胺基酸衍生物的製作方法

2023-05-27 16:04:21 2

專利名稱：胺基酸衍生物的製作方法
技術領域：
本發明涉及胺基酸衍生物。具體地說，涉及以純的光學非對映體、非對映體的混合物、非對映體的外消旋化合物或非對映體外消旋化合物的混合物形式存在的通式Ⅰ的胺基酸衍生物及其藥學上有用的鹽，
其中X代表氮原子或-CH-，R1代表苯基、吡啶基或異喹啉基，R2代環烷基、環烷基烷基、烷硫基烷基、烷基磺醯基烷基、鏈烯基，或者，其中X代表氮原子和/或R1代表異喹啉基和/或R3代表鏈烯基、烷基，R3代表氫、烷基、鏈烯基、咪唑基甲基、吡啶基甲基、噻唑基甲基或苄基，R4代表環己基甲基或苄基，R5代表環烷基、烷基或雜環基烷基。
這些化合物是新的，並具有有價值的藥效特性。
本發明的目的是式Ⅰ化合物及其藥學上有用的鹽本身、它們作為活性治療物質的用途、這些化合物的製備、含這些化合物的藥物和這些藥物的製備以及式Ⅰ化合物及其藥學上有用的鹽用來防病治病的用途或用於增進健康，特別是用來控制或預防高血壓和心機能不全。
本說明書中，單獨使用或聯合使用的「烷基」一詞代表含1-8個碳原子，優選的是含1-4個碳原子的直鏈和支鏈、飽和的烴基，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、另丁基、叔丁基、戊基、己基等。「環烷基」代表含3-8個碳原子，優選的是含3-6碳原子的飽和環烴基，例如，環丙基、環丁基、環戊基、環己基等。「鏈烯基」代表含2-8碳原子，優選的是含2-4個碳原子的直鏈和支鏈不飽和烴基，例如乙烯基、烯丙基、2-丁烯基、3-丁烯基等。「雜環基」代表至少含一個氮原子，此外還可以含一個氧原子、氮原子或硫原子作為成環原子的5元或6元飽和雜環，所述雜環通過氮原子連接在-CH(OH)-基團上，另外的氮原子可以被烷基化，所述雜環基例如嗎啉基、哌啶基、哌嗪基、硫代嗎啉基、S-氧代硫代嗎啉基、S，S-二氧代硫代嗎啉基、吡咯烷基、噻唑烷基、咪唑烷基、噁唑烷基、N-甲基哌啶基等。
「藥學上有用的鹽」包括無機酸鹽或有機酸鹽，例如氫氯酸、氫溴酸、硝酸、硫酸、磷酸、檸檬酸、甲酸、馬來酸、乙酸、琥珀酸、酒石酸、甲磺酸對甲苯磺酸等。本領域一般技術人員根據本領域的狀況以及將被轉化為鹽的化合物的性質，可以容易地製備出所述的鹽。
式Ⅰ化合物至少有三個不對稱碳原子，因而其存在的形式有純的光學非對映體、非對映體的混合物、非對映體的外消旋化合物或非對映體外消旋化合物的混合物。本發明包括所有形式。非對映體混合物、非對映的外消旋化合物或非對映體外消旋化合物的混合物可以按照常用的方法進行分離，例如採用柱色譜、薄層色譜、高壓液相色譜等方法進行分離。
一組具體的式Ⅰ化合物包括其中R2代表環烷基、環烷基烷基、烷硫基烷基、烷基碘醯基烷基、鏈烯基或，當X代表氮原子和/或R1代表異喹啉基時，R2也代表烷基。
其中X代表-CH-的式Ⅰ化合物是優選的。R1代表吡啶基、特別是3-吡啶基的式Ⅰ化合物也是優選的。優選的R2是環烷基或環烷基烷基，環烷基較好，環丙基最好。優選的R3是咪唑基甲基、吡啶基甲基或噻唑基甲基，吡啶基甲基或噻唑基甲基較好，4-噻唑基甲基最好。優選的R4是環己基甲基。優選的R5是環烷基或烷基，環烷基較好，環丙基最好。
從上述內容明顯可知，X代表-CH-、R1代表3-吡啶基、R2代表環丙基、R3代表4-噻唑基甲基、R4代表環己基甲基、R5代表環丙基的式Ⅰ化合物是最優選的。
優選的式Ⅰ化合物物有(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥丙基]-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺，N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺，(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-α-(4-噻唑基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺，(R，S)-N-[(1S，2R，3S)-1-苄基-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基-甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺，(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-(環丙基甲基)-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺基，
(R或S)-N-[(1S，2R，3R)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-(環丙基甲基)-6-(3-吡啶基)-α-(4-噻唑基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺，和(R，S)-α-烯丙基-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-丙基-6-(3-吡啶基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺。
優選的式Ⅰ化合物還有N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-6-(4-異喹啉基)-8-丙基-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺，(S或R)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-6-(4-異喹啉基)-8-丙基-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺，和(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-羥基丙基]-6-(4-異喹啉基)-8-丙基-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺。
優選的式Ⅰ化合物的例子還有N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-丙基-6-(3-吡啶基)-均三唑並[3，4-f](1，2，4]三嗪-3-乙醯胺，(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-丙基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[3，4-f][1，2，4]三嗪-3-乙醯胺，(S或R)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-丙基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[3，4-f][1，2，4]三嗪-3-乙醯胺，(S或R)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-丙基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[3，4-f][1，2，4]三嗪-3-乙醯胺，(S或R)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-異丁基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基)-均三唑並[3，4-f][1，2，4]三嗪-3-乙醯胺和(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-異丁基-6-(3-吡啶基)-a-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[3，4-f][3，4-f][1，2，4]三嗪-3-乙醯胺。
