一種人絨毛膜促性腺激素和泌尿系統感染聯檢試劑盒的製作方法
2023-06-12 13:13:46 1
一種人絨毛膜促性腺激素和泌尿系統感染聯檢試劑盒的製作方法
【專利摘要】本實用新型涉及一種人絨毛膜促性腺激素和泌尿系統感染聯檢試劑盒，屬於檢測【技術領域】。包括HCG免疫層析檢測試紙條，以及尿蛋白檢測試紙，白細胞檢測試紙，便潛血檢測試紙和亞硝酸鹽檢測試紙中的一種或多種，較佳地，HCG免疫層析檢測試紙條的結合墊和層析膜上分別包被相應的免疫標記抗體和檢測抗體，HCG免疫層析檢測試紙條與尿蛋白檢測試紙，白細胞檢測試紙，便潛血檢測試紙和亞硝酸鹽檢測試紙中的一種或多種並列設置或置於底板的上下表面，本實用新型可以通過自我取樣，一次取樣即可同時檢測HCG和泌尿系統感染，簡單方便，適合大規模推廣應用。
【專利說明】一種人絨毛膜促性腺激素和泌尿系統感染聯檢試劑盒
【技術領域】
[0001]本實用新型涉及一種人絨毛膜促性腺激素和泌尿系統感染聯檢試劑盒，特別涉及一種人絨毛膜促性腺激素(HCG)和泌尿系統感染聯檢試劑盒，屬於檢測【技術領域】。
【背景技術】
[0002]人絨毛膜促性腺激素(HCG)，是由胎盆合體滋養細胞分泌的一種具有促進性腺發育的糖蛋白激素，存在於孕婦的血液、尿液、初乳、羊水和胎兒體內，在妊娠早期HCG分泌量增高極快，至妊娠8?10周時血清濃度達到高峰，在妊娠初期，規則HCG在血清中比例最高，其含量在血、尿中基本平行，HCG相關分子的測定在臨床上有廣泛應用，包括:用於早期妊娠的診斷；提示異常妊娠的出現(如先兆流產、唐氏症候群等)；診斷和監測妊娠滋養層疾病(葡萄胎、絨癌等)等。
[0003]泌尿系統感染為臨床常見感染性疾病.女性發病率明顯高於男性，妊娠期間極易出現泌尿系統感染。
[0004]臨床上廣泛應用膠體金法對HCG進行快速檢測，泌尿系統感染檢測也有多種檢測方法，包括尿液分析，細菌學檢查等，但尚未發現HCG和泌尿系統感染聯檢的產品。如將HCG和泌尿系統感染進行聯檢，通過自我取樣，一次即可以同時進行檢測，簡單方便。
【發明內容】
[0005]本實用新型的目的在於克服上述不足之處，通過一次取樣，對HCG和泌尿系統感染進行檢測，提供一種人絨毛膜促性腺激素HCG和泌尿系統感染聯檢試劑盒，應用簡便，適於大規模推廣應用。
[0006]按照本實用新型提供的技術方案，一種人絨毛膜促性腺激素和泌尿系統感染聯檢試劑盒，包括第一底板，在第一底板的一面上設置有層析膜，層析膜的前端設置不透明保護膜，不透明保護膜的前端設置箭頭；箭頭的前端設置結合墊；層析膜上還依次設置有檢測線和質控線，層析膜後端設置有吸水墊。
[0007]還包括感染指標檢測區。
[0008]所述感染指標檢測區附著於第二底板上或複合於第一底板的任意一個表面上。
[0009]在第一底板的一面上設置有層析膜，層析膜的前端設置結合墊，結合墊的前方還設置樣品墊；層析膜上還依次設置有檢測線和質控線，層析膜後端設置有吸水墊；第一底板的下表面上還設置有感染指標檢測區。
[0010]所述感染指標檢測區設置有尿蛋白檢測試紙，白細胞檢測試紙，便潛血檢測試紙和亞硝酸鹽檢測試紙中的一種或幾種。
[0011]所述尿蛋白檢測試紙，白細胞檢測試紙，便潛血檢測試紙和亞硝酸鹽檢測試紙的第一底板或第二底板的材料為PET、PVC、PE、PP或PS中的一種，長為10_300mm，寬2_30mm，厚度為0.1-1.5_。
[0012]所述尿蛋白檢測試紙，白細胞檢測試紙，便潛血檢測試紙和亞硝酸鹽檢測試紙的基礎材料為纖維素濾紙，玻璃纖維濾紙，層析紙，聚酯膜或尼龍膜；所述試紙的形狀為正方形，長方形，圓形，橢圓形，三角形，菱形或梯形；大小為長1-30 mm;寬1-30 mm;厚度0.01-5臟；多種試紙之間的間距為1_30 mm。
[0013]所述結合墊上包被有人絨毛膜促性腺激素HCG檢測抗體。
[0014]所述層析膜6上包被有HCG檢測抗體。
