AIDS的個體；及其組合。3.權利要求1或2中任一項的方法，其中所述營養組合物是液體，其包含約0.001mg/mL至約20mg/mL的唾液酸化的人乳寡糖或巖藻糖基化的人乳寡糖，優選約0.001mg/mL至約10mg/mL的唾液酸化的人乳寡糖或巖藻糖基化的人乳寡糖，更優選約0.001mg/mL至約5mg/mL的唾液酸化的人乳寡糖或巖藻糖基化的人乳寡糖。4.前述權利要求中任一項的方法，其中所述營養組合物是粉末，其包含所述粉末的約0.0005重量％至約5重量％的唾液酸化的人乳寡糖或巖藻糖基化的人乳寡糖，優選約0.01重量％至約1重量％的唾液酸化的人乳寡糖或巖藻糖基化的人乳寡糖。5.前述權利要求中任一項的方法，其中所述唾液酸化的人乳寡糖選自3'-唾液酸乳糖、6'-唾液酸乳糖、乳醯唾液酸四糖及其組合。6.前述權利要求中任一項的方法，其中所述營養組合物基本上無巖藻糖基化的人乳寡糖。7.權利要求1-5中任一項的方法，其中所述巖藻糖基化的人乳寡糖選自2'-巖藻糖基乳糖、3'-巖藻糖基乳糖、乳醯-N-巖藻五糖、單巖藻糖基乳醯-N-六糖及其組合。8.權利要求1-5或7中任一項的方法，其中所述營養組合物基本上無唾液酸化的人乳寡糖。9.權利要求1的方法，其中所述營養組合物包含足以增強T細胞介導的應答的量的唾液酸化的人乳寡糖和足以增強T細胞調節性應答的量的巖藻糖基化的人乳寡糖。10.權利要求1_5、7或9中任一項的方法，其中所述營養組合物是液體，其包含約0.001mg/mL至約20mg/mL的唾液酸化和巖藻糖基化的人乳寡糖的每一種，優選約0.001mg/mL至約10mg/mL的唾液酸化和巖藻糖基化的人乳寡糖的每一種，更優選約0.001mg/mL至約5mg/mL的唾液酸化和巖藻糖基化的人乳寡糖的每一種。11.權利要求1-5、7、9或10中任一項的方法，其中所述營養組合物是粉末，其包含所述粉末的約〇.0005重量％至約5重量％的唾液酸化和巖藻糖基化的人乳寡糖的每一種，優選約0.01重量％至約1重量％的唾液酸化和巖藻糖基化的人乳寡糖的每一種。12.權利要求1_5、7或9-11中任一項的方法，其中所述唾液酸化的人乳寡糖選自3'-唾液酸乳糖、6'-唾液酸乳糖、乳醯唾液酸四糖及其組合，且所述巖藻糖基化的人乳寡糖選自2'-巖藻糖基乳糖、3'-巖藻糖基乳糖、乳醯-N-巖藻五糖、單巖藻糖基乳醯-N-六糖及其組合。13.權利要求1-6或9-12中任一項的方法，其中所述營養組合物包含足以增強T細胞介導的應答的量的唾液酸化的人乳寡糖。14.權利要求1-5或7-13中任一項的方法，其中所述營養組合物包含足以增強T細胞調節性應答的量的巖藻糖基化的人乳寡糖。【文檔編號】A61K31/702GK104363962SQ201380016517【公開日】2015年2月18日申請日期:2013年3月11日優先權日:2012年3月27日【發明者】D.L.託馬斯,R.巴克申請人:雅培製藥有限公司