純的光學非對映體、非對映體的混合物、非對映體的外消旋化合物或非對映體外消旋化合物的混合物等形式的式Ⅰ化合物及其藥學上可接受的鹽可以通過下述方法製備a)通式Ⅱ的化合物
其中R4和R5的定義同上，與通式Ⅲ化合物或其活性衍生物反應，
其中X、R1、R2和R3的定義同上，b)必要時，將獲得的其中R2代表烷硫基烷基的式Ⅰ化合物氧化成相應的其中R2代表烷基磺醯基烷基的式Ⅰ化合物，和/或c)必要時，將非對映體外消旋化合物的混合物拆分為非對映體的外消旋化合物或純的光學非對映體，和/或d)必要時，將非對映體的混合物拆分為純的非對映體，和/或e)必要時，將獲得的化合物轉化為藥學上有用的鹽。
式Ⅱ化合物的醯化作用可以按照已知方法進行。特別適宜的醯化劑是活性的酸衍生物如酯、混合酯、醯囟、酸酐或混合酸酐。反應在0℃至室溫溫度下、在有機溶劑或混合溶劑中進行，所述溶劑在反應條件下是惰性的。所述溶劑包括芳香族烴例如苯、甲苯或二甲苯，氯化烴如二氯甲烷或氯仿，醚類如乙醚、四氫呋喃或二氧六環等。反應在肽化學所常用的反應條件下進行，即在縮合劑存在下進行較好，所述縮合劑如HBTU(0-苯並三唑基-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸鹽)、BOP(苯並三唑-1-基氧-三(二甲基氨基)鏻六氟磷酸鹽)、BOPC(雙(2-氧代-3-噁唑烷基)次膦醯氯)、HOBT(N-羥基苯並三唑)、DCC(二環己基碳化二亞胺)、EDC(N-乙基-N′-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽)等。反應在0℃-50℃下、優選的是在室溫下、在有機溶劑或溶劑混合物中可以容易地進行，所述溶劑在反應條件下是穩定的。本發明優選的溶劑有二甲基甲醯胺、二氯甲烷、乙腈、四氟呋喃等。
R2代表烷硫基烷基的Ⅰ化合物的氧化也可以按已知方法進行。氧化可以按如下方法進行，例如，將其與下述試劑反應過氧化氫，有機過酸如過乙酸、過苯甲酸、過苯二甲酸等，過酯，高碘酸鈉，過一硫酸鉀(在鏈烷醇/水中)等。氧化反應可以在惰性溶劑中方便地進行，所述溶劑如囟代烴，例如氯仿、二氯甲烷、二氯乙烷等。當過氧化氫用作氧化劑時，反應也可以在乙酸中進行。通常，氧化在0℃-30℃溫度下進行，優選的是0℃左右。
式Ⅱ所示的原料是已知的，或者按照類似於製備已知化合物的方法進行製備。
X代表-CH-的式Ⅲ所示的原料見EP-A0，369，743，或者按照類似於製備已知化合物的方法進行製備。
其餘的式Ⅲ所示的化合物是新的，並且是本發明的目的之一。可以從相應的1，2，4-三唑酮開始，按照各種已知的方法以及類似於EP-A0，369，743所介紹的方法進行製備。這些製備方法以及按照EP-A0，369，743的方法被列於下述反應Ⅰ和Ⅱ中。在這些反應中，R代表烷基，R1、R2和R3的定義同上。反應Ⅱ中，式Ⅸ所示的1，2，4-三嗪酮可以按照類似於Heterocyclic Chem.，15，1271(1978)介紹的1，2，4-三嗪酮的製備方法進行製備。
式Ⅰ化合物及其藥學上有用的鹽對生物酶血管緊張肽原酶有抑制作用。後者從腎進入血液，並在那裡引起血管緊張肽原的分裂，生成十肽菌素血管緊張肽Ⅰ，然後，在肺、腎和其它器官中，十肽菌素血管緊張肽Ⅰ被分裂成八肽血管緊張肽Ⅱ。血管緊張肽Ⅱ不信通過動脈的收縮直接增加血壓，而且通過腎上腺釋放鈉離子保持荷爾蒙醛甾酮間接地增加血壓，這還伴隨著細胞外流體體積的增加。這一增加是由於血管緊張肽Ⅱ本身的作用或者是由於其分裂產物七肽血管緊張肽Ⅲ的作用。血管緊張肽原酶的酶活性抑制劑能夠抑制血管緊張肽Ⅰ的生成，因而血管緊張肽Ⅱ的生成量減少。所述活性肽荷爾蒙濃度的降低是血管緊張肽原酶抑制劑能夠降低血壓的真正原因。
血管緊張肽原酶抑制劑的活性可以通過下述體外試驗加以證明。
用純的人體血管緊張肽原酶進行的體外試驗試驗在Eppendorf試管中進行。培養混合物包括(1)100ml人體血管緊張肽原酶的緩衝液A(0.1M磷酸鈉溶液，PH7.4，含0.1%牛血清清蛋白，0.1%疊氮化鈉和1mM乙二胺四乙酸)的溶液，它足以保證每小時每毫升2-3ng血管緊張肽Ⅰ的血管緊張肽原酶活性;(2)145ml緩衝液A;(3)30ml 10mM人體十四肽血管緊張肽原酶培養基(hTD)的10mM鹽酸溶液;(4)15ml二甲基亞碸，其中含或不含抑制劑;(5)10ml 0.03M硫酸羥基吡啶的水溶液。
將一式三份的樣品分別在37℃和4℃下培養3小時。每試驗管用2×100ml樣品，以便於通過RIA(標準放射性免役測定法;醫用固相試驗儀)測量產生的血管緊張肽Ⅰ。用於RIA的抗體的交叉反應性是血管緊張肽Ⅰ100%;血管緊肽Ⅱ0.0013%;hTD(血管緊張肽Ⅰ-Val-Ile-His-Ser-OH)0.09%。血管緊張肽Ⅰ的產量由37℃下和4℃下試驗結果的差值決定。
進行下列對照試驗(a)在37℃下和4℃下培養不含血管緊張肽原酶和抑制劑的hTD樣品。這兩個值之差為血管緊張肽Ⅰ產量的基準值。
(b)在37℃下和4℃下培養含血管緊張肽原酶、但不含抑制劑的hTD樣品。所得的值之差為血管緊張肽Ⅰ產量的最大值。
在每個樣品中，測得的血管緊張肽Ⅰ的產量要減去血管緊張肽產量的基準值。最大值與基準值之差為由血管緊張肽原酶引起的培養基最大水解值(＝100%)。
結果以IC50值的形式給出，它表示酶活性被抑制50%所需的抑制劑濃度。IC50值由分對數-對數圖的線型回歸曲線求得。
試驗得到的值列在下表表化合物 IC50值(nmol/1t)A 51B 2.0C 17D 2.3E 100F 150G 16A＝(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺B＝(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-α-(4-噻唑基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺C＝(R或S)-N-[1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-(環丙基甲基)-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺D＝(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-(環丙基甲基)-6-(3-吡啶基)-α-(4-噻唑基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺E＝(R，S)-N-[(1S，2R，3S)-1-苄基-3-環丙基-2，3-二羥基-丙基]-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺F＝(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-異丁基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[3，4-f][1，2，4]三嗪-3-乙醯胺G＝(R、S)-a-烯丙基-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-丙基-6-(3-吡啶基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺式Ⅰ化合物及其藥學上有用的鹽可以用作藥物，例如，可以以藥用製劑的形式使用。所述藥用製劑可以經腸給藥如口服，例如，製成片劑、包衣片劑、糖衣藥丸、硬和軟明膠膠囊、溶液、乳液或混懸液，經鼻給藥，例如，製成噴鼻劑，或者經直腸給藥，例如製成栓劑。但也可以非腸道給藥，例如肌內給藥或靜脈給藥，例如，製成注射溶液。
