前列地爾脂質體組合藥物配方及製備方法和用途的製作方法

2023-09-20 23:38:20 3

專利名稱：前列地爾脂質體組合藥物配方及製備方法和用途的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種大工業化生產脂質體組合藥物配方及製備方法，其特徵是，發明主題是用溶解超濾_噴霧乾燥_分子分散包衣_水化制粒_冷凍乾燥法，以統一的配方、工藝、設備既可大工業化生產脂質體藥物注射劑，又可大工業化生產脂質體藥物口服製劑。
背景技術：
我國製藥技術，原料藥製備技術和國際先進水平差距僅5年以內，有的已達到或超過國際先進水平，製劑技術要落後國際先進水平20年。現大量的是生產二代普通製劑， 而三代緩釋、控釋劑，部分藥廠在生產，尤其是四代脂質體等靶向製劑，目前大量的僅處於實驗室研究階段。原因有1、現有生產、科研製備脂質體藥物技術注射劑與口服製劑配方、工藝、設備不統一，既浪費資源、能源，投資大，又質量不高，汙染環境。2、現有技術中可能使脂質體藥物工業化生產的方法有高壓勻質法、超聲波法、有機溶劑乾燥法、噴霧乾燥法、流化床包衣法、單相溶液冷凍乾燥法。高壓勻質法及超聲波法粒徑可控，但是高能破碎，對原料藥有破壞；後四種方法對粒徑不可控且粒徑分布不集中， 有機溶劑殘留，有洩漏、沉澱、凝聚、磷脂腐敗等質量問題；3、現有脂質體製備方法使脂質體藥物載體的包封率不能達100%，各批次波動、變化大；洩漏率大，失去脂質體藥物意義；4、生產過程折騰多，耗能費時，設備投資大，處方、工藝不穩靠、不成熟，導致製劑質量不可控、不穩定、重現性差；5、滅菌、除熱原方法不當，全程無菌、無熱原操作難以保障，對脂質體藥物缺乏高度無菌觀念，致使脂質體藥物在細菌侵蝕下腐敗，包封率遞降，洩漏率遞增，有效期極短，幾乎失去藥用價值；6、注射劑不溶解性粒子數及粒徑超標；7、原料藥、磷脂及輔料、溶劑選材大多沒有國家藥品質量標準，有專利也批不了新藥證書及生產批文，註冊難度很大，時間很長；8、脫離中國實情，從開發到得到脂質體新藥生產批文，花費近10年時間，耗資 2000萬元以上，再好的藥品發明專利，絕大多企業不敢投資開發。可見，在國家進行醫療改革及國家基本藥物制度時期，從已經進入國家基本藥物二代製劑中選銷量大產品提升到第四代的脂質體製劑，進行製劑技術創新，消除其副作用及不良反應，這樣藥品銷量大，投資回收時間短。達到安全、有效、優質、經濟這一基本原則。

發明內容
本發明目的是克服上述現有技術的缺陷。本發明的主題是用溶解超濾_噴霧乾燥_分子分散包衣_水化制粒_冷凍乾燥法，以統一的配方、工藝、設備既可大工業化生產脂質體藥物注射劑，又可大工業化生產脂質體藥物口服製劑。提供工業化生產脂質體組合藥物的規範配方及規範製備方法。形成二代藥物製劑創新提升到四代靶向製劑。本發明是通過以下技術方案實現的本發明工業化生產脂質體組合藥物的規範的各藥效原料摩爾數比如下1、原料藥0.05-0.202、磷脂原料0. 50-4. 00 3、抗氧劑0.01-0.064、磷脂膜分子態稀釋劑1.00-6.005、脂質體載藥體分散劑及賦形劑2. 00-8. 006、表面活性劑0. 01-0. 057、乙醇彡75%濃度(體積比，乙醇水彡75%，乾燥時揮發至盡)適量8、注射用磷酸鹽緩衝液0. 01-0. 05M濃度pH值5. 0-8.0 (乾燥時揮發至盡)適量9、注射用水(乾燥時揮發至盡)與注射用磷酸鹽等體積所述原料藥為強脂溶性強特性，配方劑量是現有二代對應口服或注射劑製劑最小規格製劑量的三分之一到五分之一。優選前列地爾。所述磷脂原料的平均分子量都定義以800D計算，磷脂原料是氫化大豆卵磷脂與多烯磷脂醯膽鹼的組合物，摩爾數比為1-5 0.5的組合物。所述磷脂的抗氧劑是還原型穀胱甘肽。所述磷脂膜分子態稀釋劑，又是抗氧劑，是二巰丙醇。所述脂質體載藥體分散劑，又為賦型劑，為木糖醇。