[0015]所述HCG免疫層析檢測試紙條的結合墊上具有HCG免疫標記抗體，所述HCG免疫層析檢測試紙條的層析膜上包被有HCG檢測抗體；所述尿蛋白檢測試紙，白細胞檢測試紙，便潛血檢測試紙和亞硝酸鹽檢測試紙是由尿蛋白檢測試劑，白細胞檢測試劑，便潛血檢測試劑和亞硝酸鹽檢測試劑固化在纖維素濾紙，玻璃纖維濾紙，層析紙，聚酯膜或尼龍膜，採用水平覆蓋或內置嵌入方法置於底板的上下表面，底板由透明或不透明塑料材料構成。
[0016]本實用新型的有益效果:本實用新型可以通過自我取樣，一次取樣即可同時檢測HCG和泌尿系統感染，簡單方便，適合大規模推廣應用。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0017]圖1是實施例1第一底板10結構示意圖。
[0018]圖2是實施例1第二底板11結構示意圖。
[0019]圖3是實施例2結構示意圖。
[0020]圖4是實施例3結構示意圖。
[0021]圖5是實施例4結構示意圖。
[0022]圖6是實施例1感染指標檢測區結構示意圖。
[0023]圖7是實施例2感染指標檢測區結構示意圖。
[0024]圖8是實施例3感染指標檢測區結構示意圖。
[0025]圖9是實施例4感染指標檢測區結構示意圖。
【具體實施方式】
[0026]實施例1
[0027]如圖1、2、5所示，一種人絨毛膜促性腺激素和泌尿系統感染聯檢試劑盒，包括第一底板10，在第一底板10的一面上設置有層析膜6，層析膜6的前端設置不透明保護膜3，不透明保護膜3的前端設置箭頭2 ;箭頭2的前端設置結合墊I ;層析膜6上還依次設置有檢測線4和質控線5，層析膜6後端設置有吸水墊7。
[0028]還包括感染指標檢測區8。所述感染指標檢測區8附著於第一底板10的上表面。
[0029]所述感染指標檢測區8設置有尿蛋白檢測試紙。所述的HCG免疫層析檢測試紙條，以及泌尿系統感染指標檢測區，包括尿蛋白檢測試紙，以水平覆蓋方式或內置嵌入方式置於底板10的上表面。
[0030]實施例2
[0031]如圖3、7所示，一種人絨毛膜促性腺激素和泌尿系統感染聯檢試劑盒，包括第一底板10，在第一底板10的一面上設置有層析膜6，層析膜6的前端設置不透明保護膜3，不透明保護膜3的前端設置箭頭2 ;箭頭2的前端設置結合墊I ;層析膜6上還依次設置有檢測線4和質控線5，層析膜6後端設置有吸水墊7。[0032]還包括感染指標檢測區8。所述感染指標檢測區8附著於第二底板11上。
[0033]所述感染指標檢測區8設置有白細胞檢測試紙，便潛血檢測試紙。以水平覆蓋方式或內置嵌入方式置於底板的上表面，且與HCG免疫層析檢測試紙條並列設置於卡槽上。
[0034]實施例3
[0035]如圖4、8所示，一種人絨毛膜促性腺激素和泌尿系統感染聯檢試劑盒，包括第一底板10，在第一底板10的一面上設置有層析膜6，層析膜6的前端設置結合墊1，結合墊I的前方還設置樣品墊9 ;層析膜6上還依次設置有檢測線4和質控線5，層析膜6後端設置有吸水墊7 ;第一底板10的下表面上還設置有感染指標檢測區8。
[0036]所述感染指標檢測區8附著於第一底板10的下表面上。
[0037]所述感染指標檢測區8設置有白細胞檢測試紙，便潛血檢測試紙和亞硝酸鹽檢測試紙，以水平覆蓋方式或內置嵌入方式置於底板的表面，且與HCG免疫層析檢測試紙分別置於底板的上下表面。
[0038]實施例4
[0039]如圖5、9所示，一種人絨毛膜促性腺激素和泌尿系統感染聯檢試劑盒，包括第一底板10，在第一底板10的一面上設置有層析膜6，層析膜6的前端設置不透明保護膜3，不透明保護膜3的前端設置箭頭2 ;箭頭2的前端設置結合墊I ;層析膜6上還依次設置有檢測線4和質控線5，層析膜6後端設置有吸水墊7。所述感染指標檢測區8附著於第二底板11上。
