培養皿及培養套件的製作方法
2023-05-30 02:54:41
培養皿及培養套件的製作方法
【專利摘要】培養皿（10）具備皿主體（20）和支承部件（60）。皿主體（20）具備：內底面（32）成為培養面的有底圓筒形狀的頸縮部（30）、圓筒形狀且直徑大的開口部（40）、和將頸縮部（30）與開口部（40）連結的連結部（50）。開口部（40）的外徑與通用的培養皿的外徑相同。此外，支承部件（60）形成為環狀，外徑與通用的培養皿的外徑相同。此外，該培養皿（10）的高度與通用的培養皿的高度相同。
【專利說明】培養皿及培養套件
【技術領域】
[0001]本發明涉及培養皿及培養套件。
【背景技術】
[0002]作為用於細胞或組織的培養的培養容器，例如作為通用品而市售有Φ35.ι、Φ 60mm> Φ 100mm、Φ 150mm等的有底圓筒形狀的培養皿。
[0003]在角膜或皮膚、口腔黏膜等薄片狀的培養細胞(細胞薄片)中，將培養細胞培養到作為培養面(培養皿的內底面)整面的鋪滿狀態的製品作為最終製品用於移植。培養面的面積越大，為了培養到鋪滿狀態越花費時間，需要較多的播種細胞等而效率較差，所以希望培養面的面積相比需要的細胞薄片的尺寸不過大。例如，在角膜中，只要能夠得到Φ25πιπι左右的細胞薄片就足夠，所以培養面的面積優選的是Φ 25mm左右。
[0004]另一方面，如果單單使培養皿整體的大小匹配於培養面的面積而變小，則發生操作性變差而掉落、或不能對應於設計為適合於通用品的一般的設備儀器等的不良狀況。因為這樣，所以開發了在通用尺寸的培養皿中配置具有與培養面的面積匹配的底面積的圓筒、能夠在該圓筒內培養少量的細胞的結構(參照專利文獻I)。
[0005]專利文獻1:外觀設計註冊第1382462號公報。
【發明內容】
[0006]但是，在專利文獻I的培養皿中，雖然能夠對應於設計為適合於通用品的設備儀器，但在操作性上存在問題。具體而言，有圓筒的開口部過小而難以將細胞薄片取出、或難以將培養液供給到圓筒內的問題。
[0007]本發明是為了解決這樣的課題而做出的，目的是提供一種能夠對應於設計為適合於通用品的設備儀器、並且操作性較好的培養皿。
[0008]本發明的培養皿及培養套件為了達到上述的主要目的，採用了以下的技術手段。
[0009]即，本發明的培養皿具備皿主體和支承部件；所述皿主體將頸縮部和開口部經由連結部連結，所述頸縮部為內底面成為培養面的有底圓筒形狀且直徑小，所述開口部為圓筒形狀且直徑大；所述支承部件設在上述頸縮部的底面的外側；上述開口部的外徑及上述支承部件的外徑與通用的培養皿的外徑相同。
[0010]在該培養皿中，由於開口部的外徑及支承部件的外徑與通用的培養皿的外徑相同，所以能夠對應於適合於通用品而設計的設備儀器。此外，由於用直徑小的頸縮部的內底面進行培養，所以能夠得到比用通用品進行培養的情況小的細胞薄片。此外，由於在頸縮部上連結著直徑大的開口部，所以容易進行細胞薄片比較容易取出的培養液的供給。
[0011]在本發明的培養皿中，也可以是，上述支承部件是環狀的支承部件，所述環狀的支承部件形成為外徑與上述通用的培養皿的外徑一致，在上述支承部件與上述頸縮部之間形成有間隙。如果這樣，則在將得到的細胞薄片連同培養皿一起浸潰在輸送液中的狀態下進行輸送，在從輸送液將培養皿取出而操作細胞薄片時等，由於輸送液不易殘留在支承部件，所以能夠不擔心輸送液的滴下等而進行操作。
[0012]在本發明的培養皿中，也可以是，上述培養皿的高度與通用的培養皿的高度相同。如果這樣，則更容易對應於適合於通用的培養皿而設計的一般的設備儀器等。
