替加氟的硒代卵磷脂類化合物及其合成的製作方法
2023-12-12 00:50:17 1
專利名稱：替加氟的硒代卵磷脂類化合物及其合成的製作方法
技術領域：
一種含替加氟的硒代卵磷脂類化合物及其合成，涉及有機硒和一種核苷類物質，具體是替加氟的硒代磷脂衍生物。
背景提要磷脂具有廣泛的生理活性，大量的磷脂已被合成並證明具有良好的抗癌活性，同時它又是藥物的有效載體，對腫瘤組織具有一定的靶向作用；核苷及其類似物在臨床上廣泛用作抗腫瘤和抗病毒藥物；硒是人體必須微量元素，它具有非常明顯的防癌、抗癌作用，臨床結果表明，有機態硒能極為有效地提高硒的生物利用度及其作為生命必須微量元素的生理功能，且其毒性比無機硒大大降低。其化合物在治療癌症方面發揮了重大的作用，近幾年，將Se引入到藥物分子中或合成新的含Se藥物是一個研究的熱點。但是核苷的硒代卵磷脂類化合物的合成與活性還未見報導。因此，合成這類化合物並研究它們的生物活性，對磷脂類新藥的創製將會具有一定的指導意義。
發明內容
本發明的目的在於合成核苷的硒代卵磷脂類化合物，以期解決核苷類藥物療效低，毒性大等不足。
實現本發明的技術方案是本發明的化合物是一種如通式所示的替加氟的硒卵磷脂類化合物
n＝2，3，6其合成方法為 下面進一詳述本發明合成的替加氟的硒代卵磷脂類化合物的元素分析用YanacoCHN CORDER MT-3型自動元素分析儀測定。元素分析結果及理化數據見表1。
表1.2a～c的31P NMR，元素分析及理化數據Entry n分子式 Rf狀態Yield(％)元素分析 分析值(計算值)碳 氫 氮2a 2C35H65FN3O7PSe 0.25 Syrup56 54.9(54.6) 8.47(8.45) 5.45(5.46)2b 3C36H67FN3O7PSe 0.28 Syrup63 55.3(55.2) 8.67(8.66) 5.37(5.34)2c 6C39H73FN3O7PSe 0.35 Syrup68 56.9(56.7) 8.83(8.85) 5.12(5.09)說明測定比移值Rf所用的流動相是氯仿/甲醇(9∶1)；收率是柱層析後的產率。
用BRUKER AC-P400HE型儀測定31P NMR(85％H3PO4為外標)，和1H NMR(以TMS為內標)，結果見表2。
表2.2a～c核磁共振氫譜及31P NMR如下2a1H NMR(δppm)0.879(t，J＝6.4Hz，3H，C15H30CH3)；1.213～1.298(s，26H(CH2)13)，1.337(t，J＝7.2Hz，9H，N(CH2CH3)3)，1.531～1.548(m，2H，O CH2C15H31)，1.880～1.952(m，1H，1/2 CH2CHN)，2.008～2.049(m，1H，1/2 CH2CHN)，2.175～2.192(m，1H，1/2 CH2CH2OCHN)；2.302～2.410(m，1H，1/2 CH2CH2OCHN)，3.009～3.165(m，6H，N( CH2CH3)3)，3.416～4.387(m，13H)，5.975(N(CH2CH3)3)，7.360～7.383(d，J＝6Hz，1H，CHCF).31P NMR55.782，56.083，56.234，56.507ppm.
2b1H NMR(δppm)0.879(t，J＝6.4Hz，3H，C15H30CH3)；1.215～1.299(s，28H(CH2)13，OCH2CH2CH2N)；1.339(t，J＝7.2Hz，9H，N(CH2CH3)3)，1.533～1.552(m，2H，O CH2C15H31)，1.883～1.955(m，1H，1/2 CH2CHN)，2.010～2.051(m，1H，1/2 CH2CHN)，2.179～2.195(m，1H，1/2 CH2CH2OCHN)；2.305～2.413(m，1H，1/2 CH2CH2OCHN)，3.011～3.167(m，6H，N( CH2CH3)3)，3.419～4.391(m，13H)，5.975(N(CH2CH3)3)，7.363～7.386(d，J＝6Hz，1H，CHCF).31P NMR55.653，55.956，56.013，56.327ppm.
2c1H NMR(δppm)0.879(t，J＝6.4Hz，3H，C15H30CH3)；1.215～1.332(s，36H(CH2)13，OCH2( CH2)4CH2N)；1.342(t，J＝7.2Hz，9H，N(CH2CH3)3)，1.536～1.559(m，2H，O CH2C15H31)，1.887～1.965(m，1H，1/2 CH2CHN)，2.013～2.058(m，1H，1/2 CH2CHN)，2.183～2.225(m，1H，1/2 CH2CH2OCHN)；2.317～2.469(m，1H，1/2 CH2CH2OCHN)，3.015～3.178(m，6H，N( CH2CH3)3)，3.422～4.395(m，13H)，5.978(N(CH2CH3)3)，7.363～7.386(d，J＝6Hz，1H，CHCF).31P NMR55.332，55.635，55.938，56.257ppm.