[0040]在實施例1-4中，所述HCG免疫標記抗體是抗人HCG膠體金免疫標記抗體,所述HCG檢測抗體是抗人HCG檢測抗體，其中的抗人HCG膠體金免疫標記抗體和抗人HCG檢測抗體結合人HCG的不同部位；
[0041]所述感染指標檢測區8設置有尿蛋白檢測試紙，白細胞檢測試紙，便潛血檢測試紙和亞硝酸鹽檢測試紙，以水平覆蓋方式或內置嵌入方式置於底板的上表面，且與HCG免疫層析檢測試紙置於可拆卸的卡槽上。
[0042]所述尿蛋白檢測試紙為將空白濾紙在溴酚藍，表面活性劑和檸檬酸緩衝液組成的溶液中浸泡後乾燥處理，所訴溴酚藍在溶液中的濃度為100-2000mg/L，表面活性劑在溶液中的質量濃度為0.1_10%，檸檬酸緩衝 液的pH值為2.8-4.6，摩爾濃度為0.01-1M ；
[0043]所述白細胞檢測試紙為將空白濾紙在5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸鹽和蔗糖組成的溶液中浸泡後乾燥處理，所述5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸鹽在溶液中的濃度為40-1000 mg/L，所述蔗糖在溶液中的濃度為200-10000 mg/L ；
[0044]所述便潛血檢測試紙為將空白濾紙在過氧化氫或過氧化異丙苯，四甲基聯苯胺或氨基比林，表面活性劑和PBS緩衝液組成的溶液中浸泡後乾燥處理，所述過氧化氫或過氧化異丙苯的質量分數為1_10%，四甲基聯苯胺(TMB)或氨基比林的濃度為0.1-40 g/L，PBS緩衝液的PH值為7.0，摩爾濃度為0.01-1 M ；
[0045]所述亞硝酸鹽檢測試紙為將空白濾紙在對氨基苯磺酸，α -萘胺和酒石酸組成的溶液中浸泡後乾燥處理，所述對氨基苯磺酸的濃度為50(T4000 mg/L, α-萘胺的濃度為500^4000 mg/L，酒石酸的質量分數為0.05~10%。
[0046]檢測時如果HCG免疫層析檢測試紙條C區出現條帶，則T區出現條帶即表示樣品為陽性，未出現條帶則表示陰性；如果C區未出現條帶，則表示試紙條失效。尿蛋白檢測試紙顏色發生變化表示不正常，顏色不發生變化表示正常。白細胞檢測試紙不顯色表示正常，出現藍色或綠色表示不正常。便潛血檢測試紙不顯色表示正常，出現藍色(或藍紫色)表示不正常。亞硝酸鹽檢測試紙不顯色表示正常，出現粉紅色或紅色表示不正常。
[0047]製備實施例1
[0048]用於HCG檢測的抗體膠體金標記方法為加入400 μ L，3%的碳酸鉀調節50 mL膠體金溶液的pH ;在攪拌條件下逐漸加入0.25 mL, 6.6 mg/mL待標記抗HCG抗體於上述膠體金溶液中，混勻，室溫靜置30 min ;將12.5 mL封閉液緩慢加入上述膠體金溶液中，混勻，室溫靜置30min ；8000g 4°C離心lh，去上清，留疏鬆沉澱；各管沉澱用25mL洗滌液溶解，6000g4°C離心lh，去上清，留疏鬆沉澱；各管沉澱用1.2 mL洗滌液溶解，轉入1.5mL離心管中，4500g 4°C離心lh，去上清；所有沉澱用I mL膠體金抗體重懸液重懸，4°C保存。
[0049]用於HCG檢測的抗體膠體金墊的噴點方法如下:用膠體金抗體重懸液將上述製備的膠體金抗體結合物稀釋4倍；開啟點膜儀的電源，設定噴點程序，噴點量為8 μ L/cm ；1號管道為噴點通道；將I號管道置於膠體金抗體重懸溶液中，選擇初始化程序，初始化6個循環；將金標墊按固定位置平放在點膜儀上，按控制面板上「G0」鍵開始噴點，點完後取下，檢查噴點好的金標墊，噴點的膠體金抗體條帶均勻、連續和貫通整個金標墊的直線為合格噴點品，兩條直線中出現斷點為不合格噴點品；每放一片金標墊，按一次控制面板上的「G0」鍵為噴點一次(一片)；噴點結束，將噴點的金標墊置於室溫中自然乾燥I個小時，膜上應看不到噴點痕跡。