[0013]本發明的培養套件具備:上述的本發明的培養皿；和載體，載置在該培養皿的內底面上，以使上述內底面的一部分露出；上述培養皿的內底面被溫度響應性聚合物覆蓋，所述溫度響應性聚合物以規定的臨界溫度為邊界，細胞粘接性和細胞剝離性轉換；上述載體具有不依存於溫度的細胞粘接性。在該培養套件中，當培養粘接依存性細胞時，通過將內底面維持為作為細胞粘接性的溫度，不僅是具有細胞粘接性的載體上，在露出的內底面上，粘接依存性細胞也粘接而增殖，成為細胞薄片。另一方面，通過在成為鋪滿狀態的時點將內底面維持在為細胞剝離性的溫度，細胞薄片從內底面剝離，能夠得到僅粘接在載體上的細胞薄片。由於細胞薄片非常薄，所以難以取出，但在該培養套件中，只要把持載體而從培養皿取出，就能夠將細胞薄片同時取出。這樣，能夠容易地進行粘接依存性細胞的培養及取出。
[0014]在本發明的培養套件中，也可以是，上述載體具備環狀部和耳部，所述環狀部具有比上述培養皿的頸縮部的內徑稍稍小的外徑，所述耳部設在該環狀部的外側，當將上述環狀部載置在上述培養皿上時，所述耳部沿著上述培養皿的頸縮部的側壁豎起，一部分伸出到該側壁的上方。如果這樣，則能夠在細胞薄片的外周整體粘接在載體上的狀態下將細胞薄片取出，所以能夠抑制細胞薄片的收縮及變形等。此外，由於載體的耳部伸出到頸縮部的側壁的上方，所以容易把持載體，更容易將細胞薄片取出。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0015]圖1是培養皿10的立體圖。
[0016]圖2是將培養皿10從上方觀察的圖。
[0017]圖3是將培養皿10從下方觀察的圖。
[0018]圖4是表示圖2的各切斷面的端面的圖。
[0019]圖5是培養套件15的立體圖。
[0020]圖6是載體90的說明圖。
[0021]圖7是使用培養套件15的細胞薄片的製作方法的說明圖。
[0022]圖8是包裝容器100的說明圖。
[0023]圖9是包裝體200的說明圖。
[0024]圖10是表示從培養皿10將細胞薄片取出的方法的說明圖。
【具體實施方式】
[0025]1.培養皿
接著，使用附圖對本發明的優選的一實施方式進行說明。圖1是培養皿10的立體圖，圖2是將培養皿10從上方觀察的圖，圖3是將培養皿10從下方觀察的圖，圖4是表示圖2的各切斷面的端面的圖。圖4 (八)對應於八一八切斷面，圖4 (8)對應於8 — 8切斷面，圖4 (0對應於(:一(:切斷面。
[0026]培養皿10如圖1?圖4所示，具備皿主體20、支承部件60和橋接部70。該培養皿10是聚苯乙烯樹脂制，整體是透明的。因此，在圖1?圖3中，雖然也應記載透明的裡側的線，但為了方便而將透明的裡側的線省略。
[0027]皿主體20具備頸縮部30、開口部40和連結部50。該皿主體20與通用的培養皿高度相同(這裡是12mm)。頸縮部30形成為內底面32為培養面的有底圓筒形狀，在底上設有腳36。內底面32的直徑在這裡為Φ25πιπι。在該內底面32上鋪設有溫度響應性聚合物。溫度響應性聚合物以規定的臨界溫度(這裡是32°C )為邊界，在比其低溫下顯現細胞剝離性，在比其高溫下顯現細胞粘接性。因此，在培養粘接依存性細胞時，將內底面32的溫度維持為例如37°C左右而使內底面32為細胞粘接性，由此細胞粘接在內底面32上而增殖。另一方面，在成為鋪滿狀態的時點，將內底面32的溫度降低到例如20°C左右而成為細胞剝離性，由此細胞從內底面32剝離。另外，關於溫度響應性聚合物，例如在特開2003 - 38170等中被詳細地說明，所以這裡省略詳細的說明。腳36與設在通用的培養皿的底上的腳同樣，是用來防止因皿主體20的底直接接觸在作業臺等上而發生的損傷等的。該腳36形成為外徑與內底面32相同、按照90°具有間隙的環狀。開口部40形成為直徑比頸縮部30大的圓筒形狀，外徑與通用的培養皿的外徑相同(這裡是Φ35πιπι)。連結部50將頸縮部30的上端與開口部40的下端連結。該連結部50具有從頸縮部30的側壁的上端大致水平地朝外側擴大、逐漸向外側上方延伸的剖視圓弧狀的形狀。另外，在本發明中，所謂通用的培養皿，是指Φ35ι?πι、Φ 60mm> Φ 100mm、Φ 150mm等的作為通用品市售的培養皿。此外，在本發明中，所謂外徑或高度與通用的培養皿相同，只要是以能夠對應於一般的設備儀器等的程度相同就可以，所述一般的設備儀器適合於該通用的培養皿而設計。
