增加傷口癒合的方法
2023-06-14 10:29:26 1
專利名稱：增加傷口癒合的方法
技術領域：
本發明涉及增強傷口癒合的方法。
背景技術：
固定是傷口癒合的基本治療原則，是治療所有種類的損傷所共同的。模型、託基和縫線使肌肉張力對癒合組織的負面作用最小化。由於張力是決定疤痕形成程度的主要因素之一，該原則在皮膚損傷中也是正確的。精心計劃的選擇性切開皮膚，常常可獲得最好的美學效果。
外科醫生正尋求減少過度疤痕形成(尤其在面部)的技術和方法。已採用了許多方法來克服肌肉張力對傷口癒合過程的負面影響，包括各種縫合技術，類固醇注射、底切傷口邊緣，和將切口置於一條與鬆弛的皮膚張力線(RSTL)平行的線條中。
在一個多世紀前首次描述的皮膚張力線病因學，這幾年來受到了反駁。然而，總體上仍同意皮膚張力線根據它們的相對位置，影響切口的癒合。證據是RSTL的形成是隨時間而變的動態過程。對牛胚胎和人胚胎皮膚的研究提示，RSTL不是遺傳決定的，而代表了外力和/或內力引起的皮膚紋理的改變。Lorenz,H.P.等，發育，114(1):253-259,(1992)。皮膚紋理中的這種改變賦予皮膚某種機械特徵，它甚至在被切開後仍保留。因此認為肌肉張力是RSTL形成的主要因素。
皮膚張力增加對傷口癒合有不利作用，導致肥厚的疤痕或傷口開裂。見例如，Sherris,D.A.等，北美耳鼻喉科臨床，28(5):1957-1968,1995。受傷組織的連續移位導致癒合過程中反覆的微創傷誘導炎症反應延長和代謝活動增加。結果，膠原和葡糖胺聚糖的胞外沉積增強，並導致肥厚的疤痕。肥厚疤痕的發生率在肌肉運動增加的某些解剖區域更高。McCarthy,J.G.，整形外科，1990，卷1,philadelphia,WB Saunders,44頁。
發明簡述本發明部分基於一種新的處理創傷和醫原性傷口的治療方法，包括消除作用於傷口的張力。新療法包括注射一種化學去神經劑，來麻醉能對這些傷口施加張力的肌肉，提供了更好的傷口癒合和最小的疤痕產生。另外，在所選程序中早固定也使外科醫生可使用更細的縫線，從而進一步改善了整容結果。
在一方面，本發明的特徵是一種治療帶有傷口(如面部傷口)的病人的方法。該方法包括局部施用一定量的化學去神經劑，從而使傷口增強癒合。化學去神經劑可以是例如肉毒毒素、石房蛤毒素、破傷風毒素或河豚毒素，並通常通過注射施用。肉毒毒素可以是肉毒毒素A、B、C、D、E、F或G，特別是肉毒毒素A或B。該方法還包括施用一定量的局部麻醉劑和/或局部血管收縮劑，來有效增強傷口癒合。可在注射化學去神經劑之前或同時注射局部麻醉劑，如利多卡因、丁哌卡因或甲哌卡因，或局部血管收縮劑。
本發明的另一個特徵是一種含有化學去神經劑、局部麻醉劑和局部血管收縮劑的組合物。
在另一個方面，本發明的特徵是一種製品，包括包裝材料和一定量的化學去神經劑。該包裝材料包括表明該化學去神經劑用於治療具有傷口的病人的標籤。施用該化學去神經劑增強傷口癒合。化學去神經劑可以是肉毒毒素，如肉毒毒素A。製品還可包括局部麻醉劑或血管收縮劑。
除非另外指出，本文所用的所有技術和科學術語具有本發明所屬領域中一般技術人員通常理解的相同含義。雖然可用類似或等價於本文描述的方法和材料來實施本發明，下文描述了合適的方法和材料。本文提到的所有出版物、專利申請、專利和其它參考文獻在此完整引入以供參考。如果衝突，以本說明書為準。另外，材料、方法和實施例僅用來說明，而不是用來限制。
本發明的其它特徵和優點根據下面的詳述和權利要求將變得清楚。
附圖簡述
圖1表明三個觀察者的配對的實驗性和對照疤痕評分的平均差異。
發明詳述如本文所述，疤痕的整容外觀在傷口癒合過程中受其下方肌肉活性的影響。麻痺下方的肌肉活動提高了癒合速率，並產生更好的整容效果。不受特別機制所束縛，認為局部誘導皮膚缺陷下方的肌肉麻痺可使作用於傷口邊緣的反覆性張力最小化，對傷疤形成產生卓越的整容效果。