[0050]用於HCG檢測的抗體層析膜製備方法如下:取鼠抗人HCG抗體500 μ g，加到5mL刻度離心管中,抗體稀釋液至lmL，容器標記T標誌。取羊抗鼠IgG抗體25 μ L，加到5 mL刻度離心管中，抗體稀釋液至I mL，容器標記C標誌；開啟點膜儀的電源，設定噴點程序，噴點量為I μ L/cm, I號管道為檢測帶噴點通道，2號管道為對照帶噴點通道；將I號管道置於檢測帶溶液中，將2號管道置於對照帶溶液中，選擇初始化程序，初始化6個循環；將層析膜按固定位置平放在點膜儀上，按控制面板上「G0」鍵開始噴點，點完後取下，檢查噴點好的層析膜，檢測帶和對照帶為兩條均勻、連續和貫通整個層析膜的直線為合格噴點品，兩條直線中出現斷點為不合格噴點品；每放一片層析膜，按一次控制面板上的「G0」鍵為噴點一次(一片)；噴點結束，將噴點的層析膜置於室溫中自然乾燥I個小時，膜上應看不到噴點痕跡。
[0051]將底板上較寬部分的保護紙除去，沿上面保護紙的上邊緣，將劃好線的層析膜，以C線在上方的方式貼到底板板上；將膠體金墊貼在T線下方，與NC膜少許接觸；將樣品墊貼在膠體金墊下方，與膠體金墊少許接觸；接著除去上方保護紙，將吸水墊貼在NC膜的上方，與NC膜少許接觸；將保護紙及指示帶紙逐一貼在組裝好的試紙條外面，組裝成大卡。接通切割機電源，設定切膜程序，設定切割寬度為4 mm;將大卡合格品平放入切割機平臺軌道中，正面朝上，按操作面板上「G0」鍵，開始切割；每放一片大卡合格品，按操作面板上「G0」鍵一次，直至切割完所有大卡合格品。
[0052]所述尿蛋白檢測試紙為將空白濾紙在溴酚藍，表面活性劑和檸檬酸緩衝液組成的溶液中浸泡後乾燥處理，所訴溴酚藍在溶液中的濃度為500 mg/L，表面活性劑在溶液中的質量濃度為10 %，檸檬酸緩衝液的pH值為4.6，摩爾濃度為0.01 M，烘乾後使用切割機切成邊長為4 mm的正方形；
[0053]所述白細胞檢測試紙為將空白濾紙在5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸鹽和蔗糖組成的溶液中浸泡後乾燥處理，所述5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸鹽在溶液中的濃度為800 mg/L，所述蔗糖在溶液中的濃度為10000 mg/L，烘乾後使用切割機切成邊長為4 mm的正方形；
[0054]所述便潛血檢測試紙為將空白濾紙在過氧化氫或過氧化異丙苯，四甲基聯苯胺或氨基比林，表面活性劑和PBS緩衝液組成的溶液中浸泡後乾燥處理，所述過氧化氫或過氧化異丙苯的質量分數為10%，四甲基聯苯胺(TMB)或氨基比林的濃度為40 g/L, PBS緩衝液的PH值為7.0，摩爾濃度為0.01 M，烘乾後使用切割機切成邊長為4 mm的正方形；
[0055]所述亞硝酸鹽檢測試紙為將空白濾紙在對氨基苯磺酸，α -萘胺和酒石酸組成的溶液中浸泡後乾燥處理，所述對氨基苯磺酸的濃度為4000 mg/L, α -萘胺的濃度為2000mg/L,酒石酸的質量分數為0.05%,烘乾後使用切割機切成邊長為4 mm的正方形。
[0056]分別將尿蛋白檢測試紙，白細胞檢測試紙，便潛血檢測試紙和亞硝酸鹽檢測試紙中的一種或多種以水平覆蓋或內置嵌入方式粘貼固定於透明的PVC片上，各試紙間距為5_，切成邊長為4 mm的試紙條即成。
[0057]製備實施例2
[0058]用於HCG檢測的抗體膠體金標記方法為加入400 μ L，3%的碳酸鉀調節50 ml膠體金溶液的pH ;在攪拌條件下逐漸加入0.25 mL,6.6 mg/mL待標記抗HCG抗體於上述膠體金溶液中，混勻，室溫靜置30 min ;將12.5 mL封閉液緩慢加入上述膠體金溶液中，混勻，室溫靜置30min ；8000g 4°C離心Ih，去上清，留疏鬆沉澱；各管沉澱用25ml洗滌液溶解，6000g 4°C離心lh，去上清，留疏鬆沉澱；各管沉澱用1.2mL洗滌液溶解，轉入1.5mL離心管中，4500g 4°C離心lh，去上清；所有沉澱用I mL膠體金抗體重懸液重懸，4°C保存。