所述表面活性劑是去氫膽酸鈉。脂質體組合藥物的各藥效原料都應有國家標準，並且都是藥用注射劑級的國家標準。既符合國家GMP規範，又符合國家《藥品註冊管理辦法》的規定，以利產業化開發。本發明還提供所述組質體組合藥物的規範製備方法(1)將木糖醇配料量在注射用磷酸鹽緩衝液中溶解成木糖醇的10%的重量百分比溶液，將此溶液在121°C蒸汽滅菌20分鐘，當溶液溫度為20-25°C時，用截留分子量1000D 的超濾膜的超濾柱超濾，除溶液中的熱原及熱原分子片段，取超濾得到的溶液；再在室溫下，等分超濾得到的溶液，分為A、B溶液，將A、B溶液分別用5% -8%的分析純氫氧化鈉溶液調pH值8. 5，將A、B溶液分別經0. 05 μ m以下孔徑的膜濾過，除去不溶性粒子、高價金屬離子、金屬離子的沉澱物，再將A、B溶液分別用8%的分析純的鹽酸溶液調pH值為 5. 0-8. 0 ；(2)將A溶液在製備藥用注射劑級的噴霧乾燥機中，按噴霧乾燥常法，A溶液由設備頂部的噴霧噴咀中與潔淨度100級壓縮空氣(由壓縮機來，室溫)混合噴出，與設備底部進入的溫度150°c -190°c 100級潔淨空氣(由引風機引來，高溫)氣液逆流混合，噴霧乾燥成120-150目左右多孔粒子乾粉；乾燥完畢，乾燥物料存放在此設備底部備用； (3)分別加入脂溶性的原料藥前列地爾、磷脂、磷脂分散劑到乙醇中攪拌溶解完全，製成比重在1. 0至1. 2的溶液，經過截留分子量1000D的膜超濾，再經0. 05 μ m以下孔徑膜濾過，除去熱原、細菌、不溶性粒子；(4)將第(2)步製備的A溶液的組合物乾燥顆粒，放到沸騰包衣機中，按沸騰包衣及沸騰乾燥常法操作，先將第(3)步製備的磷脂乙醇溶液等體積分三份；在設備底部改為弓丨入無水、無菌、無油、無0. 001 μ m以上粒徑的粒子的室溫純氮氣流，在40°C -65°C溫度下， 對第(2)步製得的木糖乾燥物粒子進行沸騰流化狀態下包衣先將第一份的(三分之一體積的)磷脂乙醇溶液，由泵輸送到設備中部的包衣噴咀中與經壓縮的潔淨級別為100級純氮氣混合，呈噴霧狀噴到機中沸騰高度為400mm-450mm物料(木糖醇)流的最密集處，在沸騰物料粒子表面包衣，沸騰下的物料同時高度均勻地混和及分散，並極快地使溶劑揮發，形成多孔固體包衣薄層，第一個三分之一磷脂的乙醇溶液料液包衣完成，沸騰乾燥15分鐘， 再將第一步製備的B溶液也等分三份，將第一份B溶液的體積的三分之一溶液在無水、無菌、無油、無0. OOlym以上粒徑的粒子的100級純氮氣流中，按上述操作包衣，包衣後，沸騰乾燥20分鐘，這樣進行了第一次包衣_乾燥操作；重複上述包衣_乾燥操作，分別進行第二、第三次兩種溶液的第二份、第三份的三分之一體積的溶液按上述操作，進行磷脂液與B 溶液的交替包衣_乾燥操作；最外層包衣層是木糖醇微孔乾燥物層，第三次包衣後，得到的包衣乾燥物料中殘留水份< 1.0%，殘留的二巰丙醇<0.2% ；(5)在配料罐中加入與第一步用的注射用磷酸鹽溶液等體積的注射用水，在罐內充氮氣與罐外壓持平，100轉/分鐘攪拌速度下，加熱至60士5°C;調攪拌轉速為500-700轉 /分鐘，在罐內充氮氣下，在30分鐘至60分鐘內把第4步製得的包衣乾燥物加入到配料罐中；加完包衣乾燥物後，在罐內充氮氣環境下，保持溫度60士5°C，並在100轉/分鐘攪拌下保持60-120分鐘；再在100轉/分鐘攪拌下，把罐內藥液冷卻到30-40°C;再在100轉/分鐘攪拌下，分別加入抗氧劑穀胱甘肽及去氫膽酸鈉溶解完全，並調整藥液PH值5. 0-8. 0 ；(6)在保藥液持溫度在30士5°C範圍內，在0. 1_0. 2Mpa氮氣壓下，用0. 15 μ m膜濾過第(5)步製得的藥液，取濾過的藥液，得到粒徑小於150nm的脂質體藥液。按藥劑學允許該藥品的劑量分裝脂質體藥液到西林瓶中，並半加塞，在冷凍乾燥機組的冷凍乾燥箱中常法冷凍乾燥；至藥品固體殘留水分為小於2%，二巰丙醇殘留量為小於0.2%，真空壓塞，軋蓋，檢驗合格後進庫；製成脂質體載藥體的納米粒徑的凍幹針劑；此凍幹針劑還可配成無菌噴霧劑；(7)在100級無菌級別下，將第(6)步濾過的濾膜上截留的大於150nm的脂質藥物顆粒洗到10%的按第1步操作、滅菌、除熱原新製備(這新製備定義10%的木糖醇溶液是磷酸鹽緩衝液作溶劑，木醇量和磷酸鹽液量都應依大於150nm粒徑的脂質體藥物量而定，是新增加的、超過配方中的量)的10%木糖醇溶液中，測定藥液中總磷脂原料的含量， 並用滅菌除熱原合格新製備的10%木糖醇溶液調整藥液體積，達到控制藥液中總磷脂含量在40-80mg/ml ；把這藥液加入到另一配料灌中，衝氮氣下，100轉/分鐘攪拌速度，30-60分鐘內加熱到50士5°C，保持這溫度範圍攪拌60-120分鐘；再保持衝氮氣下，100轉/分鐘轉速，冷卻藥液至20-25°C，把藥液分裝到316L的不鏽鋼託盤中，放到另一臺凍幹機組的冷凍乾燥箱中，常法冷凍乾燥，至藥物固體中水分含量小於2% ；二巰丙醇殘留量為小於0.2% ；得到脂質體藥物固體，把脂質體藥物固體在100級無菌級別下，粉碎至80-100目，按藥劑學允許的劑量，常法製成該藥的無菌腸溶口服製劑，無菌拴劑； (8)所有操作都應嚴格按照國家GMP規範中注射劑無菌要求進行；口服製劑也得按注射劑無菌要求進行。