[0028]支承部件60形成為環狀。該支承部件60外徑與通用的培養皿的外徑相同(這裡是Φ35πιπι)。此外，支承部件60的下端與皿主體20的腳36的下端高度方向的位置一致。在支承部件60上設有突起62。
[0029]橋接部70在皿主體20與支承部件60之間按照90°設有4處，將皿主體20和支承部件60橋接。由此，形成由皿主體20、支承部件60和橋接部70包圍的間隙80。在橋接部70中，有將皿主體20的頸縮部30和支承部件60橋接的第I橋接部72、和不僅是頸縮部30也與連結部50橋接的第2橋接部74，將它們交替地配置。橋接部70的底與皿主體20的底(除了腳36以外)高度方向的位置相同。
[0030]2.培養套件
以下，使用附圖對包括上述培養皿10的培養套件的一例進行說明。圖5是培養套件15的立體圖，圖6是載體90的說明圖。
[0031]培養套件15如圖5、圖6所示，具備培養皿10和載體90。關於培養皿10，由於已在上述「1.培養皿」中說明，所以省略說明。載體90是厚度為0.1mm以下(更優選的是0.05mm以下)的聚對苯二甲酸乙二醇酯樹脂(PET)制的薄片，作為細胞粘接面的表面被親水處理。通過親水處理，而具有不依存於溫度的細胞粘接性。這裡，所謂「具有不依存於溫度的細胞粘接性」，是指至少在鋪設於培養皿10的內底面32上的溫度響應性聚合物的臨界溫度附近(正負10°C以內)不具有細胞粘接性和細胞剝離性明確地轉換的溫度。該載體90具備具有比培養皿10的頸縮部30的內徑稍稍小的外徑的環狀部92、和在環狀部92的外側按照90°設置的4個耳部94。如果將環狀部92載置到培養皿10的內底面32上，則內底面32的一部在環狀部92的內側露出。耳部94如圖6那樣在虛線部彎折而使用。該耳部94當將環狀部92載置到培養皿10上時，沿著培養皿10的頸縮部30的側壁豎起，一部分伸出到側壁的上方。
[0032]3.細胞薄片的製作
以下，對使用包括培養皿10的培養套件15製作細胞薄片的操作的一例使用附圖進行說明。圖7是使用培養套件15的細胞薄片的製作方法的說明圖。
[0033]在採取約Imm2的角膜環部組織後，通過胰蛋白酶處理從組織將細胞分散，調製細胞懸濁液。
[0034]在培養皿10的內底面32上鋪設載體90 (圖7 (A))。並且，在鋪設了載體90的內底面32上鋪設飼養細胞，播種細胞懸濁液(圖7 (B))。作為飼養細胞，使用通過絲裂黴素C或X射線照射等的不活化處理抑制了增殖能力的鼠纖維芽細胞。在細胞播種後，供給含有10v/v%FBS (胎牛血清)的DMEM/F12混合培養基作為培養用培養基，在飼養細胞的存在下培養角膜細胞。通過持續培養角膜細胞，在7天左右達到鋪滿狀態，形成培養角膜細胞的細胞薄片(圖7 (C))。在達到鋪滿狀態的時候，飼養細胞幾乎全部被從培養系統中排除。培養在培養皿10的內底面32顯現細胞粘接性的37°C左右的溫度條件下進行。因此，在使用培養套件15的培養中，在培養皿10的內底面32露出的部分中細胞粘接在內底面32上而增殖，在鋪設有載體90的部分中，細胞粘接在載體90的上表面上而增殖。此時，粘接在內底面32上的細胞和粘接在載體90上的細胞超過載體90的厚度而結合，形成成為一體的細胞薄片。此時，如果載體90的厚度是0.1mm以下，則細胞容易超過載體的厚度而結合。另外，雖然省略了圖示，但在培養時，對培養皿10蓋上蓋而進行培養。本實施方式的培養皿10由於開口部40及支承部件60的外徑是與通用的培養皿相同的Φ 35mm，所以能夠原樣應用適合於Φ35_的通用的培養皿而設計的蓋(通用品)。此外，培養也可以根據需要而在中途進行培養基更換或繼代操作。在培養中，也可以使用自動進行溫度管理或培養基更換等的自動培養裝置。另外，這樣的裝置一般是適合於通用的培養皿而設計的，從其偏離的培養皿不能使用的情況較多，需要準備專用夾具等的對策。特別是，在把持培養皿而進行培養皿的移動或培養基更換等的類型的裝置中，如果外徑與通用的培養皿不一致則不能把持培養皿、不能使用的情況較多。本實施方式的培養皿10由於開口部40及支承部件60的外徑是與通用的培養皿相同的Φ 35mm,所以能夠對這樣的裝置原樣應用。