式Ⅰ化合物及其藥學上有用的鹽可以與藥學上惰性的無機或有機賦形劑一起加工，製成片劑、包衣片劑、糖衣藥丸和硬明膠膠囊。乳糖、玉米澱粉或其衍生物、滑石粉、硬脂酸或其鹽等可以用作例如賦形劑，用於製備片劑、糖衣藥丸和硬明膠膠囊。
適用於軟明膠膠囊的賦劑例如植物油、蠟、脂肪、半固體和液體多元醇等。
適用於製備溶液和糖漿的賦形劑例如水、多元醇、蔗糖、轉化糖、葡萄糖。
適用於注射液的賦形劑例如水、醇、多元醇、甘油、植物油等。
適用於栓劑的賦形劑例如天然油或硬化油、蠟、脂肪、半液態或液態多元醇等。
此外，藥用製劑還可含防腐劑、增溶劑、增稠劑、穩定劑、潤溼劑、乳化劑、甜味劑、著色劑、調味劑、鹽(用於改變滲透壓)、緩衝劑、塗覆劑或抗氧劑。它們還可含其它有治療價值的物質。
按照本發明，式Ⅰ化合物及其藥學上有用的鹽可以用於控制或防止高血壓和心機能不全。劑量不以在很大的範圍內變化，當然，劑量應適合於每個特定病例的具體需要。總之，如果口服給藥，日劑量約為3mg-3g就夠了，優選的約為10mg-1g，例如每人約300mg，分1-3次服用較好，每次的量可以相同，但是，必要時，也可以超過上述規定的上限值。通常，兒童比成人劑量減半。
下列實施例用來說明本發明，但並不是對本發明的限制。所有溫度均採用攝氏度。
實施例1將0.587g(1.55mmol)HBTU和0.215ml(1.55mmol)三乙胺加入0.600g(1.55mmol)rac-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸和0.352g(1.55mmol)(1S，2R，3S)-3-氨基-4-環己基-1-環丙基-1，2-丁二醇(EP-A 0，332，008)的乙腈(30ml)溶液中，得到的混懸液在室溫下攪拌12小時。加入飽和氯化鈉溶液後，混合物用乙酸乙酯提取三次。有機層用飽和碳酸氫鈉溶液、水和飽和氯化鈉溶液洗滌，用硫酸鎂乾燥、過濾，減壓蒸發。矽膠色譜分離(二氯甲烷/甲醇9∶1)後，得到0.240g純的、極性較小的差向異構體(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺，MS(FAB)596(M+H)，和0.160g純的、極性較大的(S或R)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺，MS(FAB)596(M+H)+，均為無色泡沫體。
原料rac-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸按下述方法製備(a)在10℃下，將49g(240mmol)DCC加入25.18g(185mmol)2-環丙基-2-氧代乙酸的鈉鹽(Collect.Czech.Chem.Commun.40，1038(1975))、38.28g(185mmol)3-(氨基乙醯基)吡啶二鹽酸鹽(J.Chem.Soc.1938，753)和25.34g(185mmol)HOBT的750ml二氯甲烷的混懸液中，混合物在室溫下攪拌過液。濾去產生的脲，濾液用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，隨後用飽和氯化鈉溶液洗滌，用硫酸鎂乾燥，用硫酸鎂乾燥，過濾並減壓蒸發。矽膠色譜分離(二氯甲烷/甲醇97∶3)，得到21gN-[2-氧代-2-(3-吡啶基)乙基]-α-氧環丙基乙醯胺，無色晶體，MS(EI)233(M+H)+。
(b)用8.90g(116mmol)乙酸處理9.00g(38.76mmol)N-[2-氧代-2-(3-吡啶基)乙基]-α-氧環丙基乙醯胺在80ml乙醇中的溶液，混合物加熱回流2小時。將溶劑蒸發，剩餘物溶於二氯甲烷中。溶液依次用水、飽和碳酸氫鈉溶液、水和飽和氯化鈉溶液洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾，然後減壓蒸發。矽膠色譜分離(二氯甲烷/甲醇9∶1)並用乙醚重結晶後，得到6.00g3-環丙基-5-(3-吡啶基)-2-(1H)吡嗪酮，黃色粉末，m.p.168-170℃，MS(EI)213M。
(C)將6.00g(28.13mmol)3-環丙基-5-(3-吡啶基)-2-(1H)-吡嗪酮在50ml三氯氧化磷中的溶液加熱回流2小時。淺褐色的溶液在旋轉蒸發器上減壓蒸發，蒸餘物倒入冰水中。用二氯甲烷提取、硫酸鈉乾燥、過濾並減壓蒸發後，得到5.2g 2-氯-3-環丙基-5-(3-吡啶基)吡嗪，無色粉末，MS(EI)230M+。
(d)用7ml(140mmol)水合肼處理5.20g(22.4mmol)2-氯-3-環丙基-5-(3-吡啶基)吡嗪的乙醇(50ml)溶液，混合物加熱回流7小時。冷卻至室溫，抽濾出沉澱後，得到2.7g 3-環丙基-2-肼基-5-(3-吡啶基)吡嗪，黃色閃光片晶，m.p.179-181℃，MS(EI)227M+。
(e)將0.760g(4mmol)對甲苯磺酸加入0.900g(4mmol)3-環丙基-2-肼基-5-(3-吡啶基)吡嗪和1.5g(6mmol)(3-吡啶基甲基)丙二酸二乙酯(Arch.Pharm.308，663(1975))的二甲苯(70ml)溶液中，混合物在水分離器中加熱回流2小時。減壓蒸去二甲苯後，剩餘物溶於二氯甲烷中。有機層用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，隨後用飽和氯化鈉溶液洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾，減壓蒸發。經矽膠色譜分離(二氯甲烷/甲醇13∶1)後，得到0.800g rac-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸乙酯，無色油狀物(Rf0.33，矽膠，二氯甲烷/甲醇，9∶1)。
(f)用10ml 2N氫氧化鈉溶液處理0.300g(0.724mmol)rac-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸乙酯乙醇(20ml)溶液，混合物在室溫下攪拌6小時。然後加入10ml 2N鹽酸，混合物蒸發後，剩餘物分配在10ml水和50ml 10∶1二氯甲烷和甲醇的混合物中。有機相用硫酸鎂乾燥，過濾，減壓蒸發。得到0.258g rac-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸，無色、無定形粉末，MS(EI)342(M-CO2)+。