[0059]用於HCG檢測的抗體膠體金墊的噴點方法如下:用膠體金抗體重懸液將上述製備的膠體金抗體結合物稀釋4倍；開啟點膜儀的電源，設定噴點程序，噴點量為8 μ L /cm ;1號管道為噴點通道；將I號管道置於膠體金抗體重懸溶液中，選擇初始化程序，初始化6個循環；將金標墊按固定位置平放在點膜儀上，按控制面板上「G0」鍵開始噴點，點完後取下，檢查噴點好的金標墊，噴點的膠體金抗體條帶均勻、連續和貫通整個金標墊的直線為合格噴點品，兩條直線中出現斷點為不合格噴點品；每放一片金標墊，按一次控制面板上的「G0」鍵為噴點一次(一片)；噴點結束，將噴點的金標墊置於室溫中自然乾燥I個小時，膜上應看不到噴點痕跡。
[0060]用於HCG檢測的抗體層析膜製備方法如下:取鼠抗人HCG抗體500 μ g，加到5mL刻度離心管中，抗體稀釋液至lmL，容器標記T標誌。取羊抗鼠IgG抗體25 μ L,加到5mL刻度離心管中，抗體稀釋液至ImL容器標記C標誌；開啟點膜儀的電源，設定噴點程序，噴點量為I μ L /cm, I號管道為檢測帶噴點通道，2號管道為對照帶噴點通道；將I號管道置於檢測帶溶液中，將2號管道置於對照帶溶液中，選擇初始化程序，初始化6個循環；將層析膜按固定位置平放在點膜儀上，按控制面板上「G0」鍵開始噴點，點完後取下，檢查噴點好的層析膜，檢測帶和對照帶為兩條均勻、連續和貫通整個層析膜的直線為合格噴點品，兩條直線中出現斷點為不合格噴點品；每放一片層析膜，按一次控制面板上的「G0」鍵為噴點一次(一片)；噴點結束，將噴點的層析膜置於室溫中自然乾燥I個小時，膜上應看不到噴點痕跡。
[0061]將底板上較寬部分的保護紙除去，沿上面保護紙的上邊緣，將劃好線的層析膜，以C線在上方的方式貼到底板板上；將膠體金墊貼在T線下方，與NC膜少許接觸；將樣品墊貼在膠體金墊下方，與膠體金墊少許接觸；接著除去上方保護紙，將吸水墊貼在NC膜的上方，與NC膜少許接觸；將保護紙及指示帶紙逐一貼在組裝好的試紙條外面，組裝成大卡。接通切割機電源，設定切膜程序，設定切割寬度為4 mm ;將大卡合格品平放入切割機平臺軌道中，正面朝上，按操作面板上「GO」鍵，開始切割；每放一片大卡合格品，按操作面板上「GO」鍵一次，直至切割完所有大卡合格品。
[0062]所述尿蛋白檢測試紙為將空白濾紙在溴酚藍，表面活性劑和檸檬酸緩衝液組成的溶液中浸泡後乾燥處理，所訴溴酚藍在溶液中的濃度為500 mg/L，表面活性劑在溶液中的濃度為10 %，檸檬酸緩衝液的pH值為4.6，摩爾濃度為0.01 M，烘乾後使用切割機切成邊長為4 mm的正方形；
[0063]所述白細胞檢測試紙為將空白濾紙在5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸鹽和蔗糖組成的溶液中浸泡後乾燥處理，所述5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸鹽在溶液中的濃度為800 mg/L，所述蔗糖在溶液中的濃度為10000 mg/L，烘乾後使用切割機切成邊長為4 mm的正方形；
[0064]所述便潛血檢測試紙為將空白濾紙在過氧化氫或過氧化異丙苯，四甲基聯苯胺或氨基比林，表面活性劑和PBS緩衝液組成的溶液中浸泡後乾燥處理，所述過氧化氫或過氧化異丙苯的質量分數為10%，四甲基聯苯胺(TMB)或氨基比林的濃度為40 g/L, PBS緩衝液的PH值為7.0，摩爾濃度為0.01 M，烘乾後使用切割機切成邊長為4 mm的正方形；
[0065]所述亞硝酸鹽檢測試紙為將空白濾紙在對氨基苯磺酸，α -萘胺和酒石酸組成的溶液中浸泡後乾燥處理，所述對氨基苯磺酸的濃度為4000 mg/L, α -萘胺的濃度為2000mg/L,酒石酸的質量分數為0.05%,烘乾後使用切割機切成邊長為4 mm的正方形。