本發明的脂質體藥物，無菌凍幹針劑在使用時，當西林瓶內用輸液水化溶解時，磷脂分散劑把脂質體載藥體迅速分散，並在木糖醇液表面張力及表面活性劑作用下，形成粒徑50nm-150nm範圍單室納米粒徑的脂質體載藥粒子均勻分散體系；口服製劑在腸內形成 150-1000nm粒徑粒子；包封率都在100% ；脂質體載藥體分散在輸液中6小時內洩漏率5% 以下，不沉澱、不凝聚、不分層，分散均勻；本發明的藥物口服後在胃腸道液中分散組成單室及多室混合脂質體藥物，提高藥物的治療指數。本發明的優勢有1、溶解超濾_噴霧乾燥_分子分散包衣_水化制粒_冷凍乾燥法，生產脂質體組合藥物配方及方法，以統一的配方、工藝、設備既可大工業化生產脂質體藥物注射劑，又可大工業化生產脂質體藥物口服製劑。2、用二代製劑的設備創新改造及二代製劑工藝的創新組合製備四代靶向製劑，使神秘的脂質體藥物從實驗室實施工業化穩定生產。開拓了脂質體組合藥物的規範配方、規範製備方法，而且是注射劑、口服製劑、其它給藥途徑製劑有統一的核心配方及製備方法， 在廉價設備內生產，極大地節省廠房、設備、人力、時間、能源，也可實現三廢零排放。3、本發明重在理念創新帶來創新技術突破以安全、有效、優質、經濟這一基本原貝U，對發明藥品從選料開始、到製備過程、到使用最終脂質體藥物分散到輸液中全程對藥品的無菌、熱原、粒徑、粒徑分布、包封率、洩漏率、腐敗率、沉降速率、凝聚率、有效期等等都是高要求地、完善地符合這一基本原則，使本發明藥品產業化開發上市風險小。4、本發明中的藥品核心技術有磷脂原料摩爾數投入量突破現有技術用量，是現有技術用量的5倍，是原料藥的10倍，並且原料藥是選脂溶性或水溶性強於分散劑木糖醇的藥物，磷脂對藥物的包封率大大地大於對木糖醇的包封率，包封率達100% ；同時磷脂原料用量大，存在大量空白脂質體，在體內空白脂質體被巨噬細胞吞噬，使載藥脂質體少被吞噬，療效更高；表面活性劑溶於脂質體磷脂膜層中，對脂質體雙分子層起「封堵」，加固作用， 這因為脂質體表面活性劑是鈉鹽，當溶解生理鹽水及葡萄糖等PH值小於6輸液中，部分其鈉鹽變成不溶於水的酸分子，而進入磷脂雙分子層中，代替膽固醇也起「封堵」、加固脂質體粒子作用，使洩漏率非常小，表面活性劑還有抗脂質體在輸液中的沉澱、凝聚作用，還有加強脂質體分散成均勻的脂質體輸液作用；由於加入磷脂膜分散劑二巰丙醇，在包衣乾燥時， 使磷脂膜呈分子態的微孔固態分散體，比高壓撞擊破碎的磷脂原料粒子小千萬倍，在包衣時木糖醇取代揮發的二巰丙醇位置，組成磷脂與木糖醇分子態微孔固體分散體系，使木糖醇成為脂質體的分散劑；本研究發現，木糖醇也和甘露醇樣具有保護脂質體載藥體在冷凍乾燥時不被小冰渣破壞的保護作用，但甘露醇在靜脈滴注時對血管有刺激作用；二巰丙醇在包衣時抗氧化作用，保護穀胱甘肽、磷脂、原料藥不被氧化，使穀胱甘肽在體內起抗氧化及抗過氧化組用，並保護肝臟不受藥物損害；磷脂材料本研究發現，氫化大豆卵磷脂這飽和磷脂和多烯磷脂醯膽鹼組合物製成脂質體穩定、洩漏率低，磷脂對人體無抗原及對肝臟無損害；本發明的脂質體凍幹針劑是製成了脂質體均勻分散體系再冷凍乾燥，在重新水化時，保持脂質體物理及化學性質不變。5、由於上述作用本發明藥物在輸液中的粒徑、粒徑分布不變，包封率100%、洩漏率< 5%、腐敗率為0%、沉降率為0%、凝聚率為0%，消除了脂質體藥物冰箱儲運、含量及包封率遞降、洩漏率遞升，有效期短於原料藥的四大世界性難題。令人滿意地成為優良的可實用的四代製劑。6、本發明製備的脂質體藥物，磷脂膜中磷脂是以分子狀態成固態溶液分散於磷脂膜吸釋劑及表面活性劑中，且比超聲波法、高壓均勻質破碎磷脂粒子要小千萬倍；在噴霧包衣-乾燥中溶劑及二巰丙醇的揮發使磷脂膜層形成無數微小孔層，這比冷凍乾燥法形成網狀結構比表面積要大得多；因為凍幹過程中固體中水分子升華揮發路程比包衣層路程長千萬倍，使網狀結構溶解凝結；又由於磷脂膜層和木糖醇層是磷脂膜分散劑層，在水化時迅速、高度分散磷脂。這三種優勢，比現有技術形成的脂質體粒子粒徑更穩定、更重現性好地形成納米粒徑範圍，且粒徑呈正態分布。7、本發明組合藥物由於選的磷脂是天然磷脂，是人體及微生物細胞膜組成物質， 對病菌、病毒細胞、腫瘤細胞及血管壁破壞處有更好靶向釋藥功能，治療指數高，所以原料藥用量僅是二代藥物的三分之一至五分之一，加上磷脂的包封，原料藥的不良反應幾乎沒有了。