因此，本發明提供了一種治療病人傷口的方法，其包括對病人局部施用一定量的化學去神經劑以有效增強傷口癒合。本文所用的「化學去神經劑」指能中斷跨越神經肌肉接點神經衝動傳遞，阻斷神經遞質的釋放，或改變神經元電壓閥門鈉通道，充分降低傷口部位內或附近肌肉張力的任何藥劑。本文所用的「傷口」指皮膚、肌腱或骨骼傷口，而且可包括炎症損傷或其它受肌肉張力或活動不良影響的損傷。皮膚傷口包括例如，面部裂傷，如由於創傷(如車禍)引起的，或醫原性，如手術引起的切口。特別是，手術引起的切口包括疤痕修正切除手術。同樣的，皮膚傷口包括選擇性切口和非選擇性切口。皮膚傷口可相對良好或不良的。本文所用的「良好傷口」指和RSTL相對平行的切口或裂傷，而「不良傷口」指和RSTL相對垂直的切口。良好和不良傷口都可從本文描述的方法獲益。肌腱傷口包括例如斷裂或損傷的肌腱和肌腱炎。
骨骼傷口包括良性或不良骨折。「良性骨折」指肌肉牽拉不易引起一塊或多塊骨折碎片移位的骨折，而「不良骨折」指由於肌肉牽拉，一塊或多塊碎片易於移位的骨折。如果最大程度降低作用於骨折的肌肉拉力，將有利於骨折的治療。如此，治療的侵害性降低、耗時較少和/或花費較少。例如，對於肘部骨折，肱三頭肌會使骨碎片移位。手術修復的另一方法包括採用經皮架線縫法將骨骼固定在原位，並用化學去神經劑麻痺，來鬆弛三頭肌。用架線縫合和化學去神經劑可減少或避免手術和/或相伴隨的全身麻醉。
本文描述的方法通過使肌肉張力和活動性對傷口的不良作用最小化，和通過減少疤痕發生改進整容外觀，增強了傷口癒合。另外，可減少癒合過程中的炎症。
去神經劑去神經劑的非限制性例子包括肉毒毒素、石房蛤毒素、破傷風毒素和河豚毒素。合適的肉毒毒素包括例如，肉毒毒素A、B、C(C1和C2)、D、E、F、或G。肉毒毒素A、B、和F特別有用。肉毒毒素A是一種強效藥物，當局部注射時產生暫時性肌肉麻痺。已用肉毒毒素A治療和強制肌肉收縮有關的各種各樣的疾病。已證明它對治療病灶性張力障礙，如眼瞼痙攣、非張力障礙性疾病，如半面痙攣，共軛眼球運動疾病，如斜視和眼球震顫，強直性疾病，如多發性硬化和大腦性麻痺，和局部肌肉痙攣的疾病是有效的。另外，已用肉毒毒素A治療和衰老有關的上面部皺紋。肉毒毒素A使用安全有效，並相對無痛，具有很少的輕微和短暫的副作用。注射24-72小時後作用開始發生，並持續2-6個月。肉毒毒素A可從Allergan,Inc.(Irvine,CA,Botox)和Speywood Pharmaceuticals(England,Dysport)商品購得。
局部固定所需的肉毒毒素A劑量通常不超過1單位毒素/千克體重，而且是安全的。靈長類研究已表明劑量在33單位/千克體重以下觀察不到全身性作用。見例如，Scott和Suzuki,Mov.Disord.,1996,11(2),181-184和Truong,D.D.等，Mov.Disord,1988,3:333-335。
也已對張力障礙病人使用肉毒毒素B和F。Greene,P.E.等，Mov.Disord.,1997,12(5):772-775。肉毒毒素B可購自Elan Corporation(Dublin,Ireland,Neurobloc)。
還可通過用標準技術從肉毒梭菌(Clostridium botulinum)的菌株純化毒素，獲得肉毒毒素。例如，可在Hall菌株中用含有酪蛋白消化液、酵母抽提物和葡萄糖的培養基中生產肉毒毒素A。裂解培養物後，毒素被釋放入培養基中，被蛋白酶激活，然後用酸沉澱。進一步純化可包括用磷酸鈉緩衝液抽提，乙醇沉澱，和用硫酸銨結晶。見例如，Schantz,E.J.和Johnson,E.A.，微生物學綜述，1992,56(1):80-99。