實施例2按類似於實施例1的方法，製得下述化合物由rac-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-α-(4-噻唑基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸和(1S，2R，3S)-3-氨基-4-環己基-1-環丙基-1，2-丁二醇製得(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-α-(4-噻唑基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺，MS(FAB)602(M+H)+，和(S或R)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基]-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-α-(4-噻唑基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺，MS(FAB)602(M+H)+，均為無色泡沫體;
由8-環丙基-6-(3-吡啶基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸和(1S，2R，3S)-3-氨基-4-環己基-1-環丙基-1，2-丁二醇，製得N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪基-3-乙醯胺，MS(FAB)505(M+H)+，無色泡沫體;
由rac-8-(環丙基甲基)-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸和(1S，2R，3S)-3-氨基-4-環己基-1-環丙基-1，2-丁二醇，製得(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-(環丙基甲基)-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺，MS(FAB)610(M+H)+，和(S或R)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-(環丙基甲基)-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺，MS(FAB)610(M+H)+，均為無色泡沫;
由rac-8-(環丙基甲基)-6-(3-吡啶基)-α-(4-噻唑基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸和(1S，2R，3S)-3-氨基-4-環己基-1-環丙基-1，2-丁二醇，製得(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-(環丙基甲基)-6-(3-吡啶基)-α-(4-噻唑基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺，MS(ISP)616(M+H)+，和(S或R)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-(環丙基甲基)-6-(3-吡啶基)-α-(4-噻唑基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺MS(ISP)616(M+H)+，均為無色泡沫體;
由8-(環丙基甲基)-6-(3-吡啶基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸和(1S，2R，3S)-3-氨基-4-環己基-1-環丙基-1，2-丁二醇，製得N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-(環丙基甲基)-6-(3-吡啶基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺，MS(ISP)519(M+H)+，無色泡沫體;
由rac-6-(4-異喹啉基)-8-丙基-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸和(1S，2R，3S)-3-氨基-4-環己基-1-環丙基-1，2-丁二醇，製得(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-6-(4-異喹啉基)-8-丙基-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺，MS(FAB)648(M+H)+，和(S或R)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-6-(4-異喹啉基)-8-丙基-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺，MS(FAB)648(M+H)+，均為無色泡沫體;
由6-(4-異喹啉基)-8-丙基-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸和(1S，2R，3S)-3-氨基-4-環己基-1-環丙基-1，2-丁二醇，製得N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-6-(4-異喹啉基)-8-丙基-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺，MS(EI)556M+，無色泡沫體，由rac-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸和(1S，2R，3S)-3-氨基-1-環丙基-4-苯基-1，2-丁二醇，製得(R，S)-N-[(1S，2R，3S)-1-苄基-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺，MS(FAB)590(M+H)+，無色泡沫體(1∶1差向異構體混合物);
由8-丙基-6-(3-吡啶基)-均三唑並[3，4-f][1，2，4]三嗪-2-乙酸和(1S，2R，3S)-3-氨基-4-環己基-1-環丙基-1，2-丁二醇，製得N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-丙基-6-(3-吡啶基)-均三唑並[3，4-f][1，2，4]三嗪-3-乙醯胺，MS(FAB)508(M+H)+，無色泡沫體;
由rac-8-丙基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[3，4-f][1，2，4]三嗪-3-乙酸，製得(1S，2R，3S)-3-氨基-4-環己基-1-環丙基-1，2-丁二醇，製得(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-丙基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[3，4-f][1，2，4]三嗪-3-乙醯胺，MS(FAB)599(M+H)+，製得(S或R)-N-[(1S，2R，3S)-1-環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-丙基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[3，4-f][1，2，4]三嗪-3-乙醯胺，MS(FAB)599(M+H)+，均為無色泡沫體;