原料藥的用量減少，加大磷脂用量，確保包封率達100%，並有「封堵」加固脂質體作用的表面活性劑，所以洩漏率為零。8、本發明組合藥物的磷脂膜分散劑又是磷脂膜包衣的支撐劑。又是與表面活性劑共同控制前脂質體水化時脂質體粒子大小的物質，它們是由在水溶液中形成一定範圍的表面張力作用所致。木糖醇可對糖尿病、肝病患者供給能量，是理想的磷脂膜分散劑及賦型劑。9、本發明的組合藥物的磷脂膜稀釋劑，由既溶於乙醇又溶於水，在噴霧乾燥時揮發，形成磷脂膜成分子態固體分散體系的微孔磷脂膜層，在水化時磷脂膜中磷脂是以分子態破碎程度並和表面分散劑把磷脂分散到水中，形成均勻的納米粒脂質體載藥體，其中的二巰丙醇又是優良的脂質體的抗氧劑，在包衣時保護磷脂及藥物。10、本發明的組合藥物的表面活性劑作用第一是在磷脂水化時把磷脂分散到水中，第二在進入PH值4. 0-6. 0的輸液中，它又由鈉鹽酸化為分子結構有機酸，又進入脂質體雙分脂層中，起到脂質體「封堵」加固作用，第三在脂質體表面起表面活性劑作用。11、本發明能使脂質體藥物有效期達一年，採用四個有效措施一是加了抗氧劑， 保護磷脂膜及原料藥不氧化；二是在磷脂分散劑包衣層在磷脂膜包衣層外面，包護磷脂膜層；三是口服製劑也是按注射劑選材、滅菌及無菌操作，消除細菌對磷脂的腐敗分解，這是所有現有脂質體口服製劑乃至注射劑技術重大失誤的地方；四是在脂質體分散於輸液中， 有0. 2%的二巰丙醇絡合輸液中金屬離子，使輸液中帶來的金屬離子不會破壞磷脂及脂質體載藥體，在維生素C-穀胱甘肽-二巰丙醇組合抗氧劑、在脂質體表面活性劑、分散劑共同作用下不洩漏、不沉澱、不分層、不凝聚、不氧化、不腐敗，從而使脂質體載約體真正過了有實際使用價值難關。脂質體載藥體分散在輸液中，由於脂質體本身缺陷及輸液的作用下，使脂質體組合藥物產生質變，也是本發明彌補現有技術的重大失誤之處。12、本發明的脂質體藥物在製備過程中，磷脂液及磷脂分散劑液都經過0.05 μ m 孔徑以下的膜濾過(通常注射劑製備都是經0. 22 μ m膜濾過)，使不溶解性粒子粒徑降至允許值的四分之一，使脂質體水化後粒徑50nm至150nm粒子全為脂質體粒子。可精確測定脂質體載藥體的粒徑及粒徑分布。這也是本發明彌補現有技術重大失誤的地方。
具體實施例方式實施例1 原料藥是脂溶性強的脂質體組合藥物規範的各藥效原料摩爾數比如下1.原料藥是前列地爾0.052、磷脂原料是大豆卵磷脂與多烯磷脂醯膽鹼摩爾數1 0. 5的組合物0. 503、抗氧劑是還原型穀胱甘肽0.014、磷脂膜分子態稀釋劑是二巰丙醇1.005、脂質體載藥體分散劑及賦形劑是木糖醇2. 006、表面活性劑是去氫膽酸鈉0. 017、乙醇80% (ν/ν)(乾燥時揮發至盡)適量8、注射用磷酸鹽緩衝液0. 05Μ ρΗ值5. 0-8. 0適量9、注射用水(乾燥時揮發至盡)與注射用磷酸鹽緩衝液等體積本實施例的規範製備步驟和方法1、將木糖醇配料量在注射用磷酸鹽緩衝液中溶解成木糖醇的10%的重量百分比溶液，將此溶液在121°C蒸汽滅菌20分鐘，當溶液溫度為20-25°C時，用截留分子量1000D 的超濾膜的超濾柱超濾除溶液中的熱原及熱原分子片段，取超濾得到的溶液；再在室溫下， 等分超濾得到的溶液為A、B溶液，將A、B溶液分別用5% -8%的分析純氫氧化鈉溶液調ρΗ 值8. 5，將A、B溶液分別經0. 05 μ m以下孔徑的膜濾過，除去不溶性粒子、高價金屬離子、金屬離子的沉澱物，再將A、B溶液分別用8%的分析純的鹽酸溶液調ρΗ值為5. 0-8. 0。原料溶液要求檢驗熱原及不溶性粒子合格。2、將A溶液在藥用注射劑級噴霧沸騰乾燥器中，按噴霧乾燥常法，A溶液由設備頂部的噴霧噴咀中與潔淨度100級壓縮空氣(由壓縮機來，室溫)混合噴出，與設備底部進入的溫度150°C-190°C 100級潔淨空氣(由引風機引來，高溫)氣液逆流混合，噴霧乾燥成 120-150目左右多孔粒子乾粉。乾燥完畢，乾燥物料存放在此設備底部備用。3、分別加入脂溶性的原料藥、磷脂、磷脂分散劑到乙醇中攪拌溶解完全，若原料藥溶解不理想，可在乙醇中加入少量的二氯甲烷，至原料藥溶解度理想為止，儘量不加及儘量少加二氯甲烷，製成比重在1. 0至1. 2的溶液，經過截留分子量1000D的聚四氟乙烯材質膜超濾，再經0. 05 μ m以下孔徑鈦膜濾過，除去熱原、細菌、不溶性粒子。4、將第2步製備的A溶液的組合物乾燥顆粒，放到噴霧沸騰包衣_沸騰乾燥機中， 按沸騰包衣、沸騰乾燥常法操作，先將第3步製備的磷脂乙醇溶液等體積分三份。