[0035]4.細胞薄片的包裝
以下，對將在上述「3.細胞薄片的製作」中製作出的細胞薄片連同培養皿10 —起包裝的操作進行說明。這裡，對使用圖8所示的包裝容器100包裝的情況進行說明。
[0036]首先，對包裝容器100進行說明。包裝容器100是用來將細胞薄片連同培養皿10一起包裝而進行保存或輸送的容器，具備容器主體110、適配器170和蓋體140。
[0037]容器主體110是能夠儲存輸送液等液體的容器，是在側壁上具有多個階差的杯狀的容器。具體而言，從內底面112朝向上方，形成有第I階差部114、第2階差部116、第3階差部118。在該容器主體110的側壁上，形成有在上下方向上延伸的一對縱槽124、125。一對縱槽124、125相互面對而形成，從內底面112經過第I階差部114達到第2階差部116。在第3階差部118的外周側，形成有隔開了較小的階差的水平面120。
[0038]適配器170用來將培養皿10以從容器主體110的內底面11離開間隔的狀態保持。適配器170具備圓筒172、和設在圓筒172的上端的凸緣174。圓筒172是在其內側固定培養皿10的部位，內徑形成得比培養皿10的外徑稍大。此外，圓筒172在下端設有折入到內側的爪186，使得培養皿10不向下方錯移。凸緣174彎曲為凹狀，具備俯視的形狀是將圓用兩個平行的弦切掉的形狀的彎曲部176、和從兩個弦垂直地豎起的I對縱壁178、179。彎曲部176的外周為與容器主體110的第2階差部116的內周大致相同的形狀。此外，在彎曲部176的背側，設有具有水平的底面的載置爪188，以便穩定地載置到容器主體110的第I階差部114的上表面上。縱壁178、179分別具備流通用缺口 180、181。該適配器170具備橫跨圓筒172和凸緣174的兩方將內外貫通而設置的流通孔182、及設在圓筒172的下端處的流通狹縫184。另外，設在培養皿10的支承部件60上的突起62鉤掛在流通狹縫184上，限制培養皿10的向上方的移動。
[0039]蓋體140將容器主體110的開口封堵。蓋體140具備底面142、和設在底面142的外周側的水平面144，底面142和水平面144用壁面146連結。此外,蓋體140具備從底面142隆起的捏手148。在底面142上，平行地形成有多個向下凸的線狀的加強用凹部150。該蓋體140的外周為與容器主體110的第3階差部118的外周大致相同的形狀。
[0040]使用這樣的包裝容器100，如以下這樣連同培養皿10 —起將細胞薄片包裝。首先，將製作出的細胞薄片用清洗液清洗多次。接著，將具有細胞薄片的原狀的培養皿10推入到適配器170的圓筒172中而固定，將該適配器170安設到容器主體110內。如果將適配器170安設到容器主體110中，則圓筒172進入到容器主體110的內底面112與第I階差部114之間，凸緣174的彎曲部176進入到第2階差部116的內周，設在彎曲部176的底面上的載置爪188被載置到第I階差部114上。此時，I對的縱壁178、179與設在容器主體110上的I對縱槽124、125對置，在適配器170與容器主體110之間形成將適配器170的上側的區域與下側的區域連結的通路。接著，從在縱壁178、179與縱槽124、125之間形成的通路向適配器170的下側的區域注入輸送液，注入直到其水位成為容器主體110的第2階差部116的上表面的高度。輸送液如果其水位超過適配器170的流通用缺口 180、181，則經由流通用缺口 180、181也向適配器170的上側的區域進入。