由rac-8-異丁基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[3，4-f][1，2，4]三嗪-3-乙酸和(1S，2R，3S)-3-氨基-4-環己基-1-環丙基-1，2-丁二醇，製得(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-異丁基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[3，4-f][1，2，4]三嗪-3-乙醯胺，MS(FAB)613(M+H)+，(S或R)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-異丁基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[3，4-f][1，2，4]三嗪-3-乙醯胺，MS(FAB)613(M+H)+，均為無色泡沫體。
原料酸按下述方法製備rac-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-α-(4-噻唑基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸按類似於實施例1(e，f)的方法，將3-環丙基-2-肼基-5-(3-吡啶基)吡嗪與(4-噻唑基甲基)丙二酸二乙酯(EP-A 0，307，837)縮合，隨後鹼性皂化，得到rac-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-α-(4-噻唑基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸，無色粉末(Rf0.161，矽膠，二氯甲烷/甲醇，4∶1)。
8-(環丙基-6-(3-吡啶基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸按類似於實施例1(e，f)的方法，將3-環丙基-2-肼基-5-(3-吡啶基)吡嗪與丙二酸二乙酯縮合，隨後鹼性皂化，得到8-環丙基-6-(3-吡啶基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸，無色粉沫，MS(EI)251(M-CO2)+。
rac-8-(環丙基甲基)-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸按類似於實施例1(a-f)的方法，將2-氧代-3-環丙基丙酸(J.Med.Chem.30，1074(1987))與3-(氨基乙醯基)吡啶二鹽酸鹽偶合，得到N-[2-氧代-2-(3-吡啶基)乙基]-α-氧代-3-環丙基丙醯胺，無色粉末，MS(EI)218(M-CO)+，然後在乙醇中與氯化銨反應，得到3-(環丙基甲基)-5-(3-吡啶基)-2-(1H)-吡嗪酮，MS(EI)227M+，無色粉末。用三氯氧化磷氯化處理，得到2-氯-3-(環丙基甲基)-5-(3-吡啶基)吡嗪，棕灰色粉末，MS(EI)245M+，與水合肼反應，得到3-(環丙基甲基)-2-肼基-5-(3-吡啶基)吡嗪，淡黃色粉末，m.p.161-163℃，MS(EI)241M+。與(3-吡啶基甲基)丙二酸二乙酯縮合，隨後鹼性皂化，得到rac-8-(環丙基甲基)-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸，無色粉末，MS(ISN)400(M-H)-。
rac-8-(環丙基甲基)-6-(3-吡啶基)-α-(4-噻唑基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸按類似於實施例1(e，f)的方法，將3-(環丙基甲基)-2-肼基-5-(3-吡啶基)吡嗪與(4-噻唑基甲基)丙二酸二乙酯縮合，隨後鹼性皂化，得到rac-8-(環丙基甲基)-6-(3-吡啶基)-α-(4-噻唑基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸，無色粉末，MS(ISN)405(M-H)-。
8-(環丙基甲基)-6-(3-吡啶基-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸按類似於實施例1(e，f)的方法，將3-(環丙基甲基)-2-肼基-5-(3-吡啶基)吡嗪與丙二酸二乙酯縮合，得到8-(環丙基甲基)-6-(3-吡啶基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸乙酯，無色粉末，m.p.140-141℃，MS(EI)337M+。隨後鹼性皂化，得到8-(環丙基甲基)-6-(3-吡啶基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸，無色粉末(Rf0.12，二氯甲烷/甲醇，4∶1)。
rac-6-(4-異喹啉醯基)-8-丙基-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸按類似於實施例1(b-f)的方法，在乙醇中將N-[(異喹啉基羰基)甲基]-2-氧戊醯胺與氯化銨反應，得到5-(4-異喹啉基)-3-丙基-2(1H)-吡嗪酮，無色粉末，MS(EI)265M+。用三氯氧化磷氯化處理，得到4-(5-氯-6-丙基-2-吡嗪基)異喹啉，MS(EI)283M+，無色粉末，與水合肼反應，得4-(5-肼基-6-丙基-2-吡嗪基)異喹啉，淡黃色粉末，m.p.161-163℃，MS(EI)279M+。與(3-吡啶基甲基)丙二酸二乙酯縮合，隨後鹼性皂化，得到rac-6-(4-異喹啉基)-8-丙基-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸，無色粉末，MS(EI)394(M-CO2)+。
rac-6-(4-異喹啉基)-8-丙基-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸按類似於實施例1(e，f)的方法，將4-(5-肼基-6-丙基-2-吡嗪基)異喹啉與丙二酸二乙酸縮合，隨後鹼性皂化，得到rac-6-(4-異喹啉基)-8-丙基-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸，無色粉末，MS(EI)303(M-CO2)+。
原料N-[(異喹啉基羰基)甲基-2-氧戊醯胺按下述方法製備按類似於Org.Synth.64，19(1986)所述製備2，2-二乙氧基-2-(4-吡啶基乙基)二胺的方法，從4-乙醯基異喹啉(J.Am.Chem.Soc.67，1268(1945))開始，將其與羥胺反應，製備其甲苯磺酸酯，隨後用乙醇鈉重排，得到2，2-二乙氧基-2-(4-異喹啉基)乙胺，m.p.236℃(分解)。
將0.8ml 2-氧-正戊酸、2.7ml(15.5mol)三乙胺和1.07g(7.8mmol)HOBT加入2.6g(7.8mmol)2，2-二乙氧基-2-(4-異喹啉基)乙胺的二氯甲烷(40ml)混懸液中，隨後用1.59g DCC的8ml二氯甲烷溶液處理反應混合物。24小時後，濾去生成的脲，濾液用飽和碳酸氫鈉溶液和飽和氯化鈉溶液洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾，減壓蒸發。矽膠色譜分離(二氯甲烷/乙醚，9∶1)，得到1.5g黃色油狀物，將其溶於50ml 2N鹽酸中，室溫下攪拌24小時。減壓蒸去溶劑，剩餘物用甲苯共沸乾燥數次。得到1.1g N-[(4-異喹啉基羰基)甲基]-2-氧戊醯胺鹽酸鹽，淺褐色粉末，MS(EI)256(M-CO)。