其它去神經劑，如石房蛤毒素、破傷風毒素和河豚毒素也是合適的。然而，石房蛤毒素誘導的麻痺持續時間不象肉毒毒素誘導的一樣長。因此，可能需要重複注射該類毒素。可用已知程序純化石房蛤毒素。見例如，Schantz,E.J.等，美國化學協會雜誌，1975,97:1238-1239。當局部注射時，破傷風毒素可降低膽鹼能周圍神經的乙醯膽鹼釋放。Dreyer,F.，破傷風毒素的外圍作用，p.179-202，於「肉毒神經毒素和破傷風毒素」。Academic Press,Inc.,San Diego,L.L.Simpson(編)。破傷風毒素還可進入中樞神經系統，在其中它將導致失控的肌肉痙攣。當在本文所述方法中使用破傷風毒素時，必須小心確保局部反應。Matsuda,M.等，Biochem.Biophys Res Commu.,1982,104:799-805；和Habermann,E.等，Naunvn-Schmiedeberg’s Arch.Pharmacol.,1980,311:33-40。可用標準程序純化破傷風毒素，見例如，Robinson,J.P.，酶學方法，1988,165:85-90。河豚毒素可阻斷神經和肌肉組織興奮膜鈉通道，並可用常規技術純化。見例如，Yotsu,M.等，Toxicon,1987,25:225-228。
通常通過皮下(SQ)、肌肉內(IM)、肌肉周圍注射或透皮滴注(如空氣槍或皮膚貼片)局部施用化學去神經劑。當SQ注射化學去神經劑時，藥劑通過灌注達到肌肉。對於選擇性切口，可在製造切口前，同時或已造成切口後施用化學去神經劑。
局部麻醉劑和局部血管收縮劑的施用治療方法還包括施用局部麻醉劑或局部血管收縮劑或二者。這些藥劑可在注射化學去神經劑前或同時施用。局部麻醉劑阻斷神經傳導，並導致局部區域感覺和運動麻痺。局部麻醉劑具有迅速的作用，因此幾乎立刻減弱了肌肉張力，並減弱了和注射有關的疼痛。局部麻醉劑實現的肌肉麻痺程度有助於預測隨後在同一注射位點注射化學去神經劑可實現的麻痺程度。因此，防止了可能的局部副作用，如化學去神經劑擴散到臨近的肌肉群。局部麻醉劑的非限制性例子包括利多卡因、丁哌卡因、氯普魯卡因、衣鐵卡因或甲哌卡因，而且是可商品購得的。另外，可在該方法中施用其它醯胺類局部麻醉劑。醫生不難確定局部麻醉劑的合適用量。例如，可注射約0.5％-2％濃度的約1-5毫升利多卡因。當切口是手術引起時，如在疤痕修正切除手術中，施用局部麻醉劑特別有用。
局部血管收縮劑的施用導致注射組織血液灌注減少。因此，給予局部血管收縮劑可幫助防止或控制化學去神經劑的擴散，並最大程度減少可能的副作用，如由於注射入額肌和/或皺眉肌引起的眉下垂或眼閉合不全。局部血管收縮劑的非限制性例子包括腎上腺素和苯福林，而且是可商業購得的。醫生不難確定局部血管收縮劑的合適用量。例如，對於局部血管收縮作用，通常使用5毫升1∶100,000或1∶200,000的腎上腺素。
可製備含有化學去神經劑和局部麻醉劑，和/或局部血管收縮劑的組合物，應用於需要同時引入化學去神經劑和一種或多種其它成分時。可將凍幹成分和另一種成分的溶液重建來製備這些組合物。例如，可將凍幹的肉毒毒素重建在含有局部麻醉劑和局部血管收縮劑的溶液中，或在含有局部麻醉劑或局部血管收縮劑的溶液中。含有利多卡因和腎上腺素的組合物是可從例如Astra商品購得的。通常，利多卡因以0.5-2％存在，而腎上腺素以1∶100,000到1∶200,000存在。
本發明將用下列實施例進一步描述，這些實施例不限制權利要求描述的本發明的範圍。
實施例1-在猴中通過注射化學去神經劑增強傷口癒合為了接近的模擬肌肉活動對人面部皮膚傷口的作用，必須使用合適的動物模型。由於廣泛的皮膚鬆弛和不恰當的模擬肌肉系統，已建立的模型如大鼠、豬和馬對於該目的是不理想的。選擇獼猴(Cynomolgus macaque)(Macaca fascicularis)作為模型，因為它們的顱面解剖和皮膚解剖和人的相似。
