北蟲草寡肽組合物及其製備方法和使用的製作方法
2023-06-06 10:05:01
專利名稱：北蟲草寡肽組合物及其製備方法和使用的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種從北蟲草中提取得到納米寡肽的方法和通過該方法提取得到的 組合物。本發明還涉及從北蟲草中提取得到的含有納米寡肽的組合物在醫藥、保健品、化妝 品中的應用。
背景技術：
冬蟲夏草是麥角菌科蟲草真菌ifordycc印s sinensis)的子座及其寄生主蝙蝠蛾 Qieplalus armaricanus)幼蟲屍體的複合體。現代藥理實驗證明，冬蟲夏草具有抗衰老、提 高免疫力、抗癌、抗病毒、抗驚厥及鎮靜作用、雄性激素樣作用，對心腦血管系統也有保護 作用。由於受生長條件的限制，天然蟲草產量有限，野生資源已受到過度的採掘，產量逐年 減少，遠遠不能滿足人們生活的需要。t^M^Cordyceps militaris (L. ) Link)又稱北冬蟲夏草，俗稱蛹蟲草。目前 北蟲草液體、固體及蛹體培養技術已經成熟並進入了工業化生產。研究發現，人工培育的北 蟲草子實體中一般營養成分與天然冬蟲夏草對比發現，蟲草素與多糖含量比野生冬蟲夏草 要高，二者的胺基酸組成完全一致、不同胺基酸的含量略有差異但總量基本相當。藥理試驗 證明，人工培養的北蟲草子實體同樣具有與天然蟲草一樣的藥理功能。北蟲草含有多種營養成分。北蟲草的子實體中一般營養成分如下水分2. 31%， 灰分0. 33%，粗蛋白28. 67%，粗脂肪2. 52%，粗纖維1. 6%，核苷酸1. 50%, SOD (鮮)3 .78%，蟲草多糖5. 54%。蛋白質為蟲草中含量最多的功效成分。過去的觀點認為，動物 的消化道只能吸收游離的胺基酸，即蛋白質必須分解成游離的胺基酸才能被吸收，近年來 的研究發現，寡肽可以完整的形式被吸收進入循環系統而被組織利用。在營養和化妝行業，對冬蟲夏草進行提取處理獲得更高純度的有效成分物質是常 用的手段。目前比較流行的蟲草的營養製劑的提取方法是粗加工的方式，包括蒸煮、回流或 索氏提取等方式。這些方法獲得的蟲草製劑中含有大量不需要的物質，另外，其有效成分物 質的純度仍然不夠，特別是蛋白質通常還保留幾乎完整的大分子形式。大分子形式的蛋白 質生物利用度一般比較低，在營養和化妝行業中是不利的。而多肽，特別是小分子肽有以下特點 (1)不需消化，直接吸收。(2)吸收時不需消耗人體能量。(3)不增加人體胃腸功能負擔。(4)具優先吸收特點。(5)吸收快速，比人體吸收大分子蛋白質快129600秒鐘，較人體胺基酸快64800秒鐘。(6)以自身能量推動吸收。(7) 100% 被吸收。(8)在人體吸收功能降低時，人體能夠被動吸收。
(9)具有載體作用，可將人體其它營養載在基體上，輸送到人體細胞組織。(10)在人體內變成運輸工具，將各種微量元素送到人體各部位。(11)具有極強的活性和生理功能多樣性。因此，人們通過各種水解方法把蛋白水解變成小的肽，以提高其生物利用度。專利CN200710030010.X中用酸解和超聲波共同處理蟲草粉，得到一種活性提取 物。專利CN200510040961.6中用單一的中性蛋白酶處理含有蟲草粉和其它如蠶蛹和 蛋等營養物質的混合物，得到一種保健化妝品製品。專利CN200510016899. 7中採用木瓜蛋白酶或胰蛋白酶對北蟲草菌進行蛋白酶水 解，然後再通過納米機對水解產物進行處理，得到產物分子量分布在100-200nm範圍。專利CN200710077253. 9中對含有包括蟲草粉在內的三種菌類的混合物用單一的
中性蛋白酶進行完全酶解處理，得到一種營養製品。專利CN200710159152.6中對北蟲草用胃蛋白酶、HAP鹼性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰 酶、鹼性內切蛋白酶、纖維素溶壁酶中的一種或多種進行處理，得到一種營養製品。然而，本領域仍然需要具有更低分子量的北蟲草小分子肽製品，例如大部分為含 有長度低於十個胺基酸，優選為兩個到五個胺基酸的小分子肽，其分子的長度為0. I-IOnm 水平。
發明內容