在輸送液的注入時等，有在培養皿10的下方形成空氣積存部的情況，但這樣的空氣除了形成於縱壁178、179與縱槽124、125之間的通路以外，還能夠經過設在適配器170上的流通孔182及流通狹縫184、設在培養皿10的腳36與腳36之間的間隙、以及皿主體20與支承部件60之間的間隙80等向適配器170的上方排出。輸送液的注入結束後，用蓋體140蓋住。如果用蓋體140將容器主體110蓋住，則底面142和壁面146進入到第3階差部118的內周，水平面144被載置到第3階差部118的上表面上,水平面144的上表面和水平面120的上表面成為大致同面。然後，在包裝容器100的上方載置密閉薄片210 (圖中用陰影網格表示)，通過熱熔接到包裝容器100的上表面上，得到圖9所示那樣的包裝體200。密閉薄片210具備作為從包裝容器100剝下時的把手的耳212。
[0041]5.細胞薄片的取出
以下，對從由上述「4.細胞薄片的包裝」得到的包裝體200將移植用的細胞薄片取出的操作進行說明。
[0042]首先，將包裝體200的密閉薄片210從包裝容器100剝下，將蓋體140從容器主體110拆下，從容器主體110將適配器170取出。接著，在將培養皿10固定在適配器170上的原狀下，通過將其傾斜，從流通用缺口 180、181將培養皿10內的不需要的輸送液排出。另夕卜，關於輸送液的排出，也可以不將適配器170傾斜，而使用注射器或吸管排出。
[0043]接著，從培養皿10將細胞薄片取出。關於以後的操作，使用圖10進行說明。首先，通過將培養皿10冷卻到201左右，使培養皿10的內底面32成為細胞剝離性，將內底面32和細胞薄片直接接觸的部分剝離。此時，是在作為不具有溫度響應性的細胞粘接性的薄片的載體90上粘接著細胞薄片的原狀。接著，把持載體90的耳部94，連同載體90—起，將形成在其上的細胞薄片取出(圖10 (八接著，將細胞薄片中的在載體90的環狀部92的內側部分處形成的部分用手術刀切下(圖10 (8)),用於移植等。
[0044]在以上說明的實施方式的培養皿10中，由於開口部40的外徑及支承部件60的外徑是與通用的培養皿的外徑相同的0 35臟，所以能夠對應於適合於35臟的通用品而設計的設備儀器。此外，在對培養皿10鋪設溫度響應性聚合物時，也能夠原樣使用適合於小35臟的通用的培養皿而設計的設備。
[0045]此外，由於用￠25111111的內底面32進行培養，所以能夠得到比用小35臟的通用品進行培養的情況小的細胞薄片，具有以下這樣的優點。在上述角膜細胞的培養中，由於細胞薄片是￠25111111左右就足夠，所以如果用￠35111111的通用品進行培養，則為了成為鋪滿狀態而花費時間、或播種較多的細胞、或在多餘的區域中形成細胞薄片。另一方面，如果使用培養皿10，則能夠有效率地得到細胞薄片。
[0046]進而，由於在有底圓筒形狀的頸縮部30上連結著直徑大的開口部40，所以細胞薄片比較容易取出。關於這一點，在沒有開口部40的有底圓筒形狀的培養容器中，也可以想到只要容器的深度較淺，細胞薄片就能夠容易取出。但是，在細胞的培養中需要某種程度的培養液的液量，在操作時在容器的深度上需要餘量以使培養液不會溢出，所以難以使容器變淺。此外，只要對直徑大的開口部40供給培養液，該培養液就必然向直徑小的頸縮部30流入，所以培養液向培養面的供給較容易。
[0047]進而，由於支承部件60是形成為使外徑與通用的培養皿一致的環狀的支承部件，在與頸縮部30之間形成有間隙80，所以能夠將得到的細胞薄片連同培養皿10 —起在浸潰於輸送液中的狀態下進行輸送，當從輸送液將培養皿10取出而操作細胞薄片時等，輸送液不易殘留在支承部件60中。因此，能夠不擔心輸送液的滴下等而進行操作。
[0048]此外，皿主體20與通用的培養皿高度相同，培養皿10作為整體而與通用的培養皿高度相同。因此，更容易對應於適合於通用的培養皿而設計的一般的設備儀器等。