我們研究了化合物(2a～c)對人體對膀胱癌細胞T-24抑制作用的體外試驗，本試驗選用體外連續培養的膀胱癌細胞株。細胞培養於含10％胎牛血清的DMEM高糖培養基，37℃、5％CO2條件下；細胞倍增時間為24～30h.以替加氟作為參照。其結果見表3。
表3化合物2a～c對膀胱癌細胞T-24抑制作用(半數置死量IC50，μg/ml)Entry Tegafur2a 2b 2cT-24 1277.03.512從表3可知，化合物2a～c對膀胱癌細胞T-24生長抑制效果遠優於原藥替加氟，說明硒的引入，增強了抗癌活性。
合成路線設計方案開環是有機反應中的一類重要反應。在合成天然產物及其衍生物方面有巨大應用，卵磷脂的合成是通過1.3.2-二氧磷雜環戊烷的開環，我們設計替加氟的硒代卵磷脂類化合物的合成通過三乙胺對替加氟的環甘油硒代磷脂綴合物的親核開環來實現。
化合物(1a～c)與三乙胺發生開環反應在室溫下即能進行，得目標分子(2a～c)。
硒代卵磷脂類化合物是一類結構新型的化合物。其光譜性質未見文獻報導，通過與其相應的硫代卵磷脂類化合物的光譜性質的比較，我們可以確定其結構。
首先通過比較反應物與產物的1H NMR，可以確定已經引入了(CH3CH2)3N基團。在產物分子中，它除了具有與原料基本相同的1H NMR值外，在δ1.33處有一個三重峰，在δ3.16處有一個四重峰。這些都表明(CH3CH2)3N基團的存在。
反應物環甘油硒磷脂綴合物的31P NMR值為δ87ppm左右，而生成物的31P NMR值為δ55ppm左右，表明反應物已經發生了轉化。產物為下列結構 前面，我們報導了替加氟的硫代卵磷脂類化合物的31P NMR值為δ62ppm左右。硒代卵磷脂類化合物與硫代卵磷脂類化合物的31P NMR值之差異，可歸結於硒的電負性比硫小的原故。
其反應機理可以認為是親核試劑進攻甘油骨架上位阻較小碳原子的側面而形成目標產物。
化合物(2a～c)與(1a～c)相比，性質有較大區別反應物不溶於水，僅能溶於有機溶劑中。室溫下，產物在水中有一定的溶解度，與乙醇、二氯甲烷、苯等有機溶劑則混溶，具有親水親脂性，這是由於目標分子中有強親水性基氧負離子.對於提高藥物生物利用率具有重要的意義。
具體實施例方式1、替加氟的硒代卵磷脂類化合物的合成將334mg(0.5mmol)硒代甘油磷脂替加氟綴合物1a溶於5ml乾燥苯中，加入2ml三乙胺。室溫下避光攪拌6小時。(攪拌速度為800轉/分鐘)，旋轉去掉溶劑苯和剩餘的三乙胺，將殘餘物進行快速色譜分離(CH3Cl-CH3OH＝9∶1)。按表1中比移值收集。
2、抗腫瘤活性測定首先以DMSO為溶劑將樣品和對照物分別稀釋為10，0.1mg.ml-1，再分別取10ul加入到完全培養基1ml中，使之在實驗中的終濃度為100ug.ml-1、1mg.ml-1。同時以不加樣品的DMSO為實驗陽性對照。
以完全培養基為溶劑，分別配製成100，10和1ug.ml-1，作為實驗使用。同時以完全培養基作為陰性對照。
細胞鋪板與觀察計數取正常生長處於對數期的T-24和BGC-823細胞，用0.02％EDTA消化液將細胞從種子瓶中消化下來，製備成細胞濃度為1.5×104個/ml的細胞懸液，將細胞懸液接種於24孔板，1ml/孔，正常培養24h後，吸取培養基，換入各組含有測試樣品的培養基繼續培養。
給藥後，並分別於給藥後24、48、72、96、120h觀察細胞生長狀態，同時消化各組仍處於生長狀態的活細胞，進行細胞計數。得出樣品對癌細胞的抑制作用結果。在不同時段，在倒置顯微鏡下，可清晰的觀察到對照組細胞生長正常。細胞排列緊密，呈對數生長狀態。細胞分裂指數相為惡性腫瘤細胞分裂指數狀態。以DMSO為溶劑組由於DMSO對細胞有一定的毒副作用，因此在實驗中設置空白組。在給藥組，細胞分裂指數相下降。隨藥物農度的增加，其下降趨勢增大，細胞死亡增加，存活細胞出現縮圓、胞質濃縮、精糙、顆粒性內涵物增加。
權利要求
1.一種含替加氟的硒代卵磷脂類化合物，其特徵在於該化合物的通式為
2.一種如權利要求1所述的替加氟的硒代卵磷脂類化合物合成方法，其特徵在於環甘油硒代磷脂綴合物與三乙胺在室溫下發生親核開環反應得到含替加氟的硒代卵磷脂類化合物，反應式為
全文摘要
含替加氟的硒代卵磷脂類化合物及其合成涉及有機硒和一種核苷類物質。該化合物的結構式如通式所示如上式化合物的合成，是將替加氟的環甘油硒代磷脂綴合物與三乙胺在室溫下發生親核開環反應。經抗腫瘤活性測定，本發明化合物對人體膀胱癌抑制效果比原藥替加氟好。
文檔編號C07H19/10GK1634960SQ20041004692
公開日2005年7月6日 申請日期2004年11月12日 優先權日2004年11月12日
發明者許新華, 陳雄, 周冰 申請人:湖南大學