Institutional Committee of Animal Care and Use at Mayo Clinic批准了該研究，並按照該協會的指導籠養、照顧、並餵食動物。沒有動物被處死。用20mg/kg的開他敏IM(Ketaset,Fort Dodge),0.5mg/kg甲苯噻嗪IM(Rompun,Bayer),和1％異氟烷(Isoflurane,Abbott)組成的麻醉劑進行所有程序。
選擇前額作為猴的切開部位，因為額肌、降眉間肌和皺眉肌經常對前額皮膚施加張力，而麻痺這些肌肉不導致功能上的缺陷。為了使局部變量最小化，計劃實驗性和對照切口放在同一動物的對稱解剖位置上。在前額以中線對稱的兩側設計三個Y-形切口，它們的主軸垂直於RSTL。
用模板來確定切口的位置和輪廓，以確保最大精確度。一個有經驗的面部整形外科醫生，在不了解實驗條件的情況下進行了所有切開。用標準手術技術，切開皮膚和皮下組織，並將額肌保存在缺陷基底部。隨後，隨機確定前額的一側為實驗側，向毗鄰該側各切口的模擬肌由直視下注射7單位肉毒毒素A(Botox,Allegan)的0.9％鹽水(25單位/毫升)，每半邊前額肉毒毒素A總劑量為21單位。以相同方式將等體積的0.9％鹽水注入對照側。用一根6-0 Chromic Gut(Chromic Gut,Ethicon)埋藏縫線和多根5-0黑色單絲Nylon(Ethilon,Ethicon)淺表縫線閉合所有傷口。從手術後的第三日起，在所有6個動物中觀察到肉毒毒素A處理的一側出現顯著麻痺。眼外肌運動和眼瞼閉合不受影響。
請三位未參加手術過程的有經驗的面部外科醫生作為不知情的觀察者，來評估手術後1、4和12周的疤痕整容外觀。注意每次估時深度鎮靜動物，從而使評估人不能認出前額的麻痺側。
首先，要求評估人用10cm外觀模擬標尺對各疤痕進行評分。每個評估人單獨對36個前額疤痕(每隻動物3個實驗性疤痕和3個對照疤痕)進行了評估。以該標尺，疤痕評分為1-10,0是最差的，而10是最好的。在手術後1和4周，盲法評價沒有一個揭示實驗傷口或對照傷口哪個有顯著更好的整容外觀。術後12周三個評估人的平均評分在18對對稱疤痕的16對中實驗側達到了較高的評分(圖1)。圖1中的直方條代表三位觀察者配對的實驗性和對照疤痕評分的均值差異。1號評估人對實驗性疤痕的平均評分是9.4，對對照疤痕是8.1；2號評估人對實驗性疤痕的平均評分是8.0，對照疤痕是7.3；而3號評估人對實驗性疤痕的平均評分是7.9，對照疤痕是7.3。三個評估人對實驗側的平均評分是8.4(SD1.0)，對照側是7.6(SD0.9)。幹涉作用的統計學評估是基於採用三個評估人的平均評級，並擬合於方差模型的二因素(幹涉，位點)重複測量分析，考慮了在同一動物上獲得的測量值的關聯。根據該分析，實驗側的疤痕評分顯著比對照側的疤痕評分高(p＜0.01)。
第二，要求評估人檢查每隻動物前額兩側上的3個疤痕群(術後12周)，並給每個疤痕評分，與其對稱的對應部位相比，分為較好，相等或較差。從大部分候選值中產生一個一致評分。在6隻動物中的6隻中，實驗側被評估為比對照側好。根據雙尾、單樣品二項試驗，該結果是統計學上顯著的(p＜0.031)(表1)。
表1疤痕評估
+=實驗側評估較好-=實驗側評估較差？=兩側評估相等術後12周用4mm打孔機切取疤痕的代表性區域。將活體檢查標本包埋在福馬林中，切成25微米厚的切片，並用蘇木精和Eosin染色進行評估。將疤痕分類成沒有炎症症象的成熟疤痕，或正進行重塑的疤痕。
實施例2-肉毒毒素A注射增強人傷口癒合一位男性病人(26歲，82公斤)進行了疤痕修復切除手術。疤痕位於前額中線左側約2釐米，眼眶最上沿約3釐米顱骨處。它的方向是水平的，提供了一個相對於皺紋線良好的位置。該疤痕是7歲時受傷的結果，當時在三級治療中心閉合。