[0066]分別將尿蛋白檢測試紙，白細胞檢測試紙，便潛血檢測試紙和亞硝酸鹽檢測試紙中的一種或多種以水平覆蓋或內置嵌入方式粘貼固定於透明的PVC片上，各試紙間距為5mm,切成邊長為4mm的試紙條即成，且與HCG免疫層析檢測試紙條並列置於卡槽上。
[0067]製備實施例3
[0068]用於HCG檢測的抗體膠體金標記方法為加入400 μ L，3%的碳酸鉀調節50 mL膠體金溶液的pH ;在攪拌條件下逐漸加入0.25mL, 6.6 mg/mL待標記抗HCG抗體於上述膠體金溶液中，混勻，室溫靜置30 min ;將12.5 mL封閉液緩慢加入上述膠體金溶液中，混勻，室溫靜置30min ；8000g 4°C離心lh，去上清，留疏鬆沉澱；各管沉澱用25mL洗滌液溶解，6000g 4°C離心lh，去上清，留疏鬆沉澱；各管沉澱用1.2mL洗滌液溶解，轉入1.5mL離心管中，4500g 4°C離心lh，去上清；所有沉澱用ImL膠體金抗體重懸液重懸，4°C保存。
[0069]用於HCG檢測的抗體膠體金墊的噴點方法如下:用膠體金抗體重懸液將上述製備的膠體金抗體結合物稀釋4倍；開啟點膜儀的電源，設定噴點程序，噴點量為8yL /cm;l號管道為噴點通道；將I號管道置於膠體金抗體重懸溶液中，選擇初始化程序，初始化6個循環；將金標墊按固定位置平放在點膜儀上，按控制面板上「G0」鍵開始噴點，點完後取下，檢查噴點好的金標墊，噴點的膠體金抗體條帶均勻、連續和貫通整個金標墊的直線為合格噴點品，兩條直線中出現斷點為不合格噴點品；每放一片金標墊，按一次控制面板上的「G0」鍵為噴點一次(一片)；噴點結束，將噴點的金標墊置於室溫中自然乾燥I個小時，膜上應看不到噴點痕跡。
[0070]用於HCG檢測的抗體層析膜製備方法如下:取鼠抗人HCG抗體500 μ g，加到5mL刻度離心管中,抗體稀釋液至lmL，容器標記T標誌。取羊抗鼠IgG抗體25yL，加到5mL刻度離心管中，抗體稀釋液至lmL，容器標記C標誌；開啟點膜儀的電源，設定噴點程序，噴點量為I μ L /cm, I號管道為檢測帶噴點通道，2號管道為對照帶噴點通道；將I號管道置於檢測帶溶液中，將2號管道置於對照帶溶液中，選擇初始化程序，初始化6個循環；將層析膜按固定位置平放在點膜儀上，按控制面板上「GO」鍵開始噴點，點完後取下，檢查噴點好的層析膜，檢測帶和對照帶為兩條均勻、連續和貫通整個層析膜的直線為合格噴點品，兩條直線中出現斷點為不合格噴點品；每放一片層析膜，按一次控制面板上的「GO」鍵為噴點一次(一片)；噴點結束，將噴點的層析膜置於室溫中自然乾燥I個小時，膜上應看不到噴點痕跡。
[0071]將底板上較寬部分的保護紙除去，沿上面保護紙的上邊緣，將劃好線的層析膜，以C線在上方的方式貼到底板板上；將膠體金墊貼在T線下方，與NC膜少許接觸；將樣品墊貼在膠體金墊下方，與膠體金墊少許接觸；接著除去上方保護紙，將吸水墊貼在NC膜的上方，與NC膜少許接觸；將保護紙及指示帶紙逐一貼在組裝好的試紙條外面，組裝成大卡。接通切割機電源，設定切膜程序，設定切割寬度為4 mm;將大卡合格品平放入切割機平臺軌道中，正面朝上，按操作面板上「G0」鍵，開始切割；每放一片大卡合格品，按操作面板上「G0」鍵一次，直至切割完所有大卡合格品。
[0072]所述尿蛋白檢測試紙為將空白濾紙在溴酚藍，表面活性劑和檸檬酸緩衝液組成的溶液中浸泡後乾燥處理，所訴溴酚藍在溶液中的濃度為500 mg/L，表面活性劑在溶液中的濃度為10 %，檸檬酸緩衝液的pH值為4.6，摩爾濃度為0.01 M，烘乾後使用切割機切成邊長為4 mm的正方形；
[0073]所述白細胞檢測試紙為將空白濾紙在5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸鹽和蔗糖組成的溶液中浸泡後乾燥處理，所述5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸鹽在溶液中的濃度為800 mg/L，所述蔗糖在溶液中的濃度為10000 mg/L，烘乾後使用切割機切成邊長為4 mm的正方形；