rac-8-丙基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[3，4-f][1，2，4]三嗪-3-乙酸按類似於實施例1(C-f)的方法，從5-丙基-3-(3-吡啶基)-as-三嗪-6(1H)-酮開始，用三氯氧化磷將其氯化，得到6-氯-5-丙基-3-(3-吡啶基)-as-三嗪，無色粉末，m.p.74-76℃，MS(EI)234M+，與肼反應，得到6-肼基-5-丙基-3-(3-吡啶基)-as-三嗪，黃色粉末，MS(EI)230M+。與(3-吡啶基甲基)丙二酸二乙酯縮合，隨後鹼性皂化，得到rac-8-丙基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[2，4-f][1，2，4]三嗪-3-乙酸，無色粉末，MS(FAB)346(M-CO+H)+。
8-丙基-6-(3-吡啶基)-均三唑並[3，4-f][1，2，4]三嗪-3-乙酸按類似於實施例1(e，f)的方法，將6-肼基-5-丙基-3-(3-吡啶基)-as-三嗪與丙二酸二乙酯縮合，隨後鹼性皂化，得到8-丙基-6-(3-吡啶基)-均三唑並[3，4-f][1，2，4]三嗪-3-乙酸，無色粉末，MS(FAB)299(M+H)+。
原料5-丙基-3-(3-吡啶基)-as-三嗪-6-(1H)-酮的製備方法如下將6.50g(36mmol)D，L-戊氨酸乙酯鹽酸鹽的10ml水溶液加入6.4g(36mmol)吡啶-3-carboximidate甲酯(J.Org.Chem.26，416(1961))的乙醚(10ml)混懸液中，混合物在室溫下攪拌3小時。加入50ml二氯甲烷後，分出有機相，用硫酸鈉乾燥，過濾，減壓蒸發。得到的淡黃色油狀物(6.05g)與1.5ml(30mmol)水合肼的20ml異丙醇溶液一起加熱回流2小時。冷至室溫後，混合物物用10ml水處理，用二氯甲烷提取。有機相用硫酸鎂乾燥，過濾，減壓蒸發。矽膠色譜分離(二氯甲烷/甲醇，9∶1)後，得到2.50g rac-2.5-二氫-5-丙基-3-(3-吡啶基)-as-三嗪-6-(1H)-酮，無色粉末，m.p.144-146℃，MS(EI)218M+。
將6.4ml(10.5mmol)10%Javelle水加入1.09g(5mmol)rac-2.5-二氫-5-丙基-3-(3-吡啶基)-as-三嗪-6-(1H)-酮的10ml 1N氫氧化鈉溶液中，邊加邊用冰冷卻，隨後混合物在室溫下攪拌12小時。用二氯甲烷提取，用硫酸鈉乾燥，過濾，減壓蒸發，得到0.58g 5-丙基-3-(3-吡啶基)-as-三嗪-6(1H)-酮，無色粉末，m.p.160-162℃，MS(EI)216M+。
rac-8-異丁基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[3，4-f][1，2，4]三嗪-3-乙酸按類似於實施例1(c-f)的方法，從5-異丁基-3-(3-吡啶基)-as-三嗪-6(1H)-酮開始，用三氯氧化磷氯化，得到6-氯-5-異丁基-3-(3-吡啶基)-as-三嗪，無色粉末，m.p.63-65℃。MS(EI)248M，將其與肼反應，得到6-肼基-5-異丁基-3-(3-吡啶基)-as-三嗪，黃色粉末，m.p.126-129℃，MS(EI)244M。與(3-吡啶基甲基)丙二酸二乙酯縮合，隨後鹼性皂化，得到rac-8-異丁基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[3，4-f][1，2，4]三嗪-3-乙酸，無色粉末，MS(FAB)359(M-CO2+H)+。
原料5-異丁基-3-(3-吡啶基)-as-三嗪-6(1H)-酮的製法如下用D，L-亮氨酸乙酯鹽酸鹽代替D，L-戊氨酸乙酯鹽酸鹽，按類似於製備5-丙基-3-(3-吡啶基)-as-三嗪-6(1H)-酮的方法，製得5-異丁基-3-(3-吡啶基)-as-三嗪-6-(1H)-酮，無色粉末，m.p.141-144℃，MS(EI)230M+。
原料(1S，2R，3S)-3-氨基-1-環丙基-4-苯基-1，2-丁二醇的製法如下(1S，2R，3S)-3-氨基-1-環丙基-4-苯基-1，2-丁二醇在輕度回流下，在30分鐘的時間內，將9.96ml(124.5mmol)環丙基溴的乙醚(100ml)溶液滴加到3.03g(124.5mmol)鎂與10ml無水乙醚的混合物中，隨後加熱回流2.5小時。隨後在回流條件下，在45分鐘時間內，將6.25g(22.63mmol)[1S，2R]-1-苄基-2-氰基-2-羥基乙基]氨基甲酸叔丁酯(EP-A 0，266，950)滴加到反應混合物中，然後再加熱回流2.5小時。最後，將混合物冷卻(10℃)，滴加10%檸檬酸，混合物用乙醚提取兩次。有機相用水和飽和氯化鈉溶液洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾，減壓蒸餾。矽膠色譜分離(甲苯/乙酸乙酯，9∶1)後，得到[(1S，2R)-1-苄基-2-(環丙基羰基)-2-羥基乙基]氨基甲酸叔丁酯，淺黃色固體，MS(EI)246(M-C3H9O)+。
將2.83g(8.77mmol)[(1S，2R)-1-苄基-2-(環丙基羰基)-2-羥基乙基]氨基甲酸叔丁酯溶於130ml二氯甲烷中製成溶液，將3ml乙酸加入其中，然後在0-10℃下，用0.332mg(8.78mmol)硼氫化鈉分批處理該混合物。反應溶液在5℃下繼續攪拌2小時，然後將其分配在2N碳酸氫鈉溶液和二氯甲烷中。分出有機相，用水和飽和氯化鈉溶液洗滌，硫酸鎂乾燥，過濾，減壓蒸發。剩餘物用乙醚/己烷結晶，得到2.1g[(1S，2R，3S)]-1-苄基-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]氨基甲酸叔丁酯，無色針狀晶體，m.p.83-85℃。
用20ml 2N鹽酸處理2.0g(6.23mmol)[(1S，2R，3S)-1-苄基-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]氨基甲酸叔丁酯的甲醇(20ml)溶液，將溶液加熱至50℃，保持90分鐘。冷卻後混合物用40ml 1N氫氧化鈉溶液中和，然後減壓下，用旋轉蒸發器濃縮至幹。剩餘物分配在水和二氯甲烷中。有機相用水和飽和氯化鈉溶液洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾，減壓蒸發。得到(1S，2R，3S)-3-氨基-1-環丙基-4-苯基-1，2-丁二醇，白色結晶固體，MS(EI)150(M-C4H8O)+。
實施例3按類似於實施例1的方法，製得了下述化合物從rac-8-(3-甲基硫烷基丙基)-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑[4，3-a]吡嗪-3-乙酸和(1S，2R，3S)-3-氨基-4-環己基-1-環丙基-1，2-丁二醇開始，製得(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-(3-甲基硫烷基基丙基)-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺，MS(FAB)644(M+H)+，和(S或R)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-(3-甲基硫烷基丙基)-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-α]吡嗪-3-乙醯胺，MS(FAB)644(M+H)+，無色泡沫;