將病人置於仰臥位，局部注射5毫升0.5％的利多卡因和1∶200,000腎上腺素。切除疤痕，並用單極燒灼器控制出血。將肉毒毒素A(10單位)直視下注射入傷口扇形區的額肌中。用6-0 Vicryl線深縫和6-0 Nylon線淺表縫合傷口。將另7.5單位肉毒毒素A注入雙側的降眉間肌和皺眉肌，因為皺眉將導致傷口扭曲。
手術後大約24小時，病人的被注射肌肉發生了顯著的麻痺，並在切口周圍直徑4釐米的區域內喪失了皺起前額皮膚的能力。傷口在術後早期癒合良好。傷口邊緣的運動和張力明顯減少。病人的前額傷口癒合，無併發症。和術前疤痕比較，術後12個月產生的疤痕的整容外觀優異，優於起初的疤痕。
實施例3-單獨注射化學去神經劑或聯合局部麻醉劑病人的疤痕評估告知了健康志願者這種治療的潛在危險和副作用。根據Mayo InstitutionalReview Board細則獲得了正式的書面同意。在加入研究前，評估了額肌、降眉間肌和皺眉肌作用的對稱性，研究對象僅包括那些無功能性不對稱的。將這些人的前額以中線分成兩個對稱區域，一個作為對照側，另一個作為實驗側。作為對照側的前額是隨機決定的，並注射了溶於0.9％鹽水的肉毒毒素A(Botox)。實驗側注射了以1％或2％利多卡因和1∶100,000腎上腺素重建的肉毒毒素A。這些藥劑和肉毒毒素A的組合是通過將100單位凍幹的肉毒毒素A重建於5毫升1％或2％利多卡因和1∶100,000腎上腺素溶液(1％或2％的Xylocaine(利多卡因)和腎上腺素1∶100,000,Astra)實現的。這導致常規臨床用途中的這些物質常用的劑量(每毫升1％或2％的利多卡因和1∶100,000腎上腺素中20單位肉毒毒素)。
為了確保注射的對稱性和相等性，用模板預先確定了注射部位。在各位置注射預定量和體積的毒素。注射後，要求試驗對象評價前額兩側分別經皮注射導致的疼痛程度。這在注射10分鐘後用標準化的問卷法完成。注射一周後，比較局部麻醉劑加Botox實現的肌肉麻醉模式和Botox A單獨導致的麻醉模式。系列觀察比較了以血管收縮劑和麻醉劑重建的Botox A，和以0.9％鹽水重建的Botox A的作用強度和持續時間，直到面部肌肉功能恢復。注射5-15分鐘後、注射一周後，和其後每月對試驗對象進行拍照，嘗試作最大程度的前額肌肉收縮。
提供了這些注射的兩個特別例子。用溶於1毫升1％利多卡因和1∶100,000腎上腺素的20單位Botox注射白人女性的前額右側，並以同樣精確的形式用重建於0.9％鹽水的20單位Botox注射前額左側。用相同方式注射第二個白人女性，除了使用2％利多卡因外。將0.125毫升8份注射入前額各側，用模板確定注射位點。各人前額右側額肌、降眉間肌和降眉肌(depressor supercilii muscle)立即發生麻痺。局部麻醉藥(利多卡因1％或2％)即刻導致的立即肌肉麻痺的模式和程度，可預測Botox一周後所導致的延遲麻痺的模式和程度。Botox-誘導的肌肉麻痺作用以對稱形式消退，表明Botox誘導的肌肉麻痺的持續不受加入的利多卡因或腎上腺素影響。
其它實施例需理解雖然本發明已結合本文的詳述進行了描述，但上面的描述目的是要說明，而不是限制本發明權利要求所限定的範圍。本發明的其它方面、優點和變化都在權利要求的範圍內。
權利要求
1．一種治療具有傷口的病人的方法，其特徵在於，所述方法包括局部施用一定量的化學去神經劑，從而增強所述傷口的癒合。
2．如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述化學去神經劑是肉毒毒素。
3．如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述肉毒毒素選自肉毒毒素A、B、C、D、E、F和G。