在設備底部改為引入無水、無菌、無油、無0. 001 μ m以上粒徑的粒子的室溫純氮氣流，在40°C -65°C 溫度下，對第2步製得的木糖乾燥物粒子進行沸騰流化狀態下包衣先將第一份的(三分之一體積的)磷脂乙醇溶液，由泵輸送到設備中部的包衣噴咀中與經壓縮潔淨級別為100 級純氮氣混合，噴霧狀噴到機中沸騰高度為400mm-450mm物料(果糖與甘露醇組合物)流的最密集處，在沸騰物料粒子表面包衣，沸騰下的物料同時高度均勻地混和及分散，並極快地使溶劑揮發，形成多孔固體包衣薄層，第一個三分之一磷脂的乙醇溶液料液包衣完成，沸騰乾燥15分鐘，再將第一步製備的B溶液也等分三份，將第一份B溶液的體積的三分之一溶液在無水、無菌、無油、無0. 001 μ m以上粒徑的粒子的100級純氮氣流中，按上述操作包衣，包衣後，沸騰乾燥20分鐘，這樣進行了第一次包衣_乾燥操作；重複上述包衣_乾燥操作，分別進行第二、第三次兩種溶液的第二份、第三份的三分之一體積的溶液按上述操作進行磷脂液與B溶液的交替包衣_乾燥操作。最外層包衣層是木糖醇微孔乾燥物層，第三次包衣後，得到的包衣乾燥物料中殘留水份< 1.0%，殘留的二氯甲烷及乙醇為0%，殘留的二巰丙醇彡0. 2%。5、在配料罐中加入與第一步用的注射用磷酸鹽溶液等體積的注射用水，在罐內充氮氣與罐外壓持平，100轉/分鐘攪拌速度下，加熱至60士5°C，調攪拌轉速為500-700轉/ 分鐘，在罐內充氮氣下，在30分鐘-60分鐘內把第4步製得的包衣乾燥物加入到配料罐中， 加完包衣乾燥物後，在罐內充氮氣環境下，保持溫度60 士 5 °C，並在100轉/分鐘攪拌下保持 60-120分鐘。再在100轉/分鐘攪拌下，把罐內藥液冷卻到30-40°C。再在100轉/分鐘攪拌下，分別加入抗氧劑穀胱甘肽及去氫膽酸鈉溶解完全，並調整藥液PH值5. 0-8.0。6、在保藥液持溫度在30士5°C範圍內，在0. 1_0. 2Mpa氮氣壓下，用0. 15 μ m膜濾過第5步製得的藥液，取濾過的藥液，得到粒徑小於150nm的脂質體藥液。按藥劑學允許該藥品的劑量分裝脂質體藥液到西林瓶中，並半加塞，在冷凍乾燥機組的冷凍乾燥箱中常法冷凍乾燥。至藥品固體殘留水分為小於2%，二巰丙醇殘留量小於0.2%，乙醇及二氯甲烷殘留都為0%。真空壓塞，軋蓋，檢驗合格後進庫。製成凍幹針劑。此凍幹針劑可配成無菌噴霧劑。7、在100級無菌級別下，將第6步濾過的濾膜上截留的大於150nm的脂質藥物顆粒洗到10%的按第1步操作滅菌除熱原合格的木糖醇溶液中，測定藥液中總磷脂原料的含量，並用滅菌除熱原合格的10%木糖醇溶液調整藥液體積，達到控制藥液中總磷脂含量在 40-80mg/mL·把藥液加入到另一配料灌中，衝氮氣下，100轉/分鐘攪拌速度，30-60分鐘內加熱到50士。C，保持這溫度範圍攪拌60-120分鐘，再保持衝氮氣下，100轉/分鐘轉速，冷卻藥液20-25°C，把藥業分裝到316L的不鏽鋼託盤中，放到另一臺凍幹機組的冷凍乾燥箱中，常法冷凍乾燥，至藥物固體中水分殘留量小於2%，二巰丙醇殘留量小0.2%，乙醇及二氯甲烷殘留為0%。得到脂質體藥物固體，把脂質體藥物固體在100級無菌級別下粉碎至 80-100目，按藥劑學允許的劑量，常法製成該藥的無菌腸溶口服製劑，無菌拴劑。8、所有操作都應嚴格按照國家GMP規範中注射劑無菌要求進行。口服製劑也得按注射劑無菌要求進行。實施例2原料藥是脂溶性強的脂質體組合藥物規範的各藥效原料摩爾數比如下1、原料藥是原料藥是前列地爾0.202、磷脂原料是大豆卵磷脂與多烯磷脂醯膽鹼摩爾數5 0.5的組合物4.003、抗氧劑是還原型穀胱甘肽0.064、磷脂膜分子態稀釋劑是二巰丙醇6.005、脂質體載藥體分散劑及賦形劑是木糖醇8. 00
6、表面活性劑是去氫膽酸鈉0. 05 7、乙醇80% (ν/ν)(乾燥時揮發至盡)適量8、注射用磷酸鹽緩衝液0. 05Μ ρΗ值5. 0-8. 0適量9、注射用水(乾燥時揮發至盡)與注射用磷酸鹽緩衝液等體積本實施例的規範製備步驟及方法同實施例1。實施例3原料藥是脂溶性強的脂質體組合藥物規範的各藥效原料摩爾數比如下1、原料藥是前列地爾0.052、磷脂原料是大豆卵磷脂與多烯磷脂醯膽鹼摩爾數2 0. 5的組合物4. 003、抗氧劑是還原型穀胱甘肽0.014、磷脂膜分子態稀釋劑是二巰丙醇6.005、脂質體載藥體分散劑及賦形劑是木糖醇2. 006、表面活性劑是去氫膽酸鈉0. 