從rac-α-烯丙基-8-丙基-6-(3-吡啶基)-均三唑並[4，3-α]吡嗪-3-乙酸和(1S，2R，3S)-3-氨基-4-環己基-1-環丙基-1，2-丁二醇開始，製得(R，S)-α-烯丙基-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-丙基-6-(3-吡啶基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺，MS(FAB)547，(M+H)+，無色泡沫體。
原料酸按下述方法製備rac-8-(3-甲基硫烷基丙基)
-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸按類似於實施例1(a-f)的方法，將5-(甲基硫烷基)-2-氧戊酸(J.Med.Chem.30，1074(1987))與3-(氨基乙醯基)吡啶二鹽酸鹽偶合，得到N-[2-氧代-2-(3-吡啶基)乙基]-α-氧代-5-甲基硫烷基戊醯胺，無色粉末，MS(EI)280M+，在乙酸中與氯化銨反應，得到3-(3-甲基硫烷基丙基)-5-(3-吡啶基)-2(1H)-吡嗪酮，MS(EI)261M+，無色粉末。用三氯氧化磷氯化，得到2-氯-3-(3-甲基硫烷基丙基)-5-(3-吡啶基)吡嗪，棕灰色粉末，MS(EI)244(M-Cl)+，與水合肼反應，得到2-肼基-3-(3-甲基硫烷基丙基)-5-(3-吡啶基)吡嗪，淡黃色粉末，MS(EI)275M。與(3-吡啶基甲基)丙二酸二乙酯縮合，隨後鹼性皂化，得到rac-8-(3-甲基硫烷基丙基)-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸，無色泡沫體，MS(EI)390(M-CO2)+。
rac-α-烯丙基-8-丙基-6-(3-吡啶基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸在0℃下，將135mg(3.1mmol)氫化鈉一次加入975mg(3mmol)8-丙基-6-(3-吡啶基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸乙酯(EP-A 0，369，743)的二甲基甲醯胺(25ml)溶液中。等到氫氣放出完全後，將0.25ml(3mmol)烯丙基溴的5ml二甲基甲醯胺溶液緩慢滴加到反應混合物中，得到溶液攪拌2小時。反應溶液倒入冰水中，然後用二氯甲烷提取三次。有機相用硫酸鎂乾燥，過濾，減壓蒸發。矽膠色譜分離(二氯甲烷/甲醇25∶1)後，得到800mg rac-α-烯丙基-8-丙基-6-(3-吡啶基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸乙酯，無色油狀物，MS(EI)365M，按類似於實施例1(f)的方法皂化，得到rac-α-烯丙基-8-丙基-6-(3-吡啶基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙酸，MS(EI)293(M-CO2)+，無色粉末。
實施例40℃下，將62.9mg(0.311mmol)間氯過苯甲酸(85%)加入100mg(0.115mmol)(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-(3-甲基硫烷基丙基)-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺的二氯甲烷(2ml)溶液中，混合物在室溫下攪拌12小時。反應溶液用10ml二氯甲烷稀釋，隨後用10%亞硫酸鈉溶液、飽和碳酸氫鈉溶液和水洗滌。有機相用硫酸鎂乾燥，過濾，減壓蒸發。矽膠色譜分離(二氯甲烷/甲醇/氨110∶10∶1)後，得到50mg(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-(3-甲磺醯基丙基)-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺，無色晶體，MS(ISP)676(M+H)+。
按類似於上述的方法，由(S或R)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-(3-甲基硫烷基丙基)-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺製得(S或R)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-(3-甲基磺醯基丙基)-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺，無色晶體，MS(ISP)676(M+H)+。
實施例A口服水混懸液組成(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-α-(4-噻唑基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺(製成直徑為數微米的小粒子) 5.0g吐溫-80羥丙基甲基纖維素 1.0g調味劑 適量對羥基苯甲酸甲酯 0.2g對羥基苯甲酸丙酯 0.04g水 加至100ml實施例B組成(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-α-(4-噻唑基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺甲磺酸鹽 10g對羥基苯甲酸甲酯 0.2g對羥基苯甲酸丙酯 0.04g調味劑 適量水 加至100ml實施例C組成1)(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-α-(4-噻唑基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺甲磺酸鹽 200mg2)無水乳糖 160mg3)羥丙基甲基纖維素 18mg4)羧甲基纖維素鈉 20mg5)硬脂酸鎂 2mg片劑重400mg製備方法將1)和2)強烈攪拌。然後混合物用3)的水溶液浸溼捏和，得到物質造粒，乾燥，過篩。得到的粒子與4)和5)混合，然後壓成大小適宜的片。
實施例D膠囊組成1)(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-
3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-α-(4-噻唑基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺甲磺酸鹽 200mg2)無水乳糖 160mg3)羥丙基甲基纖維素 18mg4)羧甲基纖維素鈉 20mg5)硬脂酸鎂 2mg膠囊填充物重 400mg製備方法將1)和2)強烈混合。然後混合物用3)的水溶液浸溼並捏和，得到的物質造粒，乾燥，過篩，得到的粒子與4)和5)混合，然後將混合物填入尺寸適宜的膠囊中。
實施例E注射溶液組成 1ml(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-α-(4-噻唑基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺甲磺酸鹽 20mg無熱源D-甘露糖醇 10mg注射用水 加至1.0ml製備方法將活性物質和甘露糖醇溶於氮中毒的水中，隨後按常規方法冷幹。