[0049]此外，培養皿10的內底面32鋪設有在規定的臨界溫度下細胞粘接性和細胞剝離性轉換的溫度響應性聚合物，進而，將具有不依存於溫度的細胞粘接性、當載置時內底面32的一部分露出那樣的形狀的載體90載置於內底面32上而使用。因此，細胞薄片的培養和取出較容易。此外，由於載體90具備具有比培養皿10的頸縮部30的內徑稍稍小的外徑的環狀部92，所以能夠在外周整體粘接在載體90上的狀態下將細胞薄片取出。因此，能夠抑制細胞薄片的收縮及變形等。此外，由於載體90的耳部94伸出到頸縮部30的側壁的上方，所以容易把持載體94，更容易將細胞薄片取出。
[0050]此外，通過使用包裝容器100那樣的包裝容器，能夠連同培養皿10 —起包裝而進行保存及輸送。在該包裝容器100中，也可以代替培養皿10而使用通用的培養皿。
[0051]另外，本發明完全不限定於上述實施方式，當然只要屬於本發明的技術範圍，就能夠以各種形態實施。
[0052]例如，在上述實施方式中，支承部件60是環狀的支承部件，在與頸縮部30之間形成有間隙80，但只要外徑與通用的培養皿的外徑相同就可以，並不限定於此。例如，支承部件60也可以是在與頸縮部30之間不形成間隙80的圓盤形狀，也可以由從頸縮部30以放射狀延伸的多個棒狀部件構成。這樣，也能夠對應於適合於通用品而設計的設備儀器。
[0053]在上述實施方式中，培養皿10為聚苯乙烯樹脂制，但並不限定於此。例如，可以使用聚氯乙烯樹脂、聚乙烯樹脂、丙烯酸樹脂、聚丙烯樹脂、聚甲基戊烯樹脂、氟樹脂、苯酚樹月旨、尿素樹脂、環氧樹脂、三聚氰胺樹脂、矽樹脂等各種樹脂。此外，培養皿10整體為透明，以便容易確認細胞的狀態，但並不限定於此。例如，只要頸縮部30的底是透明的，就能夠進行顯微鏡觀察，所以其以外的部分也可以不是透明的。
[0054]在上述實施方式中，假設開口部40和支承部件60的外徑是Φ35πιπι，內底面32的直徑是Φ 25mm,高度是12mm,但並不限定於此。例如,在細胞薄片的尺寸是Φ 1mm就足夠的情況下，內底面32的直徑只要設為(MOmm就可以。此外，在需要Φ40πιπι的細胞薄片的情況下，內底面32的直徑只要設為Φ40πιπι就可以，在此情況下，例如可以將開口部40和支承部件60的外徑設為Φ60mm,以便能夠對應於適合於Φ60mm的通用品的設備。高度既可以與通用品相同，也可以不同。
[0055]在上述實施方式的培養皿中，假設內底面32鋪設有溫度響應性聚合物，但並不限定於此。例如，也可以代替溫度響應性聚合物的鋪設，而通過細胞粘接性聚合物的鋪設或親水處理等表面處理單單賦予細胞粘接性。通過這樣，也能夠培養角膜細胞等粘接依存性細胞。在此情況下，為了將細胞剝離而進行酵素處理，由此能夠將細胞薄片剝離。表面處理只要是能夠得到細胞粘接性的處理，是怎樣的處理都可以，例如可以舉出骨膠原、纖連蛋白等粘接因子或由溫度響應性聚合物等化學材料進行的塗層、通過離子照射或等離子處理等進行的表面改性等。
[0056]在上述實施方式中，橋接部70按照90°設有4處，但並不限定於此。例如也可以不以等間隔設置，也可以設置3處以下或5處以上。此外，為具備將皿主體20的頸縮部30的側面與支承部件60橋接的第I橋接部72、和不僅是頸縮部30的側面、與連結部50的下表面也橋接的第2橋接部74、它們交替地配置的結構，但也可以僅具備第I橋接部72，也可以僅具備第2橋接部74。此外，它們也可以不是交替地配置。另外，由於第I橋接部72有液體不易滯留在培養皿10的底上的優點，第2橋接部74有容易提高強度的優點，所以只要根據使用方法等適當選擇就可以。此外，橋接部70的底與皿主體20的底(除了腳36以外)高度方向的位置相同，但並不限定於此。例如，也可以與腳36的下端高度方向的位置相同。
[0057]在上述實施方式中，在皿主體20的底上設有腳36，但也可以不具有腳36。此外，腳36按照90°具有間隙，但也可以不具有間隙，間隙也可以不是等間隔地設置，間隙的間隔也可以不是90°。