本發明提供了一種從北蟲草中水解提取得到納米寡肽的方法，其中採用複合酶 法水解北蟲草，獲得含有小分子納米寡肽的組合物，其特徵在於，所述納米寡肽的分子量主 要分布在100-1000D之間。在本發明的一個方面，所述組合物中分子量為100-500D的納米 寡肽的高斯分布峰面積百分比超過50%，優選超過70%。在本發明的又一個方面，所述組合 物中納米寡肽的高斯分布峰值分子量約為150-500D。在本發明的又一個方面，所述組合物 中納米寡肽的分子量具有如下的高斯分布
權利要求
1. 一種從北蟲草中水解提取得到納米寡肽的方法，其中採用複合酶法水解北蟲草， 獲得含有小分子納米寡肽的組合物，其特徵在於，所述納米寡肽的分子量主要分布在 100-1000D之間，優選的，所述組合物中分子量為100-500D的納米寡肽的高斯分布峰面積 百分比超過50%，優選超過70%，更優選的，所述組合物中納米寡肽的分子量具有如下的高 斯分布
2.權利要求1的方法，其中水解所採用的酶是3種或3種以上水解酶的組合，所述水解 酶選自胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、鹼性蛋白酶、基質金屬蛋白酶、中性蛋白酶和菠蘿 蛋白酶。
3.權利要求2的方法，其特徵在於，其中水解所採用的酶含有鹼性蛋白酶、中性蛋白酶 和胃蛋白酶，優選的，加入酶的順序是鹼性蛋白酶、中性蛋白酶和胃蛋白酶。
4.權利要求3的方法，所述方法包括以下步驟 將蟲草子實體烘乾，粉碎成50-200目細粉； 將所述細粉與去離子水按1 10-1 50混合；蛋白質變性處理，將混合液升溫至90-95°C，保持10-15min ；把所述混合液降溫至50-60°C，按子實體乾重的1重量％_3重量％加入50萬u/g鹼性 蛋白酶，調節pH至8-9，50-60°C保溫2-4h ；降溫至40-50°C，按子實體乾重1重量％_3重量％加入15萬u/g中性蛋白酶，調節pH 至 7-7. 5，40-50°C保溫 2-4h ；調pH至3. 0-4. 0,按子實體乾重1重量％_3重量％加入5萬u/g胃蛋白酶，升溫至 50-60°C，保持 2-4h ；升溫至95-100°C，保持10-20min，滅酶； 粗過濾；加重量2-3重量％的活性炭，70-75°C脫色0. 5-lh ；用硅藻土過濾機過濾得澄清微黃色小分子肽液體； 濃縮，進行噴霧乾燥或冷凍乾燥得到淡黃色粉末。
5. 一種從北蟲草水解提取得到的組合物，所述水解為用複合酶法對北蟲草蛋白進行水 解，其特徵在於，所述組合物中含有北蟲草蛋白水解得到的小分子的納米寡肽，所述納米寡 肽的分子量主要分布在100-1000D之間，優選的，所述組合物中分子量為100-500D的納米 寡肽的高斯分布峰面積百分比超過50%，優選超過70%，更優選的，所述組合物中納米寡肽 的分子量具有如下的高斯分布
6.權利要求5的組合物，其中水解所採用的酶是3種或3種以上水解酶的組合，所述水 解酶選自胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、鹼性蛋白酶、基質金屬蛋白酶、中性蛋白酶和菠 蘿蛋白酶。
7.權利要求6的組合物，其特徵在於，其中水解所採用的酶含有鹼性蛋白酶、中性蛋白 酶和胃蛋白酶，優選的，所述水解中加入酶的順序是鹼性蛋白酶、中性蛋白酶和胃蛋白酶。
8.權利要求5的組合物，其中還含有其它活性成分，其為蟲草素、蛻皮酮、腺苷、蟲草多 糖、蟲草酸、麥角留醇、膽醇、甘露醇、軟脂酸脂、腺嘌呤、次黃嘌呤、胸腺嘧啶、亞油酸、黃酮 類物質，激素樣成分，維生素以及微量元素。
9.一種化妝品組合物，其含有權利要求5-8中任一項的從北蟲草水解提取得到的組合物。
10.根據權利要求5-8中任一項的從北蟲草水解提取得到的組合物在製備醫藥、保健 品、化妝品中的應用。
全文摘要
本發明涉及一種從北蟲草中提取含有納米寡肽的組合物的方法和通過該方法提取得到的組合物。本發明採用複合酶法水解北蟲草，獲得小分子的納米寡肽，其特徵在於，所述納米寡肽的分子量主要分布在100-1000D之間，優選的，所述組合物中分子量為100-500D的納米寡肽的高斯分布峰面積百分比超過50%。本發明提供的北蟲草寡肽提取物中同時保留了其它活性成分，包括蟲草素、蛻皮酮、腺苷、蟲草多糖、蟲草酸、微量元素、各族維生素、以及游離胺基酸。本發明還涉及從北蟲草中提取得到的含有納米寡肽的組合物在製備醫藥、保健品、化妝品中的應用。
文檔編號A61K8/64GK102000121SQ201010533520
公開日2011年4月6日 申請日期2010年11月5日 優先權日2010年11月5日
發明者杜以波, 胡如桂 申請人:北京中生奧普寡肽技術研究所