[0074]所述便潛血檢測試紙為將空白濾紙在過氧化氫或過氧化異丙苯，四甲基聯苯胺或氨基比林，表面活性劑和PBS緩衝液組成的溶液中浸泡後乾燥處理，所述過氧化氫或過氧化異丙苯的質量分數為10%，四甲基聯苯胺(TMB)或氨基比林的濃度為40 g/L, PBS緩衝液的PH值為7.0，摩爾濃度為0.01 M，烘乾後使用切割機切成邊長為4 mm的正方形；
[0075]所述亞硝酸鹽檢測試紙為將空白濾紙在對氨基苯磺酸，α -萘胺和酒石酸組成的溶液中浸泡後乾燥處理，所述對氨基苯磺酸的濃度為4000 mg/L, α -萘胺的濃度為2000mg/L,酒石酸的質量分數為0.05%,烘乾後使用切割機切成邊長為4 mm的正方形。
[0076]分別將尿蛋白檢測試紙，白細胞檢測試紙，便潛血檢測試紙和亞硝酸鹽檢測試紙中的一種或多種以水平覆蓋或內置嵌入方式粘貼固定於透明的PVC片上，各試紙間距為5mm,切成邊長為4 mm的試紙條即成，且與HCG免疫層析檢測試紙條分別置於底板的上下表面。
[0077]製備實施例4
[0078]用於HCG檢測的抗體膠體金標記方法為加入400 μ L，3%的碳酸鉀調節50 mL膠體金溶液的pH ;在攪拌條件下逐漸加入0.25 mL, 6.6 mg/mL待標記抗HCG抗體於上述膠體金溶液中，混勻，室溫靜置30 min ;將12.5mL封閉液緩慢加入上述膠體金溶液中，混勻，室溫靜置30min ；8000g 4°C離心Ih，去上清，留疏鬆沉澱；各管沉澱用25mL洗滌液溶解，6000g4°C離心lh，去上清，留疏鬆沉澱；各管沉澱用1.2 mL洗滌液溶解，轉入1.5 mL離心管中，4500g 4°C離心lh，去上清；所有沉澱用ImL膠體金抗體重懸液重懸，4°C保存。
[0079]用於HCG檢測的抗體膠體金墊的噴點方法如下:用膠體金抗體重懸液將上述製備的膠體金抗體結合物稀釋4倍；開啟點膜儀的電源，設定噴點程序，噴點量為8yL /cm;l號管道為噴點通道；將I號管道置於膠體金抗體重懸溶液中，選擇初始化程序，初始化6個循環；將金標墊按固定位置平放在點膜儀上，按控制面板上「GO」鍵開始噴點，點完後取下，檢查噴點好的金標墊，噴點的膠體金抗體條帶均勻、連續和貫通整個金標墊的直線為合格噴點品，兩條直線中出現斷點為不合格噴點品；每放一片金標墊，按一次控制面板上的「GO」鍵為噴點一次(一片)；噴點結束，將噴點的金標墊置於室溫中自然乾燥I個小時，膜上應看不到噴點痕跡。
[0080]用於HCG檢測的抗體層析膜製備方法如下:取鼠抗人HCG抗體500 ug,加到5 ml刻度離心管中，抗體稀釋液至I ml，容器標記T標誌。取羊抗鼠IgG抗體25 μ L，加到5mL刻度離心管中，抗體稀釋液至I mL，容器標記C標誌；開啟點膜儀的電源，設定噴點程序，噴點量為I μ L /cm, I號管道為檢測帶噴點通道，2號管道為對照帶噴點通道；將I號管道置於檢測帶溶液中，將2號管道置於對照帶溶液中，選擇初始化程序，初始化6個循環；將層析膜按固定位置平放在點膜儀上，按控制面板上「G0」鍵開始噴點，點完後取下，檢查噴點好的層析膜，檢測帶和對照帶為兩條均勻、連續和貫通整個層析膜的直線為合格噴點品，兩條直線中出現斷點為不合格噴點品；每放一片層析膜，按一次控制面板上的「G0」鍵為噴點一次(一片);噴點結束，將噴點的層析膜置於室溫中自然乾燥I個小時，膜上應看不到噴點痕跡。