057、乙醇80% (ν/ν)(乾燥時揮發至盡)適量8、注射用磷酸鹽緩衝液0. 05Μ ρΗ值5. 0-8. 0適量9、注射用水(乾燥時揮發至盡)與注射用磷酸鹽緩衝液等體積本實施例的規範製備步驟及方法同實施例1。實施例4原料藥是脂溶性強的脂質體組合藥物規範的各藥效原料摩爾數比如下1、原料藥是前列地爾0. 192、磷脂原料是大豆卵磷脂與多烯磷脂醯膽鹼摩爾數3 0.5的組合物2.503、抗氧劑是還原型穀胱甘肽0.044、磷脂膜分子態稀釋劑是二巰丙醇4.905、脂質體載藥體分散劑及賦形劑是木糖醇 2. 806、表面活性劑是去氫膽酸鈉0.047、乙醇80% (ν/ν)(乾燥時揮發至盡)適量8、注射用磷酸鹽緩衝液0. 05Μ ρΗ值5. 0-8. 0適量9、注射用水(乾燥時揮發至盡)與注射用磷酸鹽緩衝液等體積本實施例的規範製備步驟及方法同實施例1。實施例5原料藥是脂溶性強的脂質體組合藥物規範的各藥效原料摩爾數比如下1、原料藥是前列地爾0.202、磷脂原料是大豆卵磷脂與多烯磷脂醯膽鹼摩爾數4: 0.5的組合物0.503、抗氧劑是還原型穀胱甘肽0.064、磷脂膜分子態稀釋劑是二巰丙醇1.005、脂質體載藥體分散劑及賦形劑是木糖醇 8. 00
6、表面活性劑是去氫膽酸鈉0.017、乙醇80% (ν/ν)(乾燥時揮發至盡)適量8、注射用磷酸鹽緩衝液0. 05Μ ρΗ值5. 0-8. 0 適量9、注射用水(乾燥時揮發至盡)與注射用磷酸鹽緩衝液等體積本實施例的規範製備步驟及方法同實施例1。實施例6原料藥是脂溶性強的脂質體組合藥物規範的各藥效原料摩爾數比如下1、原料藥是硝酸甘油0.052、磷脂原料是大豆卵磷脂與多烯磷脂醯膽鹼摩爾數5 0.5的組合物0.503、抗氧劑是還原型穀胱甘肽0.014、磷脂膜分子態稀釋劑是二巰丙醇1.005、脂質體載藥體分散劑及賦形劑是木糖醇 2. 006、表面活性劑是去氫膽酸鈉0.017、乙醇80% (ν/ν)(乾燥時揮發至盡)適量8、注射用磷酸鹽緩衝液0. 05Μ ρΗ值5. 0-8. 0 適量9、注射用水(乾燥時揮發至盡)與注射用磷酸鹽緩衝液等體積本實施例的規範製備步驟及方法同實施例1。實施例7原料藥是脂溶性強的脂質體組合藥物規範的各藥效原料摩爾數比如下1、原料藥是硝酸甘油0.202、磷脂原料是大豆卵磷脂與多烯磷脂醯膽鹼摩爾數1 0.5的組合物4.003、抗氧劑是還原型穀胱甘肽0.064、磷脂膜分子態稀釋劑是二巰丙醇6.005、脂質體載藥體分散劑及賦形劑是木糖醇 8. 006、表面活性劑是去氫膽酸鈉0.057、乙醇80% (ν/ν)(乾燥時揮發至盡)適量8、注射用磷酸鹽緩衝液0. 05Μ ρΗ值5. 0-8. 0 適量9、注射用水(乾燥時揮發至盡)與注射用磷酸鹽緩衝液等體積本實施例的規範製備步驟及方法同實施例1。實施例8原料藥是脂溶性強的脂質體組合藥物規範的各藥效原料摩爾數比如下1、原料藥是硝酸甘油2.002、磷脂原料是大豆卵磷脂與多烯磷脂醯膽鹼摩爾數2 0.5的組合物0.503、抗氧劑是還原型穀胱甘肽0.064、磷脂膜分子態稀釋劑是二巰丙醇 1.005、脂質體載藥體分散劑及賦形劑是木糖醇8. 00
6、表面活性劑是去氫膽酸鈉0.01 7、乙醇80% (ν/ν)(乾燥時揮發至盡)適量8、注射用磷酸鹽緩衝液0. 05Μ ρΗ值5. 0-8. 0適量9、注射用水(乾燥時揮發至盡)與注射用磷酸鹽緩衝液等體積本實施例的規範製備步驟及方法同實施例1。實施例9原料藥是脂溶性強的脂質體組合藥物規範的各藥效原料摩爾數比如下1、原料藥是硝酸甘油0.162、磷脂原料是大豆卵磷脂與多烯磷脂醯膽鹼摩爾數1 0. 1的組合物2.503、抗氧劑是還原型穀胱甘肽0.044、磷脂膜分子態稀釋劑是二巰丙醇4.005、脂質體載藥體分散劑及賦形劑是木糖醇6. 006、表面活性劑是去氫膽酸鈉0.037、乙醇80% (ν/ν)(乾燥時揮發至盡)適量8、注射用磷酸鹽緩衝液0. 05Μ ρΗ值5. 0-8. 0適量9、注射用水(乾燥時揮發至盡)與注射用磷酸鹽緩衝液等體積本實施例的規範製備步驟及方法同實施例1。實施例10原料藥是脂溶性強的脂質體組合藥物規範的各藥效原料摩爾數比如下1、原料藥是硝酸甘油0.052、磷脂原料是大豆卵磷脂與多烯磷脂醯膽鹼摩爾數1 0. 1的組合物4.003、抗氧劑是還原型穀胱甘肽0.014、磷脂膜分子態稀釋劑是二巰丙醇6.005、脂質體載藥體分散劑及賦形劑是木糖醇 2. 006、表面活性劑是去氫膽酸鈉0.057、乙醇80% (ν/ν)(乾燥時揮發至盡)適量8、注射用磷酸鹽緩衝液0. 05Μ ρΗ值5. 0-8. 0適量9、注射用水(乾燥時揮發至盡)與注射用磷酸鹽緩衝液等體積本實施例的規範製備步驟及方法同實施例1。技術經濟及質量指標對比本發明方法勻質冷凍乾燥法流化床包衣1、可製劑型口服、注射劑注射劑、口服口服脂質體脂質體載藥體脂質體載藥體載藥體2、IOOkg/批脂質體設備投資1600萬元 2600萬元1200萬元3、工時24小時/批 48小時/批8小時/批4、無菌率100% 90%有限菌落