實施例F按實施例A-E所述的方法，用下述同樣優選的化合物及其藥學上有用的鹽，可以製備相應的草本製劑(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺，(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-(環丙基甲基)-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺，(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-(環丙基甲基)-6-(3-吡啶基)-α-(4-噻唑基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺。
權利要求
1.以純的光學非對映體、非對映體的混合物、非對映體的外消旋化合物或非對映體外消旋化合物的混合物形式存在的通式Ⅰ的胺基酸衍生物及其藥學上有用的鹽的製備方法，式Ⅰ如下
其中X代表氮原子或-CH-，R1代表苯基、吡啶基或異喹啉基，R2代環烷基、環烷基烷基、烷硫基烷基、烷基磺醯基烷基、鏈烯基，或者，其中X代表氮原子和/或R1代表異喹啉基和/或R3代表鏈烯基、烷基，R3代表氫、烷基、鏈烯基、咪唑基甲基、吡啶基甲基、噻唑基甲基或苄基，R4代表環己基甲基或苄基，R5代表環烷基、烷基或雜環基烷基。該方法包括a)通式Ⅱ化合物
其中R4和R5的定義同上，與通式Ⅲ化合物或其活性衍生物反應，
其中X、R1、R2和R3的定義同上，b)必要時，將獲得的其中R2代表烷硫基烷基的式Ⅰ化合物氧化成相應的其中R2代表烷基磺醯基烷基的式Ⅰ化合物，和/或c)必要時，將非對映體外消旋化合物的混合物拆分為非對映體的外消旋化合物或純的光學非對映體，和/或d)必要時，將非對映體的混合物拆分為純的非對映體，和/或e)必要時，將獲得的化合物轉化為藥學上有用的鹽。
2.按權利要求1或2的方法，其中R2代表環烷基、環烷基烷基、烷硫基烷基、烷基磺醯基烷基、鏈烯基，或者，當X代表氮原子和/或R1代表異喹啉基時，R2也可代表烷基。
3.按權利要求1或2的方法，其中X代表-CH-。
4.按權利要求1-3的任一方法，其中R1代表吡啶基，優選的是3-吡啶基。
5.按權利要求1-4的任一方法，其中R2代表環烷基或環烷基烷基，優選的是環烷基，環丙基最好。
6.按權利要求1-5的任一方法，其中R3代表咪唑基甲基、吡啶基甲基或噻唑基甲基，優選的是吡啶基甲基或噻唑基甲基，4-噻唑基甲基最好。
7.按權利要求1-6的任一方法，其中R4代表環己基甲基。
8.按權利要求1-7的任一方法，其中R5代表環烷基烷基或烷基，優選的是環烷基，環丙基最好。
9.按權利要求1-8的任一方法，其中X代表-CH-，R1代表3-吡啶基，R2代表環丙基，R3代表4-噻唑基甲基，R4代表環己基甲基，R5代表環丙基。
10.按權利要求2的方法，製備(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺。
11.按權利要求2的方法，製備N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-α-(4-噻唑基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺。
12.按權利要求2的方法，製備(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-α-(4-噻唑基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺。
13.按權利要求2的方法，製備(R.S)-N-[(1S，2R，3S)-1-苄基-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-環丙基-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺。
14.按權利要求2的方法，製備(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-(環丙基甲基)-6-(3-吡啶基)-α-(3-吡啶基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺。
15.按權利要求2的方法，製備(R或S)-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-(環丙基甲基)-6-(3-吡啶基)-α-(4-噻唑基甲基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺。
16.按權利要求1的方法，製備(R，S)-α-烯丙基-N-[(1S，2R，3S)-1-(環己基甲基)-3-環丙基-2，3-二羥基丙基]-8-丙基-6-(3-吡啶基)-均三唑並[4，3-a]吡嗪-3-乙醯胺。
17.一種藥物的製備方法，具體地說是用來控制或預防高血壓和心機能不全的藥物的製備方法，該方法包括將一種以純的光學非對映體、非對映體的混合物、非對映體外消旋化合物或非對映體外消旋化合物的混合物形式存在的權利要求1所述的通式Ⅰ的胺基酸衍生物或其藥學上有用的鹽引入草本製劑中。
18.一種含以純的光學非對映體、非對映體的混合物、非對映體外消旋化合物或非對映體外消旋化合物的混合物形式存在的權利要求1所述的通式Ⅰ的胺基酸衍生物或其藥學上有用的鹽和治療學上惰性的賦形劑的藥物。
19.一種用於控制或預防高血壓和心機能不全的藥物，所述藥物含以純的光學非對映體、非對映體的混合物、非對映體外消旋化合物或非對映體外消旋化合物的混合物形式存在的權利要求1所述的式Ⅰ胺基酸衍生物或其藥學上有用的鹽和治療學上惰性的賦形劑。
20.權利要求1所述的以純的光學非對映體、非對映體的混合物、非對映體的外消旋化合物或非對映體外消旋化合物的混合物形式存在的式Ⅰ胺基酸衍生物或其藥學上有用的鹽作為控制或預防高血壓和/或心機能不全的藥物的用途。
21.以純的光學非對映體、非對映體的混合物、非對映體的外消旋化合物或非對映體外消旋化合物的混合物形式存在的式Ⅰ胺基酸衍生物及其藥學上有用的鹽，按權利要求1的方法或明顯的化學上等價的方法製備，式Ⅰ如下
其中X代表氮原子或-CH-，R1代表苯基、吡啶基或異喹啉基，R2代環烷基、環烷基烷基、烷硫基烷基、烷基磺醯基烷基、鏈烯基，或者，其中X代表氮原子和/或R1代表異喹啉基和/或R3代表鏈烯基、烷基，R3代表氫、烷基、鏈烯基、咪唑基甲基、吡啶基甲基、噻唑基甲基或苄基，R4代表環己基甲基或苄基，R5代表環烷基、烷基或雜環基烷基。
22.如前所述的發明。
23.下列通式的化合物
其中R1代表苯基、吡啶基或異喹啉基，R2代表環烷基、環烷基烷基、烷硫基烷基、烷基磺醯基烷基、鏈烯基或烷基，R3代表氫、烷基、鏈烯基、咪唑基甲基、吡啶基甲基、噻唑基甲基或苄基。
全文摘要
以純的光學非對映體、非對映的混合物、非對映體的外消旋化合物或非對映體外消旋化合物的混合物形式存在的式I化合物及其藥學上有用的鹽，它們對生物酶血管緊張肽原酶有抑制作用，因而可以用作藥學製劑，用來控制或預防高血壓和心機能不全。可以通過將式II的氨基二醇與相應的酸或其活性衍生物反應製得。
文檔編號C07D487/04GK1072413SQ9211366
公開日1993年5月26日 申請日期1992年11月18日 優先權日1991年11月19日
發明者H·施塔德勒, E·維爾拉, W·沃斯爾 申請人:霍夫曼-拉羅奇有限公司