[0081]將底板上較寬部分的保護紙除去，沿上面保護紙的上邊緣，將劃好線的層析膜，以C線在上方的方式貼到底板板上；將膠體金墊貼在T線下方，與NC膜少許接觸；將樣品墊貼在膠體金墊下方，與膠體金墊少許接觸；接著除去上方保護紙，將吸水墊貼在NC膜的上方，與NC膜少許接觸；將保護紙及指示帶紙逐一貼在組裝好的試紙條外面，組裝成大卡。接通切割機電源，設定切膜程序，設定切割寬度為4mm ;將大卡合格品平放入切割機平臺軌道中，正面朝上，按操作面板上「G0」鍵，開始切割；每放一片大卡合格品，按操作面板上「G0」鍵一次，直至切割完所有大卡合格品。
[0082]所述尿蛋白檢測試紙為將空白濾紙在溴酚藍，表面活性劑和檸檬酸緩衝液組成的溶液中浸泡後乾燥處理，所訴溴酚藍在溶液中的濃度為500 mg/L，表面活性劑在溶液中的濃度為10 %，檸檬酸緩衝液的pH值為4.6，摩爾濃度為0.01 M，烘乾後使用切割機切成邊長為4 mm的正方形；
[0083]所述白細胞檢測試紙為將空白濾紙在5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸鹽和蔗糖組成的溶液中浸泡後乾燥處理，所述5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸鹽在溶液中的濃度為800 mg/L，所述蔗糖在溶液中的濃度為10000 mg/L，烘乾後使用切割機切成邊長為4mm的正方形；
[0084]所述便潛血檢測試紙為將空白濾紙在過氧化氫或過氧化異丙苯，四甲基聯苯胺或氨基比林，表面活性劑和PBS緩衝液組成的溶液中浸泡後乾燥處理，所述過氧化氫或過氧化異丙苯的質量分數為10%，四甲基聯苯胺(TMB)或氨基比林的濃度為40g/L，PBS緩衝液的PH值為7.0，摩爾濃度為0.01M，烘乾後使用切割機切成邊長為4mm的正方形；
[0085]所述亞硝酸鹽檢測試紙為將空白濾紙在對氨基苯磺酸，α -萘胺和酒石酸組成的溶液中浸泡後乾燥處理，所述對氨基苯磺酸的濃度為4000 mg/L, α-萘胺的濃度為2000mg/L，酒石酸的質量分數為0.05%，烘乾後使用切割機切成邊長為4 mm的正方形。
[0086]分別將尿蛋白檢測試紙，白細胞檢測試紙，便潛血檢測試紙和亞硝酸鹽檢測試紙中的一種或多種以水平覆蓋或內置嵌入方式粘貼固定於透明的PVC片上，各試紙間距為 5mm，切成邊長為4mm的試紙條即成，且與HCG免疫層析試紙條置於可拆卸的卡槽上。
【權利要求】
1.一種人絨毛膜促性腺激素和泌尿系統感染聯檢試劑盒，包括第一底板(10)，其特徵是:在第一底板(10)的一面上設置有層析膜(6)，層析膜(6)的前端設置不透明保護膜(3)，不透明保護膜(3)的前端設置箭頭(2);箭頭(2)的前端設置結合墊(I);層析膜(6)上還依次設置有檢測線(4)和質控線(5)，層析膜(6)後端設置有吸水墊(7);還包括感染指標檢測區(8)； 所述感染指標檢測區(8)中包括HCG免疫層析檢測試紙條，還包括有尿蛋白檢測試紙，白細胞檢測試紙，便潛血檢測試紙和亞硝酸鹽檢測試紙中的一種或幾種。
2.如權利要求1所述人絨毛膜促性腺激素和泌尿系統感染聯檢試劑盒，其特徵是:所述感染指標檢測區(8 )附著於第二底板(11)上或複合於第一底板(10 )的任意一個表面上。
3.一種人絨毛膜促性腺激素和泌尿系統感染聯檢試劑盒，包括第一底板(10)，其特徵是:在第一底板(10)的一面上設置有層析膜(6)，層析膜(6)的前端設置結合墊(1)，結合墊(I)的前方還設置樣品墊(9);層析膜(6)上還依次設置有檢測線(4)和質控線(5)，層析膜(6)後端設置有吸水墊(7);第一底板(10)的下表面上還設置有感染指標檢測區(8)； 所述感染指標檢測區(8)中包括HCG免疫層析檢測試紙條，還包括有尿蛋白檢測試紙，白細胞檢測試紙，便潛血檢測試紙和亞硝酸鹽檢測試紙中的一種或幾種。
【文檔編號】G01N33/76GK203616319SQ201320690882
【公開日】2014年5月28日 申請日期:2013年11月4日 優先權日:2013年11月4日
【發明者】陸月, 時振華, 胡越, 韋彥餘 申請人:無錫博慧斯生物醫藥科技有限公司