4．如權利要求3所述的方法，其特徵在於，所述肉毒毒素是肉毒毒素A。
5．如權利要求3所述的方法，其特徵在於，所述肉毒毒素是肉毒毒素B。
6．如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述化學去神經劑是石房蛤毒素。
7．如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述化學去神經劑是破傷風毒素。
8．如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述化學去神經劑是河豚毒素。
9．如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述施藥步驟是通過注射。
10．如權利要求9所述的方法，其特徵在於，皮下注射所述化學去神經劑。
11．如權利要求9所述的方法，其特徵在於，肌肉內注射所述化學去神經劑。
12．如權利要求9所述的方法，其特徵在於，經皮滴注所述化學去神經劑。
13．如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述方法還包括施用局部麻醉劑。
14．如權利要求13所述的方法，其特徵在於，所述局部麻醉劑是利多卡因。
15．如權利要求13所述的方法，其特徵在於，所述局部麻醉劑是丁哌卡因。
16．如權利要求13所述的方法，其特徵在於，所述局部麻醉劑是甲哌卡因。
17．如權利要求13所述的方法，其特徵在於，所述局部麻醉劑在施用所述化學去神經劑前施用。
18．如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述方法還包括施用局部血管收縮劑。
19．如權利要求18所述的方法，其特徵在於，所述局部血管收縮劑是腎上腺素。
20．如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述方法還包括施用局部麻醉劑和血管收縮劑。
21．如權利要求20所述的方法，其特徵在於，在所述化學去神經劑前施用所述局部麻醉劑和所述血管收縮劑。
22．如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述傷口是面部傷口。
23．一種組合物，其特徵在於，該組合物含有化學去神經劑、局部麻醉劑和血管收縮劑。
24．如權利要求23所述的組合物，其特徵在於，所述化學去神經劑是肉毒毒素。
25．一種含有包裝材料和一定量的化學去神經劑的製品，其特徵在於，所述包裝材料含有一標籤，該標籤表明所述化學去神經劑是用於治療具有傷口的病人，而且局部施用所述量的所述化學去神經劑以增強所述傷口的癒合。
26．如權利要求25所述的製品，其特徵在於，所述化學去神經劑是肉毒毒素。
27．如權利要求25所述的製品，其特徵在於，所述肉毒毒素是肉毒毒素A。
28．如權利要求25所述的製品，其特徵在於，所述肉毒毒素是肉毒毒素B。
29．如權利要求25所述的製品，其特徵在於，所述製品還含有局部麻醉劑。
30．如權利要求25所述的製品，其特徵在於，所述製品還含有局部血管收縮劑。
31．如權利要求25所述的製品，其特徵在於，所述製品還含有局部麻醉劑和局部血管收縮劑。
全文摘要
描述了治療帶有傷口的病人的方法。該方法包括施用一定量的化學去神經劑,從而增強傷口的癒合。通過詳述三個觀察者的配對的實驗性和對照疤痕評分的平均差異說明了該方法。
文檔編號A61K38/16GK1324246SQ99812622
公開日2001年11月28日 申請日期1999年10月15日 優先權日1998年10月27日
發明者H·G·加斯納 申請人:梅約醫學教育與研究基金會