[0058]在上述實施方式中，使連結部50的形狀為從頸縮部30的側壁的上端大致水平地朝向外側擴大、逐漸向外側上方延伸的剖視圓弧狀，但並不限定於此。例如，也可以從頸縮部30的側壁的上端朝向開口部40的上端為平緩的斜坡形狀，也可以朝向頸縮部30的側壁的上端和開口部40的上端的中途地點為平緩的斜坡形狀，也可以為從那裡到開口部40的上端垂直地豎立的形狀。
[0059]在上述實施方式中，進行角膜細胞的培養，但培養的細胞並不限定於此。例如，可以適當地用於皮膚或口腔黏膜等粘接依存性細胞的培養。此外，也可以用於細胞的培養以外的用途。
[0060]在上述實施方式中，鋪設使用載體90，但並不一定需要鋪設載體90。此外，載體90具備具有比培養皿10的頸縮部30的內徑稍稍小的外徑的環狀部92，但並不限定於這樣的結構，只要在將載體90載置在培養皿10的內底面32上時，內定面32的一部分露出就可以。此外，載體90將耳部94按照90。具備4個耳部94，但也可以不具備耳部94，也可以不是等間隔地具備，也可以具備3個以下或5個以上。
[0061]在上述實施方式中，在將得到的細胞薄片用包裝容器100包裝後取出使用，但也可以不進行這樣的包裝。此外，也可以用包裝容器100以外的包裝容器包裝。
[0062]本申請以2012年5月31日提出申請的日本專利申請第2012 — 124818號為基礎主張優先權，在本說明書中通過引用而包含其全部內容。
[0063]產業上的可利用性
本發明能夠在生物體外(111 ^1^0)培養細胞的細胞培養技術中使用。
[0064]附圖標記說明
10培養皿，15培養套件，20皿主體，30頸縮部，32內底面，36腳，40開口部，50連結部，60支承部件，62突起，70橋接部，72第1橋接部，74第2橋接部，80間隙，90載體，92環狀部，94耳部，100包裝容器，110容器主體，112內底面，114第1階差部，116第2階差部，118第3階差部，120水平面，124、125縱槽，140蓋體，142底面，144水平面，146壁面，148捏手，150加強用凹部，170適配器，172圓筒，174凸緣，176彎曲部，178、179縱壁，180、181流通用缺口，182流通孔，184流通狹縫，186爪，188載置爪，200包裝體，210密閉薄片，212耳。
【權利要求】
1.一種培養皿,其特徵在於， 具備皿主體和支承部件； 所述皿主體將頸縮部和開口部經由連結部連結，所述頸縮部為內底面成為培養面的有底圓筒形狀且直徑小，所述開口部為圓筒形狀且直徑大； 所述支承部件設在上述頸縮部的底面的外側； 上述開口部的外徑及上述支承部件的外徑與通用的培養皿的外徑相同。
2.如權利要求1所述的培養皿，其特徵在於， 上述支承部件是環狀的支承部件，所述環狀的支承部件形成為外徑與上述通用的培養皿的外徑一致，在上述支承部件與上述頸縮部之間形成有間隙。
3.如權利要求1或2所述的培養皿，其特徵在於， 上述培養皿的高度與通用的培養皿的高度相同。
4.一種培養套件，其特徵在於， 具備:權利要求1?3中任一項所述的培養皿；和 載體，載置在該培養皿的內底面上，以使上述內底面的一部分露出； 上述培養皿的內底面被溫度響應性聚合物覆蓋，所述溫度響應性聚合物以規定的臨界溫度為邊界，細胞粘接性和細胞剝離性轉換； 上述載體具有不依存於溫度的細胞粘接性。
5.如權利要求4所述的培養套件，其特徵在於， 上述載體具備環狀部和耳部，所述環狀部具有比上述培養皿的頸縮部的內徑稍稍小的外徑，所述耳部設在該環狀部的外側，當將上述環狀部載置在上述培養皿上時，所述耳部沿著上述培養皿的頸縮部的側壁豎起，一部分伸出到該側壁的上方。
【文檔編號】C12M3/00GK104334713SQ201380028128
【公開日】2015年2月4日 申請日期:2013年5月17日 優先權日:2012年5月31日
【發明者】淡海陽子, 井家益和, 杉浦誠, 諏訪裕子, 小笠原隆廣 申請人:株式會社日本組織工程