5、熱原彡 50EU/ml彡 100EU/ml彡 300EU/100mg6、包封率100%80% -90%80% -90%7、洩漏率彡 5%^ 20%^ 20%8、粒徑 nm彡 150彡 200彡 20009、產生雜質3%-5%10% -20%5% -10%結論本發明技術製備脂質體載藥體與現有勻質冷凍乾燥法、流化床包衣法技術制脂質體載藥體相比，本發明技術經濟及主要質量指標都優越於勻質冷凍乾燥法，質量指標都優於流化床包衣法。藥效學驗證試驗1.抗心肌缺血藥藥效學驗證試驗選用健康小鼠，性別不限，體重18_20g，每組10隻。用異丙腎上腺素引起小鼠心肌缺血(由實驗動物中心製備心肌缺血小鼠模型)。設空白對照及陽性藥物對照組。陽性對照藥物規定為硝酸甘油，每天給藥一次，給藥10天。10天後進行缺血或梗死心肌的雙重染色，即N-BT或TTC染色；顯微鏡下定量心肌缺血和梗死面積，計算每組平均值與陽性對照組平均值及與空白對照組平均值的比的百分數。所用藥物、劑量、給藥方式見藥效學試驗結果表
權利要求
1. 一種前列地爾脂質體組合藥物，其特徵是，本發的前列地爾脂質體組合藥物的各藥效原料摩爾數比如下原料藥0.05 — 0.20磷脂原料0.50-4.00抗氧劑0.01 — 0:06磷脂膜分子態稀釋劑1. 00-6. 00脂質體載藥體分散劑及賦形劑2. 00-8. 00表面活性劑0. 01-0. 05乙醇>75%濃度(體積比，乙醇水>75%，乾燥時揮發至盡)適量注射用磷酸鹽緩衝液.0. 01-0. 05M濃度PH值5. 0-8. 0 (乾燥時揮發至盡)適量注射用水(乾燥時揮發至盡) 與注射用磷酸鹽等體積所述原料藥為強脂溶性強特性，配方劑量是現有二代對應口服或注射劑製劑最小規格製劑量的三分之一到五分之一；優選前列地爾；所述磷脂原料的平均分子量都定義以800D計算，磷脂原料是氫化大豆卵磷脂與多烯磷脂醯膽鹼的組合物，摩爾數比為1-5 0.5的組合物； 所述磷脂的抗氧劑是還原型穀胱甘肽； 所述磷脂膜分子態稀釋劑，又是抗氧劑，是二巰丙醇； 所述脂質體載藥體分散劑，又為賦型劑，為木糖醇； 所述表面活性劑是去氫膽酸鈉；脂質體組合藥物的各藥效原料都應有國家標準，並且都是藥用注射劑級的國家標準； 既符合國家GMP規範，又符合國家《藥品註冊管理辦法》的規定，以利產業化開發； 本發明還提供所述組質體組合藥物的規範製備方法(1)將木糖醇配料量在注射用磷酸鹽緩衝液中溶解成木糖醇的10%的重量百分比溶液，將此溶液在121°C蒸汽滅菌20分鐘，當溶液溫度為20-25°C時，用截留分子量IOOOD的超濾膜的超濾柱超濾，除溶液中的熱原及熱原分子片段，取超濾得到的溶液；再在室溫下， 等分超濾得到的溶液，分為A、B溶液，將A、B溶液分別用5% -8%的分析純氫氧化鈉溶液調pH值8. 5，將A、B溶液分別經0. 05 μ m以下孔徑的膜濾過，除去不溶性粒子、高價金屬離子、金屬離子的沉澱物，再將A、B溶液分別用8%的分析純的鹽酸溶液調pH值為.5. 0-8. O ；(2)將A溶液在製備藥用注射劑級的噴霧乾燥機中，按噴霧乾燥常法，A溶液由設備頂部的噴霧噴咀中與潔淨度100級壓縮空氣(由壓縮機來，室溫)混合噴出，與設備底部進入的溫度150°c-190°c 100級潔淨空氣(由引風機引來，高溫)氣液逆流混合，噴霧乾燥成 120-150目左右多孔粒子乾粉；乾燥完畢，乾燥物料存放在此設備底部備用；(3)分別加入脂溶性的原料藥前列地爾、磷脂、磷脂分散劑到乙醇中攪拌溶解完全，製成比重在1. 0至1. 2的溶液，經過截留分子量1000D的膜超濾，再經0. 05 μ m以下孔徑膜濾過，除去熱原、細菌、不溶性粒子；(4)將 第(2)步製備的A溶液的組合物乾燥顆粒，放到沸騰包衣機中，按沸騰包衣及沸騰乾燥常法操作，先將第(3)步製備的磷脂乙醇溶液等體積分三份；在設備底部改為引入無水、無菌、無油、無0. 001 μ m以上粒徑的粒子的室溫純氮氣流，在40°C -65°C溫度下，對第 (2)步製得的木糖乾燥物粒子進行沸騰流化狀態下包衣先將第一份的(三分之一體積的) 磷脂乙醇溶液，由泵輸送到設備中部的包衣噴咀中與經壓縮的潔淨級別為100級純氮氣混合，呈噴霧狀噴到機中沸騰高度為400mm-450mm物料(木糖醇)流的最密集處，在沸騰物料粒子表面包衣，沸騰下的物料同時高度均勻地混和及分散，並極快地使溶劑揮發，形成多孔固體包衣薄層，第一個三分之一磷脂的乙醇溶液料液包衣完成，沸騰乾燥15分鐘，再將第一步製備的B溶液也等分三份，將第一份B溶液的體積的三分之一溶液在無水、無菌、無油、 無0. 001 μ m以上粒徑的粒子的100級純氮氣流中，按上述操作包衣，包衣後，沸騰乾燥20 分鐘，這樣進行了第一次包衣-乾燥操作；重複上述包衣-乾燥操作，分別進行第二、第三次兩種溶液的第二份、第三份的三分之一體積的溶液按上述操作，進行磷脂液與B溶液的交替包衣-乾燥操作；最外層包衣層是木糖醇微孔乾燥物層，第三次包衣後，得到的包衣乾燥物料中殘留水份彡1.0%，殘留的二巰丙醇<0.2% ；(5)在配料罐中加入與第一步用的注射用磷酸鹽溶液等體積的注射用水，在罐內充氮氣與罐外壓持平，100轉/分鐘攪拌速度下，加熱至60士5°C;調攪拌轉速為500-700轉/分鐘，在罐內充氮氣下，在30分鐘至60分鐘內把第4步製得的包衣乾燥物加入到配料罐中； 加完包衣乾燥物後，在罐內充氮氣環境下，保持溫度60 士 5 °C，並在100轉/分鐘攪拌下保持 60-120分鐘；再在100轉/分鐘攪拌下，把罐內藥液冷卻到30-40°C ；再在100轉/分鐘攪拌下，分別加入抗氧劑穀胱甘肽及去氫膽酸鈉溶解完全，並調整藥液PH值5. 0-8. 0 ；(6)在保藥液持溫度在30士5°C範圍內，在0.1-0. 2Mpa氮氣壓下，用0. 15 μ m膜濾過第 (5)步製得的藥液，取濾過的藥液，得到粒徑小於150nm的脂質體藥液；按藥劑學允許該藥品的劑量分裝脂質體藥液到西林瓶中，並半加塞，在冷凍乾燥機組的冷凍乾燥箱中常法冷凍乾燥；至藥品固體殘留水分為小於2%，二巰丙醇殘留量為小於0. 2%，真空壓塞，軋蓋， 檢驗合格後進庫；製成脂質體載藥體的納米粒徑的凍幹針劑；此凍幹針劑還可配成無菌噴霧劑；(7)在100級無菌級別下，將第(6)步濾過的濾膜上截留的大於150nm的脂質藥物顆粒洗到10%的按第1步操作、滅菌、除熱原新製備(這新製備定義10%的木糖醇溶液是磷酸鹽緩衝液作溶劑，木醇量和磷酸鹽液量都應依大於150nm粒徑的脂質體藥物量而定， 是新增加的、超過配方中的量)的10%木糖醇溶液中，測定藥液中總磷脂原料的含量，並用滅菌除熱原合格新製備的10%木糖醇溶液調整藥液體積，達到控制藥液中總磷脂含量在 40-80mg/ml ；把這藥液加入到另一配料灌中，衝氮氣下，100轉/分鐘攪拌速度，30-60分鐘內加熱到50士5°C，保持這溫度範圍攪拌60-120分鐘；再保持衝氮氣下，100轉/分鐘轉速，冷卻藥液至20-25°C，把藥液分裝到316L的不鏽鋼託盤中，放到另一臺凍幹機組的冷凍乾燥箱中，常法冷凍乾燥，至藥物固體中水分含量小於2% ；二巰丙醇殘留量為小於0.2% ；得到脂質體藥物固體，把脂質體藥物固體在100級無菌級別下，粉碎至80-100目，按藥劑學允許的劑量，常法製成該藥的無菌腸溶口服製劑，無菌拴劑；(8)所有操作都應嚴格按照國家GMP規範中注射劑無菌要求進行；口服製劑也得按注射劑無菌要求進行。
2.依權利要求1所述的前列地爾脂質體組合藥物，其特徵是，按藥劑學允許的劑量，製成前列地爾脂質體組合藥物的凍幹針劑，或口服製劑、或再按常法配製成噴霧劑、或再按常法配製成栓劑。
3.依權利要求1所述的前列地爾脂質體組合藥物，其特徵是，其用途為用於抗病毒、抗腫瘤、抗心絞痛、降血壓。
全文摘要
本發明一種前列地爾脂質體組合藥物，其特徵是，公開本發明的前列地爾脂質體組合藥的各組份原料摩爾數比；本發明還提供所述組質體組合藥物的大工業化製備方法；其特徵是，按藥劑學允許的劑量，製成前列地爾脂質體組合藥物的凍幹針劑，或口服製劑、或噴霧劑、或栓劑；所述的前列地爾脂質體組合藥物，其特徵是，其用途為用於抗病毒、抗腫瘤、抗心絞痛、降血壓。
文檔編號A61K9/19GK102218033SQ201110152530
公開日2011年10月19日 申請日期2011年6月9日 優先權日2010年7月29日
發明者劉會梅, 張連印, 王秀麗, 蔡